河北省保定市六校联盟2024-2025学年高二下学期4月期中生物试卷（含答案）
文档属性
| 名称 | 河北省保定市六校联盟2024-2025学年高二下学期4月期中生物试卷（含答案） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 1.5MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 通用版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2025-06-19 18:21:04 | ||
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文档简介
河北省保定市六校联盟2024-2025学年高二下学期4月期中考试生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。下列叙述错误的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵
B．利用发酵工程可以从酵母细胞内获得单细胞蛋白
C．在菌种确定后再选择原料制备培养基
D．发酵工程与传统发酵技术的主要区别是菌种是否单一
2．我国具有悠久的酿酒文化和历史。《天工开物》中有“古来曲造酒，蘖造醴”的记载，“曲”指由谷物培养微生物所制成的发酵剂，“蘖”指发芽的谷物，“醴”指甜酒。古人在冬季酿酒时，常将谷物封存在陶器中并埋藏于地下进行保温。下列叙述错误的是（ ）
A．“曲”中含有大量的酵母菌，温度是影响酵母菌生长的重要因素
B．酿酒过程中密封的主要目的是避免杂菌污染，从而提高酒的品质
C．“造醴”时选择“蘖”的原因是发芽的谷物会释放更多的淀粉酶
D．“蘖造醴”时大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成
3．微生物培养过程中要使用无菌技术且要对微生物进行纯化培养。下列叙述正确的是（ ）
A．利用生物或其代谢物除去环境中部分微生物的方法属于消毒
B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C．稀释涂布平板法统计活菌数时用台盼蓝染色更准确
D．平板划线法纯化细菌时必须对样品菌液进行多倍稀释
4．植酸磷是植物或饲料中磷的主要储存形式，由于动物体内缺少分解植酸磷的植酸酶，导致植酸磷在动物体内的利用率很低，造成磷的浪费。科研人员从土壤中分离了五种能产生植酸酶的细菌菌株，培养基中能出现分解植酸磷的透明圈，操作过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．该过程的接种方法为平板划线法
B．A菌株是产植酸酶的理想菌株，应对其扩大培养
C．土样的稀释过程不需要无菌操作
D．若平板中平均菌落为150，则1g土壤中含有细菌1.5×108个
5．中药材怀菊含有多种活性物质，具有清热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（ ）
A．利用怀菊任何部位的细胞进行植物细胞培养均可获得次生代谢物
B．怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传
C．利用怀菊的茎段作为外植体，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染
D．生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小
6．科学家用蜗牛提取液处理烟草叶片和拟南芥根得到原生质体，两种原生质体经PEG处理后筛选出杂种细胞，其分裂产生的愈伤组织经诱导形成再生植株。经鉴定，再生植株同时表现出烟草和拟南芥的部分性状。下列叙述错误的是（ ）
A．蜗牛提取液具有纤维素酶和果胶酶活性，可去除细胞壁获得原生质体
B．利用PEG处理可诱导两种原生质体的融合
C．诱导愈伤组织期间一定要给予适宜的光照和温度，以利于愈伤组织形成
D．杂种细胞诱导形成具有双亲部分性状的再生植株是基因选择性表达的结果
7．辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变
B．①过程受外源激素的调控，②过程只受内源激素的调控
C．用幼嫩的根和茎作为外植体，获得的脱毒苗具有更强的抗病毒能力
D．通过细胞培养获得辣椒素的过程未体现细胞的全能性
8．如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①细胞培养液中通常需要添加血清等物质
B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．过程②常对受精卵进行去核
D．过程③后，胚胎分割获得同卵双胎属于无性繁殖
9．研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述错误的是（ ）
A．该产品不能通过直接改造胰岛素来生产的
B．改变氨基酸的种类可能会影响胰岛素的空间结构
C．该技术属于蛋白质工程，可通过定向诱导胰岛素基因碱基增添达到改造目的
D．胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反
10．自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过如图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述正确的是（ ）
A．该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲
B．囊胚的内细胞团将来发育成胎膜和胎盘
C．诱导后的iPGCs具有胚胎干细胞的特性
D．通过该实验可以获得甲的克隆
11．关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验，下列相关叙述错误的是（ ）
A．PCR实验中使用的微量离心管、蒸馏水和微量移液器等在使用前都必须进行高压灭菌处理
B．电泳槽中添加的凝胶的浓度需考虑DNA分子的大小
C．电泳鉴定PCR产物时加样缓冲液中的指示剂可提示终止时刻
D．可用PCR技术检测抗虫棉花的细胞中Bt基因是否转录出mRNA
12．质粒是基因工程中最常用的载体，质粒有标记基因（如图所示），通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。质粒上箭头表示三种限制酶的酶切位点。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况不同。如表是外源基因插入（插入点有a、b、c）后细菌的生长情况。下列有关叙述正确的是（ ）
项目 细菌在含氨苄青霉素的培养基上生长情况 细菌在含四环素的培养基上生长情况
① 能生长 不能生长
② 能生长 能生长
③ 不能生长 能生长
A．质粒的复制原点是转录的起始位点
B．①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是a，②是c，③是b
C．质粒被一个限制酶切开时，被水解的磷酸二酯键有2个
D．将外源基因与质粒连接时需用DNA聚合酶
13．公众从网络和自媒体获得的信息众多。请利用生物学知识甄别以下信息，其中错误的是（ ）
A．当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆
B．消费者对转基因食品有知情权和选择权
C．为防止转基因花粉的传播，科学家将来自玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中
D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
二、多选题
14．发酵工程利用微生物的特定功能规模化生产对人类有用的产品。下列关于发酵工程的叙述，错误的有（ ）
A．白酒、味精和腐乳的生产所需要的微生物均为真核生物
B．用平板划线法进行微生物计数时，结果往往比实际值偏小
C．啤酒生产时，加入糖浆和啤酒花后蒸煮的目的是产生风味物质、终止酶的进一步作用、灭菌
D．现代发酵工程生产谷氨酸需要严格控制酸性条件
15．蛭弧菌能使污水中的嗜水气单胞菌（异养型）裂解，将蛭弧菌接种在长满嗜水气单胞菌的平板上会出现噬菌斑。某兴趣小组将嗜水气单胞菌接种到固体培养基上，培养形成薄层，再接种采集的污水用以分离蛭弧菌。下列叙述正确的是（ ）
A．可用干热灭菌法对平板进行灭菌
B．可用涂布平板法或平板划线法接种嗜水气单胞菌
C．出现噬菌斑一定是蛭弧菌作用的结果
D．污水可为自然环境中的嗜水气单胞菌提供碳源
16．如图为某生物工程的操作流程模式图，下列叙述错误的是（ ）
A．若此图表示植物体细胞杂交流程图，则①表示脱分化，②表示再分化
B．若此图表示克隆羊的培育流程图，则①涉及核移植技术
C．若此图表示单克隆抗体的制备流程图，则①只可用灭活的病毒进行诱导
D．若此图表示试管牛的培育流程图，则②涉及对囊胚或原肠胚进行分割处理
17．华西牛是我国育种专家培育的具有完全自主知识产权的专门化肉牛新品种，打破了我国肉牛种源严重依赖进口的局面。科研人员在生产中采取体外受精、胚胎移植等技术手段实现了华西牛的快速繁育。下列叙述正确的是（ ）
A．新生犊牛的遗传性状由华西牛公牛及母牛决定，不受受体母牛的影响
B．可以采用孕激素对华西牛母牛进行超数排卵处理，以发挥其繁殖潜力
C．受体母牛需健康且具有正常的繁殖能力，胚胎移植前需要对其进行同期发情处理
D．胚胎移植后，囊胚进一步扩大，导致囊胚腔破裂的过程称为孵化
18．某科研小组采用PCR技术构建了红色荧光蛋白基因（dsred2）和α-淀粉酶基因（amy）的dsred2-amy融合基因，其过程如图所示，其中引物②和引物③中部分序列（深色区域）可互补配对。下列说法正确的是（ ）
A．利用PCR技术扩增基因时不需要解旋酶来打开DNA双链
B．不能在同一反应体系中进行dsred2基因和amy基因的扩增
C．dsred2基因和amy基因混合后只能得到一种类型的杂交链
D．杂交链延伸得到dsred2-amy融合基因的过程不需要加引物
三、解答题
19．孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。
(1)培养基的配制：MG降解菌富集培养基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等，再加 作为唯一碳源。培养基制备好后需立即灭菌，目的是 。
(2)MG高效降解菌株的分离和纯化：图中所示的分离纯化细菌的方法是 ，统计菌落数目时每隔24h统计一次，选取 的记录作为结果；活菌的实际数目比用该方法统计样品的菌落数目 （填“少”或“多”），原因是 。
(3)黑曲霉是一种丝状真菌，黑曲霉的PDA液体产酶培养基组成为：麸皮、豆粉饼、（NH4）2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4，培养时需要通气振荡。黑曲霉的代谢类型是 ；若要分离黑曲霉菌落，上述培养基中还需要添加 ，在培养基灭菌前需将培养基调至 （填“酸性”“中性”或“碱性”）。
(4)以大豆为主要原料，利用黑曲霉产生的蛋白酶可将原料中的蛋白质水解成 ，然后经淋洗、调制可得到酱油。
20．犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。回答下列问题：
(1)制备单克隆抗体依赖的生物技术有 （答出2点）。与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的B淋巴细胞 （填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；步骤①中，用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是 。
(2)经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是 。对杂交细胞等用特定的选择培养基，该培养基对 和 生长具有抑制作用，此次筛选得到杂交瘤细胞的特点是 ；对杂交瘤细胞进行 经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。
(3)体外培养杂交瘤细胞后从培养基中提取到抗CPV单克隆抗体，也可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，从 中获取抗CPV单克隆抗体。
(4)对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行 检测。
21．研究表明，羊乳中的β-乳球蛋白（BLG）是人体主要过敏源，图1为研究人员利用基因编辑技术敲除山羊中BLG基因，同时导入人乳铁蛋白（hLF）基因并获得转基因山羊的操作过程。图1中sgBLG/Cas9复合物中，sgBLG是能准确识别图1中母羊甲DNA特定序列的RNA，并引导Cas9蛋白对DNA进行切割。回答下列问题：
(1)上述操作过程中的目的基因是 。Cas9蛋白作用于目标DNA的 （填化学键）使其断裂。
(2)图中③应用到的技术为 。
(3)获取母羊丙的卵母细胞后需将其培养至 期后去核，去核的目的是 。⑤过程需将早期胚胎移植到母羊丁的子宫中，进行胚胎移植的优势是 。
(4)研究人员利用人乳铁蛋白基因的mRNA进行逆转录得到了cDNA，已知mRNA的序列为5′—UUACUUCCUG……（中间序列）…CAAGUUUCAU—3′。在目的基因两端加上相应的限制酶识别序列后利用PCR技术扩增，目的基因和图2中的质粒连接构建表达载体。请分别写出PCR扩增时所需两种DNA引物按5′到3′方向的前12个碱基序列 。
(5)筛选后得到的早期胚胎细胞中不能检测到该药用蛋白， （填“能”或“不能”）作为目的基因是否成功导入并表达的依据，理由是 。
22．反刍动物的瘤胃中含有分解纤维素的微生物，科研小组从瘤胃中分离培养分解纤维素的微生物的流程如图所示。回答下列问题：
(1)菌落特征可作为鉴定菌种的依据，观察分离到的菌落将菌落特征如 （答出一点）记录下来。
(2)将Ⅰ过程得到的菌液接种到充满N2的密闭试管中进行Ⅱ过程，培养一段时间后可在试管壁的薄层培养基上获得单菌落。培养瘤胃微生物时，除考虑营养物质外，还要考虑 、 和渗透压等条件。
(3)分离出某真菌的W基因可编码一种可高效降解纤维素的酶，已知图中W基因转录方向是从左向右，为使大肠杆菌产生该酶，以图中质粒为载体，进行转基因操作。不同限制酶的识别序列及切割位点如表所示。
限制酶 BamHI EcoRI MfeI KpnI HindⅢ
识别序列和切割位点 G↓GATTC G↓AATTC C↓AATTG GGTAC↓C A↓AGCTT
①W基因转录的模板链是 。利用PCR技术对W基因进行扩增时子链延伸的方向是 。
②启动子通常具有物种特异性，在质粒中插入W基因，其上游启动子应选择 的启动子。
③限制酶主要是从 中分离纯化出来的。应使用限制酶 切割图中质粒，使用限制酶 切割图中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。
四、实验题
23．小麦是我国重要的粮食作物之一，也是盐碱地开发利用的主要作物之一。研究表明，在盐碱条件下小麦的生长受到影响。为了研究小麦耐盐基因TaHKT1（用A基因表示）控制的耐盐性状，研究人员利用基因工程构建了A基因超量表达的转基因小麦。回答下列问题：
(1)可利用PCR获取和扩增A基因，PCR的原理是 ，扩增过程需要除具有引物外还应具有 （答出两点）等基本条件才能保证DNA复制顺利进行，其中加入引物的作用是 ；进行图1过程时应将温度控制为 左右。
(2)图2表示A基因与强启动子连接在一起得到的片段，据此推测构建该片段时，切割强启动子和A基因时均用到的限制酶为 ，并用 将二者连接在一起得到图示片段，再将该片段继续与图2中的Ti质粒相连，切割该片段和Ti质粒时选择BamHⅠ和SacⅠ进项双酶切，目的是 。
(3)该实验将目的基因导入小麦细胞的常用方法为 ，筛选出含有目的基因的小麦细胞后获得转基因小麦应用到的技术是 。
(4)为了检测A基因超量表达对小麦耐盐性状的影响，应如何设计实验？请写出实验思路。 。
河北省保定市六校联盟2024-2025学年高二下学期4月期中考试生物试题参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B B A D B C D C C A
题号 11 12 13 14 15 16 17 18
答案 A C D ABD BD ACD AC ABD
19．(1) 孔雀石绿 防止杂菌污染
(2) 稀释涂布平板法 菌落数目稳定时 多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
(3) 异养需氧型 琼脂 酸性
(4)小分子的肽和氨基酸
20．(1) 动物细胞培养、动物细胞融合 不需要 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多已免疫的B淋巴细胞
(2) 细胞融合是随机的 未融合的亲本细胞 融合的具有同种核的细胞 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 克隆化培养、抗体检测
(3)小鼠腹水
(4)抗原—抗体杂交
21．(1) 人乳铁蛋白（hLF）基因 磷酸二酯键
(2)显微操作去核
(3) MⅡ（中）（减数分裂Ⅱ中期/减数第二次分裂中期） 确保重构胚的核遗传物质来自供体细胞 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
(4)5′—GAATTCTTACTT—3′，5′—CTGCAGATGAAA—3′
(5) 不能 人乳铁蛋白（目的）基因只能在转基因动物的乳腺细胞内表达
22．(1)形状、大小、颜色等
(2) 温度 pH
(3) 乙链 5′→3′ 大肠杆菌 原核生物 MfeⅠ、HindⅢ EcoRⅠ、HindⅢ
23．(1) DNA半保留复制 DNA模板、（4种）脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、含Mg2+的缓冲液 使耐高温的DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 50℃
(2) HindⅢ DNA连接酶 防止目的基因和质粒的自身环化，防止目的基因和质粒的反向连接
(3) 农杆菌转化法 植物组织培养
(4)可用一定浓度的盐水浇灌转基因植株和非转基因植株，观察比较两种植株的生长状况
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。下列叙述错误的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵
B．利用发酵工程可以从酵母细胞内获得单细胞蛋白
C．在菌种确定后再选择原料制备培养基
D．发酵工程与传统发酵技术的主要区别是菌种是否单一
2．我国具有悠久的酿酒文化和历史。《天工开物》中有“古来曲造酒，蘖造醴”的记载，“曲”指由谷物培养微生物所制成的发酵剂，“蘖”指发芽的谷物，“醴”指甜酒。古人在冬季酿酒时，常将谷物封存在陶器中并埋藏于地下进行保温。下列叙述错误的是（ ）
A．“曲”中含有大量的酵母菌，温度是影响酵母菌生长的重要因素
B．酿酒过程中密封的主要目的是避免杂菌污染，从而提高酒的品质
C．“造醴”时选择“蘖”的原因是发芽的谷物会释放更多的淀粉酶
D．“蘖造醴”时大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成
3．微生物培养过程中要使用无菌技术且要对微生物进行纯化培养。下列叙述正确的是（ ）
A．利用生物或其代谢物除去环境中部分微生物的方法属于消毒
B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C．稀释涂布平板法统计活菌数时用台盼蓝染色更准确
D．平板划线法纯化细菌时必须对样品菌液进行多倍稀释
4．植酸磷是植物或饲料中磷的主要储存形式，由于动物体内缺少分解植酸磷的植酸酶，导致植酸磷在动物体内的利用率很低，造成磷的浪费。科研人员从土壤中分离了五种能产生植酸酶的细菌菌株，培养基中能出现分解植酸磷的透明圈，操作过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．该过程的接种方法为平板划线法
B．A菌株是产植酸酶的理想菌株，应对其扩大培养
C．土样的稀释过程不需要无菌操作
D．若平板中平均菌落为150，则1g土壤中含有细菌1.5×108个
5．中药材怀菊含有多种活性物质，具有清热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（ ）
A．利用怀菊任何部位的细胞进行植物细胞培养均可获得次生代谢物
B．怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传
C．利用怀菊的茎段作为外植体，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染
D．生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小
6．科学家用蜗牛提取液处理烟草叶片和拟南芥根得到原生质体，两种原生质体经PEG处理后筛选出杂种细胞，其分裂产生的愈伤组织经诱导形成再生植株。经鉴定，再生植株同时表现出烟草和拟南芥的部分性状。下列叙述错误的是（ ）
A．蜗牛提取液具有纤维素酶和果胶酶活性，可去除细胞壁获得原生质体
B．利用PEG处理可诱导两种原生质体的融合
C．诱导愈伤组织期间一定要给予适宜的光照和温度，以利于愈伤组织形成
D．杂种细胞诱导形成具有双亲部分性状的再生植株是基因选择性表达的结果
7．辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变
B．①过程受外源激素的调控，②过程只受内源激素的调控
C．用幼嫩的根和茎作为外植体，获得的脱毒苗具有更强的抗病毒能力
D．通过细胞培养获得辣椒素的过程未体现细胞的全能性
8．如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①细胞培养液中通常需要添加血清等物质
B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．过程②常对受精卵进行去核
D．过程③后，胚胎分割获得同卵双胎属于无性繁殖
9．研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述错误的是（ ）
A．该产品不能通过直接改造胰岛素来生产的
B．改变氨基酸的种类可能会影响胰岛素的空间结构
C．该技术属于蛋白质工程，可通过定向诱导胰岛素基因碱基增添达到改造目的
D．胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反
10．自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过如图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述正确的是（ ）
A．该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲
B．囊胚的内细胞团将来发育成胎膜和胎盘
C．诱导后的iPGCs具有胚胎干细胞的特性
D．通过该实验可以获得甲的克隆
11．关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验，下列相关叙述错误的是（ ）
A．PCR实验中使用的微量离心管、蒸馏水和微量移液器等在使用前都必须进行高压灭菌处理
B．电泳槽中添加的凝胶的浓度需考虑DNA分子的大小
C．电泳鉴定PCR产物时加样缓冲液中的指示剂可提示终止时刻
D．可用PCR技术检测抗虫棉花的细胞中Bt基因是否转录出mRNA
12．质粒是基因工程中最常用的载体，质粒有标记基因（如图所示），通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。质粒上箭头表示三种限制酶的酶切位点。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况不同。如表是外源基因插入（插入点有a、b、c）后细菌的生长情况。下列有关叙述正确的是（ ）
项目 细菌在含氨苄青霉素的培养基上生长情况 细菌在含四环素的培养基上生长情况
① 能生长 不能生长
② 能生长 能生长
③ 不能生长 能生长
A．质粒的复制原点是转录的起始位点
B．①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是a，②是c，③是b
C．质粒被一个限制酶切开时，被水解的磷酸二酯键有2个
D．将外源基因与质粒连接时需用DNA聚合酶
13．公众从网络和自媒体获得的信息众多。请利用生物学知识甄别以下信息，其中错误的是（ ）
A．当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆
B．消费者对转基因食品有知情权和选择权
C．为防止转基因花粉的传播，科学家将来自玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中
D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
二、多选题
14．发酵工程利用微生物的特定功能规模化生产对人类有用的产品。下列关于发酵工程的叙述，错误的有（ ）
A．白酒、味精和腐乳的生产所需要的微生物均为真核生物
B．用平板划线法进行微生物计数时，结果往往比实际值偏小
C．啤酒生产时，加入糖浆和啤酒花后蒸煮的目的是产生风味物质、终止酶的进一步作用、灭菌
D．现代发酵工程生产谷氨酸需要严格控制酸性条件
15．蛭弧菌能使污水中的嗜水气单胞菌（异养型）裂解，将蛭弧菌接种在长满嗜水气单胞菌的平板上会出现噬菌斑。某兴趣小组将嗜水气单胞菌接种到固体培养基上，培养形成薄层，再接种采集的污水用以分离蛭弧菌。下列叙述正确的是（ ）
A．可用干热灭菌法对平板进行灭菌
B．可用涂布平板法或平板划线法接种嗜水气单胞菌
C．出现噬菌斑一定是蛭弧菌作用的结果
D．污水可为自然环境中的嗜水气单胞菌提供碳源
16．如图为某生物工程的操作流程模式图，下列叙述错误的是（ ）
A．若此图表示植物体细胞杂交流程图，则①表示脱分化，②表示再分化
B．若此图表示克隆羊的培育流程图，则①涉及核移植技术
C．若此图表示单克隆抗体的制备流程图，则①只可用灭活的病毒进行诱导
D．若此图表示试管牛的培育流程图，则②涉及对囊胚或原肠胚进行分割处理
17．华西牛是我国育种专家培育的具有完全自主知识产权的专门化肉牛新品种，打破了我国肉牛种源严重依赖进口的局面。科研人员在生产中采取体外受精、胚胎移植等技术手段实现了华西牛的快速繁育。下列叙述正确的是（ ）
A．新生犊牛的遗传性状由华西牛公牛及母牛决定，不受受体母牛的影响
B．可以采用孕激素对华西牛母牛进行超数排卵处理，以发挥其繁殖潜力
C．受体母牛需健康且具有正常的繁殖能力，胚胎移植前需要对其进行同期发情处理
D．胚胎移植后，囊胚进一步扩大，导致囊胚腔破裂的过程称为孵化
18．某科研小组采用PCR技术构建了红色荧光蛋白基因（dsred2）和α-淀粉酶基因（amy）的dsred2-amy融合基因，其过程如图所示，其中引物②和引物③中部分序列（深色区域）可互补配对。下列说法正确的是（ ）
A．利用PCR技术扩增基因时不需要解旋酶来打开DNA双链
B．不能在同一反应体系中进行dsred2基因和amy基因的扩增
C．dsred2基因和amy基因混合后只能得到一种类型的杂交链
D．杂交链延伸得到dsred2-amy融合基因的过程不需要加引物
三、解答题
19．孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。
(1)培养基的配制：MG降解菌富集培养基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等，再加 作为唯一碳源。培养基制备好后需立即灭菌，目的是 。
(2)MG高效降解菌株的分离和纯化：图中所示的分离纯化细菌的方法是 ，统计菌落数目时每隔24h统计一次，选取 的记录作为结果；活菌的实际数目比用该方法统计样品的菌落数目 （填“少”或“多”），原因是 。
(3)黑曲霉是一种丝状真菌，黑曲霉的PDA液体产酶培养基组成为：麸皮、豆粉饼、（NH4）2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4，培养时需要通气振荡。黑曲霉的代谢类型是 ；若要分离黑曲霉菌落，上述培养基中还需要添加 ，在培养基灭菌前需将培养基调至 （填“酸性”“中性”或“碱性”）。
(4)以大豆为主要原料，利用黑曲霉产生的蛋白酶可将原料中的蛋白质水解成 ，然后经淋洗、调制可得到酱油。
20．犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。回答下列问题：
(1)制备单克隆抗体依赖的生物技术有 （答出2点）。与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的B淋巴细胞 （填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；步骤①中，用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是 。
(2)经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是 。对杂交细胞等用特定的选择培养基，该培养基对 和 生长具有抑制作用，此次筛选得到杂交瘤细胞的特点是 ；对杂交瘤细胞进行 经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。
(3)体外培养杂交瘤细胞后从培养基中提取到抗CPV单克隆抗体，也可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，从 中获取抗CPV单克隆抗体。
(4)对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行 检测。
21．研究表明，羊乳中的β-乳球蛋白（BLG）是人体主要过敏源，图1为研究人员利用基因编辑技术敲除山羊中BLG基因，同时导入人乳铁蛋白（hLF）基因并获得转基因山羊的操作过程。图1中sgBLG/Cas9复合物中，sgBLG是能准确识别图1中母羊甲DNA特定序列的RNA，并引导Cas9蛋白对DNA进行切割。回答下列问题：
(1)上述操作过程中的目的基因是 。Cas9蛋白作用于目标DNA的 （填化学键）使其断裂。
(2)图中③应用到的技术为 。
(3)获取母羊丙的卵母细胞后需将其培养至 期后去核，去核的目的是 。⑤过程需将早期胚胎移植到母羊丁的子宫中，进行胚胎移植的优势是 。
(4)研究人员利用人乳铁蛋白基因的mRNA进行逆转录得到了cDNA，已知mRNA的序列为5′—UUACUUCCUG……（中间序列）…CAAGUUUCAU—3′。在目的基因两端加上相应的限制酶识别序列后利用PCR技术扩增，目的基因和图2中的质粒连接构建表达载体。请分别写出PCR扩增时所需两种DNA引物按5′到3′方向的前12个碱基序列 。
(5)筛选后得到的早期胚胎细胞中不能检测到该药用蛋白， （填“能”或“不能”）作为目的基因是否成功导入并表达的依据，理由是 。
22．反刍动物的瘤胃中含有分解纤维素的微生物，科研小组从瘤胃中分离培养分解纤维素的微生物的流程如图所示。回答下列问题：
(1)菌落特征可作为鉴定菌种的依据，观察分离到的菌落将菌落特征如 （答出一点）记录下来。
(2)将Ⅰ过程得到的菌液接种到充满N2的密闭试管中进行Ⅱ过程，培养一段时间后可在试管壁的薄层培养基上获得单菌落。培养瘤胃微生物时，除考虑营养物质外，还要考虑 、 和渗透压等条件。
(3)分离出某真菌的W基因可编码一种可高效降解纤维素的酶，已知图中W基因转录方向是从左向右，为使大肠杆菌产生该酶，以图中质粒为载体，进行转基因操作。不同限制酶的识别序列及切割位点如表所示。
限制酶 BamHI EcoRI MfeI KpnI HindⅢ
识别序列和切割位点 G↓GATTC G↓AATTC C↓AATTG GGTAC↓C A↓AGCTT
①W基因转录的模板链是 。利用PCR技术对W基因进行扩增时子链延伸的方向是 。
②启动子通常具有物种特异性，在质粒中插入W基因，其上游启动子应选择 的启动子。
③限制酶主要是从 中分离纯化出来的。应使用限制酶 切割图中质粒，使用限制酶 切割图中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。
四、实验题
23．小麦是我国重要的粮食作物之一，也是盐碱地开发利用的主要作物之一。研究表明，在盐碱条件下小麦的生长受到影响。为了研究小麦耐盐基因TaHKT1（用A基因表示）控制的耐盐性状，研究人员利用基因工程构建了A基因超量表达的转基因小麦。回答下列问题：
(1)可利用PCR获取和扩增A基因，PCR的原理是 ，扩增过程需要除具有引物外还应具有 （答出两点）等基本条件才能保证DNA复制顺利进行，其中加入引物的作用是 ；进行图1过程时应将温度控制为 左右。
(2)图2表示A基因与强启动子连接在一起得到的片段，据此推测构建该片段时，切割强启动子和A基因时均用到的限制酶为 ，并用 将二者连接在一起得到图示片段，再将该片段继续与图2中的Ti质粒相连，切割该片段和Ti质粒时选择BamHⅠ和SacⅠ进项双酶切，目的是 。
(3)该实验将目的基因导入小麦细胞的常用方法为 ，筛选出含有目的基因的小麦细胞后获得转基因小麦应用到的技术是 。
(4)为了检测A基因超量表达对小麦耐盐性状的影响，应如何设计实验？请写出实验思路。 。
河北省保定市六校联盟2024-2025学年高二下学期4月期中考试生物试题参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B B A D B C D C C A
题号 11 12 13 14 15 16 17 18
答案 A C D ABD BD ACD AC ABD
19．(1) 孔雀石绿 防止杂菌污染
(2) 稀释涂布平板法 菌落数目稳定时 多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
(3) 异养需氧型 琼脂 酸性
(4)小分子的肽和氨基酸
20．(1) 动物细胞培养、动物细胞融合 不需要 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多已免疫的B淋巴细胞
(2) 细胞融合是随机的 未融合的亲本细胞 融合的具有同种核的细胞 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 克隆化培养、抗体检测
(3)小鼠腹水
(4)抗原—抗体杂交
21．(1) 人乳铁蛋白（hLF）基因 磷酸二酯键
(2)显微操作去核
(3) MⅡ（中）（减数分裂Ⅱ中期/减数第二次分裂中期） 确保重构胚的核遗传物质来自供体细胞 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
(4)5′—GAATTCTTACTT—3′，5′—CTGCAGATGAAA—3′
(5) 不能 人乳铁蛋白（目的）基因只能在转基因动物的乳腺细胞内表达
22．(1)形状、大小、颜色等
(2) 温度 pH
(3) 乙链 5′→3′ 大肠杆菌 原核生物 MfeⅠ、HindⅢ EcoRⅠ、HindⅢ
23．(1) DNA半保留复制 DNA模板、（4种）脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、含Mg2+的缓冲液 使耐高温的DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 50℃
(2) HindⅢ DNA连接酶 防止目的基因和质粒的自身环化，防止目的基因和质粒的反向连接
(3) 农杆菌转化法 植物组织培养
(4)可用一定浓度的盐水浇灌转基因植株和非转基因植株，观察比较两种植株的生长状况
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