江苏省响水中学人教版高中生物选修一5.1DNA的粗提取与鉴定 导学案

　DNA的粗提取与鉴定
学习目标
1.通过对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。
2.理解DNA粗提取与鉴定的原理,掌握DNA粗提取技术。
3.利用DNA的性质、细胞的特征和试剂的使用方法进行实验设计和操作。
预学案
一、基础知识
1.提取DNA的方法
(1)DNA的粗提取就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在①方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
(2)DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其 ( http: / / www.21cnjy.com )他成分在不同浓度的②中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使③充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
(3)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:④能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温,而DNA在⑤以上才会变性。洗涤剂能够瓦解⑥,但对DNA没有影响。
2.DNA的鉴定:在⑦条件下,DNA遇⑧会被染成⑨。
二、实验设计
1.实验材料的选取:选用⑩含量相对高的生物组织,成功的可能性更大。
2.破碎细胞,获取含DNA的滤液:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解。
3.去除滤液中的杂质:当氯化钠的物质的量浓度为时,DNA的溶解度最低,而蛋白质等会溶解,利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出,从而达到分离。
4.DNA的析出与鉴定:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的,静置2~3 min,溶液中会出现,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。取两支20 mL的试管,各加入物质的量浓度为的NaCl溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4 mL的。混合均匀后,将试管置于中加热5 min,待试管冷却后,比较两支试管中溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变。
探究案：知识点一:提取DNA的方法
1.提取大分子物质的基本思路是怎样的
2.DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,尝试完成表中内容。
试剂 溶解情况
DNA 蛋白质
物质的量浓度为2 mol/L NaCl溶液
物质的量浓度为0.14 mol/L NaCl溶液
酒精(体积分数为95%的冷酒精)
3.盛放鸡血细胞液最好用什么样的容器 为什么不宜用玻璃容器
　　知识点二: DNA粗提取的实验操作及鉴定方法
1.去除滤液中杂质有三种方法:
(1)第一种方法是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。如何进行操作
(2)利用DNA对酶的耐受性也可以去除滤液中的杂质,其原理是什么 如何进行操作
(3)利用DNA对高温的耐受性也可以去除滤液中的杂质,其原理是什么 如何进行操作
2.如何用乙醇析出DNA 预冷的乙醇有何优点
3.如何用二苯胺鉴定DNA
检测案：
　　 1　关于DNA的粗提取与鉴定的实验,不是该实验依据的实验原理的一项是(　　)。
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随着NaCl溶液浓度的不同而不同
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应
　　 2　下表有关“DNA粗提取与鉴定”的相关操作中所选取的试剂,不正确的是(　　)。
选项 相关操作 选取的试剂
A 破碎鸡血细胞 蒸馏水
B 溶解核内DNA 2 mol/L NaCl溶液
C 提取杂质较少的DNA 冷却的95%的酒精
D DNA的鉴定 双缩脲试剂
3.以下与DNA的提取与鉴定有关的叙述,正确的是(　　)。
A.可用于鉴定蛋白质和DNA的试剂分别是斐林试剂和二苯胺试剂
B.只能通过动物细胞提取DNA
C.NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最高
D.从细胞核中提取DNA时所用的提取液是NaCl溶液
4.下列DNA粗提取的实验操作中,经离心或过滤后取上清液或滤液的是(　　)。
①在新鲜鸡血中加入适量的柠檬酸钠,混合均 ( http: / / www.21cnjy.com )匀后离心　②在盛有血细胞的塑料烧杯中加蒸馏水,快速搅拌后过滤　③在2 mol/L的氯化钠溶液中放入丝状物,轻轻搅拌后过滤
④在溶有DNA的2 mol/L的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤
A.①② 　　　　　　　B.②③ 　　　　　　　C. ③④ 　　　　　　　D. ①④
5.下图为DNA的粗提取与鉴定实验过程中的一些重要操作示意图。
①正确的操作顺序是　　　　　　　　　　。
②上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是　　　　　　　　和　　　　　　　　。
③上图A步骤中所用酒精必须经过　　　　　　 ( http: / / www.21cnjy.com )才能使用,该步骤的目的是　　　　　　　　　　　　　　。通过图B所示的步骤取得滤液,再在溶液中加入物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液的目的是　　　　　　　　　　　　　　　。
④为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加　　　　试剂后沸水浴加热5 min,如果出现　　　　则证明该丝状物的主要成分为DNA。
我的收获：
我的疑问：