【高考押题卷】2025年高考生物考前冲刺 细胞工程（含解析）
文档属性
| 名称 | 【高考押题卷】2025年高考生物考前冲刺 细胞工程（含解析） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 1.2MB | ||
| 资源类型 | 试卷 | ||
| 版本资源 | 通用版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2025-05-19 09:06:19 | ||
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文档简介
2025年高考生物复习考前冲刺 细胞工程
一．选择题（共16小题）
1．（2024秋 南开区期末）下列与动物细胞细胞工程和胚胎工程有关的叙述中，错误的是（ ）
A．体外培养的动物细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
B．利用体细胞核移植技术可以生成带有供体核遗传物质的胚胎干细胞
C．杂交瘤细胞的克隆化培养可获得由单个细胞分裂增殖产生的细胞团
D．胚胎移植后经受体孕育的后代，其遗传特性与供体保持一致
2．（2024秋 东城区期末）利用小麦细胞与柴胡细胞进行植物体细胞杂交，希望获得具有柴胡药效的小麦。通过PCR对杂种植株和双亲植株的物种特异性DNA进行扩增，电泳结果如图所示。下列说法不正确的是（ ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理柴胡和小麦细胞
B．用电融合的方法或PEG诱导原生质体融合
C．杂种细胞中丢失了部分来自小麦的遗传信息
D．杂种细胞染色体组成与柴胡细胞完全相同
3．（2024秋 常州期末）关于细胞工程的操作，下列叙述错误的是（ ）
A．花药离体培养得到的胚状体需要鉴定核型，筛选后才能用于单倍体育种
B．诱导植物形成愈伤组织时往往要避光培养，而在再分化过程中要有光照
C．将动物组织块中的细胞分散开时，胰蛋白酶和胶原蛋白酶都需要使用
D．制备单克隆抗体过程中，第二次筛选时挑出阳性孔中的细胞扩大培养
4．（2025 浙江模拟）下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养不能得到优良动物个体
B．培养的体细胞传代次数不能过多是为了保持细胞正常的二倍体核型
C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性
D．胰蛋白酶处理动物组织后，用培养液稀释制成细胞悬浮液
5．（2025 浙江模拟）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后形成雌原核
B．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
6．（2025 内蒙古模拟）下列有关牛体外受精的叙述错误的是（ ）
A．精子需经过获能步骤，才可用于体外受精
B．卵母细胞需培养至MⅡ期，与精子结合完成受精
C．体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合
D．精子入卵后卵细胞膜发生生理反应，阻止其他精子进入
7．（2025 内蒙古模拟）动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是（ ）
A．配制细胞培养基时，加血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素后湿热灭菌
B．在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素
C．考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数
D．采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染
8．（2025 内蒙古模拟）关于膜融合的相关对象，下列叙述正确的是（ ）
A．胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与细胞膜融合
B．克隆羊过程中，电融合法促进供体细胞核和卵细胞融合
C．制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和T细胞融合
D．清除衰老细胞器过程中，会存在囊泡与溶酶体的融合
9．（2025 内蒙古模拟）下列关于植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．诱导愈伤组织形成和后续培养过程中均需提供适宜的温度和光照
B．诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例
C．获得的试管苗通常直接移栽大田
D．获得的脱毒苗具有抗病毒能力
10．（2024秋 海淀区期末）医学上把已经消除体细胞“记忆”，且恢复到胚胎细胞状态的细胞称为“重编程”细胞。研究发现，将通透性强的纤维原细胞短暂地暴露于鼠胚胎干细胞提取物中能获得“重编程”细胞。下列有关叙述正确的是（ ）
A．提取物通过改变细胞的遗传物质获得“重编程”细胞
B．“重编程”细胞的获得过程体现了纤维原细胞的全能性
C．“重编程”细胞的获得过程会改变细胞的形态、结构和功能
D．该项研究可以表明正常机体内细胞的分化过程是可逆的
11．（2024秋 重庆校级期末）CD14为抗巨噬细胞表面标志蛋白，制备抗CD14单克隆抗体的流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①和⑤是分别注射CD14蛋白和注射分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞
B．步骤②选用SP2/0细胞是因为该细胞具有能够在体外无限增殖的生长特点
C．吸取③中上清液到④培养孔中，③所得杂交瘤细胞均能分泌抗CD14抗体
D．步骤③采用了选择培养基进行筛选，步骤④则利用了抗原﹣抗体杂交的原理
12．（2024秋 朝阳区期末）法律和法规是规范生物技术研究，防止生物技术滥用的有力武器。下列叙述与我国相关法规不符的是（ ）
A．用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识
B．不得将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统
C．在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器
D．禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠
13．（2024秋 朝阳区期末）IL﹣17A是一种细胞因子，在银屑病等自身免疫病的发病机制中发挥关键作用。我国科研人员研发了抗IL﹣17A人源﹣鼠源重组单克隆抗体。以下关于该抗体制备过程的叙述正确的是（ ）
A．用IL﹣17A注射小鼠，从小鼠血清中分离出B细胞
B．用灭活病毒诱导小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞
C．用克隆化培养和PCR技术筛选出能分泌抗IL﹣17A抗体的杂交瘤细胞
D．用蛋白质工程技术直接将鼠源抗IL﹣17A抗体中的部分氨基酸序列替换为人源
14．（2024秋 朝阳区期末）我国科学家研制的干细胞药物——“人脐带间充质干细胞治疗心衰注射液”，已经进入临床试验阶段。据此推测合理的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞进入人体后可以分化为心肌细胞
B．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的基因表达情况相同
C．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的形态结构相同
D．人脐带间充质干细胞比心肌细胞的分化程度高
15．（2024秋 靖远县校级期末）6﹣磷酸葡萄糖脱氢酶（G﹣6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理，利用含血清的培养液进行原代培养，然后制成细胞悬液，转入无血清培养液对不同的单个细胞分别进行单克隆培养，克隆形成率与接种细胞密度的关系如表。分别从原代培养和各单克隆培养中取样，对提取到的G﹣6PD蛋白进行电泳检测，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
克隆形成率与接种细胞密度的关系
1mL中接种细胞数/个 1cm2上接种细胞数/个 克隆形成率/%
10000 2000 0.1
1000 200 1.0
20 4 50
10 2 100
A．无血清培养液必须含酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶过度消化而损伤
B．为提高克隆形成率，需将原代培养制成的细胞悬液稀释为10个细胞/mL或更低
C．原代培养的细胞电泳图中出现2种不同条带是等位基因XF和XS同时表达的产物
D．出现图示实验结果的原因可能是女性细胞中的一条X染色体随机失活而导致的
16．（2024秋 靖远县校级期末）体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不再发育，这种现象称为发育阻滞。研究表明，胚胎的发育阻滞与胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换有关。小鼠的受精卵发育早期的胚胎基本受母源性信息调控，自身基因的启动最早出现在2细胞期，该时期的胚胎对环境极为敏感。下列有关叙述正确的是（ ）
A．从活的母畜中采集到的卵母细胞均可直接用于体外受精
B．小鼠的胚胎发育阻滞一般发生在开始出现分化的囊胚期
C．体外培养条件与体内发育条件的差异不会造成发育阻滞
D．调控转换时可能发生母源mRNA被降解失活，自身基因转录活跃
二．解答题（共4小题）
17．（2024秋 南开区期末）研究者以拟南芥根段作为组织培养材料，探讨了激素诱导愈伤组织分化生芽的机制。请分析回答：
（1）离体的拟南芥根段在适宜条件下可以培育出完整的植株，说明 。
（2）剪下根段后需要经过一系列的消毒过程，一般先用流水冲洗，然后在无菌操作台上依次用 和次氯酸钠溶液等消毒剂浸泡消毒，从每种消毒剂中取出根段后需用 冲洗多次，再用无菌滤纸吸干表面水分。
（3）植物组织培养常用的MS培养基是在已配制好的MS母液中添加 、琼脂、植物激素等配制而成。在组织培养过程中，根段细胞经过 过程形成愈伤组织，此后调整培养基中细胞分裂素（CK）与生长素的比例可诱导愈伤组织分化。
（4）愈伤组织生芽过程中，细胞分裂素（CK）通过ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。为探讨A基因与W基因的关系，将A基因功能缺失突变体（突变体a）和野生型的愈伤组织分别置于细胞分裂素（CK）与生长素比例高的（高CK）培养基中诱导生芽，测定此过程中W基因的表达量，结果如图1。分析得出结论：在高CK诱导下A基因 （填“促进”或“抑制”）W基因表达。得出该结论的依据为：与野生型相比， 。
（5）采用转基因技术在上述突变体a中过量表达W基因，获得材料甲。将材料甲、突变体a和野生型三组愈伤组织在高CK培养基中培养，三组愈伤组织分化生芽的比例如图2，由此能得出的结论包括 。（多选）
A.A基因在愈伤组织生芽过程中起作
B.缺失A基因，W基因表达不能促进生芽
C.过量表达W基因可使生芽时间提前
D.W基因的表达产物调控A基因的表达
18．（2024秋 南开区期末）EB病毒（EBV）可引发鼻咽癌等癌症。我国科研人员制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体，为治疗和疫苗研发提供思路。
（1）如图1所示，EBV表面的糖蛋白gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，引起gB发生 变化，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合。gHgL可作为制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体的 。
不同荧光标记的分于 相关分子的特点
荧光A﹣抗CD4抗体 CD4为辅助性T细胞的标记分子
荧光B﹣抗CD8抗体 CD8为辅助毒性T细胞的体记分子
荧光C﹣抗CD20抗体 CD20为B细胞的标记分子
荧光D﹣抗CD56抗体 CD56为NK细胞的标记分子
荧光E﹣gHgL gHgL可与细胞上的受体特异性结合
（2）研究人员从EBV感染者外周血中分离出单个核细胞（PBMC），包含自然杀伤（NK）细胞、T细胞、B细胞。将右上表中不同荧光标记的分子与PBMC培养后筛选出目标细胞，将目标细胞中的抗体mRNA 为cDNA，扩增出gHgL抗体基因，转入细胞成功表达出单克隆抗体。筛选出的目标细胞应具有荧光 。（填写表格中大写字母）
（3）经筛选得到单抗D8，与已报道的单抗A1相比，两者都有较强的gHgL结合能力，都能显著抑制EBV病毒感染上皮细胞。将gHgL与D8或A1混合接触后，检测与上皮细胞表面受体E2的结合能力，结果如图2。分析可知D8与A1作用的区别是 。
19．（2025 云南模拟）嵌合抗原受体﹣T细胞（CAR﹣T细胞）疗法在人类肿瘤治疗中取得了重要突破。CAR﹣T细胞疗法是将CAR基因导入T细胞成为CAR﹣T细胞，通过CAR蛋白上的scFv肽链（小肽不足以发挥抗原作用，但能发挥抗体识别作用）特异性识别肿瘤细胞膜上的抗原，并通过CAR蛋白上的其它肽链结构激活CAR﹣T细胞继而杀伤肿瘤细胞。回答下列问题：
（1）获得含有scFv肽链的单克隆抗体，流程如图1。
①图中通过驱动细胞和测试细胞反复免疫小鼠产生抗体的过程属于 （填“细胞”或“体液”）免疫，参与该过程的免疫细胞来源于小鼠骨髓 。实验小鼠机体产生免疫应答的过程中，辅助性T细胞的主要作用是 。该实验最适用于筛选 （填标号）。
A．大鼠肝细胞区别于兔肝细胞特殊抗原的抗体
B．正常细胞区别于感染HIV细胞内特殊抗原的抗体
C．衰老神经细胞区别于正常神经细胞抗原的抗体
②取第二组小鼠分离脾细胞，加入 诱导脾细胞和骨髓瘤细胞的融合。
（2）CAR基因的构建，流程如图2。在设计添加CAR基因两端限制酶识别序列并与表达载体正确连接的过程中，必须考虑的有 （填标号）。
A．PCR使用的上、下游引物需含限制酶识别序列
B．CAR基因内可以含有引物所含限制酶识别序列
C．限制酶识别序列需位于载体启动子、复制原点和标记基因内
D．上、下游引物所含限制酶识别序列不同
E．CAR基因插入载体位点需位于启动子下游
（3）从免疫学角度分析，如果用高特异性抗体DNA直接构建CAR基因，再通过载体导入T细胞并稳定表达，不但会使治疗效果大幅降低，同时还会 。
20．（2023秋 宣威市校级期末）我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为：该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如图所示，结合图回答问题：
（1）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核的卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用 。
（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植，其原因是 。
（3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 ，去除的“核”具体是指 。一般利用未去核的卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，其原因是 （答出2点）。
（4）体细胞克隆猴的另一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中Kdm4d的mRNA翻译产生的酶的作用是 。
2025年高考生物复习考前冲刺 细胞工程
参考答案与试题解析
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
答案 A D C C C C B D B C C
题号 12 13 14 15 16
答案 B B A C D
一．选择题（共16小题）
1．（2024秋 南开区期末）下列与动物细胞细胞工程和胚胎工程有关的叙述中，错误的是（ ）
A．体外培养的动物细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
B．利用体细胞核移植技术可以生成带有供体核遗传物质的胚胎干细胞
C．杂交瘤细胞的克隆化培养可获得由单个细胞分裂增殖产生的细胞团
D．胚胎移植后经受体孕育的后代，其遗传特性与供体保持一致
【考点】体外受精和胚胎移植；动物细胞培养的条件与过程；单克隆抗体及其应用；动物细胞核移植技术．
【专题】正推法；植物的组织培养；理解能力．
【答案】A
【分析】体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖；另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，多数细胞属于这种类型悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞。
【解答】解：A、悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，A错误；
B、体细胞核移植技术获得的重组细胞，细胞核来自于供体，可以生成带有供体核遗传物质的胚胎干细胞，B正确；
C、克隆化培养指单细胞培养，使之无性繁殖获得克隆细胞团的方法，将杂交瘤细胞克隆化培养，可获得由单个细胞分裂增殖产生的细胞团，C正确；
D、代孕母体不提供遗传物质，提供营养和子宫环境孕育后代，后代的遗传特性与供体一致，D正确。
故选：A。
【点评】本题考查动物工程的相关内容，要求学生能运用所学的知识正确作答。
2．（2024秋 东城区期末）利用小麦细胞与柴胡细胞进行植物体细胞杂交，希望获得具有柴胡药效的小麦。通过PCR对杂种植株和双亲植株的物种特异性DNA进行扩增，电泳结果如图所示。下列说法不正确的是（ ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理柴胡和小麦细胞
B．用电融合的方法或PEG诱导原生质体融合
C．杂种细胞中丢失了部分来自小麦的遗传信息
D．杂种细胞染色体组成与柴胡细胞完全相同
【考点】植物体细胞杂交技术及应用．
【专题】正推法；植物的组织培养；理解能力．
【答案】D
【分析】植物体细胞杂交技术：将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
【解答】解：A、用纤维素酶和果胶酶处理柴胡和小麦细胞，以获得原生质体，A正确；
B、电融合法或PEG诱导法均可以用于原生质体融合过程，B正确；
C、对比杂种植株和小麦的电泳结果可知，小麦中某些条带在杂种植株中没有相应的条带，说明杂种细胞中丢失了部分来自小麦的遗传信息，C正确；
D、杂种细胞染色体来源于柴胡和小麦，与柴胡细胞不完全相同，D错误。
故选：D。
【点评】本题考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程及意义，能结合所学的知识准确判断各选项。
3．（2024秋 常州期末）关于细胞工程的操作，下列叙述错误的是（ ）
A．花药离体培养得到的胚状体需要鉴定核型，筛选后才能用于单倍体育种
B．诱导植物形成愈伤组织时往往要避光培养，而在再分化过程中要有光照
C．将动物组织块中的细胞分散开时，胰蛋白酶和胶原蛋白酶都需要使用
D．制备单克隆抗体过程中，第二次筛选时挑出阳性孔中的细胞扩大培养
【考点】单克隆抗体及其应用；植物的组织培养；作物新品种的培育；动物细胞培养的条件与过程．
【专题】正推法；育种；植物的组织培养；克隆技术；理解能力．
【答案】C
【分析】植物组织培养：将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【解答】解：A、花药离体培养得到的胚状体有可能来自于花药壁等组织细胞，不一定为单倍体组织，因此需要鉴定核型，筛选后才能用于单倍体育种，A正确；
B、植物组织培养过程中，脱分化形成愈伤组织时要避光培养，而在再分化过程中要有光照，B正确；
C、将动物组织块中的细胞分散开时，只需要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶即可，C错误；
D、制备单克隆抗体过程中，第二次筛选为克隆化培养和单一抗体阳性检验，应挑出阳性孔中的细胞扩大培养，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查单倍体育种、植物组织培养、动物细胞培养等技术及相关应用，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
4．（2025 浙江模拟）下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养不能得到优良动物个体
B．培养的体细胞传代次数不能过多是为了保持细胞正常的二倍体核型
C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性
D．胰蛋白酶处理动物组织后，用培养液稀释制成细胞悬浮液
【考点】动物细胞培养的条件与过程；动物细胞融合技术．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】C
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【解答】解：A、动物细胞融合形成的杂种细胞经过动物细胞培养不能培育成动物个体，且动物细胞培养只能得到大量细胞或细胞产物，不能得到动物个体，A正确；
B、体细胞传代次数过多遗传物质会发生改变，培养的体细胞传代次数不能过多，一般在10代以内，目的是保持细胞正常的二倍体核型，B正确；
C、不能通过显微镜观察到基因突变，C错误；
D、胰蛋白酶可以消化细胞间的胶原纤维和其它成分从而获得单细胞，用培养液稀释制成细胞悬浮液，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
5．（2025 浙江模拟）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后形成雌原核
B．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
【考点】体外受精和胚胎移植；胚胎分割技术．
【专题】正推法；胚胎工程．
【答案】C
【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
【解答】解：AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减 数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核，AB正确；
C、对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，C错误；
D、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测，设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，D正确。
故选：C。
【点评】本题主要考查体外受精和胚胎移植、胚胎分割技术的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
6．（2025 内蒙古模拟）下列有关牛体外受精的叙述错误的是（ ）
A．精子需经过获能步骤，才可用于体外受精
B．卵母细胞需培养至MⅡ期，与精子结合完成受精
C．体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合
D．精子入卵后卵细胞膜发生生理反应，阻止其他精子进入
【考点】体外受精和胚胎移植．
【专题】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】C
【分析】哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精等几个主要步骤。
【解答】解：A、体外受精时，采集到的精子需要经获能处理后才具有受精能力，才可用于体外受精，A正确；
B、动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到MⅡ时，才具备与精子受精的能力，B正确；
C、体外受精不需加入聚乙二醇等诱导精卵结合，聚乙二醇常用于细胞融合，C错误；
D、卵细胞膜反应是指精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程，这是防止多精入卵的第二道屏障，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查体外受精的相关知识，要求考生识记体外受精的具体过程及注意事项，能结合所学的知识准确答题。
7．（2025 内蒙古模拟）动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是（ ）
A．配制细胞培养基时，加血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素后湿热灭菌
B．在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素
C．考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数
D．采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染
【考点】动物细胞培养的条件与过程．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】B
【分析】动物细胞培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。
【解答】解：A、配制细胞培养基时，湿热灭菌后通过过滤灭菌加入血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素，A错误；
B、在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素，保证动物细胞的正常生长，同时抑制细菌的生长，B正确；
C、考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释后涂布在平板上培养，待菌落数目稳定后计数，C错误；
D、采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作都不能清除“黑胶虫”污染，D错误。
故选：B。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
8．（2025 内蒙古模拟）关于膜融合的相关对象，下列叙述正确的是（ ）
A．胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与细胞膜融合
B．克隆羊过程中，电融合法促进供体细胞核和卵细胞融合
C．制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和T细胞融合
D．清除衰老细胞器过程中，会存在囊泡与溶酶体的融合
【考点】单克隆抗体及其应用；各类细胞器的结构和功能．
【专题】正推法；细胞器；克隆技术；理解能力．
【答案】D
【分析】分泌蛋白的合成、加工和运输过程：最初是在核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进入内质网进行加工，形成有一定空间结构的蛋白质，再到高尔基体，高尔基体对其进行进一步加工，然后形成囊泡分泌到细胞外。该过程消耗的能量由线粒体提供。
【解答】解：A、胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与高尔基体膜融合，A错误；
B、克隆羊过程中，供体细胞被注入卵母细胞后，可通过电融合法促进细胞融合，而非促进细胞核与卵细胞融合，B错误；
C、制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和B细胞融合，C错误；
D、溶酶体含多种酸性水解酶，通过含有损伤衰老细胞器的囊泡与溶酶体的融合，能够清除衰老的细胞器，D正确。
故选：D。
【点评】本题考查膜融合的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
9．（2025 内蒙古模拟）下列关于植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．诱导愈伤组织形成和后续培养过程中均需提供适宜的温度和光照
B．诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例
C．获得的试管苗通常直接移栽大田
D．获得的脱毒苗具有抗病毒能力
【考点】植物的组织培养．
【专题】正推法；植物的组织培养；理解能力．
【答案】B
【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。
【解答】解：A、诱导愈伤组织形成的过程中不需要光照，后续培养过程中需要光照，A错误；
B、生长素与细胞分裂素比值高时有利于诱导根的形成，该比值较低时有利于诱导芽的形成，因此诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例，B正确；
C、获得的幼苗需要先移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长状后再移栽到大田中，C错误；
D、茎尖等分裂旺盛部位无病毒感染，利用茎尖分生组织能培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，即脱毒苗，脱毒苗不等于抗毒苗，即获得的脱毒苗不具备抗病毒能力，D错误。
故选：B。
【点评】本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
10．（2024秋 海淀区期末）医学上把已经消除体细胞“记忆”，且恢复到胚胎细胞状态的细胞称为“重编程”细胞。研究发现，将通透性强的纤维原细胞短暂地暴露于鼠胚胎干细胞提取物中能获得“重编程”细胞。下列有关叙述正确的是（ ）
A．提取物通过改变细胞的遗传物质获得“重编程”细胞
B．“重编程”细胞的获得过程体现了纤维原细胞的全能性
C．“重编程”细胞的获得过程会改变细胞的形态、结构和功能
D．该项研究可以表明正常机体内细胞的分化过程是可逆的
【考点】干细胞的培养及其应用．
【专题】正推法；细胞的分化、衰老和凋亡．
【答案】C
【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
【解答】解；A、“重编程”细胞为恢复到胚胎细胞状态的细胞，细胞的遗传物质未发生改变，A错误；
B、细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，即细胞的全能性，所以“重编程”细胞的获得不能体现纤维原细胞的全能性，B错误；
C、纤维原细胞是分化后的细胞，具有一定的形态和结构，而“重编程”细胞是胚胎细胞状态的细胞，其结构与纤维原细胞不同，故“重编程”细胞的获得过程会改变细胞的形态、结构和功能，C正确；
D、细胞的分化是不可逆的，D错误。
故选：C。
【点评】本题主要考查细胞的全能性的相关知识，要求考生能够结合所学知识准确判断各选项，属于识记和理解层次的考查。
11．（2024秋 重庆校级期末）CD14为抗巨噬细胞表面标志蛋白，制备抗CD14单克隆抗体的流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①和⑤是分别注射CD14蛋白和注射分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞
B．步骤②选用SP2/0细胞是因为该细胞具有能够在体外无限增殖的生长特点
C．吸取③中上清液到④培养孔中，③所得杂交瘤细胞均能分泌抗CD14抗体
D．步骤③采用了选择培养基进行筛选，步骤④则利用了抗原﹣抗体杂交的原理
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】模式图；克隆技术；理解能力．
【答案】C
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【解答】解：A、要获得抗CD14单克隆抗体，步骤①应该注射CD14蛋白（CD14抗原），步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体，A正确；
B、步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，具有能够在体外无限增殖的生长特点，B正确；
C、形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，③所得杂交瘤细胞不一定能分泌抗CD14抗体，需要利用抗原﹣抗体杂交原理进行第二次筛选，C错误；
D、步骤③用特定的选择培养基进行筛选，在该选择培养基上，只有融合的杂交瘤细胞才能够生长，没有融合的细胞及同种核融合的细胞不能生长；步骤④则利用了抗原﹣抗体杂交的原理，用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查单克隆抗体的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
12．（2024秋 朝阳区期末）法律和法规是规范生物技术研究，防止生物技术滥用的有力武器。下列叙述与我国相关法规不符的是（ ）
A．用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识
B．不得将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统
C．在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器
D．禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠
【考点】体外受精和胚胎移植；生物技术引发的伦理问题；生物武器对人类的威胁．
【专题】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】B
【分析】生物安全是指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康以及生态环境所产生的危害或潜在风险。消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面。我国禁止生殖性克隆人原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。
【解答】解：A、按照有关转基因农作物的法律法规，用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识，A正确；
B、我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验，但可以在特定条件下可以将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统获得试管婴儿，B错误；
C、我国在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，C正确；
D、按照相关法律，我国禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠，D正确。
故选：B。
【点评】本题主要考查的是生物技术的安全性和伦理问题的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
13．（2024秋 朝阳区期末）IL﹣17A是一种细胞因子，在银屑病等自身免疫病的发病机制中发挥关键作用。我国科研人员研发了抗IL﹣17A人源﹣鼠源重组单克隆抗体。以下关于该抗体制备过程的叙述正确的是（ ）
A．用IL﹣17A注射小鼠，从小鼠血清中分离出B细胞
B．用灭活病毒诱导小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞
C．用克隆化培养和PCR技术筛选出能分泌抗IL﹣17A抗体的杂交瘤细胞
D．用蛋白质工程技术直接将鼠源抗IL﹣17A抗体中的部分氨基酸序列替换为人源
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】B
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：A、制备单克隆抗体，首先用IL﹣17A（抗原）注射小鼠，从小鼠脾脏中分离出B细胞，A错误；
B、动物细胞融合可以用灭活病毒诱导，制备单克隆抗体需要将经免疫的小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，B正确；
C、用克隆化培养和抗原—抗体分子杂交技术（单一抗体检测）筛选出能分泌抗IL﹣17A抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D、蛋白质工程技术需要通过改变基因结构进而改造蛋白质，而不能直接改变蛋白质（例如鼠源抗IL﹣17A抗体）中的氨基酸序列，D错误。
故选：B。
【点评】本题考查单克隆抗体的制备与应用的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
14．（2024秋 朝阳区期末）我国科学家研制的干细胞药物——“人脐带间充质干细胞治疗心衰注射液”，已经进入临床试验阶段。据此推测合理的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞进入人体后可以分化为心肌细胞
B．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的基因表达情况相同
C．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的形态结构相同
D．人脐带间充质干细胞比心肌细胞的分化程度高
【考点】干细胞的培养及其应用．
【专题】正推法；细胞的分化、衰老和凋亡；理解能力．
【答案】A
【分析】细胞分化的概念：在个体发育中，相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化过程遗传物质不变，只是基因选择性表达的结果。
【解答】解：A、人脐带间充质干细胞作为干细胞的一种，具有自我更新和分化为多种细胞类型的潜能。在特定的条件下，它们可以分化为心肌细胞，这对于治疗心衰等心脏疾病具有重要意义，A正确；
B、细胞分化是基因选择性表达的结果，由于人脐带间充质干细胞和心肌细胞是两种不同类型的细胞，它们的基因表达情况必然存在差异，B错误；
C、人脐带间充质干细胞和心肌细胞作为两种不同类型的细胞，它们的形态和结构通常也会有所不同，C错误；
D、细胞分化的程度通常与其功能特化和形态结构的复杂性成正比。心肌细胞作为高度特化的细胞类型，其分化程度通常要高于未分化的干细胞，D错误。
故选：A。
【点评】本题考查干细胞的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
15．（2024秋 靖远县校级期末）6﹣磷酸葡萄糖脱氢酶（G﹣6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理，利用含血清的培养液进行原代培养，然后制成细胞悬液，转入无血清培养液对不同的单个细胞分别进行单克隆培养，克隆形成率与接种细胞密度的关系如表。分别从原代培养和各单克隆培养中取样，对提取到的G﹣6PD蛋白进行电泳检测，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
克隆形成率与接种细胞密度的关系
1mL中接种细胞数/个 1cm2上接种细胞数/个 克隆形成率/%
10000 2000 0.1
1000 200 1.0
20 4 50
10 2 100
A．无血清培养液必须含酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶过度消化而损伤
B．为提高克隆形成率，需将原代培养制成的细胞悬液稀释为10个细胞/mL或更低
C．原代培养的细胞电泳图中出现2种不同条带是等位基因XF和XS同时表达的产物
D．出现图示实验结果的原因可能是女性细胞中的一条X染色体随机失活而导致的
【考点】动物细胞培养的条件与过程．
【专题】数据表格；胚胎工程；理解能力；解决问题能力．
【答案】C
【分析】由题干信息可知，“将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理，进行原代培养，然后用不同的单个细胞分别进行单克隆培养”，无论是原代培养还是单克隆培养，对于体细胞来说，正常情况下得到的细胞基因型是相同的；由题图的电泳结果分析，1﹣9通过单克隆培养得到的细胞所含的蛋白都只有一种，说明可能是女性细胞中一条X染色体在电泳过程中随机失活导致的。据此分析判断即可。
【解答】解：A、培养贴壁生长的细胞需用消化酶消化传代，在含血清传代培养时，血清中某些成分可以终止消化酶的消化作用，而无血清培养液培养时，必须使用酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶过度消化而损伤，A正确；
B、细胞悬液的细胞密度越大，接种时每平方厘米培养皿上接种的细胞就越多，克隆的形成率就越低，B正确；
CD、原代培养细胞电泳图有2个条带，单克隆培养的细胞只有1个条带，可能的原因是女性细胞虽然含有XF和XS，但其中一条X染色体可能随机失活，原代培养细胞电泳图出现2个不同条带可能是因为同时检测了多个细胞的产物，C错误、D正确。
故选：C。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
16．（2024秋 靖远县校级期末）体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不再发育，这种现象称为发育阻滞。研究表明，胚胎的发育阻滞与胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换有关。小鼠的受精卵发育早期的胚胎基本受母源性信息调控，自身基因的启动最早出现在2细胞期，该时期的胚胎对环境极为敏感。下列有关叙述正确的是（ ）
A．从活的母畜中采集到的卵母细胞均可直接用于体外受精
B．小鼠的胚胎发育阻滞一般发生在开始出现分化的囊胚期
C．体外培养条件与体内发育条件的差异不会造成发育阻滞
D．调控转换时可能发生母源mRNA被降解失活，自身基因转录活跃
【考点】体外受精和胚胎移植．
【专题】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】D
【分析】胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。
（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎。
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔[细胞分化在胚胎期达到最大限度。
【解答】解：A、借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具直接从活体动物卵巢中吸取的卵母细胞需体外培养成熟才可用于体外受精，A错误；
B、胚胎的发育阻滞与胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换有关，小鼠的胚胎发育调控转换期是在2细胞期，母源mRNA逐渐被降解失活，自身基因转录活跃，最易发生发育阻滞，B错误；
C、胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换时，对环境极为敏感，体内发育条件一般比体外更适宜、稳定，故体外培养容易发生发育阻滞，C错误；
D、胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换时可能发生母源mRNA被降解失活，自身基因转录活跃的情况，D正确。
故选：D。
【点评】本题考查胚胎工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
二．解答题（共4小题）
17．（2024秋 南开区期末）研究者以拟南芥根段作为组织培养材料，探讨了激素诱导愈伤组织分化生芽的机制。请分析回答：
（1）离体的拟南芥根段在适宜条件下可以培育出完整的植株，说明 植物细胞具有全能性 。
（2）剪下根段后需要经过一系列的消毒过程，一般先用流水冲洗，然后在无菌操作台上依次用 酒精 和次氯酸钠溶液等消毒剂浸泡消毒，从每种消毒剂中取出根段后需用 无菌水 冲洗多次，再用无菌滤纸吸干表面水分。
（3）植物组织培养常用的MS培养基是在已配制好的MS母液中添加 蔗糖 、琼脂、植物激素等配制而成。在组织培养过程中，根段细胞经过 脱分化 过程形成愈伤组织，此后调整培养基中细胞分裂素（CK）与生长素的比例可诱导愈伤组织分化。
（4）愈伤组织生芽过程中，细胞分裂素（CK）通过ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。为探讨A基因与W基因的关系，将A基因功能缺失突变体（突变体a）和野生型的愈伤组织分别置于细胞分裂素（CK）与生长素比例高的（高CK）培养基中诱导生芽，测定此过程中W基因的表达量，结果如图1。分析得出结论：在高CK诱导下A基因 促进 （填“促进”或“抑制”）W基因表达。得出该结论的依据为：与野生型相比， 经高CK诱导后，突变体a中的W基因表达量明显低 。
（5）采用转基因技术在上述突变体a中过量表达W基因，获得材料甲。将材料甲、突变体a和野生型三组愈伤组织在高CK培养基中培养，三组愈伤组织分化生芽的比例如图2，由此能得出的结论包括 ABC 。（多选）
A.A基因在愈伤组织生芽过程中起作
B.缺失A基因，W基因表达不能促进生芽
C.过量表达W基因可使生芽时间提前
D.W基因的表达产物调控A基因的表达
【考点】植物的组织培养．
【专题】图文信息类简答题；植物的组织培养；解决问题能力．
【答案】（1）植物细胞具有全能性
（2）酒精 无菌水
（3）蔗糖 脱分化
（4）促进 经高CK诱导后，突变体a中的W基因表达量明显低
（5）ABC
【分析】植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即细胞经分裂和分化后仍然具有发育成完整植株的潜能；生长素和细胞分裂素能促进细胞分裂分化，在培养的不同时期对两者的比例会有不同要求，在再分化过程中，生长素高，促进根的分化，细胞分裂素比例高，促进芽的分化。植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【解答】解：（1）离体的植物组织培养成完整植株的过程体现了细胞的全能性。
（2）外植体消毒一般先用流水冲洗，然后在无菌操作台上依次用酒精和次氯酸钠溶液浸泡消毒，从每种消毒剂中取出根段后需用无菌水冲洗多次，最后再用无菌滤纸吸干表面水分。
（3）MS培养基是在已配制好的MS母液中添加蔗糖、琼脂、植物激素等配制而成。已分化的细胞形成愈伤组织的过程称之为脱分化，植物激素可诱导愈伤组织分化，生长素用量比细胞分裂素（CK）比值适中时，促进愈伤组织的形成。
（4）由图判断，经高CK诱导后，突变体a的W基因的表达量明显低，说明在高CK诱导下A基因促进W基因表达。
（5）材料甲体内缺少A基因，W基因过量表达，突变体a的A基因不能表达，野生型是正常的，由图2野生型曲线和突变体a曲线对比可知，A基因在愈伤组织分化生芽的过程中起作用，缺失A基因时W基因表达不能促进生芽；由材料甲曲线和野生型曲线比较可知，过量表达W基因可使生芽时间提前。
故选：ABC。
故答案为：
（1）植物细胞具有全能性
（2）酒精 无菌水
（3）蔗糖 脱分化
（4）促进 经高CK诱导后，突变体a中的W基因表达量明显低
（5）ABC
【点评】本题结合柱形图和折线图，考查植物组织培养过程分析，要求考生能够从题目中提取有效信息进行分析，难度适中。
18．（2024秋 南开区期末）EB病毒（EBV）可引发鼻咽癌等癌症。我国科研人员制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体，为治疗和疫苗研发提供思路。
（1）如图1所示，EBV表面的糖蛋白gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，引起gB发生 空间结构 变化，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合。gHgL可作为制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体的 抗原 。
不同荧光标记的分于 相关分子的特点
荧光A﹣抗CD4抗体 CD4为辅助性T细胞的标记分子
荧光B﹣抗CD8抗体 CD8为辅助毒性T细胞的体记分子
荧光C﹣抗CD20抗体 CD20为B细胞的标记分子
荧光D﹣抗CD56抗体 CD56为NK细胞的标记分子
荧光E﹣gHgL gHgL可与细胞上的受体特异性结合
（2）研究人员从EBV感染者外周血中分离出单个核细胞（PBMC），包含自然杀伤（NK）细胞、T细胞、B细胞。将右上表中不同荧光标记的分子与PBMC培养后筛选出目标细胞，将目标细胞中的抗体mRNA 逆转录 为cDNA，扩增出gHgL抗体基因，转入细胞成功表达出单克隆抗体。筛选出的目标细胞应具有荧光 C、E 。（填写表格中大写字母）
（3）经筛选得到单抗D8，与已报道的单抗A1相比，两者都有较强的gHgL结合能力，都能显著抑制EBV病毒感染上皮细胞。将gHgL与D8或A1混合接触后，检测与上皮细胞表面受体E2的结合能力，结果如图2。分析可知D8与A1作用的区别是 D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能 。
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】（1）空间结构；抗原
（2）逆转录；C、E
（3）D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：（1）分析图1，EBV表面的糖蛋白gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，会引起gB的空间结构发生改变。gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，会引起gB的空间结构发生改变，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合，抗gHgL的单克隆抗体可与gHgL结合，阻断其与上皮细胞表面受体（如E2等）结合，进而阻断病毒包膜和上皮细胞膜融合，阻断EBV感染，故gHgL可作为制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体的抗原。
（2）cDNA是mRNA通过逆转录形成的。根据gHgL的作用机理，可知筛选出的目标细胞分泌产生的抗体与B细胞构成竞争关系，同时其发挥作用需要膜上的受体特异性结合，故筛选出的目标细胞应具有荧光C和E。
（3）依据图示信息和题干内容可知，gHgL与D8混合接触后，与上皮细胞表面受体E2的结合能力明显下降，而与A1混合接触后，变化不大，说明D8与A1作用的区别是D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能。
故答案为：
（1）空间结构；抗原
（2）逆转录；C、E
（3）D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能
【点评】本题考查单克隆抗体的制备，考查学生对相关概念、原理的理解与掌握程度，以及运用所学知识分析和解决实际问题的能力。
19．（2025 云南模拟）嵌合抗原受体﹣T细胞（CAR﹣T细胞）疗法在人类肿瘤治疗中取得了重要突破。CAR﹣T细胞疗法是将CAR基因导入T细胞成为CAR﹣T细胞，通过CAR蛋白上的scFv肽链（小肽不足以发挥抗原作用，但能发挥抗体识别作用）特异性识别肿瘤细胞膜上的抗原，并通过CAR蛋白上的其它肽链结构激活CAR﹣T细胞继而杀伤肿瘤细胞。回答下列问题：
（1）获得含有scFv肽链的单克隆抗体，流程如图1。
①图中通过驱动细胞和测试细胞反复免疫小鼠产生抗体的过程属于 体液 （填“细胞”或“体液”）免疫，参与该过程的免疫细胞来源于小鼠骨髓 造血干细胞 。实验小鼠机体产生免疫应答的过程中，辅助性T细胞的主要作用是 分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化，同时其受刺激后细胞表面的分子发生特异性变化后与B细胞接触，参与B细胞的激活 。该实验最适用于筛选 C （填标号）。
A．大鼠肝细胞区别于兔肝细胞特殊抗原的抗体
B．正常细胞区别于感染HIV细胞内特殊抗原的抗体
C．衰老神经细胞区别于正常神经细胞抗原的抗体
②取第二组小鼠分离脾细胞，加入 聚乙二醇 诱导脾细胞和骨髓瘤细胞的融合。
（2）CAR基因的构建，流程如图2。在设计添加CAR基因两端限制酶识别序列并与表达载体正确连接的过程中，必须考虑的有 ADE （填标号）。
A．PCR使用的上、下游引物需含限制酶识别序列
B．CAR基因内可以含有引物所含限制酶识别序列
C．限制酶识别序列需位于载体启动子、复制原点和标记基因内
D．上、下游引物所含限制酶识别序列不同
E．CAR基因插入载体位点需位于启动子下游
（3）从免疫学角度分析，如果用高特异性抗体DNA直接构建CAR基因，再通过载体导入T细胞并稳定表达，不但会使治疗效果大幅降低，同时还会 导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，使机体受损 。
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】图文信息类简答题；免疫调节；基因工程；克隆技术；理解能力．
【答案】（1）体液 造血干细胞 分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化，同时其受刺激后细胞表面的分子发生特异性变化后与B细胞接触，参与B细胞的激活 C 聚乙二醇
（2）ADE
（3）导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，使机体受损
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：（1）①体液免疫由B细胞介导完成，由浆细胞产生抗体发挥作用，其中的免疫细胞由骨髓造血干细胞分裂分化而来。在实验小鼠产生免疫应答（即体液免疫）的过程中，辅助性T细胞的主要作用包括以下几个方面：接受来自抗原呈递细胞的抗原信息，细胞表面的特定分子发生变化并与B细胞接触，这是激活B细胞的第二信号，辅助性T细胞还可以分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化。
A、物种不同，表面抗原差异较大，A错误；
B、感染HIV细胞内特殊抗原不能被抗体识别，B错误；
C、同一物种，细胞衰老后可能产生个别的特异性抗原，C正确。
故选：C。
②动物细胞融合技术中可以利用灭活的病毒或聚乙二醇诱导细胞融合。
（2）A、PCR使用的上、下游引物的5′端需含限制酶识别序列，从而使扩增得到的DNA可以被限制酶识别，A正确；
B、CAR基因内不能含有相关的限制酶识别序列，否则会被限制酶切割破坏，B错误；
C、限制酶识别序列需位于载体的启动子下游、终止子上游，以保证基因可以正常转录，C错误；
D、上、下游引物所含限制酶识别序列不同，即应采用两种不同的限制酶，以避免目的基因和质粒自身环化或目的基因反向连接，D正确；
E、CAR基因插入载体位点需位于启动子下游，以保证基因可以正常转录，E正确。
故选：ADE。
（3）scFv肽链不足以发挥抗原作用，但能发挥抗体识别作用，如果用高特异性抗体DNA直接构建CAR基因，再通过载体导入T细胞并稳定表达，不但会使治疗效果大幅降低，由于缺少scFv的识别作用，可能会导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，导致机体受损。
故答案为：
（1）体液 造血干细胞 分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化，同时其受刺激后细胞表面的分子发生特异性变化后与B细胞接触，参与B细胞的激活 C 聚乙二醇
（2）ADE
（3）导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，使机体受损
【点评】本题综合考查单克隆抗体的制备、基因工程的相关知识，还涉及免疫调节的基础知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
20．（2023秋 宣威市校级期末）我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为：该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如图所示，结合图回答问题：
（1）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核的卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用 诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合 。
（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植，其原因是 胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易 。
（3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 显微操作去核法 ，去除的“核”具体是指 纺锤体—染色体的复合物 。一般利用未去核的卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，其原因是 卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质 （答出2点）。
（4）体细胞克隆猴的另一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中Kdm4d的mRNA翻译产生的酶的作用是 参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触 。
【考点】动物细胞核移植技术．
【专题】正推法；克隆技术；解决问题能力．
【答案】（1）诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合
（2）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易
（3）显微操作去核法 纺锤体—染色体的复合物 卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质
（4）参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触
【分析】将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
【解答】解：（1）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核的卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合；
（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，故胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植；
（3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法，去除的“核”是指纺锤体—染色体的复合物；一般利用未去核的卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，因为卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质；
（4）图中Kdm4d的mRNA翻译产生的酶是组蛋白去甲基化酶，参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触。
故答案为：
（1）诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合
（2）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易
（3）显微操作去核法 纺锤体—染色体的复合物 卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质
（4）参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触
【点评】本题考查动物细胞工程的相关内容，要求学生能结合所学知识正确作答。
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一．选择题（共16小题）
1．（2024秋 南开区期末）下列与动物细胞细胞工程和胚胎工程有关的叙述中，错误的是（ ）
A．体外培养的动物细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
B．利用体细胞核移植技术可以生成带有供体核遗传物质的胚胎干细胞
C．杂交瘤细胞的克隆化培养可获得由单个细胞分裂增殖产生的细胞团
D．胚胎移植后经受体孕育的后代，其遗传特性与供体保持一致
2．（2024秋 东城区期末）利用小麦细胞与柴胡细胞进行植物体细胞杂交，希望获得具有柴胡药效的小麦。通过PCR对杂种植株和双亲植株的物种特异性DNA进行扩增，电泳结果如图所示。下列说法不正确的是（ ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理柴胡和小麦细胞
B．用电融合的方法或PEG诱导原生质体融合
C．杂种细胞中丢失了部分来自小麦的遗传信息
D．杂种细胞染色体组成与柴胡细胞完全相同
3．（2024秋 常州期末）关于细胞工程的操作，下列叙述错误的是（ ）
A．花药离体培养得到的胚状体需要鉴定核型，筛选后才能用于单倍体育种
B．诱导植物形成愈伤组织时往往要避光培养，而在再分化过程中要有光照
C．将动物组织块中的细胞分散开时，胰蛋白酶和胶原蛋白酶都需要使用
D．制备单克隆抗体过程中，第二次筛选时挑出阳性孔中的细胞扩大培养
4．（2025 浙江模拟）下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养不能得到优良动物个体
B．培养的体细胞传代次数不能过多是为了保持细胞正常的二倍体核型
C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性
D．胰蛋白酶处理动物组织后，用培养液稀释制成细胞悬浮液
5．（2025 浙江模拟）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后形成雌原核
B．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
6．（2025 内蒙古模拟）下列有关牛体外受精的叙述错误的是（ ）
A．精子需经过获能步骤，才可用于体外受精
B．卵母细胞需培养至MⅡ期，与精子结合完成受精
C．体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合
D．精子入卵后卵细胞膜发生生理反应，阻止其他精子进入
7．（2025 内蒙古模拟）动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是（ ）
A．配制细胞培养基时，加血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素后湿热灭菌
B．在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素
C．考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数
D．采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染
8．（2025 内蒙古模拟）关于膜融合的相关对象，下列叙述正确的是（ ）
A．胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与细胞膜融合
B．克隆羊过程中，电融合法促进供体细胞核和卵细胞融合
C．制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和T细胞融合
D．清除衰老细胞器过程中，会存在囊泡与溶酶体的融合
9．（2025 内蒙古模拟）下列关于植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．诱导愈伤组织形成和后续培养过程中均需提供适宜的温度和光照
B．诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例
C．获得的试管苗通常直接移栽大田
D．获得的脱毒苗具有抗病毒能力
10．（2024秋 海淀区期末）医学上把已经消除体细胞“记忆”，且恢复到胚胎细胞状态的细胞称为“重编程”细胞。研究发现，将通透性强的纤维原细胞短暂地暴露于鼠胚胎干细胞提取物中能获得“重编程”细胞。下列有关叙述正确的是（ ）
A．提取物通过改变细胞的遗传物质获得“重编程”细胞
B．“重编程”细胞的获得过程体现了纤维原细胞的全能性
C．“重编程”细胞的获得过程会改变细胞的形态、结构和功能
D．该项研究可以表明正常机体内细胞的分化过程是可逆的
11．（2024秋 重庆校级期末）CD14为抗巨噬细胞表面标志蛋白，制备抗CD14单克隆抗体的流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①和⑤是分别注射CD14蛋白和注射分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞
B．步骤②选用SP2/0细胞是因为该细胞具有能够在体外无限增殖的生长特点
C．吸取③中上清液到④培养孔中，③所得杂交瘤细胞均能分泌抗CD14抗体
D．步骤③采用了选择培养基进行筛选，步骤④则利用了抗原﹣抗体杂交的原理
12．（2024秋 朝阳区期末）法律和法规是规范生物技术研究，防止生物技术滥用的有力武器。下列叙述与我国相关法规不符的是（ ）
A．用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识
B．不得将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统
C．在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器
D．禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠
13．（2024秋 朝阳区期末）IL﹣17A是一种细胞因子，在银屑病等自身免疫病的发病机制中发挥关键作用。我国科研人员研发了抗IL﹣17A人源﹣鼠源重组单克隆抗体。以下关于该抗体制备过程的叙述正确的是（ ）
A．用IL﹣17A注射小鼠，从小鼠血清中分离出B细胞
B．用灭活病毒诱导小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞
C．用克隆化培养和PCR技术筛选出能分泌抗IL﹣17A抗体的杂交瘤细胞
D．用蛋白质工程技术直接将鼠源抗IL﹣17A抗体中的部分氨基酸序列替换为人源
14．（2024秋 朝阳区期末）我国科学家研制的干细胞药物——“人脐带间充质干细胞治疗心衰注射液”，已经进入临床试验阶段。据此推测合理的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞进入人体后可以分化为心肌细胞
B．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的基因表达情况相同
C．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的形态结构相同
D．人脐带间充质干细胞比心肌细胞的分化程度高
15．（2024秋 靖远县校级期末）6﹣磷酸葡萄糖脱氢酶（G﹣6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理，利用含血清的培养液进行原代培养，然后制成细胞悬液，转入无血清培养液对不同的单个细胞分别进行单克隆培养，克隆形成率与接种细胞密度的关系如表。分别从原代培养和各单克隆培养中取样，对提取到的G﹣6PD蛋白进行电泳检测，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
克隆形成率与接种细胞密度的关系
1mL中接种细胞数/个 1cm2上接种细胞数/个 克隆形成率/%
10000 2000 0.1
1000 200 1.0
20 4 50
10 2 100
A．无血清培养液必须含酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶过度消化而损伤
B．为提高克隆形成率，需将原代培养制成的细胞悬液稀释为10个细胞/mL或更低
C．原代培养的细胞电泳图中出现2种不同条带是等位基因XF和XS同时表达的产物
D．出现图示实验结果的原因可能是女性细胞中的一条X染色体随机失活而导致的
16．（2024秋 靖远县校级期末）体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不再发育，这种现象称为发育阻滞。研究表明，胚胎的发育阻滞与胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换有关。小鼠的受精卵发育早期的胚胎基本受母源性信息调控，自身基因的启动最早出现在2细胞期，该时期的胚胎对环境极为敏感。下列有关叙述正确的是（ ）
A．从活的母畜中采集到的卵母细胞均可直接用于体外受精
B．小鼠的胚胎发育阻滞一般发生在开始出现分化的囊胚期
C．体外培养条件与体内发育条件的差异不会造成发育阻滞
D．调控转换时可能发生母源mRNA被降解失活，自身基因转录活跃
二．解答题（共4小题）
17．（2024秋 南开区期末）研究者以拟南芥根段作为组织培养材料，探讨了激素诱导愈伤组织分化生芽的机制。请分析回答：
（1）离体的拟南芥根段在适宜条件下可以培育出完整的植株，说明 。
（2）剪下根段后需要经过一系列的消毒过程，一般先用流水冲洗，然后在无菌操作台上依次用 和次氯酸钠溶液等消毒剂浸泡消毒，从每种消毒剂中取出根段后需用 冲洗多次，再用无菌滤纸吸干表面水分。
（3）植物组织培养常用的MS培养基是在已配制好的MS母液中添加 、琼脂、植物激素等配制而成。在组织培养过程中，根段细胞经过 过程形成愈伤组织，此后调整培养基中细胞分裂素（CK）与生长素的比例可诱导愈伤组织分化。
（4）愈伤组织生芽过程中，细胞分裂素（CK）通过ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。为探讨A基因与W基因的关系，将A基因功能缺失突变体（突变体a）和野生型的愈伤组织分别置于细胞分裂素（CK）与生长素比例高的（高CK）培养基中诱导生芽，测定此过程中W基因的表达量，结果如图1。分析得出结论：在高CK诱导下A基因 （填“促进”或“抑制”）W基因表达。得出该结论的依据为：与野生型相比， 。
（5）采用转基因技术在上述突变体a中过量表达W基因，获得材料甲。将材料甲、突变体a和野生型三组愈伤组织在高CK培养基中培养，三组愈伤组织分化生芽的比例如图2，由此能得出的结论包括 。（多选）
A.A基因在愈伤组织生芽过程中起作
B.缺失A基因，W基因表达不能促进生芽
C.过量表达W基因可使生芽时间提前
D.W基因的表达产物调控A基因的表达
18．（2024秋 南开区期末）EB病毒（EBV）可引发鼻咽癌等癌症。我国科研人员制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体，为治疗和疫苗研发提供思路。
（1）如图1所示，EBV表面的糖蛋白gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，引起gB发生 变化，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合。gHgL可作为制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体的 。
不同荧光标记的分于 相关分子的特点
荧光A﹣抗CD4抗体 CD4为辅助性T细胞的标记分子
荧光B﹣抗CD8抗体 CD8为辅助毒性T细胞的体记分子
荧光C﹣抗CD20抗体 CD20为B细胞的标记分子
荧光D﹣抗CD56抗体 CD56为NK细胞的标记分子
荧光E﹣gHgL gHgL可与细胞上的受体特异性结合
（2）研究人员从EBV感染者外周血中分离出单个核细胞（PBMC），包含自然杀伤（NK）细胞、T细胞、B细胞。将右上表中不同荧光标记的分子与PBMC培养后筛选出目标细胞，将目标细胞中的抗体mRNA 为cDNA，扩增出gHgL抗体基因，转入细胞成功表达出单克隆抗体。筛选出的目标细胞应具有荧光 。（填写表格中大写字母）
（3）经筛选得到单抗D8，与已报道的单抗A1相比，两者都有较强的gHgL结合能力，都能显著抑制EBV病毒感染上皮细胞。将gHgL与D8或A1混合接触后，检测与上皮细胞表面受体E2的结合能力，结果如图2。分析可知D8与A1作用的区别是 。
19．（2025 云南模拟）嵌合抗原受体﹣T细胞（CAR﹣T细胞）疗法在人类肿瘤治疗中取得了重要突破。CAR﹣T细胞疗法是将CAR基因导入T细胞成为CAR﹣T细胞，通过CAR蛋白上的scFv肽链（小肽不足以发挥抗原作用，但能发挥抗体识别作用）特异性识别肿瘤细胞膜上的抗原，并通过CAR蛋白上的其它肽链结构激活CAR﹣T细胞继而杀伤肿瘤细胞。回答下列问题：
（1）获得含有scFv肽链的单克隆抗体，流程如图1。
①图中通过驱动细胞和测试细胞反复免疫小鼠产生抗体的过程属于 （填“细胞”或“体液”）免疫，参与该过程的免疫细胞来源于小鼠骨髓 。实验小鼠机体产生免疫应答的过程中，辅助性T细胞的主要作用是 。该实验最适用于筛选 （填标号）。
A．大鼠肝细胞区别于兔肝细胞特殊抗原的抗体
B．正常细胞区别于感染HIV细胞内特殊抗原的抗体
C．衰老神经细胞区别于正常神经细胞抗原的抗体
②取第二组小鼠分离脾细胞，加入 诱导脾细胞和骨髓瘤细胞的融合。
（2）CAR基因的构建，流程如图2。在设计添加CAR基因两端限制酶识别序列并与表达载体正确连接的过程中，必须考虑的有 （填标号）。
A．PCR使用的上、下游引物需含限制酶识别序列
B．CAR基因内可以含有引物所含限制酶识别序列
C．限制酶识别序列需位于载体启动子、复制原点和标记基因内
D．上、下游引物所含限制酶识别序列不同
E．CAR基因插入载体位点需位于启动子下游
（3）从免疫学角度分析，如果用高特异性抗体DNA直接构建CAR基因，再通过载体导入T细胞并稳定表达，不但会使治疗效果大幅降低，同时还会 。
20．（2023秋 宣威市校级期末）我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为：该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如图所示，结合图回答问题：
（1）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核的卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用 。
（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植，其原因是 。
（3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 ，去除的“核”具体是指 。一般利用未去核的卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，其原因是 （答出2点）。
（4）体细胞克隆猴的另一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中Kdm4d的mRNA翻译产生的酶的作用是 。
2025年高考生物复习考前冲刺 细胞工程
参考答案与试题解析
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
答案 A D C C C C B D B C C
题号 12 13 14 15 16
答案 B B A C D
一．选择题（共16小题）
1．（2024秋 南开区期末）下列与动物细胞细胞工程和胚胎工程有关的叙述中，错误的是（ ）
A．体外培养的动物细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
B．利用体细胞核移植技术可以生成带有供体核遗传物质的胚胎干细胞
C．杂交瘤细胞的克隆化培养可获得由单个细胞分裂增殖产生的细胞团
D．胚胎移植后经受体孕育的后代，其遗传特性与供体保持一致
【考点】体外受精和胚胎移植；动物细胞培养的条件与过程；单克隆抗体及其应用；动物细胞核移植技术．
【专题】正推法；植物的组织培养；理解能力．
【答案】A
【分析】体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖；另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，多数细胞属于这种类型悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞。
【解答】解：A、悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，A错误；
B、体细胞核移植技术获得的重组细胞，细胞核来自于供体，可以生成带有供体核遗传物质的胚胎干细胞，B正确；
C、克隆化培养指单细胞培养，使之无性繁殖获得克隆细胞团的方法，将杂交瘤细胞克隆化培养，可获得由单个细胞分裂增殖产生的细胞团，C正确；
D、代孕母体不提供遗传物质，提供营养和子宫环境孕育后代，后代的遗传特性与供体一致，D正确。
故选：A。
【点评】本题考查动物工程的相关内容，要求学生能运用所学的知识正确作答。
2．（2024秋 东城区期末）利用小麦细胞与柴胡细胞进行植物体细胞杂交，希望获得具有柴胡药效的小麦。通过PCR对杂种植株和双亲植株的物种特异性DNA进行扩增，电泳结果如图所示。下列说法不正确的是（ ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理柴胡和小麦细胞
B．用电融合的方法或PEG诱导原生质体融合
C．杂种细胞中丢失了部分来自小麦的遗传信息
D．杂种细胞染色体组成与柴胡细胞完全相同
【考点】植物体细胞杂交技术及应用．
【专题】正推法；植物的组织培养；理解能力．
【答案】D
【分析】植物体细胞杂交技术：将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
【解答】解：A、用纤维素酶和果胶酶处理柴胡和小麦细胞，以获得原生质体，A正确；
B、电融合法或PEG诱导法均可以用于原生质体融合过程，B正确；
C、对比杂种植株和小麦的电泳结果可知，小麦中某些条带在杂种植株中没有相应的条带，说明杂种细胞中丢失了部分来自小麦的遗传信息，C正确；
D、杂种细胞染色体来源于柴胡和小麦，与柴胡细胞不完全相同，D错误。
故选：D。
【点评】本题考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程及意义，能结合所学的知识准确判断各选项。
3．（2024秋 常州期末）关于细胞工程的操作，下列叙述错误的是（ ）
A．花药离体培养得到的胚状体需要鉴定核型，筛选后才能用于单倍体育种
B．诱导植物形成愈伤组织时往往要避光培养，而在再分化过程中要有光照
C．将动物组织块中的细胞分散开时，胰蛋白酶和胶原蛋白酶都需要使用
D．制备单克隆抗体过程中，第二次筛选时挑出阳性孔中的细胞扩大培养
【考点】单克隆抗体及其应用；植物的组织培养；作物新品种的培育；动物细胞培养的条件与过程．
【专题】正推法；育种；植物的组织培养；克隆技术；理解能力．
【答案】C
【分析】植物组织培养：将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【解答】解：A、花药离体培养得到的胚状体有可能来自于花药壁等组织细胞，不一定为单倍体组织，因此需要鉴定核型，筛选后才能用于单倍体育种，A正确；
B、植物组织培养过程中，脱分化形成愈伤组织时要避光培养，而在再分化过程中要有光照，B正确；
C、将动物组织块中的细胞分散开时，只需要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶即可，C错误；
D、制备单克隆抗体过程中，第二次筛选为克隆化培养和单一抗体阳性检验，应挑出阳性孔中的细胞扩大培养，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查单倍体育种、植物组织培养、动物细胞培养等技术及相关应用，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
4．（2025 浙江模拟）下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养不能得到优良动物个体
B．培养的体细胞传代次数不能过多是为了保持细胞正常的二倍体核型
C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性
D．胰蛋白酶处理动物组织后，用培养液稀释制成细胞悬浮液
【考点】动物细胞培养的条件与过程；动物细胞融合技术．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】C
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【解答】解：A、动物细胞融合形成的杂种细胞经过动物细胞培养不能培育成动物个体，且动物细胞培养只能得到大量细胞或细胞产物，不能得到动物个体，A正确；
B、体细胞传代次数过多遗传物质会发生改变，培养的体细胞传代次数不能过多，一般在10代以内，目的是保持细胞正常的二倍体核型，B正确；
C、不能通过显微镜观察到基因突变，C错误；
D、胰蛋白酶可以消化细胞间的胶原纤维和其它成分从而获得单细胞，用培养液稀释制成细胞悬浮液，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
5．（2025 浙江模拟）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后形成雌原核
B．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
【考点】体外受精和胚胎移植；胚胎分割技术．
【专题】正推法；胚胎工程．
【答案】C
【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
【解答】解：AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减 数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核，AB正确；
C、对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，C错误；
D、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测，设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，D正确。
故选：C。
【点评】本题主要考查体外受精和胚胎移植、胚胎分割技术的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
6．（2025 内蒙古模拟）下列有关牛体外受精的叙述错误的是（ ）
A．精子需经过获能步骤，才可用于体外受精
B．卵母细胞需培养至MⅡ期，与精子结合完成受精
C．体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合
D．精子入卵后卵细胞膜发生生理反应，阻止其他精子进入
【考点】体外受精和胚胎移植．
【专题】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】C
【分析】哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精等几个主要步骤。
【解答】解：A、体外受精时，采集到的精子需要经获能处理后才具有受精能力，才可用于体外受精，A正确；
B、动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到MⅡ时，才具备与精子受精的能力，B正确；
C、体外受精不需加入聚乙二醇等诱导精卵结合，聚乙二醇常用于细胞融合，C错误；
D、卵细胞膜反应是指精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程，这是防止多精入卵的第二道屏障，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查体外受精的相关知识，要求考生识记体外受精的具体过程及注意事项，能结合所学的知识准确答题。
7．（2025 内蒙古模拟）动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是（ ）
A．配制细胞培养基时，加血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素后湿热灭菌
B．在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素
C．考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数
D．采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染
【考点】动物细胞培养的条件与过程．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】B
【分析】动物细胞培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。
【解答】解：A、配制细胞培养基时，湿热灭菌后通过过滤灭菌加入血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素，A错误；
B、在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素，保证动物细胞的正常生长，同时抑制细菌的生长，B正确；
C、考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释后涂布在平板上培养，待菌落数目稳定后计数，C错误；
D、采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作都不能清除“黑胶虫”污染，D错误。
故选：B。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
8．（2025 内蒙古模拟）关于膜融合的相关对象，下列叙述正确的是（ ）
A．胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与细胞膜融合
B．克隆羊过程中，电融合法促进供体细胞核和卵细胞融合
C．制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和T细胞融合
D．清除衰老细胞器过程中，会存在囊泡与溶酶体的融合
【考点】单克隆抗体及其应用；各类细胞器的结构和功能．
【专题】正推法；细胞器；克隆技术；理解能力．
【答案】D
【分析】分泌蛋白的合成、加工和运输过程：最初是在核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进入内质网进行加工，形成有一定空间结构的蛋白质，再到高尔基体，高尔基体对其进行进一步加工，然后形成囊泡分泌到细胞外。该过程消耗的能量由线粒体提供。
【解答】解：A、胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与高尔基体膜融合，A错误；
B、克隆羊过程中，供体细胞被注入卵母细胞后，可通过电融合法促进细胞融合，而非促进细胞核与卵细胞融合，B错误；
C、制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和B细胞融合，C错误；
D、溶酶体含多种酸性水解酶，通过含有损伤衰老细胞器的囊泡与溶酶体的融合，能够清除衰老的细胞器，D正确。
故选：D。
【点评】本题考查膜融合的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
9．（2025 内蒙古模拟）下列关于植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．诱导愈伤组织形成和后续培养过程中均需提供适宜的温度和光照
B．诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例
C．获得的试管苗通常直接移栽大田
D．获得的脱毒苗具有抗病毒能力
【考点】植物的组织培养．
【专题】正推法；植物的组织培养；理解能力．
【答案】B
【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。
【解答】解：A、诱导愈伤组织形成的过程中不需要光照，后续培养过程中需要光照，A错误；
B、生长素与细胞分裂素比值高时有利于诱导根的形成，该比值较低时有利于诱导芽的形成，因此诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例，B正确；
C、获得的幼苗需要先移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长状后再移栽到大田中，C错误；
D、茎尖等分裂旺盛部位无病毒感染，利用茎尖分生组织能培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，即脱毒苗，脱毒苗不等于抗毒苗，即获得的脱毒苗不具备抗病毒能力，D错误。
故选：B。
【点评】本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
10．（2024秋 海淀区期末）医学上把已经消除体细胞“记忆”，且恢复到胚胎细胞状态的细胞称为“重编程”细胞。研究发现，将通透性强的纤维原细胞短暂地暴露于鼠胚胎干细胞提取物中能获得“重编程”细胞。下列有关叙述正确的是（ ）
A．提取物通过改变细胞的遗传物质获得“重编程”细胞
B．“重编程”细胞的获得过程体现了纤维原细胞的全能性
C．“重编程”细胞的获得过程会改变细胞的形态、结构和功能
D．该项研究可以表明正常机体内细胞的分化过程是可逆的
【考点】干细胞的培养及其应用．
【专题】正推法；细胞的分化、衰老和凋亡．
【答案】C
【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
【解答】解；A、“重编程”细胞为恢复到胚胎细胞状态的细胞，细胞的遗传物质未发生改变，A错误；
B、细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，即细胞的全能性，所以“重编程”细胞的获得不能体现纤维原细胞的全能性，B错误；
C、纤维原细胞是分化后的细胞，具有一定的形态和结构，而“重编程”细胞是胚胎细胞状态的细胞，其结构与纤维原细胞不同，故“重编程”细胞的获得过程会改变细胞的形态、结构和功能，C正确；
D、细胞的分化是不可逆的，D错误。
故选：C。
【点评】本题主要考查细胞的全能性的相关知识，要求考生能够结合所学知识准确判断各选项，属于识记和理解层次的考查。
11．（2024秋 重庆校级期末）CD14为抗巨噬细胞表面标志蛋白，制备抗CD14单克隆抗体的流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①和⑤是分别注射CD14蛋白和注射分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞
B．步骤②选用SP2/0细胞是因为该细胞具有能够在体外无限增殖的生长特点
C．吸取③中上清液到④培养孔中，③所得杂交瘤细胞均能分泌抗CD14抗体
D．步骤③采用了选择培养基进行筛选，步骤④则利用了抗原﹣抗体杂交的原理
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】模式图；克隆技术；理解能力．
【答案】C
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【解答】解：A、要获得抗CD14单克隆抗体，步骤①应该注射CD14蛋白（CD14抗原），步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体，A正确；
B、步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，具有能够在体外无限增殖的生长特点，B正确；
C、形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，③所得杂交瘤细胞不一定能分泌抗CD14抗体，需要利用抗原﹣抗体杂交原理进行第二次筛选，C错误；
D、步骤③用特定的选择培养基进行筛选，在该选择培养基上，只有融合的杂交瘤细胞才能够生长，没有融合的细胞及同种核融合的细胞不能生长；步骤④则利用了抗原﹣抗体杂交的原理，用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体，D正确。
故选：C。
【点评】本题考查单克隆抗体的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
12．（2024秋 朝阳区期末）法律和法规是规范生物技术研究，防止生物技术滥用的有力武器。下列叙述与我国相关法规不符的是（ ）
A．用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识
B．不得将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统
C．在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器
D．禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠
【考点】体外受精和胚胎移植；生物技术引发的伦理问题；生物武器对人类的威胁．
【专题】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】B
【分析】生物安全是指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康以及生态环境所产生的危害或潜在风险。消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面。我国禁止生殖性克隆人原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。
【解答】解：A、按照有关转基因农作物的法律法规，用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识，A正确；
B、我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验，但可以在特定条件下可以将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统获得试管婴儿，B错误；
C、我国在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，C正确；
D、按照相关法律，我国禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠，D正确。
故选：B。
【点评】本题主要考查的是生物技术的安全性和伦理问题的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
13．（2024秋 朝阳区期末）IL﹣17A是一种细胞因子，在银屑病等自身免疫病的发病机制中发挥关键作用。我国科研人员研发了抗IL﹣17A人源﹣鼠源重组单克隆抗体。以下关于该抗体制备过程的叙述正确的是（ ）
A．用IL﹣17A注射小鼠，从小鼠血清中分离出B细胞
B．用灭活病毒诱导小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞
C．用克隆化培养和PCR技术筛选出能分泌抗IL﹣17A抗体的杂交瘤细胞
D．用蛋白质工程技术直接将鼠源抗IL﹣17A抗体中的部分氨基酸序列替换为人源
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】B
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：A、制备单克隆抗体，首先用IL﹣17A（抗原）注射小鼠，从小鼠脾脏中分离出B细胞，A错误；
B、动物细胞融合可以用灭活病毒诱导，制备单克隆抗体需要将经免疫的小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，B正确；
C、用克隆化培养和抗原—抗体分子杂交技术（单一抗体检测）筛选出能分泌抗IL﹣17A抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D、蛋白质工程技术需要通过改变基因结构进而改造蛋白质，而不能直接改变蛋白质（例如鼠源抗IL﹣17A抗体）中的氨基酸序列，D错误。
故选：B。
【点评】本题考查单克隆抗体的制备与应用的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
14．（2024秋 朝阳区期末）我国科学家研制的干细胞药物——“人脐带间充质干细胞治疗心衰注射液”，已经进入临床试验阶段。据此推测合理的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞进入人体后可以分化为心肌细胞
B．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的基因表达情况相同
C．人脐带间充质干细胞与心肌细胞的形态结构相同
D．人脐带间充质干细胞比心肌细胞的分化程度高
【考点】干细胞的培养及其应用．
【专题】正推法；细胞的分化、衰老和凋亡；理解能力．
【答案】A
【分析】细胞分化的概念：在个体发育中，相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化过程遗传物质不变，只是基因选择性表达的结果。
【解答】解：A、人脐带间充质干细胞作为干细胞的一种，具有自我更新和分化为多种细胞类型的潜能。在特定的条件下，它们可以分化为心肌细胞，这对于治疗心衰等心脏疾病具有重要意义，A正确；
B、细胞分化是基因选择性表达的结果，由于人脐带间充质干细胞和心肌细胞是两种不同类型的细胞，它们的基因表达情况必然存在差异，B错误；
C、人脐带间充质干细胞和心肌细胞作为两种不同类型的细胞，它们的形态和结构通常也会有所不同，C错误；
D、细胞分化的程度通常与其功能特化和形态结构的复杂性成正比。心肌细胞作为高度特化的细胞类型，其分化程度通常要高于未分化的干细胞，D错误。
故选：A。
【点评】本题考查干细胞的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
15．（2024秋 靖远县校级期末）6﹣磷酸葡萄糖脱氢酶（G﹣6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理，利用含血清的培养液进行原代培养，然后制成细胞悬液，转入无血清培养液对不同的单个细胞分别进行单克隆培养，克隆形成率与接种细胞密度的关系如表。分别从原代培养和各单克隆培养中取样，对提取到的G﹣6PD蛋白进行电泳检测，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
克隆形成率与接种细胞密度的关系
1mL中接种细胞数/个 1cm2上接种细胞数/个 克隆形成率/%
10000 2000 0.1
1000 200 1.0
20 4 50
10 2 100
A．无血清培养液必须含酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶过度消化而损伤
B．为提高克隆形成率，需将原代培养制成的细胞悬液稀释为10个细胞/mL或更低
C．原代培养的细胞电泳图中出现2种不同条带是等位基因XF和XS同时表达的产物
D．出现图示实验结果的原因可能是女性细胞中的一条X染色体随机失活而导致的
【考点】动物细胞培养的条件与过程．
【专题】数据表格；胚胎工程；理解能力；解决问题能力．
【答案】C
【分析】由题干信息可知，“将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理，进行原代培养，然后用不同的单个细胞分别进行单克隆培养”，无论是原代培养还是单克隆培养，对于体细胞来说，正常情况下得到的细胞基因型是相同的；由题图的电泳结果分析，1﹣9通过单克隆培养得到的细胞所含的蛋白都只有一种，说明可能是女性细胞中一条X染色体在电泳过程中随机失活导致的。据此分析判断即可。
【解答】解：A、培养贴壁生长的细胞需用消化酶消化传代，在含血清传代培养时，血清中某些成分可以终止消化酶的消化作用，而无血清培养液培养时，必须使用酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶过度消化而损伤，A正确；
B、细胞悬液的细胞密度越大，接种时每平方厘米培养皿上接种的细胞就越多，克隆的形成率就越低，B正确；
CD、原代培养细胞电泳图有2个条带，单克隆培养的细胞只有1个条带，可能的原因是女性细胞虽然含有XF和XS，但其中一条X染色体可能随机失活，原代培养细胞电泳图出现2个不同条带可能是因为同时检测了多个细胞的产物，C错误、D正确。
故选：C。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
16．（2024秋 靖远县校级期末）体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不再发育，这种现象称为发育阻滞。研究表明，胚胎的发育阻滞与胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换有关。小鼠的受精卵发育早期的胚胎基本受母源性信息调控，自身基因的启动最早出现在2细胞期，该时期的胚胎对环境极为敏感。下列有关叙述正确的是（ ）
A．从活的母畜中采集到的卵母细胞均可直接用于体外受精
B．小鼠的胚胎发育阻滞一般发生在开始出现分化的囊胚期
C．体外培养条件与体内发育条件的差异不会造成发育阻滞
D．调控转换时可能发生母源mRNA被降解失活，自身基因转录活跃
【考点】体外受精和胚胎移植．
【专题】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】D
【分析】胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。
（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎。
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔[细胞分化在胚胎期达到最大限度。
【解答】解：A、借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具直接从活体动物卵巢中吸取的卵母细胞需体外培养成熟才可用于体外受精，A错误；
B、胚胎的发育阻滞与胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换有关，小鼠的胚胎发育调控转换期是在2细胞期，母源mRNA逐渐被降解失活，自身基因转录活跃，最易发生发育阻滞，B错误；
C、胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换时，对环境极为敏感，体内发育条件一般比体外更适宜、稳定，故体外培养容易发生发育阻滞，C错误；
D、胚胎的母源基因调控向自身基因调控转换时可能发生母源mRNA被降解失活，自身基因转录活跃的情况，D正确。
故选：D。
【点评】本题考查胚胎工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
二．解答题（共4小题）
17．（2024秋 南开区期末）研究者以拟南芥根段作为组织培养材料，探讨了激素诱导愈伤组织分化生芽的机制。请分析回答：
（1）离体的拟南芥根段在适宜条件下可以培育出完整的植株，说明 植物细胞具有全能性 。
（2）剪下根段后需要经过一系列的消毒过程，一般先用流水冲洗，然后在无菌操作台上依次用 酒精 和次氯酸钠溶液等消毒剂浸泡消毒，从每种消毒剂中取出根段后需用 无菌水 冲洗多次，再用无菌滤纸吸干表面水分。
（3）植物组织培养常用的MS培养基是在已配制好的MS母液中添加 蔗糖 、琼脂、植物激素等配制而成。在组织培养过程中，根段细胞经过 脱分化 过程形成愈伤组织，此后调整培养基中细胞分裂素（CK）与生长素的比例可诱导愈伤组织分化。
（4）愈伤组织生芽过程中，细胞分裂素（CK）通过ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。为探讨A基因与W基因的关系，将A基因功能缺失突变体（突变体a）和野生型的愈伤组织分别置于细胞分裂素（CK）与生长素比例高的（高CK）培养基中诱导生芽，测定此过程中W基因的表达量，结果如图1。分析得出结论：在高CK诱导下A基因 促进 （填“促进”或“抑制”）W基因表达。得出该结论的依据为：与野生型相比， 经高CK诱导后，突变体a中的W基因表达量明显低 。
（5）采用转基因技术在上述突变体a中过量表达W基因，获得材料甲。将材料甲、突变体a和野生型三组愈伤组织在高CK培养基中培养，三组愈伤组织分化生芽的比例如图2，由此能得出的结论包括 ABC 。（多选）
A.A基因在愈伤组织生芽过程中起作
B.缺失A基因，W基因表达不能促进生芽
C.过量表达W基因可使生芽时间提前
D.W基因的表达产物调控A基因的表达
【考点】植物的组织培养．
【专题】图文信息类简答题；植物的组织培养；解决问题能力．
【答案】（1）植物细胞具有全能性
（2）酒精 无菌水
（3）蔗糖 脱分化
（4）促进 经高CK诱导后，突变体a中的W基因表达量明显低
（5）ABC
【分析】植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即细胞经分裂和分化后仍然具有发育成完整植株的潜能；生长素和细胞分裂素能促进细胞分裂分化，在培养的不同时期对两者的比例会有不同要求，在再分化过程中，生长素高，促进根的分化，细胞分裂素比例高，促进芽的分化。植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【解答】解：（1）离体的植物组织培养成完整植株的过程体现了细胞的全能性。
（2）外植体消毒一般先用流水冲洗，然后在无菌操作台上依次用酒精和次氯酸钠溶液浸泡消毒，从每种消毒剂中取出根段后需用无菌水冲洗多次，最后再用无菌滤纸吸干表面水分。
（3）MS培养基是在已配制好的MS母液中添加蔗糖、琼脂、植物激素等配制而成。已分化的细胞形成愈伤组织的过程称之为脱分化，植物激素可诱导愈伤组织分化，生长素用量比细胞分裂素（CK）比值适中时，促进愈伤组织的形成。
（4）由图判断，经高CK诱导后，突变体a的W基因的表达量明显低，说明在高CK诱导下A基因促进W基因表达。
（5）材料甲体内缺少A基因，W基因过量表达，突变体a的A基因不能表达，野生型是正常的，由图2野生型曲线和突变体a曲线对比可知，A基因在愈伤组织分化生芽的过程中起作用，缺失A基因时W基因表达不能促进生芽；由材料甲曲线和野生型曲线比较可知，过量表达W基因可使生芽时间提前。
故选：ABC。
故答案为：
（1）植物细胞具有全能性
（2）酒精 无菌水
（3）蔗糖 脱分化
（4）促进 经高CK诱导后，突变体a中的W基因表达量明显低
（5）ABC
【点评】本题结合柱形图和折线图，考查植物组织培养过程分析，要求考生能够从题目中提取有效信息进行分析，难度适中。
18．（2024秋 南开区期末）EB病毒（EBV）可引发鼻咽癌等癌症。我国科研人员制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体，为治疗和疫苗研发提供思路。
（1）如图1所示，EBV表面的糖蛋白gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，引起gB发生 空间结构 变化，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合。gHgL可作为制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体的 抗原 。
不同荧光标记的分于 相关分子的特点
荧光A﹣抗CD4抗体 CD4为辅助性T细胞的标记分子
荧光B﹣抗CD8抗体 CD8为辅助毒性T细胞的体记分子
荧光C﹣抗CD20抗体 CD20为B细胞的标记分子
荧光D﹣抗CD56抗体 CD56为NK细胞的标记分子
荧光E﹣gHgL gHgL可与细胞上的受体特异性结合
（2）研究人员从EBV感染者外周血中分离出单个核细胞（PBMC），包含自然杀伤（NK）细胞、T细胞、B细胞。将右上表中不同荧光标记的分子与PBMC培养后筛选出目标细胞，将目标细胞中的抗体mRNA 逆转录 为cDNA，扩增出gHgL抗体基因，转入细胞成功表达出单克隆抗体。筛选出的目标细胞应具有荧光 C、E 。（填写表格中大写字母）
（3）经筛选得到单抗D8，与已报道的单抗A1相比，两者都有较强的gHgL结合能力，都能显著抑制EBV病毒感染上皮细胞。将gHgL与D8或A1混合接触后，检测与上皮细胞表面受体E2的结合能力，结果如图2。分析可知D8与A1作用的区别是 D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能 。
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】正推法；克隆技术；理解能力．
【答案】（1）空间结构；抗原
（2）逆转录；C、E
（3）D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：（1）分析图1，EBV表面的糖蛋白gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，会引起gB的空间结构发生改变。gHgL与上皮细胞表面受体（如E2等）结合后，会引起gB的空间结构发生改变，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合，抗gHgL的单克隆抗体可与gHgL结合，阻断其与上皮细胞表面受体（如E2等）结合，进而阻断病毒包膜和上皮细胞膜融合，阻断EBV感染，故gHgL可作为制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体的抗原。
（2）cDNA是mRNA通过逆转录形成的。根据gHgL的作用机理，可知筛选出的目标细胞分泌产生的抗体与B细胞构成竞争关系，同时其发挥作用需要膜上的受体特异性结合，故筛选出的目标细胞应具有荧光C和E。
（3）依据图示信息和题干内容可知，gHgL与D8混合接触后，与上皮细胞表面受体E2的结合能力明显下降，而与A1混合接触后，变化不大，说明D8与A1作用的区别是D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能。
故答案为：
（1）空间结构；抗原
（2）逆转录；C、E
（3）D8能够阻碍gHgL和E2结合，而A1不能
【点评】本题考查单克隆抗体的制备，考查学生对相关概念、原理的理解与掌握程度，以及运用所学知识分析和解决实际问题的能力。
19．（2025 云南模拟）嵌合抗原受体﹣T细胞（CAR﹣T细胞）疗法在人类肿瘤治疗中取得了重要突破。CAR﹣T细胞疗法是将CAR基因导入T细胞成为CAR﹣T细胞，通过CAR蛋白上的scFv肽链（小肽不足以发挥抗原作用，但能发挥抗体识别作用）特异性识别肿瘤细胞膜上的抗原，并通过CAR蛋白上的其它肽链结构激活CAR﹣T细胞继而杀伤肿瘤细胞。回答下列问题：
（1）获得含有scFv肽链的单克隆抗体，流程如图1。
①图中通过驱动细胞和测试细胞反复免疫小鼠产生抗体的过程属于 体液 （填“细胞”或“体液”）免疫，参与该过程的免疫细胞来源于小鼠骨髓 造血干细胞 。实验小鼠机体产生免疫应答的过程中，辅助性T细胞的主要作用是 分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化，同时其受刺激后细胞表面的分子发生特异性变化后与B细胞接触，参与B细胞的激活 。该实验最适用于筛选 C （填标号）。
A．大鼠肝细胞区别于兔肝细胞特殊抗原的抗体
B．正常细胞区别于感染HIV细胞内特殊抗原的抗体
C．衰老神经细胞区别于正常神经细胞抗原的抗体
②取第二组小鼠分离脾细胞，加入 聚乙二醇 诱导脾细胞和骨髓瘤细胞的融合。
（2）CAR基因的构建，流程如图2。在设计添加CAR基因两端限制酶识别序列并与表达载体正确连接的过程中，必须考虑的有 ADE （填标号）。
A．PCR使用的上、下游引物需含限制酶识别序列
B．CAR基因内可以含有引物所含限制酶识别序列
C．限制酶识别序列需位于载体启动子、复制原点和标记基因内
D．上、下游引物所含限制酶识别序列不同
E．CAR基因插入载体位点需位于启动子下游
（3）从免疫学角度分析，如果用高特异性抗体DNA直接构建CAR基因，再通过载体导入T细胞并稳定表达，不但会使治疗效果大幅降低，同时还会 导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，使机体受损 。
【考点】单克隆抗体及其应用．
【专题】图文信息类简答题；免疫调节；基因工程；克隆技术；理解能力．
【答案】（1）体液 造血干细胞 分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化，同时其受刺激后细胞表面的分子发生特异性变化后与B细胞接触，参与B细胞的激活 C 聚乙二醇
（2）ADE
（3）导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，使机体受损
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：（1）①体液免疫由B细胞介导完成，由浆细胞产生抗体发挥作用，其中的免疫细胞由骨髓造血干细胞分裂分化而来。在实验小鼠产生免疫应答（即体液免疫）的过程中，辅助性T细胞的主要作用包括以下几个方面：接受来自抗原呈递细胞的抗原信息，细胞表面的特定分子发生变化并与B细胞接触，这是激活B细胞的第二信号，辅助性T细胞还可以分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化。
A、物种不同，表面抗原差异较大，A错误；
B、感染HIV细胞内特殊抗原不能被抗体识别，B错误；
C、同一物种，细胞衰老后可能产生个别的特异性抗原，C正确。
故选：C。
②动物细胞融合技术中可以利用灭活的病毒或聚乙二醇诱导细胞融合。
（2）A、PCR使用的上、下游引物的5′端需含限制酶识别序列，从而使扩增得到的DNA可以被限制酶识别，A正确；
B、CAR基因内不能含有相关的限制酶识别序列，否则会被限制酶切割破坏，B错误；
C、限制酶识别序列需位于载体的启动子下游、终止子上游，以保证基因可以正常转录，C错误；
D、上、下游引物所含限制酶识别序列不同，即应采用两种不同的限制酶，以避免目的基因和质粒自身环化或目的基因反向连接，D正确；
E、CAR基因插入载体位点需位于启动子下游，以保证基因可以正常转录，E正确。
故选：ADE。
（3）scFv肽链不足以发挥抗原作用，但能发挥抗体识别作用，如果用高特异性抗体DNA直接构建CAR基因，再通过载体导入T细胞并稳定表达，不但会使治疗效果大幅降低，由于缺少scFv的识别作用，可能会导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，导致机体受损。
故答案为：
（1）体液 造血干细胞 分泌细胞因子，促进B细胞增殖分化，同时其受刺激后细胞表面的分子发生特异性变化后与B细胞接触，参与B细胞的激活 C 聚乙二醇
（2）ADE
（3）导致CAR蛋白攻击其他正常细胞，使机体受损
【点评】本题综合考查单克隆抗体的制备、基因工程的相关知识，还涉及免疫调节的基础知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
20．（2023秋 宣威市校级期末）我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为：该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如图所示，结合图回答问题：
（1）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核的卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用 诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合 。
（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植，其原因是 胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易 。
（3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 显微操作去核法 ，去除的“核”具体是指 纺锤体—染色体的复合物 。一般利用未去核的卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，其原因是 卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质 （答出2点）。
（4）体细胞克隆猴的另一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中Kdm4d的mRNA翻译产生的酶的作用是 参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触 。
【考点】动物细胞核移植技术．
【专题】正推法；克隆技术；解决问题能力．
【答案】（1）诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合
（2）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易
（3）显微操作去核法 纺锤体—染色体的复合物 卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质
（4）参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触
【分析】将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
【解答】解：（1）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核的卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合；
（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，故胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移植；
（3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法，去除的“核”是指纺锤体—染色体的复合物；一般利用未去核的卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，因为卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质；
（4）图中Kdm4d的mRNA翻译产生的酶是组蛋白去甲基化酶，参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触。
故答案为：
（1）诱导胎猴体细胞与去核卵母细胞融合
（2）胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易
（3）显微操作去核法 纺锤体—染色体的复合物 卵母细胞体积大，易操作，并且卵母细胞中具有促进细胞核全能性表达的物质
（4）参与形成不同组蛋白甲基化状态，调节DNA和组蛋白的缠绕程度，从而控制这些DNA与基因转录因子接触
【点评】本题考查动物细胞工程的相关内容，要求学生能结合所学知识正确作答。
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