湖北黄冈市黄梅县第一中学2026届高三下学期生物测试题1（含答案）
文档属性
| 名称 | 湖北黄冈市黄梅县第一中学2026届高三下学期生物测试题1（含答案） |
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| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 1.4MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 通用版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2026-03-21 00:00:00 | ||
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文档简介
黄梅一中 2026 届高三下学期生物测试题 1
一、单选题（共 30 题。前 10 题，每题 1 分；后 20 题，每题 1.5 分）
1 ．传统发酵技术为我们提供了多种食品、饮料及调味品。下列叙述错误的是( )
A ．泡菜的风味由乳酸菌的种类决定
B ．用果酒发酵制作果醋的主要菌种是醋酸菌
C ．家庭酿制米酒的过程既有需氧呼吸又有厌氧呼吸
D ．传统发酵通常是利用多种微生物进行的混合发酵
2 ．密码子偏好性是指在蛋白质合成过程中，不同生物对某些密码子的使用频率表现出明显的倾向性。例如，在大肠杆菌中，70%的亮氨酸由密码子 CUA 编码；原核生物与真核生物偏好的起始密码子编码序列分别是 GTG 、ATG 等。下列叙述错误的是( )
A ．通过基因工程将某基因导入受体细胞后表达量不高的原因可能是因为密码子的偏好性
B ．若要将某细菌的基因导入酿酒酵母，在扩增其基因时，可将其中一个引物的 5′-端序列GTG 改为 ATG
C ．为满足大肠杆菌的密码子偏好性，可以通过基因改造改变基因的碱基序列
D ．为满足生物的密码子偏好性而改造后的基因转录出的 mRNA 分子数量大幅下降
3．某团队研发的抗猴痘病毒（mpox）单克隆抗体 mAb975、mAb981，可有效保护小鼠和恒河猴免受感染。研究发现这些抗体能与病毒 A35 蛋白二聚体的跨物种保守表位（抗原分子中能与抗体特异性结合的部位）结合，相关制备及作用流程如图所示。下列叙述正确的是 ( )
A ．步骤②细胞融合时需用纤维素酶处理以获得单个细胞
B ．步骤③筛选的杂交瘤细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体
C ．步骤⑤中抗体与 A35 蛋白的结合体现了免疫系统的监视功能
试卷第 1 页，共 13 页
D ．若用恒河猴 A35 蛋白免疫小鼠，无法获得针对人类 mpox 病毒的抗体
4 ．有些酵母菌可以利用工业废甲醇作为碳源，既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，大致过程：①称量土样→②依次等比稀
释→③涂布平板→④挑取平板单菌落转移至培养液中培养→⑤进行甲醇分解能力的检测
→⑥选取优良菌株扩大培养。下列叙述错误的是( )
..
A ．培养基灭菌后需冷却至 25℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板
B ．步骤③应将稀释后的菌液涂布在以甲醇为唯一碳源的固体培养基
C ．步骤⑤分别测定培养液中甲醇的剩余量进一步筛选菌株
D ．步骤⑥为使酵母菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和有氧环境
5 ．科研工作者通过胚胎工程繁殖杜泊羊，需要将早期胚胎移植到当地普通绵羊进行分娩，这样做的最终目的是为了提升杜泊羊的( )
A ．存活率 B ．遗传特性 C ．繁殖潜力 D ．免疫耐受
6 ．羔羊胚胎移植技术是集诱导羔羊卵泡发育技术、体外受精和胚胎移植等技术为一体的胚胎生物技术体系，主要用于提高优良品种的繁殖速度和遗传品质，其技术流程如图所示。下列相关叙述正确的是( )
A ．甲羊的卵母细胞发育至 MⅠ期才能与获能的精子完成受精
B ．体外受精后的早期胚胎的培养不需要额外提供营养物质
C ．要对甲羊和乙羊用促性腺激素进行同期发情处理
D ．丙羊的子宫不会对外来的早期胚胎产生排斥反应
7 ．稀释涂布平板法是微生物培养的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A ．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B ．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
C ．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
D ．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
8 ．青霉素是人类发现的第一种抗生素，其工业化生产流程如图所示。下列叙述错误的是
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( )
A ．青霉素具有杀菌作用，不需对发酵罐进行灭菌
B ．过程③中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶解氧
C ．过程⑤常用的方法是过滤和沉淀，分离出的菌种可以再使用
D ．发酵过程中温度、pH、溶解氧可能发生变化，需及时调整或补充
9 ．杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值，关于杨梅发酵叙述正确的是( )
A ．传统制作杨梅酒时应将原料杨梅果汁进行高压蒸汽灭菌
B ．缺少糖源和氧气时，醋酸菌可直接将乙醇转化成乙酸
C ．杨梅酒以杨梅为主要原料在酵母菌线粒体中发酵生成
D ．果酒发酵时酸性和缺氧环境会抑制杂菌生长
10．vero 细胞是一种从非洲绿猴肾上皮细胞中分离出来的非整倍体细胞，经常作为培养病毒的细胞宿主。下列有关 vero 细胞培养的叙述，错误的是( )
A ．培养箱中的 CO2 和培养基中的 NaHCO3 共同将培养基 pH 调至 6.5~6.8
B ．在培养基中常加入合适的抗生素来抑制杂菌繁殖
C ．vero 细胞在鸡胚浸出液等天然培养基中培养不利于标准化生产
D ．体外培养的 vero 细胞活性可能与体内细胞存在差异
11．在食品加工中，优良菌种的选择对于产品的品质、风味和安全性至关重要， 如常用于酸奶的嗜酸乳酸菌（甲菌）、常用于功能性食品和婴幼儿配方食品的双歧杆菌 t 乙菌）用于酱油的米曲霉菌（丙菌）等。下列相关叙述正确的是( )
A ．甲菌、乙菌和丙菌的遗传物质是 DNA，都主要存在于拟核内
B ．利用嗜酸乳酸菌制作酸奶时，应营造有氧环境利于乳酸发酵
C ．统计每毫升酱油中的米曲霉菌数量时，各种接种方法均适宜
D ．从酱油中分离出米曲霉菌时，所用培养基需进行湿热灭菌
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12 ．下列关于 “DNA 的粗提取与鉴定”的相关描述，错误的是( )
A ．洋葱中加入适量研磨液，充分研磨、过滤并弃去滤液可以获得 DNA
B ．向溶有 DNA 的 NaCl 溶液中加入适量二苯胺，沸水浴后溶液呈蓝色
C ．提取 DNA 时加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
D ．可以选择香蕉、猪肝、菠菜等作为实验材料提取 DNA
13．苏云金杆菌是一种细菌，它能产生使棉铃虫死亡的杀虫蛋白，这种杀虫蛋白对人和牲畜无任何毒害作用。科学家将苏云金杆菌的杀虫蛋白基因转入棉花细胞， 获得了能产生杀虫蛋白的抗虫棉，提高了棉花的产量。下列相关叙述不正确的是( )
A ．苏云金杆菌有成形的细胞核
B ．抗虫棉的培育使用了转基因技术
C ．苏云金杆菌是单细胞生物
D ．该方法能减少农药对环境的污染
14．某同学利用我国人工智能大模型检索现代发酵工程应用相关的问题。下列检索的结果存在科学性错误的是( )
A ．发酵工业体系形成得益于原料丰富价廉、产物种类多、生产条件严苛
B ．发酵工程生产的单细胞蛋白就是微生物菌体，可作为食品添加剂或饲料
C ．可通过人工诱变、基因工程、从自然界直接筛选等方式获得性状优良的菌种
D ．啤酒的工业化生产主发酵阶段完成酵母菌繁殖、大部分糖的分解及代谢物生成
15 ．离心是生物学研究中常用的技术手段，下列相关叙述错误的是( )
A ．植物细胞工程中可采用离心法诱导植物细胞的原生质体融合
B ．分离细胞器时常利用差速离心法，可通过逐渐升高离心速率实现
C ．动物细胞进行传代培养时，贴壁培养的细胞可直接用离心法收集
D ．证明 DNA 半保留复制实验中，相邻两代离心的时间应与细菌分裂一次的时间一致
16．科学家利用雌性小鼠的体细胞获得 iPS 细胞，随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，进而使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是( )
A ．可以将特定基因或蛋白质导入雌性小鼠体细胞获得 iPS 细胞
B ．鉴别 iPS 细胞时可以将其特征与胚胎干细胞进行类比
C ．该过程需要动物细胞培养、体外受精、胚胎移植等技术
D ．iPS 细胞即诱导全能干细胞，应用前景优于胚胎干细胞
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17．尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图所示。某同学接种了 3 个培养基平板，一段时间后 3 个平板中分别长出了 54 个、46 个、50 个菌落。下列相关叙述错误的是( )
A ．土壤中的某些细菌之所以能分解尿素，是因为其能合成脲酶
B ．根据实验结果，该 1g 土壤样本中约有分解尿素的细菌 5×107
C ．利用上述稀释涂布平板法对尿素分解菌计数的结果较真实值低
D ．该培养基应以尿素为唯一氮源，筛选的菌种可用酚红指示剂来鉴定
18．下图是对某生物 B 基因进行基因编辑的过程，该过程中用sgRNA 指引内切核酸酶 Cas9结合到特定的靶位点。下列说法错误的是( )
A ．sgRNA 能与靶基因上特定碱基序列互补
B ．Cas9 可特异性识别并断裂核苷酸之间的磷酸二酯键
C ．基因突变是不定向的而基因编辑能定向改变基因
D ．使用该项基因编辑技术来预防人的某些疾病时需经严格审查
19．纸浆漂白需要在高温、碱性条件下进行， 因此需要耐高温、耐碱的木聚糖酶。科学家利用蛋白质工程对已知氨基酸序列的木聚糖酶进行改造，获得了耐高温、耐碱的新木聚糖酶，提高了生产效率。下列叙述错误的是( )
A ．新木聚糖酶是依据蛋白质的功能改造其结构得到的
B ．木聚糖酶的基因可定向突变成耐高温、耐碱的木聚糖酶基因
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C ．已知木聚糖酶的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础
D ．可通过基因工程将耐高温、耐碱的木聚糖酶基因传递和保存
20 ．幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将 Hp 的 Ipp20基因作为目的基因，用限制酶 Xho I 和 Xba I 切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是( )
A ．Ipp20 基因整合到大肠杆菌的 DNA 中属于基因重组
B ．基因表达载体导入之前，可用 Ca2+处理大肠杆菌
C ．培养基 A 中添加了氯霉素，培养基 B 中添加了潮霉素
D ．能用来生产 Hp 疫苗的大肠杆菌在菌落 3 和 5 中
21．乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量；酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。下图为通过双酶切构建重组质粒的过程。GTG 为原核生物偏好的起始密码子编码序列，ATG 为真核生物偏好的起始密码子编码序列。下列说法正确的是( )
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A ．引物 2 的 3'端序列应包含 XbaI 的识别序列
B ．重组质粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体
C ．PCR 反应时，缓冲液中一般要添加 Ca2+来激活相关酶
D ．引物 1 的 5'端序列应考虑将 GTG 改为 ATG
22 ．人类的每条 5 号染色体上有 2 个 SMN1 或其等位基因。SMN1 有基因内长序列缺失和微小突变（基因中一个或几个核苷酸发生变化）两种变异类型，其中长序列缺失的突变基因不能通过现有引物进行 PCR 扩增。无正常 SMN1 基因的个体患脊髓性肌萎缩症（SMA），
不考虑其他变异，下列说法正确的是( )
A ．SMN1 基因的两种变异类型均为基因突变
B ．SMA 患者的基因型有 24 种
C ．通过 PCR 扩增后电泳，有条带的个体均不患 SMA
D ．正常夫妇生下患病后代属于基因重组
23．陈皮橄榄醋以优质的橄榄为原料，结合陈皮发酵而成。大致流程为先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵 6 天后，再接入活化的醋酸菌，发酵 5 天。下列叙述错误的是( )
A ．酵母菌发酵产生的乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B ．发酵 6 天后，再接入活化的醋酸菌进行发酵时，需要适当降低温度
C ．果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时的
D ．酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，而醋酸菌在有氧条件下进行醋酸发酵
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24．生物将遗传物质传递给其他细胞而非其子代的过程称为基因水平转移。例如农杆菌可通过感染植物细胞实现基因向植物基因组的转化。下列叙述错误的是( )
A ．基因水平转移不能为生物进化提供原材料
B ．生物界共用一套遗传密码是基因水平转移实现表达的基础
C ．R 型肺炎链球菌可通过基因水平转移转化为 S 型肺炎链球菌
D ．通过农杆菌转化到植物染色体上的基因遗传时遵循孟德尔遗传规律
25 ．酿制果酒在我国具有悠久历史，许多古老的酿酒工艺保留至今。下列叙述错误的是 ..
( )
A ．多种微生物参与了发酵过程，其中发挥主要作用的是酵母菌
B ．用于酿酒的水果要尽量清洗干净，以免杂菌污染使果酒变质
C ．发酵的坛、罐不能用水果完全装满，上方最好留有一定空间
D ．不同季节适合酿制不同果酒，酿制葡萄酒选择秋季较为合适
26 ．大蜡螟幼虫肠道内存在降解塑料（由聚苯乙烯制成）的细菌，可有效加快塑料的降解。使用生活中常见的聚苯乙烯（PS）包装盒作为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫 12 天，经解剖、培养、分离，最终获得 4 株菌株。关于微生物培养的相关叙述错误的是( )
A．聚苯乙烯为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫 12 天的目的是富集大蜡螟幼虫肠道内的 PS 降解菌
B ．下图中平板划线的操作排序正确的是②③①④①⑤⑥②
C ．涂布时需要设置一个未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板以检验是否发生污染
D ．II 号培养基中含有琼脂，接种后应立即将平板倒置，统计平板上菌落的数目可以准确计算活菌的数量
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27 ．下列有关微生物培养过程中接种及分离和计数等操作的叙述，正确的是( )
A ．微生物接种后，应在培养皿皿底做标记后正放培养
B ．在酒精灯火焰附近，将冷却至室温的培养基倒入培养皿
C ．使用细菌计数板直接计数误差较大，可利用台盼蓝染色法辅助减小误差
D ．抑菌圈法探究抗生素的抑菌效果时，在贴滤纸片前需要用平板划线法接种
28．赤霉病是小麦最严重的疾病之一，可以采用赤霉菌毒素来处理小麦的部分组织，再通过植物组织培养筛选获得抗赤霉病植株。下列说法正确的是( )
A ．小麦主要依靠其初生代谢物来抵抗赤霉菌毒素
B ．筛选时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种
C ．培养外植体先用酒精处理 30min，再用次氯酸钠处理 30s
D ．先将愈伤组织接到生根培养基上，然后再转接到生芽培养基上
29 ．DNA 测序时，先将待测单链 DNA 模板、引物、有关酶、4 种脱氧核苷三磷酸（dNTP， N 代表 A 、T 、C 、G，能提供能量并作为 DNA 复制的原料）均加入 4 个试管中，再分别加入一定量的含放射性同位素标记的 ddNTP（ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP）。不同于 dNTP的是，ddNTP 的五碳糖的 3 位不含羟基。在 DNA 合成时 ddNTP 随机与 dNTP 竞争核苷酸 链延长位点，并终止 DNA 的延伸，从而形成不同长度的一系列终止处带有放射性同位素标记的 DNA 链。下图是 DNA 测序时得到含放射性标记的子代 DNA 的电泳图谱。下列相关说法错误的是( )
A ．反应体系中的引物为单链，DNA 聚合酶从引物的3'端连接脱氧核苷酸
B．ddNTP 终止子链延伸，其原理可能是其五碳糖的3'位不含羟基，无法连接新的脱氧核苷
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酸
C ．图中加入 ddCTP 的一组中，可以形成 3 种长度的子链
D ．图中子代 DNA 的碱基序列是 5'-GATCCGAAT-3'
30．体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。
下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是( )
..
A ．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂 II，排出第二极体后形成雌原核
B ．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C ．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D ．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
二、解答题
31．尿素是一种常见的农业用肥，若要充分被植物利用，需经过微生物的分解。同学们为了分离土壤中能够分解尿素的细菌（目的菌），设计了如下实验。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。回答下列问题：
成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 X
含量 1 ．4g 2 ．1g 0 ．2g 10g 1g 15g
备注 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1000mL，调 pH 为 7 ．2
(1)尿素分解菌能分泌_______将尿素分解成氨气。培养基中物质 X 是____。
(2)将细菌转到固体培养基上时，应采用_______法接种以获得单菌落。
(3)若分离的菌种为乳酸菌，则不能用（2）中的方法接种分离，应选用平板浇注分离法，原因是___。注：平板浇注法是常用的菌种分离纯化方法，是将待分离的样品用无菌水作梯度系列稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液加至无菌培养皿中，立即倒入融化的固体培养基，经充分混匀后，置室温下培养。
(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。在进行分离分解尿素的细菌实验时，A 同学从培养基上筛选出大约 150 个菌落，而其他同学只选择出大约 50
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个菌落。A 同学的实验结果产生的原因可能有________（填序号）。
①选取的土样不同②无菌操作不规范③未设置对照组④培养基被污染
32．三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”，研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，流程如下图。回答下列问题：
(1)①过程常用____________________处理，并需在_______（填“等渗”或“高渗”）溶液中进行。
(2)②过程可利用___________等化学方法诱导原生质体融合，该体系中除所需的杂种原生质体，还存在哪些种类的原生质体？________________（不考虑三个及三个以上原生质体融合）。
(3)③过程通常使用_______（填“固体”或“液体”）培养基，其中需加入植物激素________来诱导杂种细胞_______形成愈伤组织。
(4)④过程生产的药物属于植物的_______（填“初生”或“次生”）代谢物，相比传统的从植物中提取药物，此方法生产药物的优点有_______。
a.不占用耕地 b.不受季节、天气限制 c.操作简单，技术要求低 d.产量高 e.对环境的破坏小
33．糖尿病是危害全球人类健康的常见疾病，长期以来主要靠注射外源胰岛素进行治疗，严重影响患者的生活质量。我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名 1 型糖尿病（T1DM）患者体内，具体流程如图 1 所示。在一年跟踪随访中，该病例成功摆脱胰岛素依赖，各项诊断指标恢复至正常水平。
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回答下列问题：
(1)T1DM 主要是由于免疫系统攻击并破坏胰岛 B 细胞导致胰岛素分泌不足，引发高血糖症，因此属于_____ ，CiPSCs 能够被诱导形成胰岛细胞依据的原理是_____。
(2)研究人员从患者体内抽取脂肪组织，经_____分散成单个细胞制备成细胞悬液，然后进行细胞培养分离出脂肪干细胞。在诱导形成 CiPSCs 的过程中，需精确控制培养基的各种成分，与普通动物细胞培养基相比，不能添加_____等天然成分，以免影响细胞分化进程。
(3)利用CiPSCs 制备胰岛细胞后，研究人员将糖尿病模型小鼠分为 A 、B 组，A 组进行手术但不移植胰岛细胞，B 组体内移植胰岛细胞，然后两组均进行腹腔注射葡萄糖实验，结果如图 2 所示，该实验的目的是_____。经过长时间科学论证后，研究人员将胰岛细胞移植回患者体内，一年内定期进行口服耐糖检测（见图 3），结果表明患者能摆脱胰岛素依赖，依据是_____。（糖尿病的诊断阈值为血糖水平等于或高于 200mg/dL）。
(4)传统诱导多能干细胞（iPSCs）常利用病毒等载体将 4 种转录因子的基因导入体细胞，其中的 C-myc 和 Klf4 是原癌基因。据此分析，化学分子诱导 CiPSCs 的优势是_____。
34．倒伏是水稻生产的“隐形杀手”，此前研究发现的部分基因虽可调控茎秆结构，但多数突变体存在生长缺陷。中国农业大学团队研究发现一种与水稻茎秆直径相关的关键基因
STRONG2 及其调控机制，将该基因导入栽培水稻中并过量表达能显著提高茎秆直径、抗折力及单株产量，且不影响大米品质。回答下列问题：
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(1)利用PCR 技术扩增 STRONG2 基因时需向 PCR 反应体系中加入 H2O、缓冲液、引物、 DNA 模板和______。质粒载体中启动子的作用是______。
(2)载体和 STRONG2 基因中限制酶的切割位点如上图所示。为将目的基因正确插入载体， PCR 扩增该基因时需在引物 A 、B 的______（填“5′端”或“3′端”）添加限制酶识别序列，结合上图分析，引物 A 应添加______酶的识别序列，切割载体时应选用的限制酶是______。
(3)将目的基因导入水稻细胞可以采用农杆菌转化法，该方法的原理是______。
(4)利用 X-Gluc 对转基因水稻叶片进行 β-葡萄糖苷酸酶组织化学活性检测。结果显示， 与野生型水稻相比，转基因水稻叶片切口处理后显现出______。
(5)为检测 STRONG2 基因的表达水平，提取转录产物 mRNA 进行实时荧光 PCR 定量检测，如果转基因水稻的 Ct 值（PCR 产物荧光强度达到设定阈值时的 PCR 循环数，Ct 值越小则 初始模板数越多）______野生型水稻，则说明 STRONG2 基因成功过量表达。
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1 ．A
A、泡菜的风味由原料、发酵菌种类、发酵环境等因素共同决定的，A 错误；
B、用果酒发酵制作果醋的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧型微生物，B 正确；
C、家庭酿制米酒主要用的是酵母菌， 在酿制米酒的过程中，首先让酵母菌在有氧的环境进行增殖，然后在无氧的环境中进行发酵，C 正确；
D、传统发酵食品所用的是自然菌种， 没有进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，D 正确。
故选 A。
2 ．D
A、不同生物对某些密码子的使用频率有偏好， 如果目的基因的密码子在受体细胞中使用频率低，会导致翻译效率低，甚至无法表达。 所以通过基因工程将某基因导入受体细胞后表达量不高的原因可能是因为密码子的偏好性，A 正确；
B、原核生物与真核生物偏好的起始密码子序列分别是 GTG 和 ATG。若将某细菌的基因导入酿酒酵母，在扩增目的基因时，将其中一个引物的 GTG 改为 ATG，可以让基因在真核细胞中更高效地起始翻译，B 正确；
C、为满足大肠杆菌的密码子偏好性， 通过基因改造改变基因的碱基序列，使其使用大肠杆菌偏好的密码子，能提高翻译效率，C 正确；
D、改造基因的密码子偏好性时，是对基因的碱基序列进行同义替换，转录出的 mRNA 的碱基数量不变，因此 mRNA 分子数量不会大幅下降，D 错误。
故选 D。
3 ．B
A、动物细胞融合前分散细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理， 纤维素酶用于植物细胞壁分解，与动物细胞无关，A 错误；
B、单克隆抗体制备中， 步骤③通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再经克隆化培养和抗体检测，获得既能无限增殖又能分泌特异性抗 A35 抗体的细胞株，B 正确；
C、抗体与病毒蛋白结合阻断感染，属于免疫系统的防御功能（抵御病原体侵袭），监视功
能针对突变细胞，C 错误；
D、题干提到 A35 蛋白存在“跨物种保守表位”，即小鼠、恒河猴和人类 mpox 病毒的 A35 蛋白该表位结构相似，故用恒河猴 A35 蛋白免疫小鼠可能获得交叉反应的抗体，可针对人类mpox 病毒，D 错误。
故选 B。
4 ．A
A、培养基灭菌后需冷却至 25℃左右，培养基已经凝固，故培养基灭菌后需冷却至50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板，A 错误；
B、为挑选能分解甲醇的菌种，应将稀释后的菌液涂布在以甲醇为唯一碳源的固体培养基， B 正确；
C、培养液中甲醇的剩余量越低，说明分解甲醇的能力越强，可进一步筛选菌株，C 正确；
D、酵母菌为异养兼性厌氧生物，在充足的营养和有氧条件下能大量繁殖，D 正确；故选 A。
5 ．C
利用胚胎工程繁殖杜泊羊， 将早期胚胎移植到当地普通绵羊进行分娩，这样做的最终目的是为了提升杜泊羊的繁殖潜力，ABD 错误，C 正确。
故选 C。
6 ．D
A、从卵巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期）后才可与获能的精子进行体外受精，A 错误；
B、体外受精后的早期胚胎的培养需要提供各种营养物质， 以促进胚胎的生长发育，B 错误；
C、在胚胎移植前要对接受胚胎的受体和供体进行同期发情处理，使受体的生理状况相同，因此受体羊丙需和羊甲进行同期发情处理，C 错误；
D、丙羊的子宫不会对外来的早期胚胎产生排斥反应， 这为移植胚胎的存活提供了可能，D正确。
故选 D。
7 ．B
A、稀释涂布平板法的操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，当稀释度足够高时，可在培养基表面形成单个的菌落，若稀释度不够高，细胞聚集在一起，得不到单个的菌落，A 正确；
B、只有当菌液的稀释倍数达到一定程度时，才能通过稀释涂布平板法在培养基表面形成单个的菌落，B 错误；
C、需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面，C 正确；
D、操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理，以防杂菌污染，D 正确。故选 B。
8 ．A
A、青霉素虽然具有杀菌作用， 主要针对细菌起作用，真菌等其他类型的微生物可以继续生长，杂菌的存在会影响发酵的效果以及产品的品质，因此对发酵罐必须严格的灭菌， A 错误；
B、青霉菌是异养需氧型，因此在发酵过程中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶解氧， B 正确；
C、发酵产品是微生物细胞本身， 可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，分离出的菌种具有生物活性，可以再使用，C 正确；
D、在发酵过程中， 要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等， 以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH 和溶解氧等发酵条件，D 正确。
故选 A。
9 ．D
A、传统发酵原料无需严格灭菌，高压蒸汽会破坏菌种，A 错误；
B、醋酸菌是好氧菌， 氧气充足，糖源充足时，将糖分解成乙酸，缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化成乙醛，再将乙醛变为乙酸，B 错误；
C、酒精的生成场所在细胞质基质，C 错误；
D、果酒发酵过程产生的酸性和缺氧环境抑制了其他杂菌生长，D 正确。故选 D。
10 ．A
A、培养动物细胞需要将培养基 pH 调至 7.2~7.4 ，A 错误；
B、在培养基中加入抗生素以抑制某些细菌和真菌的生长，从而预防污染，B 正确；
C、天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期， 体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，不利于标准化生产，因此逐渐被合成培养基所替代， C 正确；
D、体外培养的环境毕竟是人为营造的， 和真实的体内环境有所差异，故体外培养的 vero 细胞活性可能与体内细胞存在差异，D 正确。
故选 A。
11 ．D
A、甲菌（嗜酸乳酸菌）和乙菌（双歧杆菌）是细菌，遗传物质 DNA 主要存在于拟核内，而丙菌（米曲霉菌）是真菌，遗传物质 DNA 主要存在于细胞核中，不是拟核，A错误;
B、嗜酸乳酸菌是厌氧菌， 利用其制作酸奶时应营造无氧环境，因为有氧环境会抑制乳酸发
酵，B 错误;
C、统计每毫升酱油中的米曲霉菌数量时， 可采用稀释涂布平板法，而平板划线法不能用于准确计数，C 错误；
D、从酱油中分离出米曲霉菌时， 所用培养基需进行湿热灭菌，以杀死培养基中的所有微生物，包括芽孢和孢子，防止杂菌污染，D 正确。
故选 D。
12 ．A
A、洋葱中加入研磨液充分研磨后过滤，保留滤液继续后续操作来获得 DNA ，A错误；
B、含有 DNA 的 NaCl 溶液中加入适量二苯胺，沸水浴后溶液呈蓝色，B 正确；
C、提取 DNA 时加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解，有利于析出 DNA ，C 正确；
D、香蕉、猪肝、菠菜都含有 DNA，因此可以选择香蕉、猪肝、菠菜等作为实验材料提取DNA ，D 正确。
故选 A。
13 ．A
A、苏云金杆菌是原核生物，没有成形的细胞核，A 错误；
B、抗虫棉的培育是将苏云金杆菌的杀虫蛋白基因转入棉花细胞， 使用了转基因技术，B 正确；
C、苏云金杆菌是单细胞生物，一个细胞就是一个个体，C 正确；
D、抗虫棉的培育和种植，可以减少农药的使用，减少农药对环境的污染，D 正确。故选 A。
14 ．A
A、发酵工业的优势在于原料来源广泛且成本低廉（如农副产品）、产物种类多样（如抗生素、酶制剂等），但发酵工程的生产条件通常是相对温和的（比如常温常压），而非
“严苛” ，A 错误；
B、单细胞蛋白指通过发酵工程获得的微生物菌体本身（如酵母菌、细菌），富含蛋白质，可作为食品添加剂（如营养强化剂）或动物饲料，B 正确；
C、优良菌种的选育方法包括人工诱变（诱导基因突变）、基因工程（定向改造遗传物质）及从自然界筛选（分离野生型菌株），均为现代发酵工程常用技术，C 正确；
D、啤酒工业化生产中， 主发酵阶段主要完成酵母菌的大量繁殖、大部分糖类分解（产生乙醇和 CO2）及代谢产物积累（如风味物质），后发酵阶段则进行澄清与熟化，D 正确。
故选 A。
15 ．C
A、诱导植物细胞的原生质体融合可以采用物理、化学的方法， 采用离心法诱导植物细胞的原生质体融合属于物理方法，A 正确；
B、差速离心主要是采取逐渐提高离心速率分 离不同大小颗粒的方法；分离细胞器时常利用差速离心法，可通过逐渐升高离心速率实现，B 正确；
C、在进行传代培养时， 悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，C 错误；
D、细胞两代之间细菌 DNA 复制一次、细胞分裂一次；证明DNA 半保留复制实验中，相邻两代离心的时间应与细菌分裂一次的时间一致，D 正确。
故选 C。
16 ．D
A、制备 iPS 细胞时，可以借助载体将特定基因导入雌性小鼠体细胞而获得，也可以直接将特定蛋白导入雌性小鼠体细胞中获得，A 正确；
B 、iPS 细胞是诱导多能干细胞，具有癌细胞的特征，鉴别 iPS 细胞时可以将其特征与胚胎干细胞进行类比，B 正确；
将体细胞诱导成多能干细胞进而诱导成原始生殖细胞样细胞， 需要细胞培养技术，使其
完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，需要体外受精技术，最后生育健康小鼠，需要胚胎移植技术，C 正确；
D 、iPS 细胞是人类诱导某些已分化的体细胞，是诱导多能干细胞，D 错误。
故选 D。
17 ．B
A、尿素分解菌能分解尿素是因为能合成脲酶，脲酶可将尿素分解为氨，A 正确；
B、对微生物进行应选择菌落数在 30-300 之间的菌落进行计数，根据图解可知，对菌液进行稀释时共稀释了 106 倍，接种了 3 个培养皿，一段时间后三个培养皿中分别长出了 54 个、
46 个、50 个菌落，该 1g 土壤样本中约有分解尿素的细菌=（54+46+50）÷3÷0.1×106=5×108个，B 错误；
C、用稀释涂布平板法对尿素分解菌计数时，两个或多个细胞连在一起， 平板上只出现一个菌落，使计数的结果较真实值低，C 正确；
D、分析题意可知， 实验目的是从土壤中分离能够分解尿素的细菌，故该培养基应以尿素为唯一氮源，筛选出的菌种可用酚红来鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，D 正确。
故选 B。
18 ．B
A、sgRNA 指引内切核酸酶 Cas9 结合到特定的靶位点，所以sgRNA 能与靶基因上特定碱基序列互补，A 正确；
B 、Cas9 可特断裂核苷酸之间的磷酸二酯键，sgRNA 具有特异性识别的作用，B 错误；
C、由于 sgRNA 指引内切核酸酶 Cas9 结合到特定的靶位点，所以基因编辑能定向改变基因，而基因突变是不定向的，C 正确；
D、基因编辑技术存在一定的风险，一是基因组编辑技术本身存在着识别准确性等方面的问题；二是对人类基因进行“改造”时要严格遵守法律法规，不能违反人类的伦理道德，因此使用该项基因编辑技术来预防人的某些疾病时需要经过严格的审批，D 正确。
故选 B。
19 ．B
A、蛋白质工程的基本思路是： 从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。因此新木聚糖酶是科学家依据蛋白质的功能改造其结构得到的， A 正确；
B、基因突变具有不定向性，B 错误；
C、组成蛋白质的氨基酸的种类、数量和排列顺序不同会影响蛋白质的功能， 因此已知木聚糖酶的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础，C 正确；
D、改造后的耐高温、耐碱的木聚糖酶基因， 可通过基因工程获得目的微生物进行培养，从而保存在基因文库中代代传递，D 正确。
故选 B。
20 ．C
A、基因重组是指控制不同性状的基因发生重新组合， 主要发生在有性生殖过程中，但通过基因工程将不同来源的 DNA 拼接，可以赋予生物新的遗传特性，也属于基因重组的范畴，故利用基因工程将 Ipp20 基因整合到大肠杆菌的 DNA 中属于基因重组，A 正确；
B、原核细胞作为受体细胞时， 可用 Ca2+处理受体细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中
DNA 分子的生理状态，更容易将基因表达载体导入其中，B 正确；
CD、该过程使用了限制酶 Xho I 和 Xba I 切割质粒和Ipp20 基因，结合图示可知，在构建目的基因表达载体的过程中氯霉素抗性基因被切割掉，保留了潮霉素抗性基因，不管是正常质粒还是重组质粒都含有潮霉素抗性基因，但只有正常质粒才同时含有氯霉素抗性基因，因此，可以先用含有潮霉素的培养基 A 筛选出导入正常质粒、重组质粒的大肠杆菌，再采用同位 影印接种到含有氯霉素的培养基 B 和含有潮霉素的培养基 A 中，此时含有重组质粒的大肠杆菌不能在含有氯霉素的培养基 B 上生长，从而与培养基 A（对照）相比会消失一些菌落，对照两个平板上减少的菌落就是符合要求的大肠杆菌菌落，结合图示可知，符合要求的大肠杆菌菌落是 3 和 5 ，C 错误，D 正确。
故选 C。
21 ．D
A、根据题意可知， 含 GTG 的一端为 LDH 基因的起始，为保证通过双酶切以正确方向插入质粒，设计引物 1 的 5'端序列需要包含 BamHI 的识别序列，引物 2 的 5'端序列应包含 XbaI 的识别序列，A 错误；
B、结合题意可知， 质粒上有作为标记基因尿嘧啶合成酶基因，所以本过程中重组质粒以不能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体，然后在缺乏尿嘧啶的选择培养基上，不能合成尿嘧啶的酿酒酵母菌株不能生存，导入重组质粒的酿酒酵母菌株因为获得了尿嘧啶合成酶基因而可以正常生存，从而起到筛选作用，B 错误；
C、真核细胞和细菌的 DNA 聚合酶都需要 Mg2+激活，因此，PCR 反应缓冲液中一般要添加Mg2+ ，C 错误；
D、设计引物 1 的 5'端序列，应考虑将编码起始密码子的序列由原核生物偏好的 GTG 转变为真核生物偏好的 ATG，以便目的基因在酵母细胞中更好的表达，D 正确。
故选 D。
22 ．A
A 、SMN1 基因两种变异类型均为基因内碱基序列变化，属于基因突变，A 正确；
B、由于基因突变的不定向性， SMN1 基因可能有多个复等位基因，所以患者的基因型不止24 种，B 错误；
C、仅发生长序列缺失的 SMN1 基因不能通过 PCR 扩增，因此通过 PCR 扩增后电泳，有条带的个体也可能因不含正常 SMN1 基因而患 SMA ，C 错误；
D、等位基因不发生基因重组，D 错误。
故选 A。
23 ．B
A、当缺少糖源时， 醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌繁殖，A 正确；
B、酒精发酵的温度为 18~30℃,醋酸发酵的温度为 30~35℃,因此发酵 6 天后，再接入活化的醋酸菌进行发酵时，需要适当升高温度，B 错误；
C、以酒精为底物进行醋酸发酵，酒精与氧气发生反应产生醋酸和水，几乎没有气泡产生，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时，C 正确；
D、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖， 再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧气，D 正确。
故选 B。
24 ．A
A、基因水平转移使转移的基因和受体细胞原有的基因基因重组，使遗传物质发生改变，能为生物进化提供原材料，A 错误；
B、生物界共用一套遗传密码，翻译时相同遗传密码决定的是同种氨基酸，这是基因水平转移实现表达的基础，B 正确；
C 、S 型菌的相关基因转移到 R 型菌，基因决定性状，R 型菌可通过基因水平转移转化为 S型肺炎链球菌，C 正确；
D、农杆菌将目的基因整合到受体细胞的染色体 DNA 上，随受体染色体 DNA 的复制而复制，通过农杆菌转化到植物染色体上的基因遗传时遵循孟德尔遗传规律，D 正确。
故选 A。
25 ．B
A、葡萄酒的制作运用的是酵母菌的无氧呼吸， 多种微生物参与了发酵过程，其中发挥主要作用的是酵母菌，A 正确；
B、果酒制作利用水果表面野生型酵母菌，因此不能清洗的太干净，B 错误；
C、发酵的坛、罐不能用水果完全装满， 上方最好留有一定空间，有利于发酵初期为酵母菌有氧呼吸进行，从而为繁殖提供足够的能量，还可以避免发酵旺盛时汁液溢出，C 正确；
D、不同季节适合酿制不同果酒，萄酒制作的过程中，酵母菌的培养温度控制在 18℃到30℃ ,因此酿制葡萄酒选择秋季较为合适， D 正确。
故选 B。
26 ．D
A、从肠道内容物中分离目的微生物时， 聚苯乙烯为唯一食物来源，进行富集培养的目的是为了增加目的微生物的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物，A 正确；
B、平板划线的操作的基本步骤是： 右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞；左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅
速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面；烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却(是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试)，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内 划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连；将平板倒置，放入培养箱中培养为分离纯化优良酵母菌品种。所以正确的顺序是②③①④①⑤⑥② , B 正确；
C、对涂布的平板进行培养时， 需要将接种的培养基和一个同批次未接种的培养基都放入恒温箱中培养，这样操作的目的是作为对照，可以检测培养基平板是否灭菌彻底（或是否被污染），C 正确；
D 、II 号培养基中含有琼脂，接种后应灼烧皿盖周围进行灭菌，再将平板倒置，统计平板上菌落的数目可以估算活菌的数量，D 错误。
故选 D。
27 ．C
A、微生物接种后，在培养皿皿底做标记后，将平板倒置培养，A 错误；
B、在酒精灯火焰附近，将冷却至 50℃左右的培养基倒入培养皿，B 错误；
C、使用细菌计数板直接计数误差较大， 可利用台盼蓝染色法（区分死细胞和活细胞）辅助减小误差，C 正确；
D、抑菌圈法探究抗生素抑菌效果，在贴滤纸片前需要用稀释涂布平板法接种，D 错误。故选 C。
28 ．B
A、植物的次生代谢产物是植物在长期进化中对生态环境适应的结果， 许多次生代谢产物具有抵御病菌侵害等作用，小麦主要依靠其次生代谢物来抵抗赤霉菌毒素，而不是初生代谢物。初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢过程， 其产物如糖类、蛋白质等主要用于植物的基本生命活动，与抵抗病菌毒素关系不大，A 错误；
B、筛选抗赤霉病植株时， 应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种，这样的品种在受到赤霉菌
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毒素影响时，受伤害程度相对较小，更有可能筛选出具有抗赤霉病能力的植株。如果选择对赤霉菌毒素敏感度高的品种，这些植株在培养过程中很容易受到毒素影响而死亡，不利于筛选出抗毒植株，B 正确；
C、培养外植体时，先用体积分数为 70%的酒精处理 30 - 60s，再用次氯酸钠处理 10 -
30min，而不是先用酒精处理 30min，再用次氯酸钠处理 30s。酒精处理时间过长会对外植体造成伤害，次氯酸钠处理时间过短则可能无法达到很好的消毒效果，C 错误；
D、在植物组织培养中， 一般先将愈伤组织接到生芽培养基上，诱导生芽，然后将生出芽的组织再接到生根培养基上，诱导生根。如果先接到生根培养基上， 可能不利于芽的分化和生长，D 错误。
故选 B。
29 ．D
A、引物是一小段能与 DNA 母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸；PCR 反应体系中的引物为单链，DNA 聚合酶从引物的3'端连接脱氧核苷酸，A 正确；
B、题干信息可知，ddNTP 的五碳糖的 3 位不含羟基，在 DNA 合成时 ddNTP 随机与 dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止 DNA 的延伸，可见 ddNTP 终止子链延伸，其原理可能是其五碳糖的 3'位不含羟基，无法连接新的脱氧核苷酸，B 正确；
C、在 DNA 合成时 ddNTP 随机与 dNTP 竞争核苷酸链延长位点，并终止 DNA 的延伸，根 据电泳图谱可知，待测 DNA 的碱基序列中含有 2 个 C（胞嘧啶），且 C（胞嘧啶）不在 DNA的末端，故利用上图中待测 DNA 序列，加入 ddCTP 的一组中，可以形成 34 种长度的子链，除了题图所示两种长度的子链还包括完整的子链长度，C 正确；
D、ddNTP 的 3 号碳上没羟基，参与聚合反应后无法与游离脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，因此 ddNTP 一旦参与聚合反应，则 DNA 单链延伸即终止，因此可知左上角的第一个 G 所在位置为 3'端（第一位），依据图中碱基的排序可知，图中子代 DNA 的碱基序列是
3'-GATCCGAAT-5' ，D 错误。
故选 D。
30 ．C
AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减 数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核， AB 正确；
C、对奶牛胚胎进行分割时， 应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割， 不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，C 错误；
D、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前， 根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，D 正确。
故选 C。
31 ．(1) 脲酶 琼脂
(2)稀释涂布平板法
(3)乳酸菌是厌氧型细菌，不能在培养基表面生长繁殖
(4) 灭菌 ①②④
32 ．(1) 纤维素酶和果胶酶 等渗
聚乙二醇融合法 三白草原生质体、鱼腥草原生质体、三白草和三白草融合原
生质体、鱼腥草和鱼腥草融合原生质体
(3) 固体 生长素和细胞分裂素 脱分化
(4) 次生 abde
33 ．(1) 自身免疫病 基因的选择性表达
(2) 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 动物血清##血清
(3) 探究移植胰岛细胞能否降低糖尿病小鼠的血糖水平 移植 75 天后患者血糖调节恢复正常水平
(4)不会导致细胞异常分裂（避免致癌风险）
34．(1) TaqDNA 聚合酶（或耐高温的 DNA 聚合酶）和 4 种游离的脱氧核苷酸 RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因转录出 mRNA
(2) 5′端 BglⅡ BamHⅠ 、SacⅠ
(3)农杆菌侵染植物细胞时，能将 Ti 质粒上的 T-DNA 转移到被侵染的细胞，并将其整合到该细胞的染色体 DNA 上
(4)蓝色
(5)低于
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一、单选题（共 30 题。前 10 题，每题 1 分；后 20 题，每题 1.5 分）
1 ．传统发酵技术为我们提供了多种食品、饮料及调味品。下列叙述错误的是( )
A ．泡菜的风味由乳酸菌的种类决定
B ．用果酒发酵制作果醋的主要菌种是醋酸菌
C ．家庭酿制米酒的过程既有需氧呼吸又有厌氧呼吸
D ．传统发酵通常是利用多种微生物进行的混合发酵
2 ．密码子偏好性是指在蛋白质合成过程中，不同生物对某些密码子的使用频率表现出明显的倾向性。例如，在大肠杆菌中，70%的亮氨酸由密码子 CUA 编码；原核生物与真核生物偏好的起始密码子编码序列分别是 GTG 、ATG 等。下列叙述错误的是( )
A ．通过基因工程将某基因导入受体细胞后表达量不高的原因可能是因为密码子的偏好性
B ．若要将某细菌的基因导入酿酒酵母，在扩增其基因时，可将其中一个引物的 5′-端序列GTG 改为 ATG
C ．为满足大肠杆菌的密码子偏好性，可以通过基因改造改变基因的碱基序列
D ．为满足生物的密码子偏好性而改造后的基因转录出的 mRNA 分子数量大幅下降
3．某团队研发的抗猴痘病毒（mpox）单克隆抗体 mAb975、mAb981，可有效保护小鼠和恒河猴免受感染。研究发现这些抗体能与病毒 A35 蛋白二聚体的跨物种保守表位（抗原分子中能与抗体特异性结合的部位）结合，相关制备及作用流程如图所示。下列叙述正确的是 ( )
A ．步骤②细胞融合时需用纤维素酶处理以获得单个细胞
B ．步骤③筛选的杂交瘤细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体
C ．步骤⑤中抗体与 A35 蛋白的结合体现了免疫系统的监视功能
试卷第 1 页，共 13 页
D ．若用恒河猴 A35 蛋白免疫小鼠，无法获得针对人类 mpox 病毒的抗体
4 ．有些酵母菌可以利用工业废甲醇作为碳源，既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，大致过程：①称量土样→②依次等比稀
释→③涂布平板→④挑取平板单菌落转移至培养液中培养→⑤进行甲醇分解能力的检测
→⑥选取优良菌株扩大培养。下列叙述错误的是( )
..
A ．培养基灭菌后需冷却至 25℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板
B ．步骤③应将稀释后的菌液涂布在以甲醇为唯一碳源的固体培养基
C ．步骤⑤分别测定培养液中甲醇的剩余量进一步筛选菌株
D ．步骤⑥为使酵母菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和有氧环境
5 ．科研工作者通过胚胎工程繁殖杜泊羊，需要将早期胚胎移植到当地普通绵羊进行分娩，这样做的最终目的是为了提升杜泊羊的( )
A ．存活率 B ．遗传特性 C ．繁殖潜力 D ．免疫耐受
6 ．羔羊胚胎移植技术是集诱导羔羊卵泡发育技术、体外受精和胚胎移植等技术为一体的胚胎生物技术体系，主要用于提高优良品种的繁殖速度和遗传品质，其技术流程如图所示。下列相关叙述正确的是( )
A ．甲羊的卵母细胞发育至 MⅠ期才能与获能的精子完成受精
B ．体外受精后的早期胚胎的培养不需要额外提供营养物质
C ．要对甲羊和乙羊用促性腺激素进行同期发情处理
D ．丙羊的子宫不会对外来的早期胚胎产生排斥反应
7 ．稀释涂布平板法是微生物培养的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A ．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B ．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
C ．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
D ．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
8 ．青霉素是人类发现的第一种抗生素，其工业化生产流程如图所示。下列叙述错误的是
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( )
A ．青霉素具有杀菌作用，不需对发酵罐进行灭菌
B ．过程③中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶解氧
C ．过程⑤常用的方法是过滤和沉淀，分离出的菌种可以再使用
D ．发酵过程中温度、pH、溶解氧可能发生变化，需及时调整或补充
9 ．杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值，关于杨梅发酵叙述正确的是( )
A ．传统制作杨梅酒时应将原料杨梅果汁进行高压蒸汽灭菌
B ．缺少糖源和氧气时，醋酸菌可直接将乙醇转化成乙酸
C ．杨梅酒以杨梅为主要原料在酵母菌线粒体中发酵生成
D ．果酒发酵时酸性和缺氧环境会抑制杂菌生长
10．vero 细胞是一种从非洲绿猴肾上皮细胞中分离出来的非整倍体细胞，经常作为培养病毒的细胞宿主。下列有关 vero 细胞培养的叙述，错误的是( )
A ．培养箱中的 CO2 和培养基中的 NaHCO3 共同将培养基 pH 调至 6.5~6.8
B ．在培养基中常加入合适的抗生素来抑制杂菌繁殖
C ．vero 细胞在鸡胚浸出液等天然培养基中培养不利于标准化生产
D ．体外培养的 vero 细胞活性可能与体内细胞存在差异
11．在食品加工中，优良菌种的选择对于产品的品质、风味和安全性至关重要， 如常用于酸奶的嗜酸乳酸菌（甲菌）、常用于功能性食品和婴幼儿配方食品的双歧杆菌 t 乙菌）用于酱油的米曲霉菌（丙菌）等。下列相关叙述正确的是( )
A ．甲菌、乙菌和丙菌的遗传物质是 DNA，都主要存在于拟核内
B ．利用嗜酸乳酸菌制作酸奶时，应营造有氧环境利于乳酸发酵
C ．统计每毫升酱油中的米曲霉菌数量时，各种接种方法均适宜
D ．从酱油中分离出米曲霉菌时，所用培养基需进行湿热灭菌
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12 ．下列关于 “DNA 的粗提取与鉴定”的相关描述，错误的是( )
A ．洋葱中加入适量研磨液，充分研磨、过滤并弃去滤液可以获得 DNA
B ．向溶有 DNA 的 NaCl 溶液中加入适量二苯胺，沸水浴后溶液呈蓝色
C ．提取 DNA 时加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
D ．可以选择香蕉、猪肝、菠菜等作为实验材料提取 DNA
13．苏云金杆菌是一种细菌，它能产生使棉铃虫死亡的杀虫蛋白，这种杀虫蛋白对人和牲畜无任何毒害作用。科学家将苏云金杆菌的杀虫蛋白基因转入棉花细胞， 获得了能产生杀虫蛋白的抗虫棉，提高了棉花的产量。下列相关叙述不正确的是( )
A ．苏云金杆菌有成形的细胞核
B ．抗虫棉的培育使用了转基因技术
C ．苏云金杆菌是单细胞生物
D ．该方法能减少农药对环境的污染
14．某同学利用我国人工智能大模型检索现代发酵工程应用相关的问题。下列检索的结果存在科学性错误的是( )
A ．发酵工业体系形成得益于原料丰富价廉、产物种类多、生产条件严苛
B ．发酵工程生产的单细胞蛋白就是微生物菌体，可作为食品添加剂或饲料
C ．可通过人工诱变、基因工程、从自然界直接筛选等方式获得性状优良的菌种
D ．啤酒的工业化生产主发酵阶段完成酵母菌繁殖、大部分糖的分解及代谢物生成
15 ．离心是生物学研究中常用的技术手段，下列相关叙述错误的是( )
A ．植物细胞工程中可采用离心法诱导植物细胞的原生质体融合
B ．分离细胞器时常利用差速离心法，可通过逐渐升高离心速率实现
C ．动物细胞进行传代培养时，贴壁培养的细胞可直接用离心法收集
D ．证明 DNA 半保留复制实验中，相邻两代离心的时间应与细菌分裂一次的时间一致
16．科学家利用雌性小鼠的体细胞获得 iPS 细胞，随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，进而使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是( )
A ．可以将特定基因或蛋白质导入雌性小鼠体细胞获得 iPS 细胞
B ．鉴别 iPS 细胞时可以将其特征与胚胎干细胞进行类比
C ．该过程需要动物细胞培养、体外受精、胚胎移植等技术
D ．iPS 细胞即诱导全能干细胞，应用前景优于胚胎干细胞
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17．尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图所示。某同学接种了 3 个培养基平板，一段时间后 3 个平板中分别长出了 54 个、46 个、50 个菌落。下列相关叙述错误的是( )
A ．土壤中的某些细菌之所以能分解尿素，是因为其能合成脲酶
B ．根据实验结果，该 1g 土壤样本中约有分解尿素的细菌 5×107
C ．利用上述稀释涂布平板法对尿素分解菌计数的结果较真实值低
D ．该培养基应以尿素为唯一氮源，筛选的菌种可用酚红指示剂来鉴定
18．下图是对某生物 B 基因进行基因编辑的过程，该过程中用sgRNA 指引内切核酸酶 Cas9结合到特定的靶位点。下列说法错误的是( )
A ．sgRNA 能与靶基因上特定碱基序列互补
B ．Cas9 可特异性识别并断裂核苷酸之间的磷酸二酯键
C ．基因突变是不定向的而基因编辑能定向改变基因
D ．使用该项基因编辑技术来预防人的某些疾病时需经严格审查
19．纸浆漂白需要在高温、碱性条件下进行， 因此需要耐高温、耐碱的木聚糖酶。科学家利用蛋白质工程对已知氨基酸序列的木聚糖酶进行改造，获得了耐高温、耐碱的新木聚糖酶，提高了生产效率。下列叙述错误的是( )
A ．新木聚糖酶是依据蛋白质的功能改造其结构得到的
B ．木聚糖酶的基因可定向突变成耐高温、耐碱的木聚糖酶基因
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C ．已知木聚糖酶的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础
D ．可通过基因工程将耐高温、耐碱的木聚糖酶基因传递和保存
20 ．幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将 Hp 的 Ipp20基因作为目的基因，用限制酶 Xho I 和 Xba I 切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是( )
A ．Ipp20 基因整合到大肠杆菌的 DNA 中属于基因重组
B ．基因表达载体导入之前，可用 Ca2+处理大肠杆菌
C ．培养基 A 中添加了氯霉素，培养基 B 中添加了潮霉素
D ．能用来生产 Hp 疫苗的大肠杆菌在菌落 3 和 5 中
21．乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量；酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。下图为通过双酶切构建重组质粒的过程。GTG 为原核生物偏好的起始密码子编码序列，ATG 为真核生物偏好的起始密码子编码序列。下列说法正确的是( )
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A ．引物 2 的 3'端序列应包含 XbaI 的识别序列
B ．重组质粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体
C ．PCR 反应时，缓冲液中一般要添加 Ca2+来激活相关酶
D ．引物 1 的 5'端序列应考虑将 GTG 改为 ATG
22 ．人类的每条 5 号染色体上有 2 个 SMN1 或其等位基因。SMN1 有基因内长序列缺失和微小突变（基因中一个或几个核苷酸发生变化）两种变异类型，其中长序列缺失的突变基因不能通过现有引物进行 PCR 扩增。无正常 SMN1 基因的个体患脊髓性肌萎缩症（SMA），
不考虑其他变异，下列说法正确的是( )
A ．SMN1 基因的两种变异类型均为基因突变
B ．SMA 患者的基因型有 24 种
C ．通过 PCR 扩增后电泳，有条带的个体均不患 SMA
D ．正常夫妇生下患病后代属于基因重组
23．陈皮橄榄醋以优质的橄榄为原料，结合陈皮发酵而成。大致流程为先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵 6 天后，再接入活化的醋酸菌，发酵 5 天。下列叙述错误的是( )
A ．酵母菌发酵产生的乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B ．发酵 6 天后，再接入活化的醋酸菌进行发酵时，需要适当降低温度
C ．果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时的
D ．酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，而醋酸菌在有氧条件下进行醋酸发酵
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24．生物将遗传物质传递给其他细胞而非其子代的过程称为基因水平转移。例如农杆菌可通过感染植物细胞实现基因向植物基因组的转化。下列叙述错误的是( )
A ．基因水平转移不能为生物进化提供原材料
B ．生物界共用一套遗传密码是基因水平转移实现表达的基础
C ．R 型肺炎链球菌可通过基因水平转移转化为 S 型肺炎链球菌
D ．通过农杆菌转化到植物染色体上的基因遗传时遵循孟德尔遗传规律
25 ．酿制果酒在我国具有悠久历史，许多古老的酿酒工艺保留至今。下列叙述错误的是 ..
( )
A ．多种微生物参与了发酵过程，其中发挥主要作用的是酵母菌
B ．用于酿酒的水果要尽量清洗干净，以免杂菌污染使果酒变质
C ．发酵的坛、罐不能用水果完全装满，上方最好留有一定空间
D ．不同季节适合酿制不同果酒，酿制葡萄酒选择秋季较为合适
26 ．大蜡螟幼虫肠道内存在降解塑料（由聚苯乙烯制成）的细菌，可有效加快塑料的降解。使用生活中常见的聚苯乙烯（PS）包装盒作为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫 12 天，经解剖、培养、分离，最终获得 4 株菌株。关于微生物培养的相关叙述错误的是( )
A．聚苯乙烯为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫 12 天的目的是富集大蜡螟幼虫肠道内的 PS 降解菌
B ．下图中平板划线的操作排序正确的是②③①④①⑤⑥②
C ．涂布时需要设置一个未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板以检验是否发生污染
D ．II 号培养基中含有琼脂，接种后应立即将平板倒置，统计平板上菌落的数目可以准确计算活菌的数量
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27 ．下列有关微生物培养过程中接种及分离和计数等操作的叙述，正确的是( )
A ．微生物接种后，应在培养皿皿底做标记后正放培养
B ．在酒精灯火焰附近，将冷却至室温的培养基倒入培养皿
C ．使用细菌计数板直接计数误差较大，可利用台盼蓝染色法辅助减小误差
D ．抑菌圈法探究抗生素的抑菌效果时，在贴滤纸片前需要用平板划线法接种
28．赤霉病是小麦最严重的疾病之一，可以采用赤霉菌毒素来处理小麦的部分组织，再通过植物组织培养筛选获得抗赤霉病植株。下列说法正确的是( )
A ．小麦主要依靠其初生代谢物来抵抗赤霉菌毒素
B ．筛选时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种
C ．培养外植体先用酒精处理 30min，再用次氯酸钠处理 30s
D ．先将愈伤组织接到生根培养基上，然后再转接到生芽培养基上
29 ．DNA 测序时，先将待测单链 DNA 模板、引物、有关酶、4 种脱氧核苷三磷酸（dNTP， N 代表 A 、T 、C 、G，能提供能量并作为 DNA 复制的原料）均加入 4 个试管中，再分别加入一定量的含放射性同位素标记的 ddNTP（ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP）。不同于 dNTP的是，ddNTP 的五碳糖的 3 位不含羟基。在 DNA 合成时 ddNTP 随机与 dNTP 竞争核苷酸 链延长位点，并终止 DNA 的延伸，从而形成不同长度的一系列终止处带有放射性同位素标记的 DNA 链。下图是 DNA 测序时得到含放射性标记的子代 DNA 的电泳图谱。下列相关说法错误的是( )
A ．反应体系中的引物为单链，DNA 聚合酶从引物的3'端连接脱氧核苷酸
B．ddNTP 终止子链延伸，其原理可能是其五碳糖的3'位不含羟基，无法连接新的脱氧核苷
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酸
C ．图中加入 ddCTP 的一组中，可以形成 3 种长度的子链
D ．图中子代 DNA 的碱基序列是 5'-GATCCGAAT-3'
30．体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。
下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是( )
..
A ．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂 II，排出第二极体后形成雌原核
B ．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C ．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D ．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
二、解答题
31．尿素是一种常见的农业用肥，若要充分被植物利用，需经过微生物的分解。同学们为了分离土壤中能够分解尿素的细菌（目的菌），设计了如下实验。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。回答下列问题：
成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 X
含量 1 ．4g 2 ．1g 0 ．2g 10g 1g 15g
备注 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1000mL，调 pH 为 7 ．2
(1)尿素分解菌能分泌_______将尿素分解成氨气。培养基中物质 X 是____。
(2)将细菌转到固体培养基上时，应采用_______法接种以获得单菌落。
(3)若分离的菌种为乳酸菌，则不能用（2）中的方法接种分离，应选用平板浇注分离法，原因是___。注：平板浇注法是常用的菌种分离纯化方法，是将待分离的样品用无菌水作梯度系列稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液加至无菌培养皿中，立即倒入融化的固体培养基，经充分混匀后，置室温下培养。
(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。在进行分离分解尿素的细菌实验时，A 同学从培养基上筛选出大约 150 个菌落，而其他同学只选择出大约 50
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个菌落。A 同学的实验结果产生的原因可能有________（填序号）。
①选取的土样不同②无菌操作不规范③未设置对照组④培养基被污染
32．三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”，研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，流程如下图。回答下列问题：
(1)①过程常用____________________处理，并需在_______（填“等渗”或“高渗”）溶液中进行。
(2)②过程可利用___________等化学方法诱导原生质体融合，该体系中除所需的杂种原生质体，还存在哪些种类的原生质体？________________（不考虑三个及三个以上原生质体融合）。
(3)③过程通常使用_______（填“固体”或“液体”）培养基，其中需加入植物激素________来诱导杂种细胞_______形成愈伤组织。
(4)④过程生产的药物属于植物的_______（填“初生”或“次生”）代谢物，相比传统的从植物中提取药物，此方法生产药物的优点有_______。
a.不占用耕地 b.不受季节、天气限制 c.操作简单，技术要求低 d.产量高 e.对环境的破坏小
33．糖尿病是危害全球人类健康的常见疾病，长期以来主要靠注射外源胰岛素进行治疗，严重影响患者的生活质量。我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名 1 型糖尿病（T1DM）患者体内，具体流程如图 1 所示。在一年跟踪随访中，该病例成功摆脱胰岛素依赖，各项诊断指标恢复至正常水平。
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回答下列问题：
(1)T1DM 主要是由于免疫系统攻击并破坏胰岛 B 细胞导致胰岛素分泌不足，引发高血糖症，因此属于_____ ，CiPSCs 能够被诱导形成胰岛细胞依据的原理是_____。
(2)研究人员从患者体内抽取脂肪组织，经_____分散成单个细胞制备成细胞悬液，然后进行细胞培养分离出脂肪干细胞。在诱导形成 CiPSCs 的过程中，需精确控制培养基的各种成分，与普通动物细胞培养基相比，不能添加_____等天然成分，以免影响细胞分化进程。
(3)利用CiPSCs 制备胰岛细胞后，研究人员将糖尿病模型小鼠分为 A 、B 组，A 组进行手术但不移植胰岛细胞，B 组体内移植胰岛细胞，然后两组均进行腹腔注射葡萄糖实验，结果如图 2 所示，该实验的目的是_____。经过长时间科学论证后，研究人员将胰岛细胞移植回患者体内，一年内定期进行口服耐糖检测（见图 3），结果表明患者能摆脱胰岛素依赖，依据是_____。（糖尿病的诊断阈值为血糖水平等于或高于 200mg/dL）。
(4)传统诱导多能干细胞（iPSCs）常利用病毒等载体将 4 种转录因子的基因导入体细胞，其中的 C-myc 和 Klf4 是原癌基因。据此分析，化学分子诱导 CiPSCs 的优势是_____。
34．倒伏是水稻生产的“隐形杀手”，此前研究发现的部分基因虽可调控茎秆结构，但多数突变体存在生长缺陷。中国农业大学团队研究发现一种与水稻茎秆直径相关的关键基因
STRONG2 及其调控机制，将该基因导入栽培水稻中并过量表达能显著提高茎秆直径、抗折力及单株产量，且不影响大米品质。回答下列问题：
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(1)利用PCR 技术扩增 STRONG2 基因时需向 PCR 反应体系中加入 H2O、缓冲液、引物、 DNA 模板和______。质粒载体中启动子的作用是______。
(2)载体和 STRONG2 基因中限制酶的切割位点如上图所示。为将目的基因正确插入载体， PCR 扩增该基因时需在引物 A 、B 的______（填“5′端”或“3′端”）添加限制酶识别序列，结合上图分析，引物 A 应添加______酶的识别序列，切割载体时应选用的限制酶是______。
(3)将目的基因导入水稻细胞可以采用农杆菌转化法，该方法的原理是______。
(4)利用 X-Gluc 对转基因水稻叶片进行 β-葡萄糖苷酸酶组织化学活性检测。结果显示， 与野生型水稻相比，转基因水稻叶片切口处理后显现出______。
(5)为检测 STRONG2 基因的表达水平，提取转录产物 mRNA 进行实时荧光 PCR 定量检测，如果转基因水稻的 Ct 值（PCR 产物荧光强度达到设定阈值时的 PCR 循环数，Ct 值越小则 初始模板数越多）______野生型水稻，则说明 STRONG2 基因成功过量表达。
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1 ．A
A、泡菜的风味由原料、发酵菌种类、发酵环境等因素共同决定的，A 错误；
B、用果酒发酵制作果醋的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧型微生物，B 正确；
C、家庭酿制米酒主要用的是酵母菌， 在酿制米酒的过程中，首先让酵母菌在有氧的环境进行增殖，然后在无氧的环境中进行发酵，C 正确；
D、传统发酵食品所用的是自然菌种， 没有进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，D 正确。
故选 A。
2 ．D
A、不同生物对某些密码子的使用频率有偏好， 如果目的基因的密码子在受体细胞中使用频率低，会导致翻译效率低，甚至无法表达。 所以通过基因工程将某基因导入受体细胞后表达量不高的原因可能是因为密码子的偏好性，A 正确；
B、原核生物与真核生物偏好的起始密码子序列分别是 GTG 和 ATG。若将某细菌的基因导入酿酒酵母，在扩增目的基因时，将其中一个引物的 GTG 改为 ATG，可以让基因在真核细胞中更高效地起始翻译，B 正确；
C、为满足大肠杆菌的密码子偏好性， 通过基因改造改变基因的碱基序列，使其使用大肠杆菌偏好的密码子，能提高翻译效率，C 正确；
D、改造基因的密码子偏好性时，是对基因的碱基序列进行同义替换，转录出的 mRNA 的碱基数量不变，因此 mRNA 分子数量不会大幅下降，D 错误。
故选 D。
3 ．B
A、动物细胞融合前分散细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理， 纤维素酶用于植物细胞壁分解，与动物细胞无关，A 错误；
B、单克隆抗体制备中， 步骤③通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再经克隆化培养和抗体检测，获得既能无限增殖又能分泌特异性抗 A35 抗体的细胞株，B 正确；
C、抗体与病毒蛋白结合阻断感染，属于免疫系统的防御功能（抵御病原体侵袭），监视功
能针对突变细胞，C 错误；
D、题干提到 A35 蛋白存在“跨物种保守表位”，即小鼠、恒河猴和人类 mpox 病毒的 A35 蛋白该表位结构相似，故用恒河猴 A35 蛋白免疫小鼠可能获得交叉反应的抗体，可针对人类mpox 病毒，D 错误。
故选 B。
4 ．A
A、培养基灭菌后需冷却至 25℃左右，培养基已经凝固，故培养基灭菌后需冷却至50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板，A 错误；
B、为挑选能分解甲醇的菌种，应将稀释后的菌液涂布在以甲醇为唯一碳源的固体培养基， B 正确；
C、培养液中甲醇的剩余量越低，说明分解甲醇的能力越强，可进一步筛选菌株，C 正确；
D、酵母菌为异养兼性厌氧生物，在充足的营养和有氧条件下能大量繁殖，D 正确；故选 A。
5 ．C
利用胚胎工程繁殖杜泊羊， 将早期胚胎移植到当地普通绵羊进行分娩，这样做的最终目的是为了提升杜泊羊的繁殖潜力，ABD 错误，C 正确。
故选 C。
6 ．D
A、从卵巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期）后才可与获能的精子进行体外受精，A 错误；
B、体外受精后的早期胚胎的培养需要提供各种营养物质， 以促进胚胎的生长发育，B 错误；
C、在胚胎移植前要对接受胚胎的受体和供体进行同期发情处理，使受体的生理状况相同，因此受体羊丙需和羊甲进行同期发情处理，C 错误；
D、丙羊的子宫不会对外来的早期胚胎产生排斥反应， 这为移植胚胎的存活提供了可能，D正确。
故选 D。
7 ．B
A、稀释涂布平板法的操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，当稀释度足够高时，可在培养基表面形成单个的菌落，若稀释度不够高，细胞聚集在一起，得不到单个的菌落，A 正确；
B、只有当菌液的稀释倍数达到一定程度时，才能通过稀释涂布平板法在培养基表面形成单个的菌落，B 错误；
C、需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面，C 正确；
D、操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理，以防杂菌污染，D 正确。故选 B。
8 ．A
A、青霉素虽然具有杀菌作用， 主要针对细菌起作用，真菌等其他类型的微生物可以继续生长，杂菌的存在会影响发酵的效果以及产品的品质，因此对发酵罐必须严格的灭菌， A 错误；
B、青霉菌是异养需氧型，因此在发酵过程中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶解氧， B 正确；
C、发酵产品是微生物细胞本身， 可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，分离出的菌种具有生物活性，可以再使用，C 正确；
D、在发酵过程中， 要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等， 以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH 和溶解氧等发酵条件，D 正确。
故选 A。
9 ．D
A、传统发酵原料无需严格灭菌，高压蒸汽会破坏菌种，A 错误；
B、醋酸菌是好氧菌， 氧气充足，糖源充足时，将糖分解成乙酸，缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化成乙醛，再将乙醛变为乙酸，B 错误；
C、酒精的生成场所在细胞质基质，C 错误；
D、果酒发酵过程产生的酸性和缺氧环境抑制了其他杂菌生长，D 正确。故选 D。
10 ．A
A、培养动物细胞需要将培养基 pH 调至 7.2~7.4 ，A 错误；
B、在培养基中加入抗生素以抑制某些细菌和真菌的生长，从而预防污染，B 正确；
C、天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期， 体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，不利于标准化生产，因此逐渐被合成培养基所替代， C 正确；
D、体外培养的环境毕竟是人为营造的， 和真实的体内环境有所差异，故体外培养的 vero 细胞活性可能与体内细胞存在差异，D 正确。
故选 A。
11 ．D
A、甲菌（嗜酸乳酸菌）和乙菌（双歧杆菌）是细菌，遗传物质 DNA 主要存在于拟核内，而丙菌（米曲霉菌）是真菌，遗传物质 DNA 主要存在于细胞核中，不是拟核，A错误;
B、嗜酸乳酸菌是厌氧菌， 利用其制作酸奶时应营造无氧环境，因为有氧环境会抑制乳酸发
酵，B 错误;
C、统计每毫升酱油中的米曲霉菌数量时， 可采用稀释涂布平板法，而平板划线法不能用于准确计数，C 错误；
D、从酱油中分离出米曲霉菌时， 所用培养基需进行湿热灭菌，以杀死培养基中的所有微生物，包括芽孢和孢子，防止杂菌污染，D 正确。
故选 D。
12 ．A
A、洋葱中加入研磨液充分研磨后过滤，保留滤液继续后续操作来获得 DNA ，A错误；
B、含有 DNA 的 NaCl 溶液中加入适量二苯胺，沸水浴后溶液呈蓝色，B 正确；
C、提取 DNA 时加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解，有利于析出 DNA ，C 正确；
D、香蕉、猪肝、菠菜都含有 DNA，因此可以选择香蕉、猪肝、菠菜等作为实验材料提取DNA ，D 正确。
故选 A。
13 ．A
A、苏云金杆菌是原核生物，没有成形的细胞核，A 错误；
B、抗虫棉的培育是将苏云金杆菌的杀虫蛋白基因转入棉花细胞， 使用了转基因技术，B 正确；
C、苏云金杆菌是单细胞生物，一个细胞就是一个个体，C 正确；
D、抗虫棉的培育和种植，可以减少农药的使用，减少农药对环境的污染，D 正确。故选 A。
14 ．A
A、发酵工业的优势在于原料来源广泛且成本低廉（如农副产品）、产物种类多样（如抗生素、酶制剂等），但发酵工程的生产条件通常是相对温和的（比如常温常压），而非
“严苛” ，A 错误；
B、单细胞蛋白指通过发酵工程获得的微生物菌体本身（如酵母菌、细菌），富含蛋白质，可作为食品添加剂（如营养强化剂）或动物饲料，B 正确；
C、优良菌种的选育方法包括人工诱变（诱导基因突变）、基因工程（定向改造遗传物质）及从自然界筛选（分离野生型菌株），均为现代发酵工程常用技术，C 正确；
D、啤酒工业化生产中， 主发酵阶段主要完成酵母菌的大量繁殖、大部分糖类分解（产生乙醇和 CO2）及代谢产物积累（如风味物质），后发酵阶段则进行澄清与熟化，D 正确。
故选 A。
15 ．C
A、诱导植物细胞的原生质体融合可以采用物理、化学的方法， 采用离心法诱导植物细胞的原生质体融合属于物理方法，A 正确；
B、差速离心主要是采取逐渐提高离心速率分 离不同大小颗粒的方法；分离细胞器时常利用差速离心法，可通过逐渐升高离心速率实现，B 正确；
C、在进行传代培养时， 悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，C 错误；
D、细胞两代之间细菌 DNA 复制一次、细胞分裂一次；证明DNA 半保留复制实验中，相邻两代离心的时间应与细菌分裂一次的时间一致，D 正确。
故选 C。
16 ．D
A、制备 iPS 细胞时，可以借助载体将特定基因导入雌性小鼠体细胞而获得，也可以直接将特定蛋白导入雌性小鼠体细胞中获得，A 正确；
B 、iPS 细胞是诱导多能干细胞，具有癌细胞的特征，鉴别 iPS 细胞时可以将其特征与胚胎干细胞进行类比，B 正确；
将体细胞诱导成多能干细胞进而诱导成原始生殖细胞样细胞， 需要细胞培养技术，使其
完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，需要体外受精技术，最后生育健康小鼠，需要胚胎移植技术，C 正确；
D 、iPS 细胞是人类诱导某些已分化的体细胞，是诱导多能干细胞，D 错误。
故选 D。
17 ．B
A、尿素分解菌能分解尿素是因为能合成脲酶，脲酶可将尿素分解为氨，A 正确；
B、对微生物进行应选择菌落数在 30-300 之间的菌落进行计数，根据图解可知，对菌液进行稀释时共稀释了 106 倍，接种了 3 个培养皿，一段时间后三个培养皿中分别长出了 54 个、
46 个、50 个菌落，该 1g 土壤样本中约有分解尿素的细菌=（54+46+50）÷3÷0.1×106=5×108个，B 错误；
C、用稀释涂布平板法对尿素分解菌计数时，两个或多个细胞连在一起， 平板上只出现一个菌落，使计数的结果较真实值低，C 正确；
D、分析题意可知， 实验目的是从土壤中分离能够分解尿素的细菌，故该培养基应以尿素为唯一氮源，筛选出的菌种可用酚红来鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，D 正确。
故选 B。
18 ．B
A、sgRNA 指引内切核酸酶 Cas9 结合到特定的靶位点，所以sgRNA 能与靶基因上特定碱基序列互补，A 正确；
B 、Cas9 可特断裂核苷酸之间的磷酸二酯键，sgRNA 具有特异性识别的作用，B 错误；
C、由于 sgRNA 指引内切核酸酶 Cas9 结合到特定的靶位点，所以基因编辑能定向改变基因，而基因突变是不定向的，C 正确；
D、基因编辑技术存在一定的风险，一是基因组编辑技术本身存在着识别准确性等方面的问题；二是对人类基因进行“改造”时要严格遵守法律法规，不能违反人类的伦理道德，因此使用该项基因编辑技术来预防人的某些疾病时需要经过严格的审批，D 正确。
故选 B。
19 ．B
A、蛋白质工程的基本思路是： 从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。因此新木聚糖酶是科学家依据蛋白质的功能改造其结构得到的， A 正确；
B、基因突变具有不定向性，B 错误；
C、组成蛋白质的氨基酸的种类、数量和排列顺序不同会影响蛋白质的功能， 因此已知木聚糖酶的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础，C 正确；
D、改造后的耐高温、耐碱的木聚糖酶基因， 可通过基因工程获得目的微生物进行培养，从而保存在基因文库中代代传递，D 正确。
故选 B。
20 ．C
A、基因重组是指控制不同性状的基因发生重新组合， 主要发生在有性生殖过程中，但通过基因工程将不同来源的 DNA 拼接，可以赋予生物新的遗传特性，也属于基因重组的范畴，故利用基因工程将 Ipp20 基因整合到大肠杆菌的 DNA 中属于基因重组，A 正确；
B、原核细胞作为受体细胞时， 可用 Ca2+处理受体细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中
DNA 分子的生理状态，更容易将基因表达载体导入其中，B 正确；
CD、该过程使用了限制酶 Xho I 和 Xba I 切割质粒和Ipp20 基因，结合图示可知，在构建目的基因表达载体的过程中氯霉素抗性基因被切割掉，保留了潮霉素抗性基因，不管是正常质粒还是重组质粒都含有潮霉素抗性基因，但只有正常质粒才同时含有氯霉素抗性基因，因此，可以先用含有潮霉素的培养基 A 筛选出导入正常质粒、重组质粒的大肠杆菌，再采用同位 影印接种到含有氯霉素的培养基 B 和含有潮霉素的培养基 A 中，此时含有重组质粒的大肠杆菌不能在含有氯霉素的培养基 B 上生长，从而与培养基 A（对照）相比会消失一些菌落，对照两个平板上减少的菌落就是符合要求的大肠杆菌菌落，结合图示可知，符合要求的大肠杆菌菌落是 3 和 5 ，C 错误，D 正确。
故选 C。
21 ．D
A、根据题意可知， 含 GTG 的一端为 LDH 基因的起始，为保证通过双酶切以正确方向插入质粒，设计引物 1 的 5'端序列需要包含 BamHI 的识别序列，引物 2 的 5'端序列应包含 XbaI 的识别序列，A 错误；
B、结合题意可知， 质粒上有作为标记基因尿嘧啶合成酶基因，所以本过程中重组质粒以不能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体，然后在缺乏尿嘧啶的选择培养基上，不能合成尿嘧啶的酿酒酵母菌株不能生存，导入重组质粒的酿酒酵母菌株因为获得了尿嘧啶合成酶基因而可以正常生存，从而起到筛选作用，B 错误；
C、真核细胞和细菌的 DNA 聚合酶都需要 Mg2+激活，因此，PCR 反应缓冲液中一般要添加Mg2+ ，C 错误；
D、设计引物 1 的 5'端序列，应考虑将编码起始密码子的序列由原核生物偏好的 GTG 转变为真核生物偏好的 ATG，以便目的基因在酵母细胞中更好的表达，D 正确。
故选 D。
22 ．A
A 、SMN1 基因两种变异类型均为基因内碱基序列变化，属于基因突变，A 正确；
B、由于基因突变的不定向性， SMN1 基因可能有多个复等位基因，所以患者的基因型不止24 种，B 错误；
C、仅发生长序列缺失的 SMN1 基因不能通过 PCR 扩增，因此通过 PCR 扩增后电泳，有条带的个体也可能因不含正常 SMN1 基因而患 SMA ，C 错误；
D、等位基因不发生基因重组，D 错误。
故选 A。
23 ．B
A、当缺少糖源时， 醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌繁殖，A 正确；
B、酒精发酵的温度为 18~30℃,醋酸发酵的温度为 30~35℃,因此发酵 6 天后，再接入活化的醋酸菌进行发酵时，需要适当升高温度，B 错误；
C、以酒精为底物进行醋酸发酵，酒精与氧气发生反应产生醋酸和水，几乎没有气泡产生，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时，C 正确；
D、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖， 再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧气，D 正确。
故选 B。
24 ．A
A、基因水平转移使转移的基因和受体细胞原有的基因基因重组，使遗传物质发生改变，能为生物进化提供原材料，A 错误；
B、生物界共用一套遗传密码，翻译时相同遗传密码决定的是同种氨基酸，这是基因水平转移实现表达的基础，B 正确；
C 、S 型菌的相关基因转移到 R 型菌，基因决定性状，R 型菌可通过基因水平转移转化为 S型肺炎链球菌，C 正确；
D、农杆菌将目的基因整合到受体细胞的染色体 DNA 上，随受体染色体 DNA 的复制而复制，通过农杆菌转化到植物染色体上的基因遗传时遵循孟德尔遗传规律，D 正确。
故选 A。
25 ．B
A、葡萄酒的制作运用的是酵母菌的无氧呼吸， 多种微生物参与了发酵过程，其中发挥主要作用的是酵母菌，A 正确；
B、果酒制作利用水果表面野生型酵母菌，因此不能清洗的太干净，B 错误；
C、发酵的坛、罐不能用水果完全装满， 上方最好留有一定空间，有利于发酵初期为酵母菌有氧呼吸进行，从而为繁殖提供足够的能量，还可以避免发酵旺盛时汁液溢出，C 正确；
D、不同季节适合酿制不同果酒，萄酒制作的过程中，酵母菌的培养温度控制在 18℃到30℃ ,因此酿制葡萄酒选择秋季较为合适， D 正确。
故选 B。
26 ．D
A、从肠道内容物中分离目的微生物时， 聚苯乙烯为唯一食物来源，进行富集培养的目的是为了增加目的微生物的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物，A 正确；
B、平板划线的操作的基本步骤是： 右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞；左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅
速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面；烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却(是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试)，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内 划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连；将平板倒置，放入培养箱中培养为分离纯化优良酵母菌品种。所以正确的顺序是②③①④①⑤⑥② , B 正确；
C、对涂布的平板进行培养时， 需要将接种的培养基和一个同批次未接种的培养基都放入恒温箱中培养，这样操作的目的是作为对照，可以检测培养基平板是否灭菌彻底（或是否被污染），C 正确；
D 、II 号培养基中含有琼脂，接种后应灼烧皿盖周围进行灭菌，再将平板倒置，统计平板上菌落的数目可以估算活菌的数量，D 错误。
故选 D。
27 ．C
A、微生物接种后，在培养皿皿底做标记后，将平板倒置培养，A 错误；
B、在酒精灯火焰附近，将冷却至 50℃左右的培养基倒入培养皿，B 错误；
C、使用细菌计数板直接计数误差较大， 可利用台盼蓝染色法（区分死细胞和活细胞）辅助减小误差，C 正确；
D、抑菌圈法探究抗生素抑菌效果，在贴滤纸片前需要用稀释涂布平板法接种，D 错误。故选 C。
28 ．B
A、植物的次生代谢产物是植物在长期进化中对生态环境适应的结果， 许多次生代谢产物具有抵御病菌侵害等作用，小麦主要依靠其次生代谢物来抵抗赤霉菌毒素，而不是初生代谢物。初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢过程， 其产物如糖类、蛋白质等主要用于植物的基本生命活动，与抵抗病菌毒素关系不大，A 错误；
B、筛选抗赤霉病植株时， 应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种，这样的品种在受到赤霉菌
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毒素影响时，受伤害程度相对较小，更有可能筛选出具有抗赤霉病能力的植株。如果选择对赤霉菌毒素敏感度高的品种，这些植株在培养过程中很容易受到毒素影响而死亡，不利于筛选出抗毒植株，B 正确；
C、培养外植体时，先用体积分数为 70%的酒精处理 30 - 60s，再用次氯酸钠处理 10 -
30min，而不是先用酒精处理 30min，再用次氯酸钠处理 30s。酒精处理时间过长会对外植体造成伤害，次氯酸钠处理时间过短则可能无法达到很好的消毒效果，C 错误；
D、在植物组织培养中， 一般先将愈伤组织接到生芽培养基上，诱导生芽，然后将生出芽的组织再接到生根培养基上，诱导生根。如果先接到生根培养基上， 可能不利于芽的分化和生长，D 错误。
故选 B。
29 ．D
A、引物是一小段能与 DNA 母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸；PCR 反应体系中的引物为单链，DNA 聚合酶从引物的3'端连接脱氧核苷酸，A 正确；
B、题干信息可知，ddNTP 的五碳糖的 3 位不含羟基，在 DNA 合成时 ddNTP 随机与 dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止 DNA 的延伸，可见 ddNTP 终止子链延伸，其原理可能是其五碳糖的 3'位不含羟基，无法连接新的脱氧核苷酸，B 正确；
C、在 DNA 合成时 ddNTP 随机与 dNTP 竞争核苷酸链延长位点，并终止 DNA 的延伸，根 据电泳图谱可知，待测 DNA 的碱基序列中含有 2 个 C（胞嘧啶），且 C（胞嘧啶）不在 DNA的末端，故利用上图中待测 DNA 序列，加入 ddCTP 的一组中，可以形成 34 种长度的子链，除了题图所示两种长度的子链还包括完整的子链长度，C 正确；
D、ddNTP 的 3 号碳上没羟基，参与聚合反应后无法与游离脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，因此 ddNTP 一旦参与聚合反应，则 DNA 单链延伸即终止，因此可知左上角的第一个 G 所在位置为 3'端（第一位），依据图中碱基的排序可知，图中子代 DNA 的碱基序列是
3'-GATCCGAAT-5' ，D 错误。
故选 D。
30 ．C
AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减 数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核， AB 正确；
C、对奶牛胚胎进行分割时， 应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割， 不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，C 错误；
D、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前， 根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，D 正确。
故选 C。
31 ．(1) 脲酶 琼脂
(2)稀释涂布平板法
(3)乳酸菌是厌氧型细菌，不能在培养基表面生长繁殖
(4) 灭菌 ①②④
32 ．(1) 纤维素酶和果胶酶 等渗
聚乙二醇融合法 三白草原生质体、鱼腥草原生质体、三白草和三白草融合原
生质体、鱼腥草和鱼腥草融合原生质体
(3) 固体 生长素和细胞分裂素 脱分化
(4) 次生 abde
33 ．(1) 自身免疫病 基因的选择性表达
(2) 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 动物血清##血清
(3) 探究移植胰岛细胞能否降低糖尿病小鼠的血糖水平 移植 75 天后患者血糖调节恢复正常水平
(4)不会导致细胞异常分裂（避免致癌风险）
34．(1) TaqDNA 聚合酶（或耐高温的 DNA 聚合酶）和 4 种游离的脱氧核苷酸 RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因转录出 mRNA
(2) 5′端 BglⅡ BamHⅠ 、SacⅠ
(3)农杆菌侵染植物细胞时，能将 Ti 质粒上的 T-DNA 转移到被侵染的细胞，并将其整合到该细胞的染色体 DNA 上
(4)蓝色
(5)低于
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