山东省济宁市第二中学2025-2026学年高二下学期3月月考生物试卷（含答案）
文档属性
| 名称 | 山东省济宁市第二中学2025-2026学年高二下学期3月月考生物试卷（含答案） |
|
|
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 2.1MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 通用版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2026-04-04 00:00:00 | ||
图片预览
文档简介
山东济宁市第二中学2025-2026学年第二学期高二年级3月份月考生物试卷
一、单选题
1．玉米的阔叶和窄叶受一对等位基因控制，其中阔叶基因为显性，叶基因内部没有限制酶A的酶切位点，与阔叶基因相比，窄叶基因有一个碱基对发生了改变，从而出现一个限制酶A的酶切位点。为鉴定某阔叶玉米的基因型，提取其DNA进行了PCR和电冰，下列叙述错误的是（ ）
A．需设计能与目的基因结合的单链DNA作为PCR引物
B．应在PCR扩增体系中添加Mg2+，以激活DNA聚合酶
C．采用PCR技术对一个DNA进行扩增，第n次循环共需要引物2n个
D．PCR产物DNA用酶A充分作用后进行电泳，杂合子出现2条条带
2．下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（ ）
限制酶 HindⅡ AluI BamHI Sau3AI
识别序列及切割位点 5'-GTY↓RAC-3' 5'-AG↓CT-3' 5'-G↓GATCC-3' 5'-↓GATC-3'
A．限制酶都是从原核生物中分离纯化得到的
B．限制酶识别序列越短，则相应酶切位点在DNA中出现的概率一般越大
C．一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割
D．BamHI和Sau3AI切割形成的片段进行重组后，BamHI和Sau3AI均不能识别并切割
3．质粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X-gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（ ）
A．使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数
B．如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株
C．因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株
D．若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌
4．下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（ ）
A．基因工程的操作水平属于分子水平，其原理为基因重组
B．基因工程中的基因载体都是小型环状DNA---质粒
C．基因工程中对基因的剪切和拼接过程是在生物体外完成的
D．基因工程能定向改造生物遗传性状，实现了不同物种间的基因交流
5．花青素在植物抗逆和预防人类慢性疾病中起着重要作用。研究推测拟南芥中AtMYBL2 基因缺失与植株花青素合成量显著增加有关。研究者在验证该推测的过程中，利用基因工程设计了重组DNA(质粒三)。下列分析错误的是（ ）
A．“质粒二”利用BamH I酶开环
B．该基因工程中, “目的基因”是 AtMYBL2 基因
C．构建质粒三时，最好在 A、B 两端分别加 BamHⅠ酶、Ec l酶的识别序列
D．对于培育成功的拟南芥转基因植株， “发卡”在细胞内可以阻止翻译过程
6．图1和图2表示利用自身细胞进行器官移植的两种方法。下列叙述正确的是（ ）
A．图1中4种基因经Ti质粒的T-DNA整合到受体细胞染色体上，促使iPS细胞形成
B．图2中的卵母细胞培养至MII期再显微操作去核，获得的重构胚激活后诱导分化
C．上述两种方法均用到动物细胞培养及核移植技术，但得到的组织器官不完全相同
D．图1的成纤维细胞和图2的体细胞诱导分化过程选择了完全相同的基因进行表达
7．如图是被农杆菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者将其连接成环并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，据此来确定T-DNA插入的具体位置。下列叙述正确的是（ ）
A．农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物，T-DNA存在于其拟核上
B．将扩增出的未知序列与水稻基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置
C．利用图中的引物②③组合可扩增出两侧的未知序列
D．若用PCR技术扩增循环n次，需要2n-1个引物
8．农杆菌中含有一个大型的Ti质粒，若想用基因工程并通过农杆菌向某种双子叶植物中导入抗旱基因，下列分析不合理的是（ ）
A．将重组Ti质粒导入农杆菌之前，可以用CaCl2溶液处理农杆菌
B．若能够在植物细胞中检测到抗旱基因，则说明该基因工程项目获得成功
C．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，要保证复制原点、启动子和终止子不被破坏
D．要将抗旱基因插入到Ti质粒的T-DNA上才能转移到双子叶植物的染色体上
9．下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中 TetR 表示四环素抗性基因，AmpR 表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线箭头所示为三种限制酶的酶切位点。下列相关叙述错误的是（ ）
A．要将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 HindⅢ 和 BamHⅠ 限制酶同时酶切载体和目的基因
B．图中能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是复制原点
C．为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可采用抗原-抗体杂交技术
D．该过程中的早期胚胎一般需要培养至桑葚胚或囊胚阶段再进行胚胎移植
10．为提高植物抗病能力，研究人员将抗病基因（长度大约为260bp）转入A植物中，然后通过PCR和电泳技术对1~4号A植物的细胞进行检测。该过程所用质粒与含抗病基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、2所示，电泳检测结果如图3所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．目的基因的筛选与获取是培育转基因A植物的核心步骤
B．构建表达载体时应选用BamHⅠ和HindⅢ这两种限制酶
C．受体细胞发育为转基因A植物的过程需在固体培养基上进行
D．由图3电泳结果可知，4号植株的转基因获得成功
11．ProGen是一种新型人工智能系统，可用于蛋白质结构设计和预测、ProGen将蛋白质的功能和序列信息进行映射，从而设计出具备预期功能的AI（人工智能）预测蛋白质。研究者发现有的AI预测蛋白质与天然蛋白质的氨基酸序列相似度并不高，但活性的相似度较高。下列叙述错误的是（ ）
A．ProGen以蛋白质的结构规律及其与功能的关系作为基础预测蛋白质的结构
B．ProGen从预期蛋白质的功能出发，直接设计出相应基因的碱基序列
C．ProGen设计的蛋白质与天然蛋白质的活性相似度与二者结构相似度无关没直接联系
D．ProGen助力人类正确认识蛋白质的高级结构，从而突破蛋白质工程的难点
12．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请分析下列叙述正确的是
限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ
识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC
A．一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团
B．若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高
C．用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割
D．使用EcoRI限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化
13．下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（ ）
A．限制酶只能特异性地识别6个核苷酸序列
B．限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团
C．用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选
D．DNA连接酶能连接双链DNA片段互补的黏性末端或平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键
14．将某外源基因与质粒结合形成重组质粒的过程如图。下列说法错误的是（ ）
A．氨苄青霉素抗性基因可作为筛选重组DNA的标记基因
B．用不同限制酶分别切割含目的基因的DNA 和质粒也能产生相同黏性末端
C．构建重组质粒时，除了需 BamHI酶外，还需 DNA 连接酶
D．图中方法可保证目的基因定向与质粒相连形成重组质粒
15．应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中正确的是（ ）
A．图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体
B．图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素
C．将prG导入细胞I，细胞I是B淋巴细胞
D．可用相应抗原进行抗原—抗体杂交，检测抗虫基因是否成功表达
16．下列有关高中教材实验叙述正确的是（ ）
A．体积分数为95％的乙醇加入碳酸钠可在绿叶中的色素提取实验中取代无水乙醇
B．艾弗里肺炎链球菌体外转化实验中，利用“加法原理”加入不同酶处理细胞提取液
C．用标记重捕法调查鸟类的种群密度时，若标记个体在重捕前死亡，会使调查结果比实际值偏小
D．“DNA的粗提取与鉴定”实验不需要对最后的实验结果精确定量
17．研究人员用X基因和pBR322质粒构建基因表达载体，图中X基因转录方向为从左向右。对受体细胞大肠杆菌（对四环素和氯霉素均没有抗性）进行转化和筛选，导入基因表达载体过程中，受体菌存在未导入质粒、导入空质粒（不含目的基因的pBR322质粒）或导入重组质粒的情况。下列叙述正确的是（ ）
A．用BamHI和SalI同时切割后X基因不能正确插入pBR322质粒
B．培养基添加氯霉素可将未导入质粒和导入质粒的受体菌分离
C．该实验也可以使用没有复制原点的质粒与X基因构建基因表达载体
D．用X基因的引物进行PCR扩增可对转化后的大肠杆菌进行个体生物学水平鉴定
18．图中pUC18是一种常用质粒，其中ori为复制原点，AmpR为氨苄青霉素抗性基因，lacZ基因指导合成的某种酶能将无色染料X-gal变成蓝色。已知目的基因插入的位置如图所示，且将含有重组质粒的大肠杆菌用含有氨苄青霉素和无色染料X-gal的培养基培养，下列叙述错误的是（ ）
A．将图中质粒导入大肠杆菌时，一般先用Ca2+处理大肠杆菌
B．目的基因插入时破坏了lacZ基因，有利于后续筛选目的菌株
C．含有该重组质粒的大肠杆菌在上述培养基上生长出的菌落呈蓝色
D．大肠杆菌细胞内导入了不含目的基因的空质粒时，也会形成菌落
19．如图是利用基因工程技术培育抗除草剂作物的部分过程，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶，且切割DNA分子后形成的末端均不同。下列说法正确的是（ ）
A．图示质粒分子在Sma I切割前后分别含有0或1个游离的磷酸基团
B．培育抗除草剂作物的核心是将含bar基因的表达载体导入受体细胞
C．可选用Pst I和EcoR I切割质粒和bar基因，确保目的基因正确插入
D．利用PCR技术可从分子水平检测bar基因是否翻译出抗除草剂蛋白
20．双元载体系统由微型质粒（含T-DNA，不含Vir区）和辅助Ti质粒（含Vir区，不含T-DNA）组成，辅助Ti质粒可使微型质粒上的T-DNA整合到受体植株细胞染色体上。某研究团队利用该系统研究了P启动子的调控活性，部分过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．可以将农杆菌转入双子叶植株进行研究
B．通过检测GUS基因的表达情况，可知P启动子的调控活性
C．检测发现受体植株具有卡那霉素抗性或潮霉素抗性能说明受体植株转化成功
D．辅助Ti质粒可使T-DNA整合到受体植株细胞染色体上，依靠的可能是Vir区表达产物
二、多选题
21．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”操作和结果的叙述错误的是（ ）
A．新鲜的洋葱、菠菜、猪肝等均可作为DNA粗提取的实验材料
B．鉴定DNA时，应将丝状物直接加到二苯胺试剂中进行沸水浴
C．在凝胶溶液凝固前加入核酸染料以便对DNA进行染色
D．PCR实验中使用的枪头、蒸馏水和移液器等在使用前都必须进行高压蒸汽灭菌
22．下图表示某基因表达载体中的潮霉素抗性基因和psy基因，有关叙述正确的是（ ）
A．潮霉素抗性基因可以作为标记基因用于筛选
B．启动子的转录产物为mRNA的起始密码子
C．转录过程RNA聚合酶沿3'→5'方向读取模板链的碱基序列
D．潮霉素抗性基因和psy基因以同一条链为模板进行转录
23．图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ）
A．基因A突变为a是一种碱基增添的突变
B．用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同
C．用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致
D．产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定
24．下表为几种限制酶的识别序列及其切割位点。下列叙述正确的有（ ）
限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名 识别序列和切割位点
BamHI 5'-G↓GATCC-3' Sau3AI 5'-↓GATC-3'
AluI 5'-AG↓CT-3' SmaI 5'-CCC↓GGG-3'
HindⅡ 5'-GTY↓RAC-3'
注:Y为C或T,R为A或G。
A．HindⅡ能识别GTTAAC序列，也能识别GTCGAC序列
B．AluI和SmaI切割后的序列可通过T4 DNA连接酶相连
C．BamHI和Sau3AI两种限制酶可识别相同的序列但切割后形成不同的黏性末端
D．AluI和Sau3AI破坏的都是识别序列中心轴线处的磷酸二酯键，因而形成平末端
25．除草剂的有效成分草甘膦能够专一性抑制EPSP合成酶的作用，从而使植物多种代谢途径受影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，除掉杂草的同时作物也会受损，培育抗草甘膦作物是解决办法之一。下列关于转入外源EPSP合成酶基因使矮牵牛抗草甘膦流程的叙述错误的是（ ）
A．用限制酶和DNA连接酶处理目的基因和Ti质粒，涉及磷酸二酯键、氢键的断裂和形成
B．载体Ti质粒上的抗生素合成基因通常作为对重组DNA分子鉴定和筛选的标记基因
C．基因表达载体组件中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录
D．利用农杆菌转化法可以将含有目的基因的重组Ti质粒整合到受体细胞的染色体DNA上
三、解答题
26．人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA。图1为HSA基因（仅列出部分序列），图2为构建的基因表达载体，甲、乙、丙表示引物，其碱基分别与相近的核苷酸链互补配对。
(1)利用PCR扩增技术获取HSA基因，PCR缓冲液中一般要添加_____，需要的酶______，该技术每次循环需要_______三步。在PCR扩增仪中完成反应后，常采用_________来鉴定PCR的产物。
(2)根据HSA基因的已知序列，应选用引物________进行PCR扩增。
A．5'-CTGTATGCG-3' B．5'-TACGCGTTA-3'
C．5'-GACATACGC-3' D．5'-ATGCGCAAT-3'
经过4轮扩增，扩增产物中含有的符合要求的HSA基因的数量为________。
(3)为了检测HSA基因是否正确连接在质粒上，应选择图2中的引物_______对构建的载体进行PCR扩增，理论上出现________bp的条带表明HSA正确连接在了载体上。
27．幽门螺杆菌（Hp）可导致慢性胃炎等疾病，该菌的Ipp20基因编码其特有的抗原蛋白质，研究者欲利用基因工程制备Hp疫苗，用于预防幽门螺杆菌感染。如图表示基本操作流程，如表表示所用质粒上4种限制酶的识别序列及切割位点。
限制酶 BamHI XhoI SphI XbaI
识别序列切割位点 G↓CTAGC ↓TCGAG GCATG↓C C↓CATGG
(1)质粒的基本组成单位是______，其中终止子的作用是________。
(2)限制酶SphI切割其识别序列产生的黏性末端是5'-_________-3'。构建基因表达载体时，为了确保将Ipp20基因正确连接在质粒上，最好选用_______酶切割Ipp20基因和质粒。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌常用Ca2+处理，使其处于________的生理状态。后续采用影印法筛选出含有目的基因的大肠杆菌。用无菌毡布压在培养基A的菌落上，带出菌种，平移并压在培养基B上，培养一段时间后的结果，其中数字表示不同的菌落。根据以上步骤分析，培养基A中添加的抗生素是________，培养基A中的菌落中含有Ipp20基因的大肠杆菌形成的菌落是________（填数字）。
参考答案
1．D
2．B
3．C
4．B
5．C
6．B
7．B
8．B
9．B
10．C
11．B
12．B
13．B
14．D
15．C
16．D
17．B
18．C
19．C
20．C
21．BD
22．AC
23．BD
24．AB
25．BD
26．(1) Mg2+ 耐高温的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶 变性、复性、延伸 琼脂糖凝胶电泳
(2) AD 8/八
(3) 乙、丙 350
27．(1) 脱氧核苷酸 基因转录停止的区域（或终止转录）
(2) CATG XhoI、XbaI
(3) 能吸收周围环境中DNA 潮霉素 3、5
一、单选题
1．玉米的阔叶和窄叶受一对等位基因控制，其中阔叶基因为显性，叶基因内部没有限制酶A的酶切位点，与阔叶基因相比，窄叶基因有一个碱基对发生了改变，从而出现一个限制酶A的酶切位点。为鉴定某阔叶玉米的基因型，提取其DNA进行了PCR和电冰，下列叙述错误的是（ ）
A．需设计能与目的基因结合的单链DNA作为PCR引物
B．应在PCR扩增体系中添加Mg2+，以激活DNA聚合酶
C．采用PCR技术对一个DNA进行扩增，第n次循环共需要引物2n个
D．PCR产物DNA用酶A充分作用后进行电泳，杂合子出现2条条带
2．下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（ ）
限制酶 HindⅡ AluI BamHI Sau3AI
识别序列及切割位点 5'-GTY↓RAC-3' 5'-AG↓CT-3' 5'-G↓GATCC-3' 5'-↓GATC-3'
A．限制酶都是从原核生物中分离纯化得到的
B．限制酶识别序列越短，则相应酶切位点在DNA中出现的概率一般越大
C．一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割
D．BamHI和Sau3AI切割形成的片段进行重组后，BamHI和Sau3AI均不能识别并切割
3．质粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X-gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（ ）
A．使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数
B．如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株
C．因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株
D．若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌
4．下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（ ）
A．基因工程的操作水平属于分子水平，其原理为基因重组
B．基因工程中的基因载体都是小型环状DNA---质粒
C．基因工程中对基因的剪切和拼接过程是在生物体外完成的
D．基因工程能定向改造生物遗传性状，实现了不同物种间的基因交流
5．花青素在植物抗逆和预防人类慢性疾病中起着重要作用。研究推测拟南芥中AtMYBL2 基因缺失与植株花青素合成量显著增加有关。研究者在验证该推测的过程中，利用基因工程设计了重组DNA(质粒三)。下列分析错误的是（ ）
A．“质粒二”利用BamH I酶开环
B．该基因工程中, “目的基因”是 AtMYBL2 基因
C．构建质粒三时，最好在 A、B 两端分别加 BamHⅠ酶、Ec l酶的识别序列
D．对于培育成功的拟南芥转基因植株， “发卡”在细胞内可以阻止翻译过程
6．图1和图2表示利用自身细胞进行器官移植的两种方法。下列叙述正确的是（ ）
A．图1中4种基因经Ti质粒的T-DNA整合到受体细胞染色体上，促使iPS细胞形成
B．图2中的卵母细胞培养至MII期再显微操作去核，获得的重构胚激活后诱导分化
C．上述两种方法均用到动物细胞培养及核移植技术，但得到的组织器官不完全相同
D．图1的成纤维细胞和图2的体细胞诱导分化过程选择了完全相同的基因进行表达
7．如图是被农杆菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者将其连接成环并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，据此来确定T-DNA插入的具体位置。下列叙述正确的是（ ）
A．农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物，T-DNA存在于其拟核上
B．将扩增出的未知序列与水稻基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置
C．利用图中的引物②③组合可扩增出两侧的未知序列
D．若用PCR技术扩增循环n次，需要2n-1个引物
8．农杆菌中含有一个大型的Ti质粒，若想用基因工程并通过农杆菌向某种双子叶植物中导入抗旱基因，下列分析不合理的是（ ）
A．将重组Ti质粒导入农杆菌之前，可以用CaCl2溶液处理农杆菌
B．若能够在植物细胞中检测到抗旱基因，则说明该基因工程项目获得成功
C．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，要保证复制原点、启动子和终止子不被破坏
D．要将抗旱基因插入到Ti质粒的T-DNA上才能转移到双子叶植物的染色体上
9．下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中 TetR 表示四环素抗性基因，AmpR 表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线箭头所示为三种限制酶的酶切位点。下列相关叙述错误的是（ ）
A．要将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 HindⅢ 和 BamHⅠ 限制酶同时酶切载体和目的基因
B．图中能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是复制原点
C．为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可采用抗原-抗体杂交技术
D．该过程中的早期胚胎一般需要培养至桑葚胚或囊胚阶段再进行胚胎移植
10．为提高植物抗病能力，研究人员将抗病基因（长度大约为260bp）转入A植物中，然后通过PCR和电泳技术对1~4号A植物的细胞进行检测。该过程所用质粒与含抗病基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、2所示，电泳检测结果如图3所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．目的基因的筛选与获取是培育转基因A植物的核心步骤
B．构建表达载体时应选用BamHⅠ和HindⅢ这两种限制酶
C．受体细胞发育为转基因A植物的过程需在固体培养基上进行
D．由图3电泳结果可知，4号植株的转基因获得成功
11．ProGen是一种新型人工智能系统，可用于蛋白质结构设计和预测、ProGen将蛋白质的功能和序列信息进行映射，从而设计出具备预期功能的AI（人工智能）预测蛋白质。研究者发现有的AI预测蛋白质与天然蛋白质的氨基酸序列相似度并不高，但活性的相似度较高。下列叙述错误的是（ ）
A．ProGen以蛋白质的结构规律及其与功能的关系作为基础预测蛋白质的结构
B．ProGen从预期蛋白质的功能出发，直接设计出相应基因的碱基序列
C．ProGen设计的蛋白质与天然蛋白质的活性相似度与二者结构相似度无关没直接联系
D．ProGen助力人类正确认识蛋白质的高级结构，从而突破蛋白质工程的难点
12．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请分析下列叙述正确的是
限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ
识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC
A．一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团
B．若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高
C．用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割
D．使用EcoRI限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化
13．下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（ ）
A．限制酶只能特异性地识别6个核苷酸序列
B．限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团
C．用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选
D．DNA连接酶能连接双链DNA片段互补的黏性末端或平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键
14．将某外源基因与质粒结合形成重组质粒的过程如图。下列说法错误的是（ ）
A．氨苄青霉素抗性基因可作为筛选重组DNA的标记基因
B．用不同限制酶分别切割含目的基因的DNA 和质粒也能产生相同黏性末端
C．构建重组质粒时，除了需 BamHI酶外，还需 DNA 连接酶
D．图中方法可保证目的基因定向与质粒相连形成重组质粒
15．应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中正确的是（ ）
A．图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体
B．图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素
C．将prG导入细胞I，细胞I是B淋巴细胞
D．可用相应抗原进行抗原—抗体杂交，检测抗虫基因是否成功表达
16．下列有关高中教材实验叙述正确的是（ ）
A．体积分数为95％的乙醇加入碳酸钠可在绿叶中的色素提取实验中取代无水乙醇
B．艾弗里肺炎链球菌体外转化实验中，利用“加法原理”加入不同酶处理细胞提取液
C．用标记重捕法调查鸟类的种群密度时，若标记个体在重捕前死亡，会使调查结果比实际值偏小
D．“DNA的粗提取与鉴定”实验不需要对最后的实验结果精确定量
17．研究人员用X基因和pBR322质粒构建基因表达载体，图中X基因转录方向为从左向右。对受体细胞大肠杆菌（对四环素和氯霉素均没有抗性）进行转化和筛选，导入基因表达载体过程中，受体菌存在未导入质粒、导入空质粒（不含目的基因的pBR322质粒）或导入重组质粒的情况。下列叙述正确的是（ ）
A．用BamHI和SalI同时切割后X基因不能正确插入pBR322质粒
B．培养基添加氯霉素可将未导入质粒和导入质粒的受体菌分离
C．该实验也可以使用没有复制原点的质粒与X基因构建基因表达载体
D．用X基因的引物进行PCR扩增可对转化后的大肠杆菌进行个体生物学水平鉴定
18．图中pUC18是一种常用质粒，其中ori为复制原点，AmpR为氨苄青霉素抗性基因，lacZ基因指导合成的某种酶能将无色染料X-gal变成蓝色。已知目的基因插入的位置如图所示，且将含有重组质粒的大肠杆菌用含有氨苄青霉素和无色染料X-gal的培养基培养，下列叙述错误的是（ ）
A．将图中质粒导入大肠杆菌时，一般先用Ca2+处理大肠杆菌
B．目的基因插入时破坏了lacZ基因，有利于后续筛选目的菌株
C．含有该重组质粒的大肠杆菌在上述培养基上生长出的菌落呈蓝色
D．大肠杆菌细胞内导入了不含目的基因的空质粒时，也会形成菌落
19．如图是利用基因工程技术培育抗除草剂作物的部分过程，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶，且切割DNA分子后形成的末端均不同。下列说法正确的是（ ）
A．图示质粒分子在Sma I切割前后分别含有0或1个游离的磷酸基团
B．培育抗除草剂作物的核心是将含bar基因的表达载体导入受体细胞
C．可选用Pst I和EcoR I切割质粒和bar基因，确保目的基因正确插入
D．利用PCR技术可从分子水平检测bar基因是否翻译出抗除草剂蛋白
20．双元载体系统由微型质粒（含T-DNA，不含Vir区）和辅助Ti质粒（含Vir区，不含T-DNA）组成，辅助Ti质粒可使微型质粒上的T-DNA整合到受体植株细胞染色体上。某研究团队利用该系统研究了P启动子的调控活性，部分过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．可以将农杆菌转入双子叶植株进行研究
B．通过检测GUS基因的表达情况，可知P启动子的调控活性
C．检测发现受体植株具有卡那霉素抗性或潮霉素抗性能说明受体植株转化成功
D．辅助Ti质粒可使T-DNA整合到受体植株细胞染色体上，依靠的可能是Vir区表达产物
二、多选题
21．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”操作和结果的叙述错误的是（ ）
A．新鲜的洋葱、菠菜、猪肝等均可作为DNA粗提取的实验材料
B．鉴定DNA时，应将丝状物直接加到二苯胺试剂中进行沸水浴
C．在凝胶溶液凝固前加入核酸染料以便对DNA进行染色
D．PCR实验中使用的枪头、蒸馏水和移液器等在使用前都必须进行高压蒸汽灭菌
22．下图表示某基因表达载体中的潮霉素抗性基因和psy基因，有关叙述正确的是（ ）
A．潮霉素抗性基因可以作为标记基因用于筛选
B．启动子的转录产物为mRNA的起始密码子
C．转录过程RNA聚合酶沿3'→5'方向读取模板链的碱基序列
D．潮霉素抗性基因和psy基因以同一条链为模板进行转录
23．图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ）
A．基因A突变为a是一种碱基增添的突变
B．用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同
C．用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致
D．产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定
24．下表为几种限制酶的识别序列及其切割位点。下列叙述正确的有（ ）
限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名 识别序列和切割位点
BamHI 5'-G↓GATCC-3' Sau3AI 5'-↓GATC-3'
AluI 5'-AG↓CT-3' SmaI 5'-CCC↓GGG-3'
HindⅡ 5'-GTY↓RAC-3'
注:Y为C或T,R为A或G。
A．HindⅡ能识别GTTAAC序列，也能识别GTCGAC序列
B．AluI和SmaI切割后的序列可通过T4 DNA连接酶相连
C．BamHI和Sau3AI两种限制酶可识别相同的序列但切割后形成不同的黏性末端
D．AluI和Sau3AI破坏的都是识别序列中心轴线处的磷酸二酯键，因而形成平末端
25．除草剂的有效成分草甘膦能够专一性抑制EPSP合成酶的作用，从而使植物多种代谢途径受影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，除掉杂草的同时作物也会受损，培育抗草甘膦作物是解决办法之一。下列关于转入外源EPSP合成酶基因使矮牵牛抗草甘膦流程的叙述错误的是（ ）
A．用限制酶和DNA连接酶处理目的基因和Ti质粒，涉及磷酸二酯键、氢键的断裂和形成
B．载体Ti质粒上的抗生素合成基因通常作为对重组DNA分子鉴定和筛选的标记基因
C．基因表达载体组件中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录
D．利用农杆菌转化法可以将含有目的基因的重组Ti质粒整合到受体细胞的染色体DNA上
三、解答题
26．人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA。图1为HSA基因（仅列出部分序列），图2为构建的基因表达载体，甲、乙、丙表示引物，其碱基分别与相近的核苷酸链互补配对。
(1)利用PCR扩增技术获取HSA基因，PCR缓冲液中一般要添加_____，需要的酶______，该技术每次循环需要_______三步。在PCR扩增仪中完成反应后，常采用_________来鉴定PCR的产物。
(2)根据HSA基因的已知序列，应选用引物________进行PCR扩增。
A．5'-CTGTATGCG-3' B．5'-TACGCGTTA-3'
C．5'-GACATACGC-3' D．5'-ATGCGCAAT-3'
经过4轮扩增，扩增产物中含有的符合要求的HSA基因的数量为________。
(3)为了检测HSA基因是否正确连接在质粒上，应选择图2中的引物_______对构建的载体进行PCR扩增，理论上出现________bp的条带表明HSA正确连接在了载体上。
27．幽门螺杆菌（Hp）可导致慢性胃炎等疾病，该菌的Ipp20基因编码其特有的抗原蛋白质，研究者欲利用基因工程制备Hp疫苗，用于预防幽门螺杆菌感染。如图表示基本操作流程，如表表示所用质粒上4种限制酶的识别序列及切割位点。
限制酶 BamHI XhoI SphI XbaI
识别序列切割位点 G↓CTAGC ↓TCGAG GCATG↓C C↓CATGG
(1)质粒的基本组成单位是______，其中终止子的作用是________。
(2)限制酶SphI切割其识别序列产生的黏性末端是5'-_________-3'。构建基因表达载体时，为了确保将Ipp20基因正确连接在质粒上，最好选用_______酶切割Ipp20基因和质粒。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌常用Ca2+处理，使其处于________的生理状态。后续采用影印法筛选出含有目的基因的大肠杆菌。用无菌毡布压在培养基A的菌落上，带出菌种，平移并压在培养基B上，培养一段时间后的结果，其中数字表示不同的菌落。根据以上步骤分析，培养基A中添加的抗生素是________，培养基A中的菌落中含有Ipp20基因的大肠杆菌形成的菌落是________（填数字）。
参考答案
1．D
2．B
3．C
4．B
5．C
6．B
7．B
8．B
9．B
10．C
11．B
12．B
13．B
14．D
15．C
16．D
17．B
18．C
19．C
20．C
21．BD
22．AC
23．BD
24．AB
25．BD
26．(1) Mg2+ 耐高温的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶 变性、复性、延伸 琼脂糖凝胶电泳
(2) AD 8/八
(3) 乙、丙 350
27．(1) 脱氧核苷酸 基因转录停止的区域（或终止转录）
(2) CATG XhoI、XbaI
(3) 能吸收周围环境中DNA 潮霉素 3、5
同课章节目录