1.1微生物纯培养物的获得——高二生物学北师大版（2019）选择性必修三同步课时作业（含解析）

1.1微生物纯培养物的获得——高二生物学北师大版（2019）选择性必修三同步课时作业
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部 位的杂菌 ( )
A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环
C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅
2．在获得某种微生物纯净培养物的过程中，操作的关键是( )
A.适宜环境条件下培养 B.接种纯种细菌
C.对所有器皿、培养基灭菌 D.用无菌水配培养基
3．日前微博传言手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，为辨别真伪，两电视台利用 微生物培养技术进行实验，过程及结果如图。下列叙述错误的是( )
A.本实验采用稀释涂布平板法接种
B.本实验不需要设置对照组实验
C.本实验使用的培养基应含有水、碳源、氮源和无机盐
D.两个报道结果不同，可能是因为取样环境不同
4．实验可利用稀释涂布平板法统计样品中的活菌数，下列叙述不正确的是( )
A.实验需用涂布器将菌液涂布于固体培养基表面
B.通过统计平板上的菌落数推测出样品中的活菌数，菌落数为30-300个的平板合适
C.涂布平板的所有操作都不需要在酒精灯火焰附近进行
D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
5．下列关于利用稀释涂布平板法统计待测样品中的活菌数的相关说法，正确的是( )
A.样品的稀释度不会直接影响平板上菌落数目
B.通过此方法统计得出的结果通常比实际数量偏小
C.使用涂布器时需要将涂布器放在火焰上灼烧，待涂布器上酒精燃尽后立即进行涂布
D.为了保证结果准确，一般选择菌落数为20-200的平板进行计数
6．某培养基成分如下：
葡萄糖4～10g，（NH4）2SO41g，K2HPO47g，KH2PO42g，MgSO41g，CaCl20.02g，微量元素（Fe、Co、Mn、Zn、Cu、Ni、Mo）各2～10μg，蒸馏水1000mL，pH7.2
下列相关叙述正确的是( )
A.从培养基组成来看，该培养基属于固体培养基
B.从培养基的pH分析该培养基可用于培养霉菌
C.去掉（NH4）2SO4，该培养基可用于选择培养固氮微生物
D.微量元素在生物体中含量很少，培养基中可以不加或少加
7．为纯化某菌种，某小组在鉴别培养基上划线接种了该种细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是( )
A. 该过程中接种环至少要灼烧3次
B. 图中的菌落均由同种微生物形成
C. 从3区菌落挑取后进行培养可获得纯培养物
D. 该培养基使用完之后，无须再进行灭菌处理
8．工业化生产食品时，为了延长保质期，常采用的处理方法有罐藏法、巴氏消毒法、冷藏法、干燥法或加防腐剂等，这些处理方法的共性在于能抑制或阻止微生物生长和繁殖。下列相关叙述错误的是( )
A.腐烂变质的食品能为微生物的生长提供碳源
B.利用巴氏消毒法可以杀死牛奶中的绝大多数微生物
C.干燥法可以延长食品的保质期，说明微生物的生长繁殖离不开水
D.冷藏法能抑制微生物繁殖的原因是低温会破坏蛋白质的结构
9．用马铃薯琼脂培养基可以进行酵母菌的纯培养，酵母菌培养基的配方如下表所示。下列关于酵母菌的纯培养的说法，正确的是( )
组分 马铃薯滤液 葡萄糖 琼脂 加水定容至
含量 200g 20g 15g 1000mL
A.该培养基的碳源来自马铃薯、葡萄糖和琼脂
B.纯培养物是由单一酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体分泌的代谢物
C.在配制固体培养基时需要先进行灭菌，再对pH进行调节
D.为了检验培养基灭菌是否合格，应设置一个未接种的培养皿作为对照一起放至恒温培养箱中培养
10．某同学利用选择培养基成功分离出了土壤中的自生固氮菌，得到了如图所示的实验结果，以下说法正确的是( )
A.该实验使用了划线法接种 B.该实验使用了液体培养基
C.该实验使用了无碳培养基 D.该实验使用了无氮培养基
二、多选题
11．在分离、纯化细菌的实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图,a、b、c、d是划线的四个区域。下列有关叙述正确的是( )
A.操作过程中,接种环至少需灼烧五次
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.甲图中的a区域为划线的起始区域
D.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
12．为构建转玉米蔗糖转运蛋白基因（ZmERD6）的工程菌，科研人员提取玉米细胞mRNA，获得cDNA后导入到酵母突变株SUSY7，然后利用选择培养基筛选、鉴定，最终获得目的菌。下列叙述正确的有( )
A.应选取含蔗糖转运蛋白的组织提取RNA
B.RNA形成cDNA的最适温度条件为94℃
C.选择培养基应以蔗糖为唯一碳源
D.酵母突变株SUSY7不能利用细胞外的蔗糖
三、读图填空题
13．某兴趣小组按下列配方配制培养基用于微生物的筛选和鉴定。
编号 成分 含量
① NaCl 5.0g
② KH2PO4、Na2HPO4 适量
③ MgSO4·7H2O 0.2g
④ 葡萄糖、乳糖 10.0g
⑤ X 适量
⑥ 琼脂 15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
回答下列问题：
（1）培养基配制的一般流程是计算、称量、_____、灭菌、倒平板，判断培养基灭菌是否合格以及培养条件是否符合要求的思路是_____。
（2）上表成分中能为微生物提供氮源的物质是_____，KH2PO4和Na2HPO4的作用是_____。
（3）纯化菌株时，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误：①_____；②_____。
14．下表为某生物兴趣小组的同学在培养某种微生物时制定的培养基组分，请回答下列问题：
KH2PO4 NaHPO4 MgSO4·7H2O KNO3 蒸馏水
1.4g 2.1g 0.2g 2.0g 定容至100mL
(1)该培养基缺少的营养成分是_____________，只能用来培养_____________型微生物，若要分离土壤中的尿素分解菌，该培养基中需加入_____________、_____________、琼脂，去掉KNO3。
(2)制备固体培养基，需要计算→称量→_____________→灭菌→_____________。接种前，某同学取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，其目的是：_________________。
(3)若要长时间保存大肠杆菌，可以采用__________________；使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止_________________。
参考答案
1．答案：C
解析：ABCD、高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种针等金属用具。ABD错误，C正确。
故选C。
2．答案：C
解析：A、适宜环境下培养不能有效防止外来杂菌入侵，A错误；
B、接种纯种细菌是获得纯净培养物的前提，不符合题意，B错误；
C、在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，对所有器皿、培养基进行灭菌可以防止杂菌入侵，C正确；
D、用无菌水配制培养基不是防止杂菌入侵的关键，D错误；
故选C。
3．答案：B
解析：A、由图可知，本实验采用稀释涂布平板法接种，A正确；
B、为了防止杂菌污染，本实验需要设置对照组实验，B错误；
C、本实验使用的培养基应含有水、碳源、氮源和无机盐，C正确；
D、通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物，两电台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是手机的取样和马桶的取样都不相同，D正确。
故选B。
4．答案：C
解析：A、用稀释涂布平板法进行接种时，需用涂布器将菌液涂布于固体培养基表面，A正确；
B、通过统计平板上的菌落数推测出样品中的活菌数，计数时选择菌落数为30 300的平板，B正确；
C、涂布平板的所有操作需要在酒精灯火焰附近进行，C错误；
D、用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌，D正确。
故选C。
5．答案：B
解析：A、稀释涂布平板法计数时,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落可来源于样品稀释液中的一个活菌,样品的稀释度会影响平板上菌落数目,A错误;B、由于可能有两个或多个细菌形成同一个菌落所以该方法统计的数值往往小于实际值,B正确;C、将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽,涂布器冷却后(以免杀死菌种),再进行涂布平板,用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面,涂布时可转动培养皿,使涂布均匀,C错误;D、为了保证结果准确,一般选择菌落数为30-300的平板进行计数,D错误。故选B。
6．答案：C
解析：从培养基组成来看，该培养基属于合成培养基，因其不含凝固剂琼脂，属于液体培养基，A错误；该培养基的pH为7.2是弱碱性，适于细菌的培养，霉菌培养需将pH调至酸性，B错误；去掉（NH4）2SO4后，培养基成分缺乏氮源，只有因氮微生物能生长，方可用于固氢微生物的培养，C正确；微量元素在生物体内的含量少，但作用很重要，是生物体必不可少的成分，培养基中必须添加，D错误。
7．答案：C
解析：
A、接种时，需要在第一次接种前以及每一次接种后灼烧接种环， 因此接种过程中接种环共需4次灼烧处理，A错误;
B、同种微生物形成的菌落大小形状、颜色等特征较为稳定,而图中菌落特征不同,故图中的菌落不全由同种微生物形成, B错误;
C、由图可知，3区存在单菌落，挑取一个单个菌落进行纯培养，可获得纯培养物，C正确;
D、该培养基使用完之后，需要进行灭菌处理才能丢弃，避免造成污染, D错误。
故选C。
8．答案：D
解析：A、食品腐烂与微生物的大量繁殖有关，微生物能在食品上生长和繁殖，说明食品中的含碳有机物如葡萄糖等能为微生物的生长提供碳源，A正确;B、巴氏消毒法是一种相对较温和的消毒方法，可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，B正确;C、食品经干燥处理以后，可以延长其保质期，说明微生物生长繁殖离不开水，C正确;D、冷藏法能抑制微生物繁殖的原因是低温会抑制蛋白质的活性，并非破坏蛋白质的结构，D错误。
9．答案：D
解析：A、琼脂本身不能作为微生物的碳源，A错误；B、纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，B错误；C、在配制固体培养基时需要先对pH进行调节，再进行灭菌，C错误；D、未接种的培养基作为空白对照，检验培养基灭菌是否合格，D正确。
10．答案：D
解析：A、根据图中菌落分布可知，该实验采用的接种方法是涂布平板法，A错误； B、培养基中有菌落出现，说明该实验采用的是固体培养基，B错误； C、自生固氮菌是异养型生物，因此该实验使用的是含碳培养基，C错误； D、自生固氮菌能固氮，因此该实验使用的选择培养基是无氮培养基，D正确。
故选：D
11．答案：ABD
解析：A、平板划线法中每次划线前都要灼烧接种环,保证菌种来自于上一次划线的末端,划线结束后也要灼烧接种环,防止污染环境、感染接种者;操作过程中,划线了四次,因此接种环至少需灼烧五次,A正确;
B、连续划线可以将聚集的菌种逐步稀释,以便获得单个菌落,B正确;
C、分析图乙,a对应的区域出现了单个菌落,d区域菌落最多,因此a区域应该为划线的最终区域,d区域为划线的起始区域,C错误;
D、为了防止空气中杂菌的污染,蘸取菌液和划线都要在酒精灯火焰旁进行,D正确。
12．答案：ACD
解析：A、由于基因的选择性表达，应该选取含蔗糖转运蛋白的组织提取mRNA，进行逆转录，才能获得玉米蔗糖转运蛋白基因的cDNA,A正确；B、RNA形成cDNA是通过逆转录过程，需要逆转录酶的催化，94℃的高温会导致逆转录酶失活，B错误； C、获得cDNA后导入到酵母突变株SUSY7，酵母突变株SUSY7就能合成蔗糖转运蛋白，选择培养基应以蔗糖为唯一碳源，目的基因表达的酵母菌能转运蔗糖而存活，C正确； D、酵母突变株SUSY7本身无蔗糖转运蛋白基因，无蔗糖转运蛋白，不能利用细胞外的蔗糖，D正确。
故选：ACD。
13．答案：（1）熔化；将未接种的培养基和接种菌液的培养基一同放在适宜条件下培养，观察未接种的培养基上是否有菌落生长以及接种的培养基上菌落的生长情况
（2）X；提供无机盐、调节培养基的酸碱度
（3）接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始
解析：（1）培养基配制的一般流程是计算、称量、熔化、灭菌、倒平板，判断培养基灭菌是否合格可以将未接种的培养基和接种菌液的培养基一同放在适宜条件下培养，观察未接种的培养基上是否有菌落生长以及接种的培养基上菌落的生长情况。若未接种的培养基上长出菌落，这说明灭菌失败，需要重新配制培养基进行灭菌。
（2）培养基中一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，由培养基配方表分析可知，培养基成分中还缺少氮源，故成分表中能为微生物提供氮源的物质是X，KH2PO4和Na2HPO4是无机盐，它们的作用是提供无机盐、调节培养基的酸碱度。
（3）纯化菌株时，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，结合第一区域的划线上不间断长满菌落可推测接种环灼烧后未冷却，导致接种环上的菌体受到灼伤，若划线未从第一区域末端开始，则第二划线区域所划的第一条线上也会无菌落。
14．答案：(1)碳源；自养；尿素；葡萄糖(位置可互换)
(2)溶化；倒平板；用于判断培养基是否被污染
(3)甘油管藏法；灭菌；对环境造成污染
解析：(1)培养基的营养成分一般含有碳源、氮源、水和无机盐,该培养基的成分缺少碳源,只能用来培养自养型微生物,而尿素分解菌是异养微生物,因此,若要分离土壤中的尿素分解菌,需要使用以尿素为唯一氮源的培养基,且需要加入碳源(如葡萄糖)和琼脂,同时去掉表中含氮物质KNO3。
(2)制备固体培养基的流程是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。培养基配制完成后需要先进行灭菌,然后检测是否灭菌合格,方法为取若干灭菌后的空白平板在适宜条件下培养一段时间,检测是否有菌落生成,若有则培养基制备不合格,需要重新制备。
(3)对于长时间不用的菌种可采用甘油管藏法进行保存。为避免对环境造成污染,使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃。