【备考2027】第二十二章 发酵工程--通用版高考生物学第一轮章节练（含答案）

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2027通用版高考生物学第一轮
第二十二章　发酵工程
第1节　传统发酵技术
五年高考
1.★(2025河南,6,3分)食醋和黄酒是我国传统的日常调味品,均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是(　　)
A.醋酸的发酵是好氧发酵,而酒精的发酵是厌氧发酵
B.以谷物为原料酿造食醋和黄酒时,伴有pH下降和气体产生
C.食醋和黄酒发酵过程中,微生物繁殖越快发酵产物产率越高
D.使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一
2.★(2025江苏,6,2分)某同学利用红叶李果实制作果醋,图示其操作的简易流程。下列相关叙述正确的是(　　)
A.果酒、果醋发酵所需菌种的细胞结构相同
B.过程①中添加适量果胶酶,有利于提高出汁率
C.过程②中,为使菌种充分吸收营养物质,需每日多次开盖搅拌
D.过程③发酵时会产生大量气泡,需拧松瓶盖放气
3.★(2024福建,5,2分)虾酱是以虾为原料的传统发酵食品。在乳酸菌、芽孢杆菌等多种微生物共同作用下,原料中的蛋白质和脂肪发生水解,形成虾酱的特有风味。下列叙述错误的是(　　)
A.虾酱特有风味的形成受发酵时间的影响
B.传统虾酱的制作过程需要严格执行无菌操作
C.原料中的蛋白质会被水解成小分子的肽和氨基酸
D.虾酱发酵过程微生物种类和数量的分析有助于改良风味
4.★★(2025重庆,6,3分)豆瓣酱是我国地方特色调味品,生产豆瓣酱的方法是先将蚕豆瓣制备成豆瓣曲(如图),再添加调味料进一步发酵。下列叙述错误的是(　　)
A.沸水漂烫能杀死蚕豆细胞,减少营养物质消耗
B.面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养
C.菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物
D.豆瓣曲的制备主要是利用厌氧微生物发酵
5.★★(2025云南,15,3分)黄酒是我国古老的发酵酒之一,传统酿制中,先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料,对之前发酵留存的少量酒曲(曲种)进行扩大制曲;再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后,添加足量酒母(含酵母菌)完成发酵,压榨成品。下列说法错误的是(　　)
A.小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质
B.为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质,扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌
C.糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率
D.将酒曲混合糯米、大米处理一段时间,是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖
6.★★(2023山东,12,2分)以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理:①沸盐水冷却后再倒入坛中;②盐水需要浸没全部菜料;③盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水;④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是(　　)
A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
7.★★(2021辽宁,8,2分)利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为:先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌,发酵6天后,再接入活化的醋酸杆菌,发酵5天。下列有关叙述错误的是(　　)
A.乙醇既是醋酸发酵的底物,又可以抑制杂菌繁殖
B.酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C.酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D.接入醋酸杆菌后,应适当升高发酵温度
三年模拟
8.★★(2026届河北唐山开学考)某同学利用无花果制作果醋,图示为简易操作流程。下列相关叙述正确的是(　　)
A.无花果为发酵所需的酵母菌和乳酸菌提供碳源、氮源
B.在过程①中添加适量的果胶酶,有利于提高果汁的产量
C.为排出过程②产生的CO2,需每隔一段时间将瓶盖打开一次
D.过程③的发酵温度需控制在18~30 ℃,发酵液pH逐渐下降
9.★★(2026届安徽六校开学考)安徽名酒古井贡酒采用传统泥窖发酵,其百年窖泥中含丰富的酿酒酵母及厌氧细菌。研究发现,老窖池中酵母菌通过群体感应调控发酵进程。下列叙述不正确的是(　　)
A.传统白酒的酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用的结果
B.窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系,使酿造过程中不易被杂菌污染
C.从窖泥分离的酵母菌扩大培养时,需全程在无氧环境中进行
D.从谷物原料发酵形成的酒糟中,可分离出产淀粉酶的微生物
10.★★(2026届河南示范性高中开学考)猕猴桃果醋是以猕猴桃果实为原料,经过筛选、清洗、破碎(榨汁)、酶解、调节糖度、酒精发酵、醋酸发酵、过滤、灭菌、陈酿等工艺制备而成。下列叙述正确的是(　　)
A.调节糖度主要目的是使果醋具有甜度
B.酒精发酵阶段为使菌种充分吸收养分,需每日多次开盖搅拌
C.醋酸发酵阶段温度应控制在30~35 ℃,发酵液会产生大量气泡
D.发酵原料、接种菌种和发酵条件等均会影响猕猴桃果醋的品质
11.★★★(新思维·发酵中的操作及结果等分析)(2025届江西一模)刺梨是一种落叶灌木,其果实富含维生素C、维生素P和超氧化物歧化酶(SOD),维生素C含量是苹果的800倍,被称为“维生素C大王”。为提高刺梨的经济价值,研究人员以刺梨果实为原料制备刺梨果醋,工艺流程如下:
将新鲜成熟的刺梨果清洗干净→切块、榨汁、过滤、酶解→加入白砂糖并加入活化酵母菌→Ⅰ阶段发酵→直接加入一定量活性醋酸菌→Ⅱ阶段乙酸发酵→处理→装罐→刺梨果醋。
回答下列问题:
(1)Ⅰ阶段发酵过程中,需定期排气的原因是　　　　　　　　　　　　　　。判断Ⅰ阶段发酵结束的主要指标是　　　　　　　　　　　　。
(2)Ⅱ阶段乙酸发酵中,每日2次彻底搅拌发酵液,搅拌的目的是　　　　　　 　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)实验中,在酒精发酵第0、7 d及乙酸发酵第3~7 d取发酵样液,分别命名为原汁、果酒、Ⅱ-3 d、Ⅱ-4 d、Ⅱ-5 d、Ⅱ-6 d、Ⅱ-7 d。如图为不同发酵阶段刺梨发酵液的总酸含量和pH变化。果酒发酵过程中的pH变化较小,这是因为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,在乙酸发酵0~3 d中,总酸含量增加幅度小,可能原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
第2节　微生物的培养技术及应用
考法1　微生物的分离和鉴定:T1、T2、T9、T10、T12
考法2　微生物计数:T2、T4、T5、T9、T10、T11、T12
五年高考
1.★★(2025黑吉辽蒙,4,2分)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株,旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是(　　)
A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C.配制选择培养基时,需确保pH满足实验要求
D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
2.★★(2025湖南,5,2分)采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确的是(　　)
A.稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数
B.完成平板划线后,培养时需增加一个未接种的平板作为对照
C.土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分解成乙酸
D.用于筛选尿素分解菌的培养基含有蛋白胨、尿素和无机盐等营养物质
3.★★(2024湖南,6,2分)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示,下列操作正确的是(　　)
　 　
　　　
A.①②⑤⑥　　　B.③④⑥⑦
C.①②⑦⑧　　　D.①③④⑤
4.★★(2023辽宁,9,2分)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的,利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是(　　)
A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
★★★(2025山东,15,2分)深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下,该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜,实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是(　　)
组别 压强 纤维素 淀粉 菌落
① 常压 - + -
② 常压 + - -
③ 高压 - + -
④ 高压 + - +
注:“+”表示有;“-”表示无
A.可用平板划线法对该菌计数
B.制备培养基的过程中,应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C.由②④组可知,在以纤维素为唯一碳源的培养基上,该菌可在常压下生长
D.由③④组可知,高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
6.★★★(2025四川,8,3分)微塑料由塑料废弃物风化形成,难以降解,会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌,将总菌量相同的X、Y、X+Y(X∶Y=1∶1)分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中,培养一段时间后测定微塑料的残留率(残留率=剩余量/添加量×100%),结果如图。下列叙述正确的是(　　)
A.用平板划线法能测定X菌组中的活菌数
B.Y菌组微塑料残留率较高,故菌浓度也高
C.混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种
D.能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料
三年模拟
7.★★(2026届湖南九校联盟联考)根腐病是一种真菌引起的疾病,该病会造成根部腐烂,吸收水分和养分的功能逐渐减弱,最后全株死亡,主要表现为整株叶片发黄、枯萎。如需从土壤中分离致病真菌,流程大致如下:制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是(　　)
A.为防止杂菌污染,灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖,待冷却后倒置
B.倒平板前需要将pH调整到中性或弱碱性
C.高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100 kPa、121 ℃,15~30 min
D.连续划线时,接上次划线的起始端开始划线
8.★★(2026届黑龙江龙东联盟开学考)大肠杆菌在伊红—亚甲蓝琼脂培养基(EMB培养基)上会形成有金属光泽的深紫色菌落。利用EMB培养基鉴定冰淇淋中的大肠杆菌是否超标,相关操作正确的是(　　)
A.培养基经干热灭菌后再倒平板
B.冰淇淋原液可不经稀释直接涂布在培养基上
C.EMB培养基上形成的菌落均呈有金属光泽的深紫色
D.使用过的培养基可以直接丢弃
9.★★(2026届江西红十校开学考)牛是一种反刍动物,其瘤胃内含有大量共生生物,包括细菌、真菌和原生动物。其中,纤维素分解菌是核心功能群体。科研人员为统计牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌的数量并挑选出能高效分解纤维素的目的菌,进行了如下实验。平板①、②、③上菌落数的最大值分别为60、63、66个。下列相关叙述错误的是(　　)
A.为了利于挑选出目的菌,培养箱内应氧气充足、温度适宜
B.该牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌约为3.15×107个/mL　
C.从菌落甲中更有可能得到高效分解纤维素的目的菌
D.各平板中,纤维素是唯一的碳源,但不是唯一含碳物质
10.★★★(新思维·营养缺陷型菌株筛选)(2026届重庆育才中学等三校诊断)如图是在氧气充足的条件下筛选某种营养缺陷型但高产酒精的酿酒酵母的示意图,已知营养缺陷型酵母只能在完全培养基上生长而不能在基本培养基上生长。原位影印是通过无菌绒布将原培养基上菌落保持位置不变接种到新培养基的过程。下列相关描述,正确的是(　　)
A.紫外线处理的目的是对菌液进行消毒
B.图中①②③④均为完全培养基
C.图中B过程的接种方法还可用于活菌计数
D.可以分别截取D、E菌落周围的培养基进行酒精含量检测
11.★★★(2026届四川绵阳南山中学月考)科研小组用双层平板法测定某样本中噬菌体的数量,操作流程是:①先铺2%琼脂于培养皿底层,形成底层琼脂培养基;②将敏感指示菌和待测样本混合液,加入已熔化并降温至45~48 ℃的1%琼脂培养基中,迅速倾注于底层培养基上,形成上层培养基;③倒置培养一段时间后,计数噬菌斑。双层平板如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.与下层培养基相比,上层培养基中琼脂浓度低,形成的噬菌斑较大便于计数
B.可用酵母菌作为敏感指示菌对T2噬菌体进行计数
C.上层培养基冷却至45~48 ℃,主要目的是防止底层培养基液化
D.倒平板前需对培养基和培养皿进行干热灭菌
12.★★★(2026届黑龙江哈尔滨师大附中月考)尿素是一种重要的农业肥料,需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题,请分析回答:
(1)如图是利用　　　　　　　　法进行微生物接种的,把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面。除此方法外,获得纯培养物的接种方法还有　　　　　　　　。
(2)在培养基上进行划线操作中,在2至5区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的是　　　　 　　　 　　　　　　　　　　　　。
(3)下面是两种培养基配方
表1　A培养基配方
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O
1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 定容至1 000 mL
表2　B培养基配方
纤维 素粉 NaNO3 Na2HPO4· 7H2O KH2PO4 MgSO4· 7H2O KCl 酵母 浸膏 H2O
5 g 1 g 1.2 g 0.9 g 0.5 g 0.5 g 0.5 g 定容至1 000 mL
①微生物纯培养的操作步骤:　　　　(用字母顺序回答)。
a.接种　b.配制培养基　c.灭菌　d.分离和培养
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择　　　　(A、B)配方的培养基,在该培养基中加入　　 　　指示剂,可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
③据B培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是　　　　。
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为1×106的培养基中,取0.2 mL稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了一个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中,　　　　同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是　　　　　个。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量　　　　。
第3节　发酵工程及其应用
五年高考
1.★★(2025陕晋青宁,3,3分)我国是世界上最大的柠檬酸生产国,利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸,流程如图。下列叙述错误的是(　　)
A.淀粉水解糖为发酵提供碳源和能源
B.扩大培养可提供足量的黑曲霉菌种
C.培养基、发酵罐和空气的灭菌方法相同
D.通气、搅拌有利于溶解氧增加和柠檬酸积累
2.★★(2024江西,11,2分)井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素,它由吸水链霉菌井冈变种(JGs,一种放线菌,菌体呈丝状生长)发酵而来,在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述,正确的是(　　)
A.JGs可发酵生产井冈霉素,因为它含有能够编码井冈霉素的基因
B.JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程不影响井冈霉素的产量
C.提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,一定会提高井冈霉素的产量
D.稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化
3.★★(2023重庆,9,3分)垃圾分类有利于变废为宝,减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是(　　)
A.压榨出的油水混合物可再加工,生产出多种产品
B.添加的木屑有利于堆肥体通气,还可作为某些微生物的碳源
C.X中需要添加合适的菌种,才能产生沼气
D.为保证堆肥体中微生物的活性,不宜对堆肥体进行翻动
4.★★(2022湖北,14,2分)废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.该生产过程中,一定有气体生成
B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
5.★★★(2024贵州,14,3分)酵母菌W是一种产果胶酶工程菌。为探究酵母菌W的果胶酶产量与甲醇浓度(Ⅰ<Ⅱ<Ⅲ)的关系。将酵母菌W以相同的初始接种量接种到发酵罐,在适宜条件下培养,结果如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.发酵罐中接种量越高,酵母菌W的K值越大
B.甲醇浓度为Ⅲ时,酵母菌W的果胶酶合成量最高
C.72 h前,三组实验中,甲醇浓度为Ⅱ时,产果胶酶速率最高
D.96 h后,是酵母菌W用于工业生产中收集果胶酶的最佳时期
三年模拟
6.★★(2026届四川成都树德中学月考)发酵技术广泛应用于食品、医药、农业等领域。下列叙述正确的是(　　)
A.菌落的大小、颜色、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B.工业化生产啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵,大部分糖的分解都在后发酵阶段完成
C.发酵获得的单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质,还含有糖类、脂质和维生素等物质
D.醋酸菌的最适生长温度为30~35 ℃,当缺少糖源时,其可以直接将乙醇转化为乙酸
7.★★(2026届湖南常德月考)下列有关啤酒工业化生产的叙述,错误的是(　　)
A.啤酒发酵过程包括主发酵和后发酵两个阶段
B.啤酒生产过程中发酵温度和时间会影响啤酒的风味
C.在啤酒的酿造过程中,向发酵罐中持续通入空气有利于提高啤酒产量
D.工业化生产啤酒时,需要对原料和设备进行消毒和灭菌
8.★★(2026届重庆一中月考)谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵生产L-谷氨酸。甲图为谷氨酸棒状杆菌在不同pH条件下的代谢途径。乙图为L-谷氨酸发酵装置,其培养基成分主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素(增大细胞膜通透性,利于谷氨酸进入发酵液)等。下列说法正确的是(　　)
A.据培养基成分和发酵装置可推测,谷氨酸棒状杆菌的代谢类型为异养厌氧型
B.发酵液中的氨水需分次添加,其作用为维持pH和提供氮源
C.为监测发酵液中的活菌数目,可采用显微镜直接计数法或平板划线法
D.发酵结束后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥即可获得产品
9.★★(2026届河南部分学校联考)酸奶加工厂为优化生产工艺,对传统酸奶发酵过程进行了改进。已知酸奶发酵主要依赖保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的协同作用:前者可将乳糖分解为乳酸,后者能产生促进前者生长的维生素。酸奶生产过程包括原料乳杀菌、接种发酵和冷藏保存三个阶段。下列有关说法错误的是(　　)
A.多种微生物混合发酵有利于提高酸奶的风味
B.一般采用高压蒸汽灭菌法对原料乳进行灭菌
C.发酵过程中要随时监测培养液中微生物数量和产物浓度
D.发酵后期缺氧且呈酸性的发酵液可抑制杂菌繁殖
10.★★★(2026届福建漳州一中月考)生产L-谷氨酸主要依赖有氧发酵,常用菌种谷氨酸棒状杆菌大多为生物素合成缺陷型。在各组发酵罐中分别添加不同浓度的生物素,检测结果如图。下列叙述错误的是(　　)
A.发酵过程中将空气直接通入发酵罐以保证有氧条件
B.甲~丁组谷氨酸棒状杆菌数量均呈现“S”形增长
C.乙~丁组L-谷氨酸产量不与菌体细胞密度成正比
D.用发酵罐发酵前需要进行谷氨酸棒状杆菌的扩大培养
第二十二章　发酵工程
第1节　传统发酵技术
五年高考
1.★(2025河南,6,3分)食醋和黄酒是我国传统的日常调味品,均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是(　　)
A.醋酸的发酵是好氧发酵,而酒精的发酵是厌氧发酵
B.以谷物为原料酿造食醋和黄酒时,伴有pH下降和气体产生
C.食醋和黄酒发酵过程中,微生物繁殖越快发酵产物产率越高
D.使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一
答案　C　
2.★(2025江苏,6,2分)某同学利用红叶李果实制作果醋,图示其操作的简易流程。下列相关叙述正确的是(　　)
A.果酒、果醋发酵所需菌种的细胞结构相同
B.过程①中添加适量果胶酶,有利于提高出汁率
C.过程②中,为使菌种充分吸收营养物质,需每日多次开盖搅拌
D.过程③发酵时会产生大量气泡,需拧松瓶盖放气
答案　B　
3.★(2024福建,5,2分)虾酱是以虾为原料的传统发酵食品。在乳酸菌、芽孢杆菌等多种微生物共同作用下,原料中的蛋白质和脂肪发生水解,形成虾酱的特有风味。下列叙述错误的是(　　)
A.虾酱特有风味的形成受发酵时间的影响
B.传统虾酱的制作过程需要严格执行无菌操作
C.原料中的蛋白质会被水解成小分子的肽和氨基酸
D.虾酱发酵过程微生物种类和数量的分析有助于改良风味
答案　B　
4.★★(2025重庆,6,3分)豆瓣酱是我国地方特色调味品,生产豆瓣酱的方法是先将蚕豆瓣制备成豆瓣曲(如图),再添加调味料进一步发酵。下列叙述错误的是(　　)
A.沸水漂烫能杀死蚕豆细胞,减少营养物质消耗
B.面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养
C.菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物
D.豆瓣曲的制备主要是利用厌氧微生物发酵
答案　D　
5.★★(2025云南,15,3分)黄酒是我国古老的发酵酒之一,传统酿制中,先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料,对之前发酵留存的少量酒曲(曲种)进行扩大制曲;再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后,添加足量酒母(含酵母菌)完成发酵,压榨成品。下列说法错误的是(　　)
A.小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质
B.为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质,扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌
C.糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率
D.将酒曲混合糯米、大米处理一段时间,是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖
答案　B　
6.★★(2023山东,12,2分)以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理:①沸盐水冷却后再倒入坛中;②盐水需要浸没全部菜料;③盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水;④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是(　　)
A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
答案　C　
7.★★(2021辽宁,8,2分)利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为:先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌,发酵6天后,再接入活化的醋酸杆菌,发酵5天。下列有关叙述错误的是(　　)
A.乙醇既是醋酸发酵的底物,又可以抑制杂菌繁殖
B.酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C.酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D.接入醋酸杆菌后,应适当升高发酵温度
答案　B　
三年模拟
8.★★(2026届河北唐山开学考)某同学利用无花果制作果醋,图示为简易操作流程。下列相关叙述正确的是(　　)
A.无花果为发酵所需的酵母菌和乳酸菌提供碳源、氮源
B.在过程①中添加适量的果胶酶,有利于提高果汁的产量
C.为排出过程②产生的CO2,需每隔一段时间将瓶盖打开一次
D.过程③的发酵温度需控制在18~30 ℃,发酵液pH逐渐下降
答案　B　
9.★★(2026届安徽六校开学考)安徽名酒古井贡酒采用传统泥窖发酵,其百年窖泥中含丰富的酿酒酵母及厌氧细菌。研究发现,老窖池中酵母菌通过群体感应调控发酵进程。下列叙述不正确的是(　　)
A.传统白酒的酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用的结果
B.窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系,使酿造过程中不易被杂菌污染
C.从窖泥分离的酵母菌扩大培养时,需全程在无氧环境中进行
D.从谷物原料发酵形成的酒糟中,可分离出产淀粉酶的微生物
答案　C　
10.★★(2026届河南示范性高中开学考)猕猴桃果醋是以猕猴桃果实为原料,经过筛选、清洗、破碎(榨汁)、酶解、调节糖度、酒精发酵、醋酸发酵、过滤、灭菌、陈酿等工艺制备而成。下列叙述正确的是(　　)
A.调节糖度主要目的是使果醋具有甜度
B.酒精发酵阶段为使菌种充分吸收养分,需每日多次开盖搅拌
C.醋酸发酵阶段温度应控制在30~35 ℃,发酵液会产生大量气泡
D.发酵原料、接种菌种和发酵条件等均会影响猕猴桃果醋的品质
答案　D　
11.★★★(新思维·发酵中的操作及结果等分析)(2025届江西一模)刺梨是一种落叶灌木,其果实富含维生素C、维生素P和超氧化物歧化酶(SOD),维生素C含量是苹果的800倍,被称为“维生素C大王”。为提高刺梨的经济价值,研究人员以刺梨果实为原料制备刺梨果醋,工艺流程如下:
将新鲜成熟的刺梨果清洗干净→切块、榨汁、过滤、酶解→加入白砂糖并加入活化酵母菌→Ⅰ阶段发酵→直接加入一定量活性醋酸菌→Ⅱ阶段乙酸发酵→处理→装罐→刺梨果醋。
回答下列问题:
(1)Ⅰ阶段发酵过程中,需定期排气的原因是　　　　　　　　　　　　　　。判断Ⅰ阶段发酵结束的主要指标是　　　　　　　　　　　　。
(2)Ⅱ阶段乙酸发酵中,每日2次彻底搅拌发酵液,搅拌的目的是　　　　　　 　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)实验中,在酒精发酵第0、7 d及乙酸发酵第3~7 d取发酵样液,分别命名为原汁、果酒、Ⅱ-3 d、Ⅱ-4 d、Ⅱ-5 d、Ⅱ-6 d、Ⅱ-7 d。如图为不同发酵阶段刺梨发酵液的总酸含量和pH变化。果酒发酵过程中的pH变化较小,这是因为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,在乙酸发酵0~3 d中,总酸含量增加幅度小,可能原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
答案　(1)酒精发酵过程中会产生CO2(,因此需要定期排气)　糖度不再变化(或酒精不再增加)　(2)增加发酵液的溶解氧,保证醋酸菌的活性;(让发酵液与醋酸菌充分接触,)使发酵更充分　(3)酵母菌主导的发酵主要代谢产物是乙醇,产酸性物质很少　醋酸菌适应发酵基质较为缓慢,此时产乙酸能力低
第2节　微生物的培养技术及应用
考法1　微生物的分离和鉴定:T1、T2、T9、T10、T12
考法2　微生物计数:T2、T4、T5、T9、T10、T11、T12
五年高考
1.★★(2025黑吉辽蒙,4,2分)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株,旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是(　　)
A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C.配制选择培养基时,需确保pH满足实验要求
D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
答案　D　
2.★★(2025湖南,5,2分)采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确的是(　　)
A.稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数
B.完成平板划线后,培养时需增加一个未接种的平板作为对照
C.土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分解成乙酸
D.用于筛选尿素分解菌的培养基含有蛋白胨、尿素和无机盐等营养物质
答案　B　
3.★★(2024湖南,6,2分)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示,下列操作正确的是(　　)
　 　
　　　
A.①②⑤⑥　　　B.③④⑥⑦
C.①②⑦⑧　　　D.①③④⑤
答案　D　
4.★★(2023辽宁,9,2分)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的,利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是(　　)
A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
答案　D　
★★★(2025山东,15,2分)深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下,该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜,实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是(　　)
组别 压强 纤维素 淀粉 菌落
① 常压 - + -
② 常压 + - -
③ 高压 - + -
④ 高压 + - +
注:“+”表示有;“-”表示无
A.可用平板划线法对该菌计数
B.制备培养基的过程中,应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C.由②④组可知,在以纤维素为唯一碳源的培养基上,该菌可在常压下生长
D.由③④组可知,高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
答案　D　
6.★★★(2025四川,8,3分)微塑料由塑料废弃物风化形成,难以降解,会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌,将总菌量相同的X、Y、X+Y(X∶Y=1∶1)分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中,培养一段时间后测定微塑料的残留率(残留率=剩余量/添加量×100%),结果如图。下列叙述正确的是(　　)
A.用平板划线法能测定X菌组中的活菌数
B.Y菌组微塑料残留率较高,故菌浓度也高
C.混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种
D.能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料
答案　C　
三年模拟
7.★★(2026届湖南九校联盟联考)根腐病是一种真菌引起的疾病,该病会造成根部腐烂,吸收水分和养分的功能逐渐减弱,最后全株死亡,主要表现为整株叶片发黄、枯萎。如需从土壤中分离致病真菌,流程大致如下:制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是(　　)
A.为防止杂菌污染,灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖,待冷却后倒置
B.倒平板前需要将pH调整到中性或弱碱性
C.高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100 kPa、121 ℃,15~30 min
D.连续划线时,接上次划线的起始端开始划线
答案　C　
8.★★(2026届黑龙江龙东联盟开学考)大肠杆菌在伊红—亚甲蓝琼脂培养基(EMB培养基)上会形成有金属光泽的深紫色菌落。利用EMB培养基鉴定冰淇淋中的大肠杆菌是否超标,相关操作正确的是(　　)
A.培养基经干热灭菌后再倒平板
B.冰淇淋原液可不经稀释直接涂布在培养基上
C.EMB培养基上形成的菌落均呈有金属光泽的深紫色
D.使用过的培养基可以直接丢弃
答案　B　
9.★★(2026届江西红十校开学考)牛是一种反刍动物,其瘤胃内含有大量共生生物,包括细菌、真菌和原生动物。其中,纤维素分解菌是核心功能群体。科研人员为统计牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌的数量并挑选出能高效分解纤维素的目的菌,进行了如下实验。平板①、②、③上菌落数的最大值分别为60、63、66个。下列相关叙述错误的是(　　)
A.为了利于挑选出目的菌,培养箱内应氧气充足、温度适宜
B.该牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌约为3.15×107个/mL　
C.从菌落甲中更有可能得到高效分解纤维素的目的菌
D.各平板中,纤维素是唯一的碳源,但不是唯一含碳物质
答案　A　
10.★★★(新思维·营养缺陷型菌株筛选)(2026届重庆育才中学等三校诊断)如图是在氧气充足的条件下筛选某种营养缺陷型但高产酒精的酿酒酵母的示意图,已知营养缺陷型酵母只能在完全培养基上生长而不能在基本培养基上生长。原位影印是通过无菌绒布将原培养基上菌落保持位置不变接种到新培养基的过程。下列相关描述,正确的是(　　)
A.紫外线处理的目的是对菌液进行消毒
B.图中①②③④均为完全培养基
C.图中B过程的接种方法还可用于活菌计数
D.可以分别截取D、E菌落周围的培养基进行酒精含量检测
答案　C　
11.★★★(2026届四川绵阳南山中学月考)科研小组用双层平板法测定某样本中噬菌体的数量,操作流程是:①先铺2%琼脂于培养皿底层,形成底层琼脂培养基;②将敏感指示菌和待测样本混合液,加入已熔化并降温至45~48 ℃的1%琼脂培养基中,迅速倾注于底层培养基上,形成上层培养基;③倒置培养一段时间后,计数噬菌斑。双层平板如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.与下层培养基相比,上层培养基中琼脂浓度低,形成的噬菌斑较大便于计数
B.可用酵母菌作为敏感指示菌对T2噬菌体进行计数
C.上层培养基冷却至45~48 ℃,主要目的是防止底层培养基液化
D.倒平板前需对培养基和培养皿进行干热灭菌
答案　A　
12.★★★(2026届黑龙江哈尔滨师大附中月考)尿素是一种重要的农业肥料,需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题,请分析回答:
(1)如图是利用　　　　　　　　法进行微生物接种的,把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面。除此方法外,获得纯培养物的接种方法还有　　　　　　　　。
(2)在培养基上进行划线操作中,在2至5区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的是　　　　 　　　 　　　　　　　　　　　　。
(3)下面是两种培养基配方
表1　A培养基配方
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O
1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 定容至1 000 mL
表2　B培养基配方
纤维 素粉 NaNO3 Na2HPO4· 7H2O KH2PO4 MgSO4· 7H2O KCl 酵母 浸膏 H2O
5 g 1 g 1.2 g 0.9 g 0.5 g 0.5 g 0.5 g 定容至1 000 mL
①微生物纯培养的操作步骤:　　　　(用字母顺序回答)。
a.接种　b.配制培养基　c.灭菌　d.分离和培养
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择　　　　(A、B)配方的培养基,在该培养基中加入　　 　　指示剂,可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
③据B培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是　　　　。
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为1×106的培养基中,取0.2 mL稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了一个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中,　　　　同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是　　　　　个。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量　　　　。
答案　(1)平板划线　稀释涂布平板法　(2)杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使此次划线的菌种直接来源于上次划线的末端,以逐步稀释菌种　(3)①bcad　②A　酚红　③异养型　(4)乙　1.16×109　少
第3节　发酵工程及其应用
五年高考
1.★★(2025陕晋青宁,3,3分)我国是世界上最大的柠檬酸生产国,利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸,流程如图。下列叙述错误的是(　　)
A.淀粉水解糖为发酵提供碳源和能源
B.扩大培养可提供足量的黑曲霉菌种
C.培养基、发酵罐和空气的灭菌方法相同
D.通气、搅拌有利于溶解氧增加和柠檬酸积累
答案　C　
2.★★(2024江西,11,2分)井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素,它由吸水链霉菌井冈变种(JGs,一种放线菌,菌体呈丝状生长)发酵而来,在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述,正确的是(　　)
A.JGs可发酵生产井冈霉素,因为它含有能够编码井冈霉素的基因
B.JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程不影响井冈霉素的产量
C.提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,一定会提高井冈霉素的产量
D.稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化
答案　D　
3.★★(2023重庆,9,3分)垃圾分类有利于变废为宝,减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是(　　)
A.压榨出的油水混合物可再加工,生产出多种产品
B.添加的木屑有利于堆肥体通气,还可作为某些微生物的碳源
C.X中需要添加合适的菌种,才能产生沼气
D.为保证堆肥体中微生物的活性,不宜对堆肥体进行翻动
答案　D　
4.★★(2022湖北,14,2分)废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.该生产过程中,一定有气体生成
B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
答案　A　
5.★★★(2024贵州,14,3分)酵母菌W是一种产果胶酶工程菌。为探究酵母菌W的果胶酶产量与甲醇浓度(Ⅰ<Ⅱ<Ⅲ)的关系。将酵母菌W以相同的初始接种量接种到发酵罐,在适宜条件下培养,结果如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.发酵罐中接种量越高,酵母菌W的K值越大
B.甲醇浓度为Ⅲ时,酵母菌W的果胶酶合成量最高
C.72 h前,三组实验中,甲醇浓度为Ⅱ时,产果胶酶速率最高
D.96 h后,是酵母菌W用于工业生产中收集果胶酶的最佳时期
答案　C　
三年模拟
6.★★(2026届四川成都树德中学月考)发酵技术广泛应用于食品、医药、农业等领域。下列叙述正确的是(　　)
A.菌落的大小、颜色、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B.工业化生产啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵,大部分糖的分解都在后发酵阶段完成
C.发酵获得的单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质,还含有糖类、脂质和维生素等物质
D.醋酸菌的最适生长温度为30~35 ℃,当缺少糖源时,其可以直接将乙醇转化为乙酸
答案　C　
7.★★(2026届湖南常德月考)下列有关啤酒工业化生产的叙述,错误的是(　　)
A.啤酒发酵过程包括主发酵和后发酵两个阶段
B.啤酒生产过程中发酵温度和时间会影响啤酒的风味
C.在啤酒的酿造过程中,向发酵罐中持续通入空气有利于提高啤酒产量
D.工业化生产啤酒时,需要对原料和设备进行消毒和灭菌
答案　C　
8.★★(2026届重庆一中月考)谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵生产L-谷氨酸。甲图为谷氨酸棒状杆菌在不同pH条件下的代谢途径。乙图为L-谷氨酸发酵装置,其培养基成分主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素(增大细胞膜通透性,利于谷氨酸进入发酵液)等。下列说法正确的是(　　)
A.据培养基成分和发酵装置可推测,谷氨酸棒状杆菌的代谢类型为异养厌氧型
B.发酵液中的氨水需分次添加,其作用为维持pH和提供氮源
C.为监测发酵液中的活菌数目,可采用显微镜直接计数法或平板划线法
D.发酵结束后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥即可获得产品
答案　B　
9.★★(2026届河南部分学校联考)酸奶加工厂为优化生产工艺,对传统酸奶发酵过程进行了改进。已知酸奶发酵主要依赖保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的协同作用:前者可将乳糖分解为乳酸,后者能产生促进前者生长的维生素。酸奶生产过程包括原料乳杀菌、接种发酵和冷藏保存三个阶段。下列有关说法错误的是(　　)
A.多种微生物混合发酵有利于提高酸奶的风味
B.一般采用高压蒸汽灭菌法对原料乳进行灭菌
C.发酵过程中要随时监测培养液中微生物数量和产物浓度
D.发酵后期缺氧且呈酸性的发酵液可抑制杂菌繁殖
答案　B　
10.★★★(2026届福建漳州一中月考)生产L-谷氨酸主要依赖有氧发酵,常用菌种谷氨酸棒状杆菌大多为生物素合成缺陷型。在各组发酵罐中分别添加不同浓度的生物素,检测结果如图。下列叙述错误的是(　　)
A.发酵过程中将空气直接通入发酵罐以保证有氧条件
B.甲~丁组谷氨酸棒状杆菌数量均呈现“S”形增长
C.乙~丁组L-谷氨酸产量不与菌体细胞密度成正比
D.用发酵罐发酵前需要进行谷氨酸棒状杆菌的扩大培养
答案　A　
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