河南省郑州市十校2024-2025学年高二下学期期中联考 生物试题（有答案）
文档属性
| 名称 | 河南省郑州市十校2024-2025学年高二下学期期中联考 生物试题（有答案） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 795.1KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2025-04-23 23:16:01 | ||
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文档简介
2024-2025学年下期高二年级期中联考试题
生物学科
考试时间：75分钟满分：100分
注意事项：本试卷分试题卷和答题卡两部分，考生应首先阅读试题卷上的文字信息，然后在答题卡上作答（答题注意事项见答题卡）。在试题卷上作答无效。
第I卷（选择题，共50分）
一、单选题（本题共25个小题，每小题2分，共50分）
1.制作酸菜时加入“陈酸菜水”和5%的食盐水并在不同时间测定酸菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是
A.不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同
B.加入白酒可抑制杂菌生长和增加醇香，且能加快发酵速度
C.坛盖边沿的水槽“泡”中的气体是乳酸菌细胞呼吸产生的
D.检测亚硝酸盐含量的主要目的，是为了解乳酸菌的生长状况
2.下列关于腐乳制作的叙述，正确的是
A.豆腐经微生物发酵后味道更鲜美，但不便于保存
B.密封瓶口时将瓶口通过酒精灯的火焰可防止污染
C.加盐腌制后，毛霉可产生更多的蛋白酶和脂肪酶
D.发酵过程中所有的相关反应都是在微生物细胞内进行的
3.某同学向苹果汁中加入适量体积分数为3%的乙醇，利用高产菌株酿制苹果醋。下列叙述错误的是
A.发酵液中乙醇的浓度过高会抑制醋酸菌的繁殖
B.醋酸菌可以将加入苹果汁中的乙醇转化为醋酸
C.发酵时需要保持通气，温度控制在30～35℃
D.随着发酵的进行，发酵液的pH将逐渐增大
4.某研究小组从野生草本豆科植物中分离得到A和B两种根瘤菌菌株，欲探究二者的固氮能力，以用于生产根瘤菌肥。下列相关叙述正确的是
A.选择以NH4NO3为唯一氮源的培养基对根瘤菌进行培养
B.采用干热灭菌法对培养皿、涂布器、接种环等进行灭菌
C.琼脂中的多糖是微生物生长和繁殖不可缺少的营养物质
D.根瘤菌肥作为微生物肥料可增进土壤肥力、改良土壤结构
5.无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列说法错误的是
A.消毒和灭菌的主要目的是防止杂菌污染以获取纯净微生物培养物
B.利用寄生于细菌体内的微生物裂解细菌来净化污水属于生物消毒法
C.生物消毒与煮沸消毒不同，只能杀死物体表面或内部的一部分微生物
D.动植物细胞的DNA提取可以不在无菌条件下进行
6.啤酒的工业化生产过程如下：大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法错误的是
A.蒸煮过程可以产生风味组分，也可以对糖浆灭菌
B.酒精主要是在主发酵阶段由酵母菌的无氧呼吸产生
C.焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚，从而使淀粉酶失活
D.要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，最终得到成熟的啤酒
7.转录因子Ghl和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是
A.将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗
B.Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖
C.促进GhEl基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官
D.Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达
8.七叶一枝花是百合科的一种濒危名贵植物，以根茎入药。科研人员应用生物技术繁殖和保存七叶一枝花资源，并利用植物细胞工程获取其有效成分。下列叙述正确的是
A.提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生根
B.需用适宜浓度的酒精和次氯酸钠混合后对七叶一枝花的外植体消毒
C.七叶一枝花茎尖进行植物组织培养获得的幼苗不能抵抗病毒感染
D.可将悬浮培养的七叶一枝花细胞置于低渗溶液中涨破获取有效成分
9.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是
A.用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
B.植物组织培养的培养基中不需要添加有机物
C.植物组织培养利用了细胞的全能性，动物细胞培养也利用了该原理
D.植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细胞培养对光照无要求
10.人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞培养技术。下列说法正确的是
A.培养的细胞需定期用胰蛋白酶处理后才能继续增殖
B.将动物细胞置于含有95%O2和5%的CO2培养箱中培养
C.定期更换培养液可以为动物细胞提供无毒的环境
D.原代培养和传代培养的细胞都可以直接用离心法收集
11.抗体药物偶联物（ADC）是采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞精准的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如下图，有关叙述不正确的是
A.ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合
B.ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡
C.将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体
D.对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体
12.图1表示的是科学家获得iPS细胞（类似胚胎干细胞），再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程；图2表示利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞进而培育成的单倍体动物。下列叙述错误的是
A.单倍体胚胎干细胞具有发育全能性
B.成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的再分化过程
C.该技术培育成的单倍体动物可做为研究隐性基因功能的理想模型
D.通过添加特异性基因制备iPS的过程，可能有导致肿瘤发生的风险
13.制备哺乳动物膀胱生物反应器，用其获得人体特殊功能蛋白W的基本过程如下图所示。叙述正确的是
A.转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的遗传信息不同
B.步骤①和②所代表的操作分别是显微注射技术、受精卵获能
C.转基因的动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞中都能表达W基因
D.构建的基因表达载体中含有能在膀胱中特异表达的基因的启动子
14.由于胚胎发育率低，导致非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难。我国科学家经过反复实验，成功培育出了体细胞克隆猴，流程如图（图中Kdm4d组蛋白去甲基化酶，TSA是组蛋白脱乙酰酶抑制剂）。下列叙述错误的是
A.体细胞克隆猴的线粒体DNA完全来自于提供卵母细胞的母猴
B.去核操作其实是去除卵母细胞中的染色体-纺锤体复合物
C.用灭活的仙台病毒处理可使细胞膜上的蛋白质分子和磷脂分子重新排布
D.重构胚中组蛋白的甲基化水平降低、乙酰化水平提高可能会提高胚胎发育率
15.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①②③分别表示其对应的结果，下面说法正确的是
A.若a是胚胎分割技术，则①反映了动物细胞也具有全能性
B.若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
C.若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表型一定相同
D.①②③生产过程中的受体需用促性腺激素进行同期发情处理
16.下图为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述正确的是
A.农杆菌能在自然条件下侵染单子叶植物和裸子植物
B.③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C.④的染色体上若含抗虫基因，则③就表现出抗虫性状
D.基因工程造成的变异，相当于人为的基因重组，产生了定向变异
17.下表为四种限制酶所识别的核苷酸序列及相应的切割位置（箭头所指），下列叙述正确的是
A.不同的限制酶切割DNA分子形成的黏性末端一定不同
B.①②③④可催化磷酸二酯键和氢键断裂，形成黏性末端
C.②、③切出的末端连接后形成的片段，不能再被②或③识别切割
D.限制酶切割DNA分子一次可断开1个磷酸二酯键产生2个游离的磷酸基团
18.医生可利用分子生物学技术检测受检人是否携带HIV。下列叙述错误的是
A.可根据HIV的RNA序列合成小段DNA作为引物
B.血液样品中HIV的RNA经转录后进行PCR检测
C.与检测抗原、核酸相比，检测抗体能更早诊断HIV感染
D:可通过抗原—抗体杂交技术检测血液样品中HIV抗原
19.PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列下列叙述正确的是
A.该图表示PCR循环中的变性环节
B.PCR第四次循环要消耗15对引物
C.PCR技术不能用于检测目的基因是否转录出了mRNA
D.用图中引物扩增两个循环后即可获得添加限制酶切点的产物
20.研究人员将GNA基因和ACA基因连接成融合基因后，再与pB1121质粒载体结合并导入玉米细胞，最终获得了抗蚜虫玉米新品种。部分操作如图所示，下列叙述错误的是
A.由a和b生成c至少需要1种限制酶和1种DNA连接酶
B.为确保正确连接，切割c和d时需要使用KpnI和XhoI处理
C.在卡那霉素的培养基上存活下来的玉米细胞都成功转入了e
D.抗蚜虫玉米是否培育成功，需要进行个体生物学水平的检测
21.转基因作物的推广种植促使人们关注其安全性问题。下列叙述错误的是
A.转入抗性基因的植物可能成为“入侵物种”，影响生态系统的稳定性
B.抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染
C.若目的基因来自自然界，则培育出的转基因植物不会有安全性问题
D.大面积种植抗虫棉，有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增大
22.下列应用实例最可能造成生物技术安全性与伦理问题的是
A.对先天免疫缺陷症患儿的免疫细胞进行基因编辑后，回输给患儿进行治疗
B.利用干细胞培养具有单腔室结构的迷你跳动心脏，增加器官移植供体来源
C.利用人体的成纤维细胞转变成iPS细胞，进而利用iPS细胞治疗疾病
D.利用基因编辑技术设计试管婴儿，以期得到智力超群的婴儿
23.关于“DNA的粗提取与鉴定”（实验I）和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”（实验II）的实验操作，下列相关叙述正确的是
A.实验I，将白色丝状物直接加入二苯胺试剂中并沸水浴，用于鉴定DNA
B.实验II，凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小有关
C.实验I，在离心后肝脏研磨液的沉淀物中加入等量冷却的酒精溶液粗提取DNA
D.实验II，在紫外灯下观察DNA条带的分布及粗细程度可评价扩增是否成功
24.基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列说法错误的是
A.AI可帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系
B.AI预测新型蛋白质的结构和功能依据的原理是中心法则
C.可通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质
D.AI可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质
25.某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gta3基因一端，如图1所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，科研人员设计了引物用于PCR扩增，结果如图2所示。下列叙述不正确的是
A.基因表达时图1中基因的启动子区不能转录
B.Gata3基因的启动子可同时控制GFP基因的表达
C.选择引物1和引物3能更好地鉴定新生小鼠的杂合子和纯合子情况
D.2号条带的小鼠是转入Gata3-GFP融合基因的纯合小鼠，4号条带的小鼠是野生型
第II卷（非选择题，共50分）
二、非选择题（本题共包括4个小题，共50分，除注明外，每空均为1分，把案填写在答题卡中的横线上）
26.（14分）牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题:
实验步骤:
I、取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
II、培养基的配制和灭菌:
配制全营养LB固体培养基。配方:水、蛋白胨、酵母提取物、NaC1、琼脂糖（一种凝固剂）。配制尿素固体培养基。配方:水、葡萄糖、NaC1、K,HPO4、尿素、琼脂糖。
III、制备瘤胃稀释液并接种，如下图1所示。
IV、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
（1）全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质，除水外还有______。（至少答两点）
（2）该小组采用______法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下，利用该方法进行分离计数时，需要用到图2中的实验器材有______。
（3）为检测该培养基灭菌是否彻底，应采用的检测方法是______。为判断尿素培养基是否具有选择作用，实验时还需要同时接种全营养平板，如果同一浓度梯度下，尿素培养基上的菌落数______（“大于”、“等于”或“小于”）全营养培养基上的菌落数，则说明尿素培养基具有选择作用。
（4）若甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有_______（填序号）。①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照
（5）若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数如图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为______。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数______，原因是______。
27.（11分）紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如图（注:IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用）。
（1）该研究应用的生物技术所依据的原理是_______。
（2）植物细胞壁的主要成分是_______（答出两种），在获取原生质体时常采用相应的酶进行去壁处理。①过程的发生，必须进行人工诱导，人工诱导原生质体融合的化学方法有聚乙二醇（PEG）融合法、_______等。经过过程①，只有异源融合的原生质体能够存活的原因是________。
（3）百脉根富含单宁，单宁不是百脉生长和生存所必需的产物，属于______代谢物，在植物体内含量很低，化学合成困难。单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用被用于各类产品，可利用_______技术工厂化生产单宁。该方法需要将百脉细胞诱导成________，再筛选出________进行培养。
28.（10分）尼帕病毒（NV）是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白（X蛋白）可诱导动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。回答下列问题。
（1）制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括______和______。
（2）科研人员给小鼠注射X蛋白的目的是________。
（3）筛选杂交瘤细胞时一般在多孔细胞培养板上进行:先将细胞悬浮液稀释到7~10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是_________。
（4）图中符合生产的杂交瘤细胞具有_________的特点，将其筛选出来后要对其进行_____和抗体检测，最后从_______或_______中获取优质的单克隆中和抗体。
29.（15分）下图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程的图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中LacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题:
（1）过程①为了防止目的基因和质粒的自身环化，选用限制酶的最佳方案是________。
A.只有BamHI
B.BamHI和EcoRI
C.EcoRV和BamHI
D.EcoRV和EcoRI
（2）构建基因表达载体时，一般将目的基因插在启动子和终止子之间。启动子的作用是________。
（3）基因工程的四步程序是目的基因的获取、构建基因表达载体、________和目的基因的检测与鉴定。其中在构建基因表达载体时，所用载体除了质粒以外，还可以选择________、________。
（4）过程②处理大肠杆菌后，大肠杆菌处于________的生理状态。
（5）为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的培养基中额外加入________，培养一段时间后挑选出________（填“蓝色”或“白色”）的菌落进一步培养，从而获得大量目的菌。
（6）目的基因导入受体细胞后，常用________技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。
参考答案
一、选择题（本题共25个小题，每小题2分，共50分。）
1 2 3 4 5 6 7 8 9
A B D D C C B C D
10 11 12 13 14 15 16 17 18
C C B D A B D C C
19 20 21 22 23 24 25
D C C D D B C
二、非选择题（共50分，四大题，除标记外，每空均1分）
26.（14分）
（1）碳源、氮源、无机盐
（2）稀释涂布平板 ①③④（1分或0分）
（3）将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养，检验是否有菌落产生 （2分） 小于
（4）①②③（2分 少1个扣1分，少2个本小题得0分。写错1个本题得0分）
（5）3.5×1010个（2分） 少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（2分）
27.（11分）
（1）细胞膜具有流动性、植物细胞具有全能性（2分，对1个给1分）
（2）纤维素、果胶（写全给分，少写不给分） 高Ca2+—高pH融合法 异源融合的原生质体才能完整进行有氧呼吸的三个阶段可恢复生长并获得再生能力（2分，写出“融合的原生质体才能完成完整的呼吸作用”意思对即可）
（3）次生 植物细胞培养（2分） 愈伤组织 （稳定）高产单宁的细胞
28.（10分）
（1）动物细胞培养 动物细胞融合
（2）诱导小鼠产生能够分泌抗X蛋白抗体的B淋巴细胞（或抗NV抗体的B淋巴细胞）
（2分 抗X蛋白抗体、B淋巴细胞关键词必须写全给2分，否则0分）
（3）使每个培养孔尽量只接种一个杂交瘤细胞（2分）
（4）既能无限增殖，又能产生特异性的抗体（或“特异性”写成“所需抗体”，1分，写全给1分，否则0分） 克隆化培养 （细胞）培养液、小鼠腹腔中的腹水（或腹水）
29.（15分）
（1）B（2分）
（2）RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的进行（2分，答对1点给1分）
（3）将目的基因导入到受体细胞 噬菌体 动植物病毒
（4）容易吸收周围环境中 DNA 分子（2分）
（5）X-gal（2分） 白色（2分）
（6）抗原-抗体杂交（2分）
生物学科
考试时间：75分钟满分：100分
注意事项：本试卷分试题卷和答题卡两部分，考生应首先阅读试题卷上的文字信息，然后在答题卡上作答（答题注意事项见答题卡）。在试题卷上作答无效。
第I卷（选择题，共50分）
一、单选题（本题共25个小题，每小题2分，共50分）
1.制作酸菜时加入“陈酸菜水”和5%的食盐水并在不同时间测定酸菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是
A.不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同
B.加入白酒可抑制杂菌生长和增加醇香，且能加快发酵速度
C.坛盖边沿的水槽“泡”中的气体是乳酸菌细胞呼吸产生的
D.检测亚硝酸盐含量的主要目的，是为了解乳酸菌的生长状况
2.下列关于腐乳制作的叙述，正确的是
A.豆腐经微生物发酵后味道更鲜美，但不便于保存
B.密封瓶口时将瓶口通过酒精灯的火焰可防止污染
C.加盐腌制后，毛霉可产生更多的蛋白酶和脂肪酶
D.发酵过程中所有的相关反应都是在微生物细胞内进行的
3.某同学向苹果汁中加入适量体积分数为3%的乙醇，利用高产菌株酿制苹果醋。下列叙述错误的是
A.发酵液中乙醇的浓度过高会抑制醋酸菌的繁殖
B.醋酸菌可以将加入苹果汁中的乙醇转化为醋酸
C.发酵时需要保持通气，温度控制在30～35℃
D.随着发酵的进行，发酵液的pH将逐渐增大
4.某研究小组从野生草本豆科植物中分离得到A和B两种根瘤菌菌株，欲探究二者的固氮能力，以用于生产根瘤菌肥。下列相关叙述正确的是
A.选择以NH4NO3为唯一氮源的培养基对根瘤菌进行培养
B.采用干热灭菌法对培养皿、涂布器、接种环等进行灭菌
C.琼脂中的多糖是微生物生长和繁殖不可缺少的营养物质
D.根瘤菌肥作为微生物肥料可增进土壤肥力、改良土壤结构
5.无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列说法错误的是
A.消毒和灭菌的主要目的是防止杂菌污染以获取纯净微生物培养物
B.利用寄生于细菌体内的微生物裂解细菌来净化污水属于生物消毒法
C.生物消毒与煮沸消毒不同，只能杀死物体表面或内部的一部分微生物
D.动植物细胞的DNA提取可以不在无菌条件下进行
6.啤酒的工业化生产过程如下：大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法错误的是
A.蒸煮过程可以产生风味组分，也可以对糖浆灭菌
B.酒精主要是在主发酵阶段由酵母菌的无氧呼吸产生
C.焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚，从而使淀粉酶失活
D.要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，最终得到成熟的啤酒
7.转录因子Ghl和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是
A.将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗
B.Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖
C.促进GhEl基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官
D.Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达
8.七叶一枝花是百合科的一种濒危名贵植物，以根茎入药。科研人员应用生物技术繁殖和保存七叶一枝花资源，并利用植物细胞工程获取其有效成分。下列叙述正确的是
A.提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生根
B.需用适宜浓度的酒精和次氯酸钠混合后对七叶一枝花的外植体消毒
C.七叶一枝花茎尖进行植物组织培养获得的幼苗不能抵抗病毒感染
D.可将悬浮培养的七叶一枝花细胞置于低渗溶液中涨破获取有效成分
9.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是
A.用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
B.植物组织培养的培养基中不需要添加有机物
C.植物组织培养利用了细胞的全能性，动物细胞培养也利用了该原理
D.植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细胞培养对光照无要求
10.人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞培养技术。下列说法正确的是
A.培养的细胞需定期用胰蛋白酶处理后才能继续增殖
B.将动物细胞置于含有95%O2和5%的CO2培养箱中培养
C.定期更换培养液可以为动物细胞提供无毒的环境
D.原代培养和传代培养的细胞都可以直接用离心法收集
11.抗体药物偶联物（ADC）是采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞精准的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如下图，有关叙述不正确的是
A.ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合
B.ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡
C.将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体
D.对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体
12.图1表示的是科学家获得iPS细胞（类似胚胎干细胞），再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程；图2表示利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞进而培育成的单倍体动物。下列叙述错误的是
A.单倍体胚胎干细胞具有发育全能性
B.成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的再分化过程
C.该技术培育成的单倍体动物可做为研究隐性基因功能的理想模型
D.通过添加特异性基因制备iPS的过程，可能有导致肿瘤发生的风险
13.制备哺乳动物膀胱生物反应器，用其获得人体特殊功能蛋白W的基本过程如下图所示。叙述正确的是
A.转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的遗传信息不同
B.步骤①和②所代表的操作分别是显微注射技术、受精卵获能
C.转基因的动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞中都能表达W基因
D.构建的基因表达载体中含有能在膀胱中特异表达的基因的启动子
14.由于胚胎发育率低，导致非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难。我国科学家经过反复实验，成功培育出了体细胞克隆猴，流程如图（图中Kdm4d组蛋白去甲基化酶，TSA是组蛋白脱乙酰酶抑制剂）。下列叙述错误的是
A.体细胞克隆猴的线粒体DNA完全来自于提供卵母细胞的母猴
B.去核操作其实是去除卵母细胞中的染色体-纺锤体复合物
C.用灭活的仙台病毒处理可使细胞膜上的蛋白质分子和磷脂分子重新排布
D.重构胚中组蛋白的甲基化水平降低、乙酰化水平提高可能会提高胚胎发育率
15.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①②③分别表示其对应的结果，下面说法正确的是
A.若a是胚胎分割技术，则①反映了动物细胞也具有全能性
B.若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
C.若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表型一定相同
D.①②③生产过程中的受体需用促性腺激素进行同期发情处理
16.下图为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述正确的是
A.农杆菌能在自然条件下侵染单子叶植物和裸子植物
B.③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C.④的染色体上若含抗虫基因，则③就表现出抗虫性状
D.基因工程造成的变异，相当于人为的基因重组，产生了定向变异
17.下表为四种限制酶所识别的核苷酸序列及相应的切割位置（箭头所指），下列叙述正确的是
A.不同的限制酶切割DNA分子形成的黏性末端一定不同
B.①②③④可催化磷酸二酯键和氢键断裂，形成黏性末端
C.②、③切出的末端连接后形成的片段，不能再被②或③识别切割
D.限制酶切割DNA分子一次可断开1个磷酸二酯键产生2个游离的磷酸基团
18.医生可利用分子生物学技术检测受检人是否携带HIV。下列叙述错误的是
A.可根据HIV的RNA序列合成小段DNA作为引物
B.血液样品中HIV的RNA经转录后进行PCR检测
C.与检测抗原、核酸相比，检测抗体能更早诊断HIV感染
D:可通过抗原—抗体杂交技术检测血液样品中HIV抗原
19.PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列下列叙述正确的是
A.该图表示PCR循环中的变性环节
B.PCR第四次循环要消耗15对引物
C.PCR技术不能用于检测目的基因是否转录出了mRNA
D.用图中引物扩增两个循环后即可获得添加限制酶切点的产物
20.研究人员将GNA基因和ACA基因连接成融合基因后，再与pB1121质粒载体结合并导入玉米细胞，最终获得了抗蚜虫玉米新品种。部分操作如图所示，下列叙述错误的是
A.由a和b生成c至少需要1种限制酶和1种DNA连接酶
B.为确保正确连接，切割c和d时需要使用KpnI和XhoI处理
C.在卡那霉素的培养基上存活下来的玉米细胞都成功转入了e
D.抗蚜虫玉米是否培育成功，需要进行个体生物学水平的检测
21.转基因作物的推广种植促使人们关注其安全性问题。下列叙述错误的是
A.转入抗性基因的植物可能成为“入侵物种”，影响生态系统的稳定性
B.抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染
C.若目的基因来自自然界，则培育出的转基因植物不会有安全性问题
D.大面积种植抗虫棉，有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增大
22.下列应用实例最可能造成生物技术安全性与伦理问题的是
A.对先天免疫缺陷症患儿的免疫细胞进行基因编辑后，回输给患儿进行治疗
B.利用干细胞培养具有单腔室结构的迷你跳动心脏，增加器官移植供体来源
C.利用人体的成纤维细胞转变成iPS细胞，进而利用iPS细胞治疗疾病
D.利用基因编辑技术设计试管婴儿，以期得到智力超群的婴儿
23.关于“DNA的粗提取与鉴定”（实验I）和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”（实验II）的实验操作，下列相关叙述正确的是
A.实验I，将白色丝状物直接加入二苯胺试剂中并沸水浴，用于鉴定DNA
B.实验II，凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小有关
C.实验I，在离心后肝脏研磨液的沉淀物中加入等量冷却的酒精溶液粗提取DNA
D.实验II，在紫外灯下观察DNA条带的分布及粗细程度可评价扩增是否成功
24.基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列说法错误的是
A.AI可帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系
B.AI预测新型蛋白质的结构和功能依据的原理是中心法则
C.可通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质
D.AI可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质
25.某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gta3基因一端，如图1所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，科研人员设计了引物用于PCR扩增，结果如图2所示。下列叙述不正确的是
A.基因表达时图1中基因的启动子区不能转录
B.Gata3基因的启动子可同时控制GFP基因的表达
C.选择引物1和引物3能更好地鉴定新生小鼠的杂合子和纯合子情况
D.2号条带的小鼠是转入Gata3-GFP融合基因的纯合小鼠，4号条带的小鼠是野生型
第II卷（非选择题，共50分）
二、非选择题（本题共包括4个小题，共50分，除注明外，每空均为1分，把案填写在答题卡中的横线上）
26.（14分）牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题:
实验步骤:
I、取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
II、培养基的配制和灭菌:
配制全营养LB固体培养基。配方:水、蛋白胨、酵母提取物、NaC1、琼脂糖（一种凝固剂）。配制尿素固体培养基。配方:水、葡萄糖、NaC1、K,HPO4、尿素、琼脂糖。
III、制备瘤胃稀释液并接种，如下图1所示。
IV、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
（1）全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质，除水外还有______。（至少答两点）
（2）该小组采用______法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下，利用该方法进行分离计数时，需要用到图2中的实验器材有______。
（3）为检测该培养基灭菌是否彻底，应采用的检测方法是______。为判断尿素培养基是否具有选择作用，实验时还需要同时接种全营养平板，如果同一浓度梯度下，尿素培养基上的菌落数______（“大于”、“等于”或“小于”）全营养培养基上的菌落数，则说明尿素培养基具有选择作用。
（4）若甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有_______（填序号）。①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照
（5）若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数如图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为______。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数______，原因是______。
27.（11分）紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如图（注:IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用）。
（1）该研究应用的生物技术所依据的原理是_______。
（2）植物细胞壁的主要成分是_______（答出两种），在获取原生质体时常采用相应的酶进行去壁处理。①过程的发生，必须进行人工诱导，人工诱导原生质体融合的化学方法有聚乙二醇（PEG）融合法、_______等。经过过程①，只有异源融合的原生质体能够存活的原因是________。
（3）百脉根富含单宁，单宁不是百脉生长和生存所必需的产物，属于______代谢物，在植物体内含量很低，化学合成困难。单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用被用于各类产品，可利用_______技术工厂化生产单宁。该方法需要将百脉细胞诱导成________，再筛选出________进行培养。
28.（10分）尼帕病毒（NV）是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白（X蛋白）可诱导动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。回答下列问题。
（1）制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括______和______。
（2）科研人员给小鼠注射X蛋白的目的是________。
（3）筛选杂交瘤细胞时一般在多孔细胞培养板上进行:先将细胞悬浮液稀释到7~10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是_________。
（4）图中符合生产的杂交瘤细胞具有_________的特点，将其筛选出来后要对其进行_____和抗体检测，最后从_______或_______中获取优质的单克隆中和抗体。
29.（15分）下图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程的图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中LacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题:
（1）过程①为了防止目的基因和质粒的自身环化，选用限制酶的最佳方案是________。
A.只有BamHI
B.BamHI和EcoRI
C.EcoRV和BamHI
D.EcoRV和EcoRI
（2）构建基因表达载体时，一般将目的基因插在启动子和终止子之间。启动子的作用是________。
（3）基因工程的四步程序是目的基因的获取、构建基因表达载体、________和目的基因的检测与鉴定。其中在构建基因表达载体时，所用载体除了质粒以外，还可以选择________、________。
（4）过程②处理大肠杆菌后，大肠杆菌处于________的生理状态。
（5）为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的培养基中额外加入________，培养一段时间后挑选出________（填“蓝色”或“白色”）的菌落进一步培养，从而获得大量目的菌。
（6）目的基因导入受体细胞后，常用________技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。
参考答案
一、选择题（本题共25个小题，每小题2分，共50分。）
1 2 3 4 5 6 7 8 9
A B D D C C B C D
10 11 12 13 14 15 16 17 18
C C B D A B D C C
19 20 21 22 23 24 25
D C C D D B C
二、非选择题（共50分，四大题，除标记外，每空均1分）
26.（14分）
（1）碳源、氮源、无机盐
（2）稀释涂布平板 ①③④（1分或0分）
（3）将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养，检验是否有菌落产生 （2分） 小于
（4）①②③（2分 少1个扣1分，少2个本小题得0分。写错1个本题得0分）
（5）3.5×1010个（2分） 少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（2分）
27.（11分）
（1）细胞膜具有流动性、植物细胞具有全能性（2分，对1个给1分）
（2）纤维素、果胶（写全给分，少写不给分） 高Ca2+—高pH融合法 异源融合的原生质体才能完整进行有氧呼吸的三个阶段可恢复生长并获得再生能力（2分，写出“融合的原生质体才能完成完整的呼吸作用”意思对即可）
（3）次生 植物细胞培养（2分） 愈伤组织 （稳定）高产单宁的细胞
28.（10分）
（1）动物细胞培养 动物细胞融合
（2）诱导小鼠产生能够分泌抗X蛋白抗体的B淋巴细胞（或抗NV抗体的B淋巴细胞）
（2分 抗X蛋白抗体、B淋巴细胞关键词必须写全给2分，否则0分）
（3）使每个培养孔尽量只接种一个杂交瘤细胞（2分）
（4）既能无限增殖，又能产生特异性的抗体（或“特异性”写成“所需抗体”，1分，写全给1分，否则0分） 克隆化培养 （细胞）培养液、小鼠腹腔中的腹水（或腹水）
29.（15分）
（1）B（2分）
（2）RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的进行（2分，答对1点给1分）
（3）将目的基因导入到受体细胞 噬菌体 动植物病毒
（4）容易吸收周围环境中 DNA 分子（2分）
（5）X-gal（2分） 白色（2分）
（6）抗原-抗体杂交（2分）
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