(共32张PPT)
第三章基因的本质
第1节 DNA是主要的遗传物质
1909年:摩尔根通过果蝇实验证明:基因位于染色体上。
19世纪中期:孟德尔通过豌豆实验证明了生物的性状是由遗传因子控制。
1903年:萨顿通过对蝗虫细胞观察得出假说:基因位于染色体上。
20世纪中期:科学家发现:染色体主要组成成分:DNA和蛋白质。
基因的追寻记
DNA
蛋白质
情景材料
20世纪中叶,科学家发现:染色体主要由蛋白质和DNA组成。究竟哪一种是遗传物质呢?这个问题曾引起生物界激烈的讨论
你认为遗传物质应该具有什么特点?
①储存大量的遗传信息
②可以准确地复制,并传递给下一代
③可以控制生物的性状;
④结构比较稳定等
1. 20世纪20年代
——蛋白质是遗传物质
氨基酸多种多样的排列顺序可能蕴含着遗传信息
2. 20世纪30年代后
——DNA是遗传物质
基本单位:
脱氧核糖核苷酸
对遗传物质的早期推测:
是蛋白质!
是DNA
赫尔希和蔡斯噬菌体侵染细菌的实验
格里菲思的肺炎链球菌体内转化实验
艾弗里的肺炎链球菌体外转化实验
格里菲思
艾弗里
赫尔希
蔡斯
向“遗传物质是蛋白质”提出挑战的科学家们:
“我们表示怀疑!”
1.科学家:
格里菲思
2.实验材料:
肺炎链球菌、小鼠
项目 S型细菌 R型细菌
菌落
菌体
有无毒性
表面光滑
表面粗糙
有毒,可致病,使人和小鼠患肺炎,小鼠并发败血症死亡
无毒(P43)
多糖类的荚膜
实验一:格里菲思的肺炎链球菌体内转化实验
无荚膜
不死亡
死亡
不死亡
死亡
注射R型
活细菌
注射S型
活细菌
注射加热致死的S型细菌
R型活细菌与S型死细菌混合后注射
说明加热致死的S型细菌无毒
S型细菌有毒
R型细菌无毒
说明R型细菌转化成了S型细菌
R活+S死→S活
实验一:格里菲思的肺炎链球菌体内转化实验
说明R型细菌转化成了S型细菌
起死回生?改头换面?
第一组
第二组
第三组
第四组
S型死
R型活
转化因子
S型活
改头换面
?
多糖 脂类 蛋白质 RNA DNA
谁在转化实验中起作用,转化因子究竟是什么物质?
如果是你会怎么设计实验思路?
加热杀死的S型细菌
结论:已经加热致死的S型细菌,含有某种促使R型活细菌转化为S型活细菌的活性物质——转化因子。
S型死细菌
多糖
脂类
蛋白质
DNA
分别与R型活细菌混合培养
实验二:艾弗里的体外转化实验
由于技术有限,无法实现各物质的分离!
加法原理
×
RNA
1. 艾弗里的实验思路
(1)将加热致死的S型细菌破碎后,设法去除绝大部分糖类、蛋白质和脂质,制成细胞提取物。
(2)将细胞提取物加入有R型活细菌的培养基中,混合培养。
(3)对细胞提取物分别用蛋白酶、RNA酶或酯酶进行不同的处理后与R型细菌混合培养。
(4)用DNA酶处理提取物后再与R细菌混合培养。
主要思想:
逐一去除每种物质,观察实验结果,找寻出转化因子。
实验二:艾弗里的体外转化实验
细胞提取物:
少量蛋白质、脂质和RNA、DNA
S型死细菌
细胞提取物+蛋白酶
细胞提取物+RNA酶
细胞提取物+酯酶
细胞提取物+DNA酶
分别与R型活细菌混合培养
实验二:艾弗里的体外转化实验
1.实验者:艾弗里
2.实验材料:肺炎链球菌
减法原理
√
科学方法:
与常态比较,人为增加某种影响因素的称为“加法原理”。
“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验:
与对照组相比,实验组分别作加温、滴加FeCl3溶液、
滴加肝脏研磨液的处理
自变量控制中的“加法原理” 和“减法原理”(P46)
与常态相比,人为去除某种影响因素的称为“减法原理”。
艾弗里的肺炎链球菌转化实验:
每个实验组特异性地去除了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质。
第一组
有R型细菌的培养基
S型细菌的细胞提取物
+
第二至四组
有R型细菌的培养液
S型细菌的细胞提取物
+
混合
混合
第五组
有R型细菌的培养液
S型细菌的细胞提取物
+
混合
DNA酶
蛋白酶(或RNA酶、酯酶)
S型细菌
R型细菌
S型细菌
R型细菌
只长R型细菌
对照原则、单一变量原则
实验结论
(1)DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。
(2)蛋白质等其他物质不是遗传物质。
实验二:艾弗里的体外转化实验
改头换面
对照组
改头换面
2.被转化的R型菌只是少量,在培养后既有R型细菌又有S型细菌的培养基中,R型菌的菌落占多数。
注意:
1.艾弗里的体外转化实验既证明了DNA是遗传物质,同时证明了蛋白质等不是遗传物质;
3.仅仅是S型细菌的DNA不能使小鼠致死。
1、实验材料:病毒(T2噬菌体)
实验三:噬菌体侵染细菌的实验
蛋白质外壳
DNA
组成:
蛋白质外壳(60%)和DNA(40%)
2. 生活方式:
专门寄生于大肠杆菌中
阅读P45相关信息
3. 繁殖特点: 仅将遗传物质导入大肠杆菌,
其他物质保留在大肠杆菌外。
吸附
注入
合成
组装
释放
噬菌体吸附在细菌表面
把遗传物质注入到细菌细胞
利用细菌的化学成分和酶系统合成出噬菌体的DNA、蛋白质
新合成的DNA、蛋白质组装成很多噬菌体
细菌解体,释放出噬菌体
噬菌体侵染细菌的过程:
问题1:进入大肠杆菌的遗传物质有几种可能?
假设1:噬菌体的蛋白质外壳进入细菌,DNA未进入
假设2:噬菌体的DNA进入细菌,蛋白质外壳未进入
假设3:噬菌体的DNA和蛋白质外壳都进入了细菌
问题2:DNA和蛋白质无法看到,用什么方法
判断哪种物质进入了?
放射性同位素标记法分别标记DNA和蛋白质,通过检测放射性出现在哪里,进而判断是哪种物质进入了大肠杆菌。
DNA
蛋白质
大肠杆菌
DNA
蛋白质
大肠杆菌
问题3:应标记DNA和蛋白质的什么元素?
32P
35S
问题4:可以用14C、13H、8O或15N等标记吗?
问题5:能不能同时用32P和35S标记噬菌体?
问题6:如何标记噬菌体?能否在含放射性
同位素的培养基中标记噬菌体?
不可以,噬菌体是病毒,营寄生生活,无法单独在培养基上存活,应用含被标记的大肠杆菌培养基培养噬菌体。
实验过程:
大肠杆菌+含35S的培养基→ 含35S的大肠杆菌
大肠杆菌+含32P的培养基→ 含32P的大肠杆菌
第二步:标记T2噬菌体
噬菌体+含35S的大肠杆菌→ 含35S的噬菌体
噬菌体+含32P的大肠杆菌→ 含32P的噬菌体
第一步:标记大肠杆菌
第三步:用已标记噬菌体侵染未标记的大肠杆菌
保温目的:使噬菌体完成侵染过程
搅拌目的:使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离
离心目的:让上清液中析出较轻的噬菌体颗粒,而沉淀物中留下被感染的大肠杆菌
上清液:噬菌体(剩余部分)
沉淀物:大肠杆菌(及注入部分)
可能的结果分析
第一组实验 (35S标记跟踪蛋白质) 第二组实验
(32P标记跟踪DNA)
假设1:注入的是蛋白质,DNA未进入 上清液: 上清液:
沉淀物: 沉淀物:
假设2: 注入的是DNA,蛋白质未进入 上清液: 上清液:
沉淀物: 沉淀物:
假设3:DNA和蛋白质都进入 上清液: 上清液:
沉淀物: 沉淀物:
放射性很高
无放射性
放射性很高
无放射性
放射性很高
无放射性
放射性很高
无放射性
放射性很高
无放射性
放射性很高
无放射性
上清液:噬菌体(剩余部分)
沉淀物:大肠杆菌(及注入部分)
跟踪噬菌体的蛋白质
第一组实验:
放射性标记的噬菌体蛋白质外壳没有进入大肠杆菌
第一组实验
(35S标记跟踪蛋白质)
假设2:注入的是DNA,蛋白质未进入 上清液:放射性很高
沉淀物:无放射性
跟踪噬菌体的DNA
第二组实验:
放射性标记的噬菌体DNA进入了大肠杆菌
第二组实验
(32P标记跟踪DNA)
假设2:注入的是DNA,蛋白质未进入 上清液:无放射性
沉淀物:放射性很高
第二组
实验
实验结果与结论:
第一组 实验
亲代噬菌体
32P标记DNA
35S标记
蛋白质
大肠杆菌内
有32P标记DNA
无35S标记
蛋白质
子代噬菌体
DNA有
32P标记
外壳蛋白质无35S
实验结论
子代噬菌体的各种性状,是通过亲代的DNA遗传的。
DNA是噬菌体的遗传物质。
实验三:噬菌体侵染细菌的实验
搅拌不充分
理论上
上清液
沉淀物
其中一个
大肠杆菌
实际上
①35S标记的一组,为什么沉淀中出现了放射性?
搅拌不充分导致部分蛋白质外壳吸附在细菌上,离心时随细菌到沉淀物中。
保温时间长
理论上
上清液
沉淀物
实际上
部分噬菌体未侵染
大肠杆菌
部分噬菌体释放出来
释放
实际上
保温时间短
②32P标记的一组,为什么上清液中出现了放射性?
流感病毒
只有DNA是遗传物质吗?
烟草花叶病毒
蛋白质
RNA
RNA
蛋白质
新冠病毒
如果你是科学家,请设计实验证明烟草花叶病毒的遗传物质是什么?
实验四:格勒和施拉姆的烟草花叶病毒实验
结论:RNA是烟草花叶病毒的遗传物质
分别侵染健康烟草植株
患病
不患病
得到病毒
不能得到病毒
:
RNA
蛋白质
实验四:格勒和施拉姆的烟草花叶病毒实验
RNA裸露的感染效率很差,如何改进实验?
TMV 1
TMV 2
TMV 2
RNA 2
蛋白质 2
蛋白质 1+RNA 2
TMV 2
TMV 1
RNA 1
蛋白质 1
蛋白质 2+RNA 1
TMV 1
:
结论:烟草花叶病毒的遗传物质是RNA。
不同生物体内遗传物质
绝大多数生物的遗传物质是 ;只有少部分生物的遗传物质是 。
DNA
RNA
DNA是主要的遗传物质。
DNA
RNA
DNA
生物类型 遗传物质 实例
有细胞结构的生物 真核生物 玉米、小麦、人
原核生物 乳酸菌、蓝藻
无细胞结构的生物 DNA病毒 T2噬菌体
RNA病毒 烟草花叶病毒、HIV(人类免疫缺陷病毒)、流感病毒、SARS病毒、新型冠状病毒等
知识小结
格里菲思
肺炎链球菌体内转化实验
艾弗里
肺炎链球菌体外转化实验
推论:加热杀死的S型细菌体内有“转化因子”
,将R型细菌转化为S型细菌。
遗留问题:转化因子是什么?
结论:证明DNA是转化因子(即遗传物质)
(使R型细菌产生稳定遗传变化的物质)
赫尔希和蔡斯
噬菌体侵染大肠杆菌实验
结论:
DNA是噬菌体的遗传物质。
格勒和施拉姆
烟草花叶病毒实验
结论:
少数病毒中,RNA是遗传物质。
1928
1944
1952
1957
DNA是主要的遗传物质