贵州省贵阳市第一中学2024-2025学年高二下学期5月月考 生物学试卷（含解析）

高二生物学试卷
本试卷分第Ⅰ卷 (选择题)和第Ⅱ卷 (非选择题)两部分。第Ⅰ卷第1页至第5页，第Ⅱ卷第5页至第8页。考试结束后，请将答题卡交回。满分100分，考试用时75分钟。
第Ⅰ卷 (选择题，共48分)
注意事项：
1.答题前，考生务必用黑色碳素笔将自己的姓名、准考证号、考场号、座位号在答题卡上填写清楚。
2.每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。在试题卷上作答无效。
一、选择题 (本大题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的)
1.家常酱菜采用了乳酸自然发酵的传统工艺，无添加剂，但生产周期长。下列叙述正确的是
A.为确保酱菜发酵的无氧环境，将蔬菜装入坛中时应尽可能装满
B.发酵过程中乳酸菌无氧呼吸产生二氧化碳导致坛中有气泡产生
C.乳酸自然发酵属于利用混合菌种进行的传统发酵技术
D.为防止酱菜变质，发酵过程中可加入抗生素抑制杂菌生长
2.茶叶中含多种物质，其中茶多酚 具有杀菌消炎作用。为研究茶多酚的抑菌效果，研究人员进行了相关实验。下表所示为在不同pH、茶多酚浓度为40g/L时的实验结果。
菌种 抑菌圈直径 (mm)
沙门氏菌 14.0 13.7 13.8 14.3 15.5 14.6 12.5
蜡状芽孢杆菌 16.0 15.5 14.7 15.7 17.4 15.6 13.5
大肠杆菌 11.8 12.9 12.7 13.8 15.0 14.4 12.8
结合表中数据分析，下列叙述正确的是
A.培养基经过高压蒸汽灭菌后，应先调节pH 值再倒平板
B.茶多酚为沙门氏菌、蜡状芽孢杆菌和大肠杆菌提供了碳源
C.茶多酚对三种细菌的抑制效果均最强时的最适pH是7
D.相同pH值下，茶多酚对蜡状芽孢杆菌的抑菌效果最好
3.多氯联苯 (PCB)是一种人工合成的致癌化合物。某地区近五年来一直受PCB 污染，某科研小组从该地区土壤中分离获得能高效分解 PCB 的酵母菌 (目的菌)并进行数量测定。下列叙述错误的是
A.统计土壤中目的菌的数量需先进行扩大培养，再用稀释涂布平板法接种
B.与未污染区相比，该地区酵母菌种群的PCB 分解酶基因的基因频率较高
C.若采用显微镜直接计数目的菌，则统计的结果可能比实际活菌数大
D.为得到高效分解 PCB 的酵母菌，可逐步提高培养基中PCB的浓度
4.味精的主要成分是谷氨酸钠，其生产工艺流程如图1所示。下列说法正确的是
A.谷氨酸棒状杆菌的主要碳源、氮源分别是淀粉、尿素
B.谷氨酸棒状杆菌的代谢类型与乳酸菌相同
C.发酵过程中应控制发酵液的pH 为弱碱性或中性
D.发酵结束后的发酵液经过滤、沉淀等方法得到味精
5.科研人员利用青菜 (2n=20)幼嫩花粉与甘蓝型油菜 (2n=38)下胚轴细胞为材料，试验了两种原生质体比率对原生质体融合效果的影响，结果如下表。下列叙述正确的是
下胚轴原生质体与花粉原生质体比率 异源融合
一对一融合 (%) 一对二及以上融合 (%)
1: 1 18.5 8.3
1:3 24.6 16.2
1:6 34.5 18.2
1:9 33.0 17.1
A.下胚轴原生质体与花粉原生质体可置于蒸馏水中培养
B.可通过 PEG融合法或电融合法促进原生质体融合
C.实验表明花粉原生质体占比越高，异源融合效率越高
D.某融合细胞的染色体数为58，说明该细胞是一对一异源融合细胞
6.微载体动物细胞培养是以悬浮在培养液中的微珠作为细胞贴附的载体，在轻度搅拌下进行动物细胞培养。下列相关叙述错误的是
A.培养液中需添加糖类、氨基酸等营养物质 B.轻度搅拌有利于细胞的氧气供应
C.该技术培养贴壁细胞不会发生接触抑制现象 D.该技术能提高单位体积培养液的细胞产率
7.抗体—药物偶联物 (ADC)通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图2所示。下列表述错误的是
A. ADC 的制备涉及动物细胞融合技术和动物细胞培养技术
B. ADC 进入肿瘤细胞的过程体现了细胞膜的流动性
C. ADC 中的抗体主要发挥治疗效应以杀伤肿瘤细胞
D.与化疗相比，使用ADC 治疗癌症具有毒副作用小的优点
8.我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞 (AdESCs)，具体流程见图3。下列叙述不正确的是
A.单倍体囊胚1 的培养过程中细胞内的遗传物质发生了改变
B.可用灭活病毒诱导孤雌与孤雄单倍体胚胎干细胞发生融合
C.体外培养 AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分
D. AdESCs的染色体组数与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞不同
9.细菌中广泛存在限制酶，下表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点 (箭头表示相关酶的切割位点)。如图4是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是
A.①③④对应的识别序列均能被 Sau3AⅠ识别并切割
B.含有限制酶的细菌自身的 DNA 也能被该酶水解
C.限制酶能切割磷酸二酯键和氢键
D.一种限制酶能识别一种特定的核糖核苷酸序列
10.基因工程常用的载体是质粒，关键原因在于其具备特定的结构特点。下列说法错误的是
A.质粒含有 RNA 复制起点，可在宿主细胞中自我复制
B.质粒携带的抗生素耐药基因便于重组 DNA 分子的筛选
C.质粒有一个至多个限制酶切割位点
D.基因工程的载体也可选用噬菌体和动植物病毒
11.某研究小组设计了引物A 和引物B利用PCR 扩增某目的基因。下列叙述错误的是
A. PCR用的 DNA 聚合酶是一种耐高温酶
B.复性过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则
C.经过三轮循环后的产物中含有引物B的 DNA片段所占的比例为1/2
D.常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定 PCR 的产物
12.下列有关将目的基因导入受体细胞的叙述，正确的是
A.将目的基因导入单子叶植物细胞常采用农杆菌转化法
B.动物细胞常利用显微注射将目的基因注入动物的受精卵
C.将目的基因导入大肠杆菌可以先用Mg 处理大肠杆菌
D.目的基因进入受体细胞后，稳定维持和表达其遗传特性
13.基因工程技术在农业改良、医疗创新及食品加工等领域展现了巨大的应用潜力。下列相关技术成果及应用中，错误的是
A.通过DNA 重组技术，可将基因在不同物种间转移，突破生殖隔离的限制
B.利用基因编辑技术敲除供体动物的抗原合成相关基因，可降低器官移植的免疫排斥风险
C.农业领域的核心应用是改良作物抗逆性、提升产量及优化营养组成
D.基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因表达发挥功能，以达到治疗的目的
14.有关“DNA 粗提取与鉴定”“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，正确的是
A. DNA 在 NaCl溶液中的溶解度与 NaCl溶液的浓度无关
B.将DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴5min，冷却后变蓝色
C.凝胶中的 DNA 分子可直接在波长为300nm的紫外灯下被检测出来
D.琼脂糖凝胶浓度的选择需要考虑待分离 DNA 片段的大小
15.枯草杆菌蛋白酶具有水解蛋白质的作用，因此常被应用于洗涤剂工业、丝绸工业等。为提高这种酶的使用价值，研究人员利用蛋白质工程获得该酶的多种突变体。下列说法正确的是
A.获得该酶的突变体需要通过改造该酶的合成基因来实现
B.该成果体现了蛋白质工程在培育新物种方面具有优势
C.改造后的枯草杆菌蛋白酶氨基酸数目一定发生改变
D.蛋白质工程的最终目的是改造编码蛋白质的基因序列
16.下列关于生物技术安全性与伦理问题的叙述，正确的是
A.利用转基因技术制造的新型致病菌，人体不会对它们产生免疫反应
B.克隆技术中，治疗性克隆与生殖性克隆均涉及伦理争议，但前者争议较小
C.转基因食品的安全性已得到科学证实，不存在任何风险
D.设计试管婴儿技术可任意选择胎儿性别，不存在伦理争议
第Ⅱ卷 (非选择题，共52分)
注意事项：
第Ⅱ卷用黑色碳素笔在答题卡上各题的答题区域内作答，在试题卷上作答无效。
二、非选择题 (本大题共5 小题，共52分)
17.(10分)甜叶菊等植株的植物组织培养过程如图5所示。回答相关的问题：
(1)为了获得脱毒植株，往往以取自甜叶菊的茎尖等处的分生组织作为外植体，原因是 。
(2)在生产实践中为获得大量的细胞产物，如甜叶菊多酚，可将① 放入液体培养基中，经机械方法分散成单个细胞，制备成细胞悬液，再利用 技术即可获得大量细胞。
(3)植物组织培养技术不仅应用于植物的快速繁殖过程，还广泛用于育种当中。某品种甜叶菊自然繁殖时的某个优良性状无法通过自交的方式稳定遗传，要快速获得与原植株基因型和表型都相同的该种甜叶菊，在进行组织培养时， (填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是 。
18.(12分)图6是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛。据图回答下列问题：
(1)应用1为获得克隆牛的过程，最终克隆动物的遗传物质来自 。动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是 。体细胞核移植技术目前存在的问题有 (答出2点)。
(2)应用2为获得试管牛的过程，在进行体外受精前，需要对采集到的卵母细胞和精子分别进行 处理。在进行胚胎移植前，还需要对供体和受体母牛进行 处理。
(3)应用3为胚胎分割，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意 。获得二分胚①和②的同时，需要取囊胚的滋养层细胞用于 。
19.(11分)在酿酒、食品加工等工业中，酿酒酵母是常用发酵菌种，研究人员为提高乙醇产量对菌株A 进行基因工程改造。回答下列问题：
(1)利用发酵工程生产产品过程中，选育性状优良的菌种是重要的环节，除基因工程育种外，还有 、 两种菌种选育方法。菌株A 存在于环境中，实验室获得该单一菌种的分离方法是 。
(2)菌株A 含有一种F基因，其表达的F蛋白可提高乙醇产量。研究人员基于菌株A构建了菌株B、C，其中菌株B导入含F基因的表达载体，菌株C导入不含F 基因的表达载体，构建菌株C的目的是 ，预期菌株A、B、C发酵中乙醇产量从高到低依次为 (用字母表示)。
(3)为验证F蛋白是通过增强酵母菌的乙醇耐受性来提高乙醇产量，研究人员做了以下实验，请补充完整：
①配制等量且成分相同的葡萄糖培养液，分装至两组无菌发酵瓶中。
②实验组接种 ，对照组接种野生型酵母菌 (正常表达F蛋白)，确保初始菌液浓度一致。
③将两组发酵瓶置于28℃恒温箱中，严格密封环境中培养。
④每隔12小时取样：检测培养液中 。连续检测48小时，记录数据并绘制曲线图。
20.(10分)研究人员利用基因工程将蓝色色素合成所需的转座酶基因转入普通矮牵牛中，尝试获得蓝色矮牵牛新品种。该过程所用质粒与含转座酶基因的DNA片段上相关限制酶的酶切位点分别如图7甲、乙所示。限制酶 BamH Ⅰ、Sau3A Ⅰ、Hind Ⅲ识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、↓GATC、A↓AGCTT。回答下列问题:
(1)利用PCR 技术在体外扩增转座酶基因时，引物与模板链的 端碱基互补配对。PCR反应需要在一定的缓冲液中才能进行，除引物之外，还需提供 (答出两点)等。
(2)在构建转座酶基因表达载体时，用Hind Ⅲ和 BamH Ⅰ两种酶酶切含目的基因的DNA片段和质粒，与单一酶酶切相比，采用双酶切方法的优点是 (答一点即可)。
(3)将构建好的重组质粒转入农杆菌细胞，在含 (填“氨苄青霉素”或“四环素”)的培养基中培养，进行重组质粒的筛选。
(4)检测转座酶基因是否在普通矮牵牛细胞中成功表达，在分子水平常采用的检测 技术是 。
21.(9分)胰岛素可用于治疗糖尿病，天然胰岛素制剂容易发生聚合作用，在一定程度上延缓疗效。科学家希望对胰岛素进行改造，从而降低它的聚合作用。经过不断研究，科研人员通过蛋白质工程成功实现对应氨基酸序列的改造，有效抑制了胰岛素的聚合，由此研发了速效胰岛素类似物产品并在临床上广泛应用。回答以下问题：
(1)天然蛋白质的合成过程是按照 进行的。
(2)科研人员利用蛋白质工程合成速效胰岛素的技术流程如图8：
其中，流程A 是 ， 流程B是 。
(3)与基因工程相比，蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因 或基因 ，对现有蛋白质进行 ，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活需要。
贵阳一中2023级高二年级教学质量监测卷（四）
生物学参考答案
第Ⅰ卷（选择题，共48分）
一、选择题（本大题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8
答案 C D A C B C C A
题号 9 10 11 12 13 14 15 16
答案 A A C B D D A B
【解析】
1．制作酱菜的过程中，装量不要超过2/3，以防止坛内酱菜被杂菌污染，A错误。乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，不会产生二氧化碳，B错误。乳酸自然发酵属于混合菌种发酵，故而生产周期较长，C正确。抗生素能够抑制乳酸菌的生长，不利于发酵，所以不能加入抗生素，D错误。故选C。
2．培养基应先调节pH值后再灭菌，然后倒平板，A错误。茶多酚具有杀菌消炎的作用，会抑制微生物的生长，不作为碳源，B错误。找出每一行细菌抑菌圈最大值对应的pH值，可知茶多酚对三种细菌的抑制效果均最强时的最适pH是8，C错误。找出每一列pH值下抑菌圈最大的菌种，可知茶多酚对蜡状芽孢杆菌的抑菌效果最好，D正确。故选D。
3．统计土壤样品中的菌落数目不需要进行扩大培养，直接用稀释涂布平板法接种，A错误。某地区近五年来一直受PCB污染，不含PCB分解酶基因或PCB分解酶活性低的酵母菌容易被淘汰，留下较多的是高效分解PCB的酵母菌，因此该地区酵母菌种群的PCB分解酶基因的基因频率较高，B正确。显微镜直接计数的统计结果一般是活菌数和死菌数的总和，故统计的结果可能比实际活菌数大，C正确。逐步提高培养基中PCB的浓度，淘汰分解PCB能力弱的酵母菌，得到高效分解PCB的酵母菌，D正确。故选A。
4．谷氨酸棒状杆菌的主要碳源为淀粉糖化产生的葡萄糖等，氮源是尿素，A错误。由图中“通气”可知，谷氨酸棒状杆菌的呼吸方式为有氧呼吸，乳酸菌进行的是无氧呼吸，B错误。谷氨酸的发酵生产，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N 乙酰谷氨酰胺，C正确。发酵结束后的发酵液经过滤、沉淀等方法得到的是菌体，应根据谷氨酸钠的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得谷氨酸钠，D错误。故选C。
5．原生质体无细胞壁，在蒸馏水中容易吸水胀破，无法维持细胞形态，A错误。人工诱导原生质体融合的方法包括电融合法、离心法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等，B正确。实验表明花粉原生质体占比越高，异源融合效率先增后减，C错误。某融合细胞的染色体数为58，说明该细胞是一对二异源融合细胞，因为是花粉和体细胞的融合，D错误。故选B。
6．动物细胞培养所需营养物质与体内基本相同，需添加糖类、氨基酸等营养物质，A正确。轻度搅拌可以增加培养液的溶氧量，有利于细胞的氧气供应，B正确。将培养液中的微珠作为细胞贴附的载体，贴壁细胞会附着在微珠上生长，当细胞表面相互接触时，同样会停止分裂增殖，出现接触抑制现象，C错误。以悬浮在培养液中的微珠作为细胞贴附的载体，能提高单位体积培养液的细胞产率，D正确。故选C。
7．单克隆抗体的制备过程需要用到动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，A正确。ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，体现了细胞膜的流动性，B正确。ADC中的抗体主要发挥靶向运输作用，通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物输送到靶细胞，药物发挥杀伤靶细胞的治疗效应，C错误。与化疗相比，ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点，D正确。故选C。
8．单倍体囊胚1的培养过程中细胞内的遗传物质未发生改变，A错误。诱导动物细胞融合的方法有：生物法（灭活的病毒）、物理法和化学法，因此可用灭活病毒诱导孤雌与孤雄单倍体胚胎干细胞发生融合，B正确。体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分，以补充动物细胞对特殊营养物质的需求，C正确。结合分析可知，该AdESCs是“杂合二倍体胚胎干细胞”，故体内有2个染色体组，但大鼠—小鼠杂种细胞，是由体细胞融合产生，因此杂种细胞中通常含有4个染色体组，两者染色体组数不同，D正确。故选A。
9．①③④对应的识别序列都存在GATC，都能被Sau3AⅠ识别并切割，A正确。细菌自身的DNA不能被限制酶识别并水解，该酶可以保护细菌不受某些DNA病毒等的感染，B错误。限制酶切割的均是磷酸二酯键，C错误。一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核糖核苷酸序列并在特定的位点切割，不是核糖核苷酸序列，D错误。故选A。
10．质粒具有 复制起点，在宿主细胞内能自主复制，但应为DNA复制起点，A错误。质粒具有氨苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因、荧光蛋白基因等作为标记基因，B正确。质粒有一个至多个限制酶切割位点，C正确。基因工程的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体，D正确。故选A。
11．PCR依赖耐高温DNA聚合酶（如Taq酶）以承受反复高温变性，确保酶在多次循环中保持活性，从而高效、自动地扩增目标DNA片段，A正确。复性过程中两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合，B正确。经过三轮循环后的产物中一共含有8个DNA，其中1个DNA只含有引物A，一个只含有引物B，6个DNA既含有引物A又含有引物B，引物B的DNA片段所占的比例为7/8，C错误。在PCR完成后，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物，D正确。故选C。
12．将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法，但农杆菌对大多数单子叶植物没有侵染能力，A错误。将目的基因导入动物受精卵最常用的方法是通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵中，B正确。将目的基因导入大肠杆菌可以先用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，C错误。目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性只有通过检测与鉴定才能知道，D错误。故选B。
13．基因工程可以实现基因在不同物种之间的转移，从而可以克服自然状态下远缘杂交不亲和的障碍，A正确。用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的调节因子也属于目的基因，可以抑制抗原合成，B正确。基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物，从而提高经济效益，C正确。基因治疗是指用正常基因取代或修补患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的，D错误。故选D。
14．DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCI溶液，A错误。将DNA丝状物溶于2mol/L的5mL的NaCl溶液中，然后向试管中加入4mL的二苯胺试剂，沸水浴加热5min，试管冷却后溶液呈现蓝色，B错误。凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，C错误。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，凝胶的浓度越大，DNA分子越大，DNA分子的迁移速率越慢，DNA构象也影响迁移速率，因此琼脂糖凝胶浓度的选择需要考虑待分离DNA片段的大小，D正确。故选D。
15．对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成，A正确。该成果培育了新品种，而不是新物种，B错误。经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶有可能是氨基酸发生替换，C错误。蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，虽然合成了改造的基因，但它最终要达到的目的是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，以满足人类的需求，D错误。故选A。
16．人体免疫系统能识别新型致病菌，会产生免疫反应，A错误。治疗性克隆（如提取胚胎干细胞用于医疗）虽涉及胚胎道德地位的争议，但目的是医疗救助；生殖性克隆（复制人类个体）因违背人类尊严和社会伦理，争议更大，B正确。转基因食品的安全性存在科学争议，目前主流观点认为“通过安全评估的产品可认为无害”，但“不存在任何风险”表述绝对化，C错误。设计试管婴儿技术若用于非医学目的的性别选择，会引发性别失衡、基因歧视等伦理问题，国际上普遍限制，D错误。故选B。
第Ⅱ卷（非选择题，共52分）
二、非选择题（本大题共5小题，共52分）
17．（每空2分，共10分）
（1）这些部位的病毒极少，甚至无病毒
（2）愈伤组织 植物细胞培养
（3）不能 该优良性状的甜叶菊植株，体细胞基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，用花粉粒进行组织培养得到的基因型不同于原植株
【解析】（1）植物的花芽、叶芽等处的分生组织很少受到病毒等病原体的侵害，因此为了获得脱毒植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织。
（2）细胞产物的工厂化生产并没有利用细胞的全能性原理将离体细胞培养成完整植株，而是利用植物细胞培养技术对愈伤组织进行培养产生大量的细胞产物。
（3）该品种甜叶菊自然繁殖时某优良性状无法通过自交的方式稳定遗传，说明该品种控制该性状的基因型非纯合子。故通过自然繁殖可能会产生性状分离。由于花粉粒的基因型与原植株不同，所以不能采用花粉粒作为外植体。
18．（除特殊标注外，每空2分，共12分）
（1）供体1和供体2 动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难 成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进一步改进；相对于技术研究，理论研究较为滞后；绝大多数克隆动物存在健康问题等（任答2点即可）
（2）成熟培养和获能 同期发情（1分）
（3）将内细胞团均等分割（1分） DNA分析或性别鉴定
【解析】（1）应用1为获得克隆牛的过程，该过程获得的小牛为克隆牛，其细胞核遗传物质来源于供体2，细胞质遗传物质来源于供体1，因此其遗传物质来源于供体1和供体2；动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，这是因为动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。体细胞核移植技术目前存在的问题有成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进一步改进；相对于技术研究，理论研究较为滞后；绝大多数克隆动物存在健康问题等。
（2）应用2为获得试管牛的过程，在进行体外受精前，需要对采集到的卵母细胞和精子分别进行成熟培养和获能处理。在进行胚胎移植前，还需要对供体和受体母牛进行同期发情处理。
（3）应用3为胚胎分割，胚胎分割时应注意将囊胚的内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育；获得二分胚①和②的同时，可取囊胚的滋养层细胞做DNA分析进行性别鉴定，这样不会对胚胎造成影响，同时也能达到鉴定的目的。
19．（除特殊标注外，每空2分，共11分）
（1）自然选育（1分） 诱变育种（1分） 平板划线法或稀释涂布平板法（1分）
（2）排除基因表达载体对乙醇产量的影响 B>A=C（或B>C=A）
（3）F基因敲除突变型酵母菌（或无法合成F蛋白的酵母菌） 乙醇浓度（或酵母菌存活率）
【解析】（1）选育性状优良的菌种常用的三种方法有：自然选育、诱变育种、基因工程育种。实验室获得该单一菌种的分离方法有稀释涂布平板法或平板划线法。
（2）菌株C导入不含F基因的表达载体作为对照组，可以排除基因表达载体对乙醇产量结果的影响，根据题干可知，F基因表达的F蛋白可提高发酵中乙醇产量，且F蛋白量与乙醇产量成正相关，F基因数：菌株B＞菌株C=菌株A，所以乙醇产量：菌株B＞菌株C=菌株A。
（3）该实验的自变量是酵母菌是否表达F蛋白，故实验组：接种F基因敲除突变型酵母菌；对照组：接种野生型酵母菌。实验的目的是验证F蛋白是通过增强酵母菌的乙醇耐受性来提高乙醇产量，故因变量是乙醇浓度、酵母菌存活率。
20．（每空2分，共10分）
（1）3′ 4种脱氧核苷酸（原料）、耐高温的DNA聚合酶、DNA模板等
（2）避免目的基因自身环化，利于与质粒连接或避免目的基因与质粒反向连接
（3）氨苄青霉素
（4）抗原—抗体杂交技术
【解析】（1）在PCR过程中，DNA聚合酶从引物的3′端开始延伸DNA链，所以引物要与模板链的3′端碱基互补配对，这样才能引导DNA聚合酶正确合成新的DNA链。PCR反应体系中，除引物、目的基因外，四种脱氧核苷酸是合成新DNA链的原料，为DNA的合成提供物质基础；DNA聚合酶用于催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，将单个脱氧核苷酸连接成DNA链。
（2）若只用Hind Ⅲ切割含目的基因的DNA片段，则可能导致目的基因自身环化，不利于与质粒连接；目的基因与质粒反向连接。由图甲和图乙可知，用图中质粒和转座酶基因构建基因表达载体时，最好选用Hind Ⅲ和Bam HⅠ限制酶来分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，因为质粒和目的基因都有这两种限制酶识别位点，并且切割后产生的黏性末端不同，不会出现自身环化现象，有利于质粒和目的基因结合。
（3）构建好的重组质粒上，含有氨苄青霉素抗性基因，但四环素抗性基因受损，因此成功导入蓝色色素基因的农杆菌能在含氨苄青霉素的培养基上生存，但是不能在含四环素培养基和同时含两种抗生素的培养基上生存。
（4）目的基因是否成功在宿主细胞中转录，可采用PCR等技术检测，检测目的基因是否在宿主细胞中成功表达，可采用抗原—抗体杂交技术。
21．（除特殊标注外，每空2分，共9分）
（1）中心法则
（2）预期蛋白质的功能 推测应有的氨基酸序列
（3）修饰（1分） 合成（1分） 改造（1分）
【解析】（1）根据蛋白质工程的定义可知，天然蛋白质的合成过程是按照中心法则进行的。
（2）图示为蛋白质工程的设计流程，流程A是预期蛋白质的功能，根据结构与功能相适应的原理推测，流程B是推测应有的氨基酸序列，进而根据遗传密码和氨基酸的对应关系以及转录过程中的碱基互补配对原则，推测应有的脱氧核苷酸序列，而后进行相关基因的合成。
（3）与基因工程相比，蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活需要，该过程中对蛋白质的改造最终还需要落实到基因上，因此被称为第二代基因工程。
来会抑制生长素的作用
（2）为进一步的实验摸索条件（或检验实验设计的科学性与可行性） 10-10~10-6