艺考生高考生物复习专题八细胞工程和基因工程练习课件(共40张PPT)

(共40张PPT)
非选择题
1.(2022·梅州一模)德尔塔变异株是目前新冠肺炎传播的主要变异株,中国研究员团队最新发现针对德尔塔变异株有效的单克隆抗体,为治疗新冠带来新希望。如图是单克隆抗体制备流程示意图,回答下列问题:
专题八　细胞工程和基因工程
第1讲　细胞工程　专项练习
（限时40分钟）
(1)用灭活新冠病毒给小鼠进行免疫处理时,需要注射2~4次的目的是 。
(2)图中的促融剂(化学试剂)为　　　　　　　　。淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是细胞膜具有　 　　　　　　。
(3)细胞融合完成后,只考虑两两融合,融合体系中有　　　种杂交细胞。能在HAT培养基上正常生长的细胞的特点是 。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,再进行阳性检测。
(4)单克隆抗体的主要优点是 。
为了获得更多能够分泌抗新冠病毒抗体的B淋巴细胞(浆细胞)
聚乙二醇(PEG)
3
(一定的)流动性
既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体
特异性强、灵敏度高、可能大量制备
【详解】　
(1)用灭活新冠病毒给小鼠进行免疫处理时,多次注射的目的是要获得更多能够分泌抗新冠病毒抗体的B淋巴细胞,保证成功获得所需要的杂交瘤细胞。
(2)图中的促融剂通常选择的为聚乙二醇(PEG),聚乙二醇不仅可以诱导植物细胞融合,也可诱导动物细胞融合。淋巴细胞和骨髓瘤细胞之所以能够融合成功依赖的是细胞膜的流动性。即本实验的原理是细胞膜具有一定的流动性。
(3)细胞融合完成后,若只考虑细胞两两融合,则融合体系中有3种杂交细胞。能在HAT培养基上正常生长的细胞的特点是杂交瘤细胞,这类细胞既能无限增殖也能产生专一抗体。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,再进行阳性检测,其目的是为了筛选出能产生相应抗体的杂交瘤细胞,即针对德尔塔变异株的抗体。
(4)单克隆抗体是用单个的效应B细胞和骨髓瘤细胞进行融合产生的杂交瘤细胞经过大量增殖、分泌出来的,然后从培养液中提取出来的,因此单克隆抗体具有的主要优点是纯度高,因而表现为特异性强、灵敏度高,而且可在体外条件下大量培养,因而可大量制备。
2.(2022·汕头二模)单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强、灵敏度高,并可大量制备。制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞融合技术。回答下列问题:
(1)制备单克隆抗体首先需要获得能分泌抗体的浆细胞和具有
　　　　　 能力的骨髓瘤细胞。诱导这两种细胞进行融合所依据的生物学原理是　　　　　　　　　　。
(2)细胞融合后,需用特定的选择性培养基进行第一次筛选,经筛选获得的细胞产生的抗体还不能确定是单克隆抗体,这是因为　　 　　　　　　　　。再经克隆化培养和抗体检测后,最终获得的杂交瘤细胞具有的特点是　　 　　　　　　　　。
无限增殖
细胞膜的流动性
从小鼠脾脏内提取的B淋巴细胞不止一种
既能无限增殖,又能产生专一抗体
(3)体外培养杂交瘤细胞时,所需CO2的主要作用是_________
_________;另外,应定期更换培养液,以便清除细胞代谢产物,防止　 　　　　　　　　　。
(4)有人提出,将经特定抗原刺激的B细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体,此方法　　　　　(填“能”或“不能”)获得既能分泌抗体、又能无限增殖的细胞,原因是______
_______________________________________。
调节培养液的pH值
细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害
因为无限增殖的基因在骨髓瘤细胞的细胞核中
不能
【详解】　
(1)制备单克隆抗体首先需要获得能分泌抗体的浆细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞。诱导这两种细胞进行融合所依据的生物学原理是细胞膜的流动性。
(2)经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,需用特定的选择性培养基进行第一次筛选,经筛选获得的细胞产生的抗体还不能确定是单克隆抗体,这是因为从小鼠脾脏内提取的B淋巴细胞不止一种,有可能是别的抗原免疫过的;所以需要进行克隆化培养和专一抗体检测后,最终获得的既能无限增殖,又能产生专一抗体的杂交瘤细胞。
(3)体外培养杂交瘤细胞时,所需CO2的主要作用是维持培养液的pH值;另外,在培养过程中应定期更换培养液,以便清除细胞代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害。
(4)因为无限增殖的基因在骨髓瘤细胞的细胞核中,将经特定抗原刺激的B细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中,该细胞无限增殖的基因,不能无限增殖,不能用来产生单克隆抗体,因此此方法不能获得既能分泌抗体、又能无限增殖的细胞。
3.(2022·梅州二模)科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛,要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图),请结合图示回答下列问题:
(1)通常用幼龄或早期胚胎进行动物细胞培养,原因是______
_________;
在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要利用_________________酶处理。
细胞分裂能力强
胰蛋白(或胶原蛋白)
(2)在对转基因奶牛细胞进行性别鉴定时最有效的方法是SRY-PCR法,该方法用牛Y染色体上的性别决定基因SRY作为特异性探针来检测PCR扩增产物,检测方法为　　 　　　技术,此过程需要设计引物,引物的作用是________________________
___________。
(3)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后,该母牛生出的犊牛与供体奶牛相比并不是100%的复制,原因可能是　
__________________。
(4)上述转基因奶牛的克隆成功,说明了动物　　　　 　具有全能性。
DNA分子杂交
为热稳定性DNA聚合酶提供结合位点
生物性状受细胞核基因和质基因的共同控制;生物的性状还受环境因素的影响
体细胞的细胞核
【详解】　
(1)通常用幼龄或早期胚胎进行动物细胞培养,原因是这类细胞的分化程度低,分裂能力强;将组织细胞分散成单个细胞,要利用胰蛋白酶处理。
(2)因为“该方法用牛Y染色体上的性别决定基因SRY作为特异性探针来检测PCR扩增产物”,可知是通过碱基互补配对来检测有无相应的杂交带,检测方法为DNA分子杂交技术,此过程需要设计引物,引物的作用是为热稳定性DNA聚合酶提供结合位点。
(3)由于生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制以及生物的性状还受环境因素的影响,所以重组胚胎移入受体母牛后,该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛,但也不是100%的复制。
(4)转基因奶牛的克隆成功,说明了动物体细胞的细胞核具有全能性。
4.(2022·肇庆二模)布朗瑞士奶牛的泌乳期长,产奶量高。某科技公司进行了布朗瑞士奶牛的冻胚移植,以本地母牛为受体。下图为该公司培育的过程示意图。请回答下列相关问题:
(1)图中①过程常用　　　　　激素促进布朗瑞士奶牛超数排卵。若采用人工授精,采集的精子要经过　　　　过程才能与处于　 　　　　期的卵子结合形成受精卵,然后将受精卵移入发育培养液中,目的是____________________
_________________。
(2)若布朗瑞士奶牛与布朗瑞士公牛自然交配,配种后第7天需用特制的冲卵装置将母牛体内的胚胎冲洗出来进行质量检查,此时胚胎发育时期为　　 　　　。
(3)图中④过程为　　　 　　,在此之前先要对本地母牛进行　　　　 处理。胚胎在本地母牛子宫内能够存活的生理学基础是　 　　　　。
促性腺
获能
MⅡ中(减数第二次分裂中期)
检查受精状况和受精卵的发育能力
桑椹胚或囊胚
胚胎移植
受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥
同期发情
【详解】　
(1)图中①过程常用促性腺激素促进布朗瑞士奶牛超数排卵。若采用人工授精,采集的精子要经过获能过程才能与处于MⅡ中期的卵子结合形成受精卵,然后将受精卵移入发育培养液中,目的是检查受精状况和受精卵的发育能力。
(2)若布朗瑞士奶牛与布朗瑞士公牛自然交配,配种后第7天需用特制的冲卵装置将母牛体内的胚胎冲洗出来进行质量检查,此时胚胎发育时期为桑椹胚或囊胚。
(3)分析图可知,图中④过程为胚胎移植,在此之前先要对本地母牛进行同期发情处理。胚胎在本地母牛子宫内能够存活的生理学基础是受体对外来胚胎基本不发生免疫排斥。
5.(2022·茂名二模)2021年4月15日,中外科学家团队在《细胞》上发表论文,宣布构建了世界上首个人—猴嵌合体。胚胎研究人员将人扩展多能性干细胞(人EPS细胞)注入到超过150个食蟹猴的早期囊胚中形成嵌合体胚胎。利用研究组新近开发的猴子胚胎体外培养体系,这些胚胎的存活时间达到了20天,这是目前猴子胚胎体外培养能达到的极限时长。此时嵌合体胚胎已经进入了原肠胚时期,也就是囊胚开始出现外胚层、中胚层和内胚层的分化。在外、中、内3个胚层中,科研人员都观察到了嵌合现象。据统计,人类细胞在食蟹猴胚胎中的嵌合效率大概在4%左右,但这些胚胎并未进行体内移植实验,由此也规避了一些可能存在的伦理争议。
(1)研究嵌合体的目的就是要培养一种与人类似的半同种或大部分同种器官,作为人类器官移植的供体。其器官的使用也可能有诸多风险和困难,在技术上最大的难关是　 　　　　,并保证能执行正常的器官功能。
(2)猴子胚胎体外培养的培养液成分一般都比较复杂,除一些无机盐、有机盐类、维生素、激素外,还需添加______________
____________。
(3)早期囊胚中沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞,称为　　　 　　,它们将来发育成　　 　　　。
(4)囊胚孵化后,再进一步发育,内细胞团表层的细胞形成　　　　　,下方的细胞形成　　　　　。
能否避免免疫排异
氨基酸、核苷酸、血清
滋养层细胞
胎膜和胎盘
外胚层
内胚层
(5)虽然胚胎嵌合研究获得了很多成果,但目前嵌合效率低是异种嵌合领域亟待解决的瓶颈问题。此前,科学家已经培养出了人—猪和人—鼠的嵌合体胚胎,但这些胚胎的嵌合效率很低。此次报道的人—猴嵌合体胚胎嵌合效率大概在4%左右,远远超过之前的人—猪和人—鼠的嵌合体胚胎。这种异种嵌合效率低的现象可能与_______________________________________________
__________________________________________________显著相关。
物种亲缘关系(发育时间不匹配、供体细胞竞争力不足、受到进化距离的影响、胚胎发育模式差异较大,等等)
【详解】　
(1)即使人—猴嵌合体胚胎孕育成猴子并可以获取器官,也难以移植,因为人源细胞少,会导致排异性很大,这样的器官在本质上还是一种异种器官。在器官移植中要尽可能减少免疫排异反应,并保证能执行正常的器官功能。
(2)哺乳动物胚胎的培养液成分一般都比较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分、以及血清等物质。
(3)桑椹胚进一步发育,细胞开始出现分化。聚集在胚胎一端,个体较大的细胞,称为内细胞团,将来发育成胎儿的各种组织,而沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞,称为滋养层细胞,它们将来发育成胎膜和胎盘。
(4)囊胚孵化后,再进一步发育,内细胞团表层的细胞形成外胚层,下方的细胞形成内胚层。这时的胚胎称为原肠胚,由内胚层包围的腔体叫原肠腔。
(5)此前,科学家已经培养出了人—猪和人—鼠的嵌合体胚胎,但这些胚胎的嵌合效率很低。此次的人—猴嵌合体胚胎嵌合效率大概在4%左右,远远超过之前的人—猪和人—鼠的嵌合体胚胎,这种现象与物种亲缘关系显著相关。
非选择题
1.(2022·广州一模)矮化育种能使水稻等作物品种具有抗倒伏和高产的优良特性,但同时会引起所育品种的氮肥利用率降低。研究发现,提高NGR5基因表达量既能保持矮化特征,又可以提高氮肥的利用率。为了进一步研究NGR5蛋白提高氮肥利用率的作用机制,研究人员利用酵母菌进行相关实验。回答下列问题。
第2讲　基因工程　专项练习
（限时40分钟）
(1)酵母菌需要转录因子(一类蛋白质)才能开始转录过程,某种转录因子由BD(DNA 结合结构域)和 AD(转录激活结构域)两部分组成,在具备相应条件时,BD与AD会靠拢并结合,激活特定基因的转录。据此推测,BD能识别特定基因前段的　　　　　并与之结合,但不能激活转录过程。
(2)研究人员将NGR5基因连接到含有编码BD多肽基因的表达载体中,随后使用一定方法处理酵母菌细胞,并将该表达载体导入其中,使其能表达　 。
碱基序列
BD-NGR5 融合蛋白
(3)提取水稻根部细胞的RNA,通过　　　　　过程获得大量的各种cDNA,随后将不同的cDNA片段连接到含有编码AD多肽基因的表达载体中,并导入上述酵母菌细胞,使其能表达不同的AD-Xn融合蛋白(“Xn”表示不同cDNA片段表达的多肽)。
(4)若Xn能与NGR5蛋白相互作用,则AD-Xn融合蛋白和BD-NGR5融合蛋白就会被牵引靠拢,促使BD与AD结合,激活标记基因的表达。这能使酵母菌将培养基中的某特殊物质转化为蓝色,因此可选择_________的菌落进行继续研究。
PCR扩增
变蓝
(5)为寻找能与NGR5蛋白相互作用的蛋白质,研究人员最终完成的实验如下表所示,设置3个对照组的目的分别是___________
_______________________________________________________。
确保BD与AD之间、BD-NGR5与AD之间、BD与AD-Xn之间不会相互作用
组别 表达的蛋白(多肽)1 表达的蛋白(多肽)2
对照组1 BD AD
对照组2 BD-NGR5 AD
对照组3 BD AD-Xn
实验组 BD-NGR5 AD-Xn
【详解】　
(1)由题可知,BD是DNA结合结构域,可推测BD能识别特定基因前段的碱基序列并与之结合,但是不能激活转录过程,需要和AD结合才能激活转录过程。
(2)将NGR5基因连接到编码BD多肽基因的表达载体中,导入细胞,使其进行转录和翻译,使其能表达BD-NGR5融合蛋白。
(3)PCR扩增过程利用DNA复制的原理,可获得大量的各种cDNA。
(4)标记基因被激活后,酵母菌可以将培养基中的某特殊物质转化为蓝色,所以变蓝色的菌落为两种蛋白融合的菌落,可以继续研究。
(5)由前面的题干可知,只有AD-Xn融合蛋白和BD-NGR5融合蛋白都存在时,才会相互作用,通过对照组1可以验证BD和AD蛋白不可以相互作用,对照组2可以确保BD-NGR5与AD之间不会相互作用,对照组3可以确保BD与AD-Xn之间不会相互作用。
2.(2022·深圳一模)里氏木霉能高效表达并分泌纤维二糖水解酶I(由cbh1基因编码)等多种蛋白质,且不会产生对人体有害的毒素。中国科学家用里氏木霉作为受体细胞成功表达出Nb20(一种高亲和性抗新冠病毒抗体)。操作流程如图。
回答下列问题:
(1)纤维二糖水解酶I是土壤微生物分解纤维素所需酶之一,推测里氏木霉在生态系统中的成分是　　　　　。与大肠杆菌相比,采用里氏木霉作为工程菌可以生产结构相对复杂的药用蛋白,推测其原因是__________________________________________
__________________________________________。
(2)pUC19质粒是经人工改造过的一种载体质粒,一般要利用　 技术扩增以备用。
分解者
PCR
里氏木霉是真核生物,具有各种细胞器,能对核糖体合成的蛋白质进行加工修饰并分泌到细胞外
(3)Nb20编码基因插入至cbhl基因启动子下游的目的是______
_____________________________________________________; 构建的表达载体还需要的结构有　
　 (答出两点即可)。
(4)培养液中非目标蛋白较多,导致目标蛋白(Nb20)的纯度和特异性不足,为提高目标蛋白的纯度,从基因角度思考,改造里氏木霉可采取的思路是　 。
标记基因、终止子;终止子、标记基因
对非目标蛋白质的编码基因进行基因敲除
利用cbhl基因启动子在里氏木霉细胞内转录出Nb20编码基因的mRNA
【详解】　
(1)纤维二糖水解酶I是土壤微生物分解纤维素所需酶之一,而里氏木霉能高效表达并分泌纤维二糖水解酶I,可推测里氏木霉在生态系统中的成分是分解者;与大肠杆菌相比,采用里氏木霉作为工程菌可以生产结构相对复杂的药用蛋白,推测其原因是里氏木霉是真核生物,具有各种细胞器,能对核糖体合成的蛋白质进行加工修饰并分泌到细胞外。
(2)pUC19质粒是经人工改造过的一种载体质粒,其化学本质是DNA,故一般要利用PCR技术扩增以备用。
(3)Nb20编码基因插入至cbhl基因启动子下游的目的是利用cbhl基因启动子在里氏木霉细胞内转录出Nb20编码基因的mRNA;构建的表达载体还需要的结构有标记基因、终止子、复制子、控制质粒转移的基因等。
(4)培养液中非目标蛋白较多,导致目标蛋白(Nb20)的纯度和特异性不足,为提高目标蛋白的纯度,从基因角度思考,改造里氏木霉可采取的思路是对非目标蛋白质的编码基因进行基因敲除。
3.(2022·汕头一模)中国首个自主知识产权抗新冠特效药:安巴韦单抗和罗米司韦单抗获批。这不仅意味着,我国有了第一个抗新冠的“特效药”,也标志着我国抗击新冠疫情进入了有特效药可用的全新阶段。
(1)2020年1月10日,我国科学家发布了全球首个新冠病毒的基因组测序结果。新冠病毒的遗传物质是RNA,因此在体外扩增病毒核酸时需要先进行　 。
(2)新冠病毒感染人体细胞取决于病毒棘突蛋白受体结合区域(RBD)与宿主细胞上血管紧张素转化酶2(ACE2)受体的结合。据此推测抗新冠特效药作用机制是___________________________
_______________________________________。
将病毒RNA合成DNA(逆转录、反转录)
阻断新冠病毒棘突蛋白受体结合区域(RBD)与人体细胞ACE2受体的结合
(3)在生产抗新冠的“特效药”单抗的过程中需要采取细胞融合技术,将致敏的B细胞和　　　　细胞融合形成　　　　细胞。
(4)对于任何一种疾病,预防是第一重要的,有了药,也要按要求接种疫苗。我国研制的重组新型冠状病毒疫苗在2021年2月25日获批上市,科研人员剔除了腺病毒中与复制相关的基因,再把新冠病毒棘突蛋白(S蛋白)的基因插入进去,该过程需要用的工具酶有　 　　　　。这个新插入的基因让重新组装的病毒进入人体后,在体内翻译出新冠病毒棘突蛋白,免疫系统发现棘突蛋白后会启动免疫应答,产生　 　　　　,下次碰到真的新冠病毒就会马上做出反应清除它们。
骨髓瘤
限制酶和DNA连接酶
杂交瘤
抗体和记忆细胞(或记忆细胞)
【详解】　
(1)体外扩增病毒核酸用PCR技术,故第一步应该进行逆转录。
(2)已知新冠病毒感染人体细胞的关键是病毒棘突蛋白受体结合区域(RBD)与宿主细胞上血管紧张素转化酶2(ACE2)受体结合,所以推测抗新冠特效药作用机制是阻断新冠病毒棘突蛋白受体结合区域(RBD)与人体细胞ACE2受体的结合。
(3)在单克隆抗体制备过程中的细胞融合,是将能分泌抗体的B细胞和无限增殖的骨髓瘤融合,形成具备二者优点的杂交瘤细胞。
(4)根据题干信息,“剔除了腺病毒中与复制相关的基因,再把新冠病毒棘突蛋白(S蛋白)的基因插入进去”,此过程需要用到限制酶剪切及DNA连接酶连接组合后的基因片段。新插入的基因让重新组装的病毒(重组疫苗)进入人体后,在体内翻译出新冠病毒棘突蛋白,免疫系统发现棘突蛋白后会启动免疫应答,产生抗体和记忆细胞(或记忆细胞),下次碰到真的新冠病毒就会马上做出反应清除它们。
4.(2022·广东省二模)图1是我国自主设计的“本地+移动”一站式新冠病毒核酸检测平台示意图,单平台混样日检测量可达13万人次。图2为RT-PCR(逆转录荧光PCR技术)的原理:PCR过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和淬灭基团(抑制荧光发出),当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。
图1
请回答下列问题:
(1)PCR技术的目的是　　 　　　。RT-PCR过程中,需先将RNA逆转录成cDNA,故装置中需添加的酶有　　　　　。
大量扩增目的基因片段,用于检测
图2
逆转录酶
(2)对新冠病毒进行检测时,探针的设计依据是____________
___________________探针与模板结合发生在PCR循环中的_________(选填“变性”“复性”或“延伸”)阶段。
(3)若监测系统检测到荧光信号,则可判定该检测样本为阳性,其原理是_______________________________________________
_________________________。
(4)为了在没有核酸检测的条件下及早发现新冠病毒,我国于2022年3月11日推出新冠病毒抗原检测试剂盒作为核酸检测的补充措施,该试剂盒的检测原理是_______________________。
一段已知目的基因的核苷酸序列
样本中的新冠病毒核酸会被探针识别,从而进行快速复制,导致其荧光信号倍增
复性
抗原抗体的特异性结合
【详解】　
(1)PCR技术的目的是大量扩增目的基因片段,用于基因工程或检测。以RNA为模板逆转录成cDNA,是逆转录过程,需要用到逆转录酶。
(2)探针是可以与模板结合的一小段DNA序列,故设计的依据是一段已知目的基因的核苷酸序列,变性过程是DNA双链打开的过程,复性时,引物与探针结合到模板DNA上。
(3)根据题意,当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。因此,样本中有新冠病毒核酸时,能进行快速复制,导致其荧光信号加强。
(4)因为抗原与抗体的结合具有特异性,新冠病毒抗原检测试剂盒的检测原理是抗原抗体的特异性结合。
5.(2022·深圳二模)新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)法是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。下图是RT-PCR两步法的过程图,在PCR扩增时加入能与目的基因(新冠病毒的核壳蛋白N基因)结合的荧光探针。目的基因合成越多,荧光信号越强,回答下列问题。
(1)构建cDNA文库时,会利用　　 　　　酶,将cDNA断开并与载体结合,然后把各个片段　　　　　到一个受体菌群中储存。cDNA文库构建的意义有_________________
_____________________________________________________
_______(回答1点)。
(2)在配置PCR扩增液时,加入的荧光探针序列:5'-TTGCT……
AGATT-3',如果模板中存在N基因序列,与探针结合的序列应该是5'　 　　　　3'。如果某人没有感染新冠病毒,则PCR时DNA实时荧光信号强度　　　　　(增强/减弱/不变)。
限制性内切核酸(限制)
在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势
导入(转入)
-AATCT……AGCAA-
不变
(3)我国前不久推出新冠病毒抗原检测的方法,相较核酸检测,方便简单,出结果较快,其原理是　 , 目前国家推广“抗原筛查,核酸诊断”的监测模式,如果取样中所含病原体数量较少时,核酸检测的优点是________________________________
______________。
抗原—抗体杂交
进行PCR扩增,使得核酸含量增多,结果更准确
【详解】　
(1)cDNA是RNA逆转录得到的DNA,用限制性核酸内切酶可以将cDNA切成不同的片段;再分别把各小段与载体结合,导入到一个受体菌群中,检测相应的菌落特征及菌株特性,建立cDNA文库;cDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势,从而使它在个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值,是研究工作中最常使用到的基因文库。
(2)RT-PCR是先将新型冠状病毒的RNA逆转录成cDNA,然后再进行PCR(体外DNA复制),探针能与N基因序列特异性结合,由于DNA的结构为反向平行的两条链,5'与3'互补配对,因此与探针结合的序列应该是5'-AATCT……AGCAA-3';PCR扩增时荧光探针被Taq酶切降解,使报告荧光基因和淬灭荧光基因基团分离,即每扩增一个DNA分子,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的积累与PCR产物形成完成同步,如果某人没有感染新冠病毒,无法进行PCR,则PCR时DNA实时荧光信号强度不变,即无法检测到荧光信号强度。
(3)新冠抗原自测试剂盒利用了抗原-抗体杂交原理,过程为:将新冠抗体 A 以条带状通过划或者喷在硝酸纤维素膜上,并干燥,胶体金标记另外一种新冠抗体 B 吸附在标金垫上,当我们的样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解标金垫上的胶体金标记抗体 B 后相互反应,再移动至固定有抗体 A 的区域时,如果我们的样本里面含有新冠病毒,则在试纸条上出线质控线与检测线2条线,如果不含有,则只出线质控线1条线;核酸检测要进行PCR扩增,使核酸数量增多,检测结果更准确,而抗原检测没有扩增,抗原含量少,因此抗原试剂盒检测没有核酸检测结果准确。