课件31张PPT。到目前为止,几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖都与微生物学有关微生物的类群微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物有些细菌(多为杆菌)在一定条件下,细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。每一细胞仅形成一个芽孢,所以其没有繁殖功能。1.芽孢脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的生殖细胞。它是有丝分裂或减数分裂的产物;2. 孢子课题1 微生物的实验室培养专题2 :微生物的培养与应用一.培养基:微生物的直接生存环境包含了:1.基本成分:碳源、氮源、水、无机盐⑴碳源无机碳源:有机碳源:CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物⑵氮源无机氮源:有机氮源:NH4+、NO3-牛肉膏、蛋白胨、
酵母膏、尿素等注:含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源2.特殊营养:维生素、碱基等3.pH、氧气的需求:4.种类:固体培养基液体培养基有无 凝固剂琼脂分离 鉴定工业 生产化学成分:天然培养基 合成培养基细菌偏碱,真菌偏酸液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长固体培养基:菌落,菌苔半固体培养基:无动力 有动力(弥散)(是否运动) 接种环接种针鉴别选择选择培养基1.加入青霉素的培养基:
分离酵母菌、霉菌等真菌
2.加入高浓度食盐的培养基:
分离金黄色葡萄球菌
3.无氮培养基:
分离固氮菌
4.不加含碳有机物的无碳培养基:
分离自养型微生物
5.加入四环素等抗生素的培养基:
分离导入了目的基因的受体细胞CC2.1.下列可以作为自养微生物氮源的是
A.N2、尿素
B.牛肉膏、蛋白胨
C.尿素、酵母粉
D.铵盐、硝酸盐
D
11.下列关于细菌的叙述中,正确的是
A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源
B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落
C.在加入青霉素的培养基中,细菌仍可大量繁殖
D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选D
耐高温需保持干燥的 物品,160~170℃ 1~2小时接种环、接种针等 金属用具70~75℃、30min
80℃、15min100℃、5~6min较为温和理化方法,杀死部分有害菌体(不包括芽孢、孢子)强烈的理化方法,杀死所有微生物(包括芽孢、孢子)煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂紫外线灼烧灭菌干热灭菌酒精、氯气、石炭酸等高压蒸汽灭菌培养基,
100KPa、
121℃、15~30min二.无菌技术:防止外来杂菌的污染1.消毒与灭菌:请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。
(1) 培养细菌用的培养基与培养皿
(2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管
(3) 实验操作者的双手思考2.无菌范围:实验操作空间消毒操作者的手、衣着消毒实验用具灭菌实验操作过程酒精灯旁操作超净工作台单个
或少数菌体2.特征:大小、形状、光泽度、
颜色、透明度等。3.功能:1.定义:三.菌落鉴定菌种的重要依据固体培养基上大量繁殖子细胞群体四.大肠杆菌的纯化培养:(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基6.倒平板:分散成单个细胞,形成单个菌落倒平板约50℃防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染灼烧灭菌,
防止瓶口的微生物污染培养基二.大肠杆菌的纯化培养:㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡纯化大肠杆菌:⑴平板划线法:菌种划3个平板1个不划线1.接种:接种环防止划破培养基(重复实验)(空白对照)避免污染杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种来自上次划线末端杀死残留菌种,避免污染环境、感染操作者6支试管,分别加入9ml无菌水101102103104105106⑵稀释涂布平板法:a.梯度稀释菌液:菌液微量 移液器⑵稀释涂布平板法:a.梯度稀释菌液:b.涂布平板:不超过0.1ml各梯度分别涂布3个平板1个不涂布作空白对照滴灼试涂⑴平板划线法:⑵稀释涂布平板法:2.培养:将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱中培养12h~24h后,分别观察并记录三.菌种的保藏:1.临时保藏:试管固体斜面培养基上4℃2.长期保存:菌种易被污染、变异甘油管藏1ml甘油+1ml菌液-20℃