江苏省扬州市宝应县2015-2016学年下学期高二（下）期中生物试卷（解析版）
文档属性
| 名称 | 江苏省扬州市宝应县2015-2016学年下学期高二（下）期中生物试卷（解析版） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 1.2MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 苏教版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2016-07-15 20:27:14 | ||
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文档简介
2015-2016学年江苏省扬州市宝应县高二（下）期中生物试卷
一、单项选择题（每小题只有一个正确选项．每题2分，共40分）
1．基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是（ ）
A．限制酶只用于切割获取目的基因
B．载体与目的基因必须用同一种限制酶处理
C．基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶
D．带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测
2．如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ）
A．①②③④
B．①②④③
C．①④②③
D．①④③②
3．科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．在培育转基因番茄的过程中，下列操作不合理的是（ ）
A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
B．将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体
C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
D．在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞
4．下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（ ）
A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B．蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
5．在工业化大量培养植物试管苗的过程中，一般进行如下操作，则正确的操作顺序是（ ）
①诱导形成芽和根
②取合适外植体
③诱导形成愈伤组织
④对外植体进行消毒．
A．②①③④
B．②④③①
C．②③④①
D．②①④③
6．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（ ）
A．消毒灭菌
B．适宜的温度
C．充足的光照
D．适宜的养料和激素
7．利用植物组织培养技术从红豆杉细胞中提取抗癌药物紫杉醇不需要进行的是（ ）
A．选取合适的外植体并要进行快速消毒
B．培养基中加入适量的蔗糖提供营养并维持渗透压
C．控制植物激素的种类和含量诱导产生愈伤组织
D．选择适当的分化培养基培育红豆杉幼苗
8．如图为白菜-甘蓝的培育流程，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①用到的酶是胰蛋白酶和果胶酶，目的是除去细胞壁便于细胞融合
B．过程②常用离心、振动、电刺激和化学诱导剂聚乙二醇
C．A和B细胞融合完成的标志是再生出新的细胞壁
D．过程④形成的细胞的全能性提高
9．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是（ ）
A．利用花药离体培养得到单倍体植株
B．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株
C．制造神奇的人工种子
D．利用细胞工程培育“番茄一马铃薯”杂种植株
10．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ）
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传到10代左右便会出现生长停滞
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
11．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞．
A．①③⑤
B．①②③④
C．②④
D．②③
12．下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
D．动物细胞培养和植物组织培养过程中不都用到胰蛋白酶
13．下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染
B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C．大规模生产食品添加剂、香料等
D．用于检测有毒物质
14．下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是（ ）
A．精子形成过程中，高尔基体发育为原生质滴
B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D．受精的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
15．每一物种都可保持本物种染色体数目的稳定，在动物受精过程中，有一系列的机制保证一个精子与一个卵细胞结合，而防止多个精子与卵细胞结合，从而保证本物种染色体数目的稳定．下列哪些活动可防止多个精子与卵细胞结合（ ）
①精子变形，细胞核物质集中在精子头部 ②精子获能 ③透明带反应 ④顶体反应 ⑤卵细胞膜反应．
A．①②
B．①③
C．③⑤
D．④⑤
16．下列有关早期胚胎发育和体外受精技术的叙述，正确的是（ ）
A．囊胚时期细胞的分化是由于遗传物质突变引起的
B．采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵
C．卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而不断增大
D．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
17．如图所示，下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质山羊的叙述，错误的是（ ）
A．良种公山羊采集的精子在培养液中获能后才能具备受精能力
B．人工授精后的受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎
D．胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
18．下列关于生物技术安全性和伦理问题的叙述，错误的是（ ）
A．设计试管婴儿进行遗传病基因检测，但单纯选择胎儿性别是违法的
B．克隆人可冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念
C．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
D．利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人是合乎道德规范的
19．下列关于生态工程的叙述中，错误的是（ ）
A．生态工程是无消耗、多效益的工程
B．生态工程追求经济和生态的双赢
C．生态工程是生态学和工程学的结合
D．应用物质循环再生的原理
20．为了解决人类生存和环境保护问题，实现可持续发展，当下措施及途径尚不可取的是（ ）
A．发展生态农业，改变传统的生产方式
B．利用现代生物技术，培育高产农作物新品种
C．大力发展“石油农业”，实现农业生产的高效益
D．城市生活垃圾要做到分类回收处理，实现废物资源化利用
二、多项选择题（本部分包括5题，每题3分，共计15分．每题有不止一个选项符合题意．每题全选对者得3分，少选者1分，选错者不给分．）
21．如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是（ ）
A．A→B过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料，并加入一种引物
B．A→B过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶
C．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞
D．B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
22．下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（ ）
A．培养基中添加蔗糖作为能源物质
B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同
23．人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞．如图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程，下列有关叙述正确的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞具有分裂和分化能力
B．过程①通常用胰蛋白酶处理
C．图中的培养液为液体培养基
D．细胞在培养瓶中培养一段时间会出现接触抑制
24．梅花鹿胚胎移植试验的主要流程：①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④
→⑤胚胎移植→子代梅花鹿．下列相关叙述正确的是（ ）
A．①过程需要是注射有关激素，目的是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
B．③过程是以哺乳动物早期胚胎在输卵管或子宫中处于游离状态为前提
C．④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚
D．⑤过程成功的关键是移植的胚胎能与受体子宫内原有胚胎和谐共存
25．如图表示某人工设计的生态系统，下列相关叙述正确的是（ ）
A．该生态系统经过能量的循环利用，提高了系统总能量的传递效率
B．通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用，有效地促进了系统中物质的循环利用
C．该系统的设计追求经济和生态的双赢
D．该生态系统遵循了“物质循环再生”原理
三、非选择题（本部分包括8题，共计65分．）
26．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种．
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，从陆地棉和拟南芥的_________中获取酶D基因和转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切点如图所示．则用_________和_________酶处理两个基因后，可得到_________端与_________端（填图中字母）相连的融合基因．
（2）将上述融合基因插入如图所示Ti质粒的T-DNA中，构建_________并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含_________的固体培养基上筛选培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液．
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_________．
（4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株．用_________法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功转录．
27．p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”是我国首创的基因治疗药物之一，是世界首个获准上市的基因治疗药物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．请回答下列问题：
（1）将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，需要用到的工具酶有_________．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有_________．
（2）限制酶能将特定序列的核苷酸之间的_________键切开，形成_________末端．
（3）p53基因应插入载体的_________之间，以便于基因的表达．
（4）p53基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是_________．如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图，扩增过程需要_________种引物．经3次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为_________．
28．野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能使用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．据图分析回答问题．
（1）①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括_________．
（2）②过程需要用聚乙二醇（PEG），其目的是_________．
（3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程_________
愈伤组织幼苗
．由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性，这是_________的表现．
（4）一般在培养基上培养24-48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁．可以取样，通过_________实验来鉴别细胞壁是否已经再生．
（5）请说明运用此植物体细胞杂交法的最大的好处：_________．
29．如图是单克隆抗体制备过程示意图．
（1）图中B淋巴细胞的特点是_________，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是_________．
（2）用特定的选择培养基筛选符合要求的细胞时，在该培养基上_________细胞和_________细胞会死亡，_________细胞能生长；抗体检测时，符合要求的细胞是①②③的_________（填序号），经过抗体检测以后，继续培养的细胞具有的特点是_________．
（3）在奶牛饲养的过程中，过量使用庆大霉素会导致牛奶中药物残留过多，人长期食用这样的牛奶会影响身体健康．利用抗庆大霉素的单克隆抗体，可以检测牛奶中庆大霉素的含量．
①这种检测方法依据的原理是_________．
②这种检测方法具有_________优点．
30．科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞（GiPS细胞）．如图是利用GiPS细胞对镰刀形细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程：
请据图回答：
（1）过程①中，在培养液中加入胰蛋白酶使上皮组织细胞彼此分散，若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的_________不发生变化．
（2）科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理，促使已经_________的成纤维细胞“重新编程”产生GiPS细胞，这些GiPS细胞与囊胚中的_________细胞性质相同．
（3）过程③中，将重组质粒导入GiPS细胞所用的方法是_________．
（4）若利用GiPS细胞诱导分化形成_________，再经_________技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
（5）GiPS细胞经体外诱导分化，可以直接培育出人造组织器官．图中④过程可在培养液中添加_________因子使其定向分化成造血干细胞．培育出的骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是_________．
31．图1为动物的克隆研究过程，其中Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a～h代表有关结构或个体．
（1）Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ过程证明了_________．
（2）过程Ⅴ取出的细胞f是_________，它在功能上的特点是_________，
（3）动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加_________．
（4）Ⅳ过程用的技术是_________．若d为囊胚时期，可以取_________对克隆早期胚胎进行性别鉴定．
（5）若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像提供细胞核的绵羊吗？_________．原因是_________．
32．为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答有关问题：
（1）在实际操作过程中为了使B牛超数排卵，需要注射_________，其产生的卵母细胞要在体外培养至_________（时期）才具备体外受精能力．
（2）对重构卵发育成的囊胚采用_________技术，可获得更多基因型完全相同的F牛，该技术具体操作时的注意要点是_________．
（3）方法Ⅰ中，若为体内受精则从供体母牛B体内获取胚胎的方法称为_________；胚胎移植前对B牛和D牛要进行_________处理，保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致．
（4）培育克隆牛F时使用的不同于试管牛E的生物技术是_________，试管牛E的生殖方式属于_________．
33．我国珠江三角洲地区，为充分利用土地，创造了一种挖深鱼塘、垫高基田、塘基植桑、塘内养鱼的高效人工生态系统--桑基鱼塘，如图所示．据图回答有关问题：
（1）生态工程遵循的基本原理有_________、_________、_________、整体性原理和系统学与工程学原理等．
（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程实现了_________．
（3）蚕沙是蚕食桑叶后排泄出来的粪便，蚕沙富含粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养物质，是上等的肥料，也是猪、鱼、羊的理想饲料．某种鱼专以蚕沙为食，假设某一时间段蚕从上一个营养级固定的能量为1.5×105kJ，那么这部分能量最多有_________kJ被这种鱼所同化．
（4）该生态系统向外输出的物质主要有_________．
（5）该生态系统与一般的自然生态系统相比较，_________稳定性较低，所以需要人们不断输入物质与能量．
（6）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有_________（至少答2点）．
2015-2016学年江苏省扬州市宝应县高二（下）期中生物试卷
参考答案与试题解析
一、单项选择题（每小题只有一个正确选项．每题2分，共40分）0
1．基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是（ ）
A．限制酶只用于切割获取目的基因
B．载体与目的基因必须用同一种限制酶处理
C．基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶
D．带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测
【考点】基因工程的原理及技术．
【分析】1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
2、用同一种限制酶切割目的基因和运载体，才能产生相同的黏性末端，使得DNA分子的碱基重新实现互补配对．
【解答】解：A、限制酶用于切割获取目的基因和运载体，A错误；
B、一般用同一种限制酶处理载体与目的基因，形成相同的粘性末端，B正确；
C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶，C正确；
D、采用DNA分子杂交的方法检测带有目的基因的载体是否进入受体细胞，D正确．
故选：A．
【点评】本题考查基因工程中的工具，意在考查学生的识记和理解能力，属于中档题．
2．如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ）
A．①②③④
B．①②④③
C．①④②③
D．①④③②
【考点】基因工程的原理及技术；DNA分子的复制．
【分析】分析图解：图①双链DNA分子中间出现了黏性末端，图②两个具有黏性末端的DNA片段连接成一个完整的DNA分子，图③中DNA分子的双链解开，图④是以解开的单链DNA作为模板形成子链的过程．
【解答】解：限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端，因此作用于①；DNA聚合酶用于DNA分子的复制，能在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来，因此作用于④；DNA连接酶能在具有相同碱基末端的两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，因此作用于②；解旋酶能够将DNA分子的双螺旋解开，故作用于③．
故选C．
【点评】本题通过作用效果图解考查了限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶的作用，意在考查考生的识图能力、区分能力、识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．
3．科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．在培育转基因番茄的过程中，下列操作不合理的是（ ）
A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
B．将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体
C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
D．在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞
【考点】基因工程的原理及技术．
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
【解答】解：A、获取目的基因的方法包括：从基因文库中获取、采用PCR技术体外扩增、人工化学合成（如逆转录法），A正确；
B、在培育转基因番茄的过程中，需要将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体，再导入受体细胞，B正确；
C、将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，C正确；
D、利用标记基因来自筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞，由于该基因在受体番茄细胞中还没有表达，因此不能在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞，D错误．
故选：D．
【点评】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．
4．下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（ ）
A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B．蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
【考点】蛋白质工程．
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质．
【解答】解：A、由概念可知：蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因分子进行操作，改造基因即改造蛋白质，而且可以遗传，故A错误；
B、由概念可知：蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，故B正确；
C、对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，故C错误；
D、蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，故D错误．
故选：B．
【点评】题考查蛋白质工程的相关知识，蛋白质工程的原理（实质）是：改造基因．蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；（2）进行基因修饰或基因合成；（3）最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成．因此蛋白质工程生产合成的蛋白质是自然界中不存在的新型蛋白质分子．
5．在工业化大量培养植物试管苗的过程中，一般进行如下操作，则正确的操作顺序是（ ）
①诱导形成芽和根
②取合适外植体
③诱导形成愈伤组织
④对外植体进行消毒．
A．②①③④
B．②④③①
C．②③④①
D．②①④③
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；植物的组织培养．
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，一般经诱导先出现芽，进一步分化形成根．
【解答】解：工业化大量培养植物试管苗的过程为植物组织培养过程，其操作顺序是取离体的器官、组织、细胞（外植体）→对外植体进行消毒→诱导形成愈伤组织→诱导形成芽和根→移栽成活．
故选：B．
【点评】本题考查植物组织培养的条件及过程，要求考生识记植物组织培养的过程，能理论联系实际，判断工业化大量培养植物试管苗的具体过程，再选出正确的答案，属于考纲识记层次的考查．
6．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（ ）
A．消毒灭菌
B．适宜的温度
C．充足的光照
D．适宜的养料和激素
【考点】植物培养的条件及过程．
【分析】解答该题需从如下三个方面入手分析：
①由离体的植物器官、组织或细胞形成愈伤组织的过程是植物组织培养过程中的一个阶段．该阶段要进行细胞的增殖和细胞的脱分化，这就必须要有适宜的养料和激素，必须要有适宜的温度，这样，才能保证细胞进行正常的新陈代谢．
②由离体的植物器官、组织形成愈伤组织必须是在无菌条件下，只有在这样的条件下，才能保证培养产生出的细胞是正常细胞，否则培养基内将长出许多霉菌，与离体细胞争夺营养与生存空间，形成不愈伤组织．
③由于此阶段形成的是愈伤组织，并没有形成具有根、茎、叶的植物体，因此不需要光照．
【解答】解：A、可以给植物组织或器官更好的生长环境，也防止种间竞争所以是对的，A正确；
B、该阶段要进行细胞的增殖和细胞的脱分化，这就必须要有适宜的养料和激素，必须要有适宜的温度，这样，才能保证细胞进行正常的新陈代谢，B正确；
C、当植物还在脱分化形成愈伤组织的时候不能进行光合作用，所以自然也就不需要光照，如果有光就不形成愈伤组织，而是形成维管组织，C错误；
D、生长激素是动物激素，应是生长素和细胞分裂素，D正确．
故选：C．
【点评】此题主要考查学分对植物组织培养过程的相关知识理解和记忆，该题较易．
7．利用植物组织培养技术从红豆杉细胞中提取抗癌药物紫杉醇不需要进行的是（ ）
A．选取合适的外植体并要进行快速消毒
B．培养基中加入适量的蔗糖提供营养并维持渗透压
C．控制植物激素的种类和含量诱导产生愈伤组织
D．选择适当的分化培养基培育红豆杉幼苗
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；克隆技术．
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株．
【解答】解：A、植物组织培养技术需要对外植体消毒，并且要选生长旺盛的材料，A正确；
B、植物组织培养的培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压，B正确；
C、植物激素的生长素和细胞分裂素比例为1，有利于愈伤组织的形成，C正确；
D、从红豆杉细胞中提取抗癌药物紫杉醇，只需要培养细胞，不需要分化培养基，D错误．
故选：D．
【点评】本题考查的是植物组织培养技术，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．
8．如图为白菜-甘蓝的培育流程，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①用到的酶是胰蛋白酶和果胶酶，目的是除去细胞壁便于细胞融合
B．过程②常用离心、振动、电刺激和化学诱导剂聚乙二醇
C．A和B细胞融合完成的标志是再生出新的细胞壁
D．过程④形成的细胞的全能性提高
【考点】植物体细胞杂交的过程．
【分析】分析题图：①植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；②原生质体融合所用的方法有物理法和化学法．物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；③再生细胞壁形成杂种细胞；④脱分化形成愈伤组织，⑤再分化形成“白菜一甘蓝”幼苗．
【解答】解：A、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶，A错误；
B、原生质体融合所用的方法有物理法和化学法．物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇，B正确；
C、A和B细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁，C正确；
D、过程④是脱分化，形成的细胞是愈伤组织（愈伤组织是为分化的细胞，全能性较高），由分化的细胞形成愈伤组织，全能性提高，D正确．
故选：A．
【点评】本题考查了植物体细胞杂交过程，意在考查考生对于相关知识点的掌握和运用，主要考查考生的识记和理解能力，难度中等．
9．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是（ ）
A．利用花药离体培养得到单倍体植株
B．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株
C．制造神奇的人工种子
D．利用细胞工程培育“番茄一马铃薯”杂种植株
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；克隆技术．
【分析】植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）．植物组织培养技术具有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产．
【解答】解：A、由配子直接发育的个体称为单倍体，花药中的花粉是植物的配子，所以采用花药离体培养得到单倍体植株，A正确；
B、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于自然生长过程，该过程中没有采用植物组织培养技术，B错误；
C、人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，可见该过程需要采用植物组织培养技术，C正确；
D、运用植物细胞工程的植物体细胞杂交技术可以培育出“番茄-马铃薯”杂种植株，D正确．
故选：B．
【点评】本题考查植物组织培养及应用、多倍体育种、植物体细胞杂交，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力．
10．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ）
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传到10代左右便会出现生长停滞
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
【考点】动物细胞与组织培养过程．
【分析】动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖．
细胞株：原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株．
细胞系：细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系．
【解答】解：A、动物细胞培养液的成分含葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，A正确；
B、原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，B正确；
C、动物细胞培养中，少数细胞能存活传到40～50代，传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，C错误；
D、动物细胞培养的原理即是细胞增殖，可获得大量自身健康细胞，用于检测有毒物质等，D正确．
故选：C．
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，难度不大．
11．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞．
A．①③⑤
B．①②③④
C．②④
D．②③
【考点】单克隆抗体的制备过程．
【分析】在制备单克隆抗体的过程中经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞③筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
【解答】解：特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大量增殖、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此其他的细胞都不能在此培养基上生存．在这种培养基上不能存活和繁殖的细胞有①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞．
故选：B．
【点评】本题考查了单克隆抗体制备实验，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；解题的关键是掌握单克隆抗体的制备过程及筛选过程．
12．下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
D．动物细胞培养和植物组织培养过程中不都用到胰蛋白酶
【考点】动物细胞与组织培养过程；植物组织培养的概念及原理．
【分析】植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基成分
营养物质（蔗糖）、植物激素等
营养物质（葡萄糖）、动物血清等
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无毒苗等
获得细胞或细胞产物
分散处理
无
有
脱分化
有
无
【解答】解：A、动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同，如前者含有血清、血浆，后者含有生长素和细胞分裂素，A正确；
B、动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，B错误；
C、动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖（几乎不含病毒）培养可用于植物脱除病毒，C正确；
D、动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理，但植物组织培养过程不需要胰蛋白酶处理，D正确．
故选：B．
【点评】本题考查动物细胞与组织培养过程、植物组织培养的条件及过程，要求考生识记动物细胞培养和植物组织培养的相关知识，能对两者进行比较和区分，再对选项作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查．
13．下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染
B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C．大规模生产食品添加剂、香料等
D．用于检测有毒物质
【考点】动物细胞工程的常用技术．
【专题】正推法；克隆技术．
【分析】动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等．其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础．
【解答】解：A、生产许多有价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产，是动物细胞工程的应用，A正确；
B、用灼伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞，是动物细胞工程的应用，B正确；
C、大规模生产食品添加剂、香料等是植物细胞工程的应用，C错误；
D、检测有毒物质，判断某种物质的毒性，属于动物细胞工程的应用，D正确．
故选：C．
【点评】本题难度不大，考查动物细胞工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力．
14．下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是（ ）
A．精子形成过程中，高尔基体发育为原生质滴
B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D．受精的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
【考点】动物胚胎发育的概念．
【专题】正推法；胚胎工程．
【分析】受精包括受精前的准备阶段和受精阶段：准备阶段1-精子获能，刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力；准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力．
卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中．
受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）
【解答】解：A、精子形成过程中，高尔基体发育为头部的顶体，内含顶体酶，A错误；
B、排卵就是卵细胞从卵泡中排出，可能是初级卵母细胞或次级卵母细胞，B错误；
C、卵细胞形成时的分裂过程在卵巢和输卵管中完成，C错误；
D、在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，D正确．
故选：D．
【点评】本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力，试题难度一般．
15．每一物种都可保持本物种染色体数目的稳定，在动物受精过程中，有一系列的机制保证一个精子与一个卵细胞结合，而防止多个精子与卵细胞结合，从而保证本物种染色体数目的稳定．下列哪些活动可防止多个精子与卵细胞结合（ ）
①精子变形，细胞核物质集中在精子头部 ②精子获能 ③透明带反应 ④顶体反应 ⑤卵细胞膜反应．
A．①②
B．①③
C．③⑤
D．④⑤
【考点】动物胚胎发育的概念．
【分析】在受精作用过程中，精子头部的顶体首先释放顶体酶，发生顶体反应；然后精子穿越放射冠和透明带，此时透明带发生透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障；接着精子进入卵黄膜，此时会发生卵黄膜封闭作用；此时卵细胞才真正完成减数分裂，并释放第二极体；精子的细胞核和卵细胞的细胞核分别形成雄原核和雌原核，即雌、雄原核的形成；最后核膜消失，雌、雄原核融合，标志着受精作用的完成．
【解答】解：①精子变形，细胞核物质集中在精子头部属于受精前的精子变化，不是阻止其他精子入卵而产生的生理反应，①错误；
②精子获能为受精前的准备，不是阻止其他精子入卵而产生的生理反应，②错误；
③透明带反应是指顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应，这是防止多精入卵的第一道屏障，③正确；
④顶体反应是指精子与卵子的透明带接触时，顶体酶将透明带溶出一条孔道，精子穿越透明带，不是阻止其他精子入卵而产生的生理反应，④错误．
⑤卵细胞膜反应是指精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程，这是防止多精入卵的第二道屏障，⑤正确．
故选：C．
【点评】本题考查的是防止多精子受精的两道屏障，属于考纲识记层次，难度不大．
16．下列有关早期胚胎发育和体外受精技术的叙述，正确的是（ ）
A．囊胚时期细胞的分化是由于遗传物质突变引起的
B．采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵
C．卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而不断增大
D．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
【考点】胚胎移植；动物胚胎发育的过程．
【专题】正推法；胚胎工程．
【分析】1、胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔．[细胞分化在胚胎期达到最大限度]
2、细胞分化的实质是基因的选择性表达．
【解答】解：A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，遗传物质没有发生改变，A错误；
B、采集的卵母细胞需要培养成熟（减数第二次分裂种群）后才能与获能的精子受精，B错误；
C、卵裂期，细胞数目不断增多，而胚胎的体积不变甚至略微减小，因此细胞的体积随分裂次数增加而不断减小，C错误；
D、早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清，D正确．
故选：D．
【点评】本题考查早期胚胎培养、胚胎移植等知识，要求考生识记早期胚胎培养的具体过程及条件；识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的实质，能结合所学的知识准确判断各选项．
17．如图所示，下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质山羊的叙述，错误的是（ ）
A．良种公山羊采集的精子在培养液中获能后才能具备受精能力
B．人工授精后的受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎
D．胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
【考点】胚胎移植．
【专题】模式图；胚胎工程．
【分析】分析题图：甲表示卵母细胞的采集和培养；乙表示体外受精过程；丙表示早期胚胎培养过程；丁表示胚胎移植过程．
【解答】解：A、良种公山羊采集的精子在培养液中获能后才能具备受精能力，A正确；
B、人工授精后的受精卵发育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，B错误；
C、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎，C正确；
D、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，D正确．
故选：B．
【点评】本题结合图解，考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记体外受精的具体过程；识记胚胎移植的基本程序及意义，能正确分析题图，再结合所学的知识准确判断各选项．
18．下列关于生物技术安全性和伦理问题的叙述，错误的是（ ）
A．设计试管婴儿进行遗传病基因检测，但单纯选择胎儿性别是违法的
B．克隆人可冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念
C．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
D．利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人是合乎道德规范的
【考点】转基因生物的安全性问题；生物技术中的伦理问题．
【专题】正推法；生物技术的安全性和伦理问题．
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的正确做法是趋利避害，不能因噎废食．
2、对生物技术中的伦理问题的争论，中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人．
【解答】解：A、设计试管婴儿进行遗传病基因检测有利于预防遗传病的发生，但单纯选择胎儿性别是违法的，A正确；
B、克隆人可冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念，B正确；
C、转基因植物存在生物安全问题，如转基因植物的抗除草剂基因可能通过花粉传播而进入杂草中，C错误；
D、利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人属于设计试管婴儿技术，是合乎道德规范的，D正确．
故选：C．
【点评】本题考查转基因生物的安全性问题、生物技术中的伦理问题，要求考生识记转基因技术的安全性问题，了解人们对其引起的食物安全、生物安全及环境安全的争议；关注生物技术的伦理问题；识记生物武器的相关知识，能运用所学的知识准确判断各选项．
19．下列关于生态工程的叙述中，错误的是（ ）
A．生态工程是无消耗、多效益的工程
B．生态工程追求经济和生态的双赢
C．生态工程是生态学和工程学的结合
D．应用物质循环再生的原理
【考点】生态工程的概念及其目标．
【专题】正推法；生态工程．
【分析】1、生态工程是指人类应用生态学和系统学等学科的基本原理和方法，通过系统设计、调控和技术组装，对已被破坏的生态环境进行修复、重建，对造成环境污染和破坏的传统生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力，从而促进人类社会和自然环境的和谐发展．
2、生态工程建设目的：遵循自然界物质循环的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展．（少消耗、多效益、可持续）
【解答】解：A、生态工程是少消耗，而不是无消耗，A错误；
B、生态工程追求经济和生态的双赢，B正确；
C、生态工程是生态学和工程学的结合，C正确；
D、生态工程应用到了物质循环再生等原理，D正确．
故选：A．
【点评】本题考查生态工程的概念及目标，要求考生识记生态工程的概念、目标等基础知识，能结合所学的知识准确判断各选项．
20．为了解决人类生存和环境保护问题，实现可持续发展，当下措施及途径尚不可取的是（ ）
A．发展生态农业，改变传统的生产方式
B．利用现代生物技术，培育高产农作物新品种
C．大力发展“石油农业”，实现农业生产的高效益
D．城市生活垃圾要做到分类回收处理，实现废物资源化利用
【考点】生态工程的概念及其目标．
【专题】正推法；生态工程．
【分析】可持续发展是指在保护环境的条件下既满足当代人的需求，又不损害后代人的需求的发展模式．资源的持续利用和生态系统可持续性的保持是人类社会可持续发展的首要条件．可持续发展要求人们根据可持续性的条件调整自己的生活方式，在生态可能的范围内确定自己的消耗标准．因此，人类应做到合理开发和利用自然资源，保持适度的人口规模，处理好发展经济和保护环境的关系．
【解答】解：A、发展生态农业，可实现对物质和能量的多级利用，减少能源物质的利用，A正确；
B、利用现代生物技术，培育高产农作物新品种，获得更多的资源，B正确；
C、大力发展“石油农业”，会导致环境污染加剧，不利于可持续发展，C错误；
D、城市生活垃圾要做到分类回收处理，实现废物资源化利用，有利于可持续发展，D正确．
故选：C．
【点评】本题考查可持续发展观，应明确实现可持续发展，应做到合理开发和利用自然资源，保持适度的人口规模，处理好发展经济和保护环境的关系．
二、多项选择题（本部分包括5题，每题3分，共计15分．每题有不止一个选项符合题意．每题全选对者得3分，少选者1分，选错者不给分．）
21．如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是（ ）
A．A→B过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料，并加入一种引物
B．A→B过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶
C．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞
D．B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
【考点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的原理及技术．
【分析】多聚酶链式反应扩增DNA片段的原理是DNA复制原理，利用DNA分子热变性的原理通过控制温度来控制双链的解聚与结合，包括DNA分子的变性、复性和延伸阶段，需要四种游离的脱氧核糖核苷酸、两种引物和耐高温的DNA聚合酶；利用转基因技术培育新品种常用的受体细胞的受精卵；转基因植物的培育过程目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法．
【解答】解：A、A→B过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程，需要加入两种引物，A错误；
B、A→B过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶，B正确；
C、B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是受精卵细胞，C错误；
D、B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法，D正确．
故选：AC．
【点评】对于PCR技术的原理和应用及基因工程在育种中的应用是本题考查的重点．
22．下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（ ）
A．培养基中添加蔗糖作为能源物质
B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；植物的组织培养．
【分析】植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的过程，决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要．脱分化过程要避光，否则会形成维管组织，不形成愈伤组织，而再分化过程需要光照．
同一植株不同细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同，如花粉细胞培养形成的愈伤组织细胞的基因只有体细胞的一半．
【解答】解：A、植物组织培养的培养基中需添加蔗糖，目的是提供营养，同时糖类是主要的能源物质，A正确；
B、培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化，B正确；
C、离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织，C正确；
D、同一植株不同细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同，如花粉细胞培养形成的愈伤组织细胞的基因只有体细胞的一半，D错误．
故选：ABC．
【点评】本题考查了植物组织培养技术的相关知识，属于考纲中识记、理解层次的要求，难度适中．考生要能够识记植物组织培养的培养基成分以及培养过程，并且花药离体培养也利用了植物组织培养技术，但这属于有性生殖，获得的是单倍体．
23．人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞．如图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程，下列有关叙述正确的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞具有分裂和分化能力
B．过程①通常用胰蛋白酶处理
C．图中的培养液为液体培养基
D．细胞在培养瓶中培养一段时间会出现接触抑制
【考点】动物细胞与组织培养过程．
【分析】分析题图：图示表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程，其中1表示用胰蛋白酶处理使组织细胞分散开来；2表示离心过程；3表示加培养液制成细胞悬液；4表示细胞培养．据此答题．
【解答】解：A、人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞，说明人脐带间充质干细胞具有分裂和分化能力，A正确；
B、过程①通常用胰蛋白酶处理，使组织细胞分散成单个细胞，B正确；
C、培养动物细胞所用的培养液为液体培养基，C正确；
D、正常的动物细胞存在接触抑制，因此细胞在培养瓶中培养一段时间会出现接触抑制，D正确．
故选：ABCD．
【点评】本题结合培养人脐带间充质干细胞的大致过程图，考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程及条件，能结合题中和图中信息准确判断各选项．
24．梅花鹿胚胎移植试验的主要流程：①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④
→⑤胚胎移植→子代梅花鹿．下列相关叙述正确的是（ ）
A．①过程需要是注射有关激素，目的是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
B．③过程是以哺乳动物早期胚胎在输卵管或子宫中处于游离状态为前提
C．④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚
D．⑤过程成功的关键是移植的胚胎能与受体子宫内原有胚胎和谐共存
【考点】胚胎移植．
【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：
①对供、受体的选择和处理．选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种．并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理．
②配种或人工授精．
③对胚胎的收集、检查、培养或保存．配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）．对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段．直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存．
④对胚胎进行移植．
⑤移植后的检查．对受体母牛进行是否妊娠的检查．
【解答】解：A、①过程需要是注射有关激素（促性腺激素），目的是获得更多的卵原细胞，但所获得的卵原细胞还未完成减数分裂，A错误；
B、③是胚胎收集过程，该过程是以哺乳动物早期胚胎在输卵管或子宫中处于游离状态为前提，B正确；
C、④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚，C错误；
D、⑤过程成功的关键是移植的胚胎能与子宫建立正常联系，D错误．
故选：B．
【点评】本题考查胚胎移植的相关知识，要求考生识记胚胎移植的概念、生理学基础和基本程序，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．
25．如图表示某人工设计的生态系统，下列相关叙述正确的是（ ）
A．该生态系统经过能量的循环利用，提高了系统总能量的传递效率
B．通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用，有效地促进了系统中物质的循环利用
C．该系统的设计追求经济和生态的双赢
D．该生态系统遵循了“物质循环再生”原理
【考点】生态农业工程．
【专题】模式图；生态工程．
【分析】建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染．生态系统生物种类多，自我调节能力强，建立该生态系统遵循的原理主要是物质循环再生原理和生物多样性原理．
该图是人工生态系统图，利用生物学原理设置的生态农业；该生态系统内，葡萄蔬菜是生产者，通过光合作用固定太阳能，通过食物链把能量传给人猪等生物，同时为了提高能量和物质利用率，猪粪进沼气池，沼渣喂养蚯蚓蝇蛆，施农田等，实现了物质循环再生，提高了能量的利用率．
【解答】解：A、该生态系统经过能量的多级利用，提高了系统总能量的利用效率，但不能提高系统总能量的传递效率，A错误；
B、通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用，有效地促进了系统中物质的循环利用，B正确；
C、该系统的设计追求经济和生态的双赢，C正确；
D、该生态系统遵循了“物质循环再生”原理，D正确．
故选：BCD．
【点评】本题考查生态工程和生态农业的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．与传统农业相比，生态农业的优点有实现对物质再循环利用；实现对能量的多级利用，提高了能量的利用率；有利于生态环境的保护等．
三、非选择题（本部分包括8题，共计65分．）
26．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种．
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，从陆地棉和拟南芥的基因文库中获取酶D基因和转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切点如图所示．则用ClaⅠ和DNA连接酶处理两个基因后，可得到A端与D端（填图中字母）相连的融合基因．
（2）将上述融合基因插入如图所示Ti质粒的T-DNA中，构建基因表达载体（或“重组质粒”）并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上筛选培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液．
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞．
（4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株．用核酸分子杂交法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功转录．
【考点】基因工程的原理及技术．
【专题】图文信息类简答题；基因工程．
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、cDNA文库和基因文库的比较表：
文库类型
cDNA
基因组文库
文库大小
小
大
基因中启动子
无
有
基因中内含子
无
有
基因多少
某种生物的部分基因
某种生物的全部基因
物种间的基因交流
可以
部分基因可以
【解答】解：（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因．酶D基因的A端和转运肽基因的D端都含有限制酶ClaⅠ的切割位点，因此可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因．
（2）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．因此，将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建表达载体并导入农杆菌中．由图可知，标记基因是四环素抗性基因，因此将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液．
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜．
（4）检测目的基因是否成功导入受体细胞可采用DNA分子杂交技术．
故答案为：
（1）基因文库 ClaⅠDNA连接 A D
（2）基因表达载体（或“重组质粒”） 四环素
（3）利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞
（4）核酸分子杂交
【点评】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合图中信息准确答题．
27．
p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”是我国首创的基因治疗药物之一，是世界首个获准上市的基因治疗药物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．请回答下列问题：
（1）将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有质粒和λ噬菌体衍生物等．
（2）限制酶能将特定序列的核苷酸之间的磷酸二酯键切开，形成黏性末端或平末端．
（3）p53基因应插入载体的启动子和终止子之间，以便于基因的表达．
（4）p53基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是Taq酶．如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图，扩增过程需要2种引物．经3次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为1/4．
【考点】基因工程的原理及技术．
【专题】图文信息类简答题；基因工程．
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、PCR技术的原理：DNA复制．条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
【解答】解：（1）构建基因表达载体时，首先需要用限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．基因工程常用的载体有：动植物病毒、质粒、λ噬菌体衍生物等．
（2）限制酶具有专一性，其能识别将特定核苷酸序列并将特定位点之间的磷酸二酯键切开，形成黏性末端或平末端．
（3）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质．终止子也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端．因此，p53基因应插入载体的启动子和终止子之间，以便于基因的表达．
（4）PCR技术需使用Taq酶，扩增过程需要2种引物．PCR技术的原理是DNA的复制，根据DNA半保留复制特点，经3次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为2/23=1/4．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶
质粒和λ噬菌体衍生物等
（2）磷酸二酯 黏性末端或平
（3）启动子和终止子
（4）Taq酶 2 1/4
【点评】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．
28．野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能使用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．据图分析回答问题．
（1）①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括纤维素酶和果胶酶．
（2）②过程需要用聚乙二醇（PEG），其目的是诱导原生质体融合．
（3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程融合细胞愈伤组织幼苗
愈伤组织幼苗
．由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性，这是植物细胞全能性的表现．
（4）一般在培养基上培养24-48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁．可以取样，通过质壁分离实验来鉴别细胞壁是否已经再生．
（5）请说明运用此植物体细胞杂交法的最大的好处：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍．
【考点】植物体细胞杂交的过程．
【分析】据图分析，①是去壁过程，最常用的方法是酶解法，即用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁．②表示诱导原生质体融合的过程，诱导植物细胞融合的化学法一般是用聚乙二醇（PEG）为诱导剂，原因是细胞膜具有一定流动性．③表示再生细胞壁，标志着细胞融合成功，细胞壁的形成过程主要与细胞内的高尔基体有关．④和⑤分别表示植物组织培养过程中的脱分化和再分化过程．
【解答】解：（1）细胞壁由纤维素和果胶组成，可采用纤维素酶和果胶酶将其水解．
（2）细胞融合时常用聚乙二醇作为诱导剂，诱导原生质体融合．
（3）由④→⑤是杂种细胞经过脱分化、再分化形成幼苗的过程，体现植物细胞具有全能性．
（4）一般在培养基上培养24～48h后，大部分原生质体已再形成细胞壁．此时取样，利用质量分数为25%的蔗糖溶液以及其他用具，通过质壁分离实验来鉴别细胞壁是否已经再生．
（5）植物体细胞杂交的优点是：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合的范围．
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶酶
（2）诱导原生质体融合
（3）融合细胞愈伤组织幼苗
植物细胞全能性
（4）质壁分离
（5）克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍
【点评】本题结合植物体细胞杂交过程图，考查植物体细胞杂交的相关知识，意在考查考生的识图能力和分析能力，要求学生熟记杂交流程图，难度一般．
29．
如图是单克隆抗体制备过程示意图．
（1）图中B淋巴细胞的特点是能分泌特异性抗体，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是细胞膜的流动性．
（2）用特定的选择培养基筛选符合要求的细胞时，在该培养基上未融合的亲本细胞和融合的，具有同种核的细胞会死亡，融合的杂种细胞能生长；抗体检测时，符合要求的细胞是①②③的②（填序号），经过抗体检测以后，继续培养的细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（3）在奶牛饲养的过程中，过量使用庆大霉素会导致牛奶中药物残留过多，人长期食用这样的牛奶会影响身体健康．利用抗庆大霉素的单克隆抗体，可以检测牛奶中庆大霉素的含量．
①这种检测方法依据的原理是抗原-抗体的特异性结合．
②这种检测方法具有特异性强，灵敏度高优点．
【考点】单克隆抗体的制备过程．
【分析】单克隆抗体制备流程
（1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2）得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体．
【解答】解：（1）图中B淋巴细胞是已经过免疫的，特点是能分泌特异性抗体，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是细胞膜的流动性．
（2）用特定的选择培养基筛选符合要求的细胞时，在该培养基上未融合的亲本胞和融合的，具有同种核的细胞会死亡，融合的杂种细胞能生长；抗体检测时，能和特异性抗原相结合的抗体才是符合要求的，如②，经过抗体检测以后，继续培养的细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（3）利用抗庆大霉素的单克隆抗体，可以检测牛奶中庆大霉素的含量．
①这种检测方法依据的原理是抗原-抗体的特异性结合．
②这种检测方法具有特异性强，灵敏度高的优点
故答案为：
（1）能分泌特异性抗体
细胞膜的流动性
（2）未融合的亲本
融合的，具有同种核的
融合的杂种
②
（3）①抗原-抗体的特异性结合
②特异性强，灵敏度高
【点评】本题考查了单克隆抗体的制备过程和动物细胞培养等相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．
30．科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞（GiPS细胞）．如图是利用GiPS细胞对镰刀形细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程：
请据图回答：
（1）过程①中，在培养液中加入胰蛋白酶使上皮组织细胞彼此分散，若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的正常的二倍体核型（遗传物质）不发生变化．
（2）科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理，促使已经（高度）分化的成纤维细胞“重新编程”产生GiPS细胞，这些GiPS细胞与囊胚中的内细胞团细胞性质相同．
（3）过程③中，将重组质粒导入GiPS细胞所用的方法是显微注射法．
（4）若利用GiPS细胞诱导分化形成早期胚胎（桑椹胚、囊胚），再经胚胎移植技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
（5）GiPS细胞经体外诱导分化，可以直接培育出人造组织器官．图中④过程可在培养液中添加分化诱导因子因子使其定向分化成造血干细胞．培育出的骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是不出现免疫排斥反应．
【考点】基因工程的原理及技术；动物胚胎发育的过程；胚胎移植．
【专题】图文信息类简答题；基因工程；胚胎工程．
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、细胞开始分化的时期是：囊胚期（其中内细胞团细胞具有全能性，为胚胎干细胞）．
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）．
【解答】解：（1）若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的正常的二倍体核型．
（2）成纤维上皮细胞已经高度分化；CiPS细胞与囊胚中内细胞团细胞性质相同，具有发育的全能性．
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（4）若利用CiPS细胞诱导分化形成早期胚胎，分化程度低，全能性高；再经胚胎移植技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
（5）在培养液中添加分化诱导因子可使GiPS细胞定向分化成造血干细胞．图中培育骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是不出现免疫排斥反应．
故答案为：
（1）正常的二倍体核型（遗传物质）
（2）（高度）分化 内细胞团
（3）显微注射法
（4）早期胚胎（桑椹胚、囊胚） 胚胎移植
（5）分化诱导因子 不出现免疫排斥反应
【点评】本题考查动物细胞培养、胚胎干细胞的特点、基因过程、胚胎工程等相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，难度不大．
31．图1为动物的克隆研究过程，其中Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a～h代表有关结构或个体．
（1）Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ过程证明了供体细胞的核（哺乳动物细胞核）具有全能性．
（2）过程Ⅴ取出的细胞f是胚胎干细胞，它在功能上的特点是具有发育的全能性，
（3）动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加抗生素．
（4）Ⅳ过程用的技术是胚胎移植．若d为囊胚时期，可以取滋养层细胞对克隆早期胚胎进行性别鉴定．
（5）若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像提供细胞核的绵羊吗？不是．原因是卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状．
【考点】动物细胞与组织培养过程；动物体细胞克隆；动物胚胎发育的过程；胚胎干细胞的来源及分化．
【专题】图文信息类简答题；克隆技术；胚胎工程．
【分析】分析题图：图示为克隆研究过程，其中a表示去核卵细胞；c为重组细胞；d为桑椹胚；e为代孕母羊；f为胚胎干细胞；g表示克隆羊；h表示胚胎干细胞分化形成的特定细胞；Ⅰ、Ⅱ为核移植过程；Ⅲ为早期细胞胚胎培养过程；Ⅳ为胚胎移植过程；Ⅴ表示从桑椹胚中取出胚胎干细胞；Ⅵ表示妊娠；Ⅶ表示胚胎干细胞体外培养．
【解答】解：（1）Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ是克隆羊的诞生过程，该过程证明了供体细胞的核（哺乳动物细胞核）具有全能性．
（2）过程Ⅴ取出的细胞f是胚胎干细胞，它在功能上具有发育的全能性．
（3）动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加抗生素．
（4）Ⅳ为胚胎移植过程．若d为囊胚时期，可以取滋养层细胞对克隆早期胚胎进行性别鉴定．
（5）克隆羊的细胞核遗传物质来自供体，而细胞质遗传物质几乎都来自卵细胞，且卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状，因此若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状不全部像提供细胞核的绵羊．
故答案为：
（1）供体细胞的核（哺乳动物细胞核）具有全能性
（2）胚胎干细胞 具有发育的全能性
（3）抗生素
（4）胚胎移植 滋养层细胞
（5）不是 卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状
【点评】本题结合克隆研究过程图，考查动物细胞核移植技术、胚胎移植、胚胎干细胞等知识，要求考生识记动物细胞核移植的概念和胚胎移植的过程，能准确判断图示过程或结构的名称；识记胚胎干细胞的特点，能结合所学的知识答题．
32．为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答有关问题：
（1）在实际操作过程中为了使B牛超数排卵，需要注射促性腺激素，其产生的卵母细胞要在体外培养至减数第二次分裂中期（时期）才具备体外受精能力．
（2）对重构卵发育成的囊胚采用胚胎分割技术，可获得更多基因型完全相同的F牛，该技术具体操作时的注意要点是对内细胞团进行均等分割．
（3）方法Ⅰ中，若为体内受精则从供体母牛B体内获取胚胎的方法称为冲卵；胚胎移植前对B牛和D牛要进行同期发情处理，保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致．
（4）培育克隆牛F时使用的不同于试管牛E的生物技术是细胞核移植，试管牛E的生殖方式属于有性生殖．
【考点】胚胎移植；胚胎分割移植．
【专题】图文信息类简答题；胚胎工程．
【分析】分析题图：图示为加快优良种牛繁殖速度的两种方法，方法Ⅰ采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的试管牛E属于有性生殖的产物；方法Ⅱ采用了体细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的克隆牛F属于无性生殖的产物．
【解答】解：（1）对良种母畜注射促性腺激素可促使其超数排卵；产生的卵母细胞要在体外培养至减数第二次分裂中期才具备体外受精能力．
（2）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此对重构卵发育成的囊胚采用胚胎分割技术，可获得更多基因型完全相同的E牛；胚胎分割时，应注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．
（3）方法Ⅰ中，若为体内受精则从供体母牛B体内获取胚胎的方法称为冲卵；胚胎移植前对B牛和D牛要进行同期发情处理，保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致．
（4）图解中看出，试管牛和克隆牛的培育过程中均用到了动物细胞培养（早期胚胎培养）、胚胎移植技术，而培育克隆牛F时还利用了核移植技术．试管牛E的形成存在精子和卵细胞的受精作用，因此属于有性生殖．
故答案为：
（1）促性腺激素 减数第二次分裂中期
（2）胚胎分割 对内细胞团进行均等分割
（3）冲卵 同期发情
（4）细胞核移植 有性生殖
【点评】本题结合试管牛和克隆牛培育过程图，考查动物体细胞核移植技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术等知识，要求考生识记动物体细胞核移植的概念及过程，明确试管动物的产生属于有性生殖；识记胚胎分割的概念，掌握胚胎分割的注意点．
33．
我国珠江三角洲地区，为充分利用土地，创造了一种挖深鱼塘、垫高基田、塘基植桑、塘内养鱼的高效人工生态系统--桑基鱼塘，如图所示．据图回答有关问题：
（1）生态工程遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学与工程学原理等．
（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程实现了物质和能量的多级利用．
（3）蚕沙是蚕食桑叶后排泄出来的粪便，蚕沙富含粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养物质，是上等的肥料，也是猪、鱼、羊的理想饲料．某种鱼专以蚕沙为食，假设某一时间段蚕从上一个营养级固定的能量为1.5×105kJ，那么这部分能量最多有0kJ被这种鱼所同化．
（4）该生态系统向外输出的物质主要有蚕丝、鱼、糖等．
（5）该生态系统与一般的自然生态系统相比较，抵抗力稳定性较低，所以需要人们不断输入物质与能量．
（6）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有减轻水患、提高经济效益、减少环境污染等（至少答2点）．
【考点】生态农业工程；生态工程依据的生态学原理．
【专题】图文信息类简答题；生态工程．
【分析】生态农业是一个农业生态经济复合系统，将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益．它也是农、林、牧、副、渔各业综合起来的大农业，又是农业生产、加工、销售综合起来，适应市场经济发展的现代农业．生态工程的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学和工程学原理．
【解答】解：（1）生态工程遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学与工程学原理等．
（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程实现了物质的循环再生和能量的多级利用．
（3）由于鱼利用的是蚕粪，故属于分解者，所以假设某一时间段蚕从上一个营养级固定的能量为1.5×105kJ，那么这部分能量最多有0kJ被这种鱼所同化．
（4）据图示可知，该生态系统向外输出的物质主要有蚕丝、鱼、糖等．
（5）该生态系统与一般的自然生态系统相比较，由于生物种类较少，故抵抗力稳定性较低，所以需要人们不断输入物质与能量．
（6）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有减轻水患、提高经济效益、减少环境污染等．
故答案为：
（1）物质循环再生原理 物种多样性原理 协调与平衡原理
（2）物质和能量的多级利用
（3）0
（4）蚕丝、鱼、糖等
（5）抵抗力
（6）减轻水患、提高经济效益、减少环境污染等
【点评】本题主要考查学生的分析和理解能力．与传统农业相比，生态农业的优点有实现对物质再循环利用；实现对能量的多级利用，提高了能量的利用率；有利于生态环境的保护等．
一、单项选择题（每小题只有一个正确选项．每题2分，共40分）
1．基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是（ ）
A．限制酶只用于切割获取目的基因
B．载体与目的基因必须用同一种限制酶处理
C．基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶
D．带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测
2．如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ）
A．①②③④
B．①②④③
C．①④②③
D．①④③②
3．科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．在培育转基因番茄的过程中，下列操作不合理的是（ ）
A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
B．将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体
C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
D．在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞
4．下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（ ）
A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B．蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
5．在工业化大量培养植物试管苗的过程中，一般进行如下操作，则正确的操作顺序是（ ）
①诱导形成芽和根
②取合适外植体
③诱导形成愈伤组织
④对外植体进行消毒．
A．②①③④
B．②④③①
C．②③④①
D．②①④③
6．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（ ）
A．消毒灭菌
B．适宜的温度
C．充足的光照
D．适宜的养料和激素
7．利用植物组织培养技术从红豆杉细胞中提取抗癌药物紫杉醇不需要进行的是（ ）
A．选取合适的外植体并要进行快速消毒
B．培养基中加入适量的蔗糖提供营养并维持渗透压
C．控制植物激素的种类和含量诱导产生愈伤组织
D．选择适当的分化培养基培育红豆杉幼苗
8．如图为白菜-甘蓝的培育流程，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①用到的酶是胰蛋白酶和果胶酶，目的是除去细胞壁便于细胞融合
B．过程②常用离心、振动、电刺激和化学诱导剂聚乙二醇
C．A和B细胞融合完成的标志是再生出新的细胞壁
D．过程④形成的细胞的全能性提高
9．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是（ ）
A．利用花药离体培养得到单倍体植株
B．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株
C．制造神奇的人工种子
D．利用细胞工程培育“番茄一马铃薯”杂种植株
10．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ）
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传到10代左右便会出现生长停滞
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
11．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞．
A．①③⑤
B．①②③④
C．②④
D．②③
12．下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
D．动物细胞培养和植物组织培养过程中不都用到胰蛋白酶
13．下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染
B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C．大规模生产食品添加剂、香料等
D．用于检测有毒物质
14．下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是（ ）
A．精子形成过程中，高尔基体发育为原生质滴
B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D．受精的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
15．每一物种都可保持本物种染色体数目的稳定，在动物受精过程中，有一系列的机制保证一个精子与一个卵细胞结合，而防止多个精子与卵细胞结合，从而保证本物种染色体数目的稳定．下列哪些活动可防止多个精子与卵细胞结合（ ）
①精子变形，细胞核物质集中在精子头部 ②精子获能 ③透明带反应 ④顶体反应 ⑤卵细胞膜反应．
A．①②
B．①③
C．③⑤
D．④⑤
16．下列有关早期胚胎发育和体外受精技术的叙述，正确的是（ ）
A．囊胚时期细胞的分化是由于遗传物质突变引起的
B．采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵
C．卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而不断增大
D．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
17．如图所示，下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质山羊的叙述，错误的是（ ）
A．良种公山羊采集的精子在培养液中获能后才能具备受精能力
B．人工授精后的受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎
D．胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
18．下列关于生物技术安全性和伦理问题的叙述，错误的是（ ）
A．设计试管婴儿进行遗传病基因检测，但单纯选择胎儿性别是违法的
B．克隆人可冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念
C．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
D．利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人是合乎道德规范的
19．下列关于生态工程的叙述中，错误的是（ ）
A．生态工程是无消耗、多效益的工程
B．生态工程追求经济和生态的双赢
C．生态工程是生态学和工程学的结合
D．应用物质循环再生的原理
20．为了解决人类生存和环境保护问题，实现可持续发展，当下措施及途径尚不可取的是（ ）
A．发展生态农业，改变传统的生产方式
B．利用现代生物技术，培育高产农作物新品种
C．大力发展“石油农业”，实现农业生产的高效益
D．城市生活垃圾要做到分类回收处理，实现废物资源化利用
二、多项选择题（本部分包括5题，每题3分，共计15分．每题有不止一个选项符合题意．每题全选对者得3分，少选者1分，选错者不给分．）
21．如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是（ ）
A．A→B过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料，并加入一种引物
B．A→B过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶
C．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞
D．B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
22．下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（ ）
A．培养基中添加蔗糖作为能源物质
B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同
23．人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞．如图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程，下列有关叙述正确的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞具有分裂和分化能力
B．过程①通常用胰蛋白酶处理
C．图中的培养液为液体培养基
D．细胞在培养瓶中培养一段时间会出现接触抑制
24．梅花鹿胚胎移植试验的主要流程：①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④
→⑤胚胎移植→子代梅花鹿．下列相关叙述正确的是（ ）
A．①过程需要是注射有关激素，目的是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
B．③过程是以哺乳动物早期胚胎在输卵管或子宫中处于游离状态为前提
C．④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚
D．⑤过程成功的关键是移植的胚胎能与受体子宫内原有胚胎和谐共存
25．如图表示某人工设计的生态系统，下列相关叙述正确的是（ ）
A．该生态系统经过能量的循环利用，提高了系统总能量的传递效率
B．通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用，有效地促进了系统中物质的循环利用
C．该系统的设计追求经济和生态的双赢
D．该生态系统遵循了“物质循环再生”原理
三、非选择题（本部分包括8题，共计65分．）
26．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种．
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，从陆地棉和拟南芥的_________中获取酶D基因和转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切点如图所示．则用_________和_________酶处理两个基因后，可得到_________端与_________端（填图中字母）相连的融合基因．
（2）将上述融合基因插入如图所示Ti质粒的T-DNA中，构建_________并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含_________的固体培养基上筛选培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液．
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_________．
（4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株．用_________法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功转录．
27．p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”是我国首创的基因治疗药物之一，是世界首个获准上市的基因治疗药物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．请回答下列问题：
（1）将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，需要用到的工具酶有_________．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有_________．
（2）限制酶能将特定序列的核苷酸之间的_________键切开，形成_________末端．
（3）p53基因应插入载体的_________之间，以便于基因的表达．
（4）p53基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是_________．如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图，扩增过程需要_________种引物．经3次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为_________．
28．野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能使用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．据图分析回答问题．
（1）①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括_________．
（2）②过程需要用聚乙二醇（PEG），其目的是_________．
（3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程_________
愈伤组织幼苗
．由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性，这是_________的表现．
（4）一般在培养基上培养24-48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁．可以取样，通过_________实验来鉴别细胞壁是否已经再生．
（5）请说明运用此植物体细胞杂交法的最大的好处：_________．
29．如图是单克隆抗体制备过程示意图．
（1）图中B淋巴细胞的特点是_________，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是_________．
（2）用特定的选择培养基筛选符合要求的细胞时，在该培养基上_________细胞和_________细胞会死亡，_________细胞能生长；抗体检测时，符合要求的细胞是①②③的_________（填序号），经过抗体检测以后，继续培养的细胞具有的特点是_________．
（3）在奶牛饲养的过程中，过量使用庆大霉素会导致牛奶中药物残留过多，人长期食用这样的牛奶会影响身体健康．利用抗庆大霉素的单克隆抗体，可以检测牛奶中庆大霉素的含量．
①这种检测方法依据的原理是_________．
②这种检测方法具有_________优点．
30．科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞（GiPS细胞）．如图是利用GiPS细胞对镰刀形细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程：
请据图回答：
（1）过程①中，在培养液中加入胰蛋白酶使上皮组织细胞彼此分散，若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的_________不发生变化．
（2）科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理，促使已经_________的成纤维细胞“重新编程”产生GiPS细胞，这些GiPS细胞与囊胚中的_________细胞性质相同．
（3）过程③中，将重组质粒导入GiPS细胞所用的方法是_________．
（4）若利用GiPS细胞诱导分化形成_________，再经_________技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
（5）GiPS细胞经体外诱导分化，可以直接培育出人造组织器官．图中④过程可在培养液中添加_________因子使其定向分化成造血干细胞．培育出的骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是_________．
31．图1为动物的克隆研究过程，其中Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a～h代表有关结构或个体．
（1）Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ过程证明了_________．
（2）过程Ⅴ取出的细胞f是_________，它在功能上的特点是_________，
（3）动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加_________．
（4）Ⅳ过程用的技术是_________．若d为囊胚时期，可以取_________对克隆早期胚胎进行性别鉴定．
（5）若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像提供细胞核的绵羊吗？_________．原因是_________．
32．为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答有关问题：
（1）在实际操作过程中为了使B牛超数排卵，需要注射_________，其产生的卵母细胞要在体外培养至_________（时期）才具备体外受精能力．
（2）对重构卵发育成的囊胚采用_________技术，可获得更多基因型完全相同的F牛，该技术具体操作时的注意要点是_________．
（3）方法Ⅰ中，若为体内受精则从供体母牛B体内获取胚胎的方法称为_________；胚胎移植前对B牛和D牛要进行_________处理，保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致．
（4）培育克隆牛F时使用的不同于试管牛E的生物技术是_________，试管牛E的生殖方式属于_________．
33．我国珠江三角洲地区，为充分利用土地，创造了一种挖深鱼塘、垫高基田、塘基植桑、塘内养鱼的高效人工生态系统--桑基鱼塘，如图所示．据图回答有关问题：
（1）生态工程遵循的基本原理有_________、_________、_________、整体性原理和系统学与工程学原理等．
（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程实现了_________．
（3）蚕沙是蚕食桑叶后排泄出来的粪便，蚕沙富含粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养物质，是上等的肥料，也是猪、鱼、羊的理想饲料．某种鱼专以蚕沙为食，假设某一时间段蚕从上一个营养级固定的能量为1.5×105kJ，那么这部分能量最多有_________kJ被这种鱼所同化．
（4）该生态系统向外输出的物质主要有_________．
（5）该生态系统与一般的自然生态系统相比较，_________稳定性较低，所以需要人们不断输入物质与能量．
（6）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有_________（至少答2点）．
2015-2016学年江苏省扬州市宝应县高二（下）期中生物试卷
参考答案与试题解析
一、单项选择题（每小题只有一个正确选项．每题2分，共40分）0
1．基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是（ ）
A．限制酶只用于切割获取目的基因
B．载体与目的基因必须用同一种限制酶处理
C．基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶
D．带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测
【考点】基因工程的原理及技术．
【分析】1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
2、用同一种限制酶切割目的基因和运载体，才能产生相同的黏性末端，使得DNA分子的碱基重新实现互补配对．
【解答】解：A、限制酶用于切割获取目的基因和运载体，A错误；
B、一般用同一种限制酶处理载体与目的基因，形成相同的粘性末端，B正确；
C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶，C正确；
D、采用DNA分子杂交的方法检测带有目的基因的载体是否进入受体细胞，D正确．
故选：A．
【点评】本题考查基因工程中的工具，意在考查学生的识记和理解能力，属于中档题．
2．如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ）
A．①②③④
B．①②④③
C．①④②③
D．①④③②
【考点】基因工程的原理及技术；DNA分子的复制．
【分析】分析图解：图①双链DNA分子中间出现了黏性末端，图②两个具有黏性末端的DNA片段连接成一个完整的DNA分子，图③中DNA分子的双链解开，图④是以解开的单链DNA作为模板形成子链的过程．
【解答】解：限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端，因此作用于①；DNA聚合酶用于DNA分子的复制，能在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来，因此作用于④；DNA连接酶能在具有相同碱基末端的两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，因此作用于②；解旋酶能够将DNA分子的双螺旋解开，故作用于③．
故选C．
【点评】本题通过作用效果图解考查了限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶的作用，意在考查考生的识图能力、区分能力、识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．
3．科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．在培育转基因番茄的过程中，下列操作不合理的是（ ）
A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
B．将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体
C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
D．在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞
【考点】基因工程的原理及技术．
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
【解答】解：A、获取目的基因的方法包括：从基因文库中获取、采用PCR技术体外扩增、人工化学合成（如逆转录法），A正确；
B、在培育转基因番茄的过程中，需要将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体，再导入受体细胞，B正确；
C、将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，C正确；
D、利用标记基因来自筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞，由于该基因在受体番茄细胞中还没有表达，因此不能在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄细胞，D错误．
故选：D．
【点评】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．
4．下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（ ）
A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B．蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
【考点】蛋白质工程．
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质．
【解答】解：A、由概念可知：蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因分子进行操作，改造基因即改造蛋白质，而且可以遗传，故A错误；
B、由概念可知：蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，故B正确；
C、对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，故C错误；
D、蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，故D错误．
故选：B．
【点评】题考查蛋白质工程的相关知识，蛋白质工程的原理（实质）是：改造基因．蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；（2）进行基因修饰或基因合成；（3）最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成．因此蛋白质工程生产合成的蛋白质是自然界中不存在的新型蛋白质分子．
5．在工业化大量培养植物试管苗的过程中，一般进行如下操作，则正确的操作顺序是（ ）
①诱导形成芽和根
②取合适外植体
③诱导形成愈伤组织
④对外植体进行消毒．
A．②①③④
B．②④③①
C．②③④①
D．②①④③
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；植物的组织培养．
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，一般经诱导先出现芽，进一步分化形成根．
【解答】解：工业化大量培养植物试管苗的过程为植物组织培养过程，其操作顺序是取离体的器官、组织、细胞（外植体）→对外植体进行消毒→诱导形成愈伤组织→诱导形成芽和根→移栽成活．
故选：B．
【点评】本题考查植物组织培养的条件及过程，要求考生识记植物组织培养的过程，能理论联系实际，判断工业化大量培养植物试管苗的具体过程，再选出正确的答案，属于考纲识记层次的考查．
6．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（ ）
A．消毒灭菌
B．适宜的温度
C．充足的光照
D．适宜的养料和激素
【考点】植物培养的条件及过程．
【分析】解答该题需从如下三个方面入手分析：
①由离体的植物器官、组织或细胞形成愈伤组织的过程是植物组织培养过程中的一个阶段．该阶段要进行细胞的增殖和细胞的脱分化，这就必须要有适宜的养料和激素，必须要有适宜的温度，这样，才能保证细胞进行正常的新陈代谢．
②由离体的植物器官、组织形成愈伤组织必须是在无菌条件下，只有在这样的条件下，才能保证培养产生出的细胞是正常细胞，否则培养基内将长出许多霉菌，与离体细胞争夺营养与生存空间，形成不愈伤组织．
③由于此阶段形成的是愈伤组织，并没有形成具有根、茎、叶的植物体，因此不需要光照．
【解答】解：A、可以给植物组织或器官更好的生长环境，也防止种间竞争所以是对的，A正确；
B、该阶段要进行细胞的增殖和细胞的脱分化，这就必须要有适宜的养料和激素，必须要有适宜的温度，这样，才能保证细胞进行正常的新陈代谢，B正确；
C、当植物还在脱分化形成愈伤组织的时候不能进行光合作用，所以自然也就不需要光照，如果有光就不形成愈伤组织，而是形成维管组织，C错误；
D、生长激素是动物激素，应是生长素和细胞分裂素，D正确．
故选：C．
【点评】此题主要考查学分对植物组织培养过程的相关知识理解和记忆，该题较易．
7．利用植物组织培养技术从红豆杉细胞中提取抗癌药物紫杉醇不需要进行的是（ ）
A．选取合适的外植体并要进行快速消毒
B．培养基中加入适量的蔗糖提供营养并维持渗透压
C．控制植物激素的种类和含量诱导产生愈伤组织
D．选择适当的分化培养基培育红豆杉幼苗
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；克隆技术．
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株．
【解答】解：A、植物组织培养技术需要对外植体消毒，并且要选生长旺盛的材料，A正确；
B、植物组织培养的培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压，B正确；
C、植物激素的生长素和细胞分裂素比例为1，有利于愈伤组织的形成，C正确；
D、从红豆杉细胞中提取抗癌药物紫杉醇，只需要培养细胞，不需要分化培养基，D错误．
故选：D．
【点评】本题考查的是植物组织培养技术，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．
8．如图为白菜-甘蓝的培育流程，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①用到的酶是胰蛋白酶和果胶酶，目的是除去细胞壁便于细胞融合
B．过程②常用离心、振动、电刺激和化学诱导剂聚乙二醇
C．A和B细胞融合完成的标志是再生出新的细胞壁
D．过程④形成的细胞的全能性提高
【考点】植物体细胞杂交的过程．
【分析】分析题图：①植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；②原生质体融合所用的方法有物理法和化学法．物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；③再生细胞壁形成杂种细胞；④脱分化形成愈伤组织，⑤再分化形成“白菜一甘蓝”幼苗．
【解答】解：A、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶，A错误；
B、原生质体融合所用的方法有物理法和化学法．物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇，B正确；
C、A和B细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁，C正确；
D、过程④是脱分化，形成的细胞是愈伤组织（愈伤组织是为分化的细胞，全能性较高），由分化的细胞形成愈伤组织，全能性提高，D正确．
故选：A．
【点评】本题考查了植物体细胞杂交过程，意在考查考生对于相关知识点的掌握和运用，主要考查考生的识记和理解能力，难度中等．
9．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是（ ）
A．利用花药离体培养得到单倍体植株
B．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株
C．制造神奇的人工种子
D．利用细胞工程培育“番茄一马铃薯”杂种植株
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；克隆技术．
【分析】植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）．植物组织培养技术具有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产．
【解答】解：A、由配子直接发育的个体称为单倍体，花药中的花粉是植物的配子，所以采用花药离体培养得到单倍体植株，A正确；
B、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于自然生长过程，该过程中没有采用植物组织培养技术，B错误；
C、人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，可见该过程需要采用植物组织培养技术，C正确；
D、运用植物细胞工程的植物体细胞杂交技术可以培育出“番茄-马铃薯”杂种植株，D正确．
故选：B．
【点评】本题考查植物组织培养及应用、多倍体育种、植物体细胞杂交，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力．
10．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ）
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传到10代左右便会出现生长停滞
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
【考点】动物细胞与组织培养过程．
【分析】动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖．
细胞株：原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株．
细胞系：细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系．
【解答】解：A、动物细胞培养液的成分含葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，A正确；
B、原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，B正确；
C、动物细胞培养中，少数细胞能存活传到40～50代，传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，C错误；
D、动物细胞培养的原理即是细胞增殖，可获得大量自身健康细胞，用于检测有毒物质等，D正确．
故选：C．
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，难度不大．
11．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞．
A．①③⑤
B．①②③④
C．②④
D．②③
【考点】单克隆抗体的制备过程．
【分析】在制备单克隆抗体的过程中经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞③筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
【解答】解：特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大量增殖、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此其他的细胞都不能在此培养基上生存．在这种培养基上不能存活和繁殖的细胞有①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞．
故选：B．
【点评】本题考查了单克隆抗体制备实验，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；解题的关键是掌握单克隆抗体的制备过程及筛选过程．
12．下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
D．动物细胞培养和植物组织培养过程中不都用到胰蛋白酶
【考点】动物细胞与组织培养过程；植物组织培养的概念及原理．
【分析】植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基成分
营养物质（蔗糖）、植物激素等
营养物质（葡萄糖）、动物血清等
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无毒苗等
获得细胞或细胞产物
分散处理
无
有
脱分化
有
无
【解答】解：A、动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同，如前者含有血清、血浆，后者含有生长素和细胞分裂素，A正确；
B、动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，B错误；
C、动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖（几乎不含病毒）培养可用于植物脱除病毒，C正确；
D、动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理，但植物组织培养过程不需要胰蛋白酶处理，D正确．
故选：B．
【点评】本题考查动物细胞与组织培养过程、植物组织培养的条件及过程，要求考生识记动物细胞培养和植物组织培养的相关知识，能对两者进行比较和区分，再对选项作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查．
13．下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染
B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C．大规模生产食品添加剂、香料等
D．用于检测有毒物质
【考点】动物细胞工程的常用技术．
【专题】正推法；克隆技术．
【分析】动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等．其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础．
【解答】解：A、生产许多有价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产，是动物细胞工程的应用，A正确；
B、用灼伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞，是动物细胞工程的应用，B正确；
C、大规模生产食品添加剂、香料等是植物细胞工程的应用，C错误；
D、检测有毒物质，判断某种物质的毒性，属于动物细胞工程的应用，D正确．
故选：C．
【点评】本题难度不大，考查动物细胞工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力．
14．下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是（ ）
A．精子形成过程中，高尔基体发育为原生质滴
B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D．受精的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
【考点】动物胚胎发育的概念．
【专题】正推法；胚胎工程．
【分析】受精包括受精前的准备阶段和受精阶段：准备阶段1-精子获能，刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力；准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力．
卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中．
受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）
【解答】解：A、精子形成过程中，高尔基体发育为头部的顶体，内含顶体酶，A错误；
B、排卵就是卵细胞从卵泡中排出，可能是初级卵母细胞或次级卵母细胞，B错误；
C、卵细胞形成时的分裂过程在卵巢和输卵管中完成，C错误；
D、在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，D正确．
故选：D．
【点评】本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力，试题难度一般．
15．每一物种都可保持本物种染色体数目的稳定，在动物受精过程中，有一系列的机制保证一个精子与一个卵细胞结合，而防止多个精子与卵细胞结合，从而保证本物种染色体数目的稳定．下列哪些活动可防止多个精子与卵细胞结合（ ）
①精子变形，细胞核物质集中在精子头部 ②精子获能 ③透明带反应 ④顶体反应 ⑤卵细胞膜反应．
A．①②
B．①③
C．③⑤
D．④⑤
【考点】动物胚胎发育的概念．
【分析】在受精作用过程中，精子头部的顶体首先释放顶体酶，发生顶体反应；然后精子穿越放射冠和透明带，此时透明带发生透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障；接着精子进入卵黄膜，此时会发生卵黄膜封闭作用；此时卵细胞才真正完成减数分裂，并释放第二极体；精子的细胞核和卵细胞的细胞核分别形成雄原核和雌原核，即雌、雄原核的形成；最后核膜消失，雌、雄原核融合，标志着受精作用的完成．
【解答】解：①精子变形，细胞核物质集中在精子头部属于受精前的精子变化，不是阻止其他精子入卵而产生的生理反应，①错误；
②精子获能为受精前的准备，不是阻止其他精子入卵而产生的生理反应，②错误；
③透明带反应是指顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应，这是防止多精入卵的第一道屏障，③正确；
④顶体反应是指精子与卵子的透明带接触时，顶体酶将透明带溶出一条孔道，精子穿越透明带，不是阻止其他精子入卵而产生的生理反应，④错误．
⑤卵细胞膜反应是指精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程，这是防止多精入卵的第二道屏障，⑤正确．
故选：C．
【点评】本题考查的是防止多精子受精的两道屏障，属于考纲识记层次，难度不大．
16．下列有关早期胚胎发育和体外受精技术的叙述，正确的是（ ）
A．囊胚时期细胞的分化是由于遗传物质突变引起的
B．采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵
C．卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而不断增大
D．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
【考点】胚胎移植；动物胚胎发育的过程．
【专题】正推法；胚胎工程．
【分析】1、胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔．[细胞分化在胚胎期达到最大限度]
2、细胞分化的实质是基因的选择性表达．
【解答】解：A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，遗传物质没有发生改变，A错误；
B、采集的卵母细胞需要培养成熟（减数第二次分裂种群）后才能与获能的精子受精，B错误；
C、卵裂期，细胞数目不断增多，而胚胎的体积不变甚至略微减小，因此细胞的体积随分裂次数增加而不断减小，C错误；
D、早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清，D正确．
故选：D．
【点评】本题考查早期胚胎培养、胚胎移植等知识，要求考生识记早期胚胎培养的具体过程及条件；识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的实质，能结合所学的知识准确判断各选项．
17．如图所示，下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质山羊的叙述，错误的是（ ）
A．良种公山羊采集的精子在培养液中获能后才能具备受精能力
B．人工授精后的受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎
D．胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
【考点】胚胎移植．
【专题】模式图；胚胎工程．
【分析】分析题图：甲表示卵母细胞的采集和培养；乙表示体外受精过程；丙表示早期胚胎培养过程；丁表示胚胎移植过程．
【解答】解：A、良种公山羊采集的精子在培养液中获能后才能具备受精能力，A正确；
B、人工授精后的受精卵发育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，B错误；
C、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎，C正确；
D、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，D正确．
故选：B．
【点评】本题结合图解，考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记体外受精的具体过程；识记胚胎移植的基本程序及意义，能正确分析题图，再结合所学的知识准确判断各选项．
18．下列关于生物技术安全性和伦理问题的叙述，错误的是（ ）
A．设计试管婴儿进行遗传病基因检测，但单纯选择胎儿性别是违法的
B．克隆人可冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念
C．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
D．利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人是合乎道德规范的
【考点】转基因生物的安全性问题；生物技术中的伦理问题．
【专题】正推法；生物技术的安全性和伦理问题．
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的正确做法是趋利避害，不能因噎废食．
2、对生物技术中的伦理问题的争论，中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人．
【解答】解：A、设计试管婴儿进行遗传病基因检测有利于预防遗传病的发生，但单纯选择胎儿性别是违法的，A正确；
B、克隆人可冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念，B正确；
C、转基因植物存在生物安全问题，如转基因植物的抗除草剂基因可能通过花粉传播而进入杂草中，C错误；
D、利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人属于设计试管婴儿技术，是合乎道德规范的，D正确．
故选：C．
【点评】本题考查转基因生物的安全性问题、生物技术中的伦理问题，要求考生识记转基因技术的安全性问题，了解人们对其引起的食物安全、生物安全及环境安全的争议；关注生物技术的伦理问题；识记生物武器的相关知识，能运用所学的知识准确判断各选项．
19．下列关于生态工程的叙述中，错误的是（ ）
A．生态工程是无消耗、多效益的工程
B．生态工程追求经济和生态的双赢
C．生态工程是生态学和工程学的结合
D．应用物质循环再生的原理
【考点】生态工程的概念及其目标．
【专题】正推法；生态工程．
【分析】1、生态工程是指人类应用生态学和系统学等学科的基本原理和方法，通过系统设计、调控和技术组装，对已被破坏的生态环境进行修复、重建，对造成环境污染和破坏的传统生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力，从而促进人类社会和自然环境的和谐发展．
2、生态工程建设目的：遵循自然界物质循环的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展．（少消耗、多效益、可持续）
【解答】解：A、生态工程是少消耗，而不是无消耗，A错误；
B、生态工程追求经济和生态的双赢，B正确；
C、生态工程是生态学和工程学的结合，C正确；
D、生态工程应用到了物质循环再生等原理，D正确．
故选：A．
【点评】本题考查生态工程的概念及目标，要求考生识记生态工程的概念、目标等基础知识，能结合所学的知识准确判断各选项．
20．为了解决人类生存和环境保护问题，实现可持续发展，当下措施及途径尚不可取的是（ ）
A．发展生态农业，改变传统的生产方式
B．利用现代生物技术，培育高产农作物新品种
C．大力发展“石油农业”，实现农业生产的高效益
D．城市生活垃圾要做到分类回收处理，实现废物资源化利用
【考点】生态工程的概念及其目标．
【专题】正推法；生态工程．
【分析】可持续发展是指在保护环境的条件下既满足当代人的需求，又不损害后代人的需求的发展模式．资源的持续利用和生态系统可持续性的保持是人类社会可持续发展的首要条件．可持续发展要求人们根据可持续性的条件调整自己的生活方式，在生态可能的范围内确定自己的消耗标准．因此，人类应做到合理开发和利用自然资源，保持适度的人口规模，处理好发展经济和保护环境的关系．
【解答】解：A、发展生态农业，可实现对物质和能量的多级利用，减少能源物质的利用，A正确；
B、利用现代生物技术，培育高产农作物新品种，获得更多的资源，B正确；
C、大力发展“石油农业”，会导致环境污染加剧，不利于可持续发展，C错误；
D、城市生活垃圾要做到分类回收处理，实现废物资源化利用，有利于可持续发展，D正确．
故选：C．
【点评】本题考查可持续发展观，应明确实现可持续发展，应做到合理开发和利用自然资源，保持适度的人口规模，处理好发展经济和保护环境的关系．
二、多项选择题（本部分包括5题，每题3分，共计15分．每题有不止一个选项符合题意．每题全选对者得3分，少选者1分，选错者不给分．）
21．如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是（ ）
A．A→B过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料，并加入一种引物
B．A→B过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶
C．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞
D．B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
【考点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的原理及技术．
【分析】多聚酶链式反应扩增DNA片段的原理是DNA复制原理，利用DNA分子热变性的原理通过控制温度来控制双链的解聚与结合，包括DNA分子的变性、复性和延伸阶段，需要四种游离的脱氧核糖核苷酸、两种引物和耐高温的DNA聚合酶；利用转基因技术培育新品种常用的受体细胞的受精卵；转基因植物的培育过程目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法．
【解答】解：A、A→B过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程，需要加入两种引物，A错误；
B、A→B过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶，B正确；
C、B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是受精卵细胞，C错误；
D、B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法，D正确．
故选：AC．
【点评】对于PCR技术的原理和应用及基因工程在育种中的应用是本题考查的重点．
22．下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（ ）
A．培养基中添加蔗糖作为能源物质
B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同
【考点】植物培养的条件及过程．
【专题】正推法；植物的组织培养．
【分析】植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的过程，决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要．脱分化过程要避光，否则会形成维管组织，不形成愈伤组织，而再分化过程需要光照．
同一植株不同细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同，如花粉细胞培养形成的愈伤组织细胞的基因只有体细胞的一半．
【解答】解：A、植物组织培养的培养基中需添加蔗糖，目的是提供营养，同时糖类是主要的能源物质，A正确；
B、培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化，B正确；
C、离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织，C正确；
D、同一植株不同细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同，如花粉细胞培养形成的愈伤组织细胞的基因只有体细胞的一半，D错误．
故选：ABC．
【点评】本题考查了植物组织培养技术的相关知识，属于考纲中识记、理解层次的要求，难度适中．考生要能够识记植物组织培养的培养基成分以及培养过程，并且花药离体培养也利用了植物组织培养技术，但这属于有性生殖，获得的是单倍体．
23．人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞．如图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程，下列有关叙述正确的是（ ）
A．人脐带间充质干细胞具有分裂和分化能力
B．过程①通常用胰蛋白酶处理
C．图中的培养液为液体培养基
D．细胞在培养瓶中培养一段时间会出现接触抑制
【考点】动物细胞与组织培养过程．
【分析】分析题图：图示表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程，其中1表示用胰蛋白酶处理使组织细胞分散开来；2表示离心过程；3表示加培养液制成细胞悬液；4表示细胞培养．据此答题．
【解答】解：A、人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞，说明人脐带间充质干细胞具有分裂和分化能力，A正确；
B、过程①通常用胰蛋白酶处理，使组织细胞分散成单个细胞，B正确；
C、培养动物细胞所用的培养液为液体培养基，C正确；
D、正常的动物细胞存在接触抑制，因此细胞在培养瓶中培养一段时间会出现接触抑制，D正确．
故选：ABCD．
【点评】本题结合培养人脐带间充质干细胞的大致过程图，考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程及条件，能结合题中和图中信息准确判断各选项．
24．梅花鹿胚胎移植试验的主要流程：①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④
→⑤胚胎移植→子代梅花鹿．下列相关叙述正确的是（ ）
A．①过程需要是注射有关激素，目的是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
B．③过程是以哺乳动物早期胚胎在输卵管或子宫中处于游离状态为前提
C．④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚
D．⑤过程成功的关键是移植的胚胎能与受体子宫内原有胚胎和谐共存
【考点】胚胎移植．
【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：
①对供、受体的选择和处理．选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种．并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理．
②配种或人工授精．
③对胚胎的收集、检查、培养或保存．配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）．对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段．直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存．
④对胚胎进行移植．
⑤移植后的检查．对受体母牛进行是否妊娠的检查．
【解答】解：A、①过程需要是注射有关激素（促性腺激素），目的是获得更多的卵原细胞，但所获得的卵原细胞还未完成减数分裂，A错误；
B、③是胚胎收集过程，该过程是以哺乳动物早期胚胎在输卵管或子宫中处于游离状态为前提，B正确；
C、④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚，C错误；
D、⑤过程成功的关键是移植的胚胎能与子宫建立正常联系，D错误．
故选：B．
【点评】本题考查胚胎移植的相关知识，要求考生识记胚胎移植的概念、生理学基础和基本程序，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．
25．如图表示某人工设计的生态系统，下列相关叙述正确的是（ ）
A．该生态系统经过能量的循环利用，提高了系统总能量的传递效率
B．通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用，有效地促进了系统中物质的循环利用
C．该系统的设计追求经济和生态的双赢
D．该生态系统遵循了“物质循环再生”原理
【考点】生态农业工程．
【专题】模式图；生态工程．
【分析】建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染．生态系统生物种类多，自我调节能力强，建立该生态系统遵循的原理主要是物质循环再生原理和生物多样性原理．
该图是人工生态系统图，利用生物学原理设置的生态农业；该生态系统内，葡萄蔬菜是生产者，通过光合作用固定太阳能，通过食物链把能量传给人猪等生物，同时为了提高能量和物质利用率，猪粪进沼气池，沼渣喂养蚯蚓蝇蛆，施农田等，实现了物质循环再生，提高了能量的利用率．
【解答】解：A、该生态系统经过能量的多级利用，提高了系统总能量的利用效率，但不能提高系统总能量的传递效率，A错误；
B、通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用，有效地促进了系统中物质的循环利用，B正确；
C、该系统的设计追求经济和生态的双赢，C正确；
D、该生态系统遵循了“物质循环再生”原理，D正确．
故选：BCD．
【点评】本题考查生态工程和生态农业的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．与传统农业相比，生态农业的优点有实现对物质再循环利用；实现对能量的多级利用，提高了能量的利用率；有利于生态环境的保护等．
三、非选择题（本部分包括8题，共计65分．）
26．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种．
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，从陆地棉和拟南芥的基因文库中获取酶D基因和转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切点如图所示．则用ClaⅠ和DNA连接酶处理两个基因后，可得到A端与D端（填图中字母）相连的融合基因．
（2）将上述融合基因插入如图所示Ti质粒的T-DNA中，构建基因表达载体（或“重组质粒”）并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上筛选培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液．
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞．
（4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株．用核酸分子杂交法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功转录．
【考点】基因工程的原理及技术．
【专题】图文信息类简答题；基因工程．
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、cDNA文库和基因文库的比较表：
文库类型
cDNA
基因组文库
文库大小
小
大
基因中启动子
无
有
基因中内含子
无
有
基因多少
某种生物的部分基因
某种生物的全部基因
物种间的基因交流
可以
部分基因可以
【解答】解：（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因．酶D基因的A端和转运肽基因的D端都含有限制酶ClaⅠ的切割位点，因此可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因．
（2）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．因此，将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建表达载体并导入农杆菌中．由图可知，标记基因是四环素抗性基因，因此将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液．
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜．
（4）检测目的基因是否成功导入受体细胞可采用DNA分子杂交技术．
故答案为：
（1）基因文库 ClaⅠDNA连接 A D
（2）基因表达载体（或“重组质粒”） 四环素
（3）利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞
（4）核酸分子杂交
【点评】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合图中信息准确答题．
27．
p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”是我国首创的基因治疗药物之一，是世界首个获准上市的基因治疗药物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．请回答下列问题：
（1）将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有质粒和λ噬菌体衍生物等．
（2）限制酶能将特定序列的核苷酸之间的磷酸二酯键切开，形成黏性末端或平末端．
（3）p53基因应插入载体的启动子和终止子之间，以便于基因的表达．
（4）p53基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是Taq酶．如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图，扩增过程需要2种引物．经3次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为1/4．
【考点】基因工程的原理及技术．
【专题】图文信息类简答题；基因工程．
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、PCR技术的原理：DNA复制．条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
【解答】解：（1）构建基因表达载体时，首先需要用限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．基因工程常用的载体有：动植物病毒、质粒、λ噬菌体衍生物等．
（2）限制酶具有专一性，其能识别将特定核苷酸序列并将特定位点之间的磷酸二酯键切开，形成黏性末端或平末端．
（3）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质．终止子也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端．因此，p53基因应插入载体的启动子和终止子之间，以便于基因的表达．
（4）PCR技术需使用Taq酶，扩增过程需要2种引物．PCR技术的原理是DNA的复制，根据DNA半保留复制特点，经3次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为2/23=1/4．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶
质粒和λ噬菌体衍生物等
（2）磷酸二酯 黏性末端或平
（3）启动子和终止子
（4）Taq酶 2 1/4
【点评】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．
28．野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能使用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．据图分析回答问题．
（1）①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括纤维素酶和果胶酶．
（2）②过程需要用聚乙二醇（PEG），其目的是诱导原生质体融合．
（3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程融合细胞愈伤组织幼苗
愈伤组织幼苗
．由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性，这是植物细胞全能性的表现．
（4）一般在培养基上培养24-48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁．可以取样，通过质壁分离实验来鉴别细胞壁是否已经再生．
（5）请说明运用此植物体细胞杂交法的最大的好处：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍．
【考点】植物体细胞杂交的过程．
【分析】据图分析，①是去壁过程，最常用的方法是酶解法，即用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁．②表示诱导原生质体融合的过程，诱导植物细胞融合的化学法一般是用聚乙二醇（PEG）为诱导剂，原因是细胞膜具有一定流动性．③表示再生细胞壁，标志着细胞融合成功，细胞壁的形成过程主要与细胞内的高尔基体有关．④和⑤分别表示植物组织培养过程中的脱分化和再分化过程．
【解答】解：（1）细胞壁由纤维素和果胶组成，可采用纤维素酶和果胶酶将其水解．
（2）细胞融合时常用聚乙二醇作为诱导剂，诱导原生质体融合．
（3）由④→⑤是杂种细胞经过脱分化、再分化形成幼苗的过程，体现植物细胞具有全能性．
（4）一般在培养基上培养24～48h后，大部分原生质体已再形成细胞壁．此时取样，利用质量分数为25%的蔗糖溶液以及其他用具，通过质壁分离实验来鉴别细胞壁是否已经再生．
（5）植物体细胞杂交的优点是：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合的范围．
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶酶
（2）诱导原生质体融合
（3）融合细胞愈伤组织幼苗
植物细胞全能性
（4）质壁分离
（5）克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍
【点评】本题结合植物体细胞杂交过程图，考查植物体细胞杂交的相关知识，意在考查考生的识图能力和分析能力，要求学生熟记杂交流程图，难度一般．
29．
如图是单克隆抗体制备过程示意图．
（1）图中B淋巴细胞的特点是能分泌特异性抗体，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是细胞膜的流动性．
（2）用特定的选择培养基筛选符合要求的细胞时，在该培养基上未融合的亲本细胞和融合的，具有同种核的细胞会死亡，融合的杂种细胞能生长；抗体检测时，符合要求的细胞是①②③的②（填序号），经过抗体检测以后，继续培养的细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（3）在奶牛饲养的过程中，过量使用庆大霉素会导致牛奶中药物残留过多，人长期食用这样的牛奶会影响身体健康．利用抗庆大霉素的单克隆抗体，可以检测牛奶中庆大霉素的含量．
①这种检测方法依据的原理是抗原-抗体的特异性结合．
②这种检测方法具有特异性强，灵敏度高优点．
【考点】单克隆抗体的制备过程．
【分析】单克隆抗体制备流程
（1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2）得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体．
【解答】解：（1）图中B淋巴细胞是已经过免疫的，特点是能分泌特异性抗体，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原理是细胞膜的流动性．
（2）用特定的选择培养基筛选符合要求的细胞时，在该培养基上未融合的亲本胞和融合的，具有同种核的细胞会死亡，融合的杂种细胞能生长；抗体检测时，能和特异性抗原相结合的抗体才是符合要求的，如②，经过抗体检测以后，继续培养的细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（3）利用抗庆大霉素的单克隆抗体，可以检测牛奶中庆大霉素的含量．
①这种检测方法依据的原理是抗原-抗体的特异性结合．
②这种检测方法具有特异性强，灵敏度高的优点
故答案为：
（1）能分泌特异性抗体
细胞膜的流动性
（2）未融合的亲本
融合的，具有同种核的
融合的杂种
②
（3）①抗原-抗体的特异性结合
②特异性强，灵敏度高
【点评】本题考查了单克隆抗体的制备过程和动物细胞培养等相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．
30．科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞（GiPS细胞）．如图是利用GiPS细胞对镰刀形细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程：
请据图回答：
（1）过程①中，在培养液中加入胰蛋白酶使上皮组织细胞彼此分散，若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的正常的二倍体核型（遗传物质）不发生变化．
（2）科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理，促使已经（高度）分化的成纤维细胞“重新编程”产生GiPS细胞，这些GiPS细胞与囊胚中的内细胞团细胞性质相同．
（3）过程③中，将重组质粒导入GiPS细胞所用的方法是显微注射法．
（4）若利用GiPS细胞诱导分化形成早期胚胎（桑椹胚、囊胚），再经胚胎移植技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
（5）GiPS细胞经体外诱导分化，可以直接培育出人造组织器官．图中④过程可在培养液中添加分化诱导因子因子使其定向分化成造血干细胞．培育出的骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是不出现免疫排斥反应．
【考点】基因工程的原理及技术；动物胚胎发育的过程；胚胎移植．
【专题】图文信息类简答题；基因工程；胚胎工程．
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、细胞开始分化的时期是：囊胚期（其中内细胞团细胞具有全能性，为胚胎干细胞）．
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）．
【解答】解：（1）若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的正常的二倍体核型．
（2）成纤维上皮细胞已经高度分化；CiPS细胞与囊胚中内细胞团细胞性质相同，具有发育的全能性．
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（4）若利用CiPS细胞诱导分化形成早期胚胎，分化程度低，全能性高；再经胚胎移植技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
（5）在培养液中添加分化诱导因子可使GiPS细胞定向分化成造血干细胞．图中培育骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是不出现免疫排斥反应．
故答案为：
（1）正常的二倍体核型（遗传物质）
（2）（高度）分化 内细胞团
（3）显微注射法
（4）早期胚胎（桑椹胚、囊胚） 胚胎移植
（5）分化诱导因子 不出现免疫排斥反应
【点评】本题考查动物细胞培养、胚胎干细胞的特点、基因过程、胚胎工程等相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，难度不大．
31．图1为动物的克隆研究过程，其中Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a～h代表有关结构或个体．
（1）Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ过程证明了供体细胞的核（哺乳动物细胞核）具有全能性．
（2）过程Ⅴ取出的细胞f是胚胎干细胞，它在功能上的特点是具有发育的全能性，
（3）动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加抗生素．
（4）Ⅳ过程用的技术是胚胎移植．若d为囊胚时期，可以取滋养层细胞对克隆早期胚胎进行性别鉴定．
（5）若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像提供细胞核的绵羊吗？不是．原因是卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状．
【考点】动物细胞与组织培养过程；动物体细胞克隆；动物胚胎发育的过程；胚胎干细胞的来源及分化．
【专题】图文信息类简答题；克隆技术；胚胎工程．
【分析】分析题图：图示为克隆研究过程，其中a表示去核卵细胞；c为重组细胞；d为桑椹胚；e为代孕母羊；f为胚胎干细胞；g表示克隆羊；h表示胚胎干细胞分化形成的特定细胞；Ⅰ、Ⅱ为核移植过程；Ⅲ为早期细胞胚胎培养过程；Ⅳ为胚胎移植过程；Ⅴ表示从桑椹胚中取出胚胎干细胞；Ⅵ表示妊娠；Ⅶ表示胚胎干细胞体外培养．
【解答】解：（1）Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ是克隆羊的诞生过程，该过程证明了供体细胞的核（哺乳动物细胞核）具有全能性．
（2）过程Ⅴ取出的细胞f是胚胎干细胞，它在功能上具有发育的全能性．
（3）动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加抗生素．
（4）Ⅳ为胚胎移植过程．若d为囊胚时期，可以取滋养层细胞对克隆早期胚胎进行性别鉴定．
（5）克隆羊的细胞核遗传物质来自供体，而细胞质遗传物质几乎都来自卵细胞，且卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状，因此若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状不全部像提供细胞核的绵羊．
故答案为：
（1）供体细胞的核（哺乳动物细胞核）具有全能性
（2）胚胎干细胞 具有发育的全能性
（3）抗生素
（4）胚胎移植 滋养层细胞
（5）不是 卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状
【点评】本题结合克隆研究过程图，考查动物细胞核移植技术、胚胎移植、胚胎干细胞等知识，要求考生识记动物细胞核移植的概念和胚胎移植的过程，能准确判断图示过程或结构的名称；识记胚胎干细胞的特点，能结合所学的知识答题．
32．为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答有关问题：
（1）在实际操作过程中为了使B牛超数排卵，需要注射促性腺激素，其产生的卵母细胞要在体外培养至减数第二次分裂中期（时期）才具备体外受精能力．
（2）对重构卵发育成的囊胚采用胚胎分割技术，可获得更多基因型完全相同的F牛，该技术具体操作时的注意要点是对内细胞团进行均等分割．
（3）方法Ⅰ中，若为体内受精则从供体母牛B体内获取胚胎的方法称为冲卵；胚胎移植前对B牛和D牛要进行同期发情处理，保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致．
（4）培育克隆牛F时使用的不同于试管牛E的生物技术是细胞核移植，试管牛E的生殖方式属于有性生殖．
【考点】胚胎移植；胚胎分割移植．
【专题】图文信息类简答题；胚胎工程．
【分析】分析题图：图示为加快优良种牛繁殖速度的两种方法，方法Ⅰ采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的试管牛E属于有性生殖的产物；方法Ⅱ采用了体细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的克隆牛F属于无性生殖的产物．
【解答】解：（1）对良种母畜注射促性腺激素可促使其超数排卵；产生的卵母细胞要在体外培养至减数第二次分裂中期才具备体外受精能力．
（2）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此对重构卵发育成的囊胚采用胚胎分割技术，可获得更多基因型完全相同的E牛；胚胎分割时，应注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．
（3）方法Ⅰ中，若为体内受精则从供体母牛B体内获取胚胎的方法称为冲卵；胚胎移植前对B牛和D牛要进行同期发情处理，保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致．
（4）图解中看出，试管牛和克隆牛的培育过程中均用到了动物细胞培养（早期胚胎培养）、胚胎移植技术，而培育克隆牛F时还利用了核移植技术．试管牛E的形成存在精子和卵细胞的受精作用，因此属于有性生殖．
故答案为：
（1）促性腺激素 减数第二次分裂中期
（2）胚胎分割 对内细胞团进行均等分割
（3）冲卵 同期发情
（4）细胞核移植 有性生殖
【点评】本题结合试管牛和克隆牛培育过程图，考查动物体细胞核移植技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术等知识，要求考生识记动物体细胞核移植的概念及过程，明确试管动物的产生属于有性生殖；识记胚胎分割的概念，掌握胚胎分割的注意点．
33．
我国珠江三角洲地区，为充分利用土地，创造了一种挖深鱼塘、垫高基田、塘基植桑、塘内养鱼的高效人工生态系统--桑基鱼塘，如图所示．据图回答有关问题：
（1）生态工程遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学与工程学原理等．
（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程实现了物质和能量的多级利用．
（3）蚕沙是蚕食桑叶后排泄出来的粪便，蚕沙富含粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养物质，是上等的肥料，也是猪、鱼、羊的理想饲料．某种鱼专以蚕沙为食，假设某一时间段蚕从上一个营养级固定的能量为1.5×105kJ，那么这部分能量最多有0kJ被这种鱼所同化．
（4）该生态系统向外输出的物质主要有蚕丝、鱼、糖等．
（5）该生态系统与一般的自然生态系统相比较，抵抗力稳定性较低，所以需要人们不断输入物质与能量．
（6）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有减轻水患、提高经济效益、减少环境污染等（至少答2点）．
【考点】生态农业工程；生态工程依据的生态学原理．
【专题】图文信息类简答题；生态工程．
【分析】生态农业是一个农业生态经济复合系统，将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益．它也是农、林、牧、副、渔各业综合起来的大农业，又是农业生产、加工、销售综合起来，适应市场经济发展的现代农业．生态工程的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学和工程学原理．
【解答】解：（1）生态工程遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学与工程学原理等．
（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程实现了物质的循环再生和能量的多级利用．
（3）由于鱼利用的是蚕粪，故属于分解者，所以假设某一时间段蚕从上一个营养级固定的能量为1.5×105kJ，那么这部分能量最多有0kJ被这种鱼所同化．
（4）据图示可知，该生态系统向外输出的物质主要有蚕丝、鱼、糖等．
（5）该生态系统与一般的自然生态系统相比较，由于生物种类较少，故抵抗力稳定性较低，所以需要人们不断输入物质与能量．
（6）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有减轻水患、提高经济效益、减少环境污染等．
故答案为：
（1）物质循环再生原理 物种多样性原理 协调与平衡原理
（2）物质和能量的多级利用
（3）0
（4）蚕丝、鱼、糖等
（5）抵抗力
（6）减轻水患、提高经济效益、减少环境污染等
【点评】本题主要考查学生的分析和理解能力．与传统农业相比，生态农业的优点有实现对物质再循环利用；实现对能量的多级利用，提高了能量的利用率；有利于生态环境的保护等．
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