人教版高中生物选修三专题1基因工程 单元测试
文档属性
| 名称 | 人教版高中生物选修三专题1基因工程 单元测试 |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 350.1KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（新课程标准） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2017-04-30 09:01:42 | ||
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文档简介
基因工程
一、选择题
1．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰。下列操作正确的是( A )
A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B
B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B
C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞
[解析] 提取矮牵牛蓝色花的mRNA，逆转录得到DNA，然后扩增，可获得大量的基因B，A
正确；从基因文库中获取目的基因，只要根据目的基因的相关信息和基因文库中的信息进行筛选对比即可，不需要用限制酶进行切割，B
错误；目的基因与质粒的连接需要用DNA
连接酶，而不是DNA
聚合酶，C
错误；目的基因需要和运载体连接后形成重组质粒再导入，而且应该用农杆菌进行感染，而不是大肠杆菌，D
错误。
2．(2017·晋中模拟)下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。以下说法正确的是
( A )
A．该技术的核心内容是构建基因表达载体
B．目的基因在抗虫棉中的遗传要遵循基因的分离定律
C．图中I常直接从大肠杆菌中获取
D．剔除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因会影响抗虫基因的表达
[解析] 基因工程的核心技术是基因表达载体的构建，A正确；抗虫基因如果整合到棉花细胞细胞质的DNA上，其遗传不遵循基因的分离定律，B错误；常见的载体有质粒、动植物病毒和λ噬菌体的衍生物，C错误；基因的表达具有独立性，剔除抗虫棉体内的四环素抗性基因不影响抗虫基因的表达，D错误。
3．(2015·重庆卷，6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是( C )
A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得
B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点
C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
[解析] 由于人肝细胞中胰岛素基因不能表达，所以无法利用肝细胞mRNA反转录获得胰岛素基因，A项错误；表达载体的复制启动于复制原点，胰岛素基因的转录启动于启动子，B项错误；抗生素基因是标记基因，作用是检测受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有胰岛素基因的受体细胞筛选出来，C项正确；启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，是转录的起点，而终止密码子位于mRNA上，在翻译中起作用，D项错误。
4．(2017·海口模拟)利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是( D )
A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
[解析] 基因表达的产物是蛋白质，因此，只有在受体细胞中检测或提取到了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达，A、C项只能说明完成了目的基因的导入，B项只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过程。
5．(2016·信阳模拟)关于蛋白质工程的说法，正确的是( B )
A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B．蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
[解析] 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。由于基因决定蛋白质，因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，还必须从基因入手。与基因工程不同，蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
6．下列有关基因表达载体的构建的说法中，不正确的是( B )
A．需要限制酶和DNA连接酶参与
B．任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别
C．可用抗生素基因作为标记基因
D．基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤
[解析] 构建基因表达载体时需要用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，以产生相同的黏性末端，然后用DNA连接酶连接；由于受体细胞有植物、动物和微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此，基因表达载体的构建也会有所差别，不可能是千篇一律的；抗生素基因的作用是作为标记基因，鉴别受体细胞中是否导入了目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；基因表达载体的构建是整个基因工程的核心环节。
二、非选择题
7．(2016·潍坊模拟)胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射入人体后，会堆积在皮下，要经过较长时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易分解，治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计的速效胰岛素的生产过程，请据图回答有关问题：
(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素模型的主要依据是__蛋白质的预期功能__。
(2)图中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是__根据新的胰岛素中氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后利用DNA合成仪来合成新的胰岛素基因__。
(3)新的胰岛素基因与载体(质粒)结合过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—。请画出质粒被限制性核酸内切酶I切割后所形成的黏性末端： 。DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？__否__(填“是”或“否”)。
(4)若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中，最常用的方法是__农杆菌转化法__。
(5)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素，需用到的生物工程有__蛋白质工程__、__基因工程__和发酵工程。
[解析] (1)构建新的胰岛素模型的主要依据是蛋白质的预期功能。(2)根据蛋白质的预期功能，推测新的胰岛素中氨基酸的序列，进而推断基因中的脱氧核苷酸序列来合成新的胰岛素基因。(3)将目的基因导入植物细胞中，最常用的转化方法是农杆菌转化法。(4)限制性核酸内切酶识别特定的核苷酸序列，产生特定的黏性末端或平末端，而DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列却没有专一性要求。(5)生产自然界中本来没有的蛋白质需要用到蛋白质工程、基因工程等技术。
8．(2015·海南卷，31)在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链，此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后，产生A、B两条肽链，再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。目前，利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题：
(1)人体内合成前胰岛素原的细胞是__胰岛B细胞__，合成胰高血糖素的细胞是__胰岛A细胞__。
(2)可根据胰岛素原的氨基酸序列，设计并合成编码胰岛素原的__DNA(基因)碱基序列__序列，用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成__胰岛素原__的基因工程菌。
(3)用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，则用该工程菌进行工业发酵时，应从__菌体__中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。
[解析] (1)前胰岛素原在细胞内经加工后成为胰岛素，人体合成胰岛素的细胞是胰岛B细胞，所以合成前胰岛素原的细胞也是胰岛B细胞；合成胰高血糖素的细胞是胰岛A细胞。(2)根据胰岛素原的氨基酸序列，可设计并合成编码胰岛素原的DNA序列(即目的基因)；用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成人胰岛素原的基因工程菌。(3)培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，所以应该从菌体中分离、纯化胰岛素原，经酶处理便可转变为胰岛素。
9．(2016·常州质检)如图是从酵母菌中获取棉株需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题。
(1)图中cDNA文库__小于__(填“大于”、“等于”或者“小于”)基因组文库。
(2)①过程提取的DNA需要__限制酶__的切割，B是__反转录__过程。
(3)为在短时间内大量获得目的基因，可用__PCR技术__扩增的方法，其原理是__DNA双链复制__。
(4)农杆菌中的Ti质粒上的T–DNA具有__可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上__的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是__目的基因是否整合到植物细胞染色体的DNA上__，可以用__DNA分子杂交__技术进行检测。
(5)如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要利用基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的__蛋白质结构__，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的__脱氧核苷酸序列__。
[解析] (1)一个基因组文库中包含了一种生物所有的基因，而一个cDNA文库中只包含了一种生物的一部分基因，故cDNA文库小于基因组文库。(2)从酵母菌中提取目的基因，需用限制性核酸内切酶；以mRNA为模板合成cDNA的过程属于反转录。(3)PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，其依据的原理是DNA双链复制。(4)农杆菌中的Ti质粒上T–DNA具有可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是目的基因是否整合到植物细胞染色体的DNA上，可以用DNA分子杂交技术进行检测。(5)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
10．许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β–半乳糖苷酶在X–gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图所示。请据图回答：
(1)基因工程中，构建基因表达载体的目的是__使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用__。
(2)限制酶EcoR
Ⅰ的识别序列和切割位点是–G↓AATTC–，Sma
Ⅰ的识别序列和切割位点是–CCC↓GGG–。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是__–TTAA__，连接过程中需要的基本工具是__DNA连接酶__。
(3)转化过程中，大肠杆菌应先用__Ca2＋__处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。
(4)菌落颜色为白色的是__菌落③__，原因是__lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β–半乳糖苷酶，故菌落为白色__
(5)菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是__抗原—抗体杂交__。
[解析] (1)基因工程中，构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用。(2)根据限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ的识别序列和切割位点和图解判断，图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是–TTAA，连接过程中需要的基本工具是DNA连接酶。(3)转化过程中，大肠杆菌应先用Ca2＋处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。(4)由于lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β–半乳糖苷酶，故菌落③为白色菌落。(5)可采用抗原—抗体杂交的办法检测菌落③中的目的基因是否表达。
一、选择题
1．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰。下列操作正确的是( A )
A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B
B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B
C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞
[解析] 提取矮牵牛蓝色花的mRNA，逆转录得到DNA，然后扩增，可获得大量的基因B，A
正确；从基因文库中获取目的基因，只要根据目的基因的相关信息和基因文库中的信息进行筛选对比即可，不需要用限制酶进行切割，B
错误；目的基因与质粒的连接需要用DNA
连接酶，而不是DNA
聚合酶，C
错误；目的基因需要和运载体连接后形成重组质粒再导入，而且应该用农杆菌进行感染，而不是大肠杆菌，D
错误。
2．(2017·晋中模拟)下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。以下说法正确的是
( A )
A．该技术的核心内容是构建基因表达载体
B．目的基因在抗虫棉中的遗传要遵循基因的分离定律
C．图中I常直接从大肠杆菌中获取
D．剔除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因会影响抗虫基因的表达
[解析] 基因工程的核心技术是基因表达载体的构建，A正确；抗虫基因如果整合到棉花细胞细胞质的DNA上，其遗传不遵循基因的分离定律，B错误；常见的载体有质粒、动植物病毒和λ噬菌体的衍生物，C错误；基因的表达具有独立性，剔除抗虫棉体内的四环素抗性基因不影响抗虫基因的表达，D错误。
3．(2015·重庆卷，6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是( C )
A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得
B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点
C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
[解析] 由于人肝细胞中胰岛素基因不能表达，所以无法利用肝细胞mRNA反转录获得胰岛素基因，A项错误；表达载体的复制启动于复制原点，胰岛素基因的转录启动于启动子，B项错误；抗生素基因是标记基因，作用是检测受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有胰岛素基因的受体细胞筛选出来，C项正确；启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，是转录的起点，而终止密码子位于mRNA上，在翻译中起作用，D项错误。
4．(2017·海口模拟)利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是( D )
A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
[解析] 基因表达的产物是蛋白质，因此，只有在受体细胞中检测或提取到了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达，A、C项只能说明完成了目的基因的导入，B项只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过程。
5．(2016·信阳模拟)关于蛋白质工程的说法，正确的是( B )
A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B．蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
[解析] 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。由于基因决定蛋白质，因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，还必须从基因入手。与基因工程不同，蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
6．下列有关基因表达载体的构建的说法中，不正确的是( B )
A．需要限制酶和DNA连接酶参与
B．任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别
C．可用抗生素基因作为标记基因
D．基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤
[解析] 构建基因表达载体时需要用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，以产生相同的黏性末端，然后用DNA连接酶连接；由于受体细胞有植物、动物和微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此，基因表达载体的构建也会有所差别，不可能是千篇一律的；抗生素基因的作用是作为标记基因，鉴别受体细胞中是否导入了目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；基因表达载体的构建是整个基因工程的核心环节。
二、非选择题
7．(2016·潍坊模拟)胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射入人体后，会堆积在皮下，要经过较长时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易分解，治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计的速效胰岛素的生产过程，请据图回答有关问题：
(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素模型的主要依据是__蛋白质的预期功能__。
(2)图中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是__根据新的胰岛素中氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后利用DNA合成仪来合成新的胰岛素基因__。
(3)新的胰岛素基因与载体(质粒)结合过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—。请画出质粒被限制性核酸内切酶I切割后所形成的黏性末端： 。DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？__否__(填“是”或“否”)。
(4)若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中，最常用的方法是__农杆菌转化法__。
(5)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素，需用到的生物工程有__蛋白质工程__、__基因工程__和发酵工程。
[解析] (1)构建新的胰岛素模型的主要依据是蛋白质的预期功能。(2)根据蛋白质的预期功能，推测新的胰岛素中氨基酸的序列，进而推断基因中的脱氧核苷酸序列来合成新的胰岛素基因。(3)将目的基因导入植物细胞中，最常用的转化方法是农杆菌转化法。(4)限制性核酸内切酶识别特定的核苷酸序列，产生特定的黏性末端或平末端，而DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列却没有专一性要求。(5)生产自然界中本来没有的蛋白质需要用到蛋白质工程、基因工程等技术。
8．(2015·海南卷，31)在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链，此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后，产生A、B两条肽链，再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。目前，利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题：
(1)人体内合成前胰岛素原的细胞是__胰岛B细胞__，合成胰高血糖素的细胞是__胰岛A细胞__。
(2)可根据胰岛素原的氨基酸序列，设计并合成编码胰岛素原的__DNA(基因)碱基序列__序列，用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成__胰岛素原__的基因工程菌。
(3)用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，则用该工程菌进行工业发酵时，应从__菌体__中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。
[解析] (1)前胰岛素原在细胞内经加工后成为胰岛素，人体合成胰岛素的细胞是胰岛B细胞，所以合成前胰岛素原的细胞也是胰岛B细胞；合成胰高血糖素的细胞是胰岛A细胞。(2)根据胰岛素原的氨基酸序列，可设计并合成编码胰岛素原的DNA序列(即目的基因)；用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成人胰岛素原的基因工程菌。(3)培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，所以应该从菌体中分离、纯化胰岛素原，经酶处理便可转变为胰岛素。
9．(2016·常州质检)如图是从酵母菌中获取棉株需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题。
(1)图中cDNA文库__小于__(填“大于”、“等于”或者“小于”)基因组文库。
(2)①过程提取的DNA需要__限制酶__的切割，B是__反转录__过程。
(3)为在短时间内大量获得目的基因，可用__PCR技术__扩增的方法，其原理是__DNA双链复制__。
(4)农杆菌中的Ti质粒上的T–DNA具有__可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上__的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是__目的基因是否整合到植物细胞染色体的DNA上__，可以用__DNA分子杂交__技术进行检测。
(5)如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要利用基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的__蛋白质结构__，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的__脱氧核苷酸序列__。
[解析] (1)一个基因组文库中包含了一种生物所有的基因，而一个cDNA文库中只包含了一种生物的一部分基因，故cDNA文库小于基因组文库。(2)从酵母菌中提取目的基因，需用限制性核酸内切酶；以mRNA为模板合成cDNA的过程属于反转录。(3)PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，其依据的原理是DNA双链复制。(4)农杆菌中的Ti质粒上T–DNA具有可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是目的基因是否整合到植物细胞染色体的DNA上，可以用DNA分子杂交技术进行检测。(5)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
10．许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β–半乳糖苷酶在X–gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图所示。请据图回答：
(1)基因工程中，构建基因表达载体的目的是__使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用__。
(2)限制酶EcoR
Ⅰ的识别序列和切割位点是–G↓AATTC–，Sma
Ⅰ的识别序列和切割位点是–CCC↓GGG–。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是__–TTAA__，连接过程中需要的基本工具是__DNA连接酶__。
(3)转化过程中，大肠杆菌应先用__Ca2＋__处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。
(4)菌落颜色为白色的是__菌落③__，原因是__lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β–半乳糖苷酶，故菌落为白色__
(5)菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是__抗原—抗体杂交__。
[解析] (1)基因工程中，构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用。(2)根据限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ的识别序列和切割位点和图解判断，图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是–TTAA，连接过程中需要的基本工具是DNA连接酶。(3)转化过程中，大肠杆菌应先用Ca2＋处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。(4)由于lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β–半乳糖苷酶，故菌落③为白色菌落。(5)可采用抗原—抗体杂交的办法检测菌落③中的目的基因是否表达。