人教版高中生物选修1 专题5 课题1《DNA的粗提取和鉴定》课件 （共13张PPT）

课件13张PPT。专题5 DNA和蛋白质技术课题1
DNA的粗提取与鉴定阅读与思考1.DNA的粗提取与鉴定的原理有哪些？
2.DNA的粗提取与鉴定的操作分为几步，每一步应如何操作，操作的目的是什么？一、实验原理1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水而破裂，释放出内容物。2.洗涤剂能瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3.DNA在物质的量浓度为0.14 mol／L的氯化钠溶液中的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。4. DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。5.DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色。二、实验设计1、实验材料的选取选取原则
DNA含量丰富
材料易得
提取简便鸡血细胞
鸡血细胞核DNA含量丰富
材料易得
鸡血细胞极易吸水胀破若是动物细胞，如何获取DNA滤液？
为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？在低浓度的溶液中红细胞会吸水胀破。二、实验设计2、破碎细胞，获取含DNA的滤液若是植物细胞，如何获取DNA滤液？
加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？
洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解。二、实验设计2、破碎细胞，获取含DNA的滤液滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？
为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？可能有核蛋白、多糖和RNA等杂质用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去在低盐溶液中的杂质。二、实验设计3、去除滤液中的杂质方案二与方案三的原理有什么不同？方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白质，从而使提取的DNA与蛋白质分开；
方案三是利用DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。二、实验设计3、去除滤液中的杂质滤液+同体积冷却95%酒精 白色丝状物析出：
溶解：
鉴定：沸水5min二、实验设计4、DNA的析出与鉴定将白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中方法步骤加入物质目的1.制备鸡血细胞液2.提取细胞核物质3.溶解核内的DNA4.析出含DNA的粘稠物5.滤出含DNA的粘稠物柠檬酸钠溶液20 m1蒸馏水2 mo1 /L的NaCl溶液加蒸馏水防止血凝固加速血细胞破裂溶解DNANaCl溶液稀释至0.14mol/L使DNA最大限度地释出使含DNA的黏稠物被留在纱布上方法步骤加入物质目的6.DNA的黏稠物再溶解7.过滤含DNA的NaCl溶液8.提取杂质较少的DNA9.DNA的鉴定2 mo1 /L的NaCI溶液冷却的95 ％的酒精二苯胺试剂使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中除去含DNA的滤液中的杂质提取DNA有DNA则出现蓝色 方法步骤加入物质目的1.制备鸡血细胞液2.提取细胞核物质3.溶解核内的DNA4.析出含DNA的粘稠物5.滤出含DNA的粘稠物6.DNA的黏稠物再溶解7.过滤含DNA的NaCl溶液8.提取杂质较少的DNA9.DNA的鉴定柠檬酸钠溶液20 m1蒸馏水2 mo1 /L的NaCl溶液蒸馏水2 mo1 /L的NaCI溶液冷却的95 ％的酒精二苯胺试剂①②③④⑤⑥⑦⑧⑨