山东省大联考2024-2025学年高二下学期第二次月考生物试卷（有答案）
文档属性
| 名称 | 山东省大联考2024-2025学年高二下学期第二次月考生物试卷（有答案） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 912.8KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 通用版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2025-07-04 09:55:02 | ||
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文档简介
山东省大联考2024-2025学年高二下学期5月月考生物试题
一、单选题
1．布鲁氏杆菌是动物细胞内寄生菌，下列说法错误的是（ ）
A．布鲁氏杆菌利用宿主细胞的线粒体进行细胞呼吸
B．布鲁氏杆菌利用宿主细胞的脱氧核苷酸合成DNA
C．布鲁氏杆菌拟核区域存在蛋白质-DNA复合体
D．布鲁氏杆菌与宿主细胞的遗传物质均为DNA
2．霜降时节的低温环境会使苹果细胞中的淀粉在淀粉酶和淀粉磷酸化酶的催化下水解成葡萄糖。下列说法错误的是（ ）
A．葡萄糖含量增多导致细胞液浓度升高，能够减少细胞失水
B．温度降低引起细胞呼吸减弱，但两种淀粉水解酶活性升高
C．霜冻时细胞中结合水增多，自由水含量降低，抗寒能力增强
D．低温下葡萄糖含量增多能为细胞提供抗逆能量，维持基础代谢
3．糖类能与蛋白质结合形成糖蛋白、与脂质结合形成糖脂。最新研究发现糖类还能与细胞中的RNA结合形成glycoRNA。下列说法正确的是（ ）
A．glycoRNA彻底水解产生脱氧核糖、磷酸、含氮碱基
B．真核细胞中含RNA的细胞器有核糖体、线粒体、叶绿体
C．糖蛋白和糖脂又称糖被，具有识别、细胞间信息交流等作用
D．多糖、脂质、RNA的多样性都与其单体数和排列顺序有关
4．图是某动物细胞三种细胞器及其所含相关有机物的含量。下列说法错误的是（ ）
A．甲是细胞有氧呼吸的主要场所 B．乙可能含细胞液并参与调节细胞的内环境
C．丙是真核细胞和原核细胞共有的细胞器 D．用差速离心法可分离这三种细胞器
5．下列科学方法不能达到实验目的的是（ ）
A．不完全归纳法推出植物细胞都有细胞核的结论
B．放射性同位素标记法追踪分泌蛋白的运输途径
C．颜色反应法鉴定生物组织中的还原糖
D．显微注射法将目的基因导入大肠杆菌
6．图为细胞遗传信息库的部分结构，对图中各结构的叙述正确的是（ ）
A．①为核膜，含4层磷脂双分子层 B．②为分子自由进出细胞核的通道
C．③为内质网，可与细胞膜相连通 D．④为核糖体，其形成与核孔有关
7．高尔基体膜上的 RS 受体特异性识别并结合含有短肽序列 RS 的蛋白质，以出芽的形式形成囊泡，通过囊泡运输的方式将错误转运到高尔基体的该类蛋白运回内质网并释放。RS 受体与 RS 的结合能力随 pH 升高而减弱。下列说法错误的是（ ）
A．消化酶和抗体不属于该类蛋白
B．该类蛋白运回内质网的过程消耗 ATP
C．高尔基体内 RS 受体所在区域的 pH 比内质网的 pH 高
D．RS 功能的缺失可能会使高尔基体内该类蛋白的含量增加
8．家酿柿子醋的流程如下图所示，下列说法错误的是（ ）
A．加酶榨汁环节加入果胶酶，有利于提高柿子汁产量
B．①表示酒精发酵，①前无须对过滤得到的柿子汁杀菌
C．②表示醋酸发酵，由①到②需要提高温度并通入氧气
D．①和②参与发酵的主要微生物利用的底物均为葡萄糖
9．下列关于动物核移植技术的叙述，正确的是（ ）
A．供体细胞质中具有激活重构胚以及早期胚胎发育的必需因子
B．为受体细胞去核时可采用紫外线短时间照射使DNA变性的方法
C．可通过电刺激法使供体细胞进入去核的次级卵母细胞组成重构胚
D．供体核进入卵母细胞后形成重构胚，可以直接进行胚胎移植
10．从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列说法正确的是（ ）
A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．①比②时的细胞更需要进行传代处理
C．直接用离心法收集细胞进行传代培养
D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
11．降落PCR能有效扩增一段特异性较高的DNA片段。常规PCR的退火温度固定在55℃，而降落PCR的前10个循环中退火温度从65℃逐步降至55℃，后续25个循环保持在55℃。降落PCR的产物电泳结果显示单一明亮条带，而常规PCR出现多条非特异性条带。下列说法正确的是（ ）
A．降落PCR初始退火提高了引物与模板的特异性结合，减少非配对产物的积累
B．常规PCR的退火温度过低，导致DNA变性不彻底，非特异性产物被优先扩增
C．降落PCR的循环次数更多，DNA聚合酶活性更高，因此产物量更大
D．降落PCR的35个循环过程一共消耗引物的个数为235－2
12．粗提取 DNA 时，向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌，过滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤，在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出 DNA相对含量较高的白色丝状物的处理方式是（ ）
A．加入适量的木瓜蛋白酶
B．37～40℃的水浴箱中保温 10～15 分钟
C．加入与滤液体积相等的、体积分数为 95%的冷却的酒精
D．加入 NaCl 调节浓度至 2mol/L→过滤→调节滤液中 NaCl 浓度至 0．14mol/L
13．某实验室利用甲、乙两种烟草细胞进行体细胞杂交，旨在培育耐盐碱且高产的杂种植株。甲为普通烟草，具有卡那霉素抗性（KanR）但缺失脯氨酸合成基因（），无法在无脯氨酸培养基中生长；乙为野生烟草，具有潮霉素抗性（HygR），但缺失色氨酸合成基因（），无法在无色氨酸培养基中生长。实验流程如下：
①去除细胞壁，获得原生质体
②诱导甲、乙原生质体融合，形成杂种细胞
③将融合细胞接种于含卡那霉素和潮霉素的培养基中，筛选出抗性细胞团。
④将抗性细胞团转移至无脯氨酸、无色氨酸的培养基中培养，观察是否形成愈伤组织。
下列说法错误的是（ ）
A．仅通过步骤①②③即可筛选出目标杂种细胞
B．可用高Ca2+-高pH法诱导原生质体融合
C．③是选择性培养基，未融合的细胞无法生存
D．杂种细胞恢复了和的合成能力
14．生物技术是一把双刃剑，它的发展既可以造福人类，同时也伴随着潜在的风险和挑战。下列关于生物技术安全性及伦理问题的叙述，正确的是（ ）
A．世界各国达成协议仅允许少数国家保存和使用生物武器
B．转基因生物会导致食品安全问题，应禁止使用转基因技术
C．生殖性克隆技术有悖伦理，我国严禁一切用于人的克隆技术
D．设计试管婴儿所引发的主要伦理问题是不适合的胚胎处理问题
15．胰岛素的研发走过了：动物提取—化学合成—重组胰岛素—生产胰岛素类似物生产等历程。有关叙述错误的是（ ）
A．动物体内胰岛素由胰岛B细胞合成并胞吐出细胞
B．氨基酸是化学合成胰岛素的原料
C．用大肠杆菌和乳腺生物反应器生产胰岛素需相同的启动子
D．利用蛋白质工程可生产速效胰岛素等胰岛素类似物
16．疟疾可用氯喹治疗。疟原虫基因编码的蛋白，若第76位赖氨酸变为苏氨酸，则能获得对氯喹的抗性。某小组根据基因的序列，设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物，用于扩增目的片段，如图甲。为选出正确和有效的引物组合，以疟原虫DNA为模板进行PCR后电泳结果如图乙。为区分氯喹敏感患者和氯喹抗性患者，对现有的6份血样进行PCR后产物用限制酶消化，酶解产物的电泳结果如图丙。下列说法错误的是（ ）
A．应选F1-R1引物组合用于扩增目的片段
B．R2引物能与模板链上多个位点结合
C．切割产生的黏性末端为“5′AATT3′”
D．1号和6号血样来自氯喹抗性患者
二、多选题
17．DHA是一种高度不饱和脂肪酸链（具有疏水性），是脑细胞膜磷脂的组成成分。下列说法正确的是（ ）
A．DHA在细胞膜中呈现弯曲构象
B．脑细胞膜上的磷脂分子可以侧向运动
C．DHA位于两层磷脂分子之间
D．“—C═C—”增多会增强DHA的饱和性
18．LyLAP蛋白能水解膜蛋白，若降低吞噬细胞中该蛋白的表达会导致溶酶体膜上多肽过度聚集。下列说法错误的是（ ）
A．溶酶体也能合成LyLAP蛋白和膜蛋白
B．溶酶体中LyLAP蛋白可水解细胞膜蛋白
C．LyLAP蛋白影响吞噬细胞处理抗原的能力
D．溶酶体消化产生的废物通过囊泡运往细胞外
19．下图1表示单株菌株发酵鸡血的结果，图2表示混合菌株发酵鸡血的结果。结合微生物培养的相关知识，下列说法错误的是（ ）
A．空白对照组因未灭菌，所以产生了单株菌株发酵的效果
B．利用混合菌株发酵鸡血，效果一定优于利用单株菌株发酵
C．B4会抑制A7和B1混合后的效果，但B8可抵消该抑制效应
D．混合菌株通过竞争抑制了杂菌生长，减少了发酵中营养物质的消耗
20．我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系（如图）。下列说法正确的是（ ）
A．实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有组织特异性
B．实验过程中使用的培养基中含葡萄糖、血清等
C．类囊胚的外层细胞将来能发育为原肠胚的外胚层
D．可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育
三、实验题
21．朊蛋白（）是一种在生物体内广泛表达的含208个氨基酸的糖蛋白，其初生肽链如图1；锚定于细胞膜上，发生错误折叠时会成为朊病毒（），如图2。与不同，具有蛋白酶K抗性，朊病毒感染并增殖能引起严重的神经损伤，严重时导致死亡。
(1)在 （填场所）变为，判断理由是 。
(2)氨基酸形成初生肽链的过程分子量减少了 。
(3)据图分析，的 端对的传染性更重要。研究人员构建了移除CC1上全部正电荷的Met突变体，诱导其发生错误折叠后，注射到小鼠体内发现能引起严重的神经损伤，通过该结果 （填“能”或“不能”）说明CC1上的正电荷抑制了的错误折叠，原因是 。
(4)据图2，从结构上推测PrPSc具有蛋白酶K抗性的原因是 。为进一步了解OR区是否为蛋白酶K抗性区域，可制备删除OR区的转基因小鼠ΔOR并进行诱导实验（诱导PrPC发生错误折叠），若 ，则说明OR区是蛋白酶K抗性区域，反之则不是。
22．花椒酸常用于豆、乳糕点制品的防腐，花椒酸的提取方法能影响其抑菌效果。桑葚富含花椒酸，为探究不同提取方法对其抗菌作用的影响，研究人员将酵母菌、青霉、毛霉和黑曲霉接种至马铃薯葡萄糖琼脂培养基，在每个平板打4个直径相同的孔，每孔滴加等量桑葚提取物。实验设计和结果如图。
不同提取方法的提取液对实验菌种的抑制作用（mm）
菌种 A抑菌 B抑菌 C抑菌
酵母菌 1 8 12
青霉菌 0 6 10
毛霉 0 6 6
黑曲霉 1 7 9
(1)马铃薯为培养基提供 源，青霉、毛霉、黑曲霉的培养基pH应调至 。
(2)该实验的自变量是 ；实验中每种菌种应至少接种3个平板，原因是 。
(3)为更准确地体现C方法的抑菌作用，平板中D孔应滴加 ，C提取方法产生的抑菌作用大小的计算公式是 。
(4)桑葚提取物对 的抑制效果最好。B方法比A方法抑菌效果好，对此有同学做出假设：沸水通过破坏桑葚细胞结构，使其释放出更多细胞内抑菌物质。请设计实验对该同学的假设进行验证（写出实验思路即可）： 。
四、解答题
23．LDL是人体血浆蛋白，可将胆固醇转运到靶细胞利用，过程如图1，其中网格蛋白是细胞膜上的一种糖蛋白，在细胞形态的维持和稳定以及细胞间信号传导等方面发挥着重要作用。
(1)细胞膜的主要成分是 ，网格蛋白的作用与细胞内 （填细胞结构）的作用相似。
(2)胆固醇的作用是 （答出一条），含LDL受体的囊泡与细胞膜融合的结构基础是 。
(3)LDL-胆固醇进入细胞后由溶酶体水解产生游离的胆固醇，最终经内质网、高尔基体转运至细胞膜，为研究胆固醇的转运途径，研究者用放射性H标记胆固醇，分离细胞器并检测相关细胞器的放射性，结果如图2。该结果表明:胆固醇在细胞内转运的途径为 。
(4)胆固醇对膜功能有重要作用，研究者检测了不同胆固醇比例与脂质体膜微粘度之间的关系，以确定胆固醇对细胞膜流动性的影响。据图3分析胆固醇的作用是 。
样品号 脂质体膜脂成分
a 单纯磷脂组成
b 磷脂∶胆固醇＝9∶1
c 磷脂∶胆固醇＝8∶1
d 磷脂∶胆固醇＝7∶1
24．相对于向动物体内反复注射某种抗原再从血清中分离所需抗体的传统获取方法，杂交瘤细胞制备单克隆抗体（简称单抗）因其具有诸多优点备受推广。
(1)常用灭活的病毒来诱动物细胞融合，其作用机理是 ，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开细胞发生融合。
(2)在特殊的培养基上不能生存的细胞是 。
(3)竞争法可用来对专一抗体进行检验。其原理是待测单克隆抗体和一定量的酶标抗原（载有酶的抗原）与固相抗体竞争结合位点，酶标抗原与底物发生反应可出现颜色变化。具体过程如下图。
①图中设计只加酶标记抗原的组别的作用是 。
②图示结果说明待测单克隆抗体 （填“是”或“不是”）目标单克隆抗体，判断理由是 。
(4)克隆化后的阳性孔仅有少量目标杂交瘤细胞，因此还要继续 培养得到一定数量才可用于科研或大规模抗体生产。
25．Cre-LoxP系统在基因工程中具有重要应用，该系统由Cre酶和LoxP组成，Cre酶可以识别特异的LoxP并与之结合形成聚合体，该聚合体与另一个相同LoxP聚合体结合导致两LoxP之间的DNA序列被Cre酶切开，切口可重新连接，连接结果如图1；LoxP由两个反向序列和间隔序列组成，间隔序列决定LoxP的方向，某LoxP的序列如图2。
(1)Cre酶的作用相当于基因工程操作工具中的 ，由图1可知，Cre酶切割后的DNA片段连接结果主要取决于 。
(2)他米菌体内thiC基因编码的thiC蛋白是维生素B1合成的关键蛋白。但在维生素B1充足时，thiC肽链的长度会明显变短，研究发现是因为thiC基因发生倒位所致。为证明他米菌DNA中特定序列X调控了thiC基因的倒位，研究人员设计了同时含序列X和thiC基因的Cre-LoxP系统，用其确保高浓度维生素B1时序列X不起作用，结合图一信息请在下图中画出LoxP（用表示） 。该系统能证明序列X为调控序列的原理是 。
(3)thiC基因的倒位现象为其他生物体调整基因组编程以快速适应不同条件提供了思路。当细菌内铁含量升高时，FeoB基因表达增加，Fe-S蛋白过多，加速细胞死亡的过程，为此研究人员构建了Cre-LoxP系统导入细菌以实现高铁环境下FeoB基因的倒位。
①应构建图1中情况 （填“一”或“二”或“三”）的Cre-LoxP系统导入细菌，若FeoB基因一侧LoxP的间隔序列为5′GCATACAT3′，另一侧的间隔序列应为 。
②为达到让Fe-S肽链的长度明显变短的目的，两个LoxP的具体位置应设计为 。
(4)为使上述Cre-LoxP系统只在特定环境下起作用，应将 的启动子设计为诱导型启动子。
参考答案
1．A
2．B
3．B
4．B
5．D
6．C
7．C
8．D
9．B
10．D
11．A
12．A
13．A
14．D
15．C
16．D
17．ABC
18．AD
19．ABD
20．BD
21．(1) 内质网（或内质网、高尔基体） PrPSc是PrPC发生错误折叠形成的，折叠发生在内质网中
(2)4556
(3) 羧基 不能 未设置对正常PrPC诱导错误折叠后再注射的对照组，无法得出结论
(4) 发生错误折叠后肽键被隐藏在分子内部，蛋白酶K与其接触变难 ΔOR小鼠体内提取的PrPC被诱导后不具备蛋白酶K抗性
22．(1) 碳源和氮 酸性
(2) 不同提取方法的提取液和菌种的种类 避免偶然性，减少随机误差
(3) 100mL75％酒精 C抑菌圈—D抑菌圈/C抑菌圈—75％酒精抑菌圈
(4) 酵母菌 取10g桑葚平均分为甲、乙两组，甲组加入100mL常温灭菌水，乙组加入100mL沸水，维持各自温度一段时间后，通过显微镜观察两种提取后的桑葚残渣细胞结构，检测两种提取液中花楸酸含量
23．(1) 脂质（或磷脂）和蛋白质 细胞骨架
(2) 构成动物细胞膜的主要成分（或参与血液中脂质的运输） 两者的膜均由磷脂双分子层组成
(3)溶酶体—过氧化物酶体—内质网
(4)胆固醇在温度较低时（低于25℃时）可降低膜的微粘度，增加膜的流动性，而当温度较高时（高于25℃时），则可升高膜的微粘度，降低膜的流动性
24．(1)病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集
(2)未融合细胞、同型核融合的细胞
(3) 作为颜色参考组（作为对照） 是 与只加酶标抗原的组相比，显色浅
(4)克隆化
25．(1) 限制酶 LoxP的方向及位置
(2) Cre-LoxP系统含有的序列X在高浓度维生素B1的条件下不起作用，所以不能调控thiC基因发生倒位，故thiC蛋白的长度不变
(3) 三 5′TACATACG3′ 一个LoxP在FeoB基因编码区接近启动子的位置，另一个LoxP编码终止子后面（其他表述合理亦可）
(4)Cre基因
一、单选题
1．布鲁氏杆菌是动物细胞内寄生菌，下列说法错误的是（ ）
A．布鲁氏杆菌利用宿主细胞的线粒体进行细胞呼吸
B．布鲁氏杆菌利用宿主细胞的脱氧核苷酸合成DNA
C．布鲁氏杆菌拟核区域存在蛋白质-DNA复合体
D．布鲁氏杆菌与宿主细胞的遗传物质均为DNA
2．霜降时节的低温环境会使苹果细胞中的淀粉在淀粉酶和淀粉磷酸化酶的催化下水解成葡萄糖。下列说法错误的是（ ）
A．葡萄糖含量增多导致细胞液浓度升高，能够减少细胞失水
B．温度降低引起细胞呼吸减弱，但两种淀粉水解酶活性升高
C．霜冻时细胞中结合水增多，自由水含量降低，抗寒能力增强
D．低温下葡萄糖含量增多能为细胞提供抗逆能量，维持基础代谢
3．糖类能与蛋白质结合形成糖蛋白、与脂质结合形成糖脂。最新研究发现糖类还能与细胞中的RNA结合形成glycoRNA。下列说法正确的是（ ）
A．glycoRNA彻底水解产生脱氧核糖、磷酸、含氮碱基
B．真核细胞中含RNA的细胞器有核糖体、线粒体、叶绿体
C．糖蛋白和糖脂又称糖被，具有识别、细胞间信息交流等作用
D．多糖、脂质、RNA的多样性都与其单体数和排列顺序有关
4．图是某动物细胞三种细胞器及其所含相关有机物的含量。下列说法错误的是（ ）
A．甲是细胞有氧呼吸的主要场所 B．乙可能含细胞液并参与调节细胞的内环境
C．丙是真核细胞和原核细胞共有的细胞器 D．用差速离心法可分离这三种细胞器
5．下列科学方法不能达到实验目的的是（ ）
A．不完全归纳法推出植物细胞都有细胞核的结论
B．放射性同位素标记法追踪分泌蛋白的运输途径
C．颜色反应法鉴定生物组织中的还原糖
D．显微注射法将目的基因导入大肠杆菌
6．图为细胞遗传信息库的部分结构，对图中各结构的叙述正确的是（ ）
A．①为核膜，含4层磷脂双分子层 B．②为分子自由进出细胞核的通道
C．③为内质网，可与细胞膜相连通 D．④为核糖体，其形成与核孔有关
7．高尔基体膜上的 RS 受体特异性识别并结合含有短肽序列 RS 的蛋白质，以出芽的形式形成囊泡，通过囊泡运输的方式将错误转运到高尔基体的该类蛋白运回内质网并释放。RS 受体与 RS 的结合能力随 pH 升高而减弱。下列说法错误的是（ ）
A．消化酶和抗体不属于该类蛋白
B．该类蛋白运回内质网的过程消耗 ATP
C．高尔基体内 RS 受体所在区域的 pH 比内质网的 pH 高
D．RS 功能的缺失可能会使高尔基体内该类蛋白的含量增加
8．家酿柿子醋的流程如下图所示，下列说法错误的是（ ）
A．加酶榨汁环节加入果胶酶，有利于提高柿子汁产量
B．①表示酒精发酵，①前无须对过滤得到的柿子汁杀菌
C．②表示醋酸发酵，由①到②需要提高温度并通入氧气
D．①和②参与发酵的主要微生物利用的底物均为葡萄糖
9．下列关于动物核移植技术的叙述，正确的是（ ）
A．供体细胞质中具有激活重构胚以及早期胚胎发育的必需因子
B．为受体细胞去核时可采用紫外线短时间照射使DNA变性的方法
C．可通过电刺激法使供体细胞进入去核的次级卵母细胞组成重构胚
D．供体核进入卵母细胞后形成重构胚，可以直接进行胚胎移植
10．从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列说法正确的是（ ）
A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．①比②时的细胞更需要进行传代处理
C．直接用离心法收集细胞进行传代培养
D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
11．降落PCR能有效扩增一段特异性较高的DNA片段。常规PCR的退火温度固定在55℃，而降落PCR的前10个循环中退火温度从65℃逐步降至55℃，后续25个循环保持在55℃。降落PCR的产物电泳结果显示单一明亮条带，而常规PCR出现多条非特异性条带。下列说法正确的是（ ）
A．降落PCR初始退火提高了引物与模板的特异性结合，减少非配对产物的积累
B．常规PCR的退火温度过低，导致DNA变性不彻底，非特异性产物被优先扩增
C．降落PCR的循环次数更多，DNA聚合酶活性更高，因此产物量更大
D．降落PCR的35个循环过程一共消耗引物的个数为235－2
12．粗提取 DNA 时，向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌，过滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤，在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出 DNA相对含量较高的白色丝状物的处理方式是（ ）
A．加入适量的木瓜蛋白酶
B．37～40℃的水浴箱中保温 10～15 分钟
C．加入与滤液体积相等的、体积分数为 95%的冷却的酒精
D．加入 NaCl 调节浓度至 2mol/L→过滤→调节滤液中 NaCl 浓度至 0．14mol/L
13．某实验室利用甲、乙两种烟草细胞进行体细胞杂交，旨在培育耐盐碱且高产的杂种植株。甲为普通烟草，具有卡那霉素抗性（KanR）但缺失脯氨酸合成基因（），无法在无脯氨酸培养基中生长；乙为野生烟草，具有潮霉素抗性（HygR），但缺失色氨酸合成基因（），无法在无色氨酸培养基中生长。实验流程如下：
①去除细胞壁，获得原生质体
②诱导甲、乙原生质体融合，形成杂种细胞
③将融合细胞接种于含卡那霉素和潮霉素的培养基中，筛选出抗性细胞团。
④将抗性细胞团转移至无脯氨酸、无色氨酸的培养基中培养，观察是否形成愈伤组织。
下列说法错误的是（ ）
A．仅通过步骤①②③即可筛选出目标杂种细胞
B．可用高Ca2+-高pH法诱导原生质体融合
C．③是选择性培养基，未融合的细胞无法生存
D．杂种细胞恢复了和的合成能力
14．生物技术是一把双刃剑，它的发展既可以造福人类，同时也伴随着潜在的风险和挑战。下列关于生物技术安全性及伦理问题的叙述，正确的是（ ）
A．世界各国达成协议仅允许少数国家保存和使用生物武器
B．转基因生物会导致食品安全问题，应禁止使用转基因技术
C．生殖性克隆技术有悖伦理，我国严禁一切用于人的克隆技术
D．设计试管婴儿所引发的主要伦理问题是不适合的胚胎处理问题
15．胰岛素的研发走过了：动物提取—化学合成—重组胰岛素—生产胰岛素类似物生产等历程。有关叙述错误的是（ ）
A．动物体内胰岛素由胰岛B细胞合成并胞吐出细胞
B．氨基酸是化学合成胰岛素的原料
C．用大肠杆菌和乳腺生物反应器生产胰岛素需相同的启动子
D．利用蛋白质工程可生产速效胰岛素等胰岛素类似物
16．疟疾可用氯喹治疗。疟原虫基因编码的蛋白，若第76位赖氨酸变为苏氨酸，则能获得对氯喹的抗性。某小组根据基因的序列，设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物，用于扩增目的片段，如图甲。为选出正确和有效的引物组合，以疟原虫DNA为模板进行PCR后电泳结果如图乙。为区分氯喹敏感患者和氯喹抗性患者，对现有的6份血样进行PCR后产物用限制酶消化，酶解产物的电泳结果如图丙。下列说法错误的是（ ）
A．应选F1-R1引物组合用于扩增目的片段
B．R2引物能与模板链上多个位点结合
C．切割产生的黏性末端为“5′AATT3′”
D．1号和6号血样来自氯喹抗性患者
二、多选题
17．DHA是一种高度不饱和脂肪酸链（具有疏水性），是脑细胞膜磷脂的组成成分。下列说法正确的是（ ）
A．DHA在细胞膜中呈现弯曲构象
B．脑细胞膜上的磷脂分子可以侧向运动
C．DHA位于两层磷脂分子之间
D．“—C═C—”增多会增强DHA的饱和性
18．LyLAP蛋白能水解膜蛋白，若降低吞噬细胞中该蛋白的表达会导致溶酶体膜上多肽过度聚集。下列说法错误的是（ ）
A．溶酶体也能合成LyLAP蛋白和膜蛋白
B．溶酶体中LyLAP蛋白可水解细胞膜蛋白
C．LyLAP蛋白影响吞噬细胞处理抗原的能力
D．溶酶体消化产生的废物通过囊泡运往细胞外
19．下图1表示单株菌株发酵鸡血的结果，图2表示混合菌株发酵鸡血的结果。结合微生物培养的相关知识，下列说法错误的是（ ）
A．空白对照组因未灭菌，所以产生了单株菌株发酵的效果
B．利用混合菌株发酵鸡血，效果一定优于利用单株菌株发酵
C．B4会抑制A7和B1混合后的效果，但B8可抵消该抑制效应
D．混合菌株通过竞争抑制了杂菌生长，减少了发酵中营养物质的消耗
20．我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系（如图）。下列说法正确的是（ ）
A．实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有组织特异性
B．实验过程中使用的培养基中含葡萄糖、血清等
C．类囊胚的外层细胞将来能发育为原肠胚的外胚层
D．可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育
三、实验题
21．朊蛋白（）是一种在生物体内广泛表达的含208个氨基酸的糖蛋白，其初生肽链如图1；锚定于细胞膜上，发生错误折叠时会成为朊病毒（），如图2。与不同，具有蛋白酶K抗性，朊病毒感染并增殖能引起严重的神经损伤，严重时导致死亡。
(1)在 （填场所）变为，判断理由是 。
(2)氨基酸形成初生肽链的过程分子量减少了 。
(3)据图分析，的 端对的传染性更重要。研究人员构建了移除CC1上全部正电荷的Met突变体，诱导其发生错误折叠后，注射到小鼠体内发现能引起严重的神经损伤，通过该结果 （填“能”或“不能”）说明CC1上的正电荷抑制了的错误折叠，原因是 。
(4)据图2，从结构上推测PrPSc具有蛋白酶K抗性的原因是 。为进一步了解OR区是否为蛋白酶K抗性区域，可制备删除OR区的转基因小鼠ΔOR并进行诱导实验（诱导PrPC发生错误折叠），若 ，则说明OR区是蛋白酶K抗性区域，反之则不是。
22．花椒酸常用于豆、乳糕点制品的防腐，花椒酸的提取方法能影响其抑菌效果。桑葚富含花椒酸，为探究不同提取方法对其抗菌作用的影响，研究人员将酵母菌、青霉、毛霉和黑曲霉接种至马铃薯葡萄糖琼脂培养基，在每个平板打4个直径相同的孔，每孔滴加等量桑葚提取物。实验设计和结果如图。
不同提取方法的提取液对实验菌种的抑制作用（mm）
菌种 A抑菌 B抑菌 C抑菌
酵母菌 1 8 12
青霉菌 0 6 10
毛霉 0 6 6
黑曲霉 1 7 9
(1)马铃薯为培养基提供 源，青霉、毛霉、黑曲霉的培养基pH应调至 。
(2)该实验的自变量是 ；实验中每种菌种应至少接种3个平板，原因是 。
(3)为更准确地体现C方法的抑菌作用，平板中D孔应滴加 ，C提取方法产生的抑菌作用大小的计算公式是 。
(4)桑葚提取物对 的抑制效果最好。B方法比A方法抑菌效果好，对此有同学做出假设：沸水通过破坏桑葚细胞结构，使其释放出更多细胞内抑菌物质。请设计实验对该同学的假设进行验证（写出实验思路即可）： 。
四、解答题
23．LDL是人体血浆蛋白，可将胆固醇转运到靶细胞利用，过程如图1，其中网格蛋白是细胞膜上的一种糖蛋白，在细胞形态的维持和稳定以及细胞间信号传导等方面发挥着重要作用。
(1)细胞膜的主要成分是 ，网格蛋白的作用与细胞内 （填细胞结构）的作用相似。
(2)胆固醇的作用是 （答出一条），含LDL受体的囊泡与细胞膜融合的结构基础是 。
(3)LDL-胆固醇进入细胞后由溶酶体水解产生游离的胆固醇，最终经内质网、高尔基体转运至细胞膜，为研究胆固醇的转运途径，研究者用放射性H标记胆固醇，分离细胞器并检测相关细胞器的放射性，结果如图2。该结果表明:胆固醇在细胞内转运的途径为 。
(4)胆固醇对膜功能有重要作用，研究者检测了不同胆固醇比例与脂质体膜微粘度之间的关系，以确定胆固醇对细胞膜流动性的影响。据图3分析胆固醇的作用是 。
样品号 脂质体膜脂成分
a 单纯磷脂组成
b 磷脂∶胆固醇＝9∶1
c 磷脂∶胆固醇＝8∶1
d 磷脂∶胆固醇＝7∶1
24．相对于向动物体内反复注射某种抗原再从血清中分离所需抗体的传统获取方法，杂交瘤细胞制备单克隆抗体（简称单抗）因其具有诸多优点备受推广。
(1)常用灭活的病毒来诱动物细胞融合，其作用机理是 ，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开细胞发生融合。
(2)在特殊的培养基上不能生存的细胞是 。
(3)竞争法可用来对专一抗体进行检验。其原理是待测单克隆抗体和一定量的酶标抗原（载有酶的抗原）与固相抗体竞争结合位点，酶标抗原与底物发生反应可出现颜色变化。具体过程如下图。
①图中设计只加酶标记抗原的组别的作用是 。
②图示结果说明待测单克隆抗体 （填“是”或“不是”）目标单克隆抗体，判断理由是 。
(4)克隆化后的阳性孔仅有少量目标杂交瘤细胞，因此还要继续 培养得到一定数量才可用于科研或大规模抗体生产。
25．Cre-LoxP系统在基因工程中具有重要应用，该系统由Cre酶和LoxP组成，Cre酶可以识别特异的LoxP并与之结合形成聚合体，该聚合体与另一个相同LoxP聚合体结合导致两LoxP之间的DNA序列被Cre酶切开，切口可重新连接，连接结果如图1；LoxP由两个反向序列和间隔序列组成，间隔序列决定LoxP的方向，某LoxP的序列如图2。
(1)Cre酶的作用相当于基因工程操作工具中的 ，由图1可知，Cre酶切割后的DNA片段连接结果主要取决于 。
(2)他米菌体内thiC基因编码的thiC蛋白是维生素B1合成的关键蛋白。但在维生素B1充足时，thiC肽链的长度会明显变短，研究发现是因为thiC基因发生倒位所致。为证明他米菌DNA中特定序列X调控了thiC基因的倒位，研究人员设计了同时含序列X和thiC基因的Cre-LoxP系统，用其确保高浓度维生素B1时序列X不起作用，结合图一信息请在下图中画出LoxP（用表示） 。该系统能证明序列X为调控序列的原理是 。
(3)thiC基因的倒位现象为其他生物体调整基因组编程以快速适应不同条件提供了思路。当细菌内铁含量升高时，FeoB基因表达增加，Fe-S蛋白过多，加速细胞死亡的过程，为此研究人员构建了Cre-LoxP系统导入细菌以实现高铁环境下FeoB基因的倒位。
①应构建图1中情况 （填“一”或“二”或“三”）的Cre-LoxP系统导入细菌，若FeoB基因一侧LoxP的间隔序列为5′GCATACAT3′，另一侧的间隔序列应为 。
②为达到让Fe-S肽链的长度明显变短的目的，两个LoxP的具体位置应设计为 。
(4)为使上述Cre-LoxP系统只在特定环境下起作用，应将 的启动子设计为诱导型启动子。
参考答案
1．A
2．B
3．B
4．B
5．D
6．C
7．C
8．D
9．B
10．D
11．A
12．A
13．A
14．D
15．C
16．D
17．ABC
18．AD
19．ABD
20．BD
21．(1) 内质网（或内质网、高尔基体） PrPSc是PrPC发生错误折叠形成的，折叠发生在内质网中
(2)4556
(3) 羧基 不能 未设置对正常PrPC诱导错误折叠后再注射的对照组，无法得出结论
(4) 发生错误折叠后肽键被隐藏在分子内部，蛋白酶K与其接触变难 ΔOR小鼠体内提取的PrPC被诱导后不具备蛋白酶K抗性
22．(1) 碳源和氮 酸性
(2) 不同提取方法的提取液和菌种的种类 避免偶然性，减少随机误差
(3) 100mL75％酒精 C抑菌圈—D抑菌圈/C抑菌圈—75％酒精抑菌圈
(4) 酵母菌 取10g桑葚平均分为甲、乙两组，甲组加入100mL常温灭菌水，乙组加入100mL沸水，维持各自温度一段时间后，通过显微镜观察两种提取后的桑葚残渣细胞结构，检测两种提取液中花楸酸含量
23．(1) 脂质（或磷脂）和蛋白质 细胞骨架
(2) 构成动物细胞膜的主要成分（或参与血液中脂质的运输） 两者的膜均由磷脂双分子层组成
(3)溶酶体—过氧化物酶体—内质网
(4)胆固醇在温度较低时（低于25℃时）可降低膜的微粘度，增加膜的流动性，而当温度较高时（高于25℃时），则可升高膜的微粘度，降低膜的流动性
24．(1)病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集
(2)未融合细胞、同型核融合的细胞
(3) 作为颜色参考组（作为对照） 是 与只加酶标抗原的组相比，显色浅
(4)克隆化
25．(1) 限制酶 LoxP的方向及位置
(2) Cre-LoxP系统含有的序列X在高浓度维生素B1的条件下不起作用，所以不能调控thiC基因发生倒位，故thiC蛋白的长度不变
(3) 三 5′TACATACG3′ 一个LoxP在FeoB基因编码区接近启动子的位置，另一个LoxP编码终止子后面（其他表述合理亦可）
(4)Cre基因
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