甘肃省酒泉市四校2024-2025学年高二下学期4月期中联考生物试卷（含答案）
文档属性
| 名称 | 甘肃省酒泉市四校2024-2025学年高二下学期4月期中联考生物试卷（含答案） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 1.6MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 通用版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2025-09-11 15:42:04 | ||
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文档简介
甘肃省酒泉市四校联考2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题
一、单选题
1．酒酿是一种传统发酵食品，香甜醇美，其制作流程为：糯米洗净→蒸熟→冷却至30℃→与酒曲（含根霉、酵母菌等微生物）混匀→24℃～28℃发酵2天（包括糖化和酒化）→保存。下列叙述错误的是（ ）
A．混匀使微生物与糯米充分接触
B．糖化过程主要依赖于根霉分泌的酶
C．发酵时应加盖密封以利于酒化
D．常温保存使酒酿保持甜味浓郁
2．获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列相关叙述正确的是（ ）
A．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子
B．分别对实验操作的空间和操作者的衣物、手进行灭菌和消毒
C．为了避免周围环境中微生物的污染，微生物接种应在酒精灯火焰旁进行
D．灼烧灭菌、干热灭菌都属于无菌技术，紫外线照射不属于
3．自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中氮气的细菌。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离实验，相关实验流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．该实验中取样获取的土壤一般取自表层土壤
B．图中纯化培养固氮菌时的方法是稀释涂布平板法
C．图中所用培养基不需要添加氮源，培养基的pH应在灭菌前调制成中性或弱碱性
D．结合图示并通过计算可知每克土壤中含有的自生固氮菌数目约为1.8×108个
4．聚乙烯醇（PVA）是难降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶降解PVA．PVA可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色消失，形成透明圈。下图为PVA分解菌的筛选过程，其中SG培养基为一种分离培养基，①~⑤表示过程，Ⅰ~Ⅲ表示菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．甲培养基为添加PVA和碘的选择培养基，可筛选出PVA分解菌
B．过程③应选菌落Ⅱ中的菌种进行接种，该菌种分解PVA的能力最强
C．若按图中④所示的接种方法接种，接种环需要灼烧5次
D．利用以PVA为唯一碳源的丙培养基对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养
5．植物组织培养是植物细胞工程的基本技术，下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（ ）
A．取兰花的芽或茎尖作为外植体是因为这些部位的组织细胞分化程度低，全能性也低
B．接种外植体后先在暗处培养一段时间，再在光下培养
C．茎尖材料消毒时，需用酒精和次氯酸钠混合液冲洗
D．生根试管苗在炼苗后，应连带培养基栽植于肥沃疏松基质中
6．郁金香是甘肃省花，某研究员通过植物组织培养技术对郁金香种苗进行快速繁殖及脱毒研究，若取郁金香茎段进行组织培养，茎段未能诱导出愈伤组织，其原因不包括（ ）
A．茎段接种时倒插
B．激素配比不合理
C．外植体消毒过度
D．培养时遮光处理
7．DHA俗称脑黄金，是构成人脑神经细胞膜的成分，若摄入不足会造成心脑血管方面的疾病。科研人员利用富含DHA但生长缓慢的绿色巴夫藻和不含DHA但生长迅速的四鞭藻，培育出DHA含量高又生长迅速的融合藻株，下列有关培育过程的叙述正确的是（ ）
A．细胞融合之前必须用胰蛋白酶处理两种藻，获得有活力的原生质体
B．两种原生质体融合成功的标志是观察到细胞核融合
C．细胞融合实验完成后，融合体系中含有的细胞类型有3种
D．通过第一次筛选获得的融合藻株还需进行克隆化培养和DHA检测
8．通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面积烧伤时具有较好的应用前景，下列叙述正确的是（ ）
A．由于对细胞所需的营养物质未全部研究清楚，培养时通常加入血清
B．选择非患者细胞进行培养获得人造皮肤，可以降低免疫排斥的发生
C．细胞培养获得人造皮肤的过程中，可加入纤维素酶处理贴壁的细胞
D．细胞培养时需置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱
9．我国科学家将iPS细胞注射到囊胚中得到存活并有生殖能力的小鼠。下列叙述错误的是（ ）
A．iPS细胞能分化成多种组织、器官
B．可用iPS细胞治疗小鼠的镰状细胞贫血
C．定期更换培养液有利于满足iPS细胞对生长代谢的营养需求
D．iPS细胞被称为诱导多能干细胞，均是由成纤维细胞转化而来的
10．乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球公共卫生的重大挑战，目前尚无彻底治愈的方案，现阶段治疗的主要目标是实现功能性治愈（HBsAg为其标志性抗原）。抗HBV单克隆抗体的研究不仅有助于深入解析HBV感染机制，还能加深对机体免疫反应的理解，并为疫苗开发提供重要支持。下列叙述正确的是（ ）
A．血清中检测到HBsAg和HBV-DNA，说明HBV在血浆中增殖
B．制备抗HBsAg单克隆抗体需骨髓瘤细胞和T细胞融合获得杂种细胞
C．制备的抗HBsAg单克隆抗体可使被HBV感染的肝细胞裂解死亡
D．抗HBsAg单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可用于人体血液中HBV的检测
11．在部分地区，牛的胚胎移植技术已进入生产应用阶段，胚胎移植时受体母牛须具备的条件是（ ）
A．具有产奶量较高等优良性状
B．与供体母牛的遗传特性一致
C．免疫力正常且具有健康体质
D．与供体母牛的繁殖潜能相当
12．一种能实现“线粒体置换”目的的技术原理如图所示，该技术可预防人类线粒体遗传病传给子代。下列叙述错误的是（ ）
A．患者第一极体基本不携带线粒体遗传病的致病基因
B．重组次级卵母细胞膜外极体的遗传物质与患者相同
C．可将受精卵培养至囊胚期时移植到患者的子宫中
D．精子体外获能处理后才能与重组次级卵母细胞受精
13．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的部分操作流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A．将图1中的研磨液过滤后保留沉淀
B．图2过程，用玻璃棒进行快速交叉搅拌会使DNA析出更快
C．图2析出得到的白色丝状物只能溶于2 mol/L的NaCl溶液
D．图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂
14．PCR是“聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）”的英文简写，在基因工程的四个主要阶段中一般不会用到PCR技术的是（ ）
A．目的基因的获取和扩增
B．检测基因表达载体构建是否成功
C．将含有目的基因的表达载体导入受体细胞
D．目的基因的检测与鉴定（是否导入及其表达情况）
15．限制酶HindⅢ和Xho I的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG，下列相关叙述正确的是（ ）
A．两种限制酶能识别单链DNA分子并特异性切割
B．两种限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCT
C．两种限制酶切割时断开的化学键不完全相同
D．操作中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
16．研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述正确的是（ ）
A．该产品是通过直接改造胰岛素来生产的
B．改变氨基酸的种类不会影响胰岛素的空间结构
C．可通过定向诱导胰岛素基因碱基增添达到改造目的
D．胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反
二、解答题
17．维生素K2在预防骨质疏松、心血管疾病等方面具有重要作用。科研人员以淀粉芽孢杆菌（GSA-184）为研究对象，通过优化发酵工艺，提高了维生素K2的产量。请回答下列问题：
(1)从土壤中筛选芽孢杆菌时，利用的培养基成分含有酵母浸粉、蛋白胨、NaCl和水等。其中蛋白胨提供的主要营养为 和维生素等。
(2)科研人员进行了优化培养基碳源的实验，实验结果如图1所示。据图判断，若对菌株GSA-184扩大培养，所用培养基的最佳碳源是 ；若想大量获取维生素K2，所用培养基的最佳碳源是 。
(3)科研人员探究了菌株GSA-184在不控制pH和控制pH为7.0条件下的发酵情况，实验结果如图2和图3所示。两种条件下的溶解氧在发酵3h内从100%附近急剧下降到2%附近，说明 ；在图2中，发酵80h后溶解氧开始从2%附近逐渐上升，可能的原因是 。对比图2和图3， 条件下有助于维持菌体的活性，从而提高维生素K2产量。
18．铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热的功效，其主要成分石斛多糖具有提高机体免疫力的功能。自然条件下其繁殖力很低，利用植物组织培养技术快速繁殖铁皮石斛是解决其资源短缺的有效途径。相关的培育流程如图所示，数字代表相关过程。回答下列问题：
(1)过程①是 ，该过程进行前一般需要用 法对使用的培养基进行灭菌。
(2)继代培养是继初代培养之后连续数代的扩培过程，旨在繁殖出相当数量的无根苗，最后能达到边繁殖边生根的目的。该过程 （填“需要”或“不需要”）光照，所用的培养基与②过程的主要区别是 。
(3)通过植物组织培养技术繁殖铁皮石斛，属于 繁殖，这种繁殖方式的优点是 。
(4)若要通过植物细胞培养技术生产石斛多糖，需将外植体培养到 （填结构名称）阶段。该技术不占用耕地，几乎不受 等的限制，因此对于社会、经济、环境保护具有重要意义。
19．下图是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）。naive干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。请回答下列问题：
(1)猴子芽体相当于 期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的 部位，将来发育成 。
(2)过程④⑤之后形成的胚胎是 ，由该胚胎表面细胞向内迁移形成 。
(3)过程⑥是指 ，需对代孕母猴进行 处理，目的是 。
(4)primed干细胞与神经干细胞相比，前者的特点是 。
20．人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，每个细胞最多只能产生100~1000个干扰素分子，而利用基因工程技术改造的工程菌发酵生产，在1~2天内每个菌体能产生20万个干扰素分子。回答下列问题：
(1)基因工程的核心步骤是 ，此步骤需要的工具酶是 ，其作用部位都是磷酸二酯键。图中四环素抗性基因的作用是 。
(2)PCR技术所依据的原理是 。在PCR反应体系中一般需要加入Mg2+的原因是 。
(3)在基因工程操作中，将重组质粒导入受体细胞时要用含 溶液处理，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态）。研究人员选择工程菌时选择了酵母菌而没有选择大肠杆菌，理由是因为酵母菌 。
(4)干扰素基因在工程菌中也能合成人体所需的干扰素，说明生物界中几乎所有生物 。
21．白介素—10（IL-10）是一种多功能的细胞因子，主要参与机体的免疫调节和炎症反应，能抑制肿瘤的生长和转移。科研人员利用大肠杆菌构建人IL-10工程菌，下图为目的基因IL-10的部分序列。请回答下列问题：
目的基因
5'—ATGCACAGCTCA………ATACGAAACTGA—3'
3'—TACGTGTCGAGT………TATGCTTTGACT—5'
(1)科研人员可以从基因文库中获取人IL-10cDNA基因序列，也可以从相应细胞中提取mRNA后，在 酶的作用下获得cDNA．
(2)利用PCR技术进行目的基因的扩增，应设计的一对引物分别是 和 （写出引物序列的前9个核苷酸，方向由5'到3'）。
(3)下图显示了IL-10基因附近的限制酶切割位点、pET-44质粒的模式图及其相关的限制酶切割位点，已知LacZ基因的表达产物为半乳糖苷酶，该酶催化X-gal分解产生蓝色物质，进而使菌落呈现蓝色，否则菌落表现白色。科研人员将转化后的宿主菌接种在含有X-gal和氨苄青霉素的培养基上筛选阳性转化子。据图分析，完答下列问题：
①要将IL-10基因整合到大肠杆菌pET-44质粒中，应选用的两种限制酶是 。
②经①中两种限制酶的处理后，阳性转化子的菌落呈现 色，理由是 。
③若某科研小组仅选用NdeⅠ进行酶切处理，含有重组质粒的菌落 （填“能”“不能”或“不确定”）表达产生IL-10蛋白。
④最初翻译成的IL-10蛋白包含178个氨基酸，需切除18个氨基酸残基构成的信号肽序列，才能产生成熟的IL-10蛋白。不能从大肠杆菌得到成熟的IL-10蛋白，原因是 。
参考答案
1．D
2．C
3．D
4．B
5．B
6．D
7．D
8．A
9．D
10．D
11．C
12．B
13．D
14．C
15．D
16．D
17．(1)碳源、氮源
(2) L-阿拉伯糖 甘油
(3) 该菌株为需氧型，发酵初期菌体繁殖耗氧量很大 发酵罐内的pH较高，菌体活性降低且菌体数量下降，耗氧量逐渐减少 稳定而合理的pH
18．(1) 接种 高压蒸汽灭菌
(2) 需要 生长素和细胞分裂素的比例不同
(3) 无性 能保持亲本的优良性状、繁殖速度快、可大量培养脱毒苗等
(4) 愈伤组织 季节、气候
19．(1) 囊胚 内细胞团 胎儿各种组织
(2) 原肠胚 内胚层
(3) 胚胎移植 同期发情 使供体和受体的生殖器官生理变化同步，为移入受体的胚胎提供相同的生理环境
(4)具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成机体所有的组织和器官甚至个体的潜能
20．(1) 构建基因表达载体 限制酶和DNA连接酶 作为标记基因，筛选重组质粒
(2) DNA半保留复制 Mg2+能激活DNA聚合酶
(3) Ca2+ 含有内质网和高尔基体等多种细胞器，能对蛋白质进行加工
(4)都共用一套遗传密码
21．(1)逆转录
(2) 5'—ATGCACAGC—3' 5'—TCAGTTTCG—3'
(3) NdeⅠ和XhoⅠ 白 重组质粒LacZ基因被破坏，无法正常表达合成半乳糖苷酶，进而X-gal不能被分解产生蓝色物质，菌落呈现白色 不确定 蛋白质的加工修饰发生在内质网和高尔基体中，而原核生物大肠杆菌没有内质网和高尔基体等细胞器，因而不能对多肽链进行加工，无法获得成熟的IL-10蛋白
一、单选题
1．酒酿是一种传统发酵食品，香甜醇美，其制作流程为：糯米洗净→蒸熟→冷却至30℃→与酒曲（含根霉、酵母菌等微生物）混匀→24℃～28℃发酵2天（包括糖化和酒化）→保存。下列叙述错误的是（ ）
A．混匀使微生物与糯米充分接触
B．糖化过程主要依赖于根霉分泌的酶
C．发酵时应加盖密封以利于酒化
D．常温保存使酒酿保持甜味浓郁
2．获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列相关叙述正确的是（ ）
A．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子
B．分别对实验操作的空间和操作者的衣物、手进行灭菌和消毒
C．为了避免周围环境中微生物的污染，微生物接种应在酒精灯火焰旁进行
D．灼烧灭菌、干热灭菌都属于无菌技术，紫外线照射不属于
3．自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中氮气的细菌。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离实验，相关实验流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．该实验中取样获取的土壤一般取自表层土壤
B．图中纯化培养固氮菌时的方法是稀释涂布平板法
C．图中所用培养基不需要添加氮源，培养基的pH应在灭菌前调制成中性或弱碱性
D．结合图示并通过计算可知每克土壤中含有的自生固氮菌数目约为1.8×108个
4．聚乙烯醇（PVA）是难降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶降解PVA．PVA可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色消失，形成透明圈。下图为PVA分解菌的筛选过程，其中SG培养基为一种分离培养基，①~⑤表示过程，Ⅰ~Ⅲ表示菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．甲培养基为添加PVA和碘的选择培养基，可筛选出PVA分解菌
B．过程③应选菌落Ⅱ中的菌种进行接种，该菌种分解PVA的能力最强
C．若按图中④所示的接种方法接种，接种环需要灼烧5次
D．利用以PVA为唯一碳源的丙培养基对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养
5．植物组织培养是植物细胞工程的基本技术，下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（ ）
A．取兰花的芽或茎尖作为外植体是因为这些部位的组织细胞分化程度低，全能性也低
B．接种外植体后先在暗处培养一段时间，再在光下培养
C．茎尖材料消毒时，需用酒精和次氯酸钠混合液冲洗
D．生根试管苗在炼苗后，应连带培养基栽植于肥沃疏松基质中
6．郁金香是甘肃省花，某研究员通过植物组织培养技术对郁金香种苗进行快速繁殖及脱毒研究，若取郁金香茎段进行组织培养，茎段未能诱导出愈伤组织，其原因不包括（ ）
A．茎段接种时倒插
B．激素配比不合理
C．外植体消毒过度
D．培养时遮光处理
7．DHA俗称脑黄金，是构成人脑神经细胞膜的成分，若摄入不足会造成心脑血管方面的疾病。科研人员利用富含DHA但生长缓慢的绿色巴夫藻和不含DHA但生长迅速的四鞭藻，培育出DHA含量高又生长迅速的融合藻株，下列有关培育过程的叙述正确的是（ ）
A．细胞融合之前必须用胰蛋白酶处理两种藻，获得有活力的原生质体
B．两种原生质体融合成功的标志是观察到细胞核融合
C．细胞融合实验完成后，融合体系中含有的细胞类型有3种
D．通过第一次筛选获得的融合藻株还需进行克隆化培养和DHA检测
8．通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面积烧伤时具有较好的应用前景，下列叙述正确的是（ ）
A．由于对细胞所需的营养物质未全部研究清楚，培养时通常加入血清
B．选择非患者细胞进行培养获得人造皮肤，可以降低免疫排斥的发生
C．细胞培养获得人造皮肤的过程中，可加入纤维素酶处理贴壁的细胞
D．细胞培养时需置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱
9．我国科学家将iPS细胞注射到囊胚中得到存活并有生殖能力的小鼠。下列叙述错误的是（ ）
A．iPS细胞能分化成多种组织、器官
B．可用iPS细胞治疗小鼠的镰状细胞贫血
C．定期更换培养液有利于满足iPS细胞对生长代谢的营养需求
D．iPS细胞被称为诱导多能干细胞，均是由成纤维细胞转化而来的
10．乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球公共卫生的重大挑战，目前尚无彻底治愈的方案，现阶段治疗的主要目标是实现功能性治愈（HBsAg为其标志性抗原）。抗HBV单克隆抗体的研究不仅有助于深入解析HBV感染机制，还能加深对机体免疫反应的理解，并为疫苗开发提供重要支持。下列叙述正确的是（ ）
A．血清中检测到HBsAg和HBV-DNA，说明HBV在血浆中增殖
B．制备抗HBsAg单克隆抗体需骨髓瘤细胞和T细胞融合获得杂种细胞
C．制备的抗HBsAg单克隆抗体可使被HBV感染的肝细胞裂解死亡
D．抗HBsAg单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可用于人体血液中HBV的检测
11．在部分地区，牛的胚胎移植技术已进入生产应用阶段，胚胎移植时受体母牛须具备的条件是（ ）
A．具有产奶量较高等优良性状
B．与供体母牛的遗传特性一致
C．免疫力正常且具有健康体质
D．与供体母牛的繁殖潜能相当
12．一种能实现“线粒体置换”目的的技术原理如图所示，该技术可预防人类线粒体遗传病传给子代。下列叙述错误的是（ ）
A．患者第一极体基本不携带线粒体遗传病的致病基因
B．重组次级卵母细胞膜外极体的遗传物质与患者相同
C．可将受精卵培养至囊胚期时移植到患者的子宫中
D．精子体外获能处理后才能与重组次级卵母细胞受精
13．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的部分操作流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A．将图1中的研磨液过滤后保留沉淀
B．图2过程，用玻璃棒进行快速交叉搅拌会使DNA析出更快
C．图2析出得到的白色丝状物只能溶于2 mol/L的NaCl溶液
D．图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂
14．PCR是“聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）”的英文简写，在基因工程的四个主要阶段中一般不会用到PCR技术的是（ ）
A．目的基因的获取和扩增
B．检测基因表达载体构建是否成功
C．将含有目的基因的表达载体导入受体细胞
D．目的基因的检测与鉴定（是否导入及其表达情况）
15．限制酶HindⅢ和Xho I的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG，下列相关叙述正确的是（ ）
A．两种限制酶能识别单链DNA分子并特异性切割
B．两种限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCT
C．两种限制酶切割时断开的化学键不完全相同
D．操作中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
16．研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述正确的是（ ）
A．该产品是通过直接改造胰岛素来生产的
B．改变氨基酸的种类不会影响胰岛素的空间结构
C．可通过定向诱导胰岛素基因碱基增添达到改造目的
D．胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反
二、解答题
17．维生素K2在预防骨质疏松、心血管疾病等方面具有重要作用。科研人员以淀粉芽孢杆菌（GSA-184）为研究对象，通过优化发酵工艺，提高了维生素K2的产量。请回答下列问题：
(1)从土壤中筛选芽孢杆菌时，利用的培养基成分含有酵母浸粉、蛋白胨、NaCl和水等。其中蛋白胨提供的主要营养为 和维生素等。
(2)科研人员进行了优化培养基碳源的实验，实验结果如图1所示。据图判断，若对菌株GSA-184扩大培养，所用培养基的最佳碳源是 ；若想大量获取维生素K2，所用培养基的最佳碳源是 。
(3)科研人员探究了菌株GSA-184在不控制pH和控制pH为7.0条件下的发酵情况，实验结果如图2和图3所示。两种条件下的溶解氧在发酵3h内从100%附近急剧下降到2%附近，说明 ；在图2中，发酵80h后溶解氧开始从2%附近逐渐上升，可能的原因是 。对比图2和图3， 条件下有助于维持菌体的活性，从而提高维生素K2产量。
18．铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热的功效，其主要成分石斛多糖具有提高机体免疫力的功能。自然条件下其繁殖力很低，利用植物组织培养技术快速繁殖铁皮石斛是解决其资源短缺的有效途径。相关的培育流程如图所示，数字代表相关过程。回答下列问题：
(1)过程①是 ，该过程进行前一般需要用 法对使用的培养基进行灭菌。
(2)继代培养是继初代培养之后连续数代的扩培过程，旨在繁殖出相当数量的无根苗，最后能达到边繁殖边生根的目的。该过程 （填“需要”或“不需要”）光照，所用的培养基与②过程的主要区别是 。
(3)通过植物组织培养技术繁殖铁皮石斛，属于 繁殖，这种繁殖方式的优点是 。
(4)若要通过植物细胞培养技术生产石斛多糖，需将外植体培养到 （填结构名称）阶段。该技术不占用耕地，几乎不受 等的限制，因此对于社会、经济、环境保护具有重要意义。
19．下图是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）。naive干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。请回答下列问题：
(1)猴子芽体相当于 期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的 部位，将来发育成 。
(2)过程④⑤之后形成的胚胎是 ，由该胚胎表面细胞向内迁移形成 。
(3)过程⑥是指 ，需对代孕母猴进行 处理，目的是 。
(4)primed干细胞与神经干细胞相比，前者的特点是 。
20．人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，每个细胞最多只能产生100~1000个干扰素分子，而利用基因工程技术改造的工程菌发酵生产，在1~2天内每个菌体能产生20万个干扰素分子。回答下列问题：
(1)基因工程的核心步骤是 ，此步骤需要的工具酶是 ，其作用部位都是磷酸二酯键。图中四环素抗性基因的作用是 。
(2)PCR技术所依据的原理是 。在PCR反应体系中一般需要加入Mg2+的原因是 。
(3)在基因工程操作中，将重组质粒导入受体细胞时要用含 溶液处理，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态）。研究人员选择工程菌时选择了酵母菌而没有选择大肠杆菌，理由是因为酵母菌 。
(4)干扰素基因在工程菌中也能合成人体所需的干扰素，说明生物界中几乎所有生物 。
21．白介素—10（IL-10）是一种多功能的细胞因子，主要参与机体的免疫调节和炎症反应，能抑制肿瘤的生长和转移。科研人员利用大肠杆菌构建人IL-10工程菌，下图为目的基因IL-10的部分序列。请回答下列问题：
目的基因
5'—ATGCACAGCTCA………ATACGAAACTGA—3'
3'—TACGTGTCGAGT………TATGCTTTGACT—5'
(1)科研人员可以从基因文库中获取人IL-10cDNA基因序列，也可以从相应细胞中提取mRNA后，在 酶的作用下获得cDNA．
(2)利用PCR技术进行目的基因的扩增，应设计的一对引物分别是 和 （写出引物序列的前9个核苷酸，方向由5'到3'）。
(3)下图显示了IL-10基因附近的限制酶切割位点、pET-44质粒的模式图及其相关的限制酶切割位点，已知LacZ基因的表达产物为半乳糖苷酶，该酶催化X-gal分解产生蓝色物质，进而使菌落呈现蓝色，否则菌落表现白色。科研人员将转化后的宿主菌接种在含有X-gal和氨苄青霉素的培养基上筛选阳性转化子。据图分析，完答下列问题：
①要将IL-10基因整合到大肠杆菌pET-44质粒中，应选用的两种限制酶是 。
②经①中两种限制酶的处理后，阳性转化子的菌落呈现 色，理由是 。
③若某科研小组仅选用NdeⅠ进行酶切处理，含有重组质粒的菌落 （填“能”“不能”或“不确定”）表达产生IL-10蛋白。
④最初翻译成的IL-10蛋白包含178个氨基酸，需切除18个氨基酸残基构成的信号肽序列，才能产生成熟的IL-10蛋白。不能从大肠杆菌得到成熟的IL-10蛋白，原因是 。
参考答案
1．D
2．C
3．D
4．B
5．B
6．D
7．D
8．A
9．D
10．D
11．C
12．B
13．D
14．C
15．D
16．D
17．(1)碳源、氮源
(2) L-阿拉伯糖 甘油
(3) 该菌株为需氧型，发酵初期菌体繁殖耗氧量很大 发酵罐内的pH较高，菌体活性降低且菌体数量下降，耗氧量逐渐减少 稳定而合理的pH
18．(1) 接种 高压蒸汽灭菌
(2) 需要 生长素和细胞分裂素的比例不同
(3) 无性 能保持亲本的优良性状、繁殖速度快、可大量培养脱毒苗等
(4) 愈伤组织 季节、气候
19．(1) 囊胚 内细胞团 胎儿各种组织
(2) 原肠胚 内胚层
(3) 胚胎移植 同期发情 使供体和受体的生殖器官生理变化同步，为移入受体的胚胎提供相同的生理环境
(4)具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成机体所有的组织和器官甚至个体的潜能
20．(1) 构建基因表达载体 限制酶和DNA连接酶 作为标记基因，筛选重组质粒
(2) DNA半保留复制 Mg2+能激活DNA聚合酶
(3) Ca2+ 含有内质网和高尔基体等多种细胞器，能对蛋白质进行加工
(4)都共用一套遗传密码
21．(1)逆转录
(2) 5'—ATGCACAGC—3' 5'—TCAGTTTCG—3'
(3) NdeⅠ和XhoⅠ 白 重组质粒LacZ基因被破坏，无法正常表达合成半乳糖苷酶，进而X-gal不能被分解产生蓝色物质，菌落呈现白色 不确定 蛋白质的加工修饰发生在内质网和高尔基体中，而原核生物大肠杆菌没有内质网和高尔基体等细胞器，因而不能对多肽链进行加工，无法获得成熟的IL-10蛋白
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