人教课标版高中生物选修1教学课件：2.1《微生物的实验室培养》（共38张PPT）

课件38张PPT。课题1：微生物的实验室培养霉 菌细 菌酵母菌放线菌 上图都是一些常见的微生物，微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，与人类关系密切。人工的培养和分离，使得我们更进一步认识微生物。
今天我们就来学习如何培养和分离大肠杆菌！1.特点：结构都相当简单,个体多数十分微小，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构，且体内一般不含有叶绿素，不能进行光合作用。2.微生物包括五类病 毒
细 菌
放线菌
真 菌
原生动物 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
固体培养基 液体培养基 半固体培养基1.培养基的类型成分区别：琼脂2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方细菌喜荤，霉菌喜素大肠杆菌配方
酵母提取物：0.25g 蛋白胨：0.5g
Nacl：0.5g 琼脂：1g 水：50ml3.培养基内所含的基本物质①一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐
②其他物质pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 4.培养基的用途液体培养基：增菌、工业生产
固体培养基：纯化（分离），　　　　　　鉴定、活菌计数、　　　　　　保藏菌种
半固体培养基：动力检测1.无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
无菌操作是培养微生物成功的关键！（1）消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义：是指杀灭病原微生物的方法。 是指杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽胞、孢子）的方法a.灼烧灭菌3.常用灭菌的方法b.干热灭菌：
160-170℃ 下加热1-2h。
c.高压蒸气灭菌：
100kPa、121℃ 下维持15-30min.取2个250ml的三角瓶中分别装入50mlLB液体培养基和50mlLB固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜，牛皮纸包装后高压锅灭菌15min。LB液体培养基——细菌的扩大培养
LB固体培养基——细菌的划线分离灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中，倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到灭菌后的液体培养基中，使其在37℃摇床培养12小时。 注意事项:
1.火焰旁从斜面上用接种环取菌；
2.取菌前接种环要用酒精灯灼烧灭菌，冷却后方能取菌；
3.取菌后封口膜和棉塞复原。1.平板划线法：
1）灼烧接种环；
2）接种环冷却后，蘸取带菌培养物；
3）在近火焰处，让带菌接种环在固体培养基上划线。
注意事项:
1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次。
2.划线首尾不能相接。
3.划线后，培养皿倒置培养12~24h。2-3.从上次的末端开始，交叉2~3条线4.最后的划线不能与第一区相连。分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选菌株的最简便方法之一。2.稀释涂布平板法稀释操作 注意：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处.1.临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。
2.长期保存：甘油冷冻管藏法（一）培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。实验操作成果评价3（二）接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。（三）是否进行了及时细致的观察与记录
培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。1．关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ）
A.是碳源的物质不可能同时是氮源
B.凡碳源都提供能量
C.除水以外的无机物只提供无机盐
D.无机氮源也能提供能量D解析：A、B选项的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源；有的碳源可同时是氮源；有的碳源同时是能源；有的碳源同时是氮源，也是能源。对于C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。对于D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。2．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是（ ）
A.防止杂菌污染
B.接种前菌种要进行灭菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌
D.灭菌必须在接种前B退出解析：发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），A正确；B错误，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。C正确，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。