【备考2025】高中生物人教版（2019）一轮基础练习--专题20发酵工程（含答案）

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2025广东版新教材生物学高考第一轮
第5部分　生物技术与工程
专题20　发酵工程
五年高考　　　　　　　　　　　　　　　
考点1　传统发酵技术的应用
1.(2023山东,12,2分)以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理:①沸盐水冷却后再倒入坛中;②盐水需要浸没全部菜料;③盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水;④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是(　　)
A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
2.(2022湖北,11,2分)关于白酒、啤酒和果酒的生产,下列叙述错误的是(　　)
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
C.葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质,也存在于线粒体
D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同,但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
3.(2021海南,17,3分)关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作,下列叙述正确的是(　　)
A.发酵所利用的微生物都属于原核生物
B.发酵过程都在无氧条件下进行
C.发酵过程都在同一温度下进行
D.发酵后形成的溶液都呈酸性
4.(2021浙江1月选考,10,2分)用白萝卜制作泡菜的过程中,采用适当方法可缩短腌制时间。下列方法中错误的是(　　)
A.将白萝卜切成小块
B.向容器中通入无菌空气
C.添加已经腌制过的泡菜汁
D.用沸水短时处理白萝卜块
5.(2021山东,12,2分)葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是(　　)
A.无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖
B.自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌
C.葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的
D.制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
6.(2021辽宁,8,2分)利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为:先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌,发酵6天后,再接入活化的醋酸杆菌,发酵5天。下列有关叙述错误的是(　　)
A.乙醇既是醋酸发酵的底物,又可以抑制杂菌繁殖
B.酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C.酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D.接入醋酸杆菌后,应适当升高发酵温度
7.（新教材）(2021全国乙,37,15分)工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如图。
回答下列问题:
(1)米曲霉发酵过程中,加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质,大豆中的　　　　　可为米曲霉的生长提供氮源,小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供　　　　。
(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖,大量分泌制作酱油过程所需的酶类,这些酶中的　　　　、　　　　能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分,如将蛋白质分解为小分子的肽和　　　　。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌,由此可以判断米曲霉属于　　　　(填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。
(3)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于　　　　　　(填“真核生物”或“原核生物”);添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是　　　　　　。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素,据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是　　　　　　(答出1点即可)。
考点2　微生物的培养技术及应用
8.(2023广东,10,2分)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断,下列最可能筛选到目标菌的条件组合是(　　)
A.a点时取样、尿素氮源培养基
B.b点时取样、角蛋白氮源培养基
C.b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D.c点时取样、角蛋白氮源培养基
9.(2023浙江1月选考,19,2分)某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌,进行了如下实验:取泡菜汁样品,划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基,经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是(　　)
A.培养基需偏碱性
B.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C.需在无氧条件下培养
D.分离得到的微生物均为乳酸菌
10.(2023山东,15,2分)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是(　　)
A.不含氮源的平板不能用于微生物培养
B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
11.(2023江苏,7,2分)下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是(　　)
A.通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B.通常细菌的生长速度比酵母菌快,菌落比酵母菌落大
C.通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌,酵母菌培养基用过滤除菌法除菌
D.血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定,也可用于细菌的数量测定
12.(2023辽宁,9,2分)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的,利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是(　　)
A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
13.(2022湖北,5,2分)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是(　　)
A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C.为防止蛋白质变性,不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D.可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
14.(2022江苏,3,2分)下列是某同学分离产脲酶菌的实验设计,不合理的是(　　)
A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株
B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌株
15.(2022辽宁,15,2分)为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险,需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是(　　)
A.航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物
B.细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀
C.在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品
D.采用平板划线法等分离培养微生物,观察菌落特征
16.(2022海南,12,3分)为探究校内植物园土壤中的细菌种类,某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是(　　)
A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B.培养细菌时,可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C.土壤溶液稀释倍数越低,越容易得到单菌落
D.鉴定细菌种类时,除形态学鉴定外,还可借助生物化学的方法
17.(2021北京,12,2分)人体皮肤表面存在着多种微生物,某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是(　　)
A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌
B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样
C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布
D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
18.（新情境）(2022广东,21,12分)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中,中国科学家采集了某海域1146 米深海冷泉附近沉积物样品,分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
回答下列问题:
(1)研究者先制备富集培养基,然后采用　　　　　　法灭菌,冷却后再接入沉积物样品,28℃厌氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物。为了获得纯种培养,除了稀释涂布平板法,还可采用　　　　　法。据图分析,拟杆菌新菌株在以　　　　为碳源时生长状况最好。
(2)研究发现,将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来,推测其原因可能是　　　　　　　　　　　　　　　　　。(答一点即可)
(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质,通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑,拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是 　。
(4)深海冷泉环境特殊,推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,除具有酶的一般共性外,其特性可能还有 　。
19.（新思维）(2023北京,16,12分)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性,能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分,其中蛋白胨主要为细菌提供　　　　　　和维生素等。
(2)A菌通常被用作溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上,凝固形成薄层。培养一段时间后,薄层变浑浊(如图),表明　　　　　　　　　　　　　　。
(3)为分离出具有溶菌作用的细菌,需要合适的菌落密度,因此应将含菌量较高的湖泊水样　　　　后,依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后,能溶解A菌的菌落周围会出现　　　　。采用这种方法,研究者分离、培养并鉴定出P菌。
(4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式,请提出一个假设,该假设能用以下材料和设备加以验证。
主要实验材料和设备:P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱。
20.(2022全国乙,37,15分)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S,S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此,某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响,结果见表。
碳源 细胞干重(g/L) S产量(g/L)
葡萄糖 3.12 0.15
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
回答下列问题。
(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所用的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。
(2)由实验结果可知,菌株C生长的最适碳源是　　　　;用菌株C生产S的最适碳源是　　　　　　。菌株C的生长除需要碳源外,还需要　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)等营养物质。
(3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因是　　　　　　　　　。
(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路: 　。
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出1点即可)。
21.(2022全国甲,37,15分)某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌,在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力,并分析两个菌株的其他生理功能。
实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ:K2HPO4,MgSO4,NH4NO3,石油。
培养基Ⅱ:K2HPO4,MgSO4,石油。
操作步骤:
①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养,得到A、B菌液;
②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂,分别制成平板Ⅰ、Ⅱ,并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。
回答下列问题。
(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是　　　　　。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源,氮源在菌体内可以参与合成　　　　　　　　　(答出2种即可)等生物大分子。
(2)步骤①中,在资源和空间不受限制的阶段,若最初接种N0个A细菌,繁殖n代后细菌的数量是　　　　。
(3)为了比较A、B降解石油的能力,某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验,结果如表所示(“+”表示有透明圈,“+”越多表示透明圈越大,“-”表示无透明圈),推测该同学的实验思路是 　。
菌株 透明圈大小
平板Ⅰ 平板Ⅱ
A +++ ++
B ++ -
(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤,根据上表所示实验结果,治理石油污染应选用的菌株是　　　　,理由是　 　。
22.(2022河北,23节选,10分)番茄灰霉病菌严重影响番茄生产,枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治,研究者设计了相关实验。
回答下列问题:
(1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时,取适量　　　　　　菌液涂布于固体培养基上,将无菌滤纸片(直径5mm)在　　　　　　　菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心,数秒后取出滤纸片,培养皿倒置培养后测量　　　　大小以判定抑菌效果。
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,液体培养时应采用　　　　　　　填[“静置”或“摇床震(振)荡”]培养。培养过程中抽样检测活菌数量时,应采用　　　　(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”),其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
考点3　发酵工程及其应用
23.（新情境）(2023辽宁,13,2分)利用某种微生物发酵生产DHA油脂,可获取DHA(一种不饱和脂肪酸)。如图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是(　　)
A.DHA油脂的产量与生物量呈正相关
B.温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量
C.葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量
D.12~60h,DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高
24.(2022山东,14,2分)青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时,会通过分泌青霉素杀死细菌,以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产,关于该生产过程,下列说法错误的是(　　)
A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B.可用深层通气液体发酵技术提高产量
C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中
D.青霉素具有杀菌作用,因此发酵罐不需严格灭菌
25.(2022湖北,14,2分)废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.该生产过程中,一定有气体生成
B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
26.（新思维）(2021广东,21,12分)中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液,含较多蔗糖)为原料,在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。
回答下列问题:
(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率,可在液体培养基中将蔗糖作为　　　　　　,并不断提高其浓度,经多次传代培养(指培养一段时间后,将部分培养物转入新配的培养基中继续培养)以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用　
的方法进行菌落计数,评估菌株增殖状况。此外,选育优良菌株的方法还有　　　　　　　　　　　　等。(答出两种方法即可)
(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统,其培养基盐浓度设为60g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是 　。(答出两点即可)
(3)研究人员在工厂进行扩大培养,在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵,结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和 PHA产量均未达到预期,并产生了少量乙醇等物质,说明发酵条件中　　　　可能是高密度培养的限制因素。
(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾[主要含蛋白质、淀粉、油脂(脂肪)等]来生产PHA,说明其能分泌　　　　　　　　　　　　。
三年模拟
限时拔高练1　　　　　　　　　　　　　　　
选择题
1.(2023惠州一模,12)如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是(　　)
　　
A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理
B.步骤①倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置
C.步骤②的目的是使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落
D.步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注
2.(2024届广东七校联合体一联,12)下列关于微生物的选择培养的叙述,错误的是(　　)
A.用纤维素作为唯一碳源的选择培养基分离获得纤维素分解菌
B.用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离获得尿素分解菌
C.用缺少有机碳源的选择培养基分离获得自养型微生物
D.用含有青霉素的选择培养基分离获得酵母菌和细菌
3.(2024届潮州松昌中学月考,7)近期流行一种利用能否制作酸奶来判断牛奶好坏的方法,以下自制酸奶的方法也随之广泛流传:(1)牛奶倒入玻璃杯,放在沸水中加热10分钟;(2)降温到42℃,每杯牛奶加入0.15g酸奶发酵剂;(3)用干净小勺搅拌均匀,在杯子外封上保鲜膜;(4)在42℃下保温5小时后,放在4℃冰箱中冷藏1小时。则相关问题不正确的是(　　)
A.牛奶在沸水中加热10分钟,属于消毒的方式
B.第(2)步降温到42℃的目的是避免高温使菌种失活
C.每杯牛奶加入0.15g酸奶发酵剂的目的是迅速使乳酸菌成为优势物种
D.第(3)步封上保鲜膜的目的是为了保温
4.（新教材）(2024届广东四校一联,9)苏轼的《超然台记》中提到“撷园蔬,取池鱼,酿秫(谷物)酒,瀹(煮)脱粟而食之,曰:‘乐哉游乎!’”。下列有关利用秫酿造酒的叙述,正确的是(　　)
A.秫酿造酒前要对酿酒器具和秫进行严格灭菌处理
B.秫酿造酒的酿酒酵母的最适生长温度约为30~35℃
C.秫酿造酒后期密封不严会促进醋酸菌发酵产生醋酸
D.秫酿造酒过程中全程要制造无氧环境
5.(2023广东六校一联,11)某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。有关叙述正确的是(　　)
A.鲜奶常采用湿热灭菌法进行灭菌
B.若培养基需要调节pH,应该在灭菌后培养基凝固前立即进行
C.若3个培养皿中菌落数为35、33、34,则鲜奶中细菌数为3.4×106个/mL
D.对鲜奶中细菌计数,常采用稀释涂布平板法,统计的结果往往比实际值偏高
6.(2024届广东一调,12)为了探究果酒发酵的最适温度,某研究性学习小组将制作的果汁加入果酒发酵罐中,向发酵罐中加入等量酵母菌,并分别设置不同温度,再将发酵罐与传感器相连,实时检测酒精含量变化,结果如图所示。相关叙述错误的是(　　)
A.该实验中28℃组是实验组,其余三组是对照组
B.实验结果表明果酒发酵的最适温度是28℃左右
C.将果汁装入发酵罐时不能装满,要留有一定的空间
D.橙色的酸性重铬酸钾溶液可用来检测酒精的产生
7.(2024届湛江一中开学考,16)厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾,湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。如图表示筛选高效降解淀粉的菌种的过程。下列有关叙述错误的是(　　)
A.配制培养基后需进行灭菌处理,常用的灭菌方法是湿热灭菌
B.菌落①与菌落②周围产生了透明圈,说明菌落①与菌落②可产淀粉酶
C.培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个甚至几个活菌
D.初步判断培养基上菌种的类型,需要用显微镜观察菌体的形态特征
8.（新情境）(2023惠州实验中学适应考,16)洗手液中添加抑菌物质能够有效地减少“病从口入”。常见的抑菌物质包括植物源抑菌物质、食用菌源抑菌物质和微生物源抑菌物质。为了研究这三类抑菌物质对常见细菌的抑制效果,现将不同的致病菌接种于含三种抑菌物质的培养基中,测定菌悬液的细胞密度,结果如表。下列叙述正确的是(　　)
细胞密度 (×103cfu·mL-1) 组别
对照组 植物源 抑菌物质 食用菌源 抑菌物质 微生物源 抑菌物质
菌种 金黄色 葡萄球菌 9.33 0.64 0.32 0.03
致病性大 肠杆菌 6.22 0.53 0.19 0.02
注:cfu·mL-1指每毫升样品中培养出的菌落数
A.测定细胞密度可将适量的菌悬液用稀释涂布平板法接种于固体培养基上
B.培养基中的抑菌物质为细菌提供碳源、氮源等营养物质
C.与致病性大肠杆菌相比,植物源抑菌物质对金黄色葡萄球菌的抑制效果更弱
D.微生物源抑菌物质可能通过阻碍金黄色葡萄球菌细胞核内DNA的复制,从而抑制其繁殖
限时拔高练2　　　　　　　　　　　　　　　
选择题
1.(2024届湛江一中开学考,3)果醋饮料是一种新型的健康饮料,果醋对健康养生、美容养颜的功效显著,是新时代的健康饮品。下列有关果醋制作的叙述,错误的是(　　)
A.果醋制作利用的醋酸菌是一种进行有氧呼吸的原核生物
B.在果醋制作的过程中,应将发酵温度严格控制在30~35℃
C.糖源不足时,醋酸菌形成醋酸的过程为乙醇→乙醛→醋酸
D.果汁发酵后是否有醋酸产生,可用酸性重铬酸钾溶液检测
2.(2024届广东六校一联,12)幽门螺旋杆菌(能分解对热不稳定的尿素)是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病菌。从带菌者胃黏膜样本中分离出该细菌,下列相关实验步骤和方法不合理的是(　　)
A.幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用尿素
B.尿素分解后培养基中pH升高,可利用酚红指示剂进行鉴定
C.选择培养基应以尿素为唯一氮源,制备时应先灭菌后加入无菌尿素
D.若要判断选择培养基是否起到作用,需要设置未接种的培养基作为对照组
3.（新思维）(2024届广州阶段考,16)味精是以粮食等为原料经发酵制成的一种调味料,发酵中所用的谷氨酸棒状杆菌菌种(好氧菌)大都从自然界筛选获得,如图是以小麦为原料生产味精的工艺流程图。下列分析正确的是(　　)
A.发酵前将菌种接种到摇瓶培养是为了进一步选育和纯化菌种
B.发酵前调整好温度、pH等条件,发酵过程中需关闭发酵罐通气阀门,同时需不断搅拌
C.通过基因工程育种可以对谷氨酸棒状杆菌进行定向改造,以获取性状优良的菌种
D.发酵结束后,可采用过滤、沉淀和纯化等方法获取单一菌体,并将菌体破碎后提取单细胞蛋白
4.（新情境）(2023广州一模,5)为制备圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌微生物菌剂,以降解厨余垃圾废液中淀粉、蛋白质、脂肪等物质,研究人员探究了圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比,将两种菌液进行了不同配比的分组处理,如表所示。下列叙述错误的是(　　)
编号 R0 R1 R2 R3
圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌 1∶0 2∶1 1∶1 0∶1
A.微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等分解废液中的相关物质
B.实验过程中,需将上述菌液分别接种于相同体积的厨余垃圾废液中进行培养
C.本实验还需设置对照组,具体处理是将适量R2组的菌液接种到等量无菌水中
D.可通过检测实验前后废液中淀粉、蛋白质、脂肪的含量,以确定适宜的配比
5.（新思维）(2023汕头二模,10)“断瘟病令不相染,密以艾灸病人床四角,各一壮,佳也”描绘了我国传统民间医药学用艾叶杀菌的场景。某班同学按照“探究抗生素对细菌的选择作用实验”的实验过程,分别使用含有相同浓度的艾叶汁和氨苄青霉素的两种滤纸片对大肠杆菌进行选择性培养,测量抑菌圈的直径变化,结果如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.艾叶汁的抑菌效果比氨苄青霉素好
B.氨苄青霉素对大肠杆菌的选择作用更强
C.氨苄青霉素诱导产生耐药性突变的效果更好
D.对药物敏感的细菌周围的滤纸片可能不出现抑菌圈
6.(2024届中山一中月考,14)青霉素发酵是高耗氧过程。在青霉素的发酵生产过程中总有头孢霉素产生。人们通过对青霉菌代谢途径的研究发现,在青霉素与头孢霉素的合成过程中,它们有一个共同的前体,这个前体经过两种不同酶的作用分别合成两种产物。下列相关叙述错误的是(　　)
A.工业化生产之前需要进行青霉菌纯培养并筛选青霉素分泌量高的优良菌种
B.进行主发酵前一次性加足所需的营养组分以利于工业化生产
C.通过敲除其中一种酶的基因,从而使青霉菌只产生一种产物
D.将血红蛋白基因导入青霉菌是一种保证发酵过程中高效供氧的思路
7.（新情境）(2024届深圳中学模拟,13)我国科学家利用如图所示的液态厌氧发酵工艺,实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌蛋白。下列叙述错误的是(　　)
A.乙醇梭菌以CO、CO2为主要的碳源和能源,具有较强的固碳潜力
B.乙醇梭菌是自养厌氧型细菌,其厌氧发酵的过程需要进行搅拌
C.通过该工艺高效生产清洁能源乙醇,可降低生态足迹
D.乙醇梭菌单细胞蛋白是通过发酵工程而生产的微生物菌体
8.(2024届汕头金山中学月考,16)金黄色葡萄球菌对青霉素的敏感度高且高度耐盐化。菌株可在血琼脂平板(完全培养基中添加适量血液)上生长,并能产生溶血毒素(可使红细胞及组成物质完全溶解)。而耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的mecA基因可编码新的青霉素结合蛋白2a,该蛋白对青霉素类抗菌药物亲和力低,继而对青霉素产生了一定的抗药性。以下叙述错误的是(　　)
A.在金黄色葡萄球菌分离培养过程中,须在选择培养基中加入10%~15%的NaCl、青霉素
B.培养在血琼脂平板上的金黄色葡萄球菌菌落周围会出现透明的溶血圈
C.可利用稀释涂布平板法在固体培养基表面获得均匀分布的金黄色葡萄球菌的单个菌落
D.可利用DNA分子杂交技术或PCR技术检测mecA基因,从而检测筛选出MRSA
第5部分　生物技术与工程
专题20　发酵工程
五年高考　　　　　　　　　　　　　　　
考点1　传统发酵技术的应用
1.(2023山东,12,2分)以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理:①沸盐水冷却后再倒入坛中;②盐水需要浸没全部菜料;③盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水;④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是(　　)
A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
答案　C　
2.(2022湖北,11,2分)关于白酒、啤酒和果酒的生产,下列叙述错误的是(　　)
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
C.葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质,也存在于线粒体
D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同,但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
答案　C　
3.(2021海南,17,3分)关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作,下列叙述正确的是(　　)
A.发酵所利用的微生物都属于原核生物
B.发酵过程都在无氧条件下进行
C.发酵过程都在同一温度下进行
D.发酵后形成的溶液都呈酸性
答案　D　
4.(2021浙江1月选考,10,2分)用白萝卜制作泡菜的过程中,采用适当方法可缩短腌制时间。下列方法中错误的是(　　)
A.将白萝卜切成小块
B.向容器中通入无菌空气
C.添加已经腌制过的泡菜汁
D.用沸水短时处理白萝卜块
答案　B　
5.(2021山东,12,2分)葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是(　　)
A.无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖
B.自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌
C.葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的
D.制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
答案　D　
6.(2021辽宁,8,2分)利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为:先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌,发酵6天后,再接入活化的醋酸杆菌,发酵5天。下列有关叙述错误的是(　　)
A.乙醇既是醋酸发酵的底物,又可以抑制杂菌繁殖
B.酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C.酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D.接入醋酸杆菌后,应适当升高发酵温度
答案　B　
7.（新教材）(2021全国乙,37,15分)工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如图。
回答下列问题:
(1)米曲霉发酵过程中,加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质,大豆中的　　　　　可为米曲霉的生长提供氮源,小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供　　　　。
(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖,大量分泌制作酱油过程所需的酶类,这些酶中的　　　　、　　　　能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分,如将蛋白质分解为小分子的肽和　　　　。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌,由此可以判断米曲霉属于　　　　(填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。
(3)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于　　　　　　(填“真核生物”或“原核生物”);添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是　　　　　　。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素,据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是　　　　　　(答出1点即可)。
答案　(1)蛋白质　碳源　(2)蛋白酶　脂肪酶　氨基酸　异养好氧　(3)原核生物　乙醇和CO2　食盐
考点2　微生物的培养技术及应用
8.(2023广东,10,2分)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断,下列最可能筛选到目标菌的条件组合是(　　)
A.a点时取样、尿素氮源培养基
B.b点时取样、角蛋白氮源培养基
C.b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D.c点时取样、角蛋白氮源培养基
答案　D　
9.(2023浙江1月选考,19,2分)某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌,进行了如下实验:取泡菜汁样品,划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基,经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是(　　)
A.培养基需偏碱性
B.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C.需在无氧条件下培养
D.分离得到的微生物均为乳酸菌
答案　C　
10.(2023山东,15,2分)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是(　　)
A.不含氮源的平板不能用于微生物培养
B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
答案　D　
11.(2023江苏,7,2分)下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是(　　)
A.通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B.通常细菌的生长速度比酵母菌快,菌落比酵母菌落大
C.通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌,酵母菌培养基用过滤除菌法除菌
D.血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定,也可用于细菌的数量测定
答案　A　
12.(2023辽宁,9,2分)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的,利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是(　　)
A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
答案　D　
13.(2022湖北,5,2分)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是(　　)
A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C.为防止蛋白质变性,不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D.可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
答案　D　
14.(2022江苏,3,2分)下列是某同学分离产脲酶菌的实验设计,不合理的是(　　)
A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株
B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌株
答案　D　
15.(2022辽宁,15,2分)为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险,需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是(　　)
A.航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物
B.细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀
C.在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品
D.采用平板划线法等分离培养微生物,观察菌落特征
答案　C　
16.(2022海南,12,3分)为探究校内植物园土壤中的细菌种类,某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是(　　)
A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B.培养细菌时,可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C.土壤溶液稀释倍数越低,越容易得到单菌落
D.鉴定细菌种类时,除形态学鉴定外,还可借助生物化学的方法
答案　C　
17.(2021北京,12,2分)人体皮肤表面存在着多种微生物,某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是(　　)
A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌
B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样
C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布
D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
答案　C　
18.（新情境）(2022广东,21,12分)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中,中国科学家采集了某海域1146 米深海冷泉附近沉积物样品,分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
回答下列问题:
(1)研究者先制备富集培养基,然后采用　　　　　　法灭菌,冷却后再接入沉积物样品,28℃厌氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物。为了获得纯种培养,除了稀释涂布平板法,还可采用　　　　　法。据图分析,拟杆菌新菌株在以　　　　为碳源时生长状况最好。
(2)研究发现,将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来,推测其原因可能是　　　　　　　　　　　　　　　　　。(答一点即可)
(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质,通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑,拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是 　。
(4)深海冷泉环境特殊,推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,除具有酶的一般共性外,其特性可能还有 　。
答案　(1)高压蒸汽灭菌　平板划线　纤维素　(2)培养条件与深海环境差异大;微生物不可以在培养基中培养(或生存);微生物只能在深海环境中生存;培养基没有模拟到深海环境;某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(以上答一点即可)　(3)拟杆菌作为分解者,将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物,归还到无机环境中,促进碳循环的顺利进行　(4)耐低温、耐高压
19.（新思维）(2023北京,16,12分)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性,能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分,其中蛋白胨主要为细菌提供　　　　　　和维生素等。
(2)A菌通常被用作溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上,凝固形成薄层。培养一段时间后,薄层变浑浊(如图),表明　　　　　　　　　　　　　　。
(3)为分离出具有溶菌作用的细菌,需要合适的菌落密度,因此应将含菌量较高的湖泊水样　　　　后,依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后,能溶解A菌的菌落周围会出现　　　　。采用这种方法,研究者分离、培养并鉴定出P菌。
(4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式,请提出一个假设,该假设能用以下材料和设备加以验证。
主要实验材料和设备:P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱。
答案　(1)碳源、氮源　(2)A菌通过增殖长成菌落均匀分布在培养基表面　(3)稀释　抑菌圈　(4)假设P菌通过分泌溶菌物质破坏A菌。
20.(2022全国乙,37,15分)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S,S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此,某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响,结果见表。
碳源 细胞干重(g/L) S产量(g/L)
葡萄糖 3.12 0.15
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
回答下列问题。
(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所用的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。
(2)由实验结果可知,菌株C生长的最适碳源是　　　　;用菌株C生产S的最适碳源是　　　　　　。菌株C的生长除需要碳源外,还需要　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)等营养物质。
(3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因是　　　　　　　　　。
(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路: 　。
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出1点即可)。
答案　(1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌　(2)葡萄糖　制糖废液　水、氮源、无机盐　(3)菌株C缺少淀粉酶　(4)用一系列浓度梯度的制糖废液分别培养菌株C,测定不同浓度制糖废液中的S产量,S产量最高时对应的制糖废液浓度即为最适碳源浓度　(5)减少污染、节省原料、降低生产成本
21.(2022全国甲,37,15分)某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌,在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力,并分析两个菌株的其他生理功能。
实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ:K2HPO4,MgSO4,NH4NO3,石油。
培养基Ⅱ:K2HPO4,MgSO4,石油。
操作步骤:
①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养,得到A、B菌液;
②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂,分别制成平板Ⅰ、Ⅱ,并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。
回答下列问题。
(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是　　　　　。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源,氮源在菌体内可以参与合成　　　　　　　　　(答出2种即可)等生物大分子。
(2)步骤①中,在资源和空间不受限制的阶段,若最初接种N0个A细菌,繁殖n代后细菌的数量是　　　　。
(3)为了比较A、B降解石油的能力,某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验,结果如表所示(“+”表示有透明圈,“+”越多表示透明圈越大,“-”表示无透明圈),推测该同学的实验思路是 　。
菌株 透明圈大小
平板Ⅰ 平板Ⅱ
A +++ ++
B ++ -
(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤,根据上表所示实验结果,治理石油污染应选用的菌株是　　　　,理由是　 　。
答案　(1)石油　核酸、蛋白质(其他答案合理即可)　(2)N0·2n　(3)取Ⅰ、Ⅱ平板,在甲孔注入适量的A菌液,在乙孔注入等体积的B菌液;在适宜条件下培养一段时间后,观察A、B两种菌是否能产生透明圈并测量透明圈的大小(或答:通过观察在无氮源情况下A、B两种菌株是否能产生透明圈和有氮源情况下A、B两种菌株产生透明圈的大小,来探究A、B两种菌株分解石油是否需要氮源,及在有氮源情况下,氮源对两种菌种降解石油的能力的影响)　(4)A　A菌株在无氮源的情况下可以分解石油
22.(2022河北,23节选,10分)番茄灰霉病菌严重影响番茄生产,枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治,研究者设计了相关实验。
回答下列问题:
(1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时,取适量　　　　　　菌液涂布于固体培养基上,将无菌滤纸片(直径5mm)在　　　　　　　菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心,数秒后取出滤纸片,培养皿倒置培养后测量　　　　大小以判定抑菌效果。
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,液体培养时应采用　　　　　　　填[“静置”或“摇床震(振)荡”]培养。培养过程中抽样检测活菌数量时,应采用　　　　(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”),其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
答案　(1)番茄灰霉病菌　枯草芽孢杆菌　透明圈　(2)摇床震(振)荡　稀释涂布平板法　用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞,而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内
考点3　发酵工程及其应用
23.（新情境）(2023辽宁,13,2分)利用某种微生物发酵生产DHA油脂,可获取DHA(一种不饱和脂肪酸)。如图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是(　　)
A.DHA油脂的产量与生物量呈正相关
B.温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量
C.葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量
D.12~60h,DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高
答案　D　
24.(2022山东,14,2分)青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时,会通过分泌青霉素杀死细菌,以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产,关于该生产过程,下列说法错误的是(　　)
A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B.可用深层通气液体发酵技术提高产量
C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中
D.青霉素具有杀菌作用,因此发酵罐不需严格灭菌
答案　D　
25.(2022湖北,14,2分)废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.该生产过程中,一定有气体生成
B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
答案　A　
26.（新思维）(2021广东,21,12分)中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液,含较多蔗糖)为原料,在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。
回答下列问题:
(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率,可在液体培养基中将蔗糖作为　　　　　　,并不断提高其浓度,经多次传代培养(指培养一段时间后,将部分培养物转入新配的培养基中继续培养)以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用　
的方法进行菌落计数,评估菌株增殖状况。此外,选育优良菌株的方法还有　　　　　　　　　　　　等。(答出两种方法即可)
(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统,其培养基盐浓度设为60g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是 　。(答出两点即可)
(3)研究人员在工厂进行扩大培养,在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵,结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和 PHA产量均未达到预期,并产生了少量乙醇等物质,说明发酵条件中　　　　可能是高密度培养的限制因素。
(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾[主要含蛋白质、淀粉、油脂(脂肪)等]来生产PHA,说明其能分泌　　　　　　　　　　　　。
答案　(1)唯一碳源　稀释涂布平板　诱变育种、基因工程育种　(2)在高盐和较高pH的发酵液中,菌株H可以生长繁殖,而大多数其他微生物因无法适应这一环境而受到抑制　(3)氧气　(4)蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶
三年模拟
限时拔高练1　　　　　　　　　　　　　　　
选择题
1.(2023惠州一模,12)如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是(　　)
　　
A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理
B.步骤①倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置
C.步骤②的目的是使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落
D.步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注
答案　C　
2.(2024届广东七校联合体一联,12)下列关于微生物的选择培养的叙述,错误的是(　　)
A.用纤维素作为唯一碳源的选择培养基分离获得纤维素分解菌
B.用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离获得尿素分解菌
C.用缺少有机碳源的选择培养基分离获得自养型微生物
D.用含有青霉素的选择培养基分离获得酵母菌和细菌
答案　D　
3.(2024届潮州松昌中学月考,7)近期流行一种利用能否制作酸奶来判断牛奶好坏的方法,以下自制酸奶的方法也随之广泛流传:(1)牛奶倒入玻璃杯,放在沸水中加热10分钟;(2)降温到42℃,每杯牛奶加入0.15g酸奶发酵剂;(3)用干净小勺搅拌均匀,在杯子外封上保鲜膜;(4)在42℃下保温5小时后,放在4℃冰箱中冷藏1小时。则相关问题不正确的是(　　)
A.牛奶在沸水中加热10分钟,属于消毒的方式
B.第(2)步降温到42℃的目的是避免高温使菌种失活
C.每杯牛奶加入0.15g酸奶发酵剂的目的是迅速使乳酸菌成为优势物种
D.第(3)步封上保鲜膜的目的是为了保温
答案　D　
4.（新教材）(2024届广东四校一联,9)苏轼的《超然台记》中提到“撷园蔬,取池鱼,酿秫(谷物)酒,瀹(煮)脱粟而食之,曰:‘乐哉游乎!’”。下列有关利用秫酿造酒的叙述,正确的是(　　)
A.秫酿造酒前要对酿酒器具和秫进行严格灭菌处理
B.秫酿造酒的酿酒酵母的最适生长温度约为30~35℃
C.秫酿造酒后期密封不严会促进醋酸菌发酵产生醋酸
D.秫酿造酒过程中全程要制造无氧环境
答案　C　
5.(2023广东六校一联,11)某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。有关叙述正确的是(　　)
A.鲜奶常采用湿热灭菌法进行灭菌
B.若培养基需要调节pH,应该在灭菌后培养基凝固前立即进行
C.若3个培养皿中菌落数为35、33、34,则鲜奶中细菌数为3.4×106个/mL
D.对鲜奶中细菌计数,常采用稀释涂布平板法,统计的结果往往比实际值偏高
答案　C　
6.(2024届广东一调,12)为了探究果酒发酵的最适温度,某研究性学习小组将制作的果汁加入果酒发酵罐中,向发酵罐中加入等量酵母菌,并分别设置不同温度,再将发酵罐与传感器相连,实时检测酒精含量变化,结果如图所示。相关叙述错误的是(　　)
A.该实验中28℃组是实验组,其余三组是对照组
B.实验结果表明果酒发酵的最适温度是28℃左右
C.将果汁装入发酵罐时不能装满,要留有一定的空间
D.橙色的酸性重铬酸钾溶液可用来检测酒精的产生
答案　A　
7.(2024届湛江一中开学考,16)厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾,湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。如图表示筛选高效降解淀粉的菌种的过程。下列有关叙述错误的是(　　)
A.配制培养基后需进行灭菌处理,常用的灭菌方法是湿热灭菌
B.菌落①与菌落②周围产生了透明圈,说明菌落①与菌落②可产淀粉酶
C.培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个甚至几个活菌
D.初步判断培养基上菌种的类型,需要用显微镜观察菌体的形态特征
答案　D　
8.（新情境）(2023惠州实验中学适应考,16)洗手液中添加抑菌物质能够有效地减少“病从口入”。常见的抑菌物质包括植物源抑菌物质、食用菌源抑菌物质和微生物源抑菌物质。为了研究这三类抑菌物质对常见细菌的抑制效果,现将不同的致病菌接种于含三种抑菌物质的培养基中,测定菌悬液的细胞密度,结果如表。下列叙述正确的是(　　)
细胞密度 (×103cfu·mL-1) 组别
对照组 植物源 抑菌物质 食用菌源 抑菌物质 微生物源 抑菌物质
菌种 金黄色 葡萄球菌 9.33 0.64 0.32 0.03
致病性大 肠杆菌 6.22 0.53 0.19 0.02
注:cfu·mL-1指每毫升样品中培养出的菌落数
A.测定细胞密度可将适量的菌悬液用稀释涂布平板法接种于固体培养基上
B.培养基中的抑菌物质为细菌提供碳源、氮源等营养物质
C.与致病性大肠杆菌相比,植物源抑菌物质对金黄色葡萄球菌的抑制效果更弱
D.微生物源抑菌物质可能通过阻碍金黄色葡萄球菌细胞核内DNA的复制,从而抑制其繁殖
答案　A　
限时拔高练2　　　　　　　　　　　　　　　
选择题
1.(2024届湛江一中开学考,3)果醋饮料是一种新型的健康饮料,果醋对健康养生、美容养颜的功效显著,是新时代的健康饮品。下列有关果醋制作的叙述,错误的是(　　)
A.果醋制作利用的醋酸菌是一种进行有氧呼吸的原核生物
B.在果醋制作的过程中,应将发酵温度严格控制在30~35℃
C.糖源不足时,醋酸菌形成醋酸的过程为乙醇→乙醛→醋酸
D.果汁发酵后是否有醋酸产生,可用酸性重铬酸钾溶液检测
答案　D　
2.(2024届广东六校一联,12)幽门螺旋杆菌(能分解对热不稳定的尿素)是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病菌。从带菌者胃黏膜样本中分离出该细菌,下列相关实验步骤和方法不合理的是(　　)
A.幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用尿素
B.尿素分解后培养基中pH升高,可利用酚红指示剂进行鉴定
C.选择培养基应以尿素为唯一氮源,制备时应先灭菌后加入无菌尿素
D.若要判断选择培养基是否起到作用,需要设置未接种的培养基作为对照组
答案　D　
3.（新思维）(2024届广州阶段考,16)味精是以粮食等为原料经发酵制成的一种调味料,发酵中所用的谷氨酸棒状杆菌菌种(好氧菌)大都从自然界筛选获得,如图是以小麦为原料生产味精的工艺流程图。下列分析正确的是(　　)
A.发酵前将菌种接种到摇瓶培养是为了进一步选育和纯化菌种
B.发酵前调整好温度、pH等条件,发酵过程中需关闭发酵罐通气阀门,同时需不断搅拌
C.通过基因工程育种可以对谷氨酸棒状杆菌进行定向改造,以获取性状优良的菌种
D.发酵结束后,可采用过滤、沉淀和纯化等方法获取单一菌体,并将菌体破碎后提取单细胞蛋白
答案　C　
4.（新情境）(2023广州一模,5)为制备圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌微生物菌剂,以降解厨余垃圾废液中淀粉、蛋白质、脂肪等物质,研究人员探究了圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比,将两种菌液进行了不同配比的分组处理,如表所示。下列叙述错误的是(　　)
编号 R0 R1 R2 R3
圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌 1∶0 2∶1 1∶1 0∶1
A.微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等分解废液中的相关物质
B.实验过程中,需将上述菌液分别接种于相同体积的厨余垃圾废液中进行培养
C.本实验还需设置对照组,具体处理是将适量R2组的菌液接种到等量无菌水中
D.可通过检测实验前后废液中淀粉、蛋白质、脂肪的含量,以确定适宜的配比
答案　C　
5.（新思维）(2023汕头二模,10)“断瘟病令不相染,密以艾灸病人床四角,各一壮,佳也”描绘了我国传统民间医药学用艾叶杀菌的场景。某班同学按照“探究抗生素对细菌的选择作用实验”的实验过程,分别使用含有相同浓度的艾叶汁和氨苄青霉素的两种滤纸片对大肠杆菌进行选择性培养,测量抑菌圈的直径变化,结果如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.艾叶汁的抑菌效果比氨苄青霉素好
B.氨苄青霉素对大肠杆菌的选择作用更强
C.氨苄青霉素诱导产生耐药性突变的效果更好
D.对药物敏感的细菌周围的滤纸片可能不出现抑菌圈
答案　B　
6.(2024届中山一中月考,14)青霉素发酵是高耗氧过程。在青霉素的发酵生产过程中总有头孢霉素产生。人们通过对青霉菌代谢途径的研究发现,在青霉素与头孢霉素的合成过程中,它们有一个共同的前体,这个前体经过两种不同酶的作用分别合成两种产物。下列相关叙述错误的是(　　)
A.工业化生产之前需要进行青霉菌纯培养并筛选青霉素分泌量高的优良菌种
B.进行主发酵前一次性加足所需的营养组分以利于工业化生产
C.通过敲除其中一种酶的基因,从而使青霉菌只产生一种产物
D.将血红蛋白基因导入青霉菌是一种保证发酵过程中高效供氧的思路
答案　B　
7.（新情境）(2024届深圳中学模拟,13)我国科学家利用如图所示的液态厌氧发酵工艺,实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌蛋白。下列叙述错误的是(　　)
A.乙醇梭菌以CO、CO2为主要的碳源和能源,具有较强的固碳潜力
B.乙醇梭菌是自养厌氧型细菌,其厌氧发酵的过程需要进行搅拌
C.通过该工艺高效生产清洁能源乙醇,可降低生态足迹
D.乙醇梭菌单细胞蛋白是通过发酵工程而生产的微生物菌体
答案　A　
8.(2024届汕头金山中学月考,16)金黄色葡萄球菌对青霉素的敏感度高且高度耐盐化。菌株可在血琼脂平板(完全培养基中添加适量血液)上生长,并能产生溶血毒素(可使红细胞及组成物质完全溶解)。而耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的mecA基因可编码新的青霉素结合蛋白2a,该蛋白对青霉素类抗菌药物亲和力低,继而对青霉素产生了一定的抗药性。以下叙述错误的是(　　)
A.在金黄色葡萄球菌分离培养过程中,须在选择培养基中加入10%~15%的NaCl、青霉素
B.培养在血琼脂平板上的金黄色葡萄球菌菌落周围会出现透明的溶血圈
C.可利用稀释涂布平板法在固体培养基表面获得均匀分布的金黄色葡萄球菌的单个菌落
D.可利用DNA分子杂交技术或PCR技术检测mecA基因,从而检测筛选出MRSA
答案　A　
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