河北省沙河市二十冶综合学校高中分校高中生物选修三导学案： 1.1 DNA重组技术的基本工具（无答案）

1.1《DNA重组技术的基本工具》
学法指导:设置问题情境，引导学生在思索中学习新知识。
学习目标：1、简述基因工程的原理及基本操作程序
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程
学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤
学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因
（2）利用PCR技术扩增目的基因
自学过程：
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 、 、 、 。
学点一、目的基因的获取：
1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 。也可以是一些具有 的因子。
2．获取目的基因的方法
(1)从基因文库中获取目的基因
①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。
②种类
基因组文库：含有一种生物的 基因。
部分基因文库：含有一种生物的 基因，如cDNA文库。
③目的基因的获取依据：根据基因的有关信息：基因的 序列、基因的 ， 基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的翻译产物蛋白质等特性获取目的基因。

高二生物导学案 编者：李丽平 编号：3 日期：2015-2-26
(2)利用PCR技术扩增目的基因。
①PCR含义：是一项在生物体外 特定DNA片段的核酸合成技术。
②PCR原理：DNA 。
③条件：有一段已知目的基因的 序列，以便根据这一序列合 成 。
④过程：目的基因DNA受热形成 ，与 结合，然后 在 的作用下进行延伸形成DNA。
⑤方式：每次循环后目的基因的量增加一倍，即成 扩增=2n(n为扩增循环的次数)。
(3)人工合成法：如果 ， 已知，可以通过 用化学方法人工合成。





学点二、基因表达载体的构建──基因工程的核心
1．表达载体的组成： + + + 等。
2．启动子：位于基因的 ，它是 和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA，最终获得所需的 。
3．终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，终止 。

4．标记基因：鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而将 筛选出来。常用的标记基因是 。
5．表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中 ，并且 给下一代；同时使目的基因能够_ __和 作用。
6．不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。
学点三、将目的基因导入受体细胞
(一)转化的概念：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内 和 过程。
(二) 常用的转化方法：
1．将目的基因导入植物细胞
(1)农杆菌转化法

①农杆菌特点：易感染 植物和裸子植物，对____ ___植物没有感染力；Ti质粒 的 可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
②转化过程：目的基因插人 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
(2)基因枪法
基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。
(3)花粉管通道法
花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法（我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）。植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。
2．将目的基因导入动物细胞
(1)方法：显微注射技术。
(2)操作程序：目的基因表达载体 →取卵(受精卵) →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到__ __性动物的_____ __内发育→新性状动物。
3．将目的基因导入微生物细胞
(1)原核生物特点： 、多为 、 相对较少等。
(2)大肠杆菌最常用的转化方法是： 处理细胞→ 细胞→表达载体与感受态细胞混合→ ___ __ 细胞吸收DNA分子。
学点四、目的基因的检测与鉴定
1．检测
①．首先要检测 ， 方法是采用 。
②其次还要检测 ，方法是采用 。
③最后检测 ，方法是从转基因生物中提取 ，用相应的 进行 。
2．鉴定：进行 的鉴定。如 。
[合作探究、展示点评]
1、正确表示基因工程顺序操作的四个步骤的是 ( )
A．获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测与鉴定
B．目的基因的检测与鉴定→获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞
C．获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
D．基因表达载体的构建→获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定