(共33张PPT)
3.1-DNA是主要的遗传物质
问题探讨
讨论:你认为遗传物质可能具有什么特点?
①储存大量的遗传信息。
②可以准确地复制,并传递给下一代。
③结构比较稳定等等。
20世纪中叶,科学家发现:染色体主要由蛋白质和DNA组成。这两种物质,究竟哪一种是遗传物质呢?
这个问题曾引起生物界激烈的讨论。
一、对遗传物质的早期推测
是由多种氨基酸连接而成,排列顺序多样,可能蕴含遗传信息
20世纪20年代
20世纪30年代
认识到 DNA是由许多脱氧核苷酸聚合而成的生物大分子
对DNA结构没有清晰的了解
蛋白质
蛋白质是遗传物质
蛋白质是遗传物质的观点仍占主导地位。
肺炎链球菌的转化实验
噬菌体侵染细菌的实验(赫尔希、蔡斯)
体内转化实验(格里菲思)
体外转化实验(艾弗里)
首先提出挑战
证明 DNA是遗传物质 的经典实验
向“遗传物质是蛋白质”提出挑战的科学家们:
格里菲思
艾弗里
赫尔希
蔡斯
致病性(毒性)
R型细菌
S型细菌
粗糙
光滑
无
有
无
有
(使人、鼠患肺炎,
小鼠并发败血症而死)
多糖类荚膜
菌落
二、肺炎链球菌的转化实验
1.体内转化实验(格里菲思)
实验材料:
小鼠、两种肺炎链球菌(R型、S型)
荚膜
(胶状物质)
R型细菌
S型细菌
R型
活细菌
S型
活细菌
小鼠不死亡
(第一组)
小鼠死亡
(第二组)
分离出S型活细菌
加热杀死的
S型细菌
小鼠不死亡
(第三组)
R型活细菌+加热
杀死的S型细菌
小鼠死亡
(第四组)
分离出S型活细菌
二、肺炎链球菌的转化实验
1.体内转化实验(格里菲思)
实验过程:(描述实验过程,几组?每组的过程及结果是什么?)
讨论以下问题,展示学习成果:
1.对比第一、第二组的实验现象,说明了什么?
2. 对比第二、第三组的实验现象,说明了什么?
3.为什么四组小鼠会死亡并分离出S型活细菌?
学生活动1:格里菲思的肺炎链球菌体内转化实验的分析
R型细菌无致病性;S型细菌有致病性,能使小鼠死亡。
加热杀死的S型细菌不能使小鼠死亡。
加热杀死的S型细菌使部分活的R型细菌发生了转化,变成了活的S型细菌。
已经加热杀死的S型细菌中,含有某种促使R型活细菌转化为S型活细菌的活性物质——转化因子
二、肺炎链球菌的转化实验
1.体内转化实验(格里菲思)
实验结论:
S型细菌中有很多成分,哪种成分才是转化因子呢?
S型细菌
蛋白质
DNA
糖类
脂质
RNA
怎么设计实验来证明哪种成分是转化因子,你的实验思路是?
R型+ . S型
关键思路:
每组实验特异地去除一种物质,观察在没有这种物质的情况下,实验结果会有什么变化。
用什么方法去除?
酶解法
破碎
二、肺炎链球菌的转化实验
2.体外转化实验(艾弗里)
S型的细胞提取物
(含DNA、RNA、蛋白质等)
S型细菌
蛋白质
DNA
糖类
脂质
RNA
二、肺炎链球菌的转化实验
2.体外转化实验(艾弗里)
有转化因子
有转化因子
S型细胞提取物
R型活细菌
+
①
S型细胞提取物
R型活细菌
+
②
-④
②加蛋白酶
③加RNA酶
④加脂酶
二、肺炎链球菌的转化实验
2.体外转化实验(艾弗里)
没有转化因子
转化因子很可能就是DNA
实验表明:
艾弗里的结论:
DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质
S型细胞提取物
R型活细菌
+
⑤
加DNA酶
艾弗里实验可以证明蛋白质不是遗传物质吗?
可以
1.加热杀死的S型细菌和R型活细菌混合注射到小鼠体内,从小鼠尸体中提取到的细菌全部是S型细菌( )
×
2.格里菲思实验证明转化因子是DNA( )
×
R型和S型都有
梳理梳理,练一练
2.为探明转化因子的成分,艾弗里将加热致死的S型细菌破碎后,设法去除大部分糖类、蛋白质和脂质,制成细胞提取物,然后进行如下实验:
组别 处理步骤 结果(出现R型活细菌或S型活细菌)
1 S型细菌的细胞提取物,不做处理 加入R型活细菌的培养基中,混合培养 R+S
2 S型细菌的细胞提取物+蛋白酶 3 S型细菌的细胞提取物+RNA酶 4 S型细菌的细胞提取物+酯酶 5 S型细菌的细胞提取物+DNA酶 R
下列对实验的分析,错误的是( )
A.第1组不做处理,作为对照组
B.第2、3、4组的细胞提取物仍具有转化活性
C.实验中酶能加快反应速率
D.第5组实验证明转化因子一定是DNA
D
大本38
讨论以下问题,展示学习成果:
1.五组实验中分别加入不同的酶,其目的是什么?
2. 加蛋白酶、RNA酶、酯酶后R型菌还是被转化为S型菌说明什么问题?
3.加DNA酶后只长R型菌说明什么问题?
4.该实验的设计遵循哪些原则?其巧妙之处是什么?
说明细胞提取物中的转化因子很可能就是DNA。
去除S型细菌的细胞提取物中相应的物质。
说明转化因子不是蛋白质、RNA和脂肪。
艾弗里的肺炎链球菌体外转化实验的分析
如何理解“加法原理”和“减法原理”?
减法原理
S型细胞提取物
(含DNA、RNA、蛋白质等)
去掉蛋白质
去掉RNA
去掉DNA
加法原理
①常温放置
H2O2溶液
②90℃加热
③加2滴FeCl3溶液
④加2滴H2O2酶
思考和讨论
减法原理:与常态比较,人为去除某种影响因素。
加法原理:与常态比较,人为增加某种影响因素。
有没有更好的材料、更好的方法能够将DNA和蛋白质分开,单独去观察它们的作用呢?
1952年,赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料,利用放射性同位素标记技术,完成了另一个有说服力的实验。
艾弗里的实验引起了人们的注意。但是,由于艾弗里实验中无法真正提取出纯DNA(混有少量的蛋白质)来进一步验证遗传物质就是DNA,同时,当时科学界深信蛋白质是遗传物质。
因此,对艾弗里实验结论表示质疑。
关于T2噬菌体
(1)结构:外壳由 构成,头部内含有 。
(2)生活方式: 。
蛋白质
DNA
专门寄生在大肠杆菌体内
1、实验材料
(3)噬菌体增殖过程:吸附→注入→ 合成→ 组装→ 释放
三、噬菌体侵染细菌的实验
(遗传物质注入进大肠杆菌)
三、噬菌体侵染细菌的实验
DNA
蛋白质外壳
2、实验方法:
放射性同位素标记法(DNA和蛋白质)
:C H O N P
:C H O N S
32P
35S
将______与蛋白质分开,______、______去观察它们各自的作用。
DNA
单独地
直接地
3、实验思路:
思考:如何让噬菌体带上标记?分别用含32P和35S的培养基直接普通培养噬菌体可以吗?为什么?
T2噬菌体属于病毒,专门寄生在大肠杆菌体内,不能直接用普通培养基培养。
应该如何标记上T2噬菌体呢?
(1)标记噬菌体
35S
32P
+
+
35S
含35S的培养基
含32P的培养基
大肠杆菌
大肠杆菌
含35S的大肠杆菌
含32P的大肠杆菌
35S噬菌体
32 P噬菌体
(课本P45)
4.实验过程及结果
(2)再用已标记的含35S、32P的噬菌体分别侵染细菌:
①先用含放射性同位素的培养基分别培养大肠杆菌
②再用上述大肠杆菌培养T2噬菌体
35S标记的噬菌体
用35S标记的噬菌体与大肠杆菌混合
经短时间保温后用搅拌器搅拌
离心检测上清液和
沉淀物中的放射性物质
细菌裂解后检测子代噬菌体的放射性
上清液放射性很高
(含噬菌体蛋白质外壳)
沉淀物放射性很低
(含噬菌体DNA)
子代噬菌体中无35S
上清液放射性很高,沉淀物放射性很低
实验结果
噬菌体被标记的蛋白质外壳留在细胞外
说明了
搅拌的目的:使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离
离心目的:让上清液中析出质量较轻的T2噬菌体颗粒,而离心管的沉淀物中留下被侵染的大肠杆菌
32P标记的噬菌体侵染细菌
思考:35S标记的实验发现沉淀物中也有较低放射性,可能是什么原因造成的?
搅拌不充分
理论上
上清液
沉淀物
其中一个
大肠杆菌
实际上
搅拌不充分导致部分蛋白质外壳未与细菌分离,离心时随细菌到沉淀物中。
32P标记的噬菌体
T2噬菌体中的被标记的DNA进入了大肠杆菌
子代噬菌体中含32P
用32P标记的噬菌体与大肠杆菌混合
经短时间保温后用搅拌器搅拌
离心检测上清液和
沉淀物中的放射性物质
细菌裂解后检测子代噬菌体的放射性
上清液放射性很低
(含噬菌体蛋白质外壳)
沉淀物放射性很高
(含噬菌体DNA)
上清液放射性很低,沉淀物放射性很高
32P标记的噬菌体侵染细菌
实验结果
说明了
问题5:32P标记的实验发现上清液中也有较低的放射性,可能是什么原因造成的?
保温时间长
理论上
上清液
沉淀物
若该大肠杆菌有一个噬菌体侵入
实际上
部分释
放出来
释放
未来得及侵染
实际上
保温时间短
保温时间过长,部分子代噬菌体已经释放。
保温时间过短,部分噬菌体还未侵染细菌;
标记噬菌体(35S、32P分别标记,每组只标记一种元素)
被标记的噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌(保温一段时间)
搅拌
观察放射性的分布
三、噬菌体侵染细菌的实验
实验过程:
离心
32P标记
35S标记
上清液放射性高
沉淀物放射性高
沉淀物放射性低
上清液放射性低
35S噬菌体
32 P噬菌体
(含噬菌体蛋白质外壳)
(含噬菌体DNA)
(含噬菌体蛋白质外壳)
(含噬菌体DNA)
5.实验结果分析
(1)噬菌体侵染细菌时,其_______进入细菌细胞中,而_____________留在外面。
(2)子代噬菌体的各种性状是通过亲代__________遗传的。
6.结论
__________才是噬菌体的遗传物质。
DNA
蛋白质外壳
DNA
DNA
问题2:标记噬菌体时,能否用14C标记蛋白质、DNA?为什么?
问题3:能否用35S、32P标记同一个T2噬菌体?
不能,因为C、N这些元素是蛋白质和DNA共有的元素,可能会使同一组的噬菌体的DNA和蛋白质同时被标记上。
不能,因为放射性检测只能检测到是否具有放射性,不能确定是何种放射性元素。
问题1.该实验能否证明蛋白质不是遗传物质?
不能证明,因为该实验中蛋白质没进入大肠杆菌体内,无法判断其是否没有遗传效应
艾弗里实验 噬菌体侵染细菌实验
处理方式
对照原则
实验结论
酶解法
放射性同位素标记法
S型细菌的分离物质分别与
R型细菌混合培养相互对照
分别标记噬菌体DNA和蛋白质的两组实验相互对照
证明DNA是遗传物质
证明DNA是遗传物质
两个经典实验的比较
(可证明蛋白质不是遗传物质)
不能有效证明蛋白质不是遗传物质(因为蛋白质没有进入细菌体内)
(两组实验都是实验组)
蛋白质
RNA
分别侵染健康烟草植株
患病
不患病
得到病毒
不能得到病毒
实验结论:RNA是烟草花叶病毒的遗传物质
实验过程:
四、烟草花叶病毒侵染烟草实验的分析
资料分析
资料1:
科学家根据对细胞生物的研究统计发现,真核生物与原核生物体内都含有DNA和RNA两种核酸,但是只有DNA是唯一的遗传物质。
资料2:
科学家对病毒进行研究发现,每种病毒体内只有一种核酸。根据病毒体内含有的核酸类型,可以把病毒分为DNA病毒(体内只含DNA)和RNA病毒(体内只含RNA)。根据统计发现,自然界中大多数的病毒都是DNA病毒,少数的病毒是RNA病毒。
总结:
DNA是主要的遗传物质
DNA是主要的遗传物质
肺炎链球菌体外转化实验
噬菌体侵染细菌实验
烟草花叶病毒侵染烟草实验
DNA是遗传物质
RNA是遗传物质
绝大多数生物
少数病毒
小结
THANK YOU