福建省厦门第一中学2024-2025学年高二下学期期中考试 生物试题（含答案）
文档属性
| 名称 | 福建省厦门第一中学2024-2025学年高二下学期期中考试 生物试题（含答案） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 724.2KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2025-04-25 11:34:30 | ||
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文档简介
福建省厦门第一中学2024—2025学年度第二学期期中考试
高二生物试卷
2025.4
第Ⅰ卷
本卷共20小题，每题2分，共40分。在下列各题的四个选项中，只有一个选项是正确的。请将答案填涂在答题卡上。
1．下列操作中，不能从特定的培养基中分离出目的菌的是
A．利用不含氮源的培养基，可以分离出土壤中的固氮细菌
B．利用不含氮源的培养基，可以分离出土壤中的硝化细菌
C．利用仅以尿素作为唯一氮源的培养基，可以分离出土壤中能分解尿素的细菌
D．利用仅以纤维素作为唯一碳源的培养基，可以分离出土壤中能分解纤维素的细菌
2．虾酱由小型低值虾经过加盐混合、捣碎、发酵而成。科研人员从虾酱中分离出若干菌株，发现耐盐菌株FELA1能高效产生蛋白酶和脂肪酶。下列叙述错误的是
A．虾酱制作过程中需要对原料和器皿进行严格灭菌处理
B．菌株FELA1能将原料分解为多肽、氨基酸、脂肪酸等风味物质
C．制作时加入盐的目的是抑制杂菌生长，同时调整虾酱的口味
D．对分离出的耐盐菌株FELA1进行研究有利于提升虾酱的品质
3．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法错误的是
A．倒成平板后无需再进行灭菌处理
B．倒成平板后无需接种可判断有无污染
C．图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙
D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选
4．植物组织培养过程中，需要用到①诱导愈伤组织培养基、②诱导生根培养基和③诱导生芽培养基。下列有关这3种培养基以及菊花组织培养的叙述，正确的是
A．菊花的幼茎茎段在离体培养过程中，最后用到的培养基是③
B．若接种的外植体是花药，则离体培养得到的植株都是单倍体
C．培养基中含有营养物，故诱导愈伤组织、生根、生芽期间都不需要光照
D．单倍体育种、转基因植物培育、植物体细胞杂交都离不开植物组织培养
5．科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。
下列叙述正确的是
A．愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的
B．获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状
C．用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体
D．可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生
6．无糖组织培养技术，通常以珍珠岩或蛭石代替琼脂作为支撑物，加入无蔗糖培养液，用CO 代替糖作为植物体的碳源，是更接近植物自然生长状态的一种新型植物组织培养技术。下列说法错误的是
A．该过程必须选用具有一定叶面积的外植体
B．该技术也需要经历脱分化和再分化过程
C．该技术由于去除蔗糖，减少了微生物污染率
D．自养微生物可在无蔗糖培养液中繁殖并形成菌落
7．从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如右图。下列叙述正确的是
A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．直接用离心法收集细胞进行传代培养
C．选取①的细胞进行传代培养比②更合理
D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
8．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如右图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③表示其结果。下列说法正确的是
A．若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性
B．若b为体外受精，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
C．若c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同
D．①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
9．下列关于“克隆羊”与“试管羊”的叙述，正确的是
A．克隆羊和试管羊都是无性生殖的产物
B．培育克隆羊需要进行核移植，培育试管羊需要进行体外受精
C．培育克隆羊是细胞水平的技术，培育试管羊是DNA分子水平的技术
D．克隆羊的遗传物质仅来自提供细胞核的亲本，试管羊的遗传物质来自双亲
10．如图是单克隆抗体制备流程的示意图。下列叙述正确的是
A．细胞①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的记忆B细胞
B．过程②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C．细胞③同时具有脾脏细胞和小鼠骨髓瘤细胞的特性
D．经过程④筛选可获得能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞
11．如图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列叙述正确的是
A．Ⅰ时期为桑葚胚，该时期的细胞具有全能性
B．Ⅱ与Ⅰ时期的胚胎相比，细胞数目增
多，有机物的含量增多
C．胚胎移植选择处于Ⅱ或Ⅲ时期的胚胎最易成功
D．细胞分化从Ⅲ时期开始贯穿于动物的整个生命历程
12．如图表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。下列叙述错误的是
A．获得动物1的受体细胞通常是受精卵
B．动物2体内各体细胞的基因种类相同
C．获得动物3的重组细胞具有全能性
D．上述动物的获得均需运用胚胎移植
13．采用基因工程技术培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列说法正确的是
A．该转基因羊的所有细胞都含有人凝血因子基因并可以正常表达
B．将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器
C．与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛
D．该转基因羊无法将人凝血因子基因传递给后代
14．下图为利用基因工程培育抗虫植株的示意图。以下叙述正确的是
A．②的构建需要限制酶和DNA聚合酶参与
B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
15．如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图。下列说法错误的是
A．图1中用玻璃棒卷起的丝状物为粗提取的DNA
B．图1所示操作的原理是DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精
C．图2试管1的作用是证明加入2mol·L-1NaCl溶液遇二苯胺才会出现蓝色
D．图2试管2中未将DNA溶于2mol·L-1NaCl溶液中，可能导致蓝色变化不明显
16．环境雌激素（EEs）会影响动物和人类的性腺发育。斑马鱼在EEs的诱导下，会表达出卵黄蛋白原（vtg）。已知绿色荧光蛋白（GFP）基因能使斑马鱼发光，欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼，下列操作合理的是
A．将vtg基因的启动子与GFP基因重组 B．将GFP基因的启动子与vtg基因重组
C．将EEs基因的启动子与GFP基因重组 D．将GFP基因的启动子与GFP基因重组
17．若要利用某目的基因（见图甲）和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA（见图丙），限制酶的酶切位点分别是BglⅡ（A↓GATCT）、EcoRⅠ（G↓AATTC）和Sau3AⅠ（↓GATC）。下列分析合理的是
A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因P1噬菌体载体
C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因P1噬菌体载体
D．用EcoRI和Sau3AI切割目的基因和P1噬菌体载体
18．为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是
A．①+③ B．①+② C．③+② D．③+④
19．“脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术，通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元，科学家可以了解大脑的活动。研究者设计如图所示的DNA片段，转入小鼠体内，获得每个细胞仅含一个图示片段的转基因小鼠。Cre酶是该技术的关键酶，能随机识别两个相同的loxP序列，并将两段序列之间的DNA敲除。下列说法正确的是
注：仅表达与启动子相邻的荧光蛋白基因。
A．启动子M应当是一种只有脑组织中启动基因表达的启动子
B．在没有Cre酶存在的条件下，小鼠某脑神经元活动时，发出荧光的颜色可能有3种
C．在有Cre酶存在的条件下，小鼠某脑神经元活动时会发出红色或蓝色的荧光
D．向小鼠细胞中转入图示基因时，应用PEG对受精卵细胞进行预处理
20．某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌、雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列分析错误的是
A．Gata3基因的启动子也能控制GFP基因的转录
B．由图乙可知，1、2、3号均为转基因小鼠
C．由图乙可知，2号为Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
第Ⅱ卷
本卷非选择题，共5题，共60分。请将答案写在答题卷上
21．（12分）营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。以下是实验人员利用“影印法”初检氨基酸缺陷型菌株的过程。回答下列问题：
（1）过程①的接种方法为_____。从培养基成分分析，基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。
（2）②过程相当于_____，最终可以从_____培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。
（3）为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取菌落_____（A/B）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养1~2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的_____培养基，待其冷凝后用记号笔在_____（皿盖/皿底）划分A、B、C、D、E五个区域。
③在划分的五个区域对应的培养基上放入少量分组的氨基酸粉末（如表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
组别 氨基酸种类
A 组氨酸 苏氨酸 谷氨酸 天冬氨酸 亮氨酸
B 精氨酸 苏氨酸 赖氨酸 甲硫氨酸 苯丙氨酸
C 酪氨酸 谷氨酸 赖氨酸 色氨酸 丙氨酸
D 甘氨酸 天冬氨酸 甲硫氨酸 色氨酸 丝氨酸
E 半胱氨酸 亮氨酸 苯丙氨酸 丙氨酸 丝氨酸
在上述鉴定实验中，发现在培养基A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于_____缺陷型。
22．（11分）甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：
（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原因是_____。
（2）若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是_____（字母）。
A．已转入抗性基因B．具有完整的细胞核C．具有叶绿体
（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，不同结果的出现主要是由培养基中_____两种激素用量的不同造成的；此外，光照条件也很重要，图中_____（字母）结果在培养过程中需要适当的光照处理。请再写出一个培养过程中需要注意的事项：_____。
（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖。在培养时，能否采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体 如果可能，请用流程图写出培养过程；如果不能，解释其原因。_____。
23．（12分）脂联素（APN）是蛋白类激素。血清中APN的含量可直接反映人体健康情况，低水平的APN可能与肥胖、糖尿病、心血管疾病等相关。开发APN的快速检测方法具有重要的意义。回答下列问题：
（1）科研人员通过多次注射_____对实验小鼠进行免疫，从免疫小鼠的脾中收集_____细胞与骨髓瘤细胞混合，并加入_____（试剂）促进融合，经选择、培养，最终在培养液中提取分离得到A1、A2、A3等多种抗APN的单克隆抗体。
（2）为确定A1、A2、A3的抗原结合位点是否相同，将等量A1、A2、A3分别固定于反应体
系中并结合APN，再分别加入酶E标记的A1、A2、A3，反应后洗掉未结合抗体，加入酶E的底物（可被酶E催化发生显色反应），通过与对照组比较颜色变浅的程度计算出结合抑制率，结果如表（以抑制率50%为界值进行实验数据分析）。该实验所得结论是_____。
抑制率（%） E酶标抗体
A1 A2 A3
固相抗体 A1 61 23 33
A2 18 71 56
A3 27 63 73
（3）传统的双抗夹心法可以快速检测样本中有无特定抗原，原理如图1。当胶体金停留在T线或C线，将显现出红色。当T线和C线是_____，为阳性结果；当T线和C线是_____，为阴性结果。（填写字母）
A．T线显现红色 B．T线不显色 C．C线显现红色 D．C线不显色
（4）有人在此基础上研发了双抗夹心法分段半定量检测，如图2。三条T线（T1、T2、T3）分别包埋一定量的相同抗体。
①利用上述研究获得的单克隆抗体对血清中APN半定量检测，在图2的金垫、T线、C线包埋的抗体分别是：A2、_____（A1/A2/A3）、抗A2的抗体。
②检测结果：若检测线的显色结果为_____，则说明APN的相对含量越多。
24．（11分）S蛋白是新冠病毒（SARS-CoV-2）感染机体的关键组分，也是研制新冠疫苗的关键起点。下图为某科研团队以缺失E1等基因的人复制缺陷腺病毒（E1基因是腺病毒基因组复制的关键基因）为载体的新冠疫苗研制流程示意图。
回答下列问题：
（1）构建基因表达载体时需要插入启动子，启动子的基本组成单位是_____，能识别启动子的酶是_____。
（2）HEK细胞是一种特殊的人胚胎肾源细胞，在该细胞中，质粒Ⅰ和质粒Ⅱ可进行同源重组形成含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒。为保证上述重组腺病毒能够大量复制，HEK细胞应含有_____基因及其表达产物。对获得的重组腺病毒除用PCR检测S蛋白基因外，还需要用_____（方法）检测S蛋白。
（3）图中将含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒进行扩大培养的操作是_____。
（4）与复制型腺病毒相比，利用复制缺陷重组腺病毒为载体制备成的疫苗具有更高的安全性，其原因是_____。
25．（14分）科学家欲从紫苏中提取DGAT1基因（催化油脂合成的关键酶基因），导入到四尾栅藻细胞，获得转基因油脂高产四尾栅藻，质粒pCAMBIA与PCR扩增出的DGAT1酶切位点如图所示。现有BamHⅠ、BglⅡ、EcoRⅠ三种限制酶，它们识别并切割的碱基序列如表（↓表示切割位置）。
BamHI 5'-G↓GATCC-3'
BglII 5'-A↓GATCT-3'
EcoRI 5'-G↓AATTC-3'
回答下列问题：
（1）从紫苏组织细胞中提取总RNA时，需要加入RNA酶抑制剂，目的是_____。过程①需要_____酶的催化，过程②通过PCR技术实现，进行PCR时，需要在两种引物的_____端（5'/3'）添加限制酶BglⅡ的识别序列。
（2）启动子往往具有物种特异性，在载体pCAMBIA质粒中插入紫苏DGAT1基因，其上游启动子应选择_____（紫苏/大肠杆菌/四尾栅藻）启动子。
（3）用限制酶BglⅡ切割DGATl，用限制酶_____切割pCAMBlA，将充分酶切后的产物混合，加入DNA连接酶进行连接。若只考虑DNA片段两两连接的环状产物，对其进行DNA电泳可得到_____个条带。回收电泳凝胶中大小约为_____bp的DNA对大肠杆菌进行转化，用含有_____的培养基进行筛选并提取重组质粒。最终获得的重组质粒不一定符合要求，原因是_____。
（4）为进一步筛选出符合要求的重组质粒，选用限制酶EcoRⅠ对不同的重组质粒进行酶切处理，得到的电泳结果如图所示，其中组重组质粒为所需质粒。（已知质粒pCAMBIA中EcoRⅠ的酶切位点与BamHⅠ的酶切位点间的最短距离为600bp）
高二（下）生物期中考试参考答案
1-5：BACDC 6-10：DDBBD 11-15：ABCDC 16-20：ADBAD
21．（12分）
（1）稀释涂布平板法（1分） 氨基酸（1分）
（2）接种（1分） 完全（2分）
（3）①A（2分） ②基本（2分） 皿底（1分） ③天冬氨酸（2分）
22．（11分）
（1）绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性（2分），在一定条件下能发育成完整的植株
（2）B（1分）
（3）细胞分裂素、生长素 B、C 无菌条件、适宜的温度和PH、外植体不能倒插等
（4）不能 用花粉粒进行组织培养得到的花卉是单倍体，基因型不同于原杂合体（2分）
23．（12分）
（1）APN（脂联素）（1分） B淋巴（细胞）（1分） PEG（1分）
（2）A2、A3结合同一抗原位点，A1结合另一抗原位点（2分）
（3）AC（2分） BC（2分）
（4）A1（1分） 红色条带数量越多（2分）
24．（11分）
（1）脱氧核苷酸（1分） RNA聚合酶（1分）
（2）E1（2分） 抗原-抗体杂交（2分）
（3）先在体外大量培养HEK细胞（1分），然后接种含s蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒（2分），继续培养一段时间
（4）该疫苗不会在人体细胞中复制（2分）25．（14分）
（1）防止RNA酶催化RNA分解（1分） 逆转录（1分）5’（1分）
（2）四尾栅藻（1分）
（3）BamHI（1分） 3（2分） 3200（2分） 卡那霉素（1分） 重组质粒中目的基因存在正向连接和反向连接两种情况（2分）
（4）A（2分）
高二生物试卷
2025.4
第Ⅰ卷
本卷共20小题，每题2分，共40分。在下列各题的四个选项中，只有一个选项是正确的。请将答案填涂在答题卡上。
1．下列操作中，不能从特定的培养基中分离出目的菌的是
A．利用不含氮源的培养基，可以分离出土壤中的固氮细菌
B．利用不含氮源的培养基，可以分离出土壤中的硝化细菌
C．利用仅以尿素作为唯一氮源的培养基，可以分离出土壤中能分解尿素的细菌
D．利用仅以纤维素作为唯一碳源的培养基，可以分离出土壤中能分解纤维素的细菌
2．虾酱由小型低值虾经过加盐混合、捣碎、发酵而成。科研人员从虾酱中分离出若干菌株，发现耐盐菌株FELA1能高效产生蛋白酶和脂肪酶。下列叙述错误的是
A．虾酱制作过程中需要对原料和器皿进行严格灭菌处理
B．菌株FELA1能将原料分解为多肽、氨基酸、脂肪酸等风味物质
C．制作时加入盐的目的是抑制杂菌生长，同时调整虾酱的口味
D．对分离出的耐盐菌株FELA1进行研究有利于提升虾酱的品质
3．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法错误的是
A．倒成平板后无需再进行灭菌处理
B．倒成平板后无需接种可判断有无污染
C．图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙
D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选
4．植物组织培养过程中，需要用到①诱导愈伤组织培养基、②诱导生根培养基和③诱导生芽培养基。下列有关这3种培养基以及菊花组织培养的叙述，正确的是
A．菊花的幼茎茎段在离体培养过程中，最后用到的培养基是③
B．若接种的外植体是花药，则离体培养得到的植株都是单倍体
C．培养基中含有营养物，故诱导愈伤组织、生根、生芽期间都不需要光照
D．单倍体育种、转基因植物培育、植物体细胞杂交都离不开植物组织培养
5．科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。
下列叙述正确的是
A．愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的
B．获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状
C．用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体
D．可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生
6．无糖组织培养技术，通常以珍珠岩或蛭石代替琼脂作为支撑物，加入无蔗糖培养液，用CO 代替糖作为植物体的碳源，是更接近植物自然生长状态的一种新型植物组织培养技术。下列说法错误的是
A．该过程必须选用具有一定叶面积的外植体
B．该技术也需要经历脱分化和再分化过程
C．该技术由于去除蔗糖，减少了微生物污染率
D．自养微生物可在无蔗糖培养液中繁殖并形成菌落
7．从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如右图。下列叙述正确的是
A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．直接用离心法收集细胞进行传代培养
C．选取①的细胞进行传代培养比②更合理
D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
8．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如右图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③表示其结果。下列说法正确的是
A．若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性
B．若b为体外受精，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
C．若c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同
D．①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
9．下列关于“克隆羊”与“试管羊”的叙述，正确的是
A．克隆羊和试管羊都是无性生殖的产物
B．培育克隆羊需要进行核移植，培育试管羊需要进行体外受精
C．培育克隆羊是细胞水平的技术，培育试管羊是DNA分子水平的技术
D．克隆羊的遗传物质仅来自提供细胞核的亲本，试管羊的遗传物质来自双亲
10．如图是单克隆抗体制备流程的示意图。下列叙述正确的是
A．细胞①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的记忆B细胞
B．过程②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C．细胞③同时具有脾脏细胞和小鼠骨髓瘤细胞的特性
D．经过程④筛选可获得能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞
11．如图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列叙述正确的是
A．Ⅰ时期为桑葚胚，该时期的细胞具有全能性
B．Ⅱ与Ⅰ时期的胚胎相比，细胞数目增
多，有机物的含量增多
C．胚胎移植选择处于Ⅱ或Ⅲ时期的胚胎最易成功
D．细胞分化从Ⅲ时期开始贯穿于动物的整个生命历程
12．如图表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。下列叙述错误的是
A．获得动物1的受体细胞通常是受精卵
B．动物2体内各体细胞的基因种类相同
C．获得动物3的重组细胞具有全能性
D．上述动物的获得均需运用胚胎移植
13．采用基因工程技术培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列说法正确的是
A．该转基因羊的所有细胞都含有人凝血因子基因并可以正常表达
B．将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器
C．与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛
D．该转基因羊无法将人凝血因子基因传递给后代
14．下图为利用基因工程培育抗虫植株的示意图。以下叙述正确的是
A．②的构建需要限制酶和DNA聚合酶参与
B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
15．如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图。下列说法错误的是
A．图1中用玻璃棒卷起的丝状物为粗提取的DNA
B．图1所示操作的原理是DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精
C．图2试管1的作用是证明加入2mol·L-1NaCl溶液遇二苯胺才会出现蓝色
D．图2试管2中未将DNA溶于2mol·L-1NaCl溶液中，可能导致蓝色变化不明显
16．环境雌激素（EEs）会影响动物和人类的性腺发育。斑马鱼在EEs的诱导下，会表达出卵黄蛋白原（vtg）。已知绿色荧光蛋白（GFP）基因能使斑马鱼发光，欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼，下列操作合理的是
A．将vtg基因的启动子与GFP基因重组 B．将GFP基因的启动子与vtg基因重组
C．将EEs基因的启动子与GFP基因重组 D．将GFP基因的启动子与GFP基因重组
17．若要利用某目的基因（见图甲）和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA（见图丙），限制酶的酶切位点分别是BglⅡ（A↓GATCT）、EcoRⅠ（G↓AATTC）和Sau3AⅠ（↓GATC）。下列分析合理的是
A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因P1噬菌体载体
C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因P1噬菌体载体
D．用EcoRI和Sau3AI切割目的基因和P1噬菌体载体
18．为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是
A．①+③ B．①+② C．③+② D．③+④
19．“脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术，通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元，科学家可以了解大脑的活动。研究者设计如图所示的DNA片段，转入小鼠体内，获得每个细胞仅含一个图示片段的转基因小鼠。Cre酶是该技术的关键酶，能随机识别两个相同的loxP序列，并将两段序列之间的DNA敲除。下列说法正确的是
注：仅表达与启动子相邻的荧光蛋白基因。
A．启动子M应当是一种只有脑组织中启动基因表达的启动子
B．在没有Cre酶存在的条件下，小鼠某脑神经元活动时，发出荧光的颜色可能有3种
C．在有Cre酶存在的条件下，小鼠某脑神经元活动时会发出红色或蓝色的荧光
D．向小鼠细胞中转入图示基因时，应用PEG对受精卵细胞进行预处理
20．某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌、雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列分析错误的是
A．Gata3基因的启动子也能控制GFP基因的转录
B．由图乙可知，1、2、3号均为转基因小鼠
C．由图乙可知，2号为Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
第Ⅱ卷
本卷非选择题，共5题，共60分。请将答案写在答题卷上
21．（12分）营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。以下是实验人员利用“影印法”初检氨基酸缺陷型菌株的过程。回答下列问题：
（1）过程①的接种方法为_____。从培养基成分分析，基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。
（2）②过程相当于_____，最终可以从_____培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。
（3）为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取菌落_____（A/B）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养1~2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的_____培养基，待其冷凝后用记号笔在_____（皿盖/皿底）划分A、B、C、D、E五个区域。
③在划分的五个区域对应的培养基上放入少量分组的氨基酸粉末（如表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
组别 氨基酸种类
A 组氨酸 苏氨酸 谷氨酸 天冬氨酸 亮氨酸
B 精氨酸 苏氨酸 赖氨酸 甲硫氨酸 苯丙氨酸
C 酪氨酸 谷氨酸 赖氨酸 色氨酸 丙氨酸
D 甘氨酸 天冬氨酸 甲硫氨酸 色氨酸 丝氨酸
E 半胱氨酸 亮氨酸 苯丙氨酸 丙氨酸 丝氨酸
在上述鉴定实验中，发现在培养基A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于_____缺陷型。
22．（11分）甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：
（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原因是_____。
（2）若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是_____（字母）。
A．已转入抗性基因B．具有完整的细胞核C．具有叶绿体
（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，不同结果的出现主要是由培养基中_____两种激素用量的不同造成的；此外，光照条件也很重要，图中_____（字母）结果在培养过程中需要适当的光照处理。请再写出一个培养过程中需要注意的事项：_____。
（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖。在培养时，能否采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体 如果可能，请用流程图写出培养过程；如果不能，解释其原因。_____。
23．（12分）脂联素（APN）是蛋白类激素。血清中APN的含量可直接反映人体健康情况，低水平的APN可能与肥胖、糖尿病、心血管疾病等相关。开发APN的快速检测方法具有重要的意义。回答下列问题：
（1）科研人员通过多次注射_____对实验小鼠进行免疫，从免疫小鼠的脾中收集_____细胞与骨髓瘤细胞混合，并加入_____（试剂）促进融合，经选择、培养，最终在培养液中提取分离得到A1、A2、A3等多种抗APN的单克隆抗体。
（2）为确定A1、A2、A3的抗原结合位点是否相同，将等量A1、A2、A3分别固定于反应体
系中并结合APN，再分别加入酶E标记的A1、A2、A3，反应后洗掉未结合抗体，加入酶E的底物（可被酶E催化发生显色反应），通过与对照组比较颜色变浅的程度计算出结合抑制率，结果如表（以抑制率50%为界值进行实验数据分析）。该实验所得结论是_____。
抑制率（%） E酶标抗体
A1 A2 A3
固相抗体 A1 61 23 33
A2 18 71 56
A3 27 63 73
（3）传统的双抗夹心法可以快速检测样本中有无特定抗原，原理如图1。当胶体金停留在T线或C线，将显现出红色。当T线和C线是_____，为阳性结果；当T线和C线是_____，为阴性结果。（填写字母）
A．T线显现红色 B．T线不显色 C．C线显现红色 D．C线不显色
（4）有人在此基础上研发了双抗夹心法分段半定量检测，如图2。三条T线（T1、T2、T3）分别包埋一定量的相同抗体。
①利用上述研究获得的单克隆抗体对血清中APN半定量检测，在图2的金垫、T线、C线包埋的抗体分别是：A2、_____（A1/A2/A3）、抗A2的抗体。
②检测结果：若检测线的显色结果为_____，则说明APN的相对含量越多。
24．（11分）S蛋白是新冠病毒（SARS-CoV-2）感染机体的关键组分，也是研制新冠疫苗的关键起点。下图为某科研团队以缺失E1等基因的人复制缺陷腺病毒（E1基因是腺病毒基因组复制的关键基因）为载体的新冠疫苗研制流程示意图。
回答下列问题：
（1）构建基因表达载体时需要插入启动子，启动子的基本组成单位是_____，能识别启动子的酶是_____。
（2）HEK细胞是一种特殊的人胚胎肾源细胞，在该细胞中，质粒Ⅰ和质粒Ⅱ可进行同源重组形成含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒。为保证上述重组腺病毒能够大量复制，HEK细胞应含有_____基因及其表达产物。对获得的重组腺病毒除用PCR检测S蛋白基因外，还需要用_____（方法）检测S蛋白。
（3）图中将含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒进行扩大培养的操作是_____。
（4）与复制型腺病毒相比，利用复制缺陷重组腺病毒为载体制备成的疫苗具有更高的安全性，其原因是_____。
25．（14分）科学家欲从紫苏中提取DGAT1基因（催化油脂合成的关键酶基因），导入到四尾栅藻细胞，获得转基因油脂高产四尾栅藻，质粒pCAMBIA与PCR扩增出的DGAT1酶切位点如图所示。现有BamHⅠ、BglⅡ、EcoRⅠ三种限制酶，它们识别并切割的碱基序列如表（↓表示切割位置）。
BamHI 5'-G↓GATCC-3'
BglII 5'-A↓GATCT-3'
EcoRI 5'-G↓AATTC-3'
回答下列问题：
（1）从紫苏组织细胞中提取总RNA时，需要加入RNA酶抑制剂，目的是_____。过程①需要_____酶的催化，过程②通过PCR技术实现，进行PCR时，需要在两种引物的_____端（5'/3'）添加限制酶BglⅡ的识别序列。
（2）启动子往往具有物种特异性，在载体pCAMBIA质粒中插入紫苏DGAT1基因，其上游启动子应选择_____（紫苏/大肠杆菌/四尾栅藻）启动子。
（3）用限制酶BglⅡ切割DGATl，用限制酶_____切割pCAMBlA，将充分酶切后的产物混合，加入DNA连接酶进行连接。若只考虑DNA片段两两连接的环状产物，对其进行DNA电泳可得到_____个条带。回收电泳凝胶中大小约为_____bp的DNA对大肠杆菌进行转化，用含有_____的培养基进行筛选并提取重组质粒。最终获得的重组质粒不一定符合要求，原因是_____。
（4）为进一步筛选出符合要求的重组质粒，选用限制酶EcoRⅠ对不同的重组质粒进行酶切处理，得到的电泳结果如图所示，其中组重组质粒为所需质粒。（已知质粒pCAMBIA中EcoRⅠ的酶切位点与BamHⅠ的酶切位点间的最短距离为600bp）
高二（下）生物期中考试参考答案
1-5：BACDC 6-10：DDBBD 11-15：ABCDC 16-20：ADBAD
21．（12分）
（1）稀释涂布平板法（1分） 氨基酸（1分）
（2）接种（1分） 完全（2分）
（3）①A（2分） ②基本（2分） 皿底（1分） ③天冬氨酸（2分）
22．（11分）
（1）绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性（2分），在一定条件下能发育成完整的植株
（2）B（1分）
（3）细胞分裂素、生长素 B、C 无菌条件、适宜的温度和PH、外植体不能倒插等
（4）不能 用花粉粒进行组织培养得到的花卉是单倍体，基因型不同于原杂合体（2分）
23．（12分）
（1）APN（脂联素）（1分） B淋巴（细胞）（1分） PEG（1分）
（2）A2、A3结合同一抗原位点，A1结合另一抗原位点（2分）
（3）AC（2分） BC（2分）
（4）A1（1分） 红色条带数量越多（2分）
24．（11分）
（1）脱氧核苷酸（1分） RNA聚合酶（1分）
（2）E1（2分） 抗原-抗体杂交（2分）
（3）先在体外大量培养HEK细胞（1分），然后接种含s蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒（2分），继续培养一段时间
（4）该疫苗不会在人体细胞中复制（2分）25．（14分）
（1）防止RNA酶催化RNA分解（1分） 逆转录（1分）5’（1分）
（2）四尾栅藻（1分）
（3）BamHI（1分） 3（2分） 3200（2分） 卡那霉素（1分） 重组质粒中目的基因存在正向连接和反向连接两种情况（2分）
（4）A（2分）
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