DNA的粗提取和鉴定—高考生物一轮实验专题复习
一、选择题
1．（2024高二下·北海期末）洋葱是理想的生物学实验材料，也常用于“DNA的粗提取与鉴定”实验中。下列关于该实验的叙述，正确的是（ ）
A．某些动物细胞也是提取DNA的理想材料，如猪的成熟红细胞
B．过滤后的洋葱研磨液放置在4℃冰箱中可以防止DNA 降解
C．为析出更多的DNA，可以用玻璃棒沿不同方向快速进行搅拌
D．鉴定DNA时，将二苯胺试剂加入含DNA的溶液中即出现蓝色
2．（2024高二下·曲靖月考）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ）
A．可选用菜花、香蕉、菠菜和猪血等DNA含量丰富的材料进行实验，但提取DNA的方法可能稍有不同
B．向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数70%的酒精溶液中，有利于获得较纯净的DNA
C．DNA析出过程中应用玻璃棒沿同一方向进行轻缓搅拌，以免DNA断裂
D．将提取的丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，将二苯胺试剂加入就能出现蓝色
3．（2024高二下·东城期末）“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解细胞→分离 DNA→沉淀 DNA→鉴定。下列叙述不正确的是（ ）
A．裂解：利用研磨等方法使细胞破裂释放出DNA 等物质
B．分离：离心后留取上清液可去除不溶于研磨液的物质
C．沉淀：加入95%冷的酒精溶液沉淀得到粗提 DNA
D．鉴定：加入二苯胺沸水浴后可见溶液由蓝变为砖红色
4．（2024高二下·龙马潭期末）下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A．实验用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制剂
B．洋葱研磨液需用滤纸过滤，以保证提取的DNA量
C．将二苯胺试剂加入溶有丝状物的NaCl溶液中，沸水浴呈蓝色
D．若提取的丝状物为黄色，说明其可能含有蛋白质等杂质成分
5．（2024高二下·绵阳期末）关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（ ）
A．DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精，利用这一原理初步分离DNA与蛋白质
B．将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，上清液中含DNA和蛋白质
C．将析出的丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂在沸水浴下鉴定DNA
D．实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放
6．（2024高二下·梅河口月考）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A．将预冷酒精加入上清液后，出现的白色丝状物为粗提取的DNA
B．鉴定DNA时应将丝状物直接加到二苯胺试剂中进行水浴加热
C．将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合，注入加样孔
D．在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小、构象等有关
7．（2024高二下·四川期末）“DNA的粗提取”实验流程如下图，a、b代表有关实验操作，下列叙述错误的是（ ）
A．本实验也可以采用鸡血细胞作为实验材料
B．图中a操作为研磨、过滤、离心
C．图中的A溶液为二苯胺溶液，使用时需要沸水浴加热
D．提取到的白色丝状物中仍含有杂质
8．（2024高二下·广丰月考）“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程如下图。下列选项是某同学的总结，其中叙述错误的是（ ）
A．①过程为裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质，其研磨液中的EDTA可抑制DNA酶降解DNA
B．②过程为分离：可完全去除混合物中的多糖、蛋白质等杂质
C．③过程为沉淀：反复多次可提高DNA的纯度
D．④过程为鉴定：在沸水条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
9．（2024高二下·韶关月考）DNA粗提取与鉴定实验的相关操作如图所示，将步骤①充分搅拌后获得的黏稠不溶物进行步骤②的操作。下列相关叙述错误的是（ ）
A．步骤①可去除混合物中不溶于酒精的蛋白质等物质
B．步骤②目的是使DNA溶解在溶液中
C．步骤①和步骤②所用的溶液浓度可能相同
D．步骤②黏稠物溶解后可用二苯胺试剂鉴定，但需要加热
10．（2024高二下·云南期中）研究人员通过实验探究不同储藏条件对棉花叶片DNA纯度及提取率（提取率越高，获得的DNA越多）的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．DNA能溶于酒精，故可用酒精处理棉花叶片提取DNA
B．通过粗提取获得的DNA中可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质
C．用二苯胺进行鉴定时，相同体积下可通过比较试管蓝色深浅判断DNA含量
D．进行DNA粗提取实验前最佳的处理方式为将棉花叶片冷冻处理3天
11．（2024高二下·武汉期末）“DNA粗提取与鉴定”的实验步骤是：研磨→去杂质→析出→鉴定。某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响，实验结果如下表所示。下列说法错误的是（ ）
去杂质方式 沉淀质量（g） DNA浓度（ng/μL） OD260/OD280 二苯胺鉴定
离心 0.168 81.5 1.53 蓝色
4℃冰箱静置 0.1028 336.4 1.41
（注：OD260/OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质等物质污染时，这一比值会明显降低）
A．相比于4℃冰箱静置，离心法能获得纯度更高的DNA
B．对研磨液进行离心可以加速DNA的沉淀提高纯度
C．可利用体积分数95%预冷的酒精析出DNA
D．二苯胺试剂鉴定粗提取DNA时需要加热
12．（2024高二下·河南期末）如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，相关叙述正确的是（ ）
A．图1中溶液a是NaCl溶液，玻璃棒应沿不同方向进行搅拌
B．图1中丝状物为粗提取的DNA，其与蛋白质均可溶于酒精
C．若图2试管中溶液的液面高于烧杯中的液面，可能导致加热不充分
D．图2试管2起对照作用，溶液b是溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液
13．（2024高二下·绵阳期末）下图是“DNA的粗提取和鉴定”实验中几个重要操作的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A．实验的操作顺序是③②①④
B．图①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白质可溶于酒精
C．图①需要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌，便于DNA的析出
D．图④操作后加入二苯胺试剂充分振荡，可观察到颜色变蓝
14．（2024高二下·双鸭山月考）乳酸菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，其拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间后，质粒将分布在上清液中，我们由此初步获得质粒DNA．下图为用限制酶处理所提取的产物并进行电泳分析的结果。有关DNA的粗提取与鉴定，下列分析正确的是（ ）
A．以洋葱为材料提取 DNA时可加入预冷的酒精溶液（体积分数为95%），以使蛋白质等物质析出
B．可将提取的DNA溶于2m ol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂并沸水浴5min进行鉴定
C．图中用限制酶Ⅰ和Ⅱ分别处理提取的产物所得到的电泳结果，说明未提取到质粒
D．溶菌酶能破坏乳酸菌的细胞壁，但不会破坏蓝细菌的细胞壁
15．（2024高三上·浙江月考）DNA在生活中有多方面的应用。下列关于DNA粗提取、扩增和电泳鉴定叙述正确的是（ ）
A．利用DNA在酒精中溶解度较大的原理来提取DNA
B．PCR体系中加入dNTP可为DNA扩增提供原料和能量
C．DNA电泳鉴定时，可加入二苯胺使DNA显色再观察条带
D．DNA的片段大小与在琼脂糖凝胶电泳中的迁移距离呈正相关
二、非选择题
16．（2023高二下·柳州月考）下图是 DNA 在不同 NaCl溶液中溶解度，有实验小组利用以下数据展开了 DNA 粗提取和鉴定的实验。
（1）【实验原理】：DNA 的溶解性：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同， 在 mol/L 下， DNA 的溶解度最小； 同时 DNA 不溶于 ， 但是细胞中的某些蛋白质可以溶解其中。
【实验材料】：新鲜洋葱。
（2）【实验步骤】： ①研磨： 称取30g洋葱， 放入研钵， 倒入10mL ， 充分研磨， 然后收集滤液。
②离心：将滤液放入离心机中离心，取 (填“上清液”或“沉淀”)置于烧杯中。
③DNA的析出：往烧杯中加入与滤液体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为 )，静置2~3min。
④DNA 的鉴定：用 mol/L 的NaCl溶解DNA；在 条件下， DNA 与 试剂反应呈现 。
17．（2024高二下·邢台月考）某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验，选择了不同温度（20℃、-20℃）条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，部分实验步骤如图1所示。回答下列问题：
（1）选择花菜等植物材料时，为了使研磨的效果更好，可以在处理材料的过程中加入适量的 （填酶的名称）。
（2）图1中，将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，然后进行离心处理，再取 （填“上清液”或“沉淀物”）放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA，这样做的原理是 。
（3）将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中，加入 试剂，在 条件下进行鉴定。
（4）DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析，相同温度条件下， 的DNA粗提取含量最高。同种实验材料在 ℃条件下DNA粗提取含量更高，其原因可能是 （从酶的角度作答）。
18．（DNA的粗提取和鉴定）下面是某位同学以洋葱为实验材料进行DNA提取与鉴定的实验步骤：
a．称取30克已切碎的洋葱，放入研钵中，加入少量石英砂，倒入10mL 0.14mol/L的氯化钠溶液，充分研磨．
b．研磨后，用漏斗和纱布过滤，得到滤液．
c．沿烧杯壁缓缓向滤液中加入95%的酒精溶液20mL，并用玻璃棒快速搅拌，待纤维状粘稠物析出，用玻璃棒可将其轻轻卷起．
d．取两支试管，编为1、2号，各加入2mol/L的氯化钠溶液2mL，向1号试管中加入一些纤维状粘稠物，振荡使其溶解，然后向两支试管中各加入2mL二苯胺试剂，观察颜色变化．
请分析回答：
（1）指出以上实验步骤中的三个错误： 、 ．
（2）在a步骤中，加入少量石英砂是为了 ，有时人们还在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂，原因是洗涤剂能 ，有利于DNA的释放．
（3）c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是 色的．
（4）在所有操作均正确的情况下，d步骤中1号、2号试管内溶液颜色变化分别为 ．
（5）DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料，原因是 ．
答案解析部分
1．【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
2．【答案】C
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
3．【答案】D
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
4．【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
5．【答案】A
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
6．【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
7．【答案】C
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
8．【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
9．【答案】A
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
10．【答案】A
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
11．【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
12．【答案】C
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
13．【答案】D
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
14．【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
15．【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
16．【答案】0.14；酒精；研磨液；上清液；95%；2；沸水浴；二苯胺；蓝色
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
17．【答案】（1）纤维素酶（和果胶酶）
（2）上清液；DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精
（3）二苯胺；沸水浴
（4）蒜黄；-20；与20℃相比，-20℃的低温抑制了酶的活性，DNA的降解速率更慢
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
18．【答案】（1）a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为0.14mol/L”（意思正确即可）；b步骤中“用玻璃棒快速搅拌、d步骤中没有沸水浴加热
（2）研磨充分；溶解细胞膜
（3）白
（4）变蓝、不变蓝
（5）猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
【解析】【解答】解：（1）以上实验步骤中的三个错误为：a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为 0.14mol/L”；b步骤中“用玻璃棒快速搅拌；d步骤中没有沸水浴加热．（2）洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放．（3）c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是白色的．（4）1号试管中含有DNA，加入二苯胺后沸水浴加热颜色变蓝；2号试管中不含DNA，加入二苯胺后沸水浴加热颜色不变蓝．（5）DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料，原因是猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）．
故答案为：（1）a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为 0.14mol/L b步骤中“用玻璃棒快速搅拌”d步骤中没有沸水浴加热（意思正确即可）（2）研磨充分 溶解细胞膜（3）白（4）变蓝、不变蓝（5）猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）
【分析】1、DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性．（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色.2、DNA粗提取和鉴定的过程：（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大．（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．（3）去除滤液中的杂质：方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同．方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离．（4）DNA的析出与鉴定①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分．
②取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂．混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝．
1 / 1DNA的粗提取和鉴定—高考生物一轮实验专题复习
一、选择题
1．（2024高二下·北海期末）洋葱是理想的生物学实验材料，也常用于“DNA的粗提取与鉴定”实验中。下列关于该实验的叙述，正确的是（ ）
A．某些动物细胞也是提取DNA的理想材料，如猪的成熟红细胞
B．过滤后的洋葱研磨液放置在4℃冰箱中可以防止DNA 降解
C．为析出更多的DNA，可以用玻璃棒沿不同方向快速进行搅拌
D．鉴定DNA时，将二苯胺试剂加入含DNA的溶液中即出现蓝色
【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
2．（2024高二下·曲靖月考）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ）
A．可选用菜花、香蕉、菠菜和猪血等DNA含量丰富的材料进行实验，但提取DNA的方法可能稍有不同
B．向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数70%的酒精溶液中，有利于获得较纯净的DNA
C．DNA析出过程中应用玻璃棒沿同一方向进行轻缓搅拌，以免DNA断裂
D．将提取的丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，将二苯胺试剂加入就能出现蓝色
【答案】C
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
3．（2024高二下·东城期末）“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解细胞→分离 DNA→沉淀 DNA→鉴定。下列叙述不正确的是（ ）
A．裂解：利用研磨等方法使细胞破裂释放出DNA 等物质
B．分离：离心后留取上清液可去除不溶于研磨液的物质
C．沉淀：加入95%冷的酒精溶液沉淀得到粗提 DNA
D．鉴定：加入二苯胺沸水浴后可见溶液由蓝变为砖红色
【答案】D
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
4．（2024高二下·龙马潭期末）下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A．实验用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制剂
B．洋葱研磨液需用滤纸过滤，以保证提取的DNA量
C．将二苯胺试剂加入溶有丝状物的NaCl溶液中，沸水浴呈蓝色
D．若提取的丝状物为黄色，说明其可能含有蛋白质等杂质成分
【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
5．（2024高二下·绵阳期末）关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（ ）
A．DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精，利用这一原理初步分离DNA与蛋白质
B．将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，上清液中含DNA和蛋白质
C．将析出的丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂在沸水浴下鉴定DNA
D．实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放
【答案】A
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
6．（2024高二下·梅河口月考）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A．将预冷酒精加入上清液后，出现的白色丝状物为粗提取的DNA
B．鉴定DNA时应将丝状物直接加到二苯胺试剂中进行水浴加热
C．将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合，注入加样孔
D．在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小、构象等有关
【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
7．（2024高二下·四川期末）“DNA的粗提取”实验流程如下图，a、b代表有关实验操作，下列叙述错误的是（ ）
A．本实验也可以采用鸡血细胞作为实验材料
B．图中a操作为研磨、过滤、离心
C．图中的A溶液为二苯胺溶液，使用时需要沸水浴加热
D．提取到的白色丝状物中仍含有杂质
【答案】C
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
8．（2024高二下·广丰月考）“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程如下图。下列选项是某同学的总结，其中叙述错误的是（ ）
A．①过程为裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质，其研磨液中的EDTA可抑制DNA酶降解DNA
B．②过程为分离：可完全去除混合物中的多糖、蛋白质等杂质
C．③过程为沉淀：反复多次可提高DNA的纯度
D．④过程为鉴定：在沸水条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
9．（2024高二下·韶关月考）DNA粗提取与鉴定实验的相关操作如图所示，将步骤①充分搅拌后获得的黏稠不溶物进行步骤②的操作。下列相关叙述错误的是（ ）
A．步骤①可去除混合物中不溶于酒精的蛋白质等物质
B．步骤②目的是使DNA溶解在溶液中
C．步骤①和步骤②所用的溶液浓度可能相同
D．步骤②黏稠物溶解后可用二苯胺试剂鉴定，但需要加热
【答案】A
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
10．（2024高二下·云南期中）研究人员通过实验探究不同储藏条件对棉花叶片DNA纯度及提取率（提取率越高，获得的DNA越多）的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．DNA能溶于酒精，故可用酒精处理棉花叶片提取DNA
B．通过粗提取获得的DNA中可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质
C．用二苯胺进行鉴定时，相同体积下可通过比较试管蓝色深浅判断DNA含量
D．进行DNA粗提取实验前最佳的处理方式为将棉花叶片冷冻处理3天
【答案】A
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
11．（2024高二下·武汉期末）“DNA粗提取与鉴定”的实验步骤是：研磨→去杂质→析出→鉴定。某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响，实验结果如下表所示。下列说法错误的是（ ）
去杂质方式 沉淀质量（g） DNA浓度（ng/μL） OD260/OD280 二苯胺鉴定
离心 0.168 81.5 1.53 蓝色
4℃冰箱静置 0.1028 336.4 1.41
（注：OD260/OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质等物质污染时，这一比值会明显降低）
A．相比于4℃冰箱静置，离心法能获得纯度更高的DNA
B．对研磨液进行离心可以加速DNA的沉淀提高纯度
C．可利用体积分数95%预冷的酒精析出DNA
D．二苯胺试剂鉴定粗提取DNA时需要加热
【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
12．（2024高二下·河南期末）如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，相关叙述正确的是（ ）
A．图1中溶液a是NaCl溶液，玻璃棒应沿不同方向进行搅拌
B．图1中丝状物为粗提取的DNA，其与蛋白质均可溶于酒精
C．若图2试管中溶液的液面高于烧杯中的液面，可能导致加热不充分
D．图2试管2起对照作用，溶液b是溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液
【答案】C
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
13．（2024高二下·绵阳期末）下图是“DNA的粗提取和鉴定”实验中几个重要操作的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A．实验的操作顺序是③②①④
B．图①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白质可溶于酒精
C．图①需要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌，便于DNA的析出
D．图④操作后加入二苯胺试剂充分振荡，可观察到颜色变蓝
【答案】D
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
14．（2024高二下·双鸭山月考）乳酸菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，其拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间后，质粒将分布在上清液中，我们由此初步获得质粒DNA．下图为用限制酶处理所提取的产物并进行电泳分析的结果。有关DNA的粗提取与鉴定，下列分析正确的是（ ）
A．以洋葱为材料提取 DNA时可加入预冷的酒精溶液（体积分数为95%），以使蛋白质等物质析出
B．可将提取的DNA溶于2m ol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂并沸水浴5min进行鉴定
C．图中用限制酶Ⅰ和Ⅱ分别处理提取的产物所得到的电泳结果，说明未提取到质粒
D．溶菌酶能破坏乳酸菌的细胞壁，但不会破坏蓝细菌的细胞壁
【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
15．（2024高三上·浙江月考）DNA在生活中有多方面的应用。下列关于DNA粗提取、扩增和电泳鉴定叙述正确的是（ ）
A．利用DNA在酒精中溶解度较大的原理来提取DNA
B．PCR体系中加入dNTP可为DNA扩增提供原料和能量
C．DNA电泳鉴定时，可加入二苯胺使DNA显色再观察条带
D．DNA的片段大小与在琼脂糖凝胶电泳中的迁移距离呈正相关
【答案】B
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
二、非选择题
16．（2023高二下·柳州月考）下图是 DNA 在不同 NaCl溶液中溶解度，有实验小组利用以下数据展开了 DNA 粗提取和鉴定的实验。
（1）【实验原理】：DNA 的溶解性：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同， 在 mol/L 下， DNA 的溶解度最小； 同时 DNA 不溶于 ， 但是细胞中的某些蛋白质可以溶解其中。
【实验材料】：新鲜洋葱。
（2）【实验步骤】： ①研磨： 称取30g洋葱， 放入研钵， 倒入10mL ， 充分研磨， 然后收集滤液。
②离心：将滤液放入离心机中离心，取 (填“上清液”或“沉淀”)置于烧杯中。
③DNA的析出：往烧杯中加入与滤液体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为 )，静置2~3min。
④DNA 的鉴定：用 mol/L 的NaCl溶解DNA；在 条件下， DNA 与 试剂反应呈现 。
【答案】0.14；酒精；研磨液；上清液；95%；2；沸水浴；二苯胺；蓝色
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
17．（2024高二下·邢台月考）某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验，选择了不同温度（20℃、-20℃）条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，部分实验步骤如图1所示。回答下列问题：
（1）选择花菜等植物材料时，为了使研磨的效果更好，可以在处理材料的过程中加入适量的 （填酶的名称）。
（2）图1中，将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，然后进行离心处理，再取 （填“上清液”或“沉淀物”）放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA，这样做的原理是 。
（3）将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中，加入 试剂，在 条件下进行鉴定。
（4）DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析，相同温度条件下， 的DNA粗提取含量最高。同种实验材料在 ℃条件下DNA粗提取含量更高，其原因可能是 （从酶的角度作答）。
【答案】（1）纤维素酶（和果胶酶）
（2）上清液；DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精
（3）二苯胺；沸水浴
（4）蒜黄；-20；与20℃相比，-20℃的低温抑制了酶的活性，DNA的降解速率更慢
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
18．（DNA的粗提取和鉴定）下面是某位同学以洋葱为实验材料进行DNA提取与鉴定的实验步骤：
a．称取30克已切碎的洋葱，放入研钵中，加入少量石英砂，倒入10mL 0.14mol/L的氯化钠溶液，充分研磨．
b．研磨后，用漏斗和纱布过滤，得到滤液．
c．沿烧杯壁缓缓向滤液中加入95%的酒精溶液20mL，并用玻璃棒快速搅拌，待纤维状粘稠物析出，用玻璃棒可将其轻轻卷起．
d．取两支试管，编为1、2号，各加入2mol/L的氯化钠溶液2mL，向1号试管中加入一些纤维状粘稠物，振荡使其溶解，然后向两支试管中各加入2mL二苯胺试剂，观察颜色变化．
请分析回答：
（1）指出以上实验步骤中的三个错误： 、 ．
（2）在a步骤中，加入少量石英砂是为了 ，有时人们还在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂，原因是洗涤剂能 ，有利于DNA的释放．
（3）c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是 色的．
（4）在所有操作均正确的情况下，d步骤中1号、2号试管内溶液颜色变化分别为 ．
（5）DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料，原因是 ．
【答案】（1）a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为0.14mol/L”（意思正确即可）；b步骤中“用玻璃棒快速搅拌、d步骤中没有沸水浴加热
（2）研磨充分；溶解细胞膜
（3）白
（4）变蓝、不变蓝
（5）猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）
【知识点】DNA的粗提取和鉴定
【解析】【解答】解：（1）以上实验步骤中的三个错误为：a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为 0.14mol/L”；b步骤中“用玻璃棒快速搅拌；d步骤中没有沸水浴加热．（2）洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放．（3）c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是白色的．（4）1号试管中含有DNA，加入二苯胺后沸水浴加热颜色变蓝；2号试管中不含DNA，加入二苯胺后沸水浴加热颜色不变蓝．（5）DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料，原因是猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）．
故答案为：（1）a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为 0.14mol/L b步骤中“用玻璃棒快速搅拌”d步骤中没有沸水浴加热（意思正确即可）（2）研磨充分 溶解细胞膜（3）白（4）变蓝、不变蓝（5）猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）
【分析】1、DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性．（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色.2、DNA粗提取和鉴定的过程：（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大．（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．（3）去除滤液中的杂质：方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同．方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离．（4）DNA的析出与鉴定①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分．
②取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂．混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝．
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