滕州市第一中学2023-2024学年高二下学期3月月考
生 物
一、单选题（每小题2分，共30分）
1．BCCCD 6.AABBC 11.CCBCD
二、不定项选择题（每小题3分，部分分1分）
16．A 17．CD 18．BCD 19．AC 20．ACD
21．（每空1分，共11分）
(1) 酸 扩大培养 (2)温度、pH和溶解氧（2分）
(3) 不同意 青霉素只能杀死部分微生物，某些杂菌会分祕青霉素酶将青霉素分解掉（2分）
(4) 蜗牛酶、溶菌酶（2分） 将融合细胞涂布在缺乏甲硫氨酸和精氨酸、但其他营养成分齐全的固体培养基上，在该培养基上长出的菌落即为杂种菌株（2分）
22．（每空1分，共10分）
(1)DNA连接酶 (2) 早期胚胎 提供营养，无菌、无毒的环境，适宜的温度、pH和渗透压，95%空气和5%CO2的气体环境（2分）
(3) 内细胞团 胚胎分割 将内细胞团均等分割 (4)在紫外光下能发出绿色荧光
(5)将Neo基因作为标记基因，用加有G418的选择培养液筛选出的转基因胚胎干细胞一般是能存活且含有目的基因的细胞（2分）
23．（每空1分，共11分）
(1) 秋水仙素 纯合子 细胞分裂素和生长素（2分）
(2) 逆转录 5' (3) Ti质粒上的T-DNA 植物组织培养
(4) 抗生素 愈伤组织（2分）
24．（每空1分，共12分）
(1) 刺激小鼠产生分泌特定抗体的B淋巴细胞（2分） 未融合的和同种融合的（2分）
(2) 抗原—抗体特异性结合 能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备（2分）
(3) 2/二/两 细胞密度过大、有害代谢物的积累、培养液中的营养物质缺乏（答出2点即可）（2分）
(4)能特异性杀死肿瘤细胞，减少对健康细胞的伤害 （2分）
25．（每空1分，共11分）
(1)体细胞分化程度高，不容易恢复其全能性（2分）
(2) （动物）血清 细胞贴壁生长和细胞接触抑制（2分）
(3) 显微操作 相同生理环境 体外受精、转基因技术、体内受精、核移植（2分）
(4)提高融合细胞发育成囊胚的成功率和囊胚中内细胞团的形成率（2分）滕州市第一中学2023-2024学年高二下学期3月月考
生 物
2024.3
一、单选题
1．绍兴是黄酒之乡，“麦曲酶长，酵米复芳；白梅酒酿，伴淋寒香；压滤琼浆，煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。在黄酒的主发酵过程中，“开耙”（搅拌）是极为关键的一步。下列相关叙述错误的是（ ）
A．接种麦曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒酿”菌种发酵
B．煎煮的目的是除去发酵产品中的杂菌，利于酵母菌繁殖
C．陈藏有利于黄酒中醇与酸发生酯化反应，使酒更加芳香
D．发酵过程中“开耙”可适当提供O2，调节pH，活化酵母
2．酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图 Ⅰ 所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100 mL完全培养基，下列说法错误的是（ ）
A．葡萄酒发酵过程中，缺氧酸性环境、酵母菌产生的次生代谢产物酒精等可抑制杂菌的繁殖
B．用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×109（个·L-1），此数值可能低于实际的活菌数
C．可用干热灭菌法对培养皿、培养基进行灭菌，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌
D．由图 Ⅱ 可知，丙瓶出现的原因可能是灭菌不彻底，丁组酵母菌产酒精能力比乙强
3．从自然界筛选嗜盐菌（好氧型）的一般步骤：采集菌样→富集培养→纯种分离→计数及性能测定。图1示上述步骤中的一个环节，图2示该筛选过程中一个培养基上菌落的分布情况，其中白色部分为透明圈，黑点代表大小不同的菌落。下列相关叙述正确的是（ ）
A．富集培养必须在固体培养基中进行
B．图1所示的接种方法也适合用于对细菌进行计数
C．图2中嗜盐菌的耐盐性能最强的是乙
D．图1和图2所示的培养基分别为选择培养基和鉴别培养基
4．某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种到1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上操作。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．大肠杆菌抗链霉素的突变是发生在与链霉素接触之后
B．在操作规范的情况下，5中观察到的菌落数可能大于初始接种到该培养基上的活菌数
C．4号和8号培养液中，大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大
D．该实验缺乏对照实验，无法确定抗链霉素性状属于可遗传变异
4题图 5题图
5．如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ）
A．培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子
B．选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性
C．需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④
D．植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变）
6．黑胫病对甘蓝型油菜的危害十分严重，黑芥能抗黑胫病，两者不能直接杂交。为解决该问题，科研人员通过下图所示过程获得抗病品系。据图分析，下列相关叙述不正确的是( )
A．最终获得的抗病植株具有完整的甘蓝型油菜和黑芥的遗传信息
B．过程①可使用纤维素酶和果胶酶，过程②可利用PEG进行诱导
C．过程③发生脱分化，过程④体现出植物细胞具有全能性
D．黑芥与甘蓝型油菜自然状态下不能进行基因交流
7．研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（ ）
A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞
B．经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖
C．步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交
D．步骤⑥和植物组织培养均需使用二氧化碳培养箱进行大规模培养
8．基因组印记(通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达)阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞(类似受精作用)，最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．体外培养卵母细胞时，为防止污染，需将培养皿置于二氧化碳培养箱中进行培养
B．甲基化可能会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达
C．“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
D．移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
9．线粒体置换技术是将妈妈携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫精子进行受精，从而获得重构胚胎也就是通常说的“三亲胚胎”，也被称为“第四代试管婴儿”。下列有关说法错误的是（ ）
A．重构卵母细胞需培养成熟才可以与获能精子受精
B．第四代试管婴儿的DNA来自携带者与其丈夫
C．第四代试管婴儿可避免线粒体疾病
D．第四代试管婴儿的培育还需要经历早期胚胎培养和胚胎移植等技术
10．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成a、b、c三个细胞，染色体全部来自父系的“合子”致死。其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，正确的是（ ）
A．受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段
B．排卵是指卵泡从卵巢中排出，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ的中期
C．若细胞a的染色体组成为MP1，则细胞b的染色体组成为MP2
D．这对双胞胎来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的染色体不一定不同
11．如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。如图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是（ ）
限制酶 Alu Ⅰ BamH Ⅰ Sma Ⅰ Sau3A Ⅰ
识别序列切割位点 AG↓CT TC↑GA G↓GATCC CCTAG↑G CCC↓GGG GGG↑CCC ↓GATC CTAG↑
A．BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键
B．Sau3AⅠ和BamHⅠ切割产生的片段能够相连，但连接后的片段两者都不能再切割
C．②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AⅠ识别并切割
D．T4DNA连接酶即能连接①③，也能连接②⑤，但后者连接效率低
12．THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述错误的是（ ）
EcoRⅠ BamHⅠ KpnⅠ MfeⅠ Hind Ⅲ
A．THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5′端
B．构建基因表达载体时，用MfeⅠ、HindⅢ切割质粒，用EcoRⅠ、HindⅢ切割目的基因
C．利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4
D．为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量
13．为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中，下图为重组Ti质粒上T-DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是（ ）
A．以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因
B．RNA聚合酶与启动子I识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录
C．可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的的基因大豆愈伤组织
D．用EcoRI、BamHI双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到两条带
14．疫苗是人类预防疾病强有力的手段，疫苗产业也是医疗卫生事业和生物技术产业的重点发展领域之一，目前生产疫苗的两种方法主要有：利用转基因工程菌和借助动物细胞的大规模培养。例如，生产乙肝疫苗时，可以将S基因导入大肠杆菌构建工程菌生产重组乙肝疫苗，或者大规模培养能够表达S蛋白的中国仓鼠卵巢细胞获得乙肝疫苗。下列有关两种方法叙述错误的是（ ）
A．两种方法都需用转基因技术构建工程菌或工程细胞
B．将S基因导入大肠杆菌构建工程菌时需要使用钙离子处理细胞
C．体外培养中国仓鼠卵巢细胞时要定期更换培养液以创造无菌环境
D．哺乳动物细胞表达的外源蛋白，更接近乙肝病毒的S蛋白
15．人类是乙肝病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。下图为乙肝病毒基因工程疫苗的生产和使用流程，质粒中LacZ基因可使细菌能够利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则呈白色。下列有关叙述正确的是（ ）
A．过程①最好的限制酶选择方案是BamHI和EcoRV
B．质粒用限制酶BamHI和EcoRV切割后产生4个游离的磷酸基团
C．过程②需要在培养基中加青霉素和X-gal以筛选蓝色的大肠杆菌菌落
D．基因工程疫苗不会出现病毒的增殖和感染，安全性高
二、不定项选择题
16．研究发现，小鼠四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育成胎盘等胚胎以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织。下列叙述正确的是（ ）
A．将2细胞期胚胎用灭活病毒诱导法使2细胞融合，可得到一个含四个染色体组的细胞
B．嵌合体中的ES具有自我更新能力并只能分化为胎盘等胚外组织
C．嵌合体胚胎发育至原肠胚时需移植入小鼠子宫内才可以进一步发育
D．嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型不同
17．科学家以糖蜜（含较多蔗糖）为原料，运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，在实验室发酵生产PHA（聚羟基脂肪酸酯）等新型高附加值可降解材料，工艺流程如图。下列相关说法正确的是（ ）
A．发酵工程一般包括菌种选育等多个步骤，其中心环节是菌种扩大培养
B．为在一定程度上避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度
C．菌株H还能分泌蛋白酶、脂肪酶等分解餐厨垃圾来生成PHA
D．可在发酵结束之后，采用过滤和沉淀等方法将菌株H从发酵液中分离出来
18．融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析正确的是（ ）
A．上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对
B．设计引物的目的是为了能够从其3'端开始连接脱氧核苷酸
C．融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物
D．若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物
18题图 19题图
19．通过植物细胞工程对光果甘草进行培养以获得药物甘草西定，过程如图所示。下列相关叙述错误的有（ ）
A．过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养
B．过程④常用射线或化学物质处理后可从诱变体选出所需的突变体植株丙
C．所得三种植株中乙和丙的遗传信息与甲相同，植株丁和甲是同一物种
D．过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得，应将愈伤组织细胞悬浮培养
20．嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（CAR-T细胞疗法）被认为是极具前景的抗癌免疫疗法，该T细胞表面的嵌合抗原受体（简称CAR）能直接识别肿瘤细胞的特异性抗原。下图表示一种典型的CAR-T细胞疗法的操作流程。下列叙述正确的是（ ）
A．CAR-T细胞通过CAR特异性识别肿瘤细胞
B．该免疫疗法利用T细胞清除肿瘤细胞体现了免疫防御功能
C．回输到病人体内的CAR-T细胞通过体液运输到达肿瘤细胞处
D．利用病人自身的免疫细胞治疗癌症，可尽量避免自身免疫系统的攻击
三、非选择题
21．青霉素能够破坏细菌的细胞壁，从而杀死细菌，对革兰氏阳性菌有效，而对革兰氏阴性菌无效。工业上常用产黄青霉菌来生产青霉素，图a为生产流程图，请回答下列问题：
(1)在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至 性，接种之前的过程①、②都属于 。
(2)发酵罐中发酵时要及时添加必要的营养成分，还要严格控制 等发酵条件。
(3)青霉菌在代谢过程产生的青霉素具有杀菌作用，有同学认为无需对培养液进行严格灭菌，你是否同意这样的观点？ 。为什么 。
(4)青霉素发酵是高耗氧过程，发酵过程中持续高效地供氧是保证青霉素持续高产的关键。血红蛋白具有很强的携带O2的能力，将其引入青霉菌，是提高青霉素产能的思路之一。血红蛋白不仅存在于人和动物的红细胞中，也存在于某些植物细胞中（如豆血红蛋白），还存在于某些细菌细胞中（如透明颤菌）。研究人员为了将透明颤菌的血红蛋白引入青霉菌，设计了图b所示的方案：
溶菌酶能够溶解细菌的细胞壁，蜗牛酶是从以植物和真菌为食的蜗牛消化道中提取的酶。处理①、②所用的酶分别是上述两种酶中的 ，请简述处理④从融合细胞中筛选目的菌株的基本思路： 。
22．绿色荧光蛋白在紫外线的照射下能发出绿色荧光，最初是在一种海蜇中被发现的。转绿色荧光基因（Gfp）的幼鼠在紫外光下能发出绿色荧光。进一步研究发现，绿色荧光蛋白可以帮助人们了解细胞工作的机制，通过寻找荧光便可知道基因何时以及为什么“开启”，这项成就被称为“21世纪的显微镜”。下图表示转基因绿色荧光小鼠的培育过程，图中Neo基因编码的产物能分解G418，G418是一类对原核细胞和真核细胞都有毒性的抗生素。请回答下列有关问题：
(1)①过程将绿色荧光蛋白基因与目的基因连接起来利用的工具是 。
(2)可以从 中提取胚胎干细胞，③过程胚胎干细胞培养需要的条件有 （答出2点即可）。
(3)⑤过程应把转基因胚胎干细胞导入囊胚的 ，为了获得多只小鼠c，⑥过程的操作是 ，该过程的操作要求是 。
(4)让转基因干细胞与这些细胞一起发育成胚胎，若幼鼠 ，则说明Gfp基因在幼鼠体内成功表达。
(5)据图分析，Neo基因在转基因绿色荧光小鼠的培育过程中发挥作用的机理是 。
23．改良水稻的株高和产量性状是实现袁隆平先生“禾下乘凉梦”的一种可能途径。研究人员克隆了可显著增高和增产的eui基因，并开展了相关探索，过程如下图所示。请回答下列问题：
(1)步骤Ⅰ的花药培养过程中，可产生单倍体愈伤组织，将其培养于含 的培养基上，可促进产生二倍体愈伤组织，这样的愈伤组织产生的组培苗都是 。在培养得到丛芽的过程中，培养基中添加的植物激素主要是 。
(2)步骤Ⅱ中，用从细胞内获得的RNA经过 酶的作用可得到eui基因，对该基因进行PCR扩增时一般在引物的 端添加限制酶的识别位点。
(3)利用农杆菌介导将表达载体导入植物细胞的过程中，整合到植物细胞染色体DNA的区段是 ，转化后的细胞需通过 形成植株。
(4)为筛选含重组Ti质粒的菌株，需在培养基中添加 ，获得的农杆菌菌株经鉴定后，应侵染Ⅰ中的 ，以获得转基因再生植株。
24．双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过重组 DNA 或细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图 1 是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2 是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。
(1)图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是 。过程③所用的HAT培养基从用途上看属于选择培养基，在该培养基上， 细胞不能生长。
(2)过程④中将杂交瘤细胞进行多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用 原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有 。
(3)图1注射长春碱后，要获取单克隆杂交—杂交瘤细胞，方框内至少需要经过 次筛选。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞因为 （答 2 点）等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
(4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。
25．我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：
(1)获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是 。
(2)进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有 ，且在进行细胞原代培养时会出现 现象。
(3)动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 。图中过程⑤用到胚胎移植技术，其实质是早期胚胎在 条件下空间位置的转移。除图中所示外，胚胎移植技术中胚胎的来源还有 （答出两点）。
(4)研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如右图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是 。
