课件28张PPT。2.2 动物细胞工程选修3 现代生物科技专题 专题2 细胞工程教学目标重点难点问题探讨教学过程知识结构教学反馈课后习题教学参考2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体教学目标
了解动物细胞融合的原理、过程和意义。
理解单克隆抗体制备的过程和应用重点难点1.教学重点：
单克隆抗体的制备和应用
2.教学难点：
单克隆抗体的制备过程 问题探讨 “番茄—马铃薯”（理想图） 通过长期的实验，科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？动物细胞也能融合吗？教学过程一.动物细胞融合
1.动物融合的过程
请同学们阅读课本P52动物融合
动物细胞融合过程示意图不同DNA的两个细胞 灭活的病毒有丝分裂两个完整的杂交细胞灭活病毒诱导细胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。思考题1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？
酶解法，如纤维素酶或果胶酶
2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？
无需，因为动物细胞无细胞壁
3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？
离心、电激等物理方法；PEG等化学方法
4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？
能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？
不能
7.你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？思考题 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞8.在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体6.你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？
主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株主要用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性细胞融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较2.动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。1.抗体是由何种细胞产生的？
效应B细胞（浆细胞）。
2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？
每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
3.一种抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？
动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。
4. 简述获得抗体的传统途径？
抗原 动物体 抗体
抗原不纯 抗体不纯
二、单克隆抗体刺激浆细胞
6.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？
体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体7.体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？
5.这种方法获得的抗体有什么缺陷？
产量低，纯度低，特异性差1.设计方案：
一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖
杂种细胞二、单克隆抗体2.制备过程：免疫小鼠培养骨髓瘤细胞融合骨髓瘤细胞
B淋巴细胞注射特定抗原蛋白选择培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞 单克隆抗体制备过程示意图多种杂交细胞3.单克隆抗体的应用： ①在基础理论研究中具有重要意义
②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有
③生物导弹
二、单克隆抗体特异性强、灵敏度高 等优越性。用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，灵敏度很高，在妊娠第8天就可以做出诊断，比原来的诊断方法提前了10天左右，可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90％以上。知识结构两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活的病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势教学反馈1.动物细胞融合技术最重要的用途是 （ ）
A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体
C.培育新物种 D.生产杂种细胞B2.单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ ） A.B淋巴细胞 B.T淋巴细胞
C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞 D3.（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是 （ ）
A.效应B细胞 B．T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D．杂交瘤细胞 A B C D 4.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案制备单克隆抗体不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。(1).该实验方案的目的是：________________(2).该方案能达到预期效果吗？为什么？(3).A是从小鼠的脾脏中取得__________ 该细胞能够产生______ 。
(4).图中B为________________过程，常用_________________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。
(5).C过程指细胞培养，该过程包括________培养和__________培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。B淋巴细胞抗体细胞融合灭活的病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代50课后习题1. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞
诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，
在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ）
①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A.②④ B.①③⑤
C.①②③④ D.②③
C2.动物细胞融合和植物原生质融合决定于 ( )
A.细胞膜的流动性 B．细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D．细胞质酶的活性 A一.选择题3.“生物导弹”是指 （ ）
A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞
C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 D4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是 （ ）
A．PEG B．灭活的病毒 C．电刺激 D．离心A二.简答题1.淋巴细胞是由动物体---------------------中的---------------------细胞分化发育而来的。
2.杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是---------------------骨髓造血干主动运输三.思考与探究
1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？
2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？提示：植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。 提示：哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞 能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性──在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。 教学参考1.已成功的动物细胞融合实例还有哪些？
生物种类 细胞来源 成功年代
酵母菌—鸡 原生质体—血红细胞 1975年
人—胡萝卜 腹水癌细胞—原生质体 1976年
人—小鼠 纤维肉瘤细胞—畸胎瘤细胞 1978年要知道更多的实例，需经常查阅更多科研报道。2.为什么不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的融合？ 就目前常用的细胞融合方法来看，不管是用物理的、化学的方法，还是生物的方法，其融合率都不可能是100%。仅用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞。更重要的是，即使两个细胞已发生融合，但并不一定是研究者期望得到的细胞类型。目前动物细胞融合技术最有价值的应用就是单克隆抗体的制备。我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，如果仅取一个脾细胞（含B淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的；若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合，就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。3.如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ 融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。课件45张PPT。2.2.2
动物细胞融合
与
单克隆抗体去壁去壁纤维素酶果胶酶原生质体植物细胞原生质体融合离心、振动、电刺激、
聚乙二醇再生细胞壁杂种细胞脱分化愈伤组织杂种植株激素筛选等量激素再分化植物体细胞杂交过程示意图去壁的常用方法： 原生质体融合方法： 动物单个细胞的获得 动物细胞虽然没有细胞壁，但细胞间的连接方式多样而复杂，在进行有效的细胞融合之前，也必需获得单个分散的细胞。 一.动物细胞融合1)、组织的获得 采用各种适宜的方法处死动物，取出组织块放入小烧杯中，用剪刀将组织块剪碎成1mm3大小，用吸管吸取Hanks（平衡盐溶液之一）溶液冲下剪刀上的碎块，补加3－5ml的Hanks溶液，用吸管轻轻吸打，低速离心，弃去上清液，留下组织块。 2)、组织的消化 通过生物化学的方法将剪碎的组织块分散成细胞团或单细胞。根据不同的组织对象采用不同的酶消化液。如最常用的有胰蛋白酶和胶原酶等。其他的酶如链霉蛋白酶、粘蛋白酶、蜗牛酶等也可用于动物细胞的消化。EDTA（乙二胺四乙酸 ：二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子。）最适合消化传代细胞，常与胰蛋白酶使用。 3)、胶原酶消化是一种由细菌中提取的酶，对胶原和细胞间质有较强的消化作用，适用于消化纤维组织、上皮组织、癌组织等。 （1）向培养瓶中放入1－5mm3大小的组织块，加5ml2000单位/ml的胶原酶干液，最终浓度为200单位/ml，pH=6.5。
（2）36.5℃水浴4－48小时，无需摇动，中间可更换酶液一次。
（3）当组织变软，分散于瓶底时，轻轻震荡即散成细胞团或单个细胞，小心倒出培养液。
（4）800r/min离心5分钟，弃上清液，重新悬浮BSS(缓冲平衡盐溶液)，再离心一次。
（5）加入培养液制成细胞悬浮液。
动物单个细胞的获得 过程思考下列问题1）、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢？
2）、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？
3）、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？两者的融合过程和方法是否也一样？一.动物细胞融合
（一）.动物融合的过程：P52一、动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合 受精作用2.动物融合的过程：P52动物细胞融合过程有丝分裂两个完整的杂交细胞为什么用灭活的病毒作为诱导剂？先质融合，再核融合只用单个的两种细胞来融合吗？ 灭活的病毒灭活病毒诱导细胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。不灭活的病毒可以作为诱导剂吗？不可以，因为不灭活的病毒会感染细胞，不能诱导细胞的融合。3、细胞融合与融合诱导细胞 融合物质：诱导剂：
仙台病毒、聚乙二醇
诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。
主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株主要用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的 方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性植物细胞全能性细胞融合的 原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目4、植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 细胞融合技术应用于哪些方面？ 细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。动物细胞融合有哪些方面的应用吗？ 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体思考与讨论1.抗体是由何种细胞产生的？
效应B细胞（浆细胞）。
2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？
每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
3.一种抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？
动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。
4. 简述获得抗体的传统途径？
抗原 动物体 抗体
抗原不纯 抗体不纯二、单克隆抗体刺激浆细胞1、抗原： 概念：进入动物体内对肌体的免疫系统产生刺激作用的外源物质。 包括：蛋白质、多糖、核酸、病毒、细菌、各种细胞等。 特点：外源性、结构性（分子表面具有稳定的环状结构基团作为识别位点）、特异性（抗原与抗体的反应）。 二、单克隆抗体抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的。 动物免疫系统分泌的中和或消除抗原物质的影响的糖蛋白，存在于血清中，本质是免疫球蛋白。2、什么是抗体？3、B淋巴细胞与抗体的关系： １）．B淋巴细胞受抗原刺激后，可
以产生抗体。
２）．动物体内的B淋巴细胞可以产
生百万种以上的抗体，每
种抗体对特定的抗原具
有特异性免疫作用。
３）．每一个淋巴细胞只能产
生一种抗体。MHC是种复合休,一种抗原的基因群,全称为主要组织相容性复合体,即指某一染色体上一群紧密连锁的基因群 。人体内的五种抗体 要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。但是，在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。怎样解决这个问题？为什么书上说动物体内可产生多达百万种以上的抗体？传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 动物脾脏有上百万个B淋巴 细胞系，一个细胞就是一个克隆，它针对抗原上的一个抗原决定簇产生的抗体是单克隆抗体。 一种抗原通常具有多个不同的抗原决定族，因此能刺激多个B淋巴细胞产生相应的单克隆抗体，因此血清中的抗体是针对 不同抗原决定族的单克隆抗体 混合物，称为多克隆抗体。 4、单克隆抗体 概念： 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
特点：
特异性强、灵敏度高 如何大量生产单克隆抗体？P53利用淋巴细胞产生抗体的功能
利用肿瘤细胞无限增殖的特性
利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞
利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞如何筛选？融合方式？杂种细胞的筛选原理：两种亲本细胞融合的混合物中
可能有多种类型细胞，筛选的
目的是获得优良的杂种细胞。
1）亲本
2）同核体：同源原生质体的融合体
3）异核体：非同源的原生质体的融
合体
4）多核体：含有双亲不同比例
核物质的融合体
5）异胞质体：具有不同胞质来源的
杂合细胞。
6）核质体：有细胞核而带有少量细
胞质的亚原生质体
动物细胞的筛选方式（特定培养基）：1）利用抗药性筛选系统：
利用生物细胞对药物敏感性差异筛选杂种细胞。2）营养互补筛选系统：
细胞在缺乏一种或几种营养成分时，不能生长繁殖，即营养缺陷型细胞。利用两种亲本细胞营养互补作用原理可以 筛选杂种细胞。3）温度敏感突变型杂种细胞的筛选：
一般的培养细胞能在32度到40度的范围内生长，但温度敏感突变型的细胞能在高温或低温下生长。由此筛选杂种细胞。5、单克隆抗体的制备动物免疫与亲本细胞的选择
细胞融合：淋巴细胞杂交瘤的制备
杂交瘤细胞的筛选：有限稀释法等
单克隆抗体的制备和冻存
单克隆抗体的纯化亲本细胞的选择骨髓瘤细胞：
骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白，这样的瘤细胞融合后，可能影响或降低所分泌抗体的滴度，所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型，能在体外无限繁殖和连续继代培养的 骨髓瘤细胞。
多用小鼠的骨髓瘤细胞。淋巴细胞：
经过免疫处理的淋巴细胞，多用大鼠或小鼠。 单克隆抗体制备过程细胞融合、筛选足够数量的、能产生特定抗体的细胞群单克隆抗体1、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体思考与讨论6、单克隆抗体的应用与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。应用主要有：1、临床诊断 资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。1、单抗作为体内体外诊断试剂现在已经有各种不同类型的单抗试剂在市场出售，例如乙型肝炎的表面抗原，铁蛋白、促绒毛膜性激素、促甲状腺激素、癌症、艾滋病等诊断试剂。
用同位素标记的单抗在特定的组织中成象的技术可以用于肿瘤、心血管畸形的体内诊断。1）药物与单抗直接偶联
这样的靶向制剂保留一定的药物活性，并具有一定的选择性。
如：1，4－溴柔红霉素与肿瘤细胞单抗形成的偶合物，对肿瘤有明显的选择性毒性。2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤2）药物通过小分子与单抗连接
单抗通过一些小分子交联剂，把药物分子上的某些基团连接起来。
这种靶向试剂与肿瘤的表面抗原结合后，会进入溶酶体，在酸性环境下释放药物，而杀死肿瘤细胞。3）药物通过大分子与抗体相连
大分子聚合物：葡聚糖、多聚赖氨酸、多聚谷氨酸、聚合多肽和血清蛋白等。
总之，利用单抗试剂合可以作为靶向药物，针对肿瘤、自身免疫系统疾病、各种病原体病等。3、杂交人－鼠单克隆抗体鼠源抗体一般无法有效地激发宿主的免疫防卫系统，还可能引发人对鼠源抗体本身的免疫反应。
嵌合抗体可以保留其目标专一性，降低人的抗鼠反应。小结两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案制备单克隆抗体B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代501.动物细胞工程技术的基础是：（ ）
A．动物细胞融合
B．胚胎移植
C．动物细胞培养
D．核移植Ｃ２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
A．结果是相同的
B．杂种细胞的形成过程基本相同
C．操作过程中酶的作用相同
D．诱导融合的手段相同
Ｂ３. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①淋巴细胞
②小鼠骨髓瘤细胞
③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
⑤杂交瘤细胞
A． ②④ B．①③⑤
C． ①②③④ D．②③ C课后习题2.动物细胞融合和植物原生质融合决定于 ( )
A.细胞膜的流动性 B．细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D．细胞质酶的活性 A一.选择题3.“生物导弹”是指 （ ）
A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞
C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 D4.只能使动物细胞融合的常用诱导方 （ ）
A．PEG B．灭活的病毒 C．电刺激 D．离心B二.简答题1.淋巴细胞是由动物体-------------中的-------------细胞分化发育而来的。
2.杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的
主要方式是---------------------骨髓造血干主动运输
1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？
2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？提示：植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。 提示：哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞 能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性──在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。 思考与讨论教学参考已成功的动物细胞融合实例还有哪些？
生物种类 细胞来源 成功年代
酵母菌—鸡 原生质体—血红细胞 1975年
人—胡萝卜 腹水癌细胞—原生质体 1976年
人—小鼠 纤维肉瘤细胞—畸胎瘤细胞 1978年要知道更多的实例，需经常查阅更多科研报道。
