（3）动物细胞工程学案__高二生物学浙科版（2019）选择性必修三期末易错题集训

（3）动物细胞工程
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三期末易错题集训
【易错点分析】
一、动物细胞工程
1.细胞全能性理解错误
易错点：认为动物细胞培养也能体现细胞全能性
分析：细胞全能性是指细胞具有发育成完整个体的潜能。植物组织培养能体现细胞全能性，而动物细胞培养的结果是形成细胞群，未形成完整的个体，不能体现细胞全能性，只有动物细胞核移植技术体现了动物细胞细胞核的全能性
2.原代培养和传代培养区分不清
易错点：无法准确判断原代培养和传代培养
分析：分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养；第二次用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代培养
3.单克隆抗体制备过程理解不到位
易错点：对筛选过程及原理不清楚，如认为在选择培养基中融合的细胞都能生长
分析：在单克隆抗体制备中，第一次筛选是在小鼠 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，用特定的选择培养基从不同类型的细胞中筛选出杂交瘤细胞，因为只有杂交瘤细胞同时具备骨髓瘤细胞无限增殖的能力和 B 淋巴细胞产生特异性抗体的能力。第二次筛选是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，需要用多孔培养板培养，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选可得到产生特异性抗体的细胞群
二、胚胎工程
1.受精过程相关知识混淆
易错点：不清楚精子和卵子受精前的准备阶段，以及受精过程中一些事件的发生顺序和作用
分析：成熟的精子必须获能后才具备受精能力，动物排出的卵子成熟程度不同，需要在输卵管内进一步成熟，当达到减数第二次分裂中期时才具备与精子受精的能力。在受精过程中，透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障
2.胚胎发育阶段特点及应用混淆
易错点：不能准确把握各胚胎发育阶段的特点，以及适合进行胚胎移植或胚胎分割的阶段
分析：卵裂阶段的细胞分裂方式为有丝分裂，细胞开始出现分化的阶段是囊胚期，可以进行胚胎移植或胚胎分割的阶段为桑椹胚期和囊胚期。在进行胚胎分割时，若选择囊胚期的胚胎，要注意将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育
3.胚胎移植相关知识易错
易错点：对胚胎移植过程中激素的使用、生殖方式的判断等存在疑问
分析：胚胎移植过程中两次使用激素，第一次常用孕激素对受、供体进行同期发情处理，使受体和供体的生理状态相同，为胚胎移植提供相同的生理环境；第二次用促性腺激素对供体做超数排卵处理，使供体排出更多的卵子。胚胎移植是有性生殖还是无性生殖，取决于胚胎是由受精卵形成的，还是由核移植技术形成重组细胞并发育而成或胚胎分割形成的。由受精卵形成的胚胎进行移植属于有性生殖，由核移植或胚胎分割形成的胚胎进行移植属于无性生殖
【易错点练习】
1.人乳头瘤病毒（HPV）感染是诱发宫颈癌的重要因素HPV具有多种类型，其中的HPV16和HPV18属于高危型，可引起宫颈上皮内高度病变。现对某就诊者的取样细胞进行培养，来进行诊断。下列说法错误的是( )
A.分散取样细胞时可采用胰蛋白酶、胶原蛋白酶或胃蛋白酶等处理
B.培养取样细胞时，需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的外部环境等
C.让取样细胞进行贴壁生长，若产生了接触抑制现象，则宫颈细胞未癌变
D.无论是原代培养还是传代培养，都需将培养瓶放在CO2培养箱中培养
2.“人造牛肉汉堡”中的牛肉是牛的肌肉细胞经过动物细胞培养获得的，这种人工培育的牛肉能防止疯牛病病毒、口蹄疫病毒等动物病毒感染，为人类获取更多的健康食品探索了新途径。下列有关动物细胞培养技术的说法，正确的是( )
A.制备细胞悬浮液的过程需要使用胃蛋白酶或胶原蛋白酶
B.肌肉细胞进行体外培养时，是悬浮在培养液中生长增殖的
C.95%空气和5%CO2的混合气体能维持培养液的pH,并为细胞提供适宜浓度的氧气
D.传代培养中的细胞失去增殖能力是细胞发生分化所致
3.在动物细胞培养的过程中，贴壁的细胞不一定都能增殖并形成克隆（单个细胞繁殖形成的细胞群体），而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞，这一特点可用于测定动物细胞的增殖能力。大致流程如图，相关叙述正确的是( )
A.出现接触抑制后，细胞停止增殖
B.克隆细胞与接种的细胞的遗传信息一定相同
C.需采用固体培养基培养才能形成细胞克隆
D.胰蛋白酶可使细胞分散成单层利于计数
4.如图为研究人员利用小鼠获取孤雌单倍体胚胎干细胞的过程示意图，下列相关叙述错误的是( )
A.给小鼠注射促性腺激素可促进其超数排卵
B.SrCl2处理的作用是促进卵母细胞完成减数分裂形成卵细胞
C.应在含有95%的空气+5%CO2的CO2培养箱中培养动物细胞
D.取④的滋养层细胞进行培养能获得胚胎干细胞
5.体细胞核移植技术为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理带来光明前景。如图表示体细胞核移植技术的过程，下列说法错误的是( )
A.上述过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术
B.细胞A常用处于减数分裂Ⅱ中期的次级卵母细胞
C.过程②在培养基中加入的动物血清含有激发细胞全能性表达的物质
D.该技术有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的免疫排斥问题
6.体细胞核移植技术在畜牧业,医药卫生以及其他领域有着广泛的应用前景。下列关于体细胞核移植技术的应用前景及存在问题的叙述,错误的是( )
A.利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器,生产珍贵的医用蛋白
B.以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞诱导形成的组织、器官等,可避免免疫排斥反应
C.体细胞核移植技术发展到今天,已经相当成熟,成功率较高
D.有研究者指出,绝大多数克隆动物存在健康问题,如体型过大、脏器缺陷,免疫失调等
7.2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核,15s内核移植）”成功培育出了体细胞克隆猴，流程如图，下列叙述错误的是( )
A.科学家多年反复实验拥有的娴熟技术使卵细胞受损减少
B.用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C.图中灭活是指用物理或化学手段破坏病毒的抗原结构，但保留了感染能力
D.组蛋白去甲基化和乙酰化水平提高可能有利于重构胚后续的胚胎发育j
8.我国科学家突破重重困难，重复多次下图操作过程，获得了两只克隆猴——“中中”和“华华”，率先将体细胞核移植技术成功地应用于非人灵长类动物的克隆。下列有关说法正确的是( )

A.灭活病毒处理是为了促进体细胞核膜与卵母细胞的细胞膜融合
B.重构胚的培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件
C.用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著低于成年猴的体细胞
D.克隆猴“中中”和“华华”的遗传物质和性状表现完全相同
9.如图为制备抗PD-LL单克隆抗体的过程示意图，据图分析,下列说法正确的是( )
A.从物理性质上来看,HAT培养基属于选择培养基
B.细胞全能性是抗PD-L1单克隆抗体制备过程中应用的原理之一
C.第一次筛选时融合成功的细胞都能在HAT培养基中生长
D.第二次筛选需对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测
10.如图是一种“生物导弹”的作用原理示意图,没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后会被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药,可抑制DNA和RNA的合成,对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是(???)
A.单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的
B.活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程
C.在治疗中,应先注射非活化磷酸阿霉素,再注射“生物导弹”
D.单克降抗体特异性强,能减轻阿霉素对正常细胞的伤害
11.甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如图。下列相关叙述正确的是( ??)
?
A.过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲
B.过程②诱导细胞融合,利用了细胞膜的选择透过性
C.过程③、④的筛选方法相同,细胞丙、丁的遗传物质相同
D.过程⑤无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖
12.如图所示为单克隆抗体的结构，其中抗体的V区和V区共同构成与抗原特异结合的部位。科学家利用蛋白质工程对A抗原的单克隆抗体结构进行改造，获得了一种只含A单抗V区的抗体，称为A纳米抗体。该抗体虽结构简单，但具有比A单抗更强的特异性结合A抗原的能力。下列说法错误的是( )

A.注射病原体可能引起动物产生多种抗体
B.可利用纳米抗体偶联药物进行靶向运输
C.设计纳米抗体过程中，首先要做的是筛选具有优良活性的单克隆抗体
D.纳米抗体与A抗原特异性结合力更强，原因可能是与抗原接触面积更大
13.“国宝”熊猫一直深受大家的喜爱。熊猫在自然条件下受精困难，产子率较低，可以通过胚胎工程提高熊猫的产子率。下列说法错误的是( )A.自然条件下，熊猫的受精作用是在雌性熊猫的输卵管内完成的B.在精子的刺激下，卵子完成减数分裂，排出第二极体后形成雌原核C.胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割D.体外受精时，从卵巢内获得的卵母细胞能直接与获能精子完成受精
14.下列有关胚胎发育的叙述，错误的是( )
A.受精过程的结束即胚胎发育的开始
B.胚胎发育的初期是在输卵管中进行的
C.桑葚胚期的胚胎从透明带中伸展出来，称为孵化
D.高等动物早期胚胎发育的顺序是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚
15.不孕不育症给不少家庭带来了困扰。若丈夫的生育能力正常，而妻子因输卵管阻塞而不孕，体外受精技术可以解决这一难题。下列有关叙述错误的是( )
A.精细胞变形为精子后，细胞核分布在头部，线粒体主要分布在尾部
B.采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理
C.精子和卵细胞的识别过程中，两个细胞的细胞膜可直接接触传递信息
D.在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜会立即发生生理反应拒绝多精入卵
16.下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程,下列相关说法正确的是( )
?
A.①代表体外受精,与体内受精不同的是体外受精精子需要获能
B.②代表早期胚胎培养,该过程中细胞进行有丝分裂,无细胞分化
C.③代表胚胎分割,需均等分割桑葚胚的内细胞团,以免影响胚胎发育
D.⑤代表胚胎移植,受体应处于适合的生理状态,可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理
17.随着生物科学技术的发展,动物的繁殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是健康的黄牛。请据图回答下列问题:
?
(1)应用1中,细胞B的获取需对供体2注射_______;使用核移植技术获得重组细胞,最终获得良种小牛,该技术的原理是_______。
(2)应用2中,将早期胚胎移入受体牛子宫内的技术叫_______,为使受体牛生理状况更适合完成该操作,要对受体牛进行_______处理,以提高成功率。
(3)在应用2、3、4中,将收集的精子放在某种溶液中进行培养,使其获得受精能力,这一生理现象称为_______。从母体内获得的卵母细胞需要培养到_______(填时期)才能与精子结合。
受精过程中防止多精入卵的生理反应包括_______反应和_______反应。
(4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题:通过_______技术获得二分胚①和②,在分割囊胚阶段的胚胎时,要注意将_______均等分割。
(5)应用4中,对细胞进行定向诱导,可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中,由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,因此在使用合成培养基时,通常需要加入_______等一些天然成分。培养过程中除需要适宜的温度、pH和渗透压、无菌、无毒等环境条件以外,在进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,并将它们置于含有_______的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
18.双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体。PSMA是癌细胞的一种表面抗原。T细胞有效激活依赖于T细胞的表面受体CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员尝试构建双特异性抗体PSMA×CD28(简称“PC双抗”)来治疗癌症,制备过程如图1,PC双抗的结构及作用机理如图2。
(1)制备PC双抗的过程中，用到的动物细胞工程技术主要有__________(答出2点)。
(2)制备PC双抗时，应先将______(物质X)分别注射到小鼠体内再分离出B淋巴细
胞。将B淋巴细胞分别与小鼠的骨髓瘤细胞融合，常用的诱导融合方法有________。之后筛选得到两种杂交瘤细胞,再诱导两种细胞融合，成功融合的杂交瘤细胞表达含两种L链和两种H链的双抗。据图2分析，杂交瘤细胞AB会产生多种抗体，原因是_______。因此还需通过筛选才能获得PC双抗。
(3)科研人员将某种癌细胞和T细胞共同培养，加入不同抗体后检测T细胞活化水平，结果如图3,结果说明________________________。进一步分析发现，这种癌细胞大量表达PD-L1,识别并结合T细胞表面的PD-1受体，从而________T细胞活化。为了有更好的治疗效果,请利用已有的PC双抗提出—种新的治疗手段:_________。
答案以及解析
1.答案：A
解析：分散取样细胞时可采用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理，不能用胃蛋白酶处理，A错误；培养取样细胞时，需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的外部环境等，B正确；癌细胞不会出现接触抑制现象，因此若出现接触抑制现象，则可确定宫颈细胞并未癌变，C正确;动物细胞需放到CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH,D正确。
2.答案：C
解析：制备细胞悬浮液的过程需要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A错误。体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖；另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，大多数细胞属于第二种类型，肌肉细胞也属于贴附生长的细胞类型，B错误。细胞培养应在95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行，CO2的主要作用是维持培养液的pH，氧气是细胞代谢所必需的，C正确。正常细胞的分裂次数是有限的，传代培养中的细胞失去增殖能力是细胞衰老或遗传物质发生改变所致，D错误。
3.答案：A
解析：本题考查动物细胞培养技术。在动物细胞培养的过程中，当出现接触抑制后，细胞停止增殖，A正确；克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同，B错误；需用液体培养基培养才能形成细胞克隆，C错误；胰蛋白酶可使细胞分散成单个，从而利于计数，D错误。
4.答案：D
解析：给小鼠注射促性腺激素可促进其超数排卵，A正确；据图分析，用SrCl2溶液处理的作用是促进卵母细胞完成减数分裂形成卵细胞，B正确；动物细胞培养需95%的空气+5%CO2的气体环境，C正确；囊胚腔内的内细胞团细胞能形成机体的组织和器官，因此需取④的内细胞团细胞进行培养获得胚胎干细胞，D错误。
5.答案：C
解析：据图可知，该过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术，A正确。细胞A常用处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞，主要原因是其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质，B正确。过程②表示重组细胞发育成囊胚，细胞A中含有激发细胞核全能性表达的物质，动物血清不含激发细胞核全能性表达的物质，C错误。图示中的胚胎干细胞来源于患者提供的体细胞形成的囊胚，将由此形成的器官移植给患者可以避免免疫排斥反应，故该技术有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的免疫排斥问题，D正确。
6.答案：C
解析：A、利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器,生产珍贵的医用蛋白,A正确;
B、以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞诱导形成的组织、器官等,可避免免疫排斥反应,B正确;
C、尽管通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动物,但该技术的成功率仍然非常低,各个技术环节也有待进一步改进,C错误;
D、有研究者指出,绝大多数克隆动物存在健康问题,如体型过大、脏器缺陷,免疫失调等,D正确。
故选C。
7.答案：C
解析：科学家多年反复实验拥有的娴熟技术使去核和核移植过程中对卵细胞损伤减少,A正确;在体细胞核移植过程中,用物理或化学方法激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程,B正确；灭活是指用物理或化学手段使病毒、细菌等失去感染能力,但是不破坏这些病原体的抗原,C错误；组蛋白去甲基化酶可以使组蛋白去甲基化,组蛋白脱乙酰酶抑制剂抑制组蛋白脱乙酰酶的作用,保持组蛋白乙酰化,即组蛋白乙酰化水平提高和去甲基化可能有利于重构胚后续的胚胎发育过程,D正确。
8.答案：B
解析：A、灭活病毒处理是为了促进体细胞的细胞膜与卵母细胞的细胞膜融合，A错误；B、动物组织培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件，B正确；C、用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著高于成年猴的体细胞，C错误；D、遗传物质相同的个体性状表现不一定完全相同，还受环境因素的影响，D错误。故选B。
9.答案：D
解析：根据物理性质划分,培养基有液体培养基和固体培养基;从功能角度划分,HAT培养基属于选择培养基,A错误。在单克隆抗体制备过程中并没有利用细胞的全能性,因为该过程不需要形成完整个体或分化出其他各种细胞,B错误。第一次筛选:利用特定选择培养基(HAT培养基)筛选,获得杂交瘤细胞,即B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,C错误。第二次筛选:利用多孔板对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测,获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞,D正确。
10.答案：C
解析：单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成的杂交瘤细胞合成和分泌的,A正确;由题意可知,活化阿霉素可抑制DNA和RNA的合成,即活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程,B正确;根据题图信息可知,阿霉素的活化需要“生物导弹”携带的碱性磷酸酶,所以在治疗中,应先注射“生物导弹”,再注射非活化磷酸阿霉素,但不能间隔太长时间,因为没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后会被机体清除,C错误;单克隆抗体特异性强,可与肿瘤细胞特异性结合,所以能减轻阿霉素对正常细胞的伤害,D正确。
11.答案：D
解析：过程①注射相应抗原后应经过一段时间,使小鼠产生B淋巴细胞(能产生特定抗体),再从小鼠脾脏中提取细胞甲,A项错误;
过程②诱导细胞融合,利用了细胞膜的流动性,B项错误;
过程③筛选杂交瘤细胞,过程④筛选能产生单一抗体的杂交瘤细胞,二者方法不同,C项错误;
过程⑤无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖,D项正确。
12.答案：C
解析：A、病原体可能有多种抗原,注射病原体可能引起动物产生多种抗体,A正确;B、可利用纳米抗体偶联药物形成“生物导弹”进行靶向运输,B正确;C、设计纳米抗体属于蛋白质工程,首先要做的是设计纳米抗体的空间结构,C错误;D、纳米抗体可能与抗原接触面积更大,从而使纳米抗体与A抗原特异性结合力更强,D正确。故选C。
13.答案：D
解析：A、自然条件下，哺乳动物（比如熊猫）的受精作用在输卵管内完成，受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，A正确；
B、精子入卵后，被激活的卵母细胞完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核，雌原核一般略小于雄原核，B正确；
C、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，C正确；
D、体外受精时，从卵巢中采集的卵母细胞，一般都要体外经人工培养成熟至MⅡ时，才能与获能的精子受精，D错误。
故选D。
14.答案：C
解析：AB、卵子和精子在输卵管完成受精后，发育也就开始了，因此胚胎发育的初期是在输卵管中进行的，AB正确；C、早期胚胎发育过程中，囊胚期由于细胞增殖使细胞数量增多，且出现了囊胚腔，因此体积进一步扩大，会从透明带中伸展出来，这一过程称孵化，C错误；D、高等动物早期胚胎发育的顺序是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚，D正确。故选C。
15.答案：D
解析：A、精细胞变形为精子后，大部分细胞质及多数细胞器被丢弃，但全部线粒体被保留下来并主要集中在尾的基部，而细胞核分布在头部，A正确；
B、体外受精时，采集的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期，采集的精子需要在人工配制的获能液中进行获能处理，B正确；
C、相邻两个细胞的细胞膜接触，信息从一个细胞传递给另一个细胞，如精子和卵细胞之间的识别和结合，C正确；
D、在精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，即卵细胞膜反应拒绝多精入卵，这是防止多精入卵的第二道屏障，D错误。
故选D。
16.答案：D
解析：A、①代表体外受精,体外受精前和体内受精前精子均需要获能,A错误;
B、②代表早期胚胎培养,该过程中细胞进行有丝分裂,当胚胎发育至囊胚阶段,会开始进行细胞分化,B错误;
C、③代表胚胎分割,在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分裂,以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育,而桑葚胚阶段的胚胎还未形成内细胞团,C错误;
D、⑤代表胚胎移植,胚胎移植能否成功,与供体和受体的生理状态有关,要对供、受体母牛进行同期发情处理,使供体和受体的生理状态相同,D正确。
17.答案：(1)促性腺激素;动物细胞核的全能性
(2)胚胎移植;同期发情
(3)精子获能;减数第二次分裂中期(或MⅡ期);透明带;卵细胞膜
(4)胚胎分割;内细胞团
(5)血清;95%空气和5%CO2
解析：(1)应用1中是将供体1的体细胞的细胞核移植到取自供体2的去核卵母细胞中,故为了获取更多供体2的卵母细胞,需对供体2注射促性腺激素以促进超数排卵。使用核移植技术获得重组细胞,最终获得的小牛为克隆牛,该技术所依据的原理是动物细胞核的全能性。
(2)应用2属于有性生殖,将早期胚胎移入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植:移植前需对受体牛进行同期发情处理,使供体和受体处于相同的生理状态,为移植胚胎提供相同的生理环境,提高成功率。
(3)在应用2、3、4中,将收集的精子放在获能液中进行培养,使其获得受精能力,这一生理现象称为精子获能。从母体内获得的卵母细胞不能立即用于受精,要在体外经人工培养至减数第二次分裂中期才具备受精能力,才能与精子结合。受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是透明带反应和卵细胞膜反应。
(4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题。通过胚胎分割技术可获得二分胚,对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
(5)动物细胞培养液中,通常需要加入血清等天然成分。动物细胞培养需要在含95%空气和5%CO2的恒温培养箱中进行,其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。
18.答案：(1)动物细胞融合、动物细胞培养
(2)PSMA、CD28；PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法；L链和H链随机组合,产生多种抗体
(3)PC双抗不能有效激活T细胞；抑制；将PC双抗与PD-L1单抗联合使用
解析：(1)结合单克隆抗体的制备过程可知,制备PC双抗的过程中,用到的动物细胞工程技术主要有动物细胞融合和动物细胞培养技术。
(2)制备双特异性抗体PSMA×CD28,则抗原是CD28和PSMA,将两种物质分别注射到小鼠体内,分离出B淋巴细胞,将B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合,筛选得到产生所需抗体的杂交瘤细胞,再诱导杂交瘤细胞融合。诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法。成功融合的细胞会表达含L链和H链的双抗,所需的双特异性抗体PSMA×CD28是特定的L链和H链结合形成的,由于L链和H链随机组合而产生多种抗体,因此还需要进行筛选,才能获得所需的抗体。
(3)该实验的自变量是加入抗体的种类和浓度,因变量是T细胞的活化水平(与L-2浓度呈正相关)。由图可知,两组实验T细胞的活化水平差别不大,说明PC双抗不能有效激活T细胞。进一步分析发现,这种癌细胞大量表达PD-L1,识别并结合T细胞表面的PD-1受体,从而抑制T细胞活化,使PC双抗难以发挥作用。为了有更好的治疗效果,可将PC双抗与PD-L1单抗联合使用,从而有效激活T细胞。