15.双脱氧测序法是一种用于确定DNA序列的经典方法,其原理是在DNA复制过程中引
入特殊的化学物质ddNTP来中断DNA链的延伸。ddNTP与dNTP均能遵循碱基互
补配对原则,结合在延伸的子链上,当ddNTP结合在子链上时,DNA合成终止。PCR
产物变性后电泳检测,可确定序列信息,通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段
序列,结果如图所示。下列叙述错误的是
碱基
0
5
(A/G/C/T)
H0--0
H
H
X在ddNTP中表示H
2
X在dNTP中表示OH
H
dNTP
dNTP
dNTP
dNTP
dNTP
dNTP
dNTPdNTP
+
+
+
+
+
+
ddATP ddCTP ddGTP ddTTP
ddATP ddCTP ddGTP ddTTP
A
C
G
T
A
C
G
T
电
二
三
二
方
对照
患者
A.电泳时产物的片段越小,迁移速率越快
B.患者该段序列中某位点的碱基T突变为C
C.5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列
D.ddNTP导致DNA合成终止的原因是3'端无一OH,无法形成磷酸二酯键
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第Ⅱ卷非选择题
本卷共5小题,共60分
16.(10分)
牛支原体能引起牛肺炎、关节炎等多种疾病危害养殖业。VsX蛋白是牛支原体表面
的一种脂蛋白,在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗
体进行相关研究。
回答下列问题:
(1)将纯化VspX蛋白作为
注射到小鼠体内。
(2)在融合前三天,对实验小鼠加强免疫一次,目的是
。
然后取小鼠的B
淋巴细胞用
(填化学试剂)诱导与骨髓瘤细胞融合,筛选得到杂交瘤细胞。
(3)一段时间后,将杂交瘤细胞接种到96孔培养板上进行抗体检测,检测原理如图。
酶促白色蓝色
反应
待测
酶标
底物
VspX
样本
抗体
洗脱
洗脱
固相载体
①在检测时,需将待测样本即96孔板培养槽中的
(填“细胞”或“上清液”),
加入到含VspX蛋白的固相载体的小孔中。
②加入酶标抗体一段时间后,需要用洗涤剂将未与
结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后,蓝色的深浅可代表
(4)将上述检测呈阳性的杂交瘤细胞制成细胞悬液,培养瓶中除添加一般营养物质
外,还需加入
等天然成分,并置于
(填仪器)培养。
17.(11分)
某城市景观水域存在流动性弱、污染程度大等问题。某科研团队研发了一种复
合型生态浮床来改善景观水体,复合型生态浮床上有鸢尾等植物,水体中添加鱼类、
贝类等滤食性水生动物,同时设置人工生物挂膜,挂膜内含有人工培养基、浮游生
物和细菌等,如图1所示。
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