1.2微生物纯培养物的选择——高二生物学北师大版（2019）选择性必修三同步课时作业（含解析）

1.2微生物纯培养物的选择——高二生物学北师大版（2019）选择性必修三同步课时作业
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．涂布平板操作需要用到( )
A.接种环、滴管、酒精灯 B.接种环、移液管、酒精灯
C.涂布器、移液管、酒精灯 D.涂布器、接种环、酒精灯
2．某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌数量用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应( )大肠杆菌
A.大于 B.小于 C.等于 D.大小关系均可
3．下表表示某培养基的配方（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽），下列叙述不正确的是( )
成分 蛋白胨 葡萄糖 KH2PO4 伊红 亚甲基蓝 蒸馏水 琼脂
含量 10g 10g 2g 0.4g 0.065g 1000mL 15g
A.从用途分析该培养基属于选择培养基
B.培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，提供氮源的物质是蛋白胨
C.该培养基含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质
D.该培养基pH值应调节至中性或弱碱性
4．某同学用台盼蓝染色法对酵母菌进行血细胞计数板计数，相关叙述正确的是( )
A.血细胞计数板常用于细菌、酵母菌等微生物的计数
B.计数酵母菌时，需先盖上盖玻片再滴加样液
C.滴入样液后轻轻振荡计数板，使酵母菌均匀分布
D.对活酵母菌进行计数时，应统计被染色的酵母菌
5．不同的生物适应不同的环境，筛选它们需要配置特殊培养基，下列叙述正确的是( )
A.培养固氮菌的培养基不需要加入碳源
B.培养细菌的培养基需将pH调至中性或弱酸性
C.培养霉菌的培养基可以加入一定的抗生素
D.筛选所需菌种常用平板划线法纯化分离并计数
6．金黄色葡萄球菌是一种耐高盐的食源性致病微生物。哥伦比亚血平板是含无菌脱纤维羊血等成分的固体培养基，生长在该培养基上的金黄色葡萄球菌菌落能破坏其周围的红细胞,产生透明的溶血圈。如图为检测某种饮料是否被金黄色葡萄球菌污染的操作流程，据此分析不正确的是( )
A.7.5%的NaCl肉汤培养基从功能角度划分属于选择培养基
B.振荡培养后培养基变浑浊是耐高盐的微生物数量增多所致
C.若最终长出的菌落周围出现透明的溶血圈，则说明饮料被金黄色葡萄球菌污染
D.取菌种后的接种方法为稀释涂布平板法
7．植物细胞胞质溶胶中的Cl-、通过离子通道进入液泡，Na+、Ca2+逆浓度梯度转运到液泡，以调节细胞渗透压。白天光合作用合成的蔗糖可富集在液泡中，夜间这些蔗糖运到胞质溶胶。植物液泡中部分离子与蔗糖的转运机制如图所示。下列叙述错误的是( )
A.液泡通过主动运输方式维持膜内外的H+浓度梯度
B.Cl-、通过离子通道进入液泡不需要ATP直接供能
C.Na+、Ca2+进入液泡需要载体蛋白协助不需要消耗能量
D.白天液泡富集蔗糖有利于光合作用的持续进行
8．脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是( )
A.镍是组成脲酶的重要元素
B.镍能提高尿素水解反应的活化能
C.产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖
D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌
9．在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。下列相关叙述正确的是( )
A.只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌
B.筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源
C.图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数
D.经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落
10．聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述正确的是( )
A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B.步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐菌的生长越有利
C.扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株
D.挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定嗜盐菌的PHA含量
二、多选题
11．根据食品安全国家标准(G19645-2010)灭菌乳的微生物标准为每毫升合格牛奶中细菌总数不超过50000个。某生物兴趣小组成员利用恒温水浴锅对生牛奶进行消毒后,进行细菌总数测定,主要步骤如下图。相关叙述错误的是( )
A.步骤①中对生牛奶的消毒方法属巴氏消毒法,处理时间较短的目的是减少营养物质的损失
B.过程②中应选用无菌生理盐水进行稀释,使用移液管吸取溶液前要利用灼烧法进行灭菌
C.步骤③中牛肉膏蛋白胨培养基要在高压蒸汽灭菌后再调pH,以防止高温影响培养基pH稳定
D.实验结束时培养基上的菌落可能不止一种,若平均菌落总数少于50个则表明灭菌合格
12．苯酚(C6H5OH)是重要的化工原料，被广泛应用于工业生产中，易形成污染，具有致癌、致畸和致突变作用。苯酚降解菌能分解工业废水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有几百种，多为细菌、放线菌等。分离和纯化高效降解苯酚的微生物的实验流程下图所示：
下列说法中正确的是( )
A.在制作苯酚降解菌的富集培养基和平板分离培养基时，应该制备牛肉膏蛋白胨培养基
B.采用湿热灭菌法对培养基进行灭菌
C.用上图所示方法进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少
D.可通过观察菌落的特征初步对微生物的种类进行鉴定
三、读图填空题
13．已知金黄色葡萄球菌(Sau)的最适生长温度为37℃，并且具有高度的耐盐性，可以在10%-15%NaCl肉汤培养基中生长。A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。请回答下列问题：
(1)某同学欲培养金黄色葡萄球菌，应该如何操作______，该培养基属于______培养基(从功能上考虑)。
(2)实验中一般采用______方法对培养基进行灭菌。在接种前，随机选取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是______。图中微生物的接种方法最可能是______。
(3)据图分析，______治疗Sau感染引起的肺炎效果最好。判断依据是______。
14．塑料在自然界中很难降解，俗称“白色污染”。人们偶然发现装米的塑料袋上有许多孔洞，还有黄粉虫幼虫和成虫爬出。受此启示，研究者在黄粉虫幼虫肠道中成功分离出能够降解聚氯乙烯（PVC，化学式（C2H3Cl）n）的菌株。现欲对黄粉虫幼虫消化道中的微生物进行分离并比较各菌株的降解能力。请结合图示操作完善实验步骤。
（1）将黄粉虫放入饲养盒中，饥饿2天后，加入剪碎的聚氯乙烯膜片饲喂驯化12天。将饲喂驯化后的虫体进行表面消毒处理后，用解剖刀划破虫体，从中挑出肠道放入灭菌研钵中，加入1-3mL____充分研磨制备肠道液，再将肠道液加到定量的富集培养液中培养，富集培养的目的是____。
（2）将黄粉虫肠道菌富集培养液加入以聚氯乙烯粉末为唯一____的选择培养液中，适宜条件驯化培养12天。
（3）将一定量的黄粉虫的肠道菌驯化培养液分别接种到选择培养基上，每个样品做3个平板，同时为了检测培养基灭菌是否合格，还需增加一个____培养基作为对照，并在25℃的恒温培养箱中培养5-7天。根据菌落的特征挑取菌株，在培养基上反复多次划线分离、纯化，4℃保存备用，此步骤用到的接种方法是____。
（4）接种前将筛选出的聚氯乙烯降解菌在加入定量聚氯乙烯膜片的基础培养液中培养5天，测定聚氯乙烯膜片的失重率，初步比较各菌株的降解能力。
据此推测聚氯乙烯膜片的失重率与____呈正相关。
参考答案
1．答案：C
解析：涂布平板需要用到涂布器，而不是接种环，故A、B错误。要用移液管滴菌液，且涂布器要经过酒精灯的灼烧灭菌，整个操作要在酒精灯附近进行，故C正确，D错误。
2．答案：B
解析：根据分析，滤膜法将水样通过滤膜，然后将滤膜转移至伊红美蓝培养基上，大肠杆菌可以形成有金属光泽的黑色菌落，因此滤膜的孔径应小于大肠杆菌。
故选B。
3．答案：A
解析：
4．答案：B
解析：
5．答案：C
解析：固氮菌属于异养型生物，自身无法合成有机物，需要碳源，A错误；细菌的培养基需将pH调至中性或弱碱性，B错误；抗生素能杀死细菌，培养霉菌加入一定的抗生素可以防止细菌污染，C正确；平板划线法无法计数，D错误。
6．答案：A
解析：
7．答案：C
解析：A、由图可知，细胞液的pH3-6，胞质溶胶的pH7.5，说明细胞液的H+浓度高于细胞溶胶，若要长期维持膜内外的H+浓度梯度，需通过主动运输将细胞溶胶中的H+运输到细胞液中，A正确； B、通过离子通道运输为协助扩散，Cl-、，通过离子通道进入液泡属于协助扩散，不需要ATP直接供能，B正确；C、液泡膜上的载体蛋白能将H+转运出液泡的同时将细胞质基质中的Na+、Ca2+转运到液泡内，说明Na+、Ca2+进入液泡的直接驱动力是液泡膜两侧的H+电化学梯度，因此该过程Na+、Ca2+的进入液泡的方式为主动运输，需要消耗能量，能量由液泡膜两侧的H+电化学梯度提供，C错误；D、白天蔗糖进入液泡，使光合作用产物及时转移，减少光合作用产物蔗糖在细胞质基质中过度积累。有利于光合作用的持续讲行，D正确。
8．答案：B
解析：A、根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是组成脲酶的重要元素，A正确；B、脲酶催化尿素水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B错误； C、产脲酶细菌可利用NH4Cl里的氮源进行代谢活动，因此产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖，C正确;D、产脲酶细菌能利用脲酶催化尿素分解产生NH3， NH3可作为细菌生长的氮源，不能产脲酶的细菌则无法分解尿素获得氮源，因此以尿素为唯一氨源的培养基可用于筛选产脲酶细菌，D正确。
9．答案：B
解析：A、土壤中才含有能降解该除草剂的细菌，是基因突变的结果，不是长期使用除草剂的结果，A错误；B、筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源，B正确；C、平板划线法不能用于细菌计数，稀释涂布平板法可以，C错误；D、经过一段时间的培养，培养皿中也会存在无透明圈的菌落，D错误。故选B。
10．答案：D
解析：A、PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；B、步骤③培养基浓度过高，会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；C、扩大培养应选用液体培养基，液体培养基中无需加入琼脂，C错误；D、要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐菌，挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，进行比较，D正确。故选D。
11．答案：BC
解析： 80℃15min~30min的处理属于巴氏消毒法，采用短时高温处理的目的是尽量减少食物中营养物质的损失，A正确。为防止渗透压变化影响微生物代谢，实验中通常使用无菌生理盐水稀释，移液管不能进行灼烧灭菌，移液管的灭菌方法是实验前用纸单独包裹后利用高压蒸汽灭菌或干热灭菌，使用时打开，B错误。牛肉膏蛋白胨培养基配制时应先调pH再灭菌，C错误。由于生牛奶中的微生物可能不止一种，而牛肉膏蛋白胨培养基属于天然培养基，细菌、真菌等均可生长，因此，在实验中，培养基上可能不止出现一种菌落；依据样品液稀释1000倍，接种液体积为1mL，计算推测若平均菌落总数少于50个，则表明灭菌后牛奶中细菌总数不超过50000个，灭菌合格，D正确。
12．答案：BCD
解析：BCDA.在制作苯酚降解菌的富集培养基和平板分离培养基时,培养基应该以苯酚为唯一碳源,A错误;B.湿热灭菌法如高压蒸汽灭菌可以对培养基进行灭菌,B正确;C.上述方法为平板计数法，由于多个菌可能长在一起形成一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少,C正确;D.不同菌的菌落具有不同的特征，可通过观察菌落的特征初步对微生物的种类进行鉴定,D正确。故选BCD.
13．答案：(1)配制含15%NaCl的牛肉膏蛋白胨液体培养基，在无菌条件下接种金黄色葡萄球菌，在37℃恒温箱中培养1-2天；选择。
(2)高压蒸汽灭菌；检验培养基灭菌是否合格；稀释涂布平板法。
(3)抗生素A；抗生素A的抑菌圈最大。
解析：(1)已知金黄色葡萄球菌的最适生长温度为37℃,并且有高度的耐盐性,可以在10%~15%NaCl肉汤培养基中生长。为快速培养大量的金黄色葡萄球菌,需要配制含15%NaC1的牛肉膏蛋白胨液体培养基,在无菌条件下接种金黄色葡萄球菌,在37℃恒温箱中培养1-2天;从功能上将,在该培养基上不耐盐的微生物都不能生长,故培养基属于选择培养基。
(2)为保证无菌操作,需要对培养基进行灭菌,方法是高压蒸汽灭菌;接种前,随机选取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间,这样做的目的是检验培养基灭菌是否合格:若空白平板上有菌落长出,证明灭菌不合格;据图可知,图中菌落分布相对均匀,接种方法是稀释涂布平板法。
(3)根据抑菌圈的大小,含等剂量抗生素接种到培养基上,其中抗生素A的抑菌圈最大,治疗Sau感染引起的肺炎效果最好。
14．答案：（1）无菌水；增加功能菌株的浓度
（2）碳源
（3）未接种的选择；平板划线法
（4）菌株降解聚乙烯的能力或菌株使聚乙烯膜片减少的质量
解析：
（1）微生物培养过程中要防止其他杂菌的污染，故制备肠道液应加入无菌水。富集培养是将菌液放在液体培养基中培养，能使功能菌株与营养物质充分接触，菌体繁殖速度加快，以增加功能菌株的浓度。
（2）需要筛选出能对聚乙烯地膜具有较强降解能力的功能菌株，可以将昆虫肠道菌富集培养液加入以聚乙烯粉末为唯一碳源的选择培养液中，适宜条件驯化培养。
（3）为了检测培养基灭菌是否合格，还需增加一个未接种的选择培养基作为空白对照。根据菌落的特征挑取生长的菌株，在培养基上反复多次划线分离、纯化，接种方法为平板划线法。
（4）根据该公式可知，聚乙烯膜片的失重率越大，说明聚乙烯膜片减少的质量越多，菌株降解聚乙烯的能力越强，因此聚乙烯膜片的失重率与菌株降解聚乙烯的能力（或菌株使聚乙烯膜片减少的质量）呈正相关。