2010-2015年普通高等学校招生全国统一考试 高中生物选修一汇总
文档属性
| 名称 | 2010-2015年普通高等学校招生全国统一考试 高中生物选修一汇总 |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 871.0KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（新课程标准） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2016-04-24 11:10:29 | ||
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文档简介
2010年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
（10江苏卷）25．右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图．下列叙述正确的是
A．剐溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液
B．图1中X溶液为cacl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠
C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触
D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
【答案】BCD
【解析】本题考查了固定化细胞技术的操作过 ( http: / / www.21cnjy.com )程。熔化的海藻酸钠应冷却后与活化的酵母细胞混合，A项错误；图1中氯化钙溶液可使海藻酸钠形成凝胶珠，B项正确；图2中要进行搅拌以使培养液与细胞充分接触，C项正确；图1中制备的凝胶珠要以过洗涤再移到图2装置中，D项正确。
（10新课标）37．【生物——选修模块1：生物技术实践】(15分)
下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理 ( http: / / www.21cnjy.com )由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液 (是、不是)纯的玫瑰精油，原因是 。
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过 ( http: / / www.21cnjy.com )程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 。
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 ，原因是 。
（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度 的地方，目的是 。
（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为 天左右。
(6)从薄荷叶中提取薄荷油时 (能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是 。
【答案】⑴易挥发、难溶于水 ( http: / / www.21cnjy.com )、化学性质稳定 ；不是；玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物；（2）蒸馏温度 在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加；（3）下降 部分精油会随水蒸气挥发而流失；（4）较低 减少挥发；（5）a；（6）能 薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似
【解析】植物芳香油的提取方法有蒸馏、压 ( http: / / www.21cnjy.com )榨和萃取等，具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。而水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，所以次用水蒸气蒸馏法提取。
（10北京卷）1.在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是
Ａ．让发酵装置接受光照 Ｂ．给发酵装置适时排气
Ｃ．向发酵装置通入空气 Ｄ．酵母菌装置放在45℃处
答案B
【考点直击】本题考查果酒制作的知识。此考点在高考中出现的次数较少。
【要点透析】在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装置不需要接受光照，发酵时也不能通入空气，一般将发酵温度控制在18～25℃。
（2010山东高考理综）34. 【生物—生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
( http: / / www.21cnjy.com )
(1)用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选 ( http: / / www.21cnjy.com )用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
【答案】（1） 压榨；萃取（注：两空顺序无先后）
（2）碳源 高压蒸汽灭菌
（3）显微镜直接计数 酶活性（或：酶活力） 固定化酶（或：固定化细胞）
（4）PCR（或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）
【命题立意】本题综合考查多种生物技术
【解题思路】（1）因为植物油不挥发 ( http: / / www.21cnjy.com )，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌发进行灭菌。（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶。（4）利用PCR技术可以扩增基因。
（10广东卷）25．小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是
A．加入适量的酵母菌 B．一直打开阀b通气
C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟
D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验
【答案】AC
【解析】本题主要考查学生的理解能力。果酒的制备过程中先让酵母菌在有氧条件下迅速扩增，再让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精。
（10江苏卷）7.右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是
A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下
B.过程①和都③只发生在酵母细胞的线粒体中
C.过程③和④都需要氧气的参与
D.过程①~④所需的最适温度基本相同
【答案】C
【解析】本题考查果酒果醋制作过程的反应条件等 ( http: / / www.21cnjy.com )的区别。①过程有氧无氧条件均可以发生，②过程只能发生在无氧条件下，A项错误。①在酵母菌细胞质基质中进行，③在酵母菌线粒体内进行，B项错误。③为有氧呼吸第二、三阶段，需要氧气参与，④需要氧气参与，C项错误。过程①、②、③为酵母菌的呼吸作用，最适宜温度约为20°C左右；④的最适宜温度为30—35°C，D项错误。
（10浙江自选模块）“生物技术实践”模块（10分）
请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上，每空1分，共10分。某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。 ( http: / / www.21cnjy.com )
图中用KMnO4的溶液浸泡 ( http: / / www.21cnjy.com )苹果的目的是______①___________。黑曲霉提取液中含有的_____②____可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过____③______方式将酶固定化，酶被固定在用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________④_________。
实验中，操作流程A和B的 ( http: / / www.21cnjy.com )先后顺序为_________⑤________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_______⑥__________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的_______⑦________混合，如果出现_______⑧________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调____⑨______。试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被__⑩_____使用。
【答案】（1）①消毒 ②果胶酶 ③吸附 ④未被固定的酶等
（2）⑤AB ⑥阀1 ⑦乙醇 ⑧浑浊（沉淀） ⑨ 慢
（3）⑩重复
【解析】本题考查苹果汁制作过程的反应条件注意事项，操作过程中需注意的细节。
需要学生对课本知识熟悉，培养学生学以致 ( http: / / www.21cnjy.com )用的学习态度，从现在生物学在生活中的应用区激发学生的学习兴趣。在制作工艺中必须对原材料消毒，这样才能保证后续试验的成功。KMnO4是强氧化剂，可以起到对苹果的消毒作用。
（10海南卷）25．（18分）［选修模块1：生物技术实践］
葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：
（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）该微生物通过无氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，产生的终产物是＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。
（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后 ( http: / / www.21cnjy.com )分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同学的错误是＿＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。
（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
25．答案
（1）酵母菌（2分）
（2）葡萄糖 乙醇 CO2（每空1分，共3分）
（3）未夹住发酵瓶的充气管（2分） 发酵液从充气管流出，发酵液变酸（1分）
瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口（2分）
葡萄醋（或果醋）（2分） 葡萄酒（或果酒）（1分） 葡萄酒（或果酒）（1分）
（4）未及时排气（2分）
2010年普通高等学校招生全国统一考试（全国Ⅰ卷）理科综合能力测试
34.（12分）（注意：在试题卷上作答无效）
下列是与微生物培养有关的问题，请回答：
⑴某细菌固体培养基的组成成分是KH ( http: / / www.21cnjy.com )2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是 ，碳源是 ，氮源是 。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，帮该培养基属于 培养基。按照化学成分分类，该培养基属于 培养基。从同化作用类型看，用该培养的细菌属于 。
⑵将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中 ( http: / / www.21cnjy.com )，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的 曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是
。实验室中，为了获得形态和生理特证一致的菌体，一般应在 期取体；在生产中，常收集培养至 期的细菌用于次生代谢产物的提取。
答案34.（12分）（1）琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型
（2）群体生长 菌体数目往往非常大，且变化率也很高，以菌体数目的对数为纵坐标有利于作图 对数 稳定
2011年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
2011年普通高等学校招生全国统一考试 理科综合能力测试
39．【生物——选修1：生物技术实践】（15分）
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样 ( http: / / www.21cnjy.com )品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和
。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
答案39．（1）原油 选择
（2）平板划线法 稀释涂布平板法
（3）强
（4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
(2011年江苏卷）3．下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是 D
A．腐乳制作所需要的适宜温度最高
B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
（2011年江苏卷）15．下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是 A
A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶
B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化
C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤
D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层
（2011上海生命科学卷）（五）回答下 ( http: / / www.21cnjy.com )列关于微生物和酶的问题。（10分） 环境污染物多聚苯难以降解，研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。
36．下列培养基中能有效分离联苯降解菌的是＿＿＿＿＿＿＿，原因是＿＿＿＿＿＿＿。
A培养基（g/L）：某生长因子2.0，（NH4）2SO42.0，K2HPO43.0，MgSO41.0，pH7.4，多聚联苯50mL
B培养基（g/L）：牛肉膏10.0，蛋白胨20.0，葡萄糖20.0，NaCl5.0，pH7.4
C培养基（g/L）：某生长因子2.0，淀粉 ( http: / / www.21cnjy.com )20.0，NH4NO32.5，MgCl20.5，K2HPO43.0，多聚联苯50mL，pH7.4，
进一步研究发现，不同的金属离子对联苯水解酶的活性有一定影响，结果见下表：
( http: / / www.21cnjy.com )
答案：2分 A 该培养基中有多聚联苯为唯一碳源
37．依据表中结果，金属离子 ( http: / / www.21cnjy.com )＿＿＿＿＿＿对该酶的活性有一定的促进作用。金属离子对酶的活性有促进或抑制作用，可能的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
答案：3分 Mn2+ 金属离子与酶结合可以改变酶的空间结构
38．通过酶工程可将联苯水解酶用于生产 ( http: / / www.21cnjy.com )实践。酶工程通常包括酶的生产、＿＿＿＿＿＿＿、酶的固定化和酶的应用等方面。酶固定化的好处是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 答案：2分 酶的分离纯化 便于重复利用，能连续进行反应
39．下图实线表示联苯水解酶催化的反应 ( http: / / www.21cnjy.com )速率与酶浓度的关系，虚线表示在其他条件不变的情况下，底物浓度增加一倍，反应速度与酶浓度的关系，能正确表示两者关系的是＿＿＿。
( http: / / www.21cnjy.com )
答案：1分 B
40．红球菌和假单孢菌都能降解多聚联苯， ( http: / / www.21cnjy.com )便研究发现以每克菌体计算，两种菌降解多聚联苯的能力有所不同，对此现象合理的假设是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿或＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
答案：2分 两种菌内酶量为同 两种菌内酶基因的结构（酶结构）不同
（11年广东卷）5、以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是
A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂
B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少
C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测
D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢
答案：D
【解析】D项考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理， ( http: / / www.21cnjy.com )相对分子质量越大的通过凝胶色谱柱的速度越快，故D错误。A正确，洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化，加入的是生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，重复洗涤三次，直至上清液不再呈现黄色，表明红细胞已洗涤干净。B正确，哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器，提纯时杂蛋白较少。C正确，血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液（如果操作都正确，能清楚的看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随着洗脱液缓慢流出）。这使得血红蛋白的分离过程非常直观，简化了操作。
（11年山东卷）34.（8分）（生物—生物技术实验）
研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示
( http: / / www.21cnjy.com )
（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过
___________除去其中的固体杂质。
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时
所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。 （3）培养基镇南关的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素
时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子 ( http: / / www.21cnjy.com )量越大，电泳速度___________。 （4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过
测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
答案：（1）压榨 过滤
（2）稀释涂布平板法（或稀释混合平板法） 高压蒸汽灭菌锅 消毒 （3）氮源 越慢 （4）直径（或大小）
（2011海南生物卷）30.[生物——选修1：生物技术实践]（15分）
许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。 回答问题：
（1） 薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用_____(鲜、干)薄荷叶作原料，其原因是
薄荷油是挥发性物质，鲜薄荷叶才含薄荷油。
（2） 用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是 酒精 _，原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中。
（3） 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是使溶液分层。
常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是除水_，除去固体硫酸钠的常用方法是_过滤_ _。
2012年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
（2012全国卷新课标版）39．（15分 ( http: / / www.21cnjy.com )）为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在ＭＳ培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。
回答下列问题： ( http: / / www.21cnjy.com )
（１）按照植物的需求量，培养基中无 ( http: / / www.21cnjy.com )机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中，6-BA属于 类生长调节剂。
（２）在该实验中，自变量是 ，因变量是 ，自变量的取值范围是 。
（３）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。
（４）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 （填“6-BA”或“IAA”）。
【答案】（１）大量元素 微量元素 细 ( http: / / www.21cnjy.com )胞分裂素 （２）IAA浓度 丛芽外植体的比率及丛芽平均数 ０～０.５mg/L （３）１ （４）6-BA
【解析】本题主要是对植物组培 ( http: / / www.21cnjy.com )知识的考察，提问涉及必修一和必修三的一些知识，再加上以实验分析的形式考察中学生物实验的基础知识，综合性强，并不局限于选修一，是为“选修可以考察必修”一说的集中体现。 第（１）问第一空考察必需元素的分类（可分为大量元素 微量元素），必修一的基础知识，选修一教材上亦有原句。
第（１）问第二空考察植物生 ( http: / / www.21cnjy.com )长调节剂的知识。中学生物必修一提及植物体内5大植物激素，分别为生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、乙烯类、脱落酸类，要求掌握植物生长调节剂的名称；常见选修一的植物组织培养实验中又重点分析了生长素类、细胞分裂素类，要求识记二者比例对植物脱分化的影响（生长素多有利于生根，细胞分裂素多有利于长芽）；由表格易知IAA比例上升抑制长芽，为生长素（吲哚乙酸），故6-BA为细胞分裂素。 第（2）问考察中学生物实验的基础知识，自变量是IAA（6-BA浓度不变），取值范围是０到０.５；因变量是丛芽数 （即再生丛芽外植体的比率和再生丛芽外植体上的丛芽平均数） 第（3）问直接从表格中可读出。 第（4）问参阅第（１）问第二空解析
（2012山东卷）34．（8分）【生物—生物技术实践】
辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。
( http: / / www.21cnjy.com )
（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_________和_________过程。
（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂 ( http: / / www.21cnjy.com )是________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是__________。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_______。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。
（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝 ( http: / / www.21cnjy.com )回流装置，其目的是_________。 答案：答案：（1）脱分化（或去分化） 再分化 （2）琼脂 低 高压蒸汽灭菌 （3）70% 果胶酶 （4）防止有机溶剂挥发
解析：本题考查植物组织培养的过程、条件 ( http: / / www.21cnjy.com )，灭菌与消毒，物质的提取等基础知识。 植物组织培养的关键过程包括脱分化和再分化，由形成的愈伤组织再分化成具根和芽的试管苗。在组织培养过程中，需要无菌无毒条件、一定的营养条件、激素条件和适宜的环境条件等。生长素含量高于细胞分裂素时，愈伤组织先分化出芽，反之，则先分化出根。将愈伤组织分离成单个细胞时需要酶解植物细胞壁，植物细胞壁的成分为纤维素和果胶，故需用纤维素酶和果胶酶。 制作植物组织培养等培养基时，需向培养基中加入琼脂进行凝固，并采用高压蒸汽法进行灭菌；对植物外植体进行消毒，消毒所用的酒精体积分数为70%。
（2012江苏卷）17．下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是
A．从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小
B．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药
C．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用
D．将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌
答案：C
【解析】化学结合法可能影响酶 ( http: / / www.21cnjy.com )的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A正确；消化酶在消化道内起作用，B正确；尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开，而不能再次使用，C错；固定化酵母细胞在凝胶珠中，用无菌水冲洗可洗去CaCl2和表面的杂菌，D正确
（2012江苏卷）18．下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是
A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝
C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取
D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少
答案：C
解析：洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜 ( http: / / www.21cnjy.com )，去除脂质和蛋白质,但不能DNA在NaCl溶液中的溶解度，A错；DNA丝状物在二苯胺试剂中沸水浴加热过程中变蓝，不需要冷却，B错；匀浆中含有多种酶，常温下有些酶类可破坏DNA而影响DNA的提取，C正确；用玻璃棒缓慢搅拌滤液，有利于提取并防止搅拌时DNA断裂，并不影响DNA的含量，D错。
（2012江苏卷）21．下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是
A．在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长
B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸
C．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小
D．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量
答案： ABC
【解析】在果酒发酵后期，由于瓶中的营养物质 ( http: / / www.21cnjy.com )减少，单位时间内产生的CO2的量减少，所以拧开瓶盖的间隔时间可以延长，A正确；在糖源、氧气充足的条件下，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸，B正确；果酒发酵过程中，营养物质消耗，并且有水的生成，密度会逐渐减小，C正确；将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，要分层加盐，加盐量要随着层数的加高而增加 ，近瓶口表面的盐要铺厚一些，但底层不需要大量用盐，D错误。
（2012全国理综大纲）5.关于细菌的叙述中，正确的是
A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源
B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落
C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期
D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选
( http: / / www.21cnjy.com )
（2012海南卷）30.【生物——选修I：生物技术实践】（15分）
回答下列关于腐乳制作的问题：
（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食 ( http: / / www.21cnjy.com )品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为
和 ；其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 。
（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 生长。
（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的 。
【答案】 (15分)
（1）毛霉 肽 氨基酸 脂肪酶 ( http: / / www.21cnjy.com ) 甘油 脂肪酸（每空2分，共12分） （2）微生物 （2分） （3）风味 （1分，其他合理答案也给分）
【解析】
（1）酵过程中起作用的微生物有多 ( http: / / www.21cnjy.com )种，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸。
（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物
（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）。
【试题点评】本题考查腐乳制作的原理和流程，设计到具体操作过程的作用和意义，均为课本上理解识记内容，难度不大。
（2012上海卷）9．酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有
A．热稳定性 B．催化高效性 C．催化特异性 D．可反复使用性
【答案】D
【解析】固定化酶指通过物理或化学的方法 ( http: / / www.21cnjy.com )，将水溶性酶与非水溶性载体结合，既能与反应物接触又能与产物分离，与直接使用酶相比，除催化效率高、特异性强外，还可反复使用酶；酶的热稳定性一般都不强。故D正确。
【试题点评】本题考查了固定化酶与直接使用酶的区别及酶的特性，重点在于理解两者的区别，找出固定化酶依据的基本原理，难度中等。
（2012上海卷）(四)回答下列关于微生物和酶的问题。(10分)
高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高 温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。
( http: / / www.21cnjy.com )
44．①过程称为_______，②过程是为了__________。
45．Ⅰ号培养基称为____ ( http: / / www.21cnjy.com )_________(按功能分)；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分_____。
A．琼脂 B．葡萄糖 C．硝酸铵 D．碳酸氢钠
46．一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了__________________。
在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该 ( http: / / www.21cnjy.com )酶的最佳温度范围进行测定。图16中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图16中的曲线②。
47．根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是______。
A．40℃一50℃ B．50℃一60℃ C．60℃一70℃ D．70℃-80℃
1.据图判断下列叙述错误的是______。 A．该酶只能在最佳温度范围内测出活性 B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的 C．曲线①表明80℃是该酶活性最高的温度
D．曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降。
【答案】 44.稀释 单个菌落的筛选（或筛选） 45.选择培养基 C 46.杀死培养基中的细菌芽孢 47.C 48.A
【解析】 44.由图中显 ( http: / / www.21cnjy.com )示，在①前后试管中细菌数目减少，可推知此过程为稀释，②过程后使用划线法对细菌进行固体培养基培养，可推知此过程为分离纯化嗜热菌。
45.由图示可知表示过程是嗜热菌分 ( http: / / www.21cnjy.com )离纯化的过程，Ⅰ号培养基为选择培养基。在培养微生物的培养基中，碳源和氮源必不可少，所以除淀粉外还应加入硝酸铵。
46.细菌芽孢是在极端环境中产生的，具有耐高温等特点，只有用高温高压，才能杀死细菌芽孢，防止培养基污染。
47.在使用该酶时，应保 ( http: / / www.21cnjy.com )证活性较高、酶的热稳定性较好的温度范围。由图中数据可知，60℃~70℃符合要求。 48.酶活性受温度影响，在不同的温度下，都可以测定酶的活性，A错误；由曲线①可知，该酶的最适温度是80℃，曲线②中的数据是将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，对于B选项而言是将该酶在35℃下上时间保存，然后在80℃下测定该酶活性，B、C正确。曲线②显示，酶的热稳定性从30℃开始不断下降，在70℃后，急剧下降，D正确。
【试题点评】本题综合考查了微生物的 ( http: / / www.21cnjy.com )培养、分离、纯化的方法步骤，培养基的成分，常用的灭菌方法及其适用情况，酶发挥作用的适宜温度及温度与酶活性的关系等嫩荣，同时考查了学生的识图能力和分析问题的能力，难度不大。
2013年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
2013年普通高等学校招生全国统一考试(海南)
30. 【生物——选修1：生物技术实践】（15分）根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：
(l)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和__ __，以提高
萃取效率：水蒸气蒸馏法__ __（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是____；
鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用____法，并以____样品作为对照。
(2)若要提高衣物上血渍的去除 ( http: / / www.21cnjy.com )效果，可在洗衣粉中加入____酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的____或____；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加____酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是____。
30.【答案】 (1)干燥（1分） ( http: / / www.21cnjy.com ) 不适合（1分） 水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出（3分）纸层析（2分） 标准的胡萝卜素（2分）
(2)碱性蛋白（或蛋白）（1分）氨基酸（1分）小分子肽（1分）脂肪（1分）水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活（2分）
【解析】胡萝卜提取的流程和 ( http: / / www.21cnjy.com )评价及酶的应用。考查识记能力、分析和判断等能力。（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和干燥，粉碎是为了提高胡萝卜与萃取剂的接触面积，干燥是为了祛水，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏未能适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物持，不能随水蒸气蒸馏出，因此不胡萝卜素的提取不适用用水蒸气蒸馏法提取。胡萝卜素的鉴定，通常采用纸层析未能，可以用标准的胡萝卜素样品做对照，分析萃取样品是否含胡萝卜素和杂质。（2）加酶洗衣粉中添加了多种酶制剂，如碱性蛋白酶制剂和碱性脂肪酶制剂等。加酶洗衣粉中的碱性蛋白制剂可以使奶渍、血渍等多种蛋白质污垢降解成易溶于水的小分子肽或氨基酸；碱性脂肪酶制剂能将脂肪水解成易被水冲洗掉的甘油和脂肪酸，从而达到清除衣物上脂质污垢的目的。加酶洗衣粉的洗涤效果取决于酶的活性，酶的活性易受温度影响，低温会大大降低酶的活性，高温则可使酶变性失活。
(重庆卷）5.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是
A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害
B．在愈伤组织培培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
C．出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控
D．生根时，培养基通常应含 α-萘乙酸等生长素类调节剂
【答案】B
【解析】消毒剂的使用既要杀死表 ( http: / / www.21cnjy.com )面微生物，有防止伤害组织细胞，影响组织培养，A项正确；植物细胞融合是指经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体的诱导融合，带有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞，B 项错误；出芽和生根都是细胞再分化的结果，其实质是基因的选择性表达，C 项正确；α-萘乙酸为生长素类似物，可诱导愈伤组织生根，D 项正确。
【试题评价】本题考查植物组织培养相关知识和考 ( http: / / www.21cnjy.com )生的理解能力，涉及外植体的消毒、植物体细胞杂交、细胞分化及植物生长调节剂对组织培养的影响等内容，较易得分。
（江苏生物卷）6．下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是
A.可用包埋法制备固定化酵母细胞
B.反应产物对固定化酶的活性没有影响
C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同
D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
【答案】A
【解析】固定化技术包括包埋法、物理吸 ( http: / / www.21cnjy.com )附法和化学结合法（交联法），由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法， A正确；某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，B错误；固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上，实现酶的反复利用，并提高酶稳定性，酶的各项特性（如高效性、专一性和作用条件的温和性）依然保持，C错误；固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但如果反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应，D错误。
【试题评价】此题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，难度不大。
（江苏生物卷）11．某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是
A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗
B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗
C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上
D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养
【答案】B
【解析】茎段扦插、幼芽嫁 ( http: / / www.21cnjy.com )接、植物组织培养都是无性繁殖，可以大量快速得到与原有性状相同的个体，A、C、D均可选用；采用花粉粒离体培养可获得单倍体幼苗，但由于花粉粒为雄配子，发育来的单倍体植株会发生性状分离，不能保持亲代的优良性状，B错误。
【试题评价】此题考查无性繁殖及单倍体植株的特点，难度适中。
（江苏生物卷）14．某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是
A.酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B.先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C.与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D.适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
【答案】D
【解析】醋酸菌是嗜热菌， ( http: / / www.21cnjy.com )果醋发酵所需的最适温度较高，A错误；进行果酒、果醋发酵实验，要先进行隔绝空气果酒发酵，再供氧进行果醋发酵，B错误；人工接种菌种单一，自然发酵菌群丰富，风味及品质更好，C错误；适当加大接种量，让菌体快速形成优势菌群，可以抑制杂菌生长，提高发酵速率，D正确。
【试题评价】此题考查果酒、果醋发酵实验，内容基础，难度不大。
（江苏生物卷）17．将图中果酒发酵装置改装后用于探究酵母菌呼吸方式的实验， 下列相关操作错误的是
A.探究有氧条件下酵母菌呼吸方式时打开阀a
B.经管口3取样检测酒精和CO2的产生情况
C.实验开始前对改装后整个装置进行气密性检查
D.改装时将盛有澄清石灰水的试剂瓶与管口2连通
【答案】B
【解析】图中管口1为进气口，管口2为 ( http: / / www.21cnjy.com )排气孔，管口3可以检查液体中的成分，因此探究有氧条件下酵母菌的呼吸，应打开阀门a通入氧气，A正确；管口3可以检测酒精，管口2可以与澄清石灰水相连以检查CO2，因此B错误。
（江苏生物卷）18．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是 A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
【答案】B
【解析】在配制培养基的过程中要先灭菌后 ( http: / / www.21cnjy.com )倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般要隔天观察一次，D错误。
（全国课标卷Ⅰ）39．【生物——选修1 生物技术实践】（15分）
回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是 ( http: / / www.21cnjy.com ) 。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的 ( http: / / www.21cnjy.com )因素有 、 和 等。 （4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是： 。
【答案】（1）消灭杂菌 增加乳酸菌含量 （2 ( http: / / www.21cnjy.com )）无氧呼吸 细胞质 （3）温度、食盐用量、腌制时间 （4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少 乳酸菌比杂菌更为耐酸
【解析】
（1）盐水中可能含有杂菌，制作泡菜时，所用盐水需要煮沸，以便杀死盐水中的杂菌。陈泡菜中含有现成的乳酸菌，加入后，可以缩短制作时间。
（2）乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行无氧呼吸的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中。
（3）都泡菜的制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素有温度过高、食盐用量不足、腌制时间等。
（4）从开始制作到泡菜品质最佳 ( http: / / www.21cnjy.com )这段时间内，泡菜液逐渐发酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，其他杂菌较少；原因是酸性条件下，不利于杂菌生存，增加乳酸菌的数量。
【试题点评】本题通过考查泡菜制作的相关基础知识，主要考查识记能力和对相关知识的判断能力。
（全国课标卷Ⅱ）39.[生物——选修1：生物技术实践]
临床试用抗生素前，有时需要做细菌 ( http: / / www.21cnjy.com )耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题： （1）为了 ( http: / / www.21cnjy.com )从样本中获取致病菌菌落，可用____ ___法或______ ___法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用_____ _法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将 ( http: / / www.21cnjy.com )分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___ ____；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明____ ____；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的____ ____。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。
【答案】：（1）划线 稀释涂布（或涂布 ( http: / / www.21cnjy.com )） （2）涂布 （3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A弱 耐药菌 （4）A
【解析】：本题考查微生物的培养和应用。
（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。
（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。
（3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。
（4）实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。
（山东卷）34.(8分) 【生物-生物技术实践】
胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：
( http: / / www.21cnjy.com )
（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用 ( http: / / www.21cnjy.com ) 或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是 。
（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供
和 。
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时 ( http: / / www.21cnjy.com )，干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤。其目的是 。
（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为 。
【答案】（1）稀释涂布平板法 灭菌（防止杂菌污染） （2）碳源 氮源
（3）时间 水浴 滤去不溶物 （4）(实验)对照
【解析】（1）接种微生物的方法主要是稀释涂布 ( http: / / www.21cnjy.com )平板法和夹板划线法，接种过程为了避免其它杂菌的污染，要做无菌操作，所以接种前需对接种环灭菌操作。
（2）蔗糖主要提供碳源，当 ( http: / / www.21cnjy.com )然也可以作为能源物质，硝酸盐含氮元素，可提供氮源。 （3）温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂往往有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸；萃取后需将原料中不溶于萃取剂的成分滤去。
（4）提取出来的胡萝卜素往往不是纯的，用标准样品主要起一个对照的作用。
【试题评价】本题主要考查微生物培养、植物中有效成分提取等有关知识，意在考查考生识记和理解应用能力。
（四川卷）10．（12分） ( http: / / www.21cnjy.com )由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。
( http: / / www.21cnjy.com )
(1)图甲中，过程①需要的酶有___ ( http: / / www.21cnjy.com )__________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________。
(2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平 ( http: / / www.21cnjy.com )板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。
(3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和 ( http: / / www.21cnjy.com )普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。
（4）用凝胶色谱法分离α-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。
【答案】（1）限制性核酸内切酶、D ( http: / / www.21cnjy.com )NA连接酶 淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌 （2）稀释涂布平板法 涂布不均匀
（3）工程酵母 工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快 （4）小
【解析】本题考查选修本中相关知识，包括有基因工程、微生物的培养和发酵、蛋白质的提取和分离等。
（1）①步骤为将目的基因与运 ( http: / / www.21cnjy.com )载体连接，需要先用同一种限制性核酸内切酶分别切割质粒和目的基因，露出相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接为重组质粒；而在以淀粉为唯一碳源的培养基中，其他微生物难以利用淀粉而被抑制，从而筛选高效利用淀粉的工程酵母菌；重复筛选多次可以提高目的菌的纯度。
（2）图中平板培养后的结果，形成了多个菌落，因此为稀释涂布平板法，但是菌落分布不均匀，集中分布在一定区域，说明涂布不均匀。
（3）由于工程酵母菌能够更高效的 ( http: / / www.21cnjy.com )利用淀粉，因此在以淀粉为原料的培养条件下，可以更快的进行增殖和发酵，酒精发酵产生的二氧化碳较多，所以需要先排气。
（4）凝胶色谱法分离的原理是相对分子 ( http: / / www.21cnjy.com )质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。因此，移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较小。
【试题点评】本题以图像信息为载体，考 ( http: / / www.21cnjy.com )查基因表达载体构建所需的酶、选择性培养基、微生物接种方法、细胞代谢以及蛋白质分离，意在考查学生基本操作能力，难度不大。针对此类题型，复习时需要对重点的基本操作进行复习，或者让学生进行实际操作。
（海南生物卷）30. 【生物——选修1：生物技术实践】（15分）
根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶 ( http: / / www.21cnjy.com )应用方面的问题： (l)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和__ __，以提高萃取效率：水蒸气蒸馏法__ __（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是_ __ _；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用___ _法，并以__ __样品作为对照。
(2)若要提高衣物上血渍的去除效果 ( http: / / www.21cnjy.com )，可在洗衣粉中加入_ __酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的__ __或___ _；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加__ __酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是___ _。
【答案】(1)干燥（1分） ( http: / / www.21cnjy.com )不适合（1分） 水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出（3分）纸层析（2分） 标准的胡萝卜素（2分） (2)碱性蛋白（或蛋白）（1分） 氨基酸（1分）小分子肽（1分） 脂肪（1分）水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活（2分）
【解析】（1）萃取是将粉 ( http: / / www.21cnjy.com )碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中。水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带，说明提取胡萝卜素的实验成功。
（2）血渍中含有蛋白质，可 ( http: / / www.21cnjy.com )用含蛋白酶的洗衣粉洗涤。其原理是蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸。油渍的主要成分是脂肪，需用含脂肪酶的洗衣粉。水温过低抑制酶的活性，水温过高会使酶变性失活。
【试题点评】本题考查生物技术实践 ( http: / / www.21cnjy.com )中的相关内容，包括胡萝卜素的提取和鉴定，以及加酶洗衣粉的应用。考查内容比较基础，难度较小，掌握教材上的基础知识是解答本题的关键。
2014年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
（2014全国卷1）39、[生物—选修1：生物技术实践](15分)
植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分 ( http: / / www.21cnjy.com )泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_ 分解成_
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红 ( http: / / www.21cnjy.com )（CR)时，CR可与纤维素形成 _ 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌对，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的
（3）为从富含纤维素的上壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表)：
注：“+”表示有，“-”表示无。
据表判断，培养基甲_ _〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_ ；培养基乙_ 〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 。
39.[生物——选修1：生物技术实践]（15分）
（1）纤维二糖 葡萄糖
（2）红 透明圈
（3）不能 液体培养基不能用于分离单菌落
不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
（2014全国卷2）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样 ( http: / / www.21cnjy.com )中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是___________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为___________。
（2）该小组采用平板划线法分离水 ( http: / / www.21cnjy.com )样中的细菌，操作时，接种环通过___________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是___________。
（3）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株 ( http: / / www.21cnjy.com )接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。
【答案】 （1）检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×10
（2）灼烧； 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（3）B ⑷、溶解氧 营养物质
【解析】
（1）为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：
（2）接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是：通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到菌落。
（3）由题图可知B图为平板划线法接种的结果（菌落相对均匀分布）。
（4）震荡培养可以增加液体培养基的氧气含量，促进好氧型微生物的生长；另外震荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。
(2014江苏卷)30. (8 分)为了获得 茁鄄胡萝卜素产品,某小组开展了产 -胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。 请回答下列问题:
(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是 ;为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该 。
(2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是 。
(3)右图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙指示的依次是 。 (填序号)
①安全阀、放气阀、压力表 ②放气阀、安全阀、压力表
③安全阀、放气阀、温度表 ④放气阀、安全阀、温度表
(4)为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在 3 块相同平板上划线,结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长,最可能的原因是 。
(5)为增加 茁鄄胡萝卜素提取量,在研磨 ( http: / / www.21cnjy.com )酵母细胞时,添加石英砂的目的是 ;研磨时 (填“需要”或“不需要”)添加 CaCO3,理由是 。
答案30. (8 分)(1)干热灭菌和湿热灭菌(高压蒸汽灭菌) 用牛皮纸(报纸)包扎器皿
(2)抑制细菌(放线菌)生长 (3)淤 (4)接种环温度过高,菌被杀死
(5)有助于研磨充分 不需要 茁鄄胡萝卜素较耐酸
（2014山东卷）35.玉米是重要的粮食作物，深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：
（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水 ( http: / / www.21cnjy.com )解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_______法或稀释涂布平板法计数。
（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。
（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。
（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异 ( http: / / www.21cnjy.com )构酶基因时，需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。
【答案】（1）碳源；显微镜直接计数 （2）压榨；萃取（注:两空可颠倒)
（3）固定化酶 （4）(Taq)DNA聚合酶；复性(或退火)；延伸
【解析】
试题分析：（1）纤维素经 ( http: / / www.21cnjy.com )充分水解后的产物为葡萄糖，可为酵母菌的生长提供碳源，统计细菌数量的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个细菌，但菌落数往往比活菌的菌落数目低，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，另一种方法是直接计数法，这种方法要借助显微镜，且统计的数目也包括死亡的细菌。
（2）植物芳香油的提取方法有蒸馏、萃取和压榨等，由于玉米胚芽油不易挥发，故不能采用蒸馏法，宜采用压榨法和萃取法提取。
（3）利用固定化酶技术可使酶重复利用，从而降低生产成本。
（4）PCR技术中，因需要高温解旋，故需用耐高温的DNA聚合酶催化，每次循环包括变性、复性和延伸三个步骤。
（2014海南卷）30[生物—选修1：生物技术实践]（15分）
已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时 ( http: / / www.21cnjy.com )间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：
⑴请完善下列实验步骤。
①标准管的制备：用 和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。
②样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的 ，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。
③将每个 分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅 的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。
⑵右图表示的是泡菜中 趋势。
⑶泡菜制作过程中产酸的细菌主要是 （填“醋酸杆菌”或“乳酸菌”）。
【答案】（1）①不同浓度亚硝酸钠标准溶液 ②不同泡制天数的泡菜滤液 ③样品管 相同（近似） （2）亚硝酸盐 （3）乳酸菌
【解析】（1）在亚硝酸盐的含量测定 ( http: / / www.21cnjy.com )中，用不同浓度亚硝酸盐标准溶液和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管；用刻度移液管分别吸取一定量的不同泡制天数的泡菜滤液，加到不同的比色管，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管；将每个样品管分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅相近的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量（2）据图可知，该图表示亚硝酸盐的含量随发酵时间的变化曲线。（3）制泡菜时使用生物微生物是乳酸菌。
2015年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
（2015江苏卷）19.做“微生物的分离与培养” 实验时,下列叙述正确的是
A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上
答案：19.D
（2015江苏卷）20.下图为制备人工种子部分流程示意图,下列叙述正确的是
( http: / / www.21cnjy.com )
A.胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织
B.该过程以海藻酸钠作为营养成分,以CaCl 溶液作为凝固剂
C.可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖,为胚状体提供碳源
D.包埋胚状体的凝胶珠能够隔绝空气,有利于人工种子的储藏
答案：20.C
（2015江苏卷）31.(8分)人工瘤胃 ( http: / / www.21cnjy.com )模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。 为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:
(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是 _________ (填序号)。
①酒精灯 于培养皿 ③显微镜 ④无菌水
(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 _________ 。
(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养 基,需要用酒精棉球擦净的原因是 _________ 。
(4)刚果红可以与纤维素形成红色 ( http: / / www.21cnjy.com )复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见右图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的 _________ 有关。 图中 降解纤维素能力最强的菌株是 _________ (填图中序号)。
(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株 __ ___ 更适合用于人工瘤胃发酵，理由_ ______ 。 ( http: / / www.21cnjy.com )
答案31.(8分)
(1)③ (2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果
(3)避免培养基污染棉塞 (4)量与活性 ①
(5)J4 发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高
（2015上海卷）9．在涂布有大肠杆菌 ( http: / / www.21cnjy.com )的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图3。以下判断错误的是
A．a处抑菌效果小于b处 B．b处的滤纸片没有沥干
C．c处抗生素无效 D． d为对照
【答案】A
【解析】透明圈大的抑菌效果好，透明圈小的 ( http: / / www.21cnjy.com )抑菌效果弱。d为空白对照，与d处的比较可说明a处抑菌效果大于b处；A错误。B处透明圈不规则，可说明 b处的滤纸片没有沥干；B正确。C处的与d处相同，说明c处抗生素无效；C正确。
（2015海南卷）30．【生物－选修1：生物技术实践】（15分）
生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题：
（1）某同学用三种严的果胶酶进行三 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间，然后，洲定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）某同学取5组试管（A ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )～E）分别加入等量的同种果泥，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
【答案】（1）探究不同来源果 ( http: / / www.21cnjy.com )胶酶的活性 （2）4组的温度设置不合适 各组的酶促反应受两个不同温度影响 （3）不能 E组加入蒸馏水而不是缓冲液违背了单一变量原则
【解析】（1）根据题意， ( http: / / www.21cnjy.com )用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较，可见实验的自变量是果胶酶的来源不同，因变量是果胶酶的活性，所以该实验目的是探究不同来源果胶酶的活性。（2）根据实验设计可知，该实验是探究果胶酶的最适温度，所以自变量是温度，因变量是果胶酶的活性，用出汁量进行衡量，出汁量越多则果胶酶活性越高。该实验方案中，温度应该在常温范围内设置系列温度梯度且梯度差值相等，所以4组的温度应分别设置为15℃、20℃、25℃、30℃；另外探究温度对酶活性的影响时，应保证酶促反应只能在设定的温度下进行，同一实验组的反应温度只能是一个，所以实验操作应该是将各组盛有果胶酶的试管与盛有果泥的试管分别在设定温度下处理一定时间后再将两只试管混合，才能保证实验在设定的温度下进行。（3）根据题意，本实验的自变量是果胶酶的量，因变量是出汁量，对照实验的设计应遵循单一变量原则和对照原则，根据实验设置，通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，则E组应加入缓冲液而不是蒸馏水，使试管中液体体积与实验组相同，才符合实验设计应遵循的单一变量原则。
（2015 新课标Ⅱ）三、【生物--选修1：生物技术实践】
39．（15分）回答与胡萝卜素有关的问题：
（1）胡梦卜含有的胡萝卜素中，最主要的是 ( http: / / www.21cnjy.com ) （填“α﹣胡萝卜素”、“β﹣胡萝卜素”或“γ﹣胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子 ，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为 ，胡萝卜素是 （填“挥发性”或“非挥发性”）物质．
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时， （填“需要”或“不需要”）将鲜活的岩藻干燥．
（3）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的 作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是 ．
【答案】（1）β﹣胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性 （2）需要
（3）乙酸乙酯 萃取胡萝卜素的有机溶剂不与水混溶，而乙醇虽为有机溶剂但和水混溶：【解析】（1）胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )要的是β﹣胡萝卜素，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子维生素A，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为夜盲症，胡萝卜素是非挥发性物质．
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，需要将鲜活的岩藻干燥．
（3）萃取胡萝卜素的有机溶剂应该能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，故乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的乙酸乙酯作为胡萝卜素的萃取剂．
（2015年新课标卷1）39.已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于 染色。微生物A产生的油脂不易挥发 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。
【答案】：（1）苏丹III染液或者苏丹IV染液 萃取 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )法 （2）脂肪
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板 （4）45℃ 40℃、
【解析】（1）油脂可被苏丹III染液或 ( http: / / www.21cnjy.com )者苏丹IV染液染成橘黄色或红色。由于不易挥发，故采用萃取法。（2）脂肪酶的微生物B可以分解脂肪，故可以以脂肪为碳源的固体培养基进行培养，不产生脂肪酶的微生物无法生存。（3）微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，活菌用稀释涂布平板法。（4）45℃降解10g油脂所需酶量最大，故酶活性最小；40℃温度下降解10g油脂所需酶量最小，故酶活性最大，围绕40℃温度进行后续实验设计。
（2015山东卷）乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:
(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用_ ( http: / / www.21cnjy.com )________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是_________。从功能上讲,这种培养基属于_________。
(2)培养微生物L前,宜采用_________方法对接种环进行灭菌。
(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越_________。
(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共 ( http: / / www.21cnjy.com )价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的_________确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括_________、_________、离子吸附法及交联法等。
【答案】(1)乳糖 凝固剂 选择培养基 (2)灼烧 (3)小
(4)(酶)活性[或:(酶)活力] 包埋法 物理吸附法(注:两空可颠倒)
【解析】本题主要考查微生物 ( http: / / www.21cnjy.com )的筛选与培养及固定化酶的相关知识,意在考查考生的识记和理解分析能力。难度较小。(1)该选择培养基的唯一碳源应为乳糖,只有能利用乳糖的微生物能在该培养基上生存,而其他微生物将因缺乏碳源而无法生存,利用这个原理可以筛选产乳糖酶的微生物L;固体培养基中琼脂是很好的凝固剂;从功能上讲这种培养基属于选择培养基。(2)接种环的灭菌宜采用灼烧法。(3)电泳过程中若蛋白质所带电荷相同,则电泳速度只与蛋白质的分子量大小有关,蛋白质分子量越小,电泳速度越快。(4)固定化酶常要通过测定其活性来确定其应用价值;酶的固定化方法包括包埋法、化学结合法、物理吸附法等。
（2015年广东卷）泡菜是我国的传 ( http: / / www.21cnjy.com )统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”，查阅资料得到图11
（1）制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是__________________。乳酸发酵第一阶段的产物是___________。
（2）据图11，与第3天相 ( http: / / www.21cnjy.com )比，第8天后的泡菜更适于食用，因为后者______________；pH值呈下降趋势，原因是______________。
（3）该小组得到一株“优选”乳酸菌（亚 ( http: / / www.21cnjy.com )硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍），拟参照资料的实验方案和食盐浓度（4%-10%），探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定其最适条件。请你设计一个实验结果记录表，并推测实验结论。
【答案】 (1)创造无氧环境 丙酮酸、[H]、ATP
(2)亚硝酸盐含量低 乳酸菌的代谢产物大量积累,使pH下降
(3)如下表所示
注:其他条件相同且适宜
结论:“优选”乳酸菌的亚硝酸盐的含量比普通乳酸菌的低
【解析】本题主要考查乳酸菌的发酵过程以及实 ( http: / / www.21cnjy.com )验设计的相关内容,意在考查考生的理解能力、实验与探究能力和综合运用能力。(1)乳酸菌是厌氧微生物,在无氧条件下才能增殖和生长,进行各项生命活动。细胞呼吸的第一阶段是葡萄糖分解为丙酮酸的过程,该阶段的产物有丙酮酸、[H]和ATP。(2)据题图分析,在第3天时,亚硝酸盐的含量为40 mg/kg,而在第8天时,亚硝酸盐的含量只有5 mg/kg,故第8天后的泡菜更适于食用。由于乳酸菌的无氧呼吸产物是乳酸,而乳酸呈酸性,经过大量的积累会使pH下降。(3)三因子自变量的表格中,自变量分别是食盐的浓度、不同菌种、培养时间,观察指标是亚硝酸盐的含量,其他都是无关变量,应保持相同且适宜。表格中要有单位。
（10江苏卷）25．右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图．下列叙述正确的是
A．剐溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液
B．图1中X溶液为cacl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠
C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触
D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
【答案】BCD
【解析】本题考查了固定化细胞技术的操作过 ( http: / / www.21cnjy.com )程。熔化的海藻酸钠应冷却后与活化的酵母细胞混合，A项错误；图1中氯化钙溶液可使海藻酸钠形成凝胶珠，B项正确；图2中要进行搅拌以使培养液与细胞充分接触，C项正确；图1中制备的凝胶珠要以过洗涤再移到图2装置中，D项正确。
（10新课标）37．【生物——选修模块1：生物技术实践】(15分)
下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理 ( http: / / www.21cnjy.com )由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液 (是、不是)纯的玫瑰精油，原因是 。
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过 ( http: / / www.21cnjy.com )程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 。
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 ，原因是 。
（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度 的地方，目的是 。
（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为 天左右。
(6)从薄荷叶中提取薄荷油时 (能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是 。
【答案】⑴易挥发、难溶于水 ( http: / / www.21cnjy.com )、化学性质稳定 ；不是；玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物；（2）蒸馏温度 在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加；（3）下降 部分精油会随水蒸气挥发而流失；（4）较低 减少挥发；（5）a；（6）能 薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似
【解析】植物芳香油的提取方法有蒸馏、压 ( http: / / www.21cnjy.com )榨和萃取等，具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。而水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，所以次用水蒸气蒸馏法提取。
（10北京卷）1.在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是
Ａ．让发酵装置接受光照 Ｂ．给发酵装置适时排气
Ｃ．向发酵装置通入空气 Ｄ．酵母菌装置放在45℃处
答案B
【考点直击】本题考查果酒制作的知识。此考点在高考中出现的次数较少。
【要点透析】在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装置不需要接受光照，发酵时也不能通入空气，一般将发酵温度控制在18～25℃。
（2010山东高考理综）34. 【生物—生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
( http: / / www.21cnjy.com )
(1)用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选 ( http: / / www.21cnjy.com )用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
【答案】（1） 压榨；萃取（注：两空顺序无先后）
（2）碳源 高压蒸汽灭菌
（3）显微镜直接计数 酶活性（或：酶活力） 固定化酶（或：固定化细胞）
（4）PCR（或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）
【命题立意】本题综合考查多种生物技术
【解题思路】（1）因为植物油不挥发 ( http: / / www.21cnjy.com )，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌发进行灭菌。（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶。（4）利用PCR技术可以扩增基因。
（10广东卷）25．小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是
A．加入适量的酵母菌 B．一直打开阀b通气
C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟
D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验
【答案】AC
【解析】本题主要考查学生的理解能力。果酒的制备过程中先让酵母菌在有氧条件下迅速扩增，再让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精。
（10江苏卷）7.右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是
A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下
B.过程①和都③只发生在酵母细胞的线粒体中
C.过程③和④都需要氧气的参与
D.过程①~④所需的最适温度基本相同
【答案】C
【解析】本题考查果酒果醋制作过程的反应条件等 ( http: / / www.21cnjy.com )的区别。①过程有氧无氧条件均可以发生，②过程只能发生在无氧条件下，A项错误。①在酵母菌细胞质基质中进行，③在酵母菌线粒体内进行，B项错误。③为有氧呼吸第二、三阶段，需要氧气参与，④需要氧气参与，C项错误。过程①、②、③为酵母菌的呼吸作用，最适宜温度约为20°C左右；④的最适宜温度为30—35°C，D项错误。
（10浙江自选模块）“生物技术实践”模块（10分）
请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上，每空1分，共10分。某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。 ( http: / / www.21cnjy.com )
图中用KMnO4的溶液浸泡 ( http: / / www.21cnjy.com )苹果的目的是______①___________。黑曲霉提取液中含有的_____②____可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过____③______方式将酶固定化，酶被固定在用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________④_________。
实验中，操作流程A和B的 ( http: / / www.21cnjy.com )先后顺序为_________⑤________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_______⑥__________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的_______⑦________混合，如果出现_______⑧________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调____⑨______。试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被__⑩_____使用。
【答案】（1）①消毒 ②果胶酶 ③吸附 ④未被固定的酶等
（2）⑤AB ⑥阀1 ⑦乙醇 ⑧浑浊（沉淀） ⑨ 慢
（3）⑩重复
【解析】本题考查苹果汁制作过程的反应条件注意事项，操作过程中需注意的细节。
需要学生对课本知识熟悉，培养学生学以致 ( http: / / www.21cnjy.com )用的学习态度，从现在生物学在生活中的应用区激发学生的学习兴趣。在制作工艺中必须对原材料消毒，这样才能保证后续试验的成功。KMnO4是强氧化剂，可以起到对苹果的消毒作用。
（10海南卷）25．（18分）［选修模块1：生物技术实践］
葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：
（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）该微生物通过无氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，产生的终产物是＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。
（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后 ( http: / / www.21cnjy.com )分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同学的错误是＿＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。
（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
25．答案
（1）酵母菌（2分）
（2）葡萄糖 乙醇 CO2（每空1分，共3分）
（3）未夹住发酵瓶的充气管（2分） 发酵液从充气管流出，发酵液变酸（1分）
瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口（2分）
葡萄醋（或果醋）（2分） 葡萄酒（或果酒）（1分） 葡萄酒（或果酒）（1分）
（4）未及时排气（2分）
2010年普通高等学校招生全国统一考试（全国Ⅰ卷）理科综合能力测试
34.（12分）（注意：在试题卷上作答无效）
下列是与微生物培养有关的问题，请回答：
⑴某细菌固体培养基的组成成分是KH ( http: / / www.21cnjy.com )2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是 ，碳源是 ，氮源是 。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，帮该培养基属于 培养基。按照化学成分分类，该培养基属于 培养基。从同化作用类型看，用该培养的细菌属于 。
⑵将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中 ( http: / / www.21cnjy.com )，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的 曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是
。实验室中，为了获得形态和生理特证一致的菌体，一般应在 期取体；在生产中，常收集培养至 期的细菌用于次生代谢产物的提取。
答案34.（12分）（1）琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型
（2）群体生长 菌体数目往往非常大，且变化率也很高，以菌体数目的对数为纵坐标有利于作图 对数 稳定
2011年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
2011年普通高等学校招生全国统一考试 理科综合能力测试
39．【生物——选修1：生物技术实践】（15分）
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样 ( http: / / www.21cnjy.com )品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和
。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
答案39．（1）原油 选择
（2）平板划线法 稀释涂布平板法
（3）强
（4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
(2011年江苏卷）3．下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是 D
A．腐乳制作所需要的适宜温度最高
B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
（2011年江苏卷）15．下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是 A
A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶
B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化
C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤
D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层
（2011上海生命科学卷）（五）回答下 ( http: / / www.21cnjy.com )列关于微生物和酶的问题。（10分） 环境污染物多聚苯难以降解，研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。
36．下列培养基中能有效分离联苯降解菌的是＿＿＿＿＿＿＿，原因是＿＿＿＿＿＿＿。
A培养基（g/L）：某生长因子2.0，（NH4）2SO42.0，K2HPO43.0，MgSO41.0，pH7.4，多聚联苯50mL
B培养基（g/L）：牛肉膏10.0，蛋白胨20.0，葡萄糖20.0，NaCl5.0，pH7.4
C培养基（g/L）：某生长因子2.0，淀粉 ( http: / / www.21cnjy.com )20.0，NH4NO32.5，MgCl20.5，K2HPO43.0，多聚联苯50mL，pH7.4，
进一步研究发现，不同的金属离子对联苯水解酶的活性有一定影响，结果见下表：
( http: / / www.21cnjy.com )
答案：2分 A 该培养基中有多聚联苯为唯一碳源
37．依据表中结果，金属离子 ( http: / / www.21cnjy.com )＿＿＿＿＿＿对该酶的活性有一定的促进作用。金属离子对酶的活性有促进或抑制作用，可能的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
答案：3分 Mn2+ 金属离子与酶结合可以改变酶的空间结构
38．通过酶工程可将联苯水解酶用于生产 ( http: / / www.21cnjy.com )实践。酶工程通常包括酶的生产、＿＿＿＿＿＿＿、酶的固定化和酶的应用等方面。酶固定化的好处是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 答案：2分 酶的分离纯化 便于重复利用，能连续进行反应
39．下图实线表示联苯水解酶催化的反应 ( http: / / www.21cnjy.com )速率与酶浓度的关系，虚线表示在其他条件不变的情况下，底物浓度增加一倍，反应速度与酶浓度的关系，能正确表示两者关系的是＿＿＿。
( http: / / www.21cnjy.com )
答案：1分 B
40．红球菌和假单孢菌都能降解多聚联苯， ( http: / / www.21cnjy.com )便研究发现以每克菌体计算，两种菌降解多聚联苯的能力有所不同，对此现象合理的假设是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿或＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
答案：2分 两种菌内酶量为同 两种菌内酶基因的结构（酶结构）不同
（11年广东卷）5、以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是
A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂
B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少
C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测
D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢
答案：D
【解析】D项考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理， ( http: / / www.21cnjy.com )相对分子质量越大的通过凝胶色谱柱的速度越快，故D错误。A正确，洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化，加入的是生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，重复洗涤三次，直至上清液不再呈现黄色，表明红细胞已洗涤干净。B正确，哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器，提纯时杂蛋白较少。C正确，血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液（如果操作都正确，能清楚的看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随着洗脱液缓慢流出）。这使得血红蛋白的分离过程非常直观，简化了操作。
（11年山东卷）34.（8分）（生物—生物技术实验）
研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示
( http: / / www.21cnjy.com )
（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过
___________除去其中的固体杂质。
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时
所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。 （3）培养基镇南关的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素
时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子 ( http: / / www.21cnjy.com )量越大，电泳速度___________。 （4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过
测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
答案：（1）压榨 过滤
（2）稀释涂布平板法（或稀释混合平板法） 高压蒸汽灭菌锅 消毒 （3）氮源 越慢 （4）直径（或大小）
（2011海南生物卷）30.[生物——选修1：生物技术实践]（15分）
许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。 回答问题：
（1） 薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用_____(鲜、干)薄荷叶作原料，其原因是
薄荷油是挥发性物质，鲜薄荷叶才含薄荷油。
（2） 用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是 酒精 _，原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中。
（3） 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是使溶液分层。
常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是除水_，除去固体硫酸钠的常用方法是_过滤_ _。
2012年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
（2012全国卷新课标版）39．（15分 ( http: / / www.21cnjy.com )）为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在ＭＳ培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。
回答下列问题： ( http: / / www.21cnjy.com )
（１）按照植物的需求量，培养基中无 ( http: / / www.21cnjy.com )机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中，6-BA属于 类生长调节剂。
（２）在该实验中，自变量是 ，因变量是 ，自变量的取值范围是 。
（３）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。
（４）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 （填“6-BA”或“IAA”）。
【答案】（１）大量元素 微量元素 细 ( http: / / www.21cnjy.com )胞分裂素 （２）IAA浓度 丛芽外植体的比率及丛芽平均数 ０～０.５mg/L （３）１ （４）6-BA
【解析】本题主要是对植物组培 ( http: / / www.21cnjy.com )知识的考察，提问涉及必修一和必修三的一些知识，再加上以实验分析的形式考察中学生物实验的基础知识，综合性强，并不局限于选修一，是为“选修可以考察必修”一说的集中体现。 第（１）问第一空考察必需元素的分类（可分为大量元素 微量元素），必修一的基础知识，选修一教材上亦有原句。
第（１）问第二空考察植物生 ( http: / / www.21cnjy.com )长调节剂的知识。中学生物必修一提及植物体内5大植物激素，分别为生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、乙烯类、脱落酸类，要求掌握植物生长调节剂的名称；常见选修一的植物组织培养实验中又重点分析了生长素类、细胞分裂素类，要求识记二者比例对植物脱分化的影响（生长素多有利于生根，细胞分裂素多有利于长芽）；由表格易知IAA比例上升抑制长芽，为生长素（吲哚乙酸），故6-BA为细胞分裂素。 第（2）问考察中学生物实验的基础知识，自变量是IAA（6-BA浓度不变），取值范围是０到０.５；因变量是丛芽数 （即再生丛芽外植体的比率和再生丛芽外植体上的丛芽平均数） 第（3）问直接从表格中可读出。 第（4）问参阅第（１）问第二空解析
（2012山东卷）34．（8分）【生物—生物技术实践】
辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。
( http: / / www.21cnjy.com )
（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_________和_________过程。
（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂 ( http: / / www.21cnjy.com )是________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是__________。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_______。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。
（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝 ( http: / / www.21cnjy.com )回流装置，其目的是_________。 答案：答案：（1）脱分化（或去分化） 再分化 （2）琼脂 低 高压蒸汽灭菌 （3）70% 果胶酶 （4）防止有机溶剂挥发
解析：本题考查植物组织培养的过程、条件 ( http: / / www.21cnjy.com )，灭菌与消毒，物质的提取等基础知识。 植物组织培养的关键过程包括脱分化和再分化，由形成的愈伤组织再分化成具根和芽的试管苗。在组织培养过程中，需要无菌无毒条件、一定的营养条件、激素条件和适宜的环境条件等。生长素含量高于细胞分裂素时，愈伤组织先分化出芽，反之，则先分化出根。将愈伤组织分离成单个细胞时需要酶解植物细胞壁，植物细胞壁的成分为纤维素和果胶，故需用纤维素酶和果胶酶。 制作植物组织培养等培养基时，需向培养基中加入琼脂进行凝固，并采用高压蒸汽法进行灭菌；对植物外植体进行消毒，消毒所用的酒精体积分数为70%。
（2012江苏卷）17．下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是
A．从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小
B．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药
C．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用
D．将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌
答案：C
【解析】化学结合法可能影响酶 ( http: / / www.21cnjy.com )的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A正确；消化酶在消化道内起作用，B正确；尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开，而不能再次使用，C错；固定化酵母细胞在凝胶珠中，用无菌水冲洗可洗去CaCl2和表面的杂菌，D正确
（2012江苏卷）18．下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是
A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝
C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取
D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少
答案：C
解析：洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜 ( http: / / www.21cnjy.com )，去除脂质和蛋白质,但不能DNA在NaCl溶液中的溶解度，A错；DNA丝状物在二苯胺试剂中沸水浴加热过程中变蓝，不需要冷却，B错；匀浆中含有多种酶，常温下有些酶类可破坏DNA而影响DNA的提取，C正确；用玻璃棒缓慢搅拌滤液，有利于提取并防止搅拌时DNA断裂，并不影响DNA的含量，D错。
（2012江苏卷）21．下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是
A．在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长
B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸
C．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小
D．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量
答案： ABC
【解析】在果酒发酵后期，由于瓶中的营养物质 ( http: / / www.21cnjy.com )减少，单位时间内产生的CO2的量减少，所以拧开瓶盖的间隔时间可以延长，A正确；在糖源、氧气充足的条件下，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸，B正确；果酒发酵过程中，营养物质消耗，并且有水的生成，密度会逐渐减小，C正确；将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，要分层加盐，加盐量要随着层数的加高而增加 ，近瓶口表面的盐要铺厚一些，但底层不需要大量用盐，D错误。
（2012全国理综大纲）5.关于细菌的叙述中，正确的是
A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源
B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落
C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期
D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选
( http: / / www.21cnjy.com )
（2012海南卷）30.【生物——选修I：生物技术实践】（15分）
回答下列关于腐乳制作的问题：
（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食 ( http: / / www.21cnjy.com )品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为
和 ；其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 。
（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 生长。
（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的 。
【答案】 (15分)
（1）毛霉 肽 氨基酸 脂肪酶 ( http: / / www.21cnjy.com ) 甘油 脂肪酸（每空2分，共12分） （2）微生物 （2分） （3）风味 （1分，其他合理答案也给分）
【解析】
（1）酵过程中起作用的微生物有多 ( http: / / www.21cnjy.com )种，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸。
（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物
（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）。
【试题点评】本题考查腐乳制作的原理和流程，设计到具体操作过程的作用和意义，均为课本上理解识记内容，难度不大。
（2012上海卷）9．酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有
A．热稳定性 B．催化高效性 C．催化特异性 D．可反复使用性
【答案】D
【解析】固定化酶指通过物理或化学的方法 ( http: / / www.21cnjy.com )，将水溶性酶与非水溶性载体结合，既能与反应物接触又能与产物分离，与直接使用酶相比，除催化效率高、特异性强外，还可反复使用酶；酶的热稳定性一般都不强。故D正确。
【试题点评】本题考查了固定化酶与直接使用酶的区别及酶的特性，重点在于理解两者的区别，找出固定化酶依据的基本原理，难度中等。
（2012上海卷）(四)回答下列关于微生物和酶的问题。(10分)
高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高 温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。
( http: / / www.21cnjy.com )
44．①过程称为_______，②过程是为了__________。
45．Ⅰ号培养基称为____ ( http: / / www.21cnjy.com )_________(按功能分)；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分_____。
A．琼脂 B．葡萄糖 C．硝酸铵 D．碳酸氢钠
46．一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了__________________。
在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该 ( http: / / www.21cnjy.com )酶的最佳温度范围进行测定。图16中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图16中的曲线②。
47．根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是______。
A．40℃一50℃ B．50℃一60℃ C．60℃一70℃ D．70℃-80℃
1.据图判断下列叙述错误的是______。 A．该酶只能在最佳温度范围内测出活性 B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的 C．曲线①表明80℃是该酶活性最高的温度
D．曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降。
【答案】 44.稀释 单个菌落的筛选（或筛选） 45.选择培养基 C 46.杀死培养基中的细菌芽孢 47.C 48.A
【解析】 44.由图中显 ( http: / / www.21cnjy.com )示，在①前后试管中细菌数目减少，可推知此过程为稀释，②过程后使用划线法对细菌进行固体培养基培养，可推知此过程为分离纯化嗜热菌。
45.由图示可知表示过程是嗜热菌分 ( http: / / www.21cnjy.com )离纯化的过程，Ⅰ号培养基为选择培养基。在培养微生物的培养基中，碳源和氮源必不可少，所以除淀粉外还应加入硝酸铵。
46.细菌芽孢是在极端环境中产生的，具有耐高温等特点，只有用高温高压，才能杀死细菌芽孢，防止培养基污染。
47.在使用该酶时，应保 ( http: / / www.21cnjy.com )证活性较高、酶的热稳定性较好的温度范围。由图中数据可知，60℃~70℃符合要求。 48.酶活性受温度影响，在不同的温度下，都可以测定酶的活性，A错误；由曲线①可知，该酶的最适温度是80℃，曲线②中的数据是将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，对于B选项而言是将该酶在35℃下上时间保存，然后在80℃下测定该酶活性，B、C正确。曲线②显示，酶的热稳定性从30℃开始不断下降，在70℃后，急剧下降，D正确。
【试题点评】本题综合考查了微生物的 ( http: / / www.21cnjy.com )培养、分离、纯化的方法步骤，培养基的成分，常用的灭菌方法及其适用情况，酶发挥作用的适宜温度及温度与酶活性的关系等嫩荣，同时考查了学生的识图能力和分析问题的能力，难度不大。
2013年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
2013年普通高等学校招生全国统一考试(海南)
30. 【生物——选修1：生物技术实践】（15分）根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：
(l)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和__ __，以提高
萃取效率：水蒸气蒸馏法__ __（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是____；
鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用____法，并以____样品作为对照。
(2)若要提高衣物上血渍的去除 ( http: / / www.21cnjy.com )效果，可在洗衣粉中加入____酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的____或____；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加____酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是____。
30.【答案】 (1)干燥（1分） ( http: / / www.21cnjy.com ) 不适合（1分） 水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出（3分）纸层析（2分） 标准的胡萝卜素（2分）
(2)碱性蛋白（或蛋白）（1分）氨基酸（1分）小分子肽（1分）脂肪（1分）水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活（2分）
【解析】胡萝卜提取的流程和 ( http: / / www.21cnjy.com )评价及酶的应用。考查识记能力、分析和判断等能力。（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和干燥，粉碎是为了提高胡萝卜与萃取剂的接触面积，干燥是为了祛水，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏未能适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物持，不能随水蒸气蒸馏出，因此不胡萝卜素的提取不适用用水蒸气蒸馏法提取。胡萝卜素的鉴定，通常采用纸层析未能，可以用标准的胡萝卜素样品做对照，分析萃取样品是否含胡萝卜素和杂质。（2）加酶洗衣粉中添加了多种酶制剂，如碱性蛋白酶制剂和碱性脂肪酶制剂等。加酶洗衣粉中的碱性蛋白制剂可以使奶渍、血渍等多种蛋白质污垢降解成易溶于水的小分子肽或氨基酸；碱性脂肪酶制剂能将脂肪水解成易被水冲洗掉的甘油和脂肪酸，从而达到清除衣物上脂质污垢的目的。加酶洗衣粉的洗涤效果取决于酶的活性，酶的活性易受温度影响，低温会大大降低酶的活性，高温则可使酶变性失活。
(重庆卷）5.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是
A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害
B．在愈伤组织培培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
C．出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控
D．生根时，培养基通常应含 α-萘乙酸等生长素类调节剂
【答案】B
【解析】消毒剂的使用既要杀死表 ( http: / / www.21cnjy.com )面微生物，有防止伤害组织细胞，影响组织培养，A项正确；植物细胞融合是指经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体的诱导融合，带有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞，B 项错误；出芽和生根都是细胞再分化的结果，其实质是基因的选择性表达，C 项正确；α-萘乙酸为生长素类似物，可诱导愈伤组织生根，D 项正确。
【试题评价】本题考查植物组织培养相关知识和考 ( http: / / www.21cnjy.com )生的理解能力，涉及外植体的消毒、植物体细胞杂交、细胞分化及植物生长调节剂对组织培养的影响等内容，较易得分。
（江苏生物卷）6．下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是
A.可用包埋法制备固定化酵母细胞
B.反应产物对固定化酶的活性没有影响
C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同
D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
【答案】A
【解析】固定化技术包括包埋法、物理吸 ( http: / / www.21cnjy.com )附法和化学结合法（交联法），由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法， A正确；某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，B错误；固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上，实现酶的反复利用，并提高酶稳定性，酶的各项特性（如高效性、专一性和作用条件的温和性）依然保持，C错误；固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但如果反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应，D错误。
【试题评价】此题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，难度不大。
（江苏生物卷）11．某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是
A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗
B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗
C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上
D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养
【答案】B
【解析】茎段扦插、幼芽嫁 ( http: / / www.21cnjy.com )接、植物组织培养都是无性繁殖，可以大量快速得到与原有性状相同的个体，A、C、D均可选用；采用花粉粒离体培养可获得单倍体幼苗，但由于花粉粒为雄配子，发育来的单倍体植株会发生性状分离，不能保持亲代的优良性状，B错误。
【试题评价】此题考查无性繁殖及单倍体植株的特点，难度适中。
（江苏生物卷）14．某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是
A.酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B.先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C.与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D.适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
【答案】D
【解析】醋酸菌是嗜热菌， ( http: / / www.21cnjy.com )果醋发酵所需的最适温度较高，A错误；进行果酒、果醋发酵实验，要先进行隔绝空气果酒发酵，再供氧进行果醋发酵，B错误；人工接种菌种单一，自然发酵菌群丰富，风味及品质更好，C错误；适当加大接种量，让菌体快速形成优势菌群，可以抑制杂菌生长，提高发酵速率，D正确。
【试题评价】此题考查果酒、果醋发酵实验，内容基础，难度不大。
（江苏生物卷）17．将图中果酒发酵装置改装后用于探究酵母菌呼吸方式的实验， 下列相关操作错误的是
A.探究有氧条件下酵母菌呼吸方式时打开阀a
B.经管口3取样检测酒精和CO2的产生情况
C.实验开始前对改装后整个装置进行气密性检查
D.改装时将盛有澄清石灰水的试剂瓶与管口2连通
【答案】B
【解析】图中管口1为进气口，管口2为 ( http: / / www.21cnjy.com )排气孔，管口3可以检查液体中的成分，因此探究有氧条件下酵母菌的呼吸，应打开阀门a通入氧气，A正确；管口3可以检测酒精，管口2可以与澄清石灰水相连以检查CO2，因此B错误。
（江苏生物卷）18．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是 A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
【答案】B
【解析】在配制培养基的过程中要先灭菌后 ( http: / / www.21cnjy.com )倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般要隔天观察一次，D错误。
（全国课标卷Ⅰ）39．【生物——选修1 生物技术实践】（15分）
回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是 ( http: / / www.21cnjy.com ) 。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的 ( http: / / www.21cnjy.com )因素有 、 和 等。 （4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是： 。
【答案】（1）消灭杂菌 增加乳酸菌含量 （2 ( http: / / www.21cnjy.com )）无氧呼吸 细胞质 （3）温度、食盐用量、腌制时间 （4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少 乳酸菌比杂菌更为耐酸
【解析】
（1）盐水中可能含有杂菌，制作泡菜时，所用盐水需要煮沸，以便杀死盐水中的杂菌。陈泡菜中含有现成的乳酸菌，加入后，可以缩短制作时间。
（2）乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行无氧呼吸的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中。
（3）都泡菜的制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素有温度过高、食盐用量不足、腌制时间等。
（4）从开始制作到泡菜品质最佳 ( http: / / www.21cnjy.com )这段时间内，泡菜液逐渐发酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，其他杂菌较少；原因是酸性条件下，不利于杂菌生存，增加乳酸菌的数量。
【试题点评】本题通过考查泡菜制作的相关基础知识，主要考查识记能力和对相关知识的判断能力。
（全国课标卷Ⅱ）39.[生物——选修1：生物技术实践]
临床试用抗生素前，有时需要做细菌 ( http: / / www.21cnjy.com )耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题： （1）为了 ( http: / / www.21cnjy.com )从样本中获取致病菌菌落，可用____ ___法或______ ___法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用_____ _法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将 ( http: / / www.21cnjy.com )分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___ ____；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明____ ____；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的____ ____。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。
【答案】：（1）划线 稀释涂布（或涂布 ( http: / / www.21cnjy.com )） （2）涂布 （3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A弱 耐药菌 （4）A
【解析】：本题考查微生物的培养和应用。
（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。
（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。
（3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。
（4）实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。
（山东卷）34.(8分) 【生物-生物技术实践】
胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：
( http: / / www.21cnjy.com )
（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用 ( http: / / www.21cnjy.com ) 或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是 。
（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供
和 。
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时 ( http: / / www.21cnjy.com )，干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤。其目的是 。
（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为 。
【答案】（1）稀释涂布平板法 灭菌（防止杂菌污染） （2）碳源 氮源
（3）时间 水浴 滤去不溶物 （4）(实验)对照
【解析】（1）接种微生物的方法主要是稀释涂布 ( http: / / www.21cnjy.com )平板法和夹板划线法，接种过程为了避免其它杂菌的污染，要做无菌操作，所以接种前需对接种环灭菌操作。
（2）蔗糖主要提供碳源，当 ( http: / / www.21cnjy.com )然也可以作为能源物质，硝酸盐含氮元素，可提供氮源。 （3）温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂往往有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸；萃取后需将原料中不溶于萃取剂的成分滤去。
（4）提取出来的胡萝卜素往往不是纯的，用标准样品主要起一个对照的作用。
【试题评价】本题主要考查微生物培养、植物中有效成分提取等有关知识，意在考查考生识记和理解应用能力。
（四川卷）10．（12分） ( http: / / www.21cnjy.com )由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。
( http: / / www.21cnjy.com )
(1)图甲中，过程①需要的酶有___ ( http: / / www.21cnjy.com )__________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________。
(2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平 ( http: / / www.21cnjy.com )板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。
(3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和 ( http: / / www.21cnjy.com )普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。
（4）用凝胶色谱法分离α-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。
【答案】（1）限制性核酸内切酶、D ( http: / / www.21cnjy.com )NA连接酶 淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌 （2）稀释涂布平板法 涂布不均匀
（3）工程酵母 工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快 （4）小
【解析】本题考查选修本中相关知识，包括有基因工程、微生物的培养和发酵、蛋白质的提取和分离等。
（1）①步骤为将目的基因与运 ( http: / / www.21cnjy.com )载体连接，需要先用同一种限制性核酸内切酶分别切割质粒和目的基因，露出相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接为重组质粒；而在以淀粉为唯一碳源的培养基中，其他微生物难以利用淀粉而被抑制，从而筛选高效利用淀粉的工程酵母菌；重复筛选多次可以提高目的菌的纯度。
（2）图中平板培养后的结果，形成了多个菌落，因此为稀释涂布平板法，但是菌落分布不均匀，集中分布在一定区域，说明涂布不均匀。
（3）由于工程酵母菌能够更高效的 ( http: / / www.21cnjy.com )利用淀粉，因此在以淀粉为原料的培养条件下，可以更快的进行增殖和发酵，酒精发酵产生的二氧化碳较多，所以需要先排气。
（4）凝胶色谱法分离的原理是相对分子 ( http: / / www.21cnjy.com )质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。因此，移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较小。
【试题点评】本题以图像信息为载体，考 ( http: / / www.21cnjy.com )查基因表达载体构建所需的酶、选择性培养基、微生物接种方法、细胞代谢以及蛋白质分离，意在考查学生基本操作能力，难度不大。针对此类题型，复习时需要对重点的基本操作进行复习，或者让学生进行实际操作。
（海南生物卷）30. 【生物——选修1：生物技术实践】（15分）
根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶 ( http: / / www.21cnjy.com )应用方面的问题： (l)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和__ __，以提高萃取效率：水蒸气蒸馏法__ __（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是_ __ _；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用___ _法，并以__ __样品作为对照。
(2)若要提高衣物上血渍的去除效果 ( http: / / www.21cnjy.com )，可在洗衣粉中加入_ __酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的__ __或___ _；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加__ __酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是___ _。
【答案】(1)干燥（1分） ( http: / / www.21cnjy.com )不适合（1分） 水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出（3分）纸层析（2分） 标准的胡萝卜素（2分） (2)碱性蛋白（或蛋白）（1分） 氨基酸（1分）小分子肽（1分） 脂肪（1分）水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活（2分）
【解析】（1）萃取是将粉 ( http: / / www.21cnjy.com )碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中。水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带，说明提取胡萝卜素的实验成功。
（2）血渍中含有蛋白质，可 ( http: / / www.21cnjy.com )用含蛋白酶的洗衣粉洗涤。其原理是蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸。油渍的主要成分是脂肪，需用含脂肪酶的洗衣粉。水温过低抑制酶的活性，水温过高会使酶变性失活。
【试题点评】本题考查生物技术实践 ( http: / / www.21cnjy.com )中的相关内容，包括胡萝卜素的提取和鉴定，以及加酶洗衣粉的应用。考查内容比较基础，难度较小，掌握教材上的基础知识是解答本题的关键。
2014年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
（2014全国卷1）39、[生物—选修1：生物技术实践](15分)
植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分 ( http: / / www.21cnjy.com )泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_ 分解成_
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红 ( http: / / www.21cnjy.com )（CR)时，CR可与纤维素形成 _ 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌对，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的
（3）为从富含纤维素的上壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表)：
注：“+”表示有，“-”表示无。
据表判断，培养基甲_ _〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_ ；培养基乙_ 〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 。
39.[生物——选修1：生物技术实践]（15分）
（1）纤维二糖 葡萄糖
（2）红 透明圈
（3）不能 液体培养基不能用于分离单菌落
不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
（2014全国卷2）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样 ( http: / / www.21cnjy.com )中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是___________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为___________。
（2）该小组采用平板划线法分离水 ( http: / / www.21cnjy.com )样中的细菌，操作时，接种环通过___________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是___________。
（3）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株 ( http: / / www.21cnjy.com )接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。
【答案】 （1）检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×10
（2）灼烧； 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（3）B ⑷、溶解氧 营养物质
【解析】
（1）为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：
（2）接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是：通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到菌落。
（3）由题图可知B图为平板划线法接种的结果（菌落相对均匀分布）。
（4）震荡培养可以增加液体培养基的氧气含量，促进好氧型微生物的生长；另外震荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。
(2014江苏卷)30. (8 分)为了获得 茁鄄胡萝卜素产品,某小组开展了产 -胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。 请回答下列问题:
(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是 ;为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该 。
(2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是 。
(3)右图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙指示的依次是 。 (填序号)
①安全阀、放气阀、压力表 ②放气阀、安全阀、压力表
③安全阀、放气阀、温度表 ④放气阀、安全阀、温度表
(4)为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在 3 块相同平板上划线,结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长,最可能的原因是 。
(5)为增加 茁鄄胡萝卜素提取量,在研磨 ( http: / / www.21cnjy.com )酵母细胞时,添加石英砂的目的是 ;研磨时 (填“需要”或“不需要”)添加 CaCO3,理由是 。
答案30. (8 分)(1)干热灭菌和湿热灭菌(高压蒸汽灭菌) 用牛皮纸(报纸)包扎器皿
(2)抑制细菌(放线菌)生长 (3)淤 (4)接种环温度过高,菌被杀死
(5)有助于研磨充分 不需要 茁鄄胡萝卜素较耐酸
（2014山东卷）35.玉米是重要的粮食作物，深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：
（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水 ( http: / / www.21cnjy.com )解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_______法或稀释涂布平板法计数。
（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。
（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。
（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异 ( http: / / www.21cnjy.com )构酶基因时，需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。
【答案】（1）碳源；显微镜直接计数 （2）压榨；萃取（注:两空可颠倒)
（3）固定化酶 （4）(Taq)DNA聚合酶；复性(或退火)；延伸
【解析】
试题分析：（1）纤维素经 ( http: / / www.21cnjy.com )充分水解后的产物为葡萄糖，可为酵母菌的生长提供碳源，统计细菌数量的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个细菌，但菌落数往往比活菌的菌落数目低，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，另一种方法是直接计数法，这种方法要借助显微镜，且统计的数目也包括死亡的细菌。
（2）植物芳香油的提取方法有蒸馏、萃取和压榨等，由于玉米胚芽油不易挥发，故不能采用蒸馏法，宜采用压榨法和萃取法提取。
（3）利用固定化酶技术可使酶重复利用，从而降低生产成本。
（4）PCR技术中，因需要高温解旋，故需用耐高温的DNA聚合酶催化，每次循环包括变性、复性和延伸三个步骤。
（2014海南卷）30[生物—选修1：生物技术实践]（15分）
已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时 ( http: / / www.21cnjy.com )间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：
⑴请完善下列实验步骤。
①标准管的制备：用 和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。
②样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的 ，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。
③将每个 分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅 的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。
⑵右图表示的是泡菜中 趋势。
⑶泡菜制作过程中产酸的细菌主要是 （填“醋酸杆菌”或“乳酸菌”）。
【答案】（1）①不同浓度亚硝酸钠标准溶液 ②不同泡制天数的泡菜滤液 ③样品管 相同（近似） （2）亚硝酸盐 （3）乳酸菌
【解析】（1）在亚硝酸盐的含量测定 ( http: / / www.21cnjy.com )中，用不同浓度亚硝酸盐标准溶液和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管；用刻度移液管分别吸取一定量的不同泡制天数的泡菜滤液，加到不同的比色管，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管；将每个样品管分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅相近的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量（2）据图可知，该图表示亚硝酸盐的含量随发酵时间的变化曲线。（3）制泡菜时使用生物微生物是乳酸菌。
2015年普通高等学校招生全国统一考试 选修一汇总
（2015江苏卷）19.做“微生物的分离与培养” 实验时,下列叙述正确的是
A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上
答案：19.D
（2015江苏卷）20.下图为制备人工种子部分流程示意图,下列叙述正确的是
( http: / / www.21cnjy.com )
A.胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织
B.该过程以海藻酸钠作为营养成分,以CaCl 溶液作为凝固剂
C.可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖,为胚状体提供碳源
D.包埋胚状体的凝胶珠能够隔绝空气,有利于人工种子的储藏
答案：20.C
（2015江苏卷）31.(8分)人工瘤胃 ( http: / / www.21cnjy.com )模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。 为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:
(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是 _________ (填序号)。
①酒精灯 于培养皿 ③显微镜 ④无菌水
(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 _________ 。
(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养 基,需要用酒精棉球擦净的原因是 _________ 。
(4)刚果红可以与纤维素形成红色 ( http: / / www.21cnjy.com )复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见右图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的 _________ 有关。 图中 降解纤维素能力最强的菌株是 _________ (填图中序号)。
(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株 __ ___ 更适合用于人工瘤胃发酵，理由_ ______ 。 ( http: / / www.21cnjy.com )
答案31.(8分)
(1)③ (2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果
(3)避免培养基污染棉塞 (4)量与活性 ①
(5)J4 发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高
（2015上海卷）9．在涂布有大肠杆菌 ( http: / / www.21cnjy.com )的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图3。以下判断错误的是
A．a处抑菌效果小于b处 B．b处的滤纸片没有沥干
C．c处抗生素无效 D． d为对照
【答案】A
【解析】透明圈大的抑菌效果好，透明圈小的 ( http: / / www.21cnjy.com )抑菌效果弱。d为空白对照，与d处的比较可说明a处抑菌效果大于b处；A错误。B处透明圈不规则，可说明 b处的滤纸片没有沥干；B正确。C处的与d处相同，说明c处抗生素无效；C正确。
（2015海南卷）30．【生物－选修1：生物技术实践】（15分）
生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题：
（1）某同学用三种严的果胶酶进行三 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间，然后，洲定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）某同学取5组试管（A ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )～E）分别加入等量的同种果泥，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
【答案】（1）探究不同来源果 ( http: / / www.21cnjy.com )胶酶的活性 （2）4组的温度设置不合适 各组的酶促反应受两个不同温度影响 （3）不能 E组加入蒸馏水而不是缓冲液违背了单一变量原则
【解析】（1）根据题意， ( http: / / www.21cnjy.com )用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较，可见实验的自变量是果胶酶的来源不同，因变量是果胶酶的活性，所以该实验目的是探究不同来源果胶酶的活性。（2）根据实验设计可知，该实验是探究果胶酶的最适温度，所以自变量是温度，因变量是果胶酶的活性，用出汁量进行衡量，出汁量越多则果胶酶活性越高。该实验方案中，温度应该在常温范围内设置系列温度梯度且梯度差值相等，所以4组的温度应分别设置为15℃、20℃、25℃、30℃；另外探究温度对酶活性的影响时，应保证酶促反应只能在设定的温度下进行，同一实验组的反应温度只能是一个，所以实验操作应该是将各组盛有果胶酶的试管与盛有果泥的试管分别在设定温度下处理一定时间后再将两只试管混合，才能保证实验在设定的温度下进行。（3）根据题意，本实验的自变量是果胶酶的量，因变量是出汁量，对照实验的设计应遵循单一变量原则和对照原则，根据实验设置，通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，则E组应加入缓冲液而不是蒸馏水，使试管中液体体积与实验组相同，才符合实验设计应遵循的单一变量原则。
（2015 新课标Ⅱ）三、【生物--选修1：生物技术实践】
39．（15分）回答与胡萝卜素有关的问题：
（1）胡梦卜含有的胡萝卜素中，最主要的是 ( http: / / www.21cnjy.com ) （填“α﹣胡萝卜素”、“β﹣胡萝卜素”或“γ﹣胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子 ，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为 ，胡萝卜素是 （填“挥发性”或“非挥发性”）物质．
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时， （填“需要”或“不需要”）将鲜活的岩藻干燥．
（3）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的 作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是 ．
【答案】（1）β﹣胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性 （2）需要
（3）乙酸乙酯 萃取胡萝卜素的有机溶剂不与水混溶，而乙醇虽为有机溶剂但和水混溶：【解析】（1）胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )要的是β﹣胡萝卜素，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子维生素A，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为夜盲症，胡萝卜素是非挥发性物质．
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，需要将鲜活的岩藻干燥．
（3）萃取胡萝卜素的有机溶剂应该能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，故乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的乙酸乙酯作为胡萝卜素的萃取剂．
（2015年新课标卷1）39.已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于 染色。微生物A产生的油脂不易挥发 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。
【答案】：（1）苏丹III染液或者苏丹IV染液 萃取 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网" \t "_blank )法 （2）脂肪
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板 （4）45℃ 40℃、
【解析】（1）油脂可被苏丹III染液或 ( http: / / www.21cnjy.com )者苏丹IV染液染成橘黄色或红色。由于不易挥发，故采用萃取法。（2）脂肪酶的微生物B可以分解脂肪，故可以以脂肪为碳源的固体培养基进行培养，不产生脂肪酶的微生物无法生存。（3）微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，活菌用稀释涂布平板法。（4）45℃降解10g油脂所需酶量最大，故酶活性最小；40℃温度下降解10g油脂所需酶量最小，故酶活性最大，围绕40℃温度进行后续实验设计。
（2015山东卷）乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:
(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用_ ( http: / / www.21cnjy.com )________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是_________。从功能上讲,这种培养基属于_________。
(2)培养微生物L前,宜采用_________方法对接种环进行灭菌。
(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越_________。
(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共 ( http: / / www.21cnjy.com )价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的_________确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括_________、_________、离子吸附法及交联法等。
【答案】(1)乳糖 凝固剂 选择培养基 (2)灼烧 (3)小
(4)(酶)活性[或:(酶)活力] 包埋法 物理吸附法(注:两空可颠倒)
【解析】本题主要考查微生物 ( http: / / www.21cnjy.com )的筛选与培养及固定化酶的相关知识,意在考查考生的识记和理解分析能力。难度较小。(1)该选择培养基的唯一碳源应为乳糖,只有能利用乳糖的微生物能在该培养基上生存,而其他微生物将因缺乏碳源而无法生存,利用这个原理可以筛选产乳糖酶的微生物L;固体培养基中琼脂是很好的凝固剂;从功能上讲这种培养基属于选择培养基。(2)接种环的灭菌宜采用灼烧法。(3)电泳过程中若蛋白质所带电荷相同,则电泳速度只与蛋白质的分子量大小有关,蛋白质分子量越小,电泳速度越快。(4)固定化酶常要通过测定其活性来确定其应用价值;酶的固定化方法包括包埋法、化学结合法、物理吸附法等。
（2015年广东卷）泡菜是我国的传 ( http: / / www.21cnjy.com )统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”，查阅资料得到图11
（1）制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是__________________。乳酸发酵第一阶段的产物是___________。
（2）据图11，与第3天相 ( http: / / www.21cnjy.com )比，第8天后的泡菜更适于食用，因为后者______________；pH值呈下降趋势，原因是______________。
（3）该小组得到一株“优选”乳酸菌（亚 ( http: / / www.21cnjy.com )硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍），拟参照资料的实验方案和食盐浓度（4%-10%），探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定其最适条件。请你设计一个实验结果记录表，并推测实验结论。
【答案】 (1)创造无氧环境 丙酮酸、[H]、ATP
(2)亚硝酸盐含量低 乳酸菌的代谢产物大量积累,使pH下降
(3)如下表所示
注:其他条件相同且适宜
结论:“优选”乳酸菌的亚硝酸盐的含量比普通乳酸菌的低
【解析】本题主要考查乳酸菌的发酵过程以及实 ( http: / / www.21cnjy.com )验设计的相关内容,意在考查考生的理解能力、实验与探究能力和综合运用能力。(1)乳酸菌是厌氧微生物,在无氧条件下才能增殖和生长,进行各项生命活动。细胞呼吸的第一阶段是葡萄糖分解为丙酮酸的过程,该阶段的产物有丙酮酸、[H]和ATP。(2)据题图分析,在第3天时,亚硝酸盐的含量为40 mg/kg,而在第8天时,亚硝酸盐的含量只有5 mg/kg,故第8天后的泡菜更适于食用。由于乳酸菌的无氧呼吸产物是乳酸,而乳酸呈酸性,经过大量的积累会使pH下降。(3)三因子自变量的表格中,自变量分别是食盐的浓度、不同菌种、培养时间,观察指标是亚硝酸盐的含量,其他都是无关变量,应保持相同且适宜。表格中要有单位。
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