2024~2025学年度第二学期期中调研试题
高二生物 2025.04
第Ⅰ卷（选择题 共43分）
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。
1.如图为微生物的实验室培养的有关操作，下列相关叙述错误的是
A.步骤①中，需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌
B.步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远
C.图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个菌落
D.接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数
2.为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，研究人员以冻牛粪为材料筛选出耐低温(10 ℃)的纤维素降解菌。下列相关叙述正确的是
A.初筛菌种前，要利用固体培养基在37 ℃条件下扩大培养目标菌种
B.用于筛选的培养基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白胨培养基
C.选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关
D.应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化
3.在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是
A.泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
B.制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料
C.葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋
D.果酒与果醋发酵时温度宜控制在18～25 ℃，泡菜发酵时温度宜控制在30～35 ℃
4.紫草宁是从紫草愈伤组织细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。下列关于植物细胞工程的说法，正确的是
A.植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢物
B.在离体条件下对紫草细胞进行培养使其增殖可以获得紫草宁
C.植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染
D.在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，可直接获得染色体加倍的细胞
5.束顶病毒能够引起香蕉的严重病害，科研人员用感病植株的茎尖作为外植体进行培养获得脱毒苗，实验结果如图所示。下列有关叙述正确的是
A.感病植株的茎尖需经灭菌处理后才能用于脱毒苗的培育
B.超低温保存感病植株茎尖可提高其脱毒率，降低成活率
C.培养过程中培养基常添加生长激素、细胞分裂素等激素
D.茎尖脱分化形成的愈伤组织是一团呈正方形的薄壁组织
团块
6.辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列相关叙述正确的是
A.实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变
B.①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控
C.通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现细胞的全能性
D.获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有
更强的抗病毒能力
7.如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是
A.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
B.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
C.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
D.制备单克隆抗体时可采用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法诱导细胞融合
8.甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异。下列相关叙述错误的是
A.可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的B淋巴细胞
B.在HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活
C.用96孔板培养和筛选杂交细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞
D.抗体检测呈阳性的杂交细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力
9.在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重组细胞，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂(TSA)处理，具体流程如图所示。下列相关叙述错误的是
A.常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核
B.去核时使用梯度离心、紫外光照射和化学物质处理等方法都没有穿透卵母细胞透明带
C.灭活的仙台病毒可使细胞质膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，利于融合
D.组蛋白去甲基化和乙酰化的表观遗传修饰都有利于重组细胞的分裂和发育
10.下列有关早期胚胎发育的叙述，错误的是
A.卵裂期每个细胞的核质比逐渐增大，胚胎中DNA总量逐渐增加
B.孵化是指透明带破裂，桑葚胚从透明带中伸展出来
C.滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定
D.在胚胎移植中，选择桑葚胚或囊胚期的胚胎进行移植较易成功
11.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是
A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
C.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同
D.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞
12.下列关于“DNA粗提取与鉴定”、“PCR扩增”、“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，正确的是
A.DNA粗提取过程中需使用预冷的体积分数75%的酒精溶液
B.将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，溶液即可变为蓝色
C.对1个双链DNA分子进行PCR扩增，第n次循环需要引物2 个
D.凝胶载样缓冲液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察
13.土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T－DNA片段转入植物的基因组。利用农杆菌以Ti质粒作为载体进行转基因，下列相关叙述正确的是
A.目的基因应插入T－DNA片段外，以防止破坏T－DNA
B.用Ca2＋处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞
C.Ti质粒是一种环状DNA分子，没有双螺旋结构
D.可以用DNA分子杂交技术检测外源DNA是否整合到植物的染色体DNA上
14.下列关于生物技术安全与伦理问题的叙述正确的是
A.如果有证据表明某种转基因食品有害，就应该禁止转基因技术的应用
B.利用转基因技术制造的新型致病菌具有极大的危害性，是因为人体不会对它们产生免疫反应
C.试管婴儿技术已经成熟，移植前可对胚胎进行遗传学诊断和基因改造
D.科学家将α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，从而防止
转基因花粉传播造成基因污染
二、多项选择题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
15.某研究性学习小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法正确的是
A.图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶
B.若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍
C.图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的
D.若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
16.SOD是一种广泛分布于各种细胞中的抗氧化酶，它能催化超氧阴离子自由基形成H2O2，增强植物的抗逆性。下图为培育能够产生SOD农作物新品种的一种方式，相关叙述错误的有
植物细胞(二倍体)新细胞愈伤组织胚状体―→新品种
A.①过程中最常用的方法是采用Ca2＋处理法将SOD基因导入植物细胞
B.②需要进行照光培养，以诱导叶绿素的形成
C.③表示再分化过程，无需严格的无菌操作
D.该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性
17.已知生物体内有一种转运蛋白Y，如果将蛋白Y中某一个氨基酸替换，改变后的蛋白质Y1不但保留了蛋白Y原有的功能，而且具备了酶的催化功能。下列说法错误的有
A.蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异
B.可以通过对Y蛋白基因改造或人工合成获得Y1蛋白基因
C.蛋白质工程操作过程中，不需要酶和载体
D.细胞内合成Y1蛋白与Y蛋白的过程中，遗传信息的流向是相反的
18.如图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述错误的有
A.过程①中除草剂抗性基因插入T－DNA中，导致T－DNA片段失活
B.过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化
C.过程②用Ca2＋处理，使农杆菌细胞壁通透性改变，处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
D.过程③应在培养基中加入除草剂和物质K
19.大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮PCR反应即可获得，第一轮加诱变引物和侧翼引物，第一轮产物作第二轮PCR扩增的大引物，过程如图所示。下列有关叙述错误的有
A.PCR扩增的定点诱变产物通常需要连接到载体分子上
才能表达出相应的性状，需具备启动子、终止子等结构
才能进行转录和翻译
B.单核苷酸的定点诱变所属变异类型为基因重组
C.第二轮PCR所用的引物都是第一轮PCR产物DNA的两条链
D.利用该技术将某功能蛋白的结构改变属于蛋白质工程
第Ⅱ卷（非选择题 共57分）
三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。
20.（11分）两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。请回答下列问题。
（1）过程①中普通小麦细胞和中间偃麦草细胞分别取多个的原因是 ▲ ，③要用到方法有 ▲ 两大类，过程②紫外线的作用是 ▲ ，原生质体不能在低渗培养液中培养，原因是 ▲ ，原生质体融合成功的标志是 ▲ 。
（2）杂种细胞通过过程④培养得到杂种植株要借助 ▲ 技术，该技术的原理是 ▲ ，操作过程中严格无菌的原因是 ▲ 。
（3）现采用特异性引物对普通小麦和中间偃麦草的基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，用于过程④培养的杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~4中一定是杂种植株的有 ▲ ，判断依据是 ▲ 。若要筛选得到耐盐的小麦，需要将杂种植株种植在 ▲ 的土壤中。
21.（12分）我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：
（1）动物细胞核移植过程中，通常采用卵（母）细胞作为受体细胞，原因可能是其细胞质中 ▲ 。用于核移植的供体细胞一般选用传代至10代内的细胞，原因是传至10代内的细胞 ▲ 。
（2）进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有 ▲ ，且在进行细胞原代培养时会出现 ▲ 现象。（2分）
（3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 ▲ 。图中过程⑤用到 ▲ 技术，其实质是早期胚胎在 ▲ 条件下空间位置的转移。除图中所示外，胚胎的来源还有 ▲ 。
（4）研究人员在确定去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d的mRNA的融合细胞，实验结果如上图所示。分析实验数据可知，Kdm4d的mRNA的作用是 ▲ （2分）。
（5）有人提出：将经特定抗原刺激的B淋巴细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体，此方法 ▲ （填“能”或“不能”）获得既能分泌抗体、又能无限增殖的细胞。
22.（12分）为了应对干旱和强降雨等灾害性天气，很多城市增设了雨水截流储存和利用的设施，如布设于道路周边或地势较低区域的生物滞留池。生物滞留池内土壤、植物和微生物等构成了小型生态系统。某城市道路生物滞留池内收集到的雨水含有高浓度污染物，其中的多环芳烃（PAHs）严重危害城市水环境。科研人员从解决污染问题和维护生态安全两方面考虑，在当地环境中筛选耐受菌，并通过转基因技术获得高效降解污染物的工程菌。请回答下列问题。
（1）经检测发现，生物滞留池内PAHs中的芘含量相对较高。科研人员尝试筛选能降解芘的菌种。
①筛选能降解芘的菌种的基本操作步骤如下。请将下列“方框”内字母后面的内容补充完整：
a ▲ ；b ▲ ；c ▲ ；d ▲ ；e ▲ 。
②在对培养基进行高压蒸汽灭菌时，发现灭菌锅内压力达到100kPa而温度未达到121℃，为同时达到设定的温度和压力要求，此时应该进行的操作是 ▲ （2分）。
③从对照区域和生物滞留池中分别培养出占比较高的菌属，结果如图1、图2所示。在两个区域中均能检测出的菌属有 ▲ 个，此结果能够说明滞留池土壤中微生物的 ▲ 出现了明显的变化。
④在另一个筛选对芘具有耐受性的菌株的实验中，分离得到四个菌属中的菌株，其生长曲线如图3所示。科研人员欲从中选择一个构建工程菌。结合图1、图2所示的结果，你认为应选择 ▲ ，理由是 ▲ 。
（2）科研人员将能高效降解芘的外源基因重组至所选受体菌的同时，还转入了含Lac启动子的核酸酶基因。在半乳糖苷分子的诱导下该启动子会被激活，表达的核酸酶会将自身遗传物质降解，进而发生菌体自毁。转入含Lac启动子的核酸酶基因在维护生态安全方面的意义是 ▲ 。
23.（10分）单克隆抗体免疫疗法能够抑制恶性肿瘤的发展。奥加伊妥珠单抗是一种新型的抗体—药物偶联物，由识别肿瘤细胞表面CD22蛋白的单克隆抗体和具有细胞毒性的卡奇霉素结合组成。卡妥索单抗是一种双特异性抗体，其制备原理与作用原理如图所示。
（1）一般无法通过只培养B淋巴细胞获取大量抗体，主要原因是 ▲ 。体外培养细胞时为保证无菌、无毒的环境，可采取的措施有 ▲ （答出两点即可）（2分）。
（2）制备卡妥索单抗时，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞A需要进行两步筛选，第一步筛选的方法和目的是 ▲ （2分）。杂交瘤细胞A和B融合后，可向培养液添加 ▲ （物质）用于筛选产生卡妥索单抗的杂交瘤细胞AB。
（3）奥加伊妥珠单抗在治疗肿瘤的过程中，单克隆抗体主要发挥 ▲ 的作用。单克隆抗体还被广泛用作诊断试剂，原因是 ▲ 。
（4）科研人员推测奥加伊妥珠单抗和卡妥索单抗联合给药对恶性肿瘤的抑制效果更好。为验证这一推测，某研究性学习小组设计如下实验方案：将培养好的癌细胞悬浊液对无胸腺裸鼠（简称裸鼠）进行皮下接种，接种后2周可观察各裸鼠背部长出肿块，证明实验接种成功；将上述处理的裸鼠随机分为2组：生理盐水组和奥加伊妥珠单抗+卡妥索单抗组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药后每两日测量并记录1次肿瘤体积。
请完善上述实验方案的不足之处： ▲ （答出两点即可）（2分）。
24.（12分）为筛选出宿主细胞中能与某病毒S蛋白特异性结合的受体蛋白，研究人员在S蛋白末端添加TAP标签，再利用该标签在病毒敏感细胞中纯化出S蛋白及其相互作用的蛋白质，如下图所示。请回答下列问题：
（1）S基因及TAP基因的体外扩增
①通过PCR体外扩增S基因时，应该在S基因的5'端引入 ▲ 和 ▲ 序列，并删除S基因3'端的 ▲ 编码序列。
②为了防止PCR反应中发生突变，常选择高保真Pyrobest DNA聚合酶，与一般的Taq DNA聚合酶相比，它具有3'到5'核酸外切酶活性，Pyrobest DNA聚合酶能防止发生突变的原因是 ▲ 。
③PCR一般要经历三十多次循环，在第一次循环之前，常进行预变性（95℃5min），目的是 ▲ 。
（2）重组质粒的构建
下表为四种限制酶的识别序列及切割位点：
限制酶 Xho l Sma l EcoR I BamH l
识别序列 ↓ 5'-CTCGAG-3' 3'-GAGCTC-5' ↑ ↓ 5'-CCCGGG-3' 3'-GGGCCC-5' ↑ ↓ 5'-GAATTC-3' 3'-CTTAAG-5' ↑ ↓ 5'-GGATCC-3' 3'-CCTAGG-5' ↑
由图可知TAP标签应该插入 ▲ 酶切位点之间，经限制酶切割后，为得到目标 DNA片段，还需要通过 ▲ 进行鉴定和纯化，再加入DNA连接酶完成质粒的环化。
（3）细胞转染使用特定转染试剂，将纯化后的重组质粒进行细胞转染，为保证实验的科学性，还需设置对照实验，具体做法为 ▲ 。
（4）融合蛋白的表达
①TAP标签含有特定的氨基酸序列，可用异硫氰酸荧光素标记的 ▲ 来检测融合蛋白的表达。
②研究发现，转染质粒之后融合蛋白的表达量较低，推测原因可能有 ▲
a.重组质粒pcDNA3.1-S-TAP在病毒敏感细胞中大量复制
b.S-TAP融合基因在病毒敏感细胞中转录出的mRNA量较少
c.病毒敏感细胞与病毒原宿主细胞的基因有不同的密码子偏爱性，翻译相应mRNA的tRNA数量不足
③若病毒敏感细胞在转染前感染过重组痘苗病毒，则共转染后发出荧光的细胞数量会明显增多，且荧光强度显著增强，原因可能是 ▲ （2分）。2024~2025学年度第二学期期中调研测试
高二生物参考答案 2025.04
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
答案 D C B B B C B D A B B C D D
二、多项选择题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
题号 15 16 17 18 19
答案 BC ABC ACD ABC BC
三、非选择题：本部分包括5题，共计57分，除备注外每空1分。
20.（11分）
（1）融合成功率不是100% 物理和化学 使中间偃麦草的染色体断裂
维持原生质体正常的形态和结构（或避免原生质体吸水涨破） 杂种细胞再生细胞壁
（2）植物组织培养 植物细胞全能性 外植体体积小，抗性差，对培养条件要求比较高；培养基营养丰富，一旦被污染，杂菌不但会争夺营养，且会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡 （答对一点即可得分）
（3）1、2、4 它们同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段 高盐
21.（12分）
（1）含有促进细胞核全能性表达（或发育）的物质 保持正常的二倍体核型
（2）血清 细胞贴壁生长和细胞接触抑制（2分）
（3）显微操作法 胚胎移植 相同生理环境 体外受精或转基因技术或体内受精或胚胎分割
（4）提高融合细胞发育成囊胚的成功率和囊胚中内细胞团的形成率（2分）
（5）不能
22．（12分）
（1） ①芘 培养基（培养皿﹑接种环等） 稀释涂布平板 酒精灯火焰（外焰） 菌落
② 打开排气阀，将锅内冷空气完全排尽后（1分）重新关上排气阀再加热（1分） ③3 种类及比例
④Pse Pse菌株在对照池和滞留池中均占比较大且对芘的耐受性较好
（2）防止转基因微生物逃逸到自然界，将实验带来的生态风险降到最低
23．（10分）
（1）B淋巴细胞不能无限增殖 对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；在无菌环境下进行操作；培养液需要定期更换（答出两点即可）（2分）
（2）用特定的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞（2分） EpCAM和CD3
（3）靶向运输（或靶向运载） 单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
（4）应补充单独添加奥加伊妥珠单抗和单独添加卡妥索单抗的两组给药实验组；在分组给药前应先测量每只小鼠的肿瘤体积并记录（2分）
24．（12分）
（1）Kozak序列 Smal识别序列 终止密码子 能切除不正确掺入的单核苷酸，并将其替换成正确的核苷酸 增加模板DNA分子彻底变性的概率
（2）EcoRI和BamHI 琼脂糖凝胶电泳
（3）使用PCDNA3.1空载体转染细胞，其余操作相同
（4）特定抗体 bc 重组痘苗病毒感染细胞后，细胞中合成了能与T7特异性结合的RNA聚合酶（2分）
