第一节 发酵工程的培养基
知识点一 培养基的成分和类型
1.（2024·江苏洪泽湖高级中学高二月考）下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是（ ）
A.通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源
B.蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素
C.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素
D.同一种物质不可能既作为碳源又作为能源物质
2.（2024·江苏涟水一中高二月考）下列是关于微生物的培养基成分的叙述，正确的是（ ）
A.碳源是构成微生物体的重要成分，微生物生命活动的能量也来源于碳源
B.氮源影响微生物的生长和代谢，其中氮素可参与构成细胞中蛋白质、核苷酸等生物大分子
C.微生物从培养基中摄取的磷一般以磷酸盐形式存在，可用于合成磷脂、ATP、核酸等物质
D.酵母菌等异养微生物的碳源可以是CO2，也可以是葡萄糖等含碳有机物
3.从土壤中筛选蛋白酶产生菌时，所用培养基为（ ）
A.加富培养基 B.选择培养基
C.基础培养基 D.鉴别培养基
4.获得某种特定的微生物一般需要用鉴别培养基进行鉴定，下列属于鉴别培养基的是（ ）
A.加入纤维素粉的培养基
B.加入青霉素的培养基
C.加入溴甲酚紫的培养基
D.加入血液成分的培养基
知识点二 培养基的配制
5.下列关于培养基配制的叙述，错误的是（ ）
A.合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的
B.固体培养基中加入的琼脂能提供额外的碳源和氮源
C.对有特殊生长条件需求的微生物要对培养基做调整
D.无论是固体培养基还是液体培养基，配制时都要加水
6.将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯滤液。在马铃薯滤液中加入一定量的葡萄糖和琼脂，用蒸馏水定容后灭菌，得到M培养基。下列有关叙述不正确的是（ ）
A.向培养皿中转移已灭菌的M培养基时，要注意不要黏附在壁上
B.培养基分装到培养皿后需在皿盖注明培养基的名称、配制日期等信息，牛皮纸包扎后灭菌
C.M培养基中的马铃薯滤液可为微生物提供无机盐
D.将M培养基分装到试管后可以做成斜面培养基
7.某种细菌菌株需要亮氨酸才能生长，但此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表格中细菌菌株类型，则配制相应选择培养基类型正确的是（ ）
选项 筛选出不需要亮氨酸的菌株 筛选出抗链霉素的菌株 筛选出不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株
A L＋ S＋ L－ S－ L＋ S－
B L－ S－ L＋ S＋ L－ S＋
C L－ S＋ L＋ S＋ L－ S－
D L＋ S－ L－ S－ L＋ S＋
注：L代表亮氨酸，S代表链霉素；“＋”代表加入，“－”代表不加入。
8.（多选）下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，正确的是（ ）
A.在溶化琼脂时，需要控制火力并不断用玻棒搅拌，以免发生焦煳
B.牛肉膏、蛋白胨容易吸潮，称取时动作要迅速，并及时盖上瓶盖
C.将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入干热灭菌箱内灭菌
D.培养基应先调pH再灭菌后分装到培养皿
9.（多选）（2024·泰州高二月考）如图4支试管分别代表4种微生物（固氮菌、产甲烷菌、酵母菌、幽门螺杆菌）在半固体培养基中的生长状态，其中乙试管代表幽门螺杆菌的生长状态，如表为某培养基的成分及其含量。下列叙述正确的是（ ）
成分 含量 成分 含量
葡萄糖 10 g CaSO4 0.2 g
KH2PO4 0.2 g CaCO3 5 g
MgSO4 0.2 g 琼脂 3.5 g
NaCl 0.2 g 蒸馏水 1 L
A.甲、丙、丁三个试管中的微生物分别是固氮菌、产甲烷菌、酵母菌
B.将幽门螺杆菌转移到题表所示培养基继续培养，由于培养基营养充足而更有利于它的生长
C.幽门螺杆菌的代谢类型可能是微厌氧异养型
D.丁试管中的微生物在题表所示培养基上不能正常生长，但与圆褐固氮菌同时接种在题表所示培养基上可以正常生长
10.（多选）（2024·江苏金沙中学高二期中）为探究某物种的等位基因CST1与Cst1E81K的功能，科研人员将表达CST1和Cst1E81K的质粒分别导入不能吸收葡萄糖的酵母菌（以麦芽糖为碳源），经处理后将其接种到含不同碳源的培养基上，生长情况如下表所示。相关叙述正确的是（ ）
组别 麦芽糖 麦芽糖＋葡萄糖类似物 （吸收后可杀死酵母菌）
稀释 5倍 稀释 25倍 稀释 125倍 稀释 5倍 稀释 25倍 稀释 125倍
空质粒 ＋＋＋ ＋＋＋ ＋ ＋＋＋ ＋＋＋ ＋
CST1 ＋＋＋ ＋＋ ＋ ＋＋ － －
Cst1E81K ＋＋＋ ＋＋ ＋ ＋＋＋ ＋＋ ＋
注：“＋”表示菌落多少，“－”表示无菌落。
A.培养基中除碳源外还需添加氮源、无机盐、水等成分
B.加葡萄糖类似物的目的是鉴定酵母菌能否吸收葡萄糖
C.据表推测，CST1可能与转运葡萄糖进入细胞有关
D.导入Cst1E81K的酵母菌吸收葡萄糖的能力强于导入CST1的酵母菌
11.在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：
（1）液体培养基中除了把葡萄糖作为 外，还应该含有 。
（2）样品中还发现了CV101、CV103新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是 。
请设计并完成下列实验，来验证你的观点：
①配制 的固体培养基（A组）和不含碳源的固体培养基（B组）；
②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在 条件下进行。
③预期实验结果： 。
第一节 发酵工程的培养基
1.C 一般情况下，琼脂可以作为凝固剂，但不能作为微生物的碳源，A错误；蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源和维生素等，不能提供磷酸盐，B错误；为了满足乳酸杆菌对营养物质的要求，保证乳酸杆菌能正常生长繁殖，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，C正确；同一物质，例如糖类等，既可以作为碳源又可以作为能源物质，D错误。
2.C 碳源是构成微生物体的重要成分，某些微生物如光合细菌所需的能量来源于光能，A错误；核苷酸不是生物大分子，B错误；磷作为构成磷脂、核酸和ATP的必要元素，是微生物生长繁殖所必需的，微生物从培养基中摄取的磷一般以磷酸盐形式存在，C正确；酵母菌等异养微生物所需碳源来源于含碳有机物，不能直接利用CO2，D错误。
3.B 根据题意可知，从土壤中筛选蛋白酶产生菌时，可以在培养基中加入蛋白质作为唯一氮源，从而使该菌变成优势种，该培养基属于选择培养基。
4.C 加入纤维素粉的培养基可以分离出能分解纤维素的微生物，加入青霉素的培养基可以选择培养出酵母菌或霉菌等真菌，因此二者均属于选择培养基，A、B不符合题意；加入溴甲酚紫的培养基可用于鉴别产酸微生物，属于鉴别培养基，C符合题意；加入血液成分的培养基可用于培养百日咳博德氏菌，属于加富培养基，D不符合题意。
5.B 不同培养基的用途不同，如在固体培养基上可形成单个菌落从而实现微生物的分离，鉴别培养基可以鉴定微生物的种类，A正确；固体培养基中加入的琼脂不能被微生物分解利用，故琼脂不能提供额外的碳源和氮源，B错误；对有特殊生长条件需求的微生物要对培养基做调整，如培养乳酸杆菌时需要在培养基中加入维生素，C正确。
6.B 向培养皿中转移已灭菌的M培养基时，要注意不要黏附在壁上，否则会引起杂菌污染，A正确；培养基分装到培养皿后需在培养皿底部注明培养基的名称、配制日期等信息，B错误；马铃薯滤液中含有碳源、氮源、无机盐等营养物质，C正确；M培养基属于固体培养基，可以搁置斜面做成斜面培养基，D正确。
7.B 根据题目要求，筛选不需要亮氨酸的菌株时，培养基中不需要添加亮氨酸，应使用的培养基为不加L，能生存的就是不需要亮氨酸的细菌，同时也不应该添加链霉素，以免杀死该种细菌；筛选抗链霉素的菌株时，需要向培养基中添加链霉素和亮氨酸，能抵抗链霉素的细菌就能在培养基生存下来；筛选不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株时，需要向培养基中添加链霉素，但不添加亮氨酸，应用的培养基为L－、S＋，能在培养基上生存的细菌，即是所需要的菌种，B正确，A、C、D错误。
8.ABD 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌，而不是干热灭菌，C错误。
9.ACD 分析题图4支试管中微生物对空气的依赖程度，甲试管中微生物在试管上部空气充足的条件下生长，其对应固氮菌；乙试管中幽门螺杆菌在试管中部生长，其代谢类型可能是微厌氧异养型，在空气充足或绝对无氧的环境中不能生长；丙试管中微生物集中在试管底部生长，是严格厌氧型微生物，其对应产甲烷菌；丁试管中微生物在培养基中均匀分布，是兼性厌氧型微生物，其对应酵母菌，A、C正确。由题表所示培养基的成分及其含量可知，该培养基缺少氮源，故将幽门螺杆菌转移到该培养基上不能正常生长；丁试管中的微生物（酵母菌）在该培养基上也不能正常生长，但与圆褐固氮菌同时接种在该培养基上可以正常生长，因为圆褐固氮菌能固定空气中的N2，为酵母菌的生长提供氮源，B错误，D正确。
10.ABC 培养基中的主要成分有碳源、氮源、水和无机盐等，A正确；加葡萄糖类似物的目的是鉴定酵母菌能否吸收葡萄糖，B正确；据表推测，导入CST1的酵母菌在麦芽糖＋葡萄糖类似物的培养基上菌落数目减少，这是由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，据此推测CST1能转运葡萄糖类似物进入酵母菌，故其功能可能是转运葡萄糖进入细胞，C正确；在麦芽糖＋葡萄糖类似物的培养基中，导入Cst1E81K的酵母菌菌落数目多于CST1处理组，这说明其存活率更高，由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，据此推测导入Cst1E81K的酵母菌吸收葡萄糖的能力弱于导入CST1的酵母菌，D错误。
11.（1）碳源 氮源、水和无机盐等营养物质 （2）CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源 ①以醋酸盐为唯一碳源 ②无菌（或适宜的温度等） ③A组菌株生长（形成菌落），B组菌株不能生长（无菌落）
解析：（1）由题意可知，连续培养的培养基是液体培养基，培养基的基本营养成分有碳源、氮源、水、无机盐。（2）由题意可知，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，由此可以推出CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源。若要验证这一推论，就要配制以醋酸盐为唯一碳源的培养基，将CV101菌株分别接种到以醋酸盐为唯一碳源的固体培养基（A组）和不含碳源的固体培养基（B组）中培养一段时间，并观察记录菌株生长情况。如果A组菌株生长（形成菌落），B组菌株不能生长（无菌落），则说明推论是正确的。
3 / 3第一章 发酵工程
第一节 发酵工程的培养基
导学 聚焦 1.根据微生物的代谢类型分析培养基营养物质的组成。 2.掌握配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的实验步骤
知识点（一） 培养基的类型和基础培养基
1.培养基
（1）概念：主要是指为人工培养微生物等而制备的，适合微生物等 、 或积累 的营养基质。
（2）类型
分类依据 类型
成分不同 天然培养基：由动植物组织或 以及它们的 或粗消化物配制而成
合成培养基：由准确称量的 加蒸馏水配制而成
物理性质 不同 液体培养基：呈 状态
固体培养基：添加一定量的 ，呈固体状态
半固体培养基：添加一定量的凝固剂，呈 状态
用途不同 基础培养基：为大多数微生物的生长提供基本的营养需求
特殊培养基：以 为基础，可进一步配制具有特殊用途的培养基，包括 、鉴别培养基和 等
2.基础培养基
（1）概念
各种培养基的配方虽然不同，但其成分一般都含有 等最基本的物质，这些最基本的物质是大多数微生物对营养条件的基本需求，提供这些基本需求的培养基就是基础培养基。
（2）成分
3.基于上述学习，判断下列相关表述的正误
（1）培养基中加入琼脂的目的是提供碳源。（ ）
（2）所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源。（ ）
（3）培养不同微生物的培养基成分完全一样。（ ）
（4）斜面培养基或平板培养基都属于固体培养基，可用于接种、保存和培养微生物。（ ）
（5）牛肉膏蛋白胨培养基中的蛋白胨不仅提供氮源和维生素。（ ）
下表是某培养基的配方，分析回答有关问题。
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 5 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL
（1）根据培养基的物理性质，该培养基属于 培养基，理由是
。
（2）该培养基培养的微生物同化作用类型是 ，理由是
。
（3）该培养基中提供碳源和氮源的物质是什么？属于有机物还是无机物？
1.培养基的成分及功能
营养要素 来源 功能
碳源（提供碳元素的物质） 无机碳源 CO2、NaHCO3等含碳无机物 ①构成微生物体的重要成分； ②有机碳既是碳源又是能源
有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等
氮源（提供氮元素的物质） 无机氮源 铵盐、硝酸盐等 合成含氮的代谢产物
有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、豆饼粉、酵母粉等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物
水 外界摄入 ①良好的溶剂； ②维持生物大分子结构的稳定
无机盐 无机物 是微生物生长繁殖所必需的，也是合成多种代谢产物所必需的
2.几种微生物的营养和能量来源
微生物 碳源 氮源 能源
蓝细菌 CO2 N、 N等 光能
硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化
根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物
大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物
1.（2023·徐州高二检测）下列有关以CO2为唯一碳源的自养型微生物所需营养物质的叙述，错误的是（ ）
A.铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮元素
B.碳源物质不是该微生物的能源物质
C.水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质
D.琼脂是该微生物的营养要素之一
2.如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是（ ）
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 （NH4）2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量（g） 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C.若除去①，此培养基可培养硝化细菌
D.培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源
知识点（二） 特殊培养基
1.选择培养基
（1）概念：能将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中 的特殊培养基。
（2）类型
①依据某些微生物的特殊 设计的选择培养基。例如，利用以 为唯一碳源的选择培养基，可以分离出能分解纤维素的微生物；利用 的培养基，能分离出固氮微生物。
②在培养基中加入某种化学物质， 其他微生物。例如，在选择培养基中添加数滴质量分数为10％的酚溶液，可以选择培养出 ；在培养基中加入 ，可以选择培养出伤寒沙门氏菌。
2.鉴别培养基
（1）作用：用于快速 不同类型微生物，也可用于分离和筛选产生某种 的微生物菌种。
（2）实例：将样品微生物培养在添加可溶性淀粉的培养基中，如果其菌落周围形成淀粉水解圈，说明它们是能产生 的菌株；将样品微生物培养在添加了 的培养基中，如果培养基的颜色由紫色转为黄色，说明它们是产酸微生物。
3.加富培养基
（1）概念：也称 ，即在培养基中加入 某些微生物生长和繁殖所需的特殊物质，如 、血清、酵母浸膏、动植物组织液。
（2）作用：加富培养基一般用于培养 的异养微生物。
（3）实例：培养百日咳博德氏菌需要含有 成分的加富培养基。
4.基于上述学习，判断下列相关表述的正误
（1）以尿素为唯一氮源的培养基可以选择培养得到分解尿素的细菌。（ ）
（2）在培养基中添加青霉素、四环素等，可以抑制真菌的生长和繁殖。（ ）
（3）鉴别培养基可以用于分离和筛选产生某些代谢产物的微生物。（ ）
（4）淀粉是一种能被所有微生物利用的碳源。（ ）
（5）在选择培养基中滴加一定浓度的酚溶液可以抑制细菌的生长。（ ）
1.分析下表所示培养基的配方，回答下列问题：
成分 含量 成分 含量
KH2PO4 1.4 g 葡萄糖 10.0 g
Na2HPO4 2.1 g 尿素 1.0 g
MgSO4·7H2O 0.2 g 琼脂 15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL
（1）在该培养基的配方中，为微生物提供碳源和氮源的物质分别是什么？
（2）该培养基是否具有选择作用？为什么？
2.伊红—亚甲蓝培养基（EMB）可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为大肠杆菌的代谢产物与伊红—亚甲蓝结合，使菌落呈深紫色并带有金属光泽。伊红—亚甲蓝琼脂培养基（EMB培养基）配方如下：
基础培养基100 mL
20％乳糖溶液2 mL
2％伊红水溶液2 mL
0.5％亚甲蓝水溶液1 mL
据上述材料EMB培养基从用途来分属于 培养基，配方的基础培养基中除水外还必须含有 ，乳糖可作为 ，大肠杆菌在伊红—亚甲蓝琼脂培养基上呈 。
3.自然界中某些酿酒酵母能利用木糖进行酒精发酵，某研究小组欲从土壤中分离这种酵母菌并对其产酶活性进行测定，实验基本流程为取土样→制取土壤悬液→扩大培养→选择培养→菌种分离→酶活性鉴定。
请回答下列问题：
（1）扩大培养又称加富培养，可增加 ，以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。
（2）该研究小组将扩大培养后的混合菌液适当稀释后需接种于 的选择培养基，倒置放入培养箱中培养。
1.选择培养基与鉴别培养基
项目 选择培养基 鉴别培养基
特殊成分 加入或除去某种化学物质 加入某种指示剂或化学药品
目的 抑制或杀死其他微生物生长，促进目的微生物生长 与微生物的代谢产物或培养基中的成分发生特定反应
用途 培养、分离出特定微生物 鉴别不同类型的微生物
举例 培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素等，抑制细菌生长；利用以尿素作唯一氮源的培养基来培养尿素分解菌 可用伊红—亚甲蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色）
2.加富培养基与选择培养基的比较
（1）从某种意义上来说，加富培养基类似于选择培养基。
（2）二者不同的是，采用加富培养基的目的是增加所需分离的微生物的数量，使其形成生长优势，以分离出该种微生物；采用选择培养基的目的一般是抑制不需要的微生物生长和繁殖，而使所需要的微生物增殖，再分离出所需微生物。
1.下列对各种培养基的分析和实际不相符的是（ ）
A.添加一定浓度酚溶液的培养基属于加富培养基
B.以纤维素为唯一碳源的培养基，可分离出能分解纤维素的微生物
C.分离和培养放线菌通常用高氏Ⅰ号培养基等合成培养基
D.添加了溴甲酚紫的培养基可以作为产酸菌的鉴别培养基
2.（多选）淀粉分解菌是能分解淀粉的一类微生物，在自然条件下，淀粉分解菌和其他各种细菌混杂生活在土壤中。若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），下列有关叙述正确的是（ ）
A.培养基除碳源外还含有氮源等其他营养物质
B.筛选淀粉分解菌的培养基需添加葡萄糖、淀粉作为碳源
C.培养平板经稀碘液处理后，可起到鉴别培养基的作用
D.菌落周围透明圈的面积/菌种的菌落面积的值反映了不同细菌分解淀粉能力的差异
知识点（三） 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基
1.实验目的：学会配制培养酵母菌的培养基。
2.实验原理
（1）酵母菌生长繁殖需要的营养物质有水、 、 和无机盐等。
（2）马铃薯葡萄糖琼脂培养基具有酵母菌生长所需的碳元素、氮元素和其他营养物质。
3.实验步骤
4.基于上述学习，判断下列相关表述的正误
（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基中的马铃薯块茎只能为酵母菌的生长繁殖提供碳源。（ ）
（2）马铃薯葡萄糖琼脂培养基属于固体培养基。（ ）
（3）制作斜面培养基时，倒入试管中的培养基高度约为试管高度的1/3。（ ）
1.配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的关键步骤有①称量、②调pH、③定容、④灭菌、⑤溶化、⑥分装、⑦包扎、⑧计算，正确操作步骤： ，并分析②与③、②与④正确排序的原因。
2.培养基溶化后，需要冷却到50 ℃左右时，才能分装。你用什么办法来估计培养基的温度？
3.如何判断制备的培养基是否合格？
培养基配制的4大原则
1.（多选）下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述，不正确的是（ ）
A.培养基应先调pH再进行灭菌
B.培养基应先灭菌再分装到试管或培养皿
C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦
D.制作斜面培养基时，培养基高度约为试管高度的1/2
2.马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛选，其配制过程如下：将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量琼脂，用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的是（ ）
A.应在培养基中加入链霉素，以抑制细菌的生长
B.除碳源外，马铃薯浸出液还提供氮源和无机盐
C.氮源进入细胞后，可能合成磷脂、核苷酸等物质
D.加入碘液后，周围为蓝色的菌落一般能产生淀粉酶
（1）培养基主要是指为人工培养微生物等而制备的，适合微生物等 的营养基质。
（2）各种培养基的配方虽然不同，但其成分一般都含有 等最基本的物质。
（3）加富培养基的目的是 ，使其形成生长优势，以分离出该种微生物；选择培养基的目的一般是 ，而使所需要的微生物增殖，再分离出所需微生物。
1.天然培养基是利用营养成分难以控制的天然物质配制而成的，合成培养基则是采用成分已知的化学试剂加蒸馏水配制而成的。下列说法正确的是（ ）
A.用合成培养基进行实验时，可重复性好
B.天然培养基的营养成分不如合成培养基丰富
C.微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快
D.合成培养基中不含有机物
2.（2024·淮安高二调研）下列关于培养微生物所需营养物质的描述，正确的是（ ）
A.所有碳源都能为微生物生长提供能源
B.蛋白胨可为微生物生长提供碳源和氮源
C.硝酸钾只能为微生物生长提供无机盐
D.培养基中营养物质浓度越高，微生物生长繁殖越快
3.（2024·江苏洪泽湖高级中学高二月考）甲、乙、丙为三种微生物，可以分别在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种培养基中正常生长繁殖。若甲和丙交换培养基，甲能正常生长繁殖，丙不能。甲和丙都不能在培养基Ⅱ中正常生长繁殖。下列叙述正确的是（ ）
培养基 CO（NH2）2 KH2PO4 FeSO4 蔗糖
10 g 4 g 0.5 g 10 g
Ⅰ － ＋ ＋ ＋
Ⅱ － ＋ ＋ －
Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋
培养基 （NH4）2SO4 MgSO4 琼脂 H2O 定容至 1 000 mL
0.4 g 9.25 g 10 g
Ⅰ － ＋ ＋ ＋
Ⅱ ＋ ＋ ＋ ＋
Ⅲ － ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中没有加入这种物质。
A.三种培养基都有水，故都是液体培养基
B.甲、乙、丙都不是自养微生物
C.CO（NH2）2可以作为丙的碳源和氮源
D.丙一定不是固氮微生物
4.（多选）下列关于制备用于培养酵母菌的马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基的叙述，错误的是（ ）
A.应将琼脂加热溶化后加入马铃薯的滤液中
B.溶化后的培养基应趁热分装到洁净的试管中
C.应在高压蒸汽灭菌后将斜面培养基摆成斜面
D.包扎时应在试管壁上注明培养基的名称、组别、配制日期等信息
第一节 发酵工程的培养基
【核心要点·巧突破】
知识点（一）
自主学习
1.（1）生长 繁殖 代谢产物 （2）微生物细胞 提取物 高纯度化学试剂 液体 凝固剂 半固体 基础培养基 选择培养基 加富培养基
2.（1）水、碳源、氮源和无机盐 （2） 能量 蔗糖 淀粉
蛋白质 核酸 铵盐 牛肉膏 蛋白胨
3.（1）× 提示：培养基中加入琼脂的目的是作为凝固剂。
（2）× 提示：对于固氮微生物的培养不需要添加氮源。
（3）× 提示：培养不同微生物的培养基成分一般不完全一样。
（4）√
（5）√
互动探究
（1）提示：固体 该培养基的配方中含有凝固剂——琼脂
（2）提示：异养型微生物 该微生物的碳源和氮源是有机物
（3）提示：牛肉膏、蛋白胨。二者均属于有机物。
学以致用
1.D 以CO2为唯一碳源的自养型微生物，CO2不是该微生物的能源物质，B正确；水、无机盐、碳源、氮源等最基本的物质是大多数微生物对营养条件的基本需求，C正确；琼脂是凝固剂，不是该微生物的营养要素之一，D错误。
2.C 此培养基中不含有机碳源，适合用来培养自养型微生物，A正确；此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源，B正确；硝化细菌能进行化能合成作用，但不能固氮，因此若除去①，此培养基不能培养硝化细菌，C错误；培养基中若加入氨基酸，则它可作为碳源、氮源，D正确。
知识点（二）
自主学习
1.（1）分离出来 （2）①营养需求 纤维素 缺乏氮源
②抑制或杀死 放线菌 亚硫酸铋
2.（1）分类鉴定 代谢产物 （2）淀粉酶 溴甲酚紫
3.（1）营养培养基 有利于 血液 （2）营养要求比较苛刻 （3）血液
4.（1）√
（2）× 提示：在培养基中添加青霉素、四环素等，可以抑制细菌或放线菌的生长和繁殖。
（3）√
（4）× 提示：只有能合成淀粉酶的微生物才能利用淀粉。
（5）√
互动探究
1.（1）提示：碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
（2）提示：具有选择作用。绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，本培养基以尿素为唯一氮源，可以分离得到能产生脲酶的微生物（即分解尿素的微生物）。
2.鉴别 无机盐和氮源 碳源 深紫色
3.提示：（1）目的菌株数量 （2）以木糖为唯一碳源
学以致用
1.A 添加一定浓度酚溶液的培养基可以抑制细菌和霉菌的生长，培养基上仅有放线菌生长，属于选择培养基。
2.ACD 筛选淀粉分解菌的培养基中，除提供碳源外，还需要氮源、水、无机盐等营养物质，A正确；筛选分离淀粉分解菌时，需以淀粉为培养基中的唯一碳源，才能起到选择作用，B错误；若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈，可起到鉴别培养基的作用，C正确；该值越大，分解淀粉能力越强，该值的大小反映了不同细菌分解淀粉能力的差异，D正确。
知识点（三）
自主学习
2.（1）碳源 氮源
3. 补足水 5.5 污染 1/5 灭菌 自然倾斜
名称 高压蒸汽灭菌锅 103 kPa 10121
4.（1）× 提示：马铃薯葡萄糖琼脂培养基中的马铃薯块茎能为酵母菌的生长繁殖提供碳源、氮源和无机盐等。
（2）√
（3）× 提示：制作斜面培养基时，倒入试管中的培养基高度约为试管高度的1/5。
互动探究
1.提示：正确操作步骤是⑧①⑤③②⑥⑦④。若先调pH后定容，则会导致培养基的pH不是设定的pH，故先定容后调pH；若先灭菌后调pH，则在调pH的过程中会引入杂菌，故先调pH后灭菌。
2.提示：可以用手轻轻触摸盛有培养基的烧杯，感觉烧杯的温度下降到刚刚不烫手时，就可以分装了。
3.提示：将未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天，若无菌落生长，则说明培养基制备成功；若有菌落生长，则说明培养基制备失败（被杂菌污染或灭菌不彻底），需要重新制备。
学以致用
1.BD 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的实验步骤为配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌，A正确，B错误；溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦，C正确；制作斜面培养基时，培养基高度约为试管高度的1/5，D错误。
2.D 链霉素能抑制细菌的生长，因此在培养基中加入链霉素后可以筛选真菌，加入了链霉素的培养基属于选择培养基，A正确；各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等最基本的物质，因此培养基中的马铃薯浸出液除了为微生物生长提供碳源外，还可提供的营养物质有氮源和无机盐，B正确；磷脂和核苷酸都含有N元素，因此氮源进入细胞后，可能合成磷脂、核苷酸等物质，C正确；淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的微生物的菌落周围淀粉被水解，会形成透明圈，D错误。
【过程评价·勤检测】
网络构建
（1）生长、繁殖或积累代谢产物
（2）水、碳源、氮源和无机盐
（3）增加所需分离的微生物的数量 抑制不需要的微生物生长和繁殖
课堂演练
1.A 合成培养基中化学成分及其含量明确、实验的可重复性好，A正确；天然培养基的营养成分比合成培养基丰富，B错误；微生物生长的快慢除与培养基的成分有关外，还受其他因素的影响，因此不能单一认为微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快，C错误；合成培养基中也含有机物，D错误。
2.B 有机碳源能为大多数微生物生长提供碳源和能源，无机碳源能为自养微生物生长提供碳源，但不能提供能源，A错误；蛋白胨能为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源和维生素等，B正确；硝酸钾能为微生物生长提供无机盐和氮源等，C错误；培养基中的营养物质需要控制一定的浓度和比例，营养物质浓度太高会导致培养基渗透压过高，从而抑制微生物的生长，D错误。
3.D 三种培养基都有琼脂，故都是固体培养基，A错误；培养基Ⅱ中没有碳源，甲和丙都不能在该培养基中正常生长繁殖，而乙能正常生长繁殖，说明乙是自养微生物，B错误；CO（NH2）2可以作为丙的氮源，但不能作为碳源，C错误；培养基Ⅰ中没有氮源，结合题干“若甲和丙交换培养基，甲能正常生长繁殖，丙不能”可知，丙一定不是固氮微生物，D正确。
4.AB 应将琼脂加入马铃薯滤液后再加热溶化，A错误；溶化后的培养基应冷却到50 ℃左右时，才能分装到洁净的试管中，B错误。
8 / 8(共83张PPT)
第一节 发酵工程的培养基
导学 聚焦 1.根据微生物的代谢类型分析培养基营养物质的组成。
2.掌握配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的实验步骤
核心要点·巧突破
01
过程评价·勤检测
02
课时训练·提素能
03
目录
CONTENTS
核心要点·巧突破
01
精准出击 高效学习
知识点（一） 培养基的类型和基础培养基
1. 培养基
（1）概念：主要是指为人工培养微生物等而制备的，适合微生物
等 、 或积累 的营养基质。
生长
繁殖
代谢产物
（2）类型
分类
依据 类型
成分
不同 天然培养基：由动植物组织或 以及它们
的 或粗消化物配制而成
合成培养基：由准确称量的 加蒸馏水配
制而成
微生物细胞
提取物
高纯度化学试剂
分类
依据 类型
物理
性质 不同 液体培养基：呈 状态
固体培养基：添加一定量的 ，呈固体状态
半固体培养基：添加一定量的凝固剂，呈 状态
用途
不同 基础培养基：为大多数微生物的生长提供基本的营养需求
特殊培养基：以 为基础，可进一步配制具有
特殊用途的培养基，包括 、鉴别培养基
和 等
液体
凝固剂
半固体
基础培养基
选择培养基
加富培养基
2. 基础培养基
（1）概念
各种培养基的配方虽然不同，但其成分一般都含有
等最基本的物质，这些最基本的物质是
大多数微生物对营养条件的基本需求，提供这些基本需求的
培养基就是基础培养基。
水、碳
源、氮源和无机盐
（2）成分
3. 基于上述学习，判断下列相关表述的正误
（1）培养基中加入琼脂的目的是提供碳源。 （ × ）
提示：培养基中加入琼脂的目的是作为凝固剂。
（2）所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源。 （ × ）
提示：对于固氮微生物的培养不需要添加氮源。
（3）培养不同微生物的培养基成分完全一样。 （ × ）
提示：培养不同微生物的培养基成分一般不完全一样。
（4）斜面培养基或平板培养基都属于固体培养基，可用于接种、
保存和培养微生物。 （ √ ）
（5）牛肉膏蛋白胨培养基中的蛋白胨不仅提供氮源和维生素。
（ √ ）
×
×
×
√
√
下表是某培养基的配方，分析回答有关问题。
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 5 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL
（1）根据培养基的物理性质，该培养基属于 培养基，理
由是 。
提示：固体 该培养基的配方中含有凝固剂——琼脂
（2）该培养基培养的微生物同化作用类型是 ，理
由是 。
提示：异养型微生物 该微生物的碳源和氮源是有机物
（3）该培养基中提供碳源和氮源的物质是什么？属于有机物还是无
机物？
提示：牛肉膏、蛋白胨。二者均属于有机物。
1. 培养基的成分及功能
营养要素 来源 功能
碳源（提
供碳元素
的物质） 无机
碳源 CO2、NaHCO3等含碳无机物 ①构成微生物体的重要成分；
②有机碳既是碳源又是能源
有机
碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等 氮源（提
供氮元素
的物质） 无机
氮源 铵盐、硝酸盐等 合成含氮的代谢产物
有机
氮源 牛肉膏、蛋白胨、豆饼粉、酵母粉等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物
营养要素 来源 功能
水 外界摄入 ①良好的溶剂；
②维持生物大分子结构的稳定
无机盐 无机物 是微生物生长繁殖所必需的，也是合
成多种代谢产物所必需的
2. 几种微生物的营养和能量来源
微生物 碳源 氮源 能源
蓝细菌 CO2 光能
硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化
根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物
大肠杆菌 糖类、蛋白质等
有机物 蛋白质等 有机物
1. （2023·徐州高二检测）下列有关以CO2为唯一碳源的自养型微生
物所需营养物质的叙述，错误的是（ ）
A. 铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮元素
B. 碳源物质不是该微生物的能源物质
C. 水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质
D. 琼脂是该微生物的营养要素之一
解析： 以CO2为唯一碳源的自养型微生物，CO2不是该微生物
的能源物质，B正确；水、无机盐、碳源、氮源等最基本的物质是
大多数微生物对营养条件的基本需求，C正确；琼脂是凝固剂，不
是该微生物的营养要素之一，D错误。
2. 如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是（ ）
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 （NH4）
2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量（g） 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL
A. 此培养基可用来培养自养型微生物
B. 此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C. 若除去①，此培养基可培养硝化细菌
D. 培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源
解析： 此培养基中不含有机碳源，适合用来培养自养型微生
物，A正确；此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源，
B正确；硝化细菌能进行化能合成作用，但不能固氮，因此若除去
①，此培养基不能培养硝化细菌，C错误；培养基中若加入氨基
酸，则它可作为碳源、氮源，D正确。
知识点（二） 特殊培养基
1. 选择培养基
（1）概念：能将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中
的特殊培养基。
分离
出来
①依据某些微生物的特殊 设计的选择培养基。
例如，利用以 为唯一碳源的选择培养基，可以分
离出能分解纤维素的微生物；利用 的培养基，
能分离出固氮微生物。
②在培养基中加入某种化学物质， 其他微生
物。例如，在选择培养基中添加数滴质量分数为10％的酚溶
液，可以选择培养出 ；在培养基中加入
，可以选择培养出伤寒沙门氏菌。
营养需求
纤维素
缺乏氮源
抑制或杀死
放线菌
亚硫酸
铋
（2）类型
2. 鉴别培养基
（1）作用：用于快速 不同类型微生物，也可用于分
离和筛选产生某种 的微生物菌种。
（2）实例：将样品微生物培养在添加可溶性淀粉的培养基中，如
果其菌落周围形成淀粉水解圈，说明它们是能产生
的菌株；将样品微生物培养在添加了 的培
养基中，如果培养基的颜色由紫色转为黄色，说明它们是产
酸微生物。
分类鉴定
代谢产物
淀粉
酶
溴甲酚紫
3. 加富培养基
（1）概念：也称 ，即在培养基中加入
某些微生物生长和繁殖所需的特殊物质，如 、血
清、酵母浸膏、动植物组织液。
（2）作用：加富培养基一般用于培养 的异
养微生物。
（3）实例：培养百日咳博德氏菌需要含有 成分的加富培
养基。
营养培养基
有利于
血液
营养要求比较苛刻
血液
4. 基于上述学习，判断下列相关表述的正误
（1）以尿素为唯一氮源的培养基可以选择培养得到分解尿素的细
菌。 （ √ ）
（2）在培养基中添加青霉素、四环素等，可以抑制真菌的生长和
繁殖。 （ × ）
提示：在培养基中添加青霉素、四环素等，可以抑制细菌或
放线菌的生长和繁殖。
（3）鉴别培养基可以用于分离和筛选产生某些代谢产物的微生
物。 （ √ ）
√
×
√
（4）淀粉是一种能被所有微生物利用的碳源。 （ × ）
提示：只有能合成淀粉酶的微生物才能利用淀粉。
（5）在选择培养基中滴加一定浓度的酚溶液可以抑制细菌的生
长。 （ √ ）
×
√
1. 分析下表所示培养基的配方，回答下列问题：
成分 含量 成分 含量
KH2PO4 1.4 g 葡萄糖 10.0 g
Na2HPO4 2.1 g 尿素 1.0 g
MgSO4·7H2O 0.2 g 琼脂 15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL （1）在该培养基的配方中，为微生物提供碳源和氮源的物质分别
是什么？
提示：碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
（2）该培养基是否具有选择作用？为什么？
提示：具有选择作用。绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但
是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，本培养基以尿素
为唯一氮源，可以分离得到能产生脲酶的微生物（即分解尿
素的微生物）。
2. 伊红—亚甲蓝培养基（EMB）可以用来检测自来水中的大肠杆菌
是否超标，因为大肠杆菌的代谢产物与伊红—亚甲蓝结合，使菌落
呈深紫色并带有金属光泽。伊红—亚甲蓝琼脂培养基（EMB培养
基）配方如下：
基础培养基100 mL
20％乳糖溶液2 mL
2％伊红水溶液2 mL
0.5％亚甲蓝水溶液1 mL
据上述材料EMB培养基从用途来分属于 培养基，配方的基
础培养基中除水外还必须含有 ，乳糖可作为
，大肠杆菌在伊红—亚甲蓝琼脂培养基上呈 。
鉴别
无机盐和氮源
碳
源
深紫色
3. 自然界中某些酿酒酵母能利用木糖进行酒精发酵，某研究小组欲从
土壤中分离这种酵母菌并对其产酶活性进行测定，实验基本流程为
取土样→制取土壤悬液→扩大培养→选择培养→菌种分离→酶活性
鉴定。
请回答下列问题：
（1）扩大培养又称加富培养，可增
加 ，
以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。
提示： 目的菌株数量
（2）该研究小组将扩大培养后的混合菌液适当稀释后需接种
于 的选择培养基，倒置放入培养箱中
培养。
提示： 以木糖为唯一碳源
1. 选择培养基与鉴别培养基
项目 选择培养基 鉴别培养基
特殊 成分 加入或除去某种化学物质 加入某种指示剂或化学药品
目的 抑制或杀死其他微生物生长，促进目的微生物生长 与微生物的代谢产物或培养
基中的成分发生特定反应
用途 培养、分离出特定微生物 鉴别不同类型的微生物
举
例 培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素等，抑制细菌生长；利用以尿素作唯一氮源的培养基来培养尿素分解菌 可用伊红—亚甲蓝培养基鉴
定饮用水或乳制品中是否有
大肠杆菌（若有，菌落呈深
紫色）
2. 加富培养基与选择培养基的比较
（1）从某种意义上来说，加富培养基类似于选择培养基。
（2）二者不同的是，采用加富培养基的目的是增加所需分离的微
生物的数量，使其形成生长优势，以分离出该种微生物；采
用选择培养基的目的一般是抑制不需要的微生物生长和繁
殖，而使所需要的微生物增殖，再分离出所需微生物。
1. 下列对各种培养基的分析和实际不相符的是（ ）
A. 添加一定浓度酚溶液的培养基属于加富培养基
B. 以纤维素为唯一碳源的培养基，可分离出能分解纤维素的微生物
C. 分离和培养放线菌通常用高氏Ⅰ号培养基等合成培养基
D. 添加了溴甲酚紫的培养基可以作为产酸菌的鉴别培养基
解析： 添加一定浓度酚溶液的培养基可以抑制细菌和霉菌的生
长，培养基上仅有放线菌生长，属于选择培养基。
2. （多选）淀粉分解菌是能分解淀粉的一类微生物，在自然条件下，
淀粉分解菌和其他各种细菌混杂生活在土壤中。若细菌能分解淀
粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如
图），下列有关叙述正确的是（ ）
A. 培养基除碳源外还含有氮源等其他营养物质
B. 筛选淀粉分解菌的培养基需添加葡萄糖、淀粉
作为碳源
C. 培养平板经稀碘液处理后，可起到鉴别培养基
的作用
D. 菌落周围透明圈的面积/菌种的菌落面积的值
反映了不同细菌分解淀粉能力的差异
解析： 筛选淀粉分解菌的培养基中，除提供碳源外，还需
要氮源、水、无机盐等营养物质，A正确；筛选分离淀粉分解菌
时，需以淀粉为培养基中的唯一碳源，才能起到选择作用，B错
误；若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为
中心的透明圈，可起到鉴别培养基的作用，C正确；该值越大，分
解淀粉能力越强，该值的大小反映了不同细菌分解淀粉能力的差
异，D正确。
知识点（三） 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基
1. 实验目的：学会配制培养酵母菌的培养基。
2. 实验原理
（1）酵母菌生长繁殖需要的营养物质有水、 、
和无机盐等。
（2）马铃薯葡萄糖琼脂培养基具有酵母菌生长所需的碳元素、氮
元素和其他营养物质。
碳源
氮源
3. 实验步骤
4. 基于上述学习，判断下列相关表述的正误
（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基中的马铃薯块茎只能为酵母菌的生
长繁殖提供碳源。 （ × ）
提示：马铃薯葡萄糖琼脂培养基中的马铃薯块茎能为酵母菌
的生长繁殖提供碳源、氮源和无机盐等。
（2）马铃薯葡萄糖琼脂培养基属于固体培养基。 （ √ ）
（3）制作斜面培养基时，倒入试管中的培养基高度约为试管高度
的1/3。 （ × ）
提示：制作斜面培养基时，倒入试管中的培养基高度约为试
管高度的1/5。
×
√
×
1. 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的关键步骤有①称量、②调pH、③
定容、④灭菌、⑤溶化、⑥分装、⑦包扎、⑧计算，正确操作步
骤： ，并分析②与③、②与④正确排序的原因。
提示：正确操作步骤是⑧①⑤③②⑥⑦④。若先调pH后定容，则
会导致培养基的pH不是设定的pH，故先定容后调pH；若先灭菌后
调pH，则在调pH的过程中会引入杂菌，故先调pH后灭菌。
2. 培养基溶化后，需要冷却到50 ℃左右时，才能分装。你用什么办
法来估计培养基的温度？
提示：可以用手轻轻触摸盛有培养基的烧杯，感觉烧杯的温度下降
到刚刚不烫手时，就可以分装了。
3. 如何判断制备的培养基是否合格？
提示：将未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天，若无菌落生长，
则说明培养基制备成功；若有菌落生长，则说明培养基制备失败
（被杂菌污染或灭菌不彻底），需要重新制备。
培养基配制的4大原则
1. （多选）下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述，不正确的
是（ ）
A. 培养基应先调pH再进行灭菌
B. 培养基应先灭菌再分装到试管或培养皿
C. 溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦
D. 制作斜面培养基时，培养基高度约为试管高度的1/2
解析： 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的实验步骤为配制培养
基→调节pH→分装→包扎→灭菌，A正确，B错误；溶化琼脂时不
能使培养基溢出或烧焦，C正确；制作斜面培养基时，培养基高度
约为试管高度的1/5，D错误。
2. 马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛选，其配制过程如下：将马铃薯
去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯
浸出液中加入一定量琼脂，用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的
是（ ）
A. 应在培养基中加入链霉素，以抑制细菌的生长
B. 除碳源外，马铃薯浸出液还提供氮源和无机盐
C. 氮源进入细胞后，可能合成磷脂、核苷酸等物质
D. 加入碘液后，周围为蓝色的菌落一般能产生淀粉酶
解析： 链霉素能抑制细菌的生长，因此在培养基中加入链霉素
后可以筛选真菌，加入了链霉素的培养基属于选择培养基，A正
确；各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等最基本的物
质，因此培养基中的马铃薯浸出液除了为微生物生长提供碳源外，
还可提供的营养物质有氮源和无机盐，B正确；磷脂和核苷酸都含
有N元素，因此氮源进入细胞后，可能合成磷脂、核苷酸等物质，
C正确；淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的微生物的菌落周围淀粉被
水解，会形成透明圈，D错误。
过程评价·勤检测
02
反馈效果 筑牢基础
（1）培养基主要是指为人工培养微生物等而制备的，适合微生物
等 的营养基质。
（2）各种培养基的配方虽然不同，但其成分一般都含有
等最基本的物质。
（3）加富培养基的目的是 ，使其
形成生长优势，以分离出该种微生物；选择培养基的目的一般
是 ，而使所需要的微生物
增殖，再分离出所需微生物。
生长、繁殖或积累代谢产物
水、碳
源、氮源和无机盐
增加所需分离的微生物的数量
抑制不需要的微生物生长和繁殖
1. 天然培养基是利用营养成分难以控制的天然物质配制而成的，合成
培养基则是采用成分已知的化学试剂加蒸馏水配制而成的。下列说
法正确的是（ ）
A. 用合成培养基进行实验时，可重复性好
B. 天然培养基的营养成分不如合成培养基丰富
C. 微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快
D. 合成培养基中不含有机物
解析： 合成培养基中化学成分及其含量明确、实验的可重复性
好，A正确；天然培养基的营养成分比合成培养基丰富，B错误；
微生物生长的快慢除与培养基的成分有关外，还受其他因素的影
响，因此不能单一认为微生物在合成培养基上比在天然培养基上生
长快，C错误；合成培养基中也含有机物，D错误。
2. （2024·淮安高二调研）下列关于培养微生物所需营养物质的描
述，正确的是（ ）
A. 所有碳源都能为微生物生长提供能源
B. 蛋白胨可为微生物生长提供碳源和氮源
C. 硝酸钾只能为微生物生长提供无机盐
D. 培养基中营养物质浓度越高，微生物生长繁殖越快
解析： 有机碳源能为大多数微生物生长提供碳源和能源，无机
碳源能为自养微生物生长提供碳源，但不能提供能源，A错误；蛋
白胨能为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源和维生素等，B正确；
硝酸钾能为微生物生长提供无机盐和氮源等，C错误；培养基中的
营养物质需要控制一定的浓度和比例，营养物质浓度太高会导致培
养基渗透压过高，从而抑制微生物的生长，D错误。
3. （2024·江苏洪泽湖高级中学高二月考）甲、乙、丙为三种微生
物，可以分别在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种培养基中正常生长繁殖。若甲和丙交
换培养基，甲能正常生长繁殖，丙不能。甲和丙都不能在培养基Ⅱ
中正常生长繁殖。下列叙述正确的是（ ）
培养基 CO（NH2）2 KH2PO4 FeSO4 蔗糖
10 g 4 g 0.5 g 10 g
Ⅰ － ＋ ＋ ＋
Ⅱ － ＋ ＋ －
Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋
培养基 （NH4）2SO4 MgSO4 琼脂 H2O定容至1 000 mL
0.4 g 9.25 g 10 g Ⅰ － ＋ ＋ ＋
Ⅱ ＋ ＋ ＋ ＋
Ⅲ － ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中没
有加入这种物质。
A. 三种培养基都有水，故都是液体培养基
B. 甲、乙、丙都不是自养微生物
C. CO（NH2）2可以作为丙的碳源和氮源
D. 丙一定不是固氮微生物
解析： 三种培养基都有琼脂，故都是固体培养基，A错误；培
养基Ⅱ中没有碳源，甲和丙都不能在该培养基中正常生长繁殖，而
乙能正常生长繁殖，说明乙是自养微生物，B错误；CO（NH2）2
可以作为丙的氮源，但不能作为碳源，C错误；培养基Ⅰ中没有氮
源，结合题干“若甲和丙交换培养基，甲能正常生长繁殖，丙不
能”可知，丙一定不是固氮微生物，D正确。
4. （多选）下列关于制备用于培养酵母菌的马铃薯葡萄糖琼脂斜面培
养基的叙述，错误的是（ ）
A. 应将琼脂加热溶化后加入马铃薯的滤液中
B. 溶化后的培养基应趁热分装到洁净的试管中
C. 应在高压蒸汽灭菌后将斜面培养基摆成斜面
D. 包扎时应在试管壁上注明培养基的名称、组别、配制日期等信息
解析： 应将琼脂加入马铃薯滤液后再加热溶化，A错误；溶
化后的培养基应冷却到50 ℃左右时，才能分装到洁净的试管中，B
错误。
课时训练·提素能
03
分级练习 巩固提升
知识点一 培养基的成分和类型
1. （2024·江苏洪泽湖高级中学高二月考）下列关于培养基中营养物
质的说法，正确的是（ ）
A. 通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源
B. 蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素
C. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素
D. 同一种物质不可能既作为碳源又作为能源物质
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
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解析： 一般情况下，琼脂可以作为凝固剂，但不能作为微生物
的碳源，A错误；蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源和维
生素等，不能提供磷酸盐，B错误；为了满足乳酸杆菌对营养物质
的要求，保证乳酸杆菌能正常生长繁殖，培养乳酸杆菌时需要在培
养基中添加维生素，C正确；同一物质，例如糖类等，既可以作为
碳源又可以作为能源物质，D错误。
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2. （2024·江苏涟水一中高二月考）下列是关于微生物的培养基成分
的叙述，正确的是（ ）
A. 碳源是构成微生物体的重要成分，微生物生命活动的能量也来源
于碳源
B. 氮源影响微生物的生长和代谢，其中氮素可参与构成细胞中蛋白
质、核苷酸等生物大分子
C. 微生物从培养基中摄取的磷一般以磷酸盐形式存在，可用于合成
磷脂、ATP、核酸等物质
D. 酵母菌等异养微生物的碳源可以是CO2，也可以是葡萄糖等含碳有
机物
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解析： 碳源是构成微生物体的重要成分，某些微生物如光合细
菌所需的能量来源于光能，A错误；核苷酸不是生物大分子，B错
误；磷作为构成磷脂、核酸和ATP的必要元素，是微生物生长繁殖
所必需的，微生物从培养基中摄取的磷一般以磷酸盐形式存在，C
正确；酵母菌等异养微生物所需碳源来源于含碳有机物，不能直接
利用CO2，D错误。
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3. 从土壤中筛选蛋白酶产生菌时，所用培养基为（ ）
A. 加富培养基 B. 选择培养基
C. 基础培养基 D. 鉴别培养基
解析： 根据题意可知，从土壤中筛选蛋白酶产生菌时，可以在
培养基中加入蛋白质作为唯一氮源，从而使该菌变成优势种，该培
养基属于选择培养基。
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4. 获得某种特定的微生物一般需要用鉴别培养基进行鉴定，下列属于
鉴别培养基的是（ ）
A. 加入纤维素粉的培养基
B. 加入青霉素的培养基
C. 加入溴甲酚紫的培养基
D. 加入血液成分的培养基
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解析： 加入纤维素粉的培养基可以分离出能分解纤维素的微生
物，加入青霉素的培养基可以选择培养出酵母菌或霉菌等真菌，因
此二者均属于选择培养基，A、B不符合题意；加入溴甲酚紫的培
养基可用于鉴别产酸微生物，属于鉴别培养基，C符合题意；加入
血液成分的培养基可用于培养百日咳博德氏菌，属于加富培养基，
D不符合题意。
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知识点二 培养基的配制
5. 下列关于培养基配制的叙述，错误的是（ ）
A. 合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的
B. 固体培养基中加入的琼脂能提供额外的碳源和氮源
C. 对有特殊生长条件需求的微生物要对培养基做调整
D. 无论是固体培养基还是液体培养基，配制时都要加水
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解析： 不同培养基的用途不同，如在固体培养基上可形成单个
菌落从而实现微生物的分离，鉴别培养基可以鉴定微生物的种类，
A正确；固体培养基中加入的琼脂不能被微生物分解利用，故琼脂
不能提供额外的碳源和氮源，B错误；对有特殊生长条件需求的微
生物要对培养基做调整，如培养乳酸杆菌时需要在培养基中加入维
生素，C正确。
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6. 将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯滤液。在
马铃薯滤液中加入一定量的葡萄糖和琼脂，用蒸馏水定容后灭菌，
得到M培养基。下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 向培养皿中转移已灭菌的M培养基时，要注意不要黏附在壁上
B. 培养基分装到培养皿后需在皿盖注明培养基的名称、配制日期等
信息，牛皮纸包扎后灭菌
C. M培养基中的马铃薯滤液可为微生物提供无机盐
D. 将M培养基分装到试管后可以做成斜面培养基
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解析： 向培养皿中转移已灭菌的M培养基时，要注意不要黏附
在壁上，否则会引起杂菌污染，A正确；培养基分装到培养皿后需
在培养皿底部注明培养基的名称、配制日期等信息，B错误；马铃
薯滤液中含有碳源、氮源、无机盐等营养物质，C正确；M培养基
属于固体培养基，可以搁置斜面做成斜面培养基，D正确。
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7. 某种细菌菌株需要亮氨酸才能生长，但此菌株对链霉素敏感。实验
者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表格中细菌菌株类型，则配制相
应选择培养基类型正确的是（ ）
选项 筛选出不需要亮
氨酸的菌株 筛选出抗链霉
素的菌株 筛选出不需要亮氨酸且抗
链霉素的菌株
A L＋ S＋ L－ S－ L＋ S－
B L－ S－ L＋ S＋ L－ S＋
C L－ S＋ L＋ S＋ L－ S－
D L＋ S－ L－ S－ L＋ S＋
注：L代表亮氨酸，S代表链霉素；“＋”代表加入，“－”代表
不加入。
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解析： 根据题目要求，筛选不需要亮氨酸的菌株时，培养基中
不需要添加亮氨酸，应使用的培养基为不加L，能生存的就是不需
要亮氨酸的细菌，同时也不应该添加链霉素，以免杀死该种细菌；
筛选抗链霉素的菌株时，需要向培养基中添加链霉素和亮氨酸，能
抵抗链霉素的细菌就能在培养基生存下来；筛选不需要亮氨酸且抗
链霉素的菌株时，需要向培养基中添加链霉素，但不添加亮氨酸，
应用的培养基为L－、S＋，能在培养基上生存的细菌，即是所需
要的菌种，B正确，A、C、D错误。
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8. （多选）下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，正确的是
（ ）
A. 在溶化琼脂时，需要控制火力并不断用玻棒搅拌，以免发生焦煳
B. 牛肉膏、蛋白胨容易吸潮，称取时动作要迅速，并及时盖上瓶盖
C. 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用
皮筋勒紧，放入干热灭菌箱内灭菌
D. 培养基应先调pH再灭菌后分装到培养皿
解析： 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上
牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌，而不是干热
灭菌，C错误。
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9. （多选）（2024·泰州高二月考）如图4支试管分别代表4种微生物
（固氮菌、产甲烷菌、酵母菌、幽门螺杆菌）在半固体培养基中的
生长状态，其中乙试管代表幽门螺杆菌的生长状态，如表为某培养
基的成分及其含量。下列叙述正确的是（ ）
成分 含量 成分 含量
葡萄糖 10 g CaSO4 0.2 g
KH2PO4 0.2 g CaCO3 5 g
MgSO4 0.2 g 琼脂 3.5 g
NaCl 0.2 g 蒸馏水 1 L
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A. 甲、丙、丁三个试管中的微生物分别是固氮菌、产甲烷菌、酵母
菌
B. 将幽门螺杆菌转移到题表所示培养基继续培养，由于培养基营养
充足而更有利于它的生长
C. 幽门螺杆菌的代谢类型可能是微厌氧异养型
D. 丁试管中的微生物在题表所示培养基上不能正常生长，但与圆褐
固氮菌同时接种在题表所示培养基上可以正常生长
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解析： 分析题图4支试管中微生物对空气的依赖程度，甲试
管中微生物在试管上部空气充足的条件下生长，其对应固氮菌；乙
试管中幽门螺杆菌在试管中部生长，其代谢类型可能是微厌氧异养
型，在空气充足或绝对无氧的环境中不能生长；丙试管中微生物集
中在试管底部生长，是严格厌氧型微生物，其对应产甲烷菌；丁试
管中微生物在培养基中均匀分布，是兼性厌氧型微生物，其对应酵
母菌，A、C正确。由题表所示培养基的成分及其含量可知，该培
养基缺少氮源，故将幽门螺杆菌转移到该培养基上不能正常生长；
丁试管中的微生物（酵母菌）在该培养基上也不能正常生长，但与圆
褐固氮菌同时接种在该培养基上可以正常生长，因为圆褐固氮菌能固
定空气中的N2，为酵母菌的生长提供氮源，B错误，D正确。
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10. （多选）（2024·江苏金沙中学高二期中）为探究某物种的等位基
因CST1与Cst1E81K的功能，科研人员将表达CST1和Cst1E81K的质粒
分别导入不能吸收葡萄糖的酵母菌（以麦芽糖为碳源），经处理
后将其接种到含不同碳源的培养基上，生长情况如下表所示。相
关叙述正确的是（ ）
组别 麦芽糖 麦芽糖＋葡萄糖类似物（吸收后
可杀死酵母菌） 稀释5倍 稀释25倍 稀释125倍 稀释5倍 稀释25倍 稀释125倍
空质粒 ＋＋＋ ＋＋＋ ＋ ＋＋＋ ＋＋＋ ＋
CST1 ＋＋＋ ＋＋ ＋ ＋＋ － －
Cst1E81K ＋＋＋ ＋＋ ＋ ＋＋＋ ＋＋ ＋
注：“＋”表示菌落多少，“－”表示无菌落。
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A. 培养基中除碳源外还需添加氮源、无机盐、水等成分
B. 加葡萄糖类似物的目的是鉴定酵母菌能否吸收葡萄糖
C. 据表推测，CST1可能与转运葡萄糖进入细胞有关
D. 导入Cst1E81K的酵母菌吸收葡萄糖的能力强于导入CST1的酵母菌
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解析： 培养基中的主要成分有碳源、氮源、水和无机盐
等，A正确；加葡萄糖类似物的目的是鉴定酵母菌能否吸收葡萄
糖，B正确；据表推测，导入CST1的酵母菌在麦芽糖＋葡萄糖类
似物的培养基上菌落数目减少，这是由于葡萄糖类似物被吸收后
可以杀死酵母菌，据此推测CST1能转运葡萄糖类似物进入酵母
菌，故其功能可能是转运葡萄糖进入细胞，C正确；在麦芽糖＋
葡萄糖类似物的培养基中，导入Cst1E81K的酵母菌菌落数目多于
CST1处理组，这说明其存活率更高，由于葡萄糖类似物被吸收后
可以杀死酵母菌，据此推测导入Cst1E81K的酵母菌吸收葡萄糖的能
力弱于导入CST1的酵母菌，D错误。
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11. 在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一定的速度流
出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养
物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量
受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存
在的新菌株。请回答下列问题：
（1）液体培养基中除了把葡萄糖作为 外，还应该含
有 。
解析： 由题意可知，连续培养的培养基是液体培养
基，培养基的基本营养成分有碳源、氮源、水、无机盐。
碳源
氮源、水和无机盐等营养物质
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（2）样品中还发现了CV101、CV103新品种，对其菌株的代谢差
异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物
是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过
CV103的培养基中生长，据此作出的推测是
。
请设计并完成下列实验，来验证你的观点：
①配制 的固体培养基（A组）和不
含碳源的固体培养基（B组）；
CV101菌株能
以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源
以醋酸盐为唯一碳源
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②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基
中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应
在 条件下进行。
③预期实验结果：
。
无菌（或适宜的温度等）
A组菌株生长（形成菌落），B组菌株
不能生长（无菌落）
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解析： 由题意可知，CV103对葡萄糖吸收率最高，代
谢终产物是醋酸盐，CV101可以在过滤的培养过CV103的培
养基中生长，由此可以推出CV101菌株能以CV103菌株产生
的醋酸盐为碳源。若要验证这一推论，就要配制以醋酸盐为
唯一碳源的培养基，将CV101菌株分别接种到以醋酸盐为唯
一碳源的固体培养基（A组）和不含碳源的固体培养基（B
组）中培养一段时间，并观察记录菌株生长情况。如果A组
菌株生长（形成菌落），B组菌株不能生长（无菌落），则
说明推论是正确的。
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