2017-2018新人教版高中生物选修1练习（打包34套）

基础知识：果醋制作的原理
1．
关于测定亚硝酸盐含量实验操作的有关叙述，正确的是
(
)
A．泡菜制作需要配制盐水，其中盐与水的质量比为4∶1
B．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料
C．制备样品处理液，加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液
D．泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响其含量
2．
食醋生产过程中，具有协同作用的菌类是(
)
①曲霉
②细菌
③酵母菌
④醋酸菌
A．②③④
B．①②④
C．①③④
D．①②③
3．
下面是家庭酿造甜米酒的具体操作过程。先将米加热煮至七成熟，待冷却至30℃，加少许的水和一定量的“酒药”（实际是酵母菌菌种）与米饭混合后置于一瓷坛内（其他容器也可），在米饭中央挖一小洞，加盖后置于适当地方保温（28℃），12小时即可。请从以下几个方面对发酵过程做一简单的分析。
(1)先将米煮一煮的目的是______________________。
(2)为什么要冷却到30℃后才能加入“酒药”？________________________________。
(3)在中央挖一小洞的原因是______________________。
(4)发酵坛并没有完全密封，坛内无氧发酵的环境是如何形成的？_________________。
(5)家庭酿酒的关键是保温和放“酒药”，如果米的量很多而放的
“酒药”
太少，常常导致甜米酒因变质而失败。其主要原因是___________________________。
4．
在酿制果醋的过程中，下列相关说法正确的是（　　）
A．果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是兼性厌氧型细菌，需先通一段时间氧气后密封
B．在发酵过程中，温度控制在18～25
℃，发酵效果最好
C．当氧气、糖源充足时，醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸而酿制成果醋
D．醋酸菌对氧气特别敏感，仅在深层发酵时缺氧影响代谢活动
5．
下列操作需要在火焰旁进行的一组是(　　)
①菌种检测　②观察土壤中微生物　③稀释土壤溶液　④涂布平板⑤土壤称量
A．①②③④⑤
B．②③④⑤
C．③④⑤
D．②③④
6．
酵母菌是一种真菌，与人们的日常生活密切相关，也是现代技术研究常用的模式生物，请回答下列问题。
（1）土壤中富含各种微生物，将其浸出液接种到特定培养基上，可得到酵母菌，这一过程叫做__________，这种特定培养基可称为__________。
（2）用酵母菌发面做馒头时，在发酵的面团里加入一些纯碱的主要作用是___________。
（3）制作果酒时，将酵母菌加入到葡萄汁中，控制好发酵条件，10
d后得到散发着酒香的成品，此过程的原理是_______________________________________________________。
（4）苹果醋也是受现代人所青睐的健康饮品之一，其生产过程中则利用了代谢类型为__________的__________的发酵作用，该过程需要控制的温度条件是__________。
7．
生物技术实践与人们生产和生活密切相关，也为许多学生将来就业奠定了知识基础
和能力基础。请回答下列有关生物技术实践中的问题。
（1）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有
灭菌、干热灭菌和
灭菌。
（2）在果醋、泡菜的制作过程中，需要氧气的是
；在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是
。
（3）进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、
、接种、培养、移栽、栽培。花药离体培养时，选择
期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是
。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中
。
8．
在酿制果醋果酒的过程中，下列相关说法正确的是（
）
A．果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是兼性厌氧型细菌
B．在果醋发酵过程中，温度控制在18～25
℃
C．当氧气、糖源充足时，醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸
D．制备葡萄酒的过程中，需每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，向瓶中通气
9．
千百年来,腐乳一直受到人们的喜爱,腐乳的生产工艺如下，相关叙述正确的是（
）
让豆腐上长出毛霉
→加盐腌制
→加卤汤装瓶
→密封腌制
A．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物的参与
B．卤汤是决定腐乳特殊风味的唯一因素
C．制作过程中要密封腌制，可见起主要作用的毛霉是厌氧型微生物
D．含水量为85%的豆腐利于保持湿度，适合制作腐乳
10．
果醋的制作原理为(　　)
A．醋酸菌将C2H5OH还原为醋酸
B．醋酸菌将C2H5OH氧化成醋酸
C．醋酸菌将C2H5OH分解成CO2和醋酸
D．醋酸菌能将C2H5OH直接氧化成醋酸,不需生成中间物质乙醛
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
泡菜制作中盐与水比例为1∶4；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。温度和食盐用量也会影响亚硝酸盐含量。
2．
答案：
C
解析：
细菌是原核生物，是一类生物的总称。
3．
答案：
(1)主要为了杀灭其他杂菌
(2)太高的温度会抑制或杀死酵母菌
(3)有利于透气，可保证酵母菌在开始生长时有足够的氧气，短时间内迅速繁殖。
(4)有氧呼吸消耗了大量氧气，同时产生一部分水分，容器中发酵液增多了，淹没了米饭，形成无氧环境。
(5)加的“酒药”少，造成酵母菌起始密度过低，不能迅速增殖形成生长优势，往往导致杂菌感染。
解析：

4．
答案：
C
解析：
果醋制作利用醋酸菌发酵。它的代谢类型为异养需氧型。糖源和O2充足时将糖分解为醋酸；当缺少糖源时可将乙醇氧化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
5．
答案：
C
解析：
进行菌种检测和观察土壤中微生物时不需要再火焰旁进行
6．
答案：
（1）酵母菌的分离　选择培养基　（2）中和发酵时产生的酸类物质　（3）在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵　（4）异养需氧型　醋酸菌　30～35
℃
解析：
土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到酵母菌，这属于酵母菌的分离，所用的特定培养基为选择培养基。用酵母菌发面做馒头时，酵母菌呼吸作用产生二氧化碳，二氧化碳溶于水形成碳酸，发酵的面团里加入一些纯碱可中和碳酸。酵母菌酿酒是利用酵母菌无氧呼吸能产生酒精。果醋是醋酸菌的发酵产物，发酵温度为30～35
℃，醋酸菌的代谢类型为异养需氧型。
7．
答案：
（1）灼烧
高压蒸汽
（2）果醋
用果胶酶处理
（3）外植体消毒
单核
醋酸洋红法
激素的种类及其浓度配比
解析：
考查了常用的灭菌方法：有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。果醋、泡菜的制作过程所需条件，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法，菊花组织培养的基本实验操作步骤等。
8．
答案：
C
9．
答案：
A
10．
答案：
B
解析：
在氧气、糖源充足时,醋酸菌可将糖氧化成醋酸,缺少糖源时,可将乙醇变成乙醛,然后再转变成醋酸。
PAGE
2实验——血红蛋白的提取与分离
1．
下列各组物质中，由相同种类元素组成的是
A．胆固醇、脂肪酸、脂肪酶
B．淀粉、半乳糖、糖原
C．氨基酸、核苷酸、丙酮酸
D．性激素、生长激素、胰岛素
2．
血红蛋白由　　　　　条肽链组成（　　）
A．2
B.4
C.3
D.5
3．
下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是(
)
A．可采集猪血作为实验材料
B．用蒸馏水重复洗涤红细胞
C．血红蛋白释放后应低速短时间离心
D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液
4．
细胞破碎后，各种蛋白质就会被释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。下列关于蛋白质提取的措施中，不正确的是（　　）
A．酸性蛋白质可用稀碱性溶液提取
B．水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)提取
C．脂溶性蛋白质可用有机溶剂提取
D．碱性蛋白质可用强酸性溶液提取
5．
　红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。请回答下列有关问题：
(1)样品处理，它包括________、________、收集血红蛋白溶液。
(2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是________。透析的原理是_______________
_________。
(3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是______________
____________。
6．
在PCR扩增实验中，加入一种模板DNA片断，但实验却得到了2种产物DNA，其原因可能是(　　)
A．基因突变
B．Taq
DNA聚合酶发生变异
C．基因污染
D．温度过高
7．
在制备样品处理液的操作中正确的叙述是（　
　）
A．先加入氢氧化铝，再加入氢氧化钠，然后过滤
B．先加入氢氧化钠，再加入氢氧化铝，然后过滤
C．先加入氢氧化钠，过滤后再加入氢氧化铝，然后过滤
D．先加入氢氧化铝，过滤后再加入氢氧化钠，然后过滤
8．
下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是（　　）
A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心
B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌
C．分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离
D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12h

9．
下列对血红蛋白的提取和分离实验相关叙述，错误的是(
)
A．该实验的材料必须选用鸡血
B．通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取
C．凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质
D．电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离
10．
下列是在洗涤红细胞所采用的方法是(　　)
A．低速长时间离心
B．低速短时间离心
C．高速长时间离心
D．高速短时间离心
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
A选项中胆固醇属于脂质，主要含C、H、O三种元素，而脂肪酶的化学本质是蛋白质，至少C、H、O、N四种元素；B选项中三种物质均为糖类，均由C、H、O三种元素组成；C选项中氨基酸至少含有C、H、O、N四种元素，而核苷酸含有C、H、O、N、P五种元素；D选项中性激素属于脂质，主要含C、H、O三种元素，而胰岛素的化学本质是蛋白质，至少含有C、H、O、N四种元素。
2．
答案：
B
解析：
血红蛋白由四条肽链组成，即两条α肽链和两条β肽链。
3．
答案：
A
解析：
为防止细胞吸水涨破，洗涤时要用生理盐水；释放出血红蛋白后，以2000
r/min的高速离心；在分离时，要等到红色蛋白质接近色谱柱底端时开始收集流出液。
4．
答案：
D
解析：
提取蛋白质的基本原理是根据蛋白质的物理性质，加入不同的试剂，使蛋白质溶于试剂中而提取蛋白质。强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。
5．
答案：
　(1)红细胞的洗涤　血红蛋白的释放
(2)去除相对分子质量较小的杂质　透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在透析袋内
(3)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
解析：
　样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液。透析的目的是除去相对分子质量较小的杂质；应用的原理是半透膜的选择透过性，具体说就是小分子能自由出入，大分子保留在袋中。纯化的目的是将分子质量大的杂质蛋白除去。
6．
答案：
　C
解析：
　此现象属PCR技术假阳性现象，其原因是靶细胞污染造成的。因此，在PCR实验中，一定要做到隔离操作区，分装试剂，简化操作程序，用一次性吸管等，以尽量避免基因污染。
7．
答案：
C
解析：
先加入氢氧化钠的目的是中和过多的乳酸，制造弱碱性环境；过滤后再加入氢氧化铝使滤液的色素脱色，经过滤后，滤液变得无色透明。
8．
答案：
C
解析：
解：A、红细胞洗涤过程中应该用生理盐水，不能用蒸馏水，A错误；
B．血红蛋白的释放应该加入蒸馏水，使红细胞吸水涨破，释放其中的血红蛋白，B错误；
C．将搅拌好的混合液通过离心、过滤后，用分液漏斗分离出血红蛋白溶液，C正确；
D．透析所用的磷酸缓冲液的PH为7，D错误．
故选：C．
9．
答案：
A
解析：
该实验的材料不能选用鸡血，而应用哺乳动物成熟的红细胞，因为后者没有细胞核和各种细胞器，有利于得到较纯净的血红蛋白；透析袋可允许小分子自由进出，而大分子则保留在袋内，因此通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取；凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质；电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离。
10．
答案：
B
解析：
高速或长时间离心，会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，进而影响血红蛋白的提取纯度。
PAGE
2DNA的鉴定
1．
去除杂质时，可直接在滤液中加入　　　　　，反应10～15
min（　　）
A．嫩肉粉
B.蒸馏水
C．2
mol·L-1
NaCl
D.酒精
2．
下列各项中不宜选作DNA提取材料的是(　　)
A．洋葱表皮细胞　　　　　
B．鲜豌豆种子
C．人的红细胞
D．猪肝
3．
做DNA的粗提取与鉴定实验时，实验材料用鸡血而不用猪血的原因是(　　)
A．鸡血的价格比猪血的价格低
B．猪的红细胞没有细胞核，不易提取到DNA
C．鸡血不凝固，猪血会凝固
D．用鸡血提取DNA比用猪血提取操作简单
4．
DNA在下列哪一个温度下会变性(　　)
A．20
℃
B．40
℃
C．60
℃
D．100
℃
5．
在DNA的粗提取实验过程中，对DNA提取量影响较小的是(　　)
A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质
B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直到黏稠物不再
增多
D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至再将混合液放入冰箱中冷却
6．
研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸二酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的(　　)
A．温度　　　　　　　B．pH
C．水分
D．营养
7．
随着生物技术的发展，酶在社会生产、生活中的应用越来越广泛，下列说法错误的是(双选)(　　)
A．利用酶生产某些化工产品，能显著降低能耗、减少污染，节约成本
B．“加酶洗衣粉”的洗涤效果与水温、酸碱度有关，与污染或衣物的性质无关
C．用于治疗消化不良症的肠溶多酶片中含有多种消化酶，但嚼服后会失去疗效
D．要较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应在低温的条件下使用
8．
凝胶色谱法分离蛋白质的原理是(　　)
A．根据蛋白质分子的大小
B．根据蛋白质相对分子质量的大小
C．根据蛋白质所带电荷的多少
D．根据蛋白质溶解度的大小
9．
下列关于DNA的鉴定的说法，错误的是（　　）
A．析出的DNA可用甲基绿进行染色，呈现绿色
B．二苯胺试剂会将DNA在沸水浴条件下染成蓝色
C．二苯胺试剂在使用时应现配现用
D．龙胆紫染液将DNA染成紫红色
10．
关于DNA鉴定的颜色反应，正确的是（
）
A．与双缩脉试剂反应呈紫色
B．与苏丹班染液反应呈蓝色
C．与二苯胺试剂反应呈紫色
D．与二苯胺试剂反应呈蓝色
参考答案：
1．
答案：
A
解析：
嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
2．
答案：
C.
解析：
作为DNA提取材料的首要条件是细胞中要含有DNA，次要条件是DNA的含量要丰富，A、B、D三个选项都符合要求.而哺乳动物和人成熟的红细胞无细胞核，所以不宜选作实验材料.
3．
答案：
B.
解析：
做DNA的粗提取与鉴定实验时，所选的实验材料应该DNA含量丰富，且易提取.由于哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和细胞器，提取不到DNA.因此，不能用猪血代替鸡血.
4．
答案：
D.
解析：
大多数蛋白质不能忍受60～80
℃的高温，而DNA在80
℃以上时才会变性.
4．】若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐.加入食盐的目的是(　　)
A．利于DNA的溶解
B．分离DNA和蛋白质
C．溶解细胞膜
D．溶解蛋白质
【】A.
【食盐的主要成分是NaCl，破碎细胞时所使用的NaCl的物质的量浓度有利于DNA的溶解，而在NaCl物质的量浓度为0.14
mol/L时，才用于分离DNA和蛋白质，加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜.
5．
答案：
B.
解析：
本题考查DNA的粗提取与鉴定的有关知识，同时考查学生对DNA提取原理的理解.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动的目的是防止DNA的细丝被打碎，但是打碎的DNA分子并不影响提取的DNA的含量；如果鸡血细胞破裂不充分，DNA等核物质释放不充分，DNA的提取量会减少；在析出DNA黏稠物时，加入蒸馏水的量不足，会使DNA不能充分析出，而如若加入蒸馏水的量过多，析出的DNA又会溶解，DNA的提取量也会减少；用冷酒精沉淀DNA甚至将混合液放入冰箱冷却的目的是抑制DNA水解酶活性，防止DNA降解，如果酒精冷却不充分，DNA析出量减少，DNA的提取量也会减少.此类题目的解题方法是理解实验各个环节或操作的目的，突破的方法是将各个环节进行比较分析，找出其中的相互关系.
6．
答案：
D
解析：
固定化酶技术是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术，利用了酶的高效性和专一性。酶与微生物相比，它的活性发挥不需要营养。
7．
答案：
BD
8．
答案：
B
解析：
凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，凝胶色谱法所用的凝胶是一种微小的多孔球体，在小球内部有许多贯穿的通道，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
9．
答案：
D
解析：
甲基绿能将DNA染成绿色。二苯胺试剂要现用现配，否则会影响鉴定效果。用二苯胺试剂进行DNA鉴定时应先将DNA溶于适宜浓度的NaCl溶液中，加入适量二苯胺试剂，沸水浴加热5
min，冷却后蓝色更明显。龙胆紫染液是将染色体染成紫红色。
10．
答案：
D
解析：
DNA与二苯胺试剂反应呈蓝色，双缩脉试剂鉴定蛋白质，苏丹鉴定脂肪。
PAGE
1基础知识：果酒制作的原理
1．
关于酵母菌叙述正确的是（　　）
A．酵母菌代谢类型是异养、兼性厌氧型
B．酵母菌的主要繁殖方式为孢子生殖
C．酵母菌只在酒精发酵中发挥作用
D．酵母菌在含青霉素的培养基上不能生存
2．
2009年葡萄酒烈酒品鉴会于7月7日在北京兆龙饭店拉开帷幕。在众多媒体、知名酒店与各地葡萄酒经销商的参与下成功举行。我们平时饮用的葡萄酒呈红色，其原因是(　　)
A．酒精发酵前榨汁时榨出的红色葡萄皮中的色素
B．是红色葡萄球菌分泌的色素
C．在发酵的最后程序中，加入了红色的食用色素
D．随着酒精度数的提高，红色葡萄皮中的色素溶解在发酵液中
3．
细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧几种不同的处理，这些方法可依次用于杀灭哪些部位的细菌（
）
A．接种针、手、培养基
B、手、培养基、接种针
C．培养基、手、接种针
D、接种针、培养基、手
4．
下列条件不是酵母菌快速生长繁殖因素的是（　　）
A．含糖量高的培养基
B．温度20℃左右
C．pH＝2.5
D．pH＝6
5．
下列关于高中生物学实验的原理、方法或选材的叙述，正确的是(
)
A．制作果醋时，通氧不足或温度过低会使发酵受影响
B．利用稀释涂布平板法对细菌计数时需借助于显微镜
C．只要生物材料中含丰富的葡萄糖和果糖，就可直接用于还原糖的鉴定
D．利用二苯胺试剂鉴定细胞提取物，若产生蓝色变化即表明有RNA存在
6．
腐乳味道鲜美，易于消化、吸收，是因为其内主要含有的营养成分是（
）
A．无机盐、水、维生素
B、NaCl、水、蛋白质
C．多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸
D、蛋白质、脂肪、NaCl、水
7．
用葡萄制作果酒和果醋是一个连续的过程,下列有关叙述中,错误的是(　　)
A．制作果酒和果醋的连续过程中要保持温度恒定
B．制作葡萄酒的过程中,要定时拧松瓶盖放出CO2
C．葡萄酒的自然发酵中,起主要作用的是野生型酵母菌
D．变酸的酒表面常有一层由醋酸菌大量繁殖而形成的菌膜
8．
发酵罐发酵的过程中，使温度升高的热量来源于
（
）
①冷却水供应不足
②微生物代谢旺盛
③培养基不新鲜
④搅拌
⑤放料口排出物
A．①②③④⑤
B．②③④
C．①④
D．②④
9．
啤酒是我们日常生活中最常见的饮料之一。在啤酒生产过程中，发酵是重要环节。生产过程大致如F：将经过灭菌的麦芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌种后输入发酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精浓度渐渐上升，泡沫不断增多。当糖度下降到一定程度后，结束发酵。最后分别输出有形物质和啤酒。根据上述过程，回答以下问题：
（1）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意______
，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4：根据是否能在
E生长筛/，马突变菌。
（2）酿酒过程中，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是
.
（3）小麦脱粒以后还有大量的麦秆，其成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是其
。
（4）突变菌往t斟仔有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物的作用是
，加入DNA聚合酶的作用是
。
10．
下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述正确的是(　　)
A．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
B．在无氧或缺糖条件下，醋酸菌能够将酒精发酵成醋酸
C．在发酵过程中都需要保持在同一恒定的温度条件下
D．果酒和果醋制作过程中，相应菌种种群数量在接种的初期可能呈“J”型增长
参考答案：
1．
答案：
A
解析：
酵母菌是一种异养、兼性厌氧的真核微生物，主要进行出芽和分裂生殖，环境条件恶劣时也可以进行孢子生殖，酵母菌在酿酒、酿醋、酿造酱油中发挥作用。由于酵母菌有多糖构成的细胞壁，所以青霉素对它不起作用，在含青霉素的培养基中可以选择出酵母菌和霉菌。
2．
答案：
D
解析：
葡萄酒的红色是葡萄皮中的色素。
3．
答案：
C
解析：
培养基可以高压灭菌，手需要酒精擦拭灭菌，接种针应火焰灼烧灭菌
4．
答案：
C
解析：
在pH＝2.5的环境中酵母菌尚能生长，但生长非常缓慢极易死亡。
5．
答案：
A
解析：
制作果醋时，醋酸杆菌的代谢类型为需氧型，通氧不足时会使发酵受影响，故A正确；利用稀释涂布平板法对酵母菌计数时，只需要计数培养基中的菌落数，不需要显微镜，故B错误；生物材料中含有还原糖，并且材料接近无色，才可用于还原糖的鉴定，故C错误；二苯胺试剂可以用来鉴定DNA，故D错误。
6．
答案：
C
7．
答案：
A
解析：
果酒制作时,酒精发酵一般将温度控制在18～25℃,在无氧条件下;而果醋制作将温度控制在30～35
℃条件下,适时充气。
8．
答案：
D
解析：
微生物发酵过程中要进行呼吸作用，可产生大量的化学能，且大部分转变成了热能，可使温度升高；而搅拌除了增加溶氧、加快反应速度外，同时还通过摩擦产生了热能，也可使温度升高。
9．
答案：
（1）添加高浓度蔗糖（葡萄糖）
调低pH值
是否能在选择培养基上生长。
（2）隔绝空气
（3）缺乏相应分解酶系（或缺乏纤维素酶和半纤维素酶）
（4）结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点；
催化DNA子链的合成。
10．
答案：
D
解析：
制作腐乳所利用的菌种主要是毛霉，A错误；在有氧及缺糖条件下，醋酸菌能够将酒精变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B错误；发酵过程中，对于不同的菌种，其较适宜的温度范围不同，C错误。
PAGE
2基础知识：凝胶色谱法
1．
有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是：（
）
A．它们都是分离蛋白质的重要方法
B、它们的原理相同C、使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要
D、以上说法都正确
2．
凝胶色谱法分离蛋白质时使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG—75)，其中G、75的含义分别是（　　）
A．G表示凝胶的使用量，75表示加75
g水
B．G表示凝胶的交联程度，75表示需加热75
℃
C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5
g
D．G表示凝胶的膨胀体积，75表示每克凝胶膨胀后体积可达75
cm3
3．
使用凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中，分别使用下列哪些试剂（
）
①蒸馏水
②生理盐水
③20
mmol/L的磷酸缓冲液
④清水
⑤柠檬酸钠
A．①③⑤
B．①②③
C．②①③
D．④①③
4．
在凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中，分别使用的试剂的是(　　)
①清水　②20
mmol/L的磷酸缓冲液　③生理盐水　④蒸馏水　
A．②③④
B．③④②
C．②①③
D．④①③
5．
血红蛋白释放要使用的物质是(　　)
①0.9%的生理盐水　②甲苯
③磷酸缓冲液　④蒸馏水　
A．①④
B．②④
C．④⑤
D．①③
6．
凝胶色谱法分离血红蛋白质的依据是（
）
A．根据蛋白质分子的大小
B．根据蛋白质分子质量的大小
C．根据蛋白质所带电荷的多少
D．根据蛋白质溶解度的大小
7．
下列对凝胶色谱柱相关操作过程正确的是(
)
A．将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴
B．将橡皮塞下部用刀切出凹穴
C．插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面
D．将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片
8．
凝胶常在分离蛋白质时使用，其的种类很多，但都有相同的作用是(　　)
A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径
B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度
C．将酶或细胞固定在凝胶中
D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度
9．
利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是(　　)
A．蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小
B．蛋白质相对分子质量的大小
C．蛋白质所带电荷的多少
D．蛋白质溶解度的大小
10．
下列有关生物技术实验的叙述，正确的是（
）
A．制作果酒和制作果醋所需的发酵底物、适宜温度等均相同
B．在植物组织培养过程中，制备的MS培养基需要用酒精消毒
C．用二苯胺鉴定DNA和用斐林试剂检测还原糖时均需要水浴加热
D．用凝胶色谱法分离蛋白质时，与分子量较小的蛋白质相比，血红蛋白移动较慢
参考答案：
1．
答案：
A
解析：

2．
答案：
C
解析：
G表示凝胶交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水7.5
g。
3．
答案：
C
4．
答案：
C
解析：
在分离蛋白质时，用生理盐水洗涤红细胞，以去除杂蛋白，然后将其加入蒸馏水中使红细胞破裂，释放血红蛋白，透析需用磷酸缓冲液，以维持pH稳定，故选C。
5．
答案：
B
解析：
甲苯作用为溶质，脂类物质也有利于红细胞涨破和血红蛋白的释放，蒸馏水作用是使红细胞吸水涨破，故选B。
6．
答案：
B
解析：
凝胶色谱法分离血红蛋白质的依据是根据蛋白质分子质量的大小
7．
答案：
A
解析：
制作凝胶色谱柱时，先选择合适的橡皮塞打孔，然后将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴，取适宜长度的玻璃管插入橡皮塞孔内，插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。将尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片，覆盖在橡皮塞的凹穴上，再用尼龙纱将橡皮塞上部包好，插入到玻璃管的一端。
8．
答案：
A
解析：
凝胶的种类很多，但所有凝胶均是一些微小的多孔球体，小球内部有许多贯穿的通道，由于不同蛋白质相对分子质量不同，在凝胶中走过的路径不同，因而得以分离。
9．
答案：
B
解析：
凝胶色谱法所用的凝胶实际上是一些微小多孔的球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
10．
答案：
C
解析：
试题分析：制作果酒和制作果醋所需的发酵底物、适宜温度等均不相同，A错误；在植物组织培养过程中，制备的MS培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，B错误；用二苯胺鉴定DNA和用斐林试剂检测还原糖时均需要水浴加热，C正确；用凝胶色谱法分离蛋白质时，与分子量较小的蛋白质相比，血红蛋白移动路径短，移动较快，D错误。
考点：本题考查生物技术实践的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
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2基础知识：电泳
1．
关于电泳的说法不正确的是（　　）
A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程
B．带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动
C．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少
D．用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小
2．
蛋白质分子中，氨基酸的α-氨基和α-羧基虽然大部分结合成为肽键，但是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团，如肽链末端的α-氨基和α-羧基、天冬氨酸和谷氨酸残基中的羟基、赖氨酸和组氨酸残基中的各种碱性基团，所以蛋白质是两性电解质。在酸性溶液中，碱性基团的解离增大，使蛋白质带正电荷；在碱性溶液中，酸性基团的解离加强，使蛋白质带负电荷。当溶液到达某一pH时，蛋白质可因内部酸性和碱性基团的解离相等而呈等电状态，这时的溶液pH叫做蛋白质的等电点。不处于等电点状态的蛋白质分子的正、负电荷量是不相同的。试回答下列问题。
(1)多数蛋白质的等电点近于5，一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点________(填“偏高”或“偏低”)。
(2)根据等电点的不同，你能用________方法将不同种类的蛋白质分子分开。
(3)简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
3．
下列有关提取和分离血红蛋白的实验叙述错误的是（　　）
A．该实验的材料必需选用鸡血
B．通过透析法可以去除样品中分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取
C．凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质
D．电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离
4．
下列关于蛋白质性质的叙述中，不会影响到蛋白质的泳动速度的是（　　）
A．蛋白质分子的大小
B．蛋白质分子的密度
C．蛋白质分子的形状
D．蛋白质分子的等电点
5．
有一混合蛋白质溶液，其中蛋白质的pI(等电点)分别为4.6、5.0，电泳时欲使它们泳向正极，缓冲液的pH应该是（　　）
A．6.0
B．5.0
C．4.0
D．3.0
6．
下列带电颗粒中泳动速度最快的是（　　）
A．直径大、球形、净电荷多
B．直径小、球形、净电荷多
C．直径大、方形、净电荷少
D．直径小、方形、净电荷多
7．
下列有关电泳现象的叙述，不正确的是（　　）
A．相同蛋白质的溶液，经过同一个电场电泳后，会在支持物凝胶上形成相同的带纹
B．不同蛋白质的混合溶液，经过同一个电场电泳后，在支持物凝胶上形成不同的带纹
C．每一种带纹可能就是一种蛋白质
D．每一种带纹一定不是一种蛋白质
8．
下列与蛋白质有关的说法中，不正确的是（
）
A．
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中，蛋白质的迁移速率只取决于分子质量大小
B．
血浆渗透压的大小主要与无机盐、蛋白质的含量有关
C．
功能越复杂的细胞膜，蛋白质的种类和数量越多
D．
为了后续的分离纯化蛋白质，可以利用蒸馏水洗涤红细胞去除杂质蛋白
9．
下列有关电泳的叙述，不正确的是(　　)
A．电泳的支持介质可用醋酸纤维薄膜，滤纸、琼脂凝胶等
B．带电粒子的电荷量、粒子大小和形状都可以影响泳动速度
C．点样时，应将有记号的一面向上平铺在玻璃板上进行点样
D．电泳时，电流强度越大，电泳效果越好
10．
使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于(　
)
A．电荷的多少
B.分子的大小
C．肽链的多少
D.分子形状的差异
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素，SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差异，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
2．
答案：
(1)偏高
(2)电泳
(3)调节电泳槽中缓冲液的pH，使某种蛋白质处于等电点状态，而其他蛋白质带有电荷，在电场作用下，带有正、负电荷的蛋白质分别移向两极，而不带电荷的蛋白质留在原处。
解析：
本题深入到蛋白质内部，从蛋白质分子带电性质及数量的角度，引导学生理解电泳法分离蛋白质的原理。含碱性基团较多的蛋白质溶液，在pH近于5时解离程度较大，蛋白质带正电荷。要使蛋白质内部酸性和碱性基团解离相等呈等电状态，必须提高溶液的pH，使酸性基团解离增加，故蛋白质的等电点提高。根据等电点不同，可以利用电泳法将特定的蛋白质分离出来。
3．
答案：
A
解析：
因为鸡血细胞中含有细胞核以及各种复杂的细胞器，会给提取血红蛋白带来一定的难度，故提取血红蛋白一般选用哺乳动物的成熟红细胞。
4．
答案：
B
解析：
电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
5．
答案：
A
解析：
当缓冲液的pH值大于蛋白质等电点时，会诱导羧基基团的电离，这样蛋白质本身就呈电负性，在电场的作用下，向正极移动。
6．
答案：
B
解析：
一般来说，带电颗粒直径越小，越接近于球形，所带净电荷越多，则在电场中的泳动速度越快；反之，则越慢。
7．
答案：
D
解析：
不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹。不同的蛋白质可以在同一带纹中，但同一种蛋白质一定存在于同一带纹中。
8．
答案：
D
9．
答案：
D
解析：
电泳时，每厘米膜宽电流强度为0.4～0.8
mA较好，并不是电流越强越好。
10．
答案：
B
解析：
SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物，SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
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2实验——多聚酶链式反应扩增DNA片段
1．
下列有关PCR技术的说法，错误的是：
A．DNA复制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能从3’端延伸DNA链
B．引物与DNA母链的关系是碱基互补配对
C．添加缓冲溶液的作用是维持pH基本不变
D．DNA聚合酶可以用来合成引物
2．
在实验室内模拟生物体内的DNA复制，需要哪些条件（　　）
①酶　②游离的脱氧核苷酸　③ATP　④DNA分子　⑤引物　⑥tRNA　⑦适宜的温度　⑧适宜的酸碱度
A．①②③④⑤⑥
B．②③④⑤⑥⑦
C．②③④⑤⑦⑧
D．①②④⑤⑦⑧
3．
在PCR的实验操作中，下列说法正确的是（　　）
①在微量离心管中添加各种试剂时，只需要一个枪头
②离心管的盖子一定要盖严
③用手指轻弹离心管壁
④离心的目的是使反应液集中在离心管的底部
A．①②③
B．①②④
C．②③④
D．①③④
4．
在PCR实验操作中，下列说法不正确的是（　　）
A．在微量离心管中添加各种试剂时，只需一个枪头
B．离心管的盖子一定要盖严，防止液体外溢
C．用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合
D．离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果
5．
PCR技术扩增DNA，需要的条件是（　　）
①目的基因　②引物　③四种脱氧核苷酸　④DNA聚合酶等　⑤mRNA　⑥核糖体
A．②③④⑤
B．①②③⑥
C．①②③④
D．①③④⑤
6．
下列对操作过程的叙述，错误的是（　　）
A．PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌
B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20
℃储存
C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化
D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换
7．
PCR技术是在遗传实验室中常见的一种DNA片段进行体外扩增的方法，利用它能快速得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是（　　）
A．反复洗涤
B．不被外源DNA污染
C．高压灭菌
D．在－20℃保存
8．
回答下列关于DNA复制与PCR技术的相关问题：
(1)PCR与生物体内的DNA复制有何区别？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)PCR每次循环都可分为________、________和______三步。
(3)_____
___的发现和使用大大提高了PCR的效率，使PCR技术趋向________。
(4)PCR通过控制________来控制双链的________与________。
(5)PCR反应需要一定的缓冲溶液中提供________、分别与两条模板结合的__________、__________种脱氧核苷酸、________的DNA聚合酶。
(6)从第二轮循环开始，DNA聚合酶只能特异的复制________的DNA序列，使这段________的序列呈指数扩增。
9．
使用PCR仪具体实验操作顺序应为（　　）
①设计好PCR仪的循环程序　②按配方准备好各组分　③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分　④进行PCR反应　⑤离心使反应液集中在离心管底部
A．②③⑤④①
B．①⑤③②④
C．②③⑤①④
D．④②⑤③①
10．
PCR实验中使用的微量离心管、吸头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是(　　)
A．反复洗涤
B．外源DNA污染
C．高压蒸汽灭菌
D．在－20
℃储存
参考答案：
1．
答案：
D
解析：

2．
答案：
D
解析：
在实验室内模拟DNA复制时，需要DNA聚合酶催化合成DNA子链；四种脱氧核苷酸为合成子链的原料；DNA母链为DNA复制的模板；还需要引物、较高的温度、适宜的酸碱度等。
3．
答案：
C
解析：
在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换，以确保实验的准确性；盖严离心管口的盖子，防止实验中外源DNA污染；用手指轻轻弹击管的侧壁，使反应液混合均匀；离心目的是使反应液集中在离心管的底部，提高反应效果。
4．
答案：
A
解析：
在微量离心管中添加各种试剂时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头必须更换，确保实验的准确性；离心管的盖子一定要盖严，防止实验中脱落或液体外溢；离心10
s的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果。
5．
答案：
C
解析：
PCR技术需要目的基因作为扩增的模板，DNA聚合酶催化反应的进行，而引物是满足DNA聚合酶起作用的需要，四种脱氧核苷酸是该过程的原料。
6．
答案：
C
解析：
为了防止外源DNA等因素的污染，PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌；所用的缓冲液及酶应分装成小份保存，并使用一次性吸液枪头，即A、B、D均正确。在冰箱中放置的缓冲液和酶取出后应放在冰块上缓慢融化，而不能迅速融化，故C错误。
7．
答案：
C
解析：
通过对PCR实验中所用仪器和试剂进行高压灭菌，可以避免外源DNA等因素的污染。
8．
答案：
(1)①PCR反应不需要解旋酶，而生物体内DNA复制时需要解旋酶；
②PCR需要耐热的DNA聚合酶，而生物体内DNA聚合酶在高温的时候会变性；
③PCR一般要经历三十多次循环，而生物体内DNA复制需要生物体自身的控制
(2)变性　退火　延伸
(3)Taq聚合酶　自动化
(4)温度　解聚　结合
(5)DNA模板　两种引物　四　耐热
(6)处于两个引物之间　固定长度
解析：
本题主要考查关于DNA复制与PCR技术的知识，尤其对PCR技术的考查较细致，可参考。
9．
答案：
C
解析：
PCR反应的操作步骤一般分为准备(包括配置配方及将各配方放于实验台上)→移液→混合→离心→反应，因PCR仪是一种自动控制温度的仪器，设计好循环程序就可以进行反应了。
10．
答案：
C.
解析：
通过对PCR实验中所用仪器和试剂进行高压蒸汽灭菌，可以避免外源DNA等因素的污染.
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3实验——DNA的粗提取与鉴定
1．
在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是
A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14
mol/L，滤去析出物
B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质
C．将丝状物溶解在2
mol/L
NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色
D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同
2．
对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是(　　)
A．利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离
B．利用高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离
C．在溶有DNA的2
mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，取滤液进行以后的实验
D．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA
与蛋白质分离
3．
下列操作中，对DNA的提取量影响较小的是（　　）
A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质
B．搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌
C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增加
D．用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却
4．
一个由32P标记的DNA分子，放在未标记的环境中培养，复制5次后，标记的DNA分子占DNA分子总数的(　　)
A．1/10
B．1/16
C．1/25
D．1/32
5．
玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)染成的颜色分别是(　　)
A．黄色、紫色
B．白色、砖红色
C．白色、蓝色
D．蓝色、砖红色
6．
某同学用洋葱进行DNA
粗提取和鉴定实验，操作错误的是(
)
A．
加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨
B．
用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的
DNA
C．
加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌
D．
加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热
7．
用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后,还要用酒精处理,可以得到较纯化的DNA。这是因为(　　)
A．DNA易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精
B．DNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精
C．DNA和滤液中其他成分更易溶于酒精
D．DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精
8．
下列有关“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述中，正确的是(　　)
A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝
C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取
D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少
9．
1．DNA的粗提取与鉴定实验，与下列哪项原理无关(　　)
A．DNA在0.14
mol/L的NaCl溶液中，溶解度最低
B．DNA易被龙胆紫溶液染成紫色
C．DNA溶液中加入二苯胺试剂，加热后产生蓝色
D．加入95%的冷酒精，DNA会从溶液中析出
10．
在DNA提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（　　）。
A．不易破碎
B．减少提取过程中DNA的损失
C．增加DNA的含量
D．容易洗刷
参考答案：
1．
答案：
B
解析：

2．
答案：
D
解析：
利用DNA不溶于酒精溶液，蛋白质溶于酒精溶液的特点，可将DNA与蛋白质分离；高温能使蛋白质、DNA变性，蛋白质在60～80℃可变性，而DNA在80℃以上也会变性，所以高温对DNA有影响；在溶有DNA的2
mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，得到DNA黏稠物，用DNA黏稠物进行以后的实验；在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的专一性作用，可将DNA与蛋白质分离。
3．
答案：
B
解析：
在B项所述的操作中，可以保证DNA分子的完整性，但不影响提取量。
4．
答案：
B.
解析：
一个DNA分子复制n次后产生的DNA分子数目为2n，而DNA的复制是半保留复制，其特点是：新形成的DNA双链，一条来自亲代DNA分子的母链，另一条是新形成的子链.这样最初32P标记的DNA分子复制后，其标记的两条链就分别进入两个子代DNA分子中，即两个子代DNA分子均被标记了.然而由于是在未标记的环境中培养，不论复制多少次，只有最初标记过的两条链存在于两个DNA分子中.这样，经n次复制，标记的DNA分子占2/2n即21－n，所以本题应选B项.
5．
答案：
　C
解析：
　较纯净的DNA是白色丝状物，DNA遇二苯胺，在沸水浴条件下会呈蓝色。
6．
答案：
A
解析：
加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作，A错误；利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开，起到纯化的作用，B正确；加入酒精溶液，静置溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA，用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌，防止断裂，C正确；用二苯胺鉴定DNA需要水浴加热，D正确。
7．
答案：
B
解析：
在溶液中加入酒精,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起的丝状物就是析出的DNA。因此利用的原理是DNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精
8．
答案：
C
解析：
DNA在NaCl溶液中的溶解度与洗涤剂无关；向溶解有DNA的试管中加入少量二苯胺试剂，混匀后沸水浴加热，溶液变蓝，而不是冷却后变蓝；细胞中可能含有分解DNA的酶，从而影响到DNA的提取；DNA可以吸附在玻璃棒上，用玻璃棒缓慢搅拌可以增加DNA的提取量。
9．
答案：
B
解析：
DNA在0.14
mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。DNA鉴定选用的试剂为二苯胺试剂，加热后(沸水浴)产生蓝色。加入95%的冷却的酒精，由于DNA不溶于酒精，DNA会从溶液中析出。
10．
答案：
B
解析：
玻璃对DNA有吸附作用，如果用玻璃器具，DNA会吸附在管壁上，减少DNA的提取量。
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2基础知识：亚硝酸盐及乳酸菌发酵
1．
果酒变酸、酸奶的制作、腐乳外部致密的一层“皮”，与其相关的微生物分别是（　　）
A．醋酸菌、乳酸菌、毛霉
B．乳酸菌、毛霉、醋酸菌
C．醋酸菌、酵母菌、毛霉
D．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
2．
泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是________________，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用____________法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合成________________色染料。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是__________________。
3．
下列关于亚硝酸盐的叙述，错误的是（　　）
A．亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水
B．亚硝酸盐的分布广泛，其中蔬菜中亚硝酸盐的平均含量约为4
mg/kg
C．咸菜中亚硝酸盐的平均含量在7
mg/kg以上，所以尽量少吃咸菜
D．亚硝酸盐不会危害人体健康，并且还具有防腐作用，所以在食品中应多加些以延长食品的保质期
4．
在制作果酒、果醋、泡菜、腐乳时，发酵过程中对氧气的需求分别是（　　）
A．无氧、有氧、无氧、有氧
B．有氧、无氧、无氧、有氧
C．无氧、有氧、有氧、无氧
D．有氧、无氧、有氧、无氧
5．
人体正常的血红蛋白中含有亚铁离子。若误食亚硝酸盐，则导致血红蛋白中亚铁离子转化为铁离子而中毒，服用维生素C可解除亚硝酸盐中毒。下列叙述中，正确的是（　　）
A．亚硝酸盐是还原剂
B．维生素C是还原剂
C．维生素C能将Fe2＋氧化成Fe3＋
D．亚硝酸盐被氧化
6．
泡菜制作过程中，乳酸菌进行无氧呼吸是为了（　　）
A．获取乳酸
B．获取能量
C．氧化分解有机物
D．获取热能
7．
我国食品卫生标准规定，肉制品和酱腌菜中亚硝酸盐含量不得超过（　　）
A．20
mg·kg－1
B．30
mg·kg－1
C．0.3～0.5
g·kg－1
D．2
mg·kg－1
8．
下列有关乳酸菌代谢的叙述中，正确的是（　　）
A．乳酸菌没有细胞器，只能进行无氧呼吸
B．乳酸菌的蛋白质合成在自身的核糖体上进行
C．乳酸菌的代谢终产物也是CO2和H2O
D．乳酸菌的细胞壁与植物细胞壁的组成相同
9．
用实验检测某一菌株，结果如下：
（１）有氧条件下，菌株正常生长，但检测不出乳酸和酒精
（２）无氧条件下，乳酸含量增加明显，但检测不出酒精
（３）无氧条件下，培养液中半乳糖的消耗量与乳酸的生成量成正比
由上述结果得出的下列结论中，错误的是（　　）
A．此菌能在弱酸性条件下生活　　B．此菌中存在催化乳酸形成的酶
C．此菌为厌氧菌　　　
D．半乳糖也可成为此菌的营养物质
10．
乳酸菌等细菌都具有的特征是（　　）
A．
都是异养生物
B．
仅在有水条件下繁殖
C．
仅在有氧条件下生长
D．
生存温度都超过40
℃
参考答案：
1．
答案：
A
解析：
果酒变酸是由于醋酸菌发酵产生醋酸的原因。酸奶的制作是通过乳酸菌无氧呼吸产生乳酸来完成的。腐乳外部致密的一层“皮”是毛霉生长所形成的菌丝，经腌制之后形成的。
2．
答案：
乳酸(或有机酸)　(光电)比色　玫瑰红　作为对照
解析：
泡菜发酵过程中产生的主要是乳酸，在泡菜发酵过程中，杂菌可能产生乳酸、乙酸等；测定亚硝酸盐原理是在酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸酸发生重氮化反应后，与N—1—1苯基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
3．
答案：
D
解析：
亚硝酸盐具有防腐作用，但是，当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3～0.5
g时，会中毒；当摄入总量达到3
g时，会引起死亡。
4．
答案：
A
解析：
果酒制作需要酵母菌，酵母菌在无氧条件下，把葡萄糖分解为酒精；果醋的发酵需要醋酸菌，该菌是需氧微生物；泡菜发酵需要乳酸菌，乳酸菌是厌氧细菌；腐乳生产需要毛霉，毛霉是需氧的真菌。
5．
答案：
B
解析：
维生素C具有强还原作用，可作还原剂。解答此问题的关键是：从“维生素C可解除亚硝酸盐中毒”这句话入手。亚硝酸盐可使Fe2＋转化为Fe3＋，所以维生素C可使Fe3＋还原为Fe2＋。
6．
答案：
B
解析：
乳酸菌是严格厌氧菌，其生命活动所需能量来自无氧呼吸，且是惟一来源。
7．
答案：
A
解析：
我国食品卫生标准规定，肉制品和酱腌菜中的亚硝酸盐含量不得超过20
mg·kg－1。
8．
答案：
B
解析：
乳酸菌有核糖体，乳酸菌的代谢终产物是乳酸，无CO2，乳酸菌的细胞壁主要是肽聚糖，而植物细胞壁主要由纤维素和果胶组成，故只有B正确。
9．
答案：
C
解析：
根据条件（1）、（2）可知，该菌株的代谢类型极可能是需氧型也有可能是兼性厌氧型，不可能是（专性）厌氧型。根据条件（2）、（3）可知，至少是在无氧条件下，可利用半乳糖为底物，且无氧呼吸的产物有乳酸，肯定存在催化乳酸形成的酶。真菌的最适PH为5.0-6.0，细菌的最适PH为6.5-7.5，放线菌的最适PH是7.5-8.5，不管是那种菌株，都可以在弱酸性条件下生活。
10．
答案：
B
解析：
细菌的生长需要各种营养元素，细菌种类不同，所需营养元素的种类也不同。
PAGE
1基础知识：DNA的鉴定
1．
如果在除杂中选择方案一（教材P55），初步析出DNA所用药品的浓度和名称是（　　）
A．0.1
g·L-1的柠檬酸钠溶液
B．2
mol·L-1的NaCl溶液
C．0.14
mol·L-1的NaCl溶液
D．体积分数为95%的冷却酒精溶液
2．
在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，A、B、C、D、E五个小组的操作除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均相同，而且正确，但实验结果却不同。
组别
实验材料
提取核物质时加入的溶液
去除杂质时加入的溶液
DNA鉴定时加入的试剂
A
鸡血
蒸馏水
95%的酒精(25
℃)
二苯胺
B
菜花
蒸馏水
95%的酒精(冷却)
双缩脲
C
人血浆
蒸馏水
95%的酒精(冷却)
二苯胺
D
人血细胞
2
mol/L的氯化钠
0.14
mol/L的氯化钠
双缩脲
E
鸡血
蒸馏水
95%的酒精(冷却)
二苯胺
(1)实验材料选择错误的组别是________，其原因是______________________________
________________________________________________________________________。
(2)实验步骤(不包括实验材料)均正确，但得不到DNA的组别是________。
(3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是________；蓝色较淡的是________，其原因是________________________________________________________________________。
(4)B组实验不成功的最主要原因是____________________________________________
________________________________________________________________________。
3．
下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是(　　)
A．是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法
B．在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小
分子可以进入凝胶内部流速缓慢，最后流出
C．凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的
物质分子的大小无相应关系
D．一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有
要分离的物质都应该被洗脱出来
4．
DNA不溶解于(　　)
A．NaCl溶液
B．KCl溶液
C．C2H5OH
D．MgCl2溶液
5．
某兴趣小组准备开展“不同种类的加酶洗衣粉对同一污物的洗涤效果”的活动。下列说法不正确的是(　　)
A．该实验的原理是酶的专一性
B．自变量是不同种类的加酶洗衣粉
C．水质、水量、pH均可看做无关变量
D．洗涤过程中只要保持水温相同即可
6．
标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是(　　)
A．94
℃、55
℃、72
℃　　　　　B．72
℃、50
℃、92
℃
C．50
℃、92
℃、72
℃
D．80
℃、50
℃、72
℃
7．
关于生物技术的叙述，正确的是（
）
A．制作果酒时应先除去枝梗后冲洗葡萄
B．制作果醋时应保证有氧条件以保证有关菌种正常代谢
C．分离能分解尿素的细菌，要以蛋白胨作为唯一的氮源
D．DNA的粗提取与鉴定实验中，用甲基绿鉴定DNA，呈现蓝色
8．
下列关于高中生物学实验的叙述中，不正确的是（
）
A．用二苯胺试剂染色观察DNA在细胞中的分布
B．用双缩脲试剂检测豆浆溶液中是否含有蛋白质
C．用苏丹Ⅲ染液染色观察花生子叶细胞中的油脂
D．用黑藻叶片制作装片观察叶绿体的形态和分布
9．
二苯胺试剂可以与下列哪种有机化合物发生特定的蓝色反应（
）
A．蛋白质
B．DNA
C．葡萄糖
D．
脂肪
10．
鉴定DNA的试剂及出现的颜色反应是（　　）
A．斐林试剂、砖红色
B．苏丹Ⅲ染液、橘黄色
C．双缩脲试剂、紫色
D．二苯胺试剂、蓝色
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
DNA在2
mol·L-1的NaCl溶液中溶解度最大，在0.14
mol·L-1的NaCl溶液中溶解度最小。
2．
答案：
(1)C、D　人的血浆中没有细胞结构，成熟的红细胞中没有细胞核，选用这些材料得不到DNA或得到的DNA很少　(2)C　(3)A、E　A　冷却的酒精对DNA的凝集效果较佳，该组使用的是25
℃的酒精　(4)菜花细胞在蒸馏水中不能被破坏，得不到DNA(应采用研磨的方法)
解析：
(1)人的血浆中没有细胞结构，成熟的红细胞没有细胞核，在这些材料中是不能得到DNA或得到的很少。(2)血细胞中有少量的白细胞，其中有DNA，所以只有C组织血浆中没有。(3)冷酒精对DNA有较好的凝集效果，而该组中用的是25
℃酒精。(4)菜花细胞外有细胞壁起保护作用，在蒸馏水中不会破裂，所以不能得到DNA。
3．
答案：
C.
解析：
本题考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理.凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法.凝胶是由多糖类化合物构成的，其内部有很微细的多孔网状结构，小分子蛋白质可以进入凝胶内部，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部，路程较短，移动速度较快，因此在洗脱过程中先分离出来.不同的凝胶，其立体网状结构不同，孔隙大小不同，因此可分离的分子大小也不同.凝胶一般对分离的物质无吸附作用，所以要分离的物质都应该被洗脱出来，这是凝胶色谱法与一般层析法的不同.
4．
答案：
C.
解析：
DNA可溶解在NaCl等盐溶液中，不溶于酒精溶液，但某些物质可溶于酒精溶液中，这也是提纯DNA时用酒精溶液沉淀析出DNA的原因.
5．
答案：
D
解析：
对于无关变量应该控制相同并且适宜，所以洗涤过程中水温要保持相同且适宜，还要保持其他无关变量均相同。
6．
答案：
A
解析：当温度上升到94
℃(90～95
℃)左右时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到55
℃(55～60
℃)左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，称为复性；当温度上升到72
℃(70～75
℃)左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq
DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。
7．
答案：
B
8．
答案：
A
9．
答案：
B
解析：
二苯胺试剂与DNA
有机化合物会发生特定的蓝色反应
10．
答案：
D
解析：
A、斐林试剂用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下生成砖红色沉淀，A错误；
B．苏丹Ⅲ染液可使脂肪呈橘黄色，B错误；
C．双缩脲试剂可与蛋白质发生紫色反应，C错误；
D．在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，D正确．
故选：D．
PAGE
3实验——多聚酶链式反应扩增DNA片段
1．
在进行PCR操作时，如果枪头受到污染，则会影响到
A．
复制循环速度
B.
DNA分子纯度
C.
DNA分子大小
D.
酶催化活性
2．
下列关于PCR技术的叙述，正确的是（
）
A．
PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上
B．
该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶
C．
该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的
D．
该技术应用体内DNA双链复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件
3．
PCR实验中用到微量离心管、缓冲液和蒸馏水，使用前必须进行的关键步骤是（　　）
A．反复洗涤
B．用酒精擦洗
C．高压灭菌
D．在－20
℃保存
4．
DNA在波长为多大的时候有一强烈的吸收峰（　　）
A．260nm
B．240nm
C．280nm
D．300nm
5．
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。下列防止污染的办法中不包括的是（　　）
A．将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行
B．吸样枪吸样要慢，吸样时尽量一次性完成，枪头小套、小离心管应一次性使用，以免交叉污染
C．所有PCR试剂都应放置于大瓶分装，以减少重复加样次数，避免污染机会
D．PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存，不应放于同一冰盒或同一冰箱
6．
在PCR扩增的实验中，加入一种提取物(一种模板DNA片段)，但实验得到的产物却有2种DNA。其原因可能是(　　)
A．基因突变
B．Taq聚合酶发生变异
C．基因污染
D．温度过高
7．
关于PCR技术的应用，错误的一项是(　　)
A．古生物学、刑侦破案、DNA序列测定
B．诊断遗传病、基因克隆、古生物学
C．DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案
D．诊断遗传病、合成核苷酸、DNA序列测定
8．
PCR利用了DNA热变性的原理，PCR仪实际上是一种能自动调控温度的仪器，对PCR过程中“温度的控制”的说法中错误的是(　　)
A．酶促反应需要高的温度，是为了确保模板是单链
B．延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度
C．DNA聚合酶不具热变性，要用耐高温的聚合酶
D．DNA解旋酶不具热变性，为了确保模板是单链
9．
关于DNA的复制,下列叙述正确的是(　　)
A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5′端延伸DNA链
B．DNA复制不需要引物
C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合
D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸
10．
多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：(
)
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
参考答案：
1．
答案：
B
解析：

2．
答案：
D
解析：

3．
答案：
C
解析：
在PCR实验中，为了避免外源DNA等因素的污染，微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。同时也不能忽视其他操作步骤，如缓冲液和酶应该分装成小份，并且在－20
℃保存。
4．
答案：
A
解析：

5．
答案：
C
解析：
所有的PCR试剂都应放置于小瓶分装，一次性用完，避免因多次使用造成污染。
6．
答案：
C
解析：
其原因可能是基因污染。在PCR实验中，一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸头等，尽量避免基因污染。
7．
答案：
D.
解析：
PCR技术在医学上用于遗传病的基因诊断、基因克隆、DNA序列测定，法医上用于刑侦破案，古生物学上用于生物化石样品分析.PCR技术是以4种脱氧核苷酸为原料，合成双链DNA的过程，PCR技术不能合成核苷酸.
8．
答案：
D.
解析：
PCR是一种体外DNA扩增技术.DNA双链的解开不需要解旋酶，靠高温使其变性，双螺旋结构解体，双链分开，延伸时，在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA，因此延伸的温度要大于复性温度小于变性温度.
9．
答案：
C
解析：
由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从引物的3′端开始延伸;由于DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对原则,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是从子链5′端向3′端延伸。
10．
答案：
C
PAGE
2基础知识：电泳
1．
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中决定蛋白质或多肽移动速度的主要因素是（　　）
A．蛋白质分子所带的电荷
B．蛋白质分子的形状
C．蛋白质分子的相对分子质量
D．缓冲溶液的pH
2．
材料：饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间内____________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程(如下图)。
发酵液→→含酶的发酵液→→→→纯酶
　
　　↓　　　　　　　↓
　　　菌体去除　　　透析液(Ⅰ)去除
Ⅰ中的主要成分为________；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
(3)为制备基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：______________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________________。
(4)除植酸酶外，微生物还应用在__________________的生产中。
3．
下列关于电泳技术分离蛋白质原理的叙述，正确的是（　　）
A．蛋白质中含有游离的氨基，是碱性电解质
B．蛋白质中含有游离的羧基，是酸性电解质
C．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动
D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动
4．
有关电泳的叙述，不正确的是（　　）
A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程
B．带电分子会向着与其电荷相同的电极移动
C．在一定的pH下，可解离的基团会带上正电或负电
D．电泳能够实现样品中各种分子的分离
5．
电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷________方向的电极移动（　　）
A．相同
B．相反
C．相对
D．相向
6．
下列各项中，除哪项外均为电泳使样品中各分子分离的原因（　　）
A．分子带电性质的差异
B．分子的大小
C．分子的形状
D．分子的变性温度
7．
科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。
（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法．其原理是根据蛋日质分子的
、大小及形状不同，在电场中的
不同而实现分离。
（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供
和
。
（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量的菌液培养基中菌落的
，确定该蛋白的抗菌效果。
（4）细菌培养常用的接种方法有
和
。实验结束后，对使用过的培养基应进行
处理。
8．
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中决定蛋白质或多肽移动速度的主要因素是(　　)
A．蛋白质分子所带的电荷
B.蛋白质分子的形状
C．蛋白质分子的相对分子质量
D.缓冲溶液的pH
9．
下列关于电泳的说法不正确的是（
）
A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程
B．带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动
C．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少
D．用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小
10．
电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷________方向的电极移动(　　)
A．相同
B．相反
C．相对
D．相向
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成单条肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异，从而达到仅根据蛋白质相对分子质量的不同来分离蛋白质的目的。
2．
答案：
(1)透明圈　植酸钠的消耗量(醇和磷酸的生成量)
(2)小分子杂质　凝胶色谱法：根据不同蛋白质之间分子大小、吸附性质等差别进行纯化。(或电泳法：根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化。)
(3)变性、复性和延伸　加热
(4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶
解析：
(1)选择目的菌株，可采用选择培养基来操作。通过在培养基中添加特定成分，使其他微生物死亡或不能呈现特定现象来筛选。含有植酸酶基因的菌株可产生植酸酶分解培养基中的植酸钙，产生透明圈。
(2)题干中的生产流程为酶纯化的过程。含酶的发酵液通过透析，即以半透膜过滤发酵液，使一些小分子物质被过滤掉，再通过电泳法或凝胶色谱法分离纯化混合的酶液，获取纯的植酸酶。
3．
答案：
D
解析：
蛋白质中既含有游离的氨基，又含有游离的羧基，属于两性电解质；蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。
4．
答案：
B
解析：
在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
5．
答案：
B
解析：
在一定pH作用下，生物大分子中有某些可解离的基团，这些基团会带上正电荷或负电荷，在电场作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
6．
答案：
D
解析：
电泳是指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程，样品分子的带电性质不同、分子的大小和形状不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度，与分子的变性温度无关，故选D项。
7．
答案：
（1）电荷（带电情况）迁移速度
（2）碳源
氮源
（3）数量
（4）平板划线法
稀释涂布平板法（稀释混合平板法）
灭菌
解析：
考查蛋白质的分离技术、微生物的培养技术
（1）电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，许多重要的生物大分子，如多肽、核酸、蛋白质等都具有可解离的基团。在一定的PH条件下，这些基团会带上正电或负电，在电场的作用下根据待分离的样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同。其迁移速度不同，从而把它们分离。
（2）培养基中凡是含有C、H、O、N等元素有机物都能为细菌生长提供碳源和氮源。故牛乳膏和蛋白胨主要为细菌生长提供碳源、氮源
（3）抗菌蛋白具有抗菌能力，培养基中加入抗菌蛋白后接种等量菌液。培养一定时间后，培养基中菌落数多的，该抗菌蛋白的抗菌能力强。
（4）抗菌培养时，常用的接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。实验结束后，对使用过的培养基必必须进行灭菌处理，防止菌种进入自然环境。
8．
答案：
C
解析：
在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,蛋白质分子被解聚成单条肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白质-SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异,从而达到仅根据蛋白质相对分子质量的不同来分离蛋白质的目的
9．
答案：
C
10．
答案：
B
解析：
在一定pH作用下，生物大分子中有某些可解离的基团，这些基团会带上正电荷或负电荷，在电场作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
PAGE
3基础知识：腐乳制作的原理
1．
下列关于毛霉的叙述，错误的是(　　)
A．是一种真菌
B．是一种细菌
C．有直立菌丝和匍匐菌丝
D．豆腐上长出的“白毛”，主要是它的直立菌丝
2．
下列有关毛霉在腐乳制作中的作用的叙述，正确的是（　　）
①将多糖分解成葡萄糖　②将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸　③将脂肪水解成甘油和脂肪酸　④将核酸分解成核苷酸
A．①②
B．②③
C．③④
D．①④
3．
毛霉的新陈代谢类型为异养需氧型，下列哪些措施与其需氧有关（　　）
A．豆腐含水量控制在70%左右
B．控制温度为15
℃～18
℃
C．用塑料袋罩住发酵盘时不要太严
D．与上述A、C项措施有关
4．
我国商代的《书经》中记载“若作酒醴，尔惟曲珫”。其中的“曲”是指（　　）
A．细菌
B．真菌
C．病毒
D．地衣
5．
在制作腐乳时,如果没有加盐,结果会怎样(　　)
A．豆腐腐败
B.腐乳口味不好
C．不易酥烂
D.发酵时间延长
6．
下列关于生物技术实践的叙述中，正确的是（
）
A．用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀
B．固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
C．制作腐乳需利用青霉产生的酶分解豆腐中的蛋白质、脂肪等物质
D．制作果酒、果醋和腐乳过程都应防止微生物的生长繁殖
7．
腐乳味道鲜美，易于消化、吸收，是因为其内主要含有的营养成分是（
）
A．无机盐、水、维生素
B．
NaCl、水、蛋白质
C．多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸
D．蛋白质、脂肪、NaCl、水
8．
在制果酒、果醋、腐乳、泡菜的发酵过程中，菌种是由原料本身提供的是(　　)
①果酒　②果醋　③腐乳　④泡菜
A．①②
B．②③
C．③④
D．①④
9．
请回答（1）～（4）有关问题：
（1）“闻着臭，吃着香”的臭豆腐驰名中外，其制作过程中所用的微生物主要是　______　，臭豆腐表面往往有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的　________，它对人体是无害的．
（2）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入　_________　制成选择培养基进行分离；若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是　_________　．
（3）Taq细菌在1966年被发现于美国黄石国家公园，它的发现促成了PCR技术的自动化，这是因为它为PCR技术提供了　_________　．PCR一般要经过三十多次循环，每次循环可以分为　_________　三步．
（4）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是　_________　，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是　_________　．
10．
下列关于发酵技术的叙述中，错误的是（
）
A．果酒制作的菌种属于真核生物，而果醋制作的菌种属于原核生物
B．果醋制作需要的温度比果酒制作温度高
C．醋酸菌在糖源充足和缺少糖源但有乙醇时都能产生醋酸
D．为了保证腐乳的风味应在加盐腌制时在每层均匀地加入盐分
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
毛霉是一种丝状真菌，有直立菌丝和匍匐菌丝。
2．
答案：
B
解析：
从毛霉产生的酶及其作用进行分析。毛霉能产生蛋白酶和脂肪酶，将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，将脂肪水解成为甘油和脂肪酸。
3．
答案：
D
解析：
将豆腐含水量控制在70%左右，是为了使氧气能进入豆腐，若豆腐含水太多，会因不透气而影响毛霉的生长，缺水也不利于毛霉生长。在罩住发酵盘时留有空隙，也是为了促进毛霉的有氧呼吸。
4．
答案：
B
解析：
其中的“曲”俗称“酒药”，是酿酒中用于谷物糖化的真菌(酵母菌)制剂。故B选项正确。
5．
答案：
A
解析：
加盐的作用主要有两方面:一是析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬,在后期不会过早酥烂;二是能抑制微生物生长,避免豆腐腐败
6．
答案：
A
7．
答案：
C
8．
答案：
D
解析：
果酒、泡菜的发酵过程中，菌种来自原料本身，腐乳、果醋的发酵过程中，菌种来自空气。
9．
答案：
（1）毛霉　
菌丝
（2）有机磷农药　
稀释涂布平板法
（3）耐高温的DNA聚合酶　
变性、复性和延伸
（4）防止外来杂菌的污染（无菌技术）　干热灭菌法
解析：
（1）臭豆腐制作过程中所用的微生物主要是毛霉，表面有一层致密的皮，属于毛霉的白色菌丝，包括直立菌丝和匍匐菌丝．它对人体是无害的．
（2）利用选择培养基的功能筛选，加入有机磷农药；稀释涂布平板法对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数．
（3）Taq细菌为PCR技术提供了耐高温的DNA聚合酶．PCR一般要经过三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步．
（4）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染，干热灭菌对培养皿进行灭菌．
10．
答案：
D
解析：
试题分析：果酒制作的菌种是酵母菌，属于真核生物；而果醋制作的菌种是醋酸菌，属于原核生物，A正确；果醋制作需要的温度为30-35℃，比果酒制作温度18-20℃高，B正确；醋酸菌在糖源充足和缺少糖源但有乙醇时都能产生醋酸，C正确；为了保证腐乳的风味应在加盐腌制时在每层均加入盐分，但距离瓶口越近，加入的盐应该越多，D错误。
考点：本题考查发酵技术的应用，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
PAGE
2实验——果酒和果醋的发酵
1．
下面对发酵过程中灭菌的理解，不正确的是(　　)
A．防止杂菌污染
B．灭菌必须在接种前
C．培养基和发酵设备都必须灭菌
D．消灭杂菌
2．
下列操作不能防止发酵液被污染的是(　　)
A．榨汁机要清洗干净，并晾干
B．发酵瓶要清洗干净，用无水酒精消毒
C．葡萄汁装入发酵瓶后，要密封充气口
D．发酵装置的排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连
3．
在果醋制作过程中,下列哪项操作会引起发酵液受污染
(
)
A．榨汁机用沸水进行清洗并晾干
B．发酵瓶用温水清洗,再用75%的酒精擦拭并晾干
C．葡萄先去除枝梗,再冲洗多次
D．每次排气时,只需拧松瓶盖,不能将盖完全揭开
4．
“每天喝一点，健康多一点”，这是“宁夏红”率先提出的消费理念，将积淀了千百年的枸杞药食文化和中国红文化完美结合起来，更增添了品牌的文化魅力和优势。下图为“宁夏红”枸杞果酒生产工艺流程简图，据图回答问题。
选料→？→粉碎→灭菌→接种→发酵→？→果酒
(1)流程中？处的内容应为________、________。
(2)制作果酒时，温度应该控制在________，果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格，含有醋酸杆菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。
_____________________________________________________________________________
___________________________________________________________________。
(3)果酒制作离不开酵母菌，与醋酸杆菌相比，酵母菌在结构上的主要特点是
_____________________________________________________________________________
___________________________________________________________________。
(4)枸杞果酒制作过程中，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，目的是________________________________________________________________________。
(5)果酒制作是否成功，需发酵后用______________来鉴定，在__________条件下，该物质与酒精反应呈现__________色。
5．
啤酒生产过程大致如下：将经过灭菌的麦芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌种后输入发酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，产生白色泡沫，溶解氧渐渐耗尽。随后，酵母菌繁殖速度迅速下降，糖度加速降低，酒精浓度渐渐上升，泡沫不断增多。当糖浓度下降一定程度后，结束发酵，最后分别输出有形物质和鲜啤酒。
根据上述过程回答以下问题：
(1)该过程表明啤酒酵母异化作用特点是__________________。
(2)初期酵母菌迅速繁殖的主要方式是____________。
(3)啤酒发酵过程中，总是先来“水”，后出“酒”，其原因是
_____________________________。
(4)请写出由麦芽糖→葡萄糖→酒精的反应方程式：
___________________________________________________________________。
(5)如果酵母菌消耗的糖(设为麦芽糖，其相对分子质量为342)有98.5%(物质分数)形成了酒精(相对分子质量为46.0)和其他发酵产物。设有500
t麦芽汁，其中麦芽糖的质量分数为8.0%，发酵后最多能生产酒精浓度为3.2%(质量分数)的啤酒多少吨？_______________
(6)啤酒的风味主要取决于采用的酵母菌株，某酒厂的菌株使用了30多年，繁殖了3000余代，风味不减当年，其主要原因是_____。
6．
请根据某同学尝试使用罐头瓶在常温(21±3
℃)下制作果酒的过程回答实践中的问题：
(1)开始时向消过毒的罐头瓶加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)葡萄汁装入瓶中时要留出大约1/3的空间，这样做的主要目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
在以后的过程中，每隔12小时左右将瓶盖拧松一次(不是打开瓶盖)，此后再拧紧，这样做的目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)加入的新鲜葡萄汁没有进行过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是酵母菌与杂菌之间存在的________关系，有利于酵母菌的生长繁殖；二是由于果酒中的________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)在制作果酒时，可以将果酒进一步发酵，获得果醋。在工业生产制作苹果醋时常常先将苹果发酵成酒，再放入醋酸菌发酵成果醋，请写出相关的反应式：________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)制作葡萄醋时，需要适时地通过充气口向容器内充气，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
7．
下列关于果酒制作过程中的叙述，正确的是（　　）
A．应先去除葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得更彻底
B．实验中加入H2SO3的目的主要是灭菌
C．在发酵过程中，需从充气口不断通入空气
D．由于酵母菌的繁殖能力很强，不需对所用装置进行消毒处理
8．
下列关于腐乳制作的描述中，错误的是(　　)
A．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与
B．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳
C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长
D．密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染
9．
下列关于操作过程的叙述中错误的是(
)
A．PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使
用前必须进行高压灭菌
B．PCR缓冲液和酶应分装成小份，在-20
℃储存
C．PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化
D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换
10．
下列有关生物技术实践的叙述，正确的是(　　)
A．探究果胶酶用量的实验中，果汁量与果胶酶的用量始终成正比
B．在提取β-胡萝卜素时，可选用乙醇或石油醚作为萃取剂
C．果胶酶是由植物、霉菌、细菌等产生的能分解果胶的一类酶的总称
D．为提高β-胡萝卜素的萃取速度，应采用明火加热
参考答案：
1．
答案：
D
解析：
灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。防止杂菌污染是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌)。实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物，与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌，因此发酵所用的微生物是在灭菌后接种的，如果在接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。
2．
答案：
B
解析：
发酵工程中所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物，一旦污染菌种，将导致产量大大下降，甚至得不到产品。榨汁机要清洗干净，并晾干；发酵瓶要清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，防止器材上的杂菌进入发酵液；装入葡萄汁后，要密封充气口，防止空气中的杂菌进入；发酵装置的排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是阻挡外界空气中的菌种进入发酵液。
3．
答案：
C
解析：
葡萄应先冲洗,使杂菌减少,再去除枝梗？若先去除枝梗,会使大量杂菌入侵葡萄内部,给消毒带来困难？
4．
答案：
(1)冲洗
过滤
(2)18～25℃
不能。因醋酸杆菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境(或因醋酸杆菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化为醋酸，而此时发酵罐中的条件是无氧且温度是18～25℃)
(3)有成形的细胞核
(4)在有氧条件下，使酵母菌迅速繁殖，增加数量
(5)重铬酸钾溶液
酸性
灰绿
解析：
(1)果酒生产的工艺流程为：选料→冲洗→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→果酒。
(2)醋酸杆菌的最适生长温度为18℃～25℃。如果果汁灭菌不合格，果酒发酵是无氧环境，且温度不适合醋酸杆菌生存，醋酸杆菌不能将果汁中的糖发酵为醋酸。
(3)醋酸杆菌是原核生物，无细胞核，酵母菌是真核生物，有细胞核及多种细胞器。
(4)枸杞果酒制作过程中，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，在有氧条件下，使酵母菌迅速繁殖，增加数量，有利于后期发酵。
(5)酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
5．
答案：
(1)既能进行有氧呼吸又能进行无氧呼吸
(2)出芽生殖
(3)酵母菌先进行有氧呼吸，产生大量的水；随着O2的减少，酵母菌进行发酵产生酒精
(4)C12H22O11＋H2O2C6H12O6
C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋能量
(5)662t
(6)酵母菌进行无性繁殖，其遗传物质能够保持稳定
解析：
(1)注意区分“该过程表明啤酒酵母异化作用特点”和“该过程中啤酒酵母异化作用特点”的区别。后者可以答“先进行有氧呼吸后进行无氧呼吸”。(2)有氧条件下酵母菌进行出芽生殖。(3)啤酒发酵过程中先进行有氧呼吸后进行无氧呼吸，有氧呼吸有水生成，无氧呼吸产生酒精。(4)略
(5)C12H22O11―→4C2H5OH[
342
4×46
500t×8.0%×98.5%
x
≈662
t
(6)酵母菌进行无性繁殖，其遗传物质能够保持稳定。
6．
答案：
(1)利用酵母菌将果汁中的葡萄糖分解形成酒精
　各种营养
(2)有利于发酵初期酵母菌的有氧呼吸　放掉发酵过程中产生的大量二氧化碳，同时尽量不让氧气进入瓶中
(3)竞争　酒精不利于杂菌的生长
(4)C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋能量；
C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O
(5)醋酸菌为好氧菌，且对氧气的含量非常敏感，即使短时间的缺氧也会导致其死亡
解析：
在缺氧的条件下酵母菌能够将果汁中的糖分分解成酒精和二氧化碳。果酒制作中，先通气或发酵瓶中留有1/3的空间，有利于发酵初期酵母菌的大量繁殖。用罐头瓶在常温(21±3
℃)下制作果酒的过程中，为了防止因发酵产生的二氧化碳气体使瓶内气压过高，需要每隔12小时左右将瓶盖拧松一次。果汁发酵产生酒精后如果有醋酸菌存在，在通气和适宜的温度条件下，酒精能够进一步转化为乙酸，使果酒转变成果醋。
7．
答案：
B
解析：在选葡萄时应先冲洗1～2次，再去除枝梗，以防止葡萄破损被杂菌污染；酵母菌的繁殖力虽然很强，但仍要对所用装置进行消毒处理，因为若含有有害的微生物，影响酒的品质。
8．
答案：
　B
解析：
　腐乳的制作原理是毛霉产生的蛋白酶和脂肪酶能将蛋白质和脂肪分解成小分子物质。制作过程中加盐能够抑制微生物的生长、避免豆腐块腐败变质。而加入酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。密封瓶口前将瓶口通过火焰是防止杂菌污染的有效手段。豆腐的含水量为70%左右，有利于制作腐乳，水分过多则腐乳不易成形。
9．
答案：
C
解析：
解答本题注意以下两点：(1)无菌操作的具体要求；(2)实验材料的保存条件。
10．
答案：
C
解析：
由于底物的量是一定的，所以随着果胶酶增加到一定值，果汁量将不再增加，因此不会始终成正比。萃取胡萝卜素的萃取剂不能与水混溶，而乙醇能与水混溶，所以不能作为其萃取剂；萃取剂一般为有机溶剂，是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸。果胶酶是一类酶的总称，可从植物、霉菌等中提取。
PAGE
5基础知识：PCR原理
1．
DNA中磷酸基团末端称为（　　）
A．3′端
B.2′端
C.5′端
D.1′端
2．
DNA复制过程中的前提是（　　）
A．获得引物
B.催化合成DNA子链
C．解旋
D.4种脱氧核苷酸
3．
催化合成DNA子链的是(　　)
A．解旋酶
B.DNA聚合酶
C．引物
D.淀粉酶
4．
下列不属于PCR技术的优点的是（　　）
A．简单，易于操作
B．可以完全无限制扩增
C．实用性强，灵敏度高
D．快速、高效，并可自动化
5．
有关PCR反应的叙述中，正确的是（　　）
A．PCR反应所需要的引物只是RNA
B．PCR反应所需要的原料是核糖核苷酸
C．PCR反应所需要的酶在60
℃时会变性
D．PCR反应需要在一定的缓冲液中进行
6．
在下列哪种温度范围内，DNA的双螺旋结构能解开（　　）
A．10～20
℃
B．80～100
℃
C．20～30
℃
D．40～60
℃
7．
下列关于DNA双链的叙述错误的是（　　）
A．通常将DNA的羟基末端称为5′端，而磷酸基团的末端称为3′端
B．通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团的末端称为5′端
C．通常DNA只能从3′端延伸DNA链
D．通常DNA不能从5′端延伸DNA链
8．
下列有关PCR的描述，不正确的是（　　）
A．是一种酶促反应
B．引物决定了扩增的特异性
C．PCR反应中的目的片段一般以2n指数扩增
D．扩增对象是氨基酸序列
9．
由李建远教授率领的科研团队，在山东烟台毓璜顶医院成功克隆出5枚符合国际公认技术鉴定指标的人类囊胚．请回答下列问题：
（1）在卵子去核的过程中，李建元教授采用三维立体偏震光纺锤体成像系统，对核DNA精确定位后，再用微激光主要对卵子的第一屏障打孔，才能精确剔除卵子细胞核．这一屏障是指
A．卵黄膜
B．透明带
C．核膜
（2）在培养皮肤纤维细胞和淋巴细胞时，需要用胰蛋白酶等处理，原因是
．培养过程中除了保证无菌、无毒的环境外，为了防止培养过程中的污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的
．
（3）通过克隆胚胎进而用其衍生而来的器官，来取代患者本人病变的器官，就会避免免疫排异反应的发生，根本原因是
．
（4）获得目的基因后可采用
技术进行扩增．大部分物种的基因能拼接在一起，是因为
．检测目的基因是否成功导入植物细胞，可采用的生物技术是
．
10．
要使PCR反应在体外的条件下顺利地进行，需要严格的控制（
）
A．氧气的浓度
B.酸碱度
C.温度
D.大气的湿度
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团的末端称为5′端。
2．
答案：
C
解析：
在DNA的复制过程中，双链的解开是进行DNA复制的前提。
3．
答案：
B
解析：
在DNA复制过程中，起催化作用的是DNA聚合酶。
4．
答案：
B
解析：
PCR技术要设计引物，因此扩增具有特异性，灵敏度很高。而应用Taq
DNA聚合酶的PCR仪可自动化，操作简单。PCR技术能在体外迅速扩增DNA片段，快速高效，往往被误认为可以无限制扩增，其实PCR的循环次数一般以25～35次循环为宜，当反应超过35次循环时，PCR产物也不再增加。
5．
答案：
D
解析：
PCR反应所需要的引物是DNA或RNA；原料是四种脱氧核糖核苷酸；变性是在高温下进行的，所用Taq聚合酶的特点是耐高温，即在高温下不变性。
6．
答案：
B
解析：
DNA在80
℃以上才会变性，双螺旋结构能解开。
7．
答案：
A
解析：
本题考查DNA双链的结构与复制。通常将DNA的羟基末端称为3′端，磷酸基团末端称为5′端。
8．
答案：
D
解析：
PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3′端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝，其扩增产量y＝a·2n，a代表模板DNA量，y代表DNA片段扩增后的理论拷贝数，n代表循环次数；在扩增过程中，被扩增的是DNA序列，而不是氨基酸序列，因此D项错误。
9．
答案：
（1）B
（2）将细胞分散开来解除接触抑制
抗生素
（3）遗传物质相同
（4）PCR
大部分生物的遗传物质都是DNA，且都是双螺旋结构
DNA分子杂交
解析：
（1）对卵子的第一屏障打孔，才能精确剔除卵子细胞核，而这一屏障是透明带，故选：B．
（2）在培养皮肤纤维细胞和淋巴细胞时，需要用胰蛋白酶等处理，原因是将细胞分散解除接触性抑制．培养过程中通常在细胞培养液中添加一定量的抗生素，防止培养过程中的污染．
（3）通过克隆胚胎进而用其衍生而来的器官，来取代患者本人病变的器官，由于遗传基因（物质）完全相同，则避免免疫排异反应的发生．
（4）获得目的基因后可采用PCR技术进行扩增；大部分物种的基因能拼接在一起，原因是大部分生物的遗传物质都是DNA而且都是双螺旋结构；采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否成功导入植物细胞．
10．
答案：
C
解析：
要使PCR反应在体外的条件下顺利地进行，需要严格的控制温度，因为酶受温度影响
PAGE
2基础知识：PCR原理
1．
DNA合成方向是（　　）
A．从子链的3′端向5′端延伸
B．从引物的5′端开始延伸
C．从子链的5′端向3′端延伸
D．以上皆可
2．
下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是
(
)
A．利用DNA溶于酒精，而蛋白质不溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离
B．利用高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离
C．在溶有DNA的物质的量浓度为2
mol/L的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，取滤液进行以后的实验
D．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离
3．
酵母菌是一种真菌，与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究中常用的模式生物。果酒、面包的制作需要酵母菌，酵母菌可以用液体培养基(培养液)来培养，培养液中酵母菌种群的增长情况与发酵食品的制作有密切关系。
(1)土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到酵母菌。这一过程叫做________；为提高果酒的品质，发酵时常采用人工培养的纯净菌种。实验室中获取纯净菌种的方法有________。
(2)果汁发酵后是否有酒精产生，可以用________来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈________色。
(3)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物的作用是___________________________________________
__加入DNA聚合酶的作用是__________________________________________________。
(4)酵母细胞固定化可大大提高生产效率。固定酵母细胞时首先需要将干酵母放入
________中活化，若制得的凝胶珠颜色过浅，可能是因为___________________________
_________________________________________________________________________。
4．
有关PCR的描述下列哪项不确切（　　）
A．PCR是pilymerase
chain
rdaction三个单词的首字母缩写
B．1993年，美国生物化学家穆里斯因发明PCR技术而获得度．诺贝尔化学奖
C．PCR技术的突出优点是快速、高效、灵活和易于操作
D．PCR实验的原理十分复杂，操作也十分复杂
5．
DNA的复制需要引物，主要原因是（　　）
A．可加快DNA的复制速度
B．引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合
C．引物的5′端有助于DNA聚合酶的延伸DNA链
D．DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链
6．
PCR技术中，如何设计引物（　　）
A．PCR引物要根据需要扩增的目标DNA的碱基序列来设计
B．PCR引物要根据已知的DNA序列对应的RNA序列来设计
C．PCR引物要根据已知的DNA序列对应的tRNA的序列来设计
D．以上都不是正确方法
7．
变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏，双链解开，但共价键并未断裂。引起变性的因素很多，升高温度、过酸、过碱以及加入变性剂等都能造成核酸变性。PCR的反应过程中，引起变性的因素是（　　）
A．pH
过高
B．pH
过低
C．升高温度
D．加入酒精
8．
PCR技术利用了DNA的什么原理来控制DNA的解旋与结合(　　)
A．特异性
B．稳定性
C．热变性
D．多样性
9．
下列有关PCR技术的叙述不正确的是(　　)
A．聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术
B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C．PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，只需提供：DNA模板以及四种脱氧核苷酸
D．PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性和延伸
10．
利用PCR技术可获得目的基因，下列相关叙述错误的是（　　）
A．用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
B．PCR反应体系中需添加磷酸、脱氧核糖和含氮的碱基作为原料
C．PCR
体系中需要添加从受体细胞中提取的解旋酶和DNA聚合酶
D．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
DNA聚合酶能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。
2．
答案：
D
解析：
利用DNA不溶于酒精，而蛋白质溶于酒精，可将DNA和蛋白质分开。温度过高也会影响DNA的特性，如PCR技术。在物质的量浓度为2
mol/L的氯化钠溶液中DNA溶解度最大，但加入蒸馏水后，DNA溶解度降低，DNA析出，过滤后应取其黏稠物进行以后的实验。蛋白酶能分解蛋白质，而不能分解DNA。
3．
答案：
(1)酵母菌的分离　平板划线法和稀释涂布平板法
(2)重铬酸钾　灰绿　(3)使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸　催化DNA子链的合成　(4)蒸馏水
海藻酸钠浓度过低
解析：
从近几年的高考看，在有限的题量中，命题往往以一个中心事例为切入点，综合考查几项技术的应用。本题以酵母菌为主线，综合考查了酵母菌的分离培养、酒精发酵、PCR技术、酵母细胞固定化技术等内容。第(1)小题考查了微生物的分离技术和接种方法。在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长，目的是从众多微生物中分离出所需要的微生物。微生物的纯化培养(两种接种方法)是平板划线法和稀释涂布平板法。第(2)小题考查发酵后是否有酒精产生的鉴定方法。发酵后取样，可通过嗅味和品尝进行初步鉴定，用重铬酸钾检验酒精的存在，其基本原理是酒精可使重铬酸钾的浓硫酸溶液颜色由橙色变为灰绿色。第(3)小题考查PCR技术的基础知识。PCR技术中的引物可以是RNA或单链DNA分子片段，PCR技术需要设计两种引物，分别与模板DNA两条链相结合，使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。DNA聚合酶催化合成DNA子链。第(4)小题，在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。观察凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。
4．
答案：
D
解析：

5．
答案：
D
解析：
DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。
6．
答案：
A
解析：
DNA复制需要引物，引物是一小段DNA或RNA，能与DNA母链的一段碱基序列互补配对，故引物的设计要根据目标DNA的碱基序列来确定。
7．
答案：
C
解析：
各选项的条件均能导致DNA分子变性，但在PCR反应中，变性后还要进行复性和延伸等过程，过酸、过碱、酒精等会导致反应过程中的酶变性失活，使DNA扩增不能进行，因此，在PCR反应中，选用升高温度使DNA变性。
8．
答案：
C
解析：
DNA分子在80～100
℃的温度范围内变性，双链解开成单链，当温度慢慢降低时，又能重新结合形成双链。
9．
答案：
C
解析：
PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行
10．
答案：
A
解析：
A、用PCR方法扩增目的基因时，只要设计出目的基因的引物，接下来即可自动进行，因此不必知道基因的全部序列，A正确；
B．PCR反应体系中需添加脱氧核糖核苷酸作为原料，B错误；
C．PCR过程中是通过高温使氢键断裂的，因此不需要加入解旋酶，C错误；
D．PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性、延伸，而不是为了DNA聚合酶催化不同的反应，D错误．
故选：A．
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3基础知识：果醋制作的原理
1．
下列有关发酵食品加工中所用微生物的叙述错误的是
(
)
A．酵母菌可在酸性发酵液中大量生长繁殖
B．制作果醋时，短时间中断通氧会导致醋酸菌迅速死亡
C．制作腐乳所用的毛霉是一种耐高盐的微生物
D．要获得较高品质的发酵产品需控制好发酵所用的微生物数量
2．
在“果醋制作过程”中，获得较多的醋酸菌菌种的最简便方法是（　　）
A．从变酸的葡萄酒表面获得菌膜，再培养分离
B．不必人为加入菌种，在葡萄等水果表面本身就存在大量醋酸菌
C．从食醋中分离提取
D．从土壤中分离提取
3．
制果醋时，要适时通过充气口进行充气是因为(　　)
A．醋酸菌是好氧菌，将酒精变成醋酸时需要氧气的参与
B．酵母菌进行酒精发酵时需要O2
C．通气，防止发酵液霉变
D．防止发酵时产生的CO2气体过多而引起发酵瓶的爆裂
4．
下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是（　　）
A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同
B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒
C．变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落
D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件
5．
关于果醋制作过程中的叙述正确的是（　　）
A．打开发酵瓶是因为全过程需要通入氧气，排出二氧化碳
B．醋酸菌在糖源和氧气充足时，能将葡萄糖分解成乙醇和二氧化碳
C．当糖源不足时，醋酸菌可将酒精最终转变成醋酸
D．要使果酒变成果醋只需通入氧气，加入醋酸菌就可以了
6．
在下列哪些条件下，醋酸菌能把葡萄汁中的糖分解成醋酸（　　）
A．氧气、糖源都缺乏
B．氧气充足、糖源缺乏
C．氧气缺乏、糖源充足
D．氧气、糖源充足
7．
下列关于果酒制作过程的叙述中，正确的是(　　)
A．应先去除葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得彻底
B．使发酵装置的温度维持在20
℃左右最好
C．在发酵过程中，需从充气口不断通入空气
D．由于酵母菌的繁殖能力很强，不需要对所用的装置进行消毒处理
8．
下列哪种条件下,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸(　　)
A．氧气、糖源充足
B.氧气充足、缺少糖源
C．缺少氧气、糖源充足
D.氧气、糖源都缺少
9．
果酒是以新鲜水果或果汁为原料，经全部或部分发酵配制而成，酒精度在7%～18%的发酵酒。在果酒的基础上继续发酵可得到果醋。下列有关果酒和果醋制作的叙述正确的是（
）。
A．果酒和果醋的制作都是由酵母菌完成
B．制果醋的温度要比制果酒的温度高些
C．传统的葡萄酒制作一定需要人工接种菌种
D．葡萄汁装入发酵瓶时，要将瓶装满
10．
生产果醋用的乳酸菌等细菌都具有的特征是（
）
A．都是异养生物
B．仅在有水条件下繁殖
C．仅在有氧条件下生长
D．生存温度都超过80℃
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
毛霉不耐高盐，故在腐乳中利用盐来抑制微生物的生长。
2．
答案：
A
解析：
葡萄等水果表面虽然有醋酸菌，但是不能在短时间内大量获取，所以要用分离培养的方法。土壤中含有各种微生物，所以分离和培养纯化过程比较繁琐。食醋会经过灭菌后出厂，且食醋的pH不适于醋酸菌生长繁殖，其内几乎没有活的醋酸菌，变酸的葡萄酒表面是醋酸菌的菌膜，故可以通过培养得到大量的醋酸菌。
3．
答案：
A
解析：
醋酸菌是好氧菌，发酵需要氧气的参与。酵母菌是兼性厌氧菌，有氧时大量繁殖，无氧时发酵产生酒精。
4．
答案：
A
解析：
果酒的制作菌种是酵母菌，是兼性厌氧菌，制作果醋的醋酸菌是好氧菌。
5．
答案：
C
解析：
果醋制作时并不是打开发酵瓶，在装置上连有排气口和充气口；当氧气和糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸和二氧化碳；当糖源不足时，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，最终变成醋酸；果酒变果醋时菌种不同，温度也有差异。
6．
答案：
D
解析：
醋酸菌是好氧细菌，在发酵过程中需要有充足的氧气，而在糖源充足时，可把葡萄糖分解为醋酸，在没有葡萄糖而酒精存在的情况下，可以把酒精转化为醋酸。
7．
答案：
　B
解析：
　葡萄应先冲洗，使杂菌减少，再去除枝梗。酒精发酵的温度一般在18～25
℃，维持在20
℃左右最好。发酵过程中酵母菌进行无氧呼吸，不能通入空气。发酵前要对所用的装置进行消毒处理。
8．
答案：
A
解析：
醋酸菌是需氧型微生物,可以利用糖类或酒精作为营养物质并将其转化成醋酸,当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸,当糖源不足时,醋酸菌可以将酒精先变为乙醛,再变为醋酸
9．
答案：
B
10．
答案：
B
解析：
细菌的生长所必需的营养元素：碳源、氮源、无机盐、水生长因子，其中碳源、氮源、无机盐、生长因子因细菌种类的不同，所需的种类也不一样，而水是所有微生物生长共同所需要的物质。细菌按同化作用可分为自养型和异养型两种；按异化作用可分为需氧型和厌氧型。
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2实验——泡菜的制作
1．
泡菜制作过程中，许多乳酸菌产生大量乳酸，共同抑制其他菌的生长，乳酸积累过多，又会抑制乳酸菌自身的生长，以上体现出的生物关系依次是（　　）
A．种内互助、种内斗争、种间斗争
B．种内互助、种间斗争、种内斗争
C．种内斗争、种间斗争、种内互助
D．种间斗争、种内斗争、种内互助
2．
某人利用乳酸菌制作泡菜时由于操作不当，泡菜腐烂。下列原因中可能的是（　　）
①罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖
②罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
③罐口封闭不严，氧气抑制其他腐生菌的生长和繁殖
④罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖
A．①③　　　　　　
B．②④
C．②③
D．①④
3．
关于酵母菌的叙述，错误的是(　　)
A．酵母菌营异养生活
B．酵母菌无氧呼吸时能产生乳酸
C．酵母菌在有氧气存在时，能将C6H12O6分解成CO2和水
D．酵母菌不属细菌
4．
用重铬酸钾检验发酵液中是否有酒精生成，哪些操作是错误的(　　)
①先在试管中加入发酵液2mL，再滴加3滴重铬酸钾溶液　②先在试管中加入发酵液2mL，再加入3mol？L－1的H2SO4
3滴，摇匀，再滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴　③直接将2mL重铬酸钾倒入发酵液中　④用试管取2mL发酵液放在酒精灯上加热，待温度降至常温时，再往里面加入3滴3mol？L－1的H2SO4，摇匀后，再加入3滴常温下饱和的重铬酸钾溶液
A．①②③
B．①②④
C．①③④
D．②③④
5．
制果醋时，要适时通过充气口进行充气是因为(　　)
A．醋酸菌是好氧菌，将酒精变成醋酸需要有O2参与
B．酵母菌进行酒精发酵时需要氧气
C．通气，防止发酵液霉变
D．防止发酵产生CO2过多而引起发酵瓶爆裂
6．
泡菜不是什么时候都可以腌制,在东北至少要在立冬以后才可以,其原因是(　　)
A．冬天温度低,其他细菌不易大量繁殖
B．冬天原料丰富
C．冬天乳酸菌易生长
D．冬天的泡菜可长期保存
7．
以下操作不会引起泡菜变质的是(　　)
A．坛盖边沿的水槽中应注满水，并且要时常补充水槽中的水
B．腌制时温度过高，食盐量不足10%
C．腌制的时间过短
D．盐水入坛前不用煮沸，直接入坛
8．
在制备泡菜样品处理液时，对滤液起净化作用的是(　　)
A．氢氧化铝溶液
B．氢氧化钠溶液
C．氯化镉溶液
D．氯化钡溶液
9．
关于泡菜发酵的叙述，不正确的是（
）
A．泡菜发酵过程中所产生的亚硝酸盐有致癌性，摄入过多对身体会造成伤害
B．煮沸泡菜盐水的目的是除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌
C．制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型
D．泡菜腌制时间过长，食盐用量过低，温度过高，都容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加
10．
常见的果酒、果醋、泡菜和腐乳的制作都离不开微生物的作用，请结合微生物的特点及产品的制作过程，完成下列问题。
（1）在腐乳的制作过程中，起主要作用的微生物是
。微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的
，
可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
（2）苹果醋的制作过程中，利用了代谢类型为
的
（填生物名称）发酵作用，该过程需要控制的温度条件是
。
（3）腌制腐乳的卤汤中应含有
左右的酒精以抑制细菌的增殖。
（4）泡菜制作需要配置盐水，其中盐与水的质量比为
；在
条件下，亚硝酸盐与氨基苯磺酸反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成
色，与标准液进行目测比较，可以估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
泡菜腌制初期，乳酸菌和其他杂菌并存，数量相对较少，这时乳酸菌之间存在种内互助，以抑制杂菌的生长，而和其他杂菌的关系是种间斗争，但是到发酵后期，其他杂菌被杀灭，大量乳酸菌繁殖，由于营养物质和空间资源有限，所以乳酸菌之间又转化为种内斗争。
2．
答案：
B
解析：
由于乳酸菌是严格厌氧微生物，泡菜腐烂，说明被其他微生物污染，可判断罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖，而促进了异养需氧型腐生菌的生长繁殖，才使泡菜腐烂。
3．
答案：
B
解析：
　酵母菌是营异养生活的真菌，为真核生物，不属于细菌，酵母菌属兼性厌氧型生物，进行无氧呼吸时生成酒精和CO2。
4．
答案：
C
解析：
　检验是否有酒精生成，是用重铬酸钾在酸性条件下的显色反应来完成。过程为：先在试管中加入发酵液2mL，再加3mol？L－1的H2SO4
3滴，摇匀，最后滴加常温下饱和重铬酸钾溶液3滴，故②说法正确。
5．
答案：
A
解析：
　醋酸菌是严格好氧菌，短时间缺O2可能引起醋酸菌死亡，在缺少糖源时，醋酸菌把酒精最终氧化为醋酸。
6．
答案：
A
解析：
泡菜的制作过程中,很容易受其他厌氧菌污染,冬天温度低,其他细菌不易大量繁殖,泡菜不易腐败,质量好。
7．
答案：
A
解析：
向坛盖边沿的水槽中注满水，是为了阻止空气进入坛中，水不直接与发酵物接触，不会造成污染。
8．
答案：
A
解析：
氢氧化铝可作为吸附剂对滤液起净化作用。在制备泡菜样品处理液时，对滤液起净化作用的是净化作用
9．
答案：
D
解析：
试题分析：泡菜发酵过程中所产生的亚硝酸盐有致癌性，摄入过多对身体会造成伤害，A正确；煮沸泡菜盐水的目的是除去水中的氧气和杀灭盐水中的其他杂菌，有利于乳酸菌的无氧呼吸，B正确；制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型，C正确；泡菜腌制时间过长，食盐用量过低，温度过高，都容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量先升高后降低，D错误。
10．
答案：
（1）毛霉
肽和氨基酸
脂肪酶
（2）异养需氧型
醋酸菌
30-35℃
（3）12%
（4）1∶4
盐酸酸化
玫瑰红
解析：
（1）腐乳的制作利用的微生物是毛霉。蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，
脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。（2）苹果醋的制作利用的是醋酸菌，新陈代谢类型是异养需氧型。需要的温度范围是30-35℃。（3）腌制腐乳的卤汤中应含有12%
左右的酒精以抑制细菌的增殖。（4）泡菜制作的盐水中盐与水的质量比为1∶4，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与氨基苯磺酸反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色。
考点：本题考查利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用，意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
PAGE
3实验——果酒和果醋的发酵
1．
在发酵条件的控制中，错误的是（　　）
A．葡萄汁装入发酵瓶时，要留有约1/3的空间
B．要想一次得到较多的果酒，在葡萄汁装入发酵瓶时，要将瓶装满
C．制葡萄酒的过程中，除在适宜的条件下，时间应控制在10～12天左右
D．制葡萄醋的温度要比制葡萄酒的温度高些，但时间一般控制在7～8天左右
2．
果酒的制作离不开酵母菌，在配制酵母菌的培养基时，常添加一定浓度的葡萄糖液，如果葡萄糖浓度过高，反而会抑制酵母菌的生长，其原因最可能是（　　）
A．葡萄糖被合成了淀粉
B．酵母菌细胞失水
C．改变了培养液的pH
D．酵母菌发生了变异
3．
在家中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是（　　）
A．让发酵装置接受光照
B．给发酵装置适时排气
C．向发酵装置通入空气
D．将发酵装置放在45
℃处
4．
关于葡萄酒的制作，下列说法正确的是（　　）
A．用清水冲洗葡萄除去污物，应反复多次冲洗
B．葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/4的空间
C．装入葡萄汁后，应封闭发酵装置的充气口
D．制作葡萄酒的过程中，要将温度控制在18～25
℃，时间控制在7～8天左右
5．
“葡萄美酒夜光杯,欲饮琵琶马上催”,这句诗反映了我国古代就有利用微生物发酵技术生产葡萄酒的历史。利用不同微生物的发酵作用制作食品已经普及到现代食品工业的很多领域。根据下列材料分析回答有关问题。
材料一　苹果醋是现代社会出现的一种新兴的保健养生饮料,以苹果为原料发酵生产而成,苹果醋的大规模生产使果农的农产品有了更广阔的销路并且还提高了经济效益。
材料二　生产植物能源产品——酒精来替代汽油是新能源开发的趋势。利用微生物发酵技术把植物体内的淀粉、纤维素等发酵生产酒精,可以解决全球能源危机。
(1)将苹果榨汁后,在一系列酶的作用下,把果汁中的多糖分解为葡萄糖,然后葡萄糖在　　　菌作用下,将葡萄糖转化成乙醇。
(2)向经过酒精发酵后的果汁中加入醋酸菌,并且通入充足的　　　　　　,在醋酸菌的作用下把乙醇氧化为醋酸。
(3)在发酵过程中防止发酵液被污染的方法有:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(4)利用纤维素发酵生产酒精技术的关键是要分离培育出能分解纤维素的微生物,从众多的微生物中筛选纤维素分解菌的方法是　　　　　　　,所使用的培养基是　　　　　(固体/液体)培养基,培养基的唯一碳源是　　　　　　　　　。
(5)能高效分解纤维素的纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种组分:　　　　、　　　和葡萄糖苷酶,葡萄糖苷酶的作用是把纤维二糖分解成葡萄糖。
(6)在微生物发酵过程中,往往要进行微生物的培养,在培养过程中,要对培养皿等玻璃器皿进行灭菌,常用　　　灭菌法。
6．
下列有关现代生物技术的叙述中，正确的是(
)
A．运用固定化酶和固定化细胞进行生产时，都需要为其提供营养物质
B．果酒和果醋制作中利用的微生物，结构上主要差别在于有无核糖体
C．用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低
D．探究加酶洗衣粉的最适温度时，洗衣粉量、污渍的种类属于自变量
7．
果酒是以新鲜水果或果汁为原料，经全部或部分发酵配制而成，酒精度在7%～18%的发酵酒。在果酒的基础上继续发酵可得到果醋。下列有关果酒和果醋制作的叙述正确的是（　　）。
A．果酒和果醋的制作都是由酵母菌完成
B．制果醋的温度要比制果酒的温度高些
C．传统的葡萄酒制作一定需要人工接种菌种
D．葡萄汁装入发酵瓶时，要将瓶装满
8．
制作葡萄醋时，必须控制的发酵条件是(　　)
A．温度18～25
℃，适时通气
B．温度18～25
℃，隔绝空气
C．温度30～35
℃，隔绝空气
D．温度30～35
℃，适时通气
9．
下列对传统发酵技术的描述中错误的是(　　)
A．果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧微生物，在有氧条件下能大量繁殖
B．制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄汁中的糖分解为醋酸
C．多种微生物参与了腐乳的发酵，如青霉、毛霉、曲霉等，它们都是真核生物
D．乳酸菌是一种厌氧微生物，可以参与泡菜和酸奶的制作
10．
下面是家庭酿造甜酒的具体过程．先将米加热煮至七成熟，待冷却至30℃，加少许的水和一定量的“酒药”（实际上是酵母菌）与米饭混合后置于一瓷坛内，在米饭中央挖一个小洞，加盖后置于适当地方保温（20℃）12h即可．请从以下几个方面对发酵过程做一简单的分析：
（1）先将米煮一煮的目的主要是：　_________　．
（2）为什么要冷却后才能加入“酒药”？　_________　．
（3）在中央挖一个小洞的原因是：　_________　．
（4）发酵坛并没有完全密封，坛内无氧发酵的环境是如何形成的　_________　．
（5）家庭酿酒的关键是保温和放“酒药”，如果米量很多放的“酒药”太少，常常导致甜米酒变质而失败，其主要原因是：　_________　．
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
酵母菌发酵过程中会产生大量的气体，需要一定的空间，否则发酵液会外溢而引起污染。
2．答案：
B
解析：
本题要注意题干中的有效信息，外界葡萄糖浓度过高。酵母菌处在溶液浓度较高的外界环境中时会发生细胞失水进而影响其新陈代谢。
3．
答案：
B
解析：
在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装置不需要接受光照，也不能通入空气，发酵过程中会产生CO2气体，所以要适时给装置排气；酒精发酵时一般将温度控制在18～25
℃。
4．
答案：
C
解析：
在冲洗葡萄除去污物时不能反复冲洗，以免造附着在葡萄上的酵母菌菌种的流失；葡萄汁装瓶时要留有大约1/3的空间；装入葡萄汁后应封闭发酵装置的充气口，使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精；酒精发酵过程中，时间一般控制在10～12天左右。
5．
答案：
(1)酵母
(2)无菌空气
(3)榨汁机要清洗干净,并晾干;发酵瓶要清洗干净,用体积分数为70%的酒精消毒
(4)刚果红染色法　固体　纤维素
(5)C1酶　Cx酶
(6)干热
总结归纳:生物技术实践包括微生物的利用、酶的应用、生物技术在食品加工及其他方面的应用三个方面。主要考查综合运用能力,即理论联系实际,综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。因此要从三个方面复习:(1)微生物的发酵过程和代谢产物;(2)不同微生物的代谢方式及对环境的不同要求;(3)微生物的培养和培养基的成分、类型及接种方法。
解析：
生产酒精时用酵母菌发酵,生产醋酸时用醋酸菌发酵,醋酸菌是需氧型微生物,必须不断充入无菌空气,保证醋酸菌的增殖和代谢。分离分解纤维素菌使用的是固体选择培养基,以纤维素为唯一碳源,利用刚果红染色法进行鉴定和筛选。对玻璃器皿和金属用具灭菌,常用干热灭菌法。
6．
答案：
C
解析：
利用固定化细胞进行生产时，需要提供营养物质，而固定化酶不需要，故A错；制作果醋使用的微生物是醋酸菌，制作果酒使用的微生物是酵母菌，二者在结构上最主要的差别是有无核膜包被的细胞核，二者都有核糖体，故B错；在统计菌落时，由于菌落可能重合等因素，因此统计的菌落数量比实际的要少，故C正确；探究加酶洗衣粉的最适温度的实验中，温度是自变量，故D错。
7．
答案：
B
解析：
果酒的制作离不开酵母菌，果醋的制作由醋酸菌完成。传统的葡萄酒制作中起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间。
8．
答案：
D
解析：
醋酸菌的最适生长温度是30～35
℃，并且是需氧的细菌，所以要不断适时地进行通气。
9．
答案：
B
解析：
制作果酒利用的是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，在发酵初期通入无菌空气可以使酵母菌进行有氧呼吸并大量繁殖；醋酸菌是好氧微生物，在果醋发酵过程中必须持续通入无菌空气；参与腐乳发酵的青霉、毛霉、曲霉等都属于真核生物；泡菜、酸奶制作过程中使用的乳酸菌
是一种厌氧细菌。
10．答案：

（1）为了杀灭其他杂菌
（2）温度太高会抑制或杀死酵母菌
（3）有利于透气，可保证酵母菌在开始生长时有足够的氧气，短时间内大量增殖
（4）有氧呼吸消耗了大量氧气，同时产生一部分水，容器中发酵液增多了，淹没了原液，形成无氧环境
（5）加的“酒药”少，造成酵母菌起始密度过低，不能迅速繁殖形成生长优势，往往导致杂菌污染
解析：
（1）先将米煮一煮的目的是为了杀灭其他杂菌，防止杂菌污染．
（2）温度太高会抑制或杀死酵母菌，因此要冷却后才能加入“酒药”．
（3）在中央挖一个小洞有利于透气，这样可保证酵母菌在开始生长时有足够的氧气，短时间内大量增殖．
（4）有氧呼吸消耗了大量氧气，同时产生一部分水，容器中发酵液增多了，淹没了原液，这样形成发酵坛中的无氧环境．
（5）“酒药”实际上是酵母菌，家庭酿酒的关键是保温和放“酒药”，如果米量很多放的“酒药”太少，常常导致甜米酒变质而失败，其主要原因是：加的“酒药”少，造成酵母菌起始密度过低，不能迅速繁殖形成生长优势，往往导致杂菌污染．
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4实验——腐乳的制作
1．
下列防止发酵液被污染的叙述中不合适的是
……（　　）
A．榨汁机要清洗干净，晾干后使用
B．发酵瓶要清洗干净，用体积分数为95%的酒精消毒
C．装入葡萄汁后要密闭封口，放气时不能完全打开，暴露于空气中
D．发酵装置的排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，并且胶管口向下放置
2．
在制作腐乳的过程中，需要加一些盐，下列哪项不是盐的作用（　　）
A．析出豆腐中的水分，使豆腐变硬
B．抑制微生物的生长
C．调制腐乳的口味
D．主要增加腐乳的重量，获取更多的利润
3．
在配制卤汤时，酒是不可缺少的，对酒量的要求是（　　）
A．30%
B.20%
C.15%
D.12%
4．
豆腐乳的品种很多,红方腐乳因加入红曲而呈红色,味厚醇香;糟方腐乳加入酒糟而糟香扑鼻;青方腐乳不加辅料,用豆腐本身渗出的水加盐腌制而成？豆腐乳的品种还会因豆腐的含水量？酒的种类和用量等因素而不同？就腐乳制作回答下列问题:
(1)腐乳制作有多种微生物参与,其中起主要作用的是________？
(2)豆腐发酵主要利用了微生物产生的________,通过发酵,豆腐中营养物质的种类________,且更易于消化和吸收？
(3)在腐乳制作过程中,抑制微生物的物质有盐？________？________等？
(4)含水量为________左右的豆腐适于制作腐乳,若你完成了腐乳制作,可以从________等方面评价腐乳的质量？
5．
在腐乳发酵过程中具有防腐杀菌作用的是（　　）
①花椒　②食盐　③酒　④茴香　⑤红曲霉红素
A．①②⑤
B．③④⑤
C．②③④⑤
D．①②③④
6．
关于腐乳的制作，正确的说法是（　　）
A．乳酸菌是参与豆腐发酵的主要微生物
B．传统工艺生产豆腐乳一般在夏天进行
C．现代食品企业是在无菌条件下接种乳酸菌生产腐乳
D．加盐腌制可避免豆腐变质
7．
卤汤中香辛料的作用是(　　)
①调味　②防腐　③杀菌
A．①②
B．①③
C．②③
D．①②③
8．
豆腐坯用食盐腌制,其作用是(　　)
①析出豆腐中的水分
②给腐乳以必要的咸味
③防止毛霉继续生长和杂菌繁殖
④浸提毛霉菌丝中的蛋白酶
A．①②③　
B.②③④
C.①③④
D.①②③④
9．
以下关于腐乳制作过程中的操作，错误的是(　　)
A．先将豆腐切成块放在消毒的笼屉中，保持温度在15～18
℃
B．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口表面的盐要铺厚一些
C．卤汤中酒的含量一般控制在12%左右
D．卤汤中香辛料越多，口味越好
10．
生活中有许多微生物技术的应用，请分析回答：
（1）在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是
。红色因加入
了而呈深红色，味厚醇香。
（2）在腐乳制作时，要加盐腌制，其目的是
。要制作出色香味俱全的腐乳，关键在于
的配制。
（3）泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是
，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用
法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成
色化合物。样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是_____________。
（4）在果酒、果醋的制作过程中葡萄糖汁装入发酵瓶时，要留出大约
的空间。制作过程需严格控制温度，其中果醋制作的温度是
。
（5）食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：
第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成葡萄糖。
第二步：用
菌将葡萄糖转化成乙醇，可以通过________
（试剂）检测，发酵过程中，发酵瓶不应完全密闭的主要原是
。
第三步：用
菌将乙醇转化成乙酸，这一过程
氧气。醋酸菌将乙醇变为醋酸的反应式
。
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
生物发酵过程中所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（也叫杂菌），一旦污染将导致产量下降，甚至得不到产品。因此必须做好消毒工作。消毒一般是所有器具清洗后，用体积分数为70%的酒精消毒（因为70%的酒精杀菌效果最好），以防止器材上的杂菌进入发酵液；发酵瓶装入葡萄汁产生酒精时要密封充气口，防止空气中杂菌进入；排气管弯曲细长管口向下，也是为防止空气中的杂菌进入；醋酸发酵，向发酵瓶内充气时，要充入无菌空气。
2．
答案：
D
解析：
在制作腐乳的过程中，加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中还可以防止过早酥烂，同时盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质，还可调制腐乳的口味。
3．
答案：
D
解析：
卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。
4．
答案：
(1)毛霉
(2)蛋白酶等酶类
增多
(3)酒
香辛料
(4)70%
色泽？口味？块形
解析：
腐乳制作有多种微生物参与,起主要作用的是毛霉？毛霉等微生物产生的蛋白酶等将豆腐中的营养成分分解成小分子物质,更易于消化和吸收？在腐乳制作过程中,抑制微生物的物质有盐？酒？香辛料等？含水量为70%左右的豆腐适于制作腐乳,完成了腐乳制作,可以从色？香？味？形等方面评价腐乳的质量？
5．
答案：
D
解析：
腐乳制作过程需要多种防腐杀菌的物质，多采用天然食品添加剂，如香辛料、料酒等，而不用抗生素类。
6．
答案：
D
解析：
毛霉是参与豆腐发酵的主要微生物；现代食品企业是在无菌条件下接种毛霉生产豆腐乳的；毛霉生长的温度应该控制在20
℃，而夏天的温度远高于20
℃，故传统工艺生产豆腐乳一般在夏天是错误的。
7．
答案：
　D
解析：
　卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。酒可以抑制微生物的生长，同时使腐乳具有独特香味；香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。
8．
答案：
D
解析：
豆腐坯用食盐腌制可以析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬,在后期制作过程中不会过早酥烂。同时,盐能抑制微生物生长,避免豆腐块腐败变质;盐也能够浸提毛霉菌丝中的蛋白酶,有利于腌制过程中的发酵;盐还能给腐乳以必要的咸味。
9．
答案：
D
解析：
香辛料可以调制腐乳的味道，也具有防腐杀菌的作用。可根据自己的口味来配制卤汤，但并不是香辛料越多，口味就越好。
10．
答案：
（1）毛霉
红曲
（2）析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质
卤汤
（3）乳酸
比色
玫瑰红
作为对照
（4）1/3
30～35℃
（5）酵母
重铬酸钾
发酵过程中会产生大量CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂
醋酸杆菌
需要消耗
反应式：2C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O
解析：
试题分析：（1）腐乳制作过程中起主要作用的微生物是毛霉，它具有发达的白色菌丝。其中有时出现红色是因为加入了红曲的缘故。（2）在腐乳制作时，加盐的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。（3）泡菜制作是利用乳酸菌的发酵，在发酵的过程中，会产生大量的乳酸和少量的亚硝酸盐。在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应的生成物再与盐酸萘乙二胺反应生成紫红色物质，然后通过比色，可大致估算出亚硝酸盐的含量。为了实验的科学性和严谨性，要用蒸馏水做对照试验。（4）果酒制作是利用了酵母菌的无氧呼吸产生酒精和二氧化碳的原理，由于在发酵过程中会产生二氧化碳，因此在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间。果醋制作是利用了醋酸菌的有氧呼吸，其适宜生存的温度为30～35℃。（5）大米的主要成分是淀粉,在淀粉酶催化作用下,分解成糊精(主要含麦芽糖等),这一过程可用碘液(或KI—I2溶液)来检测反应的情况。酵母菌将葡萄糖转化成乙醇的过程中产生CO2,随反应的进行发酵瓶中CO2逐渐增多,瓶内压力升高,可能引起爆裂,所以不要完全密闭。醋酸菌是好氧细菌,在将乙醇转化成乙酸的过程中消耗氧气。泡菜发酵过程离不开乳酸菌,能产生乳酸和少量的亚硝酸,亚硝酸盐总量达到0.3~0.5
g时就会引起人中毒,必须对泡菜中亚硝酸盐含量进行测定。其测定方法可用比色法,为提高可信度、准确度应设置对照实验。
PAGE
3基础知识：PCR的反应过程
1．
下列对PCR过程中“温度的控制”的叙述中不正确的是（　　）
A．PCR反应需要高温，是为了确保模板是单链
B．延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度
C．要用耐高温的DNA聚合酶
D．需要耐高温的解旋酶
2．
洗涤红细胞时，离心所采用的方法是(　　)
A．低速长时间离心
B．低速短时间离心
C．高速长时间离心
D．高速短时间离心
3．
下列各项中，一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是(　　)
A．层析柱高
B．层析柱的直径
C．缓冲溶液
D．样品的分布
4．
聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95
℃下使模板DNA变性、解链→55
℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72
℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是(　　)
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高
5．
下列关于PCR技术的描述，错误的是（
）
A．以DNA复制为基础而建立起来的技术
B．利用PCR技术可完全无误的扩增基因
C．反应体系需要模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐热DNA聚合酶和缓冲溶液
D．以变性、复性和延伸为一个周期
6．
DNA的双螺旋结构解开的温度范围是（　　）。
A．10～20
℃
B．80～100
℃
C．20～30
℃
D．40～60
℃
7．
在PCR扩增的实验中，加入一种提取物(一种模板DNA片段)，但实验得到的产物中，却有两种DNA。其原因可能是(　　)
A．基因突变
B．Taq聚合酶发生变异
C．基因污染
D．温度过高
8．
PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，下列关于它调控不同温度的目的叙述错误的是(　　)
A．94
°C，使DNA分子变性，解开螺旋
B．55
°C，引物与作为模板的单链DNA特定部位相互配对、结合
C．72
°C，使DNA分子开始复制，延伸
D．72
°C，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性
9．
PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，其基本原理和过程与细胞内DNA的复制类似．下列关于两者共同点的叙述，不正确的是（　　）
①边解旋边复制
②遵循碱基互补配对原则
③需要引物
④过程可分为变性、复性、延伸等步骤．
A．①⑦
B．⑦③
C．③④
D．①④
10．
PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为以下符合在体外进行PCR反应条件的一组是（
）
①
稳定的缓冲液环境
②
DNA模板
③
合成引物
④
四种脱氧核苷酸
⑤
DNA聚合酶
⑥
DNA解旋酶
⑦
限制性核酸内切酶
⑧
温控设备
A．①②③④⑤⑥
B．①②③④⑤⑥⑦⑧
C．③④⑤⑥⑧
D．①②③④⑤⑧
参考答案：
1．
答案：
D
解析：
PCR是体外DNA扩增技术，DNA双链的解开不需要解旋酶，而是靠高温使其变性解体。复性前，在耐高温的Taq
DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA，因此延伸的温度要大于复性温度但小于变性温度。
2．
答案：
　B
解析：
　洗涤红细胞时，转速要低，时间要短，否则白细胞会与之一起沉淀，达不到分离目的。
3．
答案：
　B
解析：
　分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱必须有适宜的高度，分离度与柱高相关。样品的分布也影响分离度，缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷，因此也影响分离度。只有层析柱的直径一般不会影响分离度。
4．
答案：
C
解析：
变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现;复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成;延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种脱氧核糖核苷酸;PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高
5．
答案：
B
解析：
利用PCR技术也可能会出现扩增的基因出现错误。故选B
6．
答案：
B
解析：
蛋白质大多不能忍受60～80
℃的高温，而DNA在80
℃以上才会变性。
7．
答案：
C
解析：
实验中得到两种DNA的原因可能是靶细胞基因污染造成的，所以在实验中，必须做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸头等，尽量避免基因污染。
8．
答案：
D
解析：
PCR利用DNA热变性的原理，当温度上升到94
°C时，双链DNA解旋为单链，A项正确；当温度下降到40～60
°C左右时，两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合，B项正确；当温度上升到72
℃左右时，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，从而实现DNA延伸，故C正确，D错误。
9．
答案：
C
解析：
解：①PCR反应和体内DNA复制都是边解旋边复制，故①正确；
②PCR反应和体内DNA复制都遵循碱基互补配对原则，故②正确；
③PCR反应需要引物，但体内DNA复制不需要引物，故③错误；
④PCR过程可分为变性、复性、延伸等步骤，而体内DNA复制没有这些步骤，故④错误．
故选C．
10．
答案：
D
解析：
试题分析：在PCR技术中，需要的条件有模板、引物、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶，此外还需要适宜的温度和pH，故D正确。
考点：本题主要考查PCR的过程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
PAGE
2实验——腐乳的制作
1．
因豆腐_________的不同、______的不同以及装罐时加入______的的不同，可以制成近百种不同风味的腐乳。
2．
下面关行腐乳制作过程的说法正确的是（　　）
A．制作腐乳时只有毛霉发挥作用
B．豆腐的表面长出青色物质则标志腐乳制作完成
C．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与
D．制作腐乳时加盐是为了促进毛霉的生长
3．
豆腐长出了毛霉之后，下一步要加盐腌制，其中不属于加盐作用的是（　　）
A．调味
B．可使豆腐析出水分，豆腐块变硬
C．促进毛霉的继续生长
D．抑制微生物的生长，避免豆腐变质
4．
市售腐乳有时口感不好，豆腐较硬，产生此现象的原因不包括（　　）
A．豆腐块的含水量太低
B．发酵时间太长
C．调味品加入量不足等
D．菌种不纯、菌种变异、菌种老化等
5．
腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒的目的是（　　）
①防腐　②与有机酸结合形成酯　③利于后期发酵
④满足饮酒需要
A．①②③④
B．①③④
C．②③④
D．①②③
6．
下面是一则关于腐乳制作方法的传说故事，阅读后回答下面问题。
相传，清康熙八年(公元1669年)，安徽省一进京举人王致和，京考未中，为了生存和准备下一次的考试，便做起了卖豆腐的生意。一天，他发现没卖出的豆腐长了白毛，深感苦恼，但又舍不得丢弃，便将豆腐装入坛内，撒上许多盐腌了，然后密封起来。他继续苦读，到了秋末他才想起此事。打开坛子，一股臭味散发出来，豆腐也变成了青色。他试着尝了一块，没想到“闻着臭，吃着香”。街坊邻居们品尝后也很爱吃。于是，王致和开始专营臭豆腐和酱豆腐的生意。
(1)你能利用所学生物学知识，解释豆腐长白毛的原因吗？
______________________________________________________。
(2)王致和把豆腐用盐腌起来起到什么作用？
___________________________________________________。
(3)你能总结王致和做腐乳的方法吗？与传统方法相比，他缺少了什么环节？
_____________________________________________________。
(4)腐乳“闻着臭，吃着香”，试解释其原因。
_____________________________________________________。
7．
“闻着臭，吃着香”的腐乳是（　　）。
A．白方腐乳
B．青方腐乳
C．红方腐乳
D．糟方腐乳
8．
在制果酒、果醋、泡菜、腐乳时，发酵过程中对氧气的需求分别是（
）
A．无氧、有氧、无氧、有氧
B．有氧、无氧、无氧、有氧
C．无氧、有氧、有氧、无氧
D．兼氧、无氧、有氧、无氧
9．
现代科学研究表明，多种微生物参与了腐乳的发酵，其中起主要作用的是（　　）
A．青霉
B．曲霉
C．毛霉
D．根霉
10．变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面长的一层膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们分别是（
）
A．醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝
B．醋酸菌、毛霉菌、毛霉菌丝
C．醋酸菌、酵母菌、毛霉菌
D．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
参考答案：
1．
答案：
含水量　发酵条件　辅料
解析：
豆腐中的含水量、发酵条件和辅料等因素都会影响腐乳的风味。
2．
答案：
C
解析：
腐乳的制作是多种微生物共同作用的结果；豆腐的表面长出青色物质仅是制作腐乳的第一步，还需要加盐腌制、配制卤汤等；加盐一方面有利于析出水分，另一方面可以抑制微生物的生长；毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成多肽和氨基酸。
3．
答案：
C
解析：
加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
4．
答案：
B
解析：
发酵时间长，蛋白质水解彻底，腐乳较软。
5．
答案：
D
解析：
腐乳酿造后期发酵中添加适量的酒可防止杂菌污染，同时由于乙醇可与有机酸结合形成酯，可赋予腐乳风味。
6．
答案：
　(1)空气中毛霉孢子落到豆腐上迅速生长形成发达的白色菌丝。
(2)高浓度的盐水能析出豆腐中的水分，使豆腐变硬，不会过早酥烂；盐水还能抑制微生物的生长，防止腐败变质；盐还是调味剂，增加腐乳的风味。
(3)豆腐上长毛→加盐腌制→密封腌制；缺少了加卤汤的环节。
(4)腐乳是经多种微生物协同作用的产物，香味来自蛋白质分解产生的多肽、氨基酸和脂肪分解产生的脂肪酸及发酵产生的酒精和微生物代谢产生的有芳香气味的酯。臭味来自细菌进行发酵产生的硫化物的浓烈臭气。
解析：
　豆腐长白毛是空气中毛霉等利用豆腐中有机营养进行大量繁殖的结果，加入盐，可抑制微生物生长繁殖。之所以“闻着臭，吃着香”，是多种微生物发酵产生多种不同物质而导致的。
7．
答案：
B
解析：
青方因不加辅料，用豆腐本身渗出的水加盐腌制而成，绵软油滑，异臭奇香。
8．
答案：
A
解析：
试题分析：制作果酒时利用酵母菌的厌氧呼吸产生酒精，制作果醋时，利用醋酸杆菌的有氧呼吸产生醋酸，制作泡菜时利用乳酸菌的无氧呼吸，制作腐乳时利用毛霉菌的有氧呼吸。
9．
答案：
C
解析：
腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收．
故选：C．
点评：
本题主要考查腐乳制作过程中的菌种，意在强化学生的识记与理解．
10．
答案：
C
解析：
试题分析：变酸的酒表面的膜是由于酒的上方有氧气,醋酸菌利用氧气将酒精氧化成醋酸,
自身得以繁殖形成酒表面的一层膜；泡菜坛表面的膜是由于酵母菌进行有氧呼吸繁殖形成的，并通过呼吸将坛中的氧气耗尽，有利于乳酸菌的无氧发酵；腐乳是利用毛霉产生的蛋白酶、脂肪酶等将豆腐中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收的物质，毛霉在生长过程中，菌丝伸长形成菌膜。故选C。
考点：本题考查微生物利用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
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2基础知识：腐乳制作的原理
1．
酒精发酵时应控制的温度为（　　）
A．10
℃左右
B.10
℃以下
C．30～35
℃
D.18～25
℃
2．
以下四种微生物都参与豆腐的发酵，从代谢类型上考虑下列选项与其他三项有明显区别的是（　　）
A．青霉
B．酵母菌
C．曲霉
D．毛霉
3．
与细菌、酵母菌、根霉、玉米四种生物的生殖方式相对应的是（　　）
A．分裂生殖、出芽生殖、孢子生殖、卵式生殖
B．分裂生殖、孢子生殖、出芽生殖、卵式生殖
C．出芽生殖、分裂生殖、孢子生殖、营养生殖
D．孢子生殖、出芽生殖、卵式生殖、营养生殖
4．
在“果醋制作过程”中，获得较多醋酸菌菌种的最简便方法是（
）
A．从变酸酒表面的菌膜中分离提取
B．从葡萄等水果表面分离提取
C．从家用食醋中分离提取
D．从酸性土壤中分离提取
5．
吃腐乳时，外层有一层致密的皮，这层“皮”是由什么形成的
A．毛霉白色菌丝上的孢子囊
B．毛霉白色菌丝
C．毛霉分泌物
D．豆腐块表面失水后变硬
6．
在果酒、果醋和腐乳制作过程中，都要防止微生物污染，下列有关叙述正确的是(　　)
A．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入
B．腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的酒以抑制细菌的增殖
C．利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌
D．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些
7．
腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品。下图是腐乳制作的流程示意图：
让豆腐上长出毛霉―→加盐腌制―→加腐乳浸液装瓶―→密封腌制
(1)现代科学研究表明，许多种微生物参与了豆腐的发酵，比如青霉、曲霉、
和
等。
其中起主要作用的是
，它是一种
状真菌，分布广泛，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上。
(2)腐乳制作的原理是
。
(3)传统的制作过程中，豆腐块上生长的毛霉来自
。而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以
。
(4)加盐的作用是
和
。
(5)腐乳浸液是由酒及各种香辛料配制而成的，腐乳浸液中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等。加料酒的作用是
和
。
8．
下表是关于四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，描述正确的一组生物是(　　)

硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
能源
氧化NH3
分解乳酸
固定N2
利用光能
碳源
CO2
糖类
糖类
CO2
氮源
NH3
N2
N2
NO
代谢类型
自养需氧型
异养厌氧型
异养需氧型
自养需氧型
A.硝化细菌与乳酸菌　　　
B．乳酸菌与根瘤菌
C．根瘤菌与衣藻
D．硝化细菌与衣藻
9．
下列关于腐乳制作过程中后期发酵的叙述，不正确的是（　　）
A．后期发酵中腐乳风味形成与蛋白质的降解密切相关
B．后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程
C．盐的用量、酒的种类和用量、温度等均影响后期发酵
D．前期发酵过程中毛霉的生长情况对后期发酵无直接影响
10．
下列关于腐乳制作过程相关的操作，错误的是（
）
A．在腐乳制作过程中要有能产生蛋白酶的微生物参与
B．豆腐块装瓶时，为了避免影响口味，逐层加盐量应大致相等
C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长
D．装瓶时，要将瓶口通过酒精灯火焰，迅速用胶条密封保存
参考答案：
1．
答案：
D
解析：
不同生物发酵时需要不同的条件，只有满足它们的条件才能正常生活，酒精发酵用的是酵母菌，它的最适温度在18～25
℃。
2．
答案：
B
解析：
四种微生物全为真核生物，同化作用类型都为异养型，不同的是酵母菌的异化作用类型是兼性厌氧型，而其他三项全为需氧型。
3．
答案：
A
解析：
该题属于识记水平。分裂生殖又叫裂殖，是由一个母体分裂成两个子体的生殖方式。细菌通常进行这种生殖方式；酵母菌在环境条件(温度、养料等)良好时，进行出芽生殖；根霉进行孢子生殖；而玉米属于高等(被子)植物，具有双受精现象，属于有性生殖中的卵式生殖。
4．
答案：
A
5．
答案：
B
6．
答案：
B
解析：
醋酸菌是好氧细菌，发酵时需要通入无菌空气；利用自然菌种发酵时利用的就是葡萄汁中的酵母菌，高压灭菌会杀死酵母菌；腐乳制作过程中，装瓶时靠近瓶口部分的盐要铺厚一些。
7．
答案：
(1)酵母菌　毛霉　毛霉　丝
(2)毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸
(3)空气中的毛霉孢子　避免其他菌种的污染，保证产品的质量
(4)析出豆腐中的水分，使豆腐变硬　抑制微生物的生长，避免豆腐腐败变质
(5)抑制其他微生物的生长　使腐乳具有独特的香味
解析：
腐乳制作的原理是：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加盐和加酒要注意控制用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长。
8．
答案：
D
解析：
乳酸菌的能源主要是糖类，且乳酸菌不能以N2作为氮源；根瘤菌能固定N2，以N2作为氮源，但不能从固氮过程获得能源，其能源应为糖类。
9．
答案：
D
解析：
解：A、后期发酵中蛋白酶将蛋白质分解成氨基酸，脂肪酶将脂肪水解成甘油和脂肪酸；故A正确．
B．后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程，加入配料后生成腐乳的香气；故B正确．
C．盐的用量适度，可以使得腐乳变硬，后期制作不会过早酥烂，而且抑制杂菌生长；酒能抑制杂菌生长，而且使得腐乳具有独特的香味；故C正确．
D．前期发酵过程中毛霉的生长情况可以形成腐乳的体，而且毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶，有利于后期发酵；故D错误．
故选D．
10．
答案：
B
解析：
试题分析：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成肽和氨基酸，故A正确；豆腐块装瓶时，应该逐层加盐，并且随着层数的加高而增加盐量，故B错误；加盐和加酒都能抑制微生物生长，故C正确；装瓶时为避免杂菌污染，应该将瓶口通过酒精灯火焰，迅速用胶条密封保存，故D正确。
PAGE
2实验——泡菜的制作
1．
下列有关泡菜制作过程的叙述，不正确的是(　　)。
A．按照清水与盐的质量比为4∶1的比例配制盐水
B．按照清水与盐的质量比为5∶1的比例配制盐水
C．盐水入坛前要煮沸、冷却，以防止污染
D．在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内的无氧环境
2．
变酸的酒表面长的一层膜和泡菜坛内长的一层白膜分别是由哪种菌的繁殖造成的（　　）
A．醋酸菌、酵母菌
B．酵母菌、毛霉
C．醋酸菌、乳酸细菌
D．酵母菌、醋酸菌
3．
下列关于醋酸菌的叙述，正确的是(　　)
A．醋酸菌为严格有氧呼吸
B．醋酸菌有氧、无氧均能生存
C．醋酸菌能形成芽孢
D．醋酸菌能将淀粉分解为醋酸
4．
为了使测定亚硝酸盐含量准确性高，关键是(　　)
A．样品处理
B．标准显色液制备
C．比色
D．泡菜的选择
5．
下列操作不会引起泡菜污染的是(　　)
A．坛盖边沿的水槽应注满水，并且要时常补充水槽中的水
B．腌制时温度过高，食盐量不足10%
C．腌制的时间过短
D．盐水入坛前未煮沸，直接入坛
6．
含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是(　　)
A．抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长
B．抗生素呈碱性，会与乳酸发生中和反应
C．抗生素能够抑制酵母菌的生长
D．抗生素在酸性环境中会被分解破坏
7．
将接种有乳酸菌的4份100mL的牛奶分别装在100mL、200mL、300mL和400mL的烧瓶内，将瓶口密封，置于适宜温度下培养，24h后，产生乳酸最多的是(　　)
A．100mL
B．200mL
C．300mL
D．400mL
8．
探究课题：泡菜制作过程中，乳酸在不同温度下的生成量
探究过程：某学生把甘蓝切丝后制作泡菜，为了探究甘蓝在不同的温度下经过3天发酵后所生成的乳酸量，在第4天检测实验结果，如表：
温度
16
℃
26
℃
31
℃
35
℃
43
℃
乳酸含量
0.81%
1.04%
1.20%
1.12%
0.95%
(1)分析资料，你可以得到什么结论？________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)在制作泡菜时，乳酸含量大致在0.8%左右时风味最好，此时维生素C的保存率也较高，结合以上材料，你在制作泡菜时应该注意什么？________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
9．
制作泡菜时泡菜坛子必须密封，其根本原因是（　　）
A．
防止产生的乳酸挥发　　　　　　　
B.
防止水分过度蒸发
C．
防止氧气进入坛内　　　　　　
　　D.
防止坛内蔬菜萎蔫
10．
回答下列有关微生物的问题：
（1）19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成该现象的生物是
　
。腐乳外部有一层致密的皮，这是
　　　
的匍匐菌丝形成的。制作泡菜时，有时坛内会长一层白膜，这是
繁殖形成的。
（2）培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，除此之外，还需要满足微生物生长对pH、
及氧气的需求，例如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素。
（3）微生物的接种方法很多，如平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种和穿刺接种等方法，虽然这些技术的操作方法各不相同，但是其核心都是要
，保证培养物的纯度。由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的
，就是菌落。
（4）从土壤中分离出分解尿素的细菌之后，要对其进行进一步的鉴定，要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入
，如果指示剂变
　
，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
（5）灭菌是用
杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。对培养皿灭菌常用的方法是
。在进行平板划线时，划线操作结束后，
（需要或不需要）灼烧接种环。
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
　B
2．
答案：
A
解析：
变酸的酒表面长的一层膜是醋酸菌的繁殖形成的；泡菜坛内长的一层白膜是酵母菌的繁殖形成的。
3．
答案：
A
解析：
　醋酸菌属严格有氧呼吸，当O2不足或缺乏时，会影响其生存；醋酸菌发酵时将酒精转化为醋酸(缺少糖源)，或将葡萄糖分解成醋酸(糖源充足)。
4．
答案：
　B
解析：
　亚硝酸盐含量是通过与标准显色液进行目测而估算出来的，故标准显色液的制备是得出正确结果的前提。
5．
答案：
　A
解析：
　在泡菜的腌制过程中，要注意控制腌制时间，温度和食盐用量。食盐用量不足10%，腌制时间过短、温度过高及盐水入坛前没有煮沸均会引起细菌大量繁殖，亚硝酸含量升高。
6．
答案：
　A
解析：
　乳酸菌为细菌，对抗生素敏感，如生活的环境中有抗生素，乳酸菌发酵不能进行，而酸奶制作过程中起作用的是乳酸菌。
7．
答案：
　A
解析：
　乳酸菌为厌氧菌，在O2存在时会抑制乳酸菌的生长繁殖及发酵作用，A不含氧气，故产生乳酸多。
8．
答案：
(1)从表中数据分析可得知，甘蓝在31
℃时所生成的乳酸量最多，低于或者高于这个温度所生成的乳酸量都少一些　(2)注意把温度控制在16
℃左右为宜
9．
答案：
C
10．
答案：
（1）醋酸菌；毛霉；酵母菌（2）特殊营养物质
（3）防止杂菌的污染；子细胞群体（4）酚红指示剂；红（5）强烈的理化因素；干热灭菌；需要
解析：
(1)葡萄酒生产过程中在起作用的微生物是酵母菌，葡萄酒变酸、变味说明有其他微生物醋酸菌引起。豆腐坯在一定温度、湿度条件下，毛霉与根霉生长繁殖于腐乳表面，形成大量的菌丝，便形成一层韧而细致的皮膜。泡菜坛内有时会长一层白膜，这是酵母菌大量繁殖结果。（2）培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，除此之外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的需求。（3）微生物的接种方法很多其核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体就是菌落。（4）尿素分解菌的鉴定用酚红指示剂，如果指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。（5）灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。对培养皿灭菌常用的方法是干热灭菌。在进行平板划线时，划线操作结束后，需要灼烧接种环。
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1基础知识：凝胶色谱法
1．
利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来（
）
A．相对分子量大的
B.溶解度高的
C．相对分子量小的
D.所代电荷多的
2．
凝胶色谱法操作正确的是(　　)
A．将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴
B．将橡皮塞下部切出凹穴
C．插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面
D．将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片
3．
下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是（　　）
A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐
B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面
C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱
D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5
mL收集一管，连续收集流出液
4．
下列关于现代生物技术应用的叙述，错误的是（　　）
A．在蛋白质的提取和分离实验中，凝胶色谱法可将不同相对分子质量的蛋白质分离
B．在PCR中，引物的结构和长度决定DNA子链从3′端向5′端延伸
C．在蛋白质的提取和分离实验中，透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质
D．在多聚酶链式反应中，Taq
DNA聚合酶只能特异性地复制整个DNA的部分序列
5．
下列各项中，一般不影响在凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是（　　）
A．层析柱高
B．层析柱的直径
C．缓冲溶液
D．样品的分布
6．
凝胶色谱法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是(　　)
A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径
B．吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度
C．将酶或细胞固定在细胞中
D．与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速率
7．
.用凝胶色谱法分离蛋白质时,相对分子质量大的蛋白质(　　)
A．路程较长,移动速度较慢
B.路程较长,移动速度较快
C．路程较短,移动速度较慢
D.路程较短,移动速度较快
8．
生物组织中有机物的提取方法有很多种．不同的有机物提取的方法各有不同．
（l）玫瑰精油称为“液体黄金”，是世界香料工业不可取代的原料，提取出的玫瑰精油要
求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是
．
（2）杏仁油富含矿物质和维生素，是一种质地轻柔、高渗透性的保温剂，主要通过
法提取．
（3）血红蛋白的提取方法可以采用
，该方法主要是利用血红蛋白的
特性将它与其他物质分开的．
（4）提取胡萝卜素的主要步骤：
①选取500g新鲜的胡萝卜，用清水洗净，沥干、
，然后在40℃的烘箱中烘干，时间约需2h，将干燥后的胡萝卜进一步粉碎过筛．注意胡萝卜的粉碎一定要彻底，主要目的是
．
②将样品放入500mL圆底烧瓶中，加入200mL萃取剂混匀，用萃取方法提取，萃取30min，然后过滤萃取液，除去固体物质，萃取的效率主要取决于
．
③用蒸馏装置，对萃取的样品进行
．
④收集接收器中的样品．
9．
蛋白质分子中，氨基酸的α－氨基和α－羧基虽然大部分都能结合形成肽键，但是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团，如肽链末端的α－氨基和α－羧基、天冬氨酸和谷氨酸残基中的羧基、赖氨酸和组氨酸残基中的各种碱性基团，所以蛋白质是两性电解质。在酸性溶液中，碱性基团的解离程度增大，使蛋白质带正电荷；在碱性溶液中，酸性基团的解离程度加强，使蛋白质带负电荷。当溶液到达某一pH时，蛋白质可因内部酸性或碱性基团的解离程度相等而呈等电状态，这时溶液的pH叫做蛋白质的等电点。不处于等电点状态的蛋白质分子的正、负电荷量是不相同的。试回答下列问题。
(1)多数蛋白质的等电点近于5，一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点________(“偏高”还是“偏低”)
(2)根据等电点的不同，可用________方法将不同种类的蛋白质分子分开。
(3)简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。
____________________________________________________________________。
(4)在血红蛋白提取和分离实验中，对分离得到的血红蛋白溶液要进行透析，除去相对分子质量较小的杂质蛋白质。请利用所给的实验材料对该透析实验进行验证。
实验目的：验证透析的基本原理和操作。
实验原理：
①__________________________________________________________________；
②__________________________________________________________________。
实验材料：①透析管或透析袋　②烧杯　③玻璃棒
④电磁搅拌器　⑤试管及试管架
实验试剂：①1
mL血红蛋白溶液　②300
mL的物质的量浓度为20
mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)
实验步骤：
①__________________________________________________________________；
②__________________________________________________________________。
10．
凝胶色谱法可测定蛋白质的相对分子质量，现有A、B两种蛋白质，请运用凝胶色谱法完成下列实验，确定A、B两种蛋白质相对分子质量的大小。
(1)凝胶色谱法的原理是____________________________________________。
(2)材料用具：玻璃器，橡皮塞，打孔器，移液管，尼龙网，螺旋夹，凝胶，缓冲液。
(3)实验步骤
①凝胶色谱柱的制作：注意底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的_____，否则难以铺实_____，还会导致液体残留，蛋白质分离不彻底。
②凝胶色谱柱的装填：装填凝胶柱时，不得有气泡存在的原因是：
___________________。
③样品的加入和洗脱：_____________________________________________。
(4)预期结果及结论：______________________________________________。
参考答案：
1．
答案：
A
解析：
凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质，路程较短，移动速度较快，首先洗脱出来。
2．
答案：
A
解析：
凝胶色谱柱制作时，首先选择合适封堵玻璃管口的橡皮塞，将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴；插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面；把尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片。
3．
答案：
C
解析：
待样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口，小心加入缓冲液到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱。
4．
答案：
B
解析：
DNA复制时，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，且和引物的结构和长短没有关系。
5．
答案：
B
解析：
分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关。样品是否分布均匀也影响分离度，缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷，因此也影响分离度。只有层析柱的直径一般不影响分离度。
6．
答案：
A
解析：
凝胶是一些微小的多孔的球体,较小的蛋白质分子进入凝胶内部,所经过的路径长,所以洗脱出来较慢,而较大的蛋白质分子则相反,并且,由于凝胶种类多,孔径大小不同,可进一步改变进入凝胶内部不同大小蛋白质的路径
7．
答案：
D
解析：
相对分子质量较小的蛋白质,易进入凝胶内部的通道,所以路径较长,移动速度慢。相对分子质量较大的蛋白质则相反。
8．
答案：
（1）水蒸气蒸馏法
（2）压榨
（3）凝胶色谱法
相对分子质量的大小
（4）①切碎
可以增加与萃取剂的接触面积，加大萃取效率
②萃取剂的性质和使用量
③浓缩
解析：
（1）玫瑰精油主要存在于玫瑰花中，提取玫瑰精油常用的方法是水蒸气蒸馏法．
（2）杏仁油主要存在于杏仁里面，用杏仁提取杏仁油常用压榨法．
（3）提取血红蛋白常用凝胶色谱法；凝胶色谱法主要是根据相对分子质量的大小不同在凝胶柱内移动的速度不同而将分子量不同的蛋白质分开．
（4）提取胡萝卜素的实验流程是：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素．
①选取500g新鲜的胡萝卜，用清水洗净，沥干、切碎，然后在40℃的烘箱中烘干；切碎胡萝卜的目的是以增加胡萝卜与萃取剂的接触面积，加大萃取效率，所以胡萝卜的粉碎一定要彻底．
②萃取和过滤，萃取时的影响萃取效率的主要因素是萃取剂的性质和使用量．
③用蒸馏装置，对萃取的样品进行浓缩，使萃取剂挥发，留下固体结晶胡萝卜素．
9．
答案：
(1)偏高
(2)电泳
(3)调节电泳槽中缓冲液的pH，使某种蛋白质处于等电点状态，而其他蛋白质带有电荷，在电场作用下，带有正、负电荷的蛋白质分别移向两极，而不带电荷的蛋白质留在原处。
(4)实验原理：①蛋白质是大分子物质，不能透过透析袋，而小分子物质可以自由透过
②在分离提纯蛋白质的过程中，常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开
实验步骤：①取1mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300mL的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液的烧杯中
②不断更换烧杯中的缓冲液，并用电磁搅拌器不断搅动缓冲液，以加速透析过程，透析12
h
解析：
含碱性基团较多的蛋白质溶液，在pH近于5时解离程度较大，蛋白质带正电荷。要使蛋白质内部酸性和碱性基团解离程度相等，呈等电状态，必须提高溶液的pH，使酸性基团解离程度增大，故蛋白质的等电点提高。根据等电点不同，可以利用电泳法将特定的蛋白质分离出来。
透析是应用半透膜的选择性，去除分子质量相对较小的杂质，从而达到对血红蛋白的粗分离。
10．
答案：
(1)根据相对分子质量的大小分离蛋白质
(3)①凹穴底面
尼龙网
②气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
③将A、B两种蛋白质的混合液加到凝胶色谱柱的上端，用缓冲液进行洗脱，检测它们洗脱的先后顺序
(4)若A先于B洗脱出来，则A的相对分子质量大于B；若B先洗脱出来，则B的相对分子质量大于A
解析：
凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。制作凝胶色谱柱时，选择橡皮塞打孔，然后将橡皮塞切出锅底状凹穴，然后插入玻璃管，注意不能超出橡皮塞凹穴底面以防难以铺实尼龙网。装填时如有气泡会扰乱洗脱次序。用吸管取混合液沿壁环绕加样后，即可用缓冲液洗脱。相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
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3实验——DNA的粗提取与鉴定
1．
填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。
（1）提取鸡血细胞中核物质：
。
(2)溶解核内DNA：
。
(3)析出2
mol/L
NaCl溶液中的DNA：
。
(4)DNA粘稠物的再溶解：
。
(5)提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物：
。
(6)DNA的鉴定：
。
2．
DNA的粗提取和鉴定实验中，步骤(1)和(3)中都要加入蒸馏水，两次加入的作用相同吗 为什么？
。
3．
将处理破裂后的红细胞混合液以2000
r/min的速度离心10
min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是(　　)
A．血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层
B．甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层
C．脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层
D．甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层
4．
以血液为实验材料进行DNA的粗提取实验中，加入柠檬酸钠的目的是(　　)
A．防止凝固　　　　　
　　　B．加快DNA析出
C．加快DNA溶解
D．加速凝血
5．
以菜花为实验材料进行“DNA粗提取与鉴定”的实验中，下面操作与目的错误的是（
）
加入试剂
目的
A
加入蒸馏水
使细胞破裂
B
加入食盐
溶解DNA
C
洗涤剂
瓦解细胞膜
D
95%冷却的酒精
析出DNA

6．在DNA的粗提取过程中,初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度和名称分别是(　　)
①0.1
g/mL的柠檬酸钠溶液
②2
mol/L的NaCl溶液
③0.14
mol/L的NaCl溶液
④体积分数为95%的冷却的酒精溶液
⑤0.015
mol/L的NaCl溶液
A．①③⑤
B.③④
C.②④
D.②③④
7．
下面是某同学用动物肝脏做“DNA粗提取与鉴定实验”的操作，正确的是(
)
A．在烧杯中加入肝脏和蒸馏水并进行搅拌，使细胞破裂释放核物质
B．调节NaCl溶液浓度至0.14mol/L，过滤后取滤液进行后续步骤的操作
C．在含DNA的滤液中加入嫩肉粉，使蛋白质与DNA分开
D．向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂后溶液呈蓝色
8．
破译基因组成的遗传信息，首先要提取DNA，下列不适于作为DNA提取的实验材料的是（
）
A．鸡血细胞
B．蛙的红细胞
C．人的成熟红细胞
D．菜花
9．
在制取玫瑰乳浊液和提纯过程中使用的NaCl的作用是(　　)
A．吸水
B．溶解
C．分层
D．萃取
10．
下列操作可以达到目的的是（
）
选项
操作
目的
A
用醋酸洋红处理花药
观察细胞核的位置，确定花药的成熟程度
B
将装有蛋白质粗制品的透析袋放入透析液中
血红蛋白质与其他小分子蛋白分离
C
在DNA粗提取实验中，鸡血中加入蒸馏水
稀释，防止血液凝固
D
将抗原注入小鼠体内
获得能大量增殖的效应B细胞

参考答案：
1．
答案：
（1）蒸馏水
(2)2
mol/LNaCl溶液(3)蒸馏水
(4)2
mol/L
NaCl溶液
(5)冷却的95%的酒精
(6)二苯胺
2．
答案：
不同，步骤1加入蒸馏水是使细胞吸水胀破，步骤3是稀释NaCl溶液，降低DNA溶解度，使DNA析出
解析：

3．
答案：
D.
解析：
混合液经离心后按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：第1层为无色透明的甲苯层，第2层白色薄层固体是脂溶性物质沉淀层，第3层红色透明液体是血红蛋白水溶液，第4层暗红色沉淀物主要是红细胞破碎物沉淀.
4．
答案：
A
解析：
柠檬酸钠与血中钙离子形成难解离的络合物，钙离子是凝血过程中所需的物质之一，血液中钙离子减少，而使血液凝固受阻。
5．
答案：
A
解析：
加入食盐：溶解DNA，洗涤剂：瓦解细胞膜，两种物质的目的是使菜花细胞破碎，释放DNA；95%冷却的酒精：DNA不溶于酒精，而其他杂质溶于酒精，析出较纯净的DNA；加入蒸馏水：使2mol/L的NaCl溶液浓度降低到0．14mol/L，析出DNA；故错误的选A。
6．
答案：
B
解析：
初步析出DNA利用其在0.14
mol/L的NaCl溶液中溶解度最低的原理,提取较纯净的DNA利用其不溶于体积分数为95%的冷却的酒精溶液的原理
7．
答案：
C
解析：
因肝脏细胞没有分散开，在烧杯中加入肝脏和蒸馏水并进行搅拌，不能使细胞破裂，应研磨；DNA在0.14mol/L
的NaCl溶液中溶解度很低，过滤后DNA不在滤液中；嫩肉粉中有蛋白酶可使蛋白质分解；向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂后需加热溶液才能呈蓝色。
8．
答案：
C
解析：
人的成熟红细胞
不适于作为DNA提取的实验材料，因为人的成熟红细胞内无细胞核。
9．
答案：
C
解析：
在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳浊液和提纯过程中，使用无水Na2SO4的作用是吸水，使用NaCl的作用是使玫瑰乳浊液油水分层。
10．
答案：
AB
解析：
试题分析：在培养花药之前，通常用醋酸洋红处理花药，用已染色的花粉样品制作临时装片，镜检，观察细胞核的位置，以确定花粉发育的时期，即花药的成熟程度，A项正确；透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开，血红蛋白是大分子的蛋白质，若除去血红蛋白粗制品中的小分子蛋白质，常利用透析的方法，B项正确；在DNA粗提取实验中，鸡血中加入蒸馏水目的是使血细胞吸水涨破，C项错误；效应B细胞无增殖能力，D项错误。
PAGE
2实验——血红蛋白的提取与分离
1．用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质（　　）
A．路程较长，移动速度较慢
B．路程较长，移动速度较快
C．路程较短，移动速度较慢
D．路程较短，移动速度较快
2．
红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是（
）
A．血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗提取→纯化→纯度鉴定处理
B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液
C．粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质
D．可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定
3．
将经处理破裂后的红细胞混合液以2
000
r/min的速度离心10
min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是（　　）
A．血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层
B．甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层
C．脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层
D．甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层
4．
蛋白质的分离与提纯技术是蛋白质研究的重要技术，下列有关叙述不正确的（　　）
A．根据蛋白质分子不能通过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离
B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质
C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质
D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质
5．
人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是(　　)
A．鸡的红细胞无血红蛋白，人的红细胞有血红蛋白
B．鸡的红细胞有线粒体，人的红细胞无线粒体
C．鸡的红细胞有细胞核，人的红细胞无细胞核
D．鸡的红细胞有氧呼吸，人的红细胞无氧呼吸
6．
下列操作正确的是(　　)
A．分离红细胞时采用低速长时间离心
B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可
C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心
D．透析时要用20
mmol/L的磷酸缓冲液,透析12
h
7．
在蛋白质的提取和分离中，下列对样品处理过程的分析正确的是（
）
A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐
B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的结果
C．洗涤过程选用质量分数0.1%的NaCl溶液(生理盐水)
D．血红蛋白溶液离心后分为四层，第四层为暗红色沉淀物
8．
下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，不正确的有(　　)
A．提取动物细胞中的DNA和蛋白质可以采用蒸馏水涨破细胞的方法
B．采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质
C．蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质
D．血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化，DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化
9．
透析法将蛋白质和其他小分子物质分离的原理是利用蛋白质分子的（
）
A．水溶性
B．不能透过半透膜的特性
C．胶体性
D．带电性
10．
关于蛋白质提取的叙述中，不正确的是
（
）
A．分离与纯化蛋白质之前首先要用适当的方法使蛋白质释放出来
B．抽提时要依据蛋白质的不同特性选择不同的溶剂
C．蛋白质的粗提取物离心可除去一些小分子杂质
D．蛋白质的粗制品可能是多种蛋白质的混合物
参考答案：
1．
答案：
D
解析：
在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
2．
答案：
B
解析：
凝胶应用蒸馏水充分溶胀来配制凝胶悬浮液，所以B错误。
3．
答案：
D
解析：
混合液经离心后，按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：第1层为无色透明的甲苯层；第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层；第3层为红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液；第4层为暗红色沉淀物，主要是红细胞破碎物沉淀。
4．
答案：
A
解析：
根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过离心沉降法分离蛋白质，根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质。
5．
答案：
C.
解析：
鸡(鸟类)的红细胞具有完整的细胞核，含有核DNA，便于进行DNA的提取；人的成熟红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白.
6．
答案：
D
解析：
分离红细胞时,采用低速短时间离心,如500
r/min离心2
min;分离血红蛋白溶液时,离心时间较长,以2
000
r/min离心10
min。释放血红蛋白时,加入蒸馏水和40%体积的甲苯;透析时用物质的量浓度为20
mmol/L的磷酸缓冲液,以除去相对分子质量较小的杂质
7．
答案：
D
8．
答案：
D
解析：
将动物细胞放在蒸馏水中，由于渗透吸水，可使细胞膜破裂，从而释放出细胞中的蛋白质和DNA，因此A选项正确。DNA在2
mol/L的NaCl溶液中的溶解度最大，而蛋白质在该浓度的NaCl溶液中部分发生盐析；DNA在0.14
mol/L的NaCl溶液中的溶解度最小，而蛋白质在该浓度的NaCl溶液中溶解，所以B选项正确。蛋白质纯化过程中利用小分子杂质能通过透析袋，而大分子蛋白质不能通过透析袋的特点，从而对蛋白质进行粗纯化，所以C选项正确。血红蛋白除可用凝胶色谱法进行纯化外，也可用电泳法进行纯化，所以D选项错误。
9．
答案：
B
解析：
透析法将蛋白质和其他小分子物质分离的原理是利用蛋白质分子的不能透过半透膜的特性
10．
答案：
C
解析：
试题分析：分离纯化蛋白质之前要先让细胞中的蛋白质释放出来，故A正确；提取蛋白质时，要根据蛋白质的不同特性选用不同的溶剂，故B正确；对蛋白质的粗提取物离心可以除去一些固体杂质，故C错误；蛋白质的粗制品是多种蛋白质的混合物，故D正确。
考点：本题考查蛋白质的提取的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
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2基础知识：DNA的溶解性
1．
在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（　　）
A．加快溶解DNA的速度
B．加快溶解杂质的速度
C．减少DNA的溶解度，加快DNA析出
D．减少杂质的溶解度，加快杂质的析出
2．
若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入食盐的目的是
……（　　）
A．利于DNA的溶解
B．分离DNA和蛋白质
C．溶解细胞膜
D．溶解蛋白质
3．
能分解植物细胞细胞膜的是（　　）
A．蒸馏水
B.HCl溶液
C．酒精
D.洗涤剂
4．
DNA不溶于（　　）
A．NaCl溶液
B.KCl溶液
C．C2H5OH
D.MgCl2溶液
5．
DNA在下列哪一个温度下会变性（　　）
A．20
℃
B.40
℃
C．60
℃
D.100
℃
6．
DNA在下列浓度的NaCl溶液中，溶解度最低的是（　　）
A．2
mol·L-1
B.0.015
mol·L-1
C．0.14
mol·L-1
D.5
mol·L-1
7．
在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品分别是(　　)
①0.1
g/mL的柠檬酸钠溶液
②2.00
mol/L的NaCl溶液
③0.14
mol/L的NaCl溶液
④体积分数为95%的酒精溶液
A．①③　　　　　　　　　
B．②③
C．②④
D．③④
8．
用过滤的方法得到含DNA的氯化钠溶液后，还要用酒精处理，才可以得到较纯的DNA，这是因为（　　）
A．DNA易溶于酒精，而滤液中某些杂质不易溶于酒精
B．DNA不易溶于酒精，而滤液中某些杂质易溶于酒精
C．DNA和滤液中其他成分更易溶于酒精
D．DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精
9．
向溶有DNA的2
mol/L的NaCl溶液中不断的加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质等的溶解度变化情况分别是（　　）
A．
减少、减少
B.
增大、增大
C．
先减少后增大、增大
D.
减少、增大
10．
下列关于“DNA
的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是（
）
A．
酵母和菜花均可作为提取
DNA的材料
B．
DNA
既溶于2mol/L
NaCl
溶液也溶于蒸馏水
C．
向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物
D．
DNA
溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,
冷却后变蓝
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，加蒸馏水的目的是降低NaCl浓度，析出DNA。
2．
答案：
A
解析：
实验材料是植物细胞，需先用洗涤剂溶解细胞膜，再加入食盐利于DNA的溶解。
3．
答案：
D
解析：
在DNA提取实验中，如果实验材料是植物细胞，需先用洗涤剂溶解细胞膜。
4．
答案：
C
解析：
DNA能溶解于像NaCl这样的盐溶液中，但不能溶于酒精等有机溶剂中。
5．
答案：
D
解析：
大多数蛋白质不能忍受60～80
℃的高温，而DNA在80
℃以上时才会变性。因此，DNA在100
℃时会变性。
6．
答案：
C
解析：
DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，当NaCl溶液的物质的量浓度为0.14
mol·L-1时，溶解度最低。
7．
答案：
D
解析：
0.14
mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小；95%的酒精溶液中DNA的溶解度也很小，但其他有机物的溶解度很大，所以可提纯DNA。
8．
答案：
B
解析：
DNA不易溶于酒精，而滤液中某些杂质易溶于酒精，利用这个特点可去除溶于酒精的杂质，得到较纯的DNA。
9．
答案：
C
解析：
DNA在不同浓度NaCl的溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl浓液中的溶解度最低，浓度大于或小于此浓度时，其浓解度都较高.而DNA溶解度低时，蛋白质的浓解度却较高。
10．
答案：
C
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2基础知识：果酒制作的原理
1．
在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是(　　)
A．让发酵装置接受光照
B．给发酵装置适时排气
C．向发酵装置通入空气
D．将发酵装置放在45
℃处
2．
下列说法不正确的是(　　)
A．在进行酒精发酵的过程中,接种酵母菌后,应立即密封
B．在进行酒精发酵的过程中,接种酵母菌后,应先通气一段时间,再隔绝空气
C．为了避免杂菌污染,在实际生产过程中可以直接接种纯种的酵母菌
D．制葡萄酒的时间控制在10
d～12
d左右
3．
若在制作葡萄酒时,在发酵液中同时生成了葡萄醋,不可能的原因是
(　　)
A．密封不严,有氧气进入
B.有空气中的醋酸菌进入
C．发酵罐消毒彻底
D.发酵液灭菌不彻底
4．
关于腐乳、果酒、果醋制作过程的叙述正确的是（
）
A．果酒发酵过程中需要适时打开瓶盖放气，以防止发酵瓶破裂
B．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口表面的盐要铺厚一些
C．在变酸的果酒表面观察到的菌膜可能是酵母菌在液面大量繁殖形成的
D．果酒发酵装置的排气口通过长而弯曲的胶管与瓶身连接，这不能防止发酵液被污染
5．
呼吸作用是生物细胞中的一种重要的生理过程，它受到各种因素的影响。某同学利用气球、酵母菌培养液、葡萄糖、恒温水浴装置等设计了一系列实验（实验中气球完全扎紧）。主要操作见下表：
操作步骤及结果
实验组1
实验组2
实验组3
实验组4
实验组5
葡萄糖溶液
10
mL
10
mL
10
mL
10
mL
10
mL
酵母菌培养液
2
mL（煮沸过）
2
mL
4
mL
2
mL
2
mL
质量分数为30%的HCl溶液
—
—
—
—
1
mL
无菌水
2
mL
2
mL
2
mL
2
mL
1
mL
水浴温度
35
℃
35
℃
35
℃
80
℃
35
℃
温度保持时间
10
min
气球体积增加量（相对）
0
1
2
0
0
试回答下列有关问题。
（1）实验中将气球置于35
℃的恒温水浴中10
min的目的是______。
实验组1设置的作用是__________。
（2）实验组2与实验组3结果差异产生的原因_______________。
（3）实验组3中，气球体积随时间的变化表现为_________
。
（4）实验组4的气球体积增加量为0，其可能的原因是_________________。
（5）实验组5设置的目的可能是________。
6．
利用酵母菌发酵生产酒精时，投放的适宜原料和在生产酒精阶段要控制的必要条件分别是(　　)
A．玉米粉和有氧
B．大豆粉和有氧
C．玉米粉和无氧
D．大豆粉和无氧
7．
下列关于果酒制作过程中的叙述，止确的是
(
)
A．应先去除葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得彻底
B．发酵装置的温度维持在20℃左右最好
C．在发酵过程中，需从充气口不断通入空气
D．由于酵母菌的繁殖能力很强，不需对所用装置进行消毒处理
8．
山楂酒具有活血、补气、健脾等功效，对恢复体力、增加精力、促进食欲有较显著的功效。以下为山楂酒制作的有关过程。分析回答以下问题。
主要原料
山楂
设备
榨汁机、发酵桶、地下室、大锅等
制作过程
山楂经充分水洗，用榨汁机榨汁。将山楂汁倒入发酵桶中，经7～10
d的发酵，即成果酒。将经过发酵的果酒滤出，倒入发酵容器内，储存在地下室里，进行30
d的再发酵。并继续放置在阴凉的地下室进行陈酿，陈酿期间，要坚持倒桶(换桶)，并保持酒桶常满，即得原汁山楂酒。
(1)请写出山楂酒制作的原理(用反应式表示)____________________。
(2)与山楂酒发酵有关的微生物主要是__________________，
在山楂酒制作中菌种的主要来源是________________________________。
(3)发酵的温度应该在______℃，在发酵过程中要先通气后密封，先通气的原因是__________________________________________________________。
(4)检验是否产生酒精可在______条件下，用______试剂检测。
(5)若要进一步制作果醋，应在发酵液中加入______菌种。
9．
下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是(　　)
A．果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧微生物，在有氧条件下能大量繁殖
B．制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄汁中的糖分解为醋酸
C．多种微生物参与了腐乳的发酵，如青霉、毛霉、曲霉等，它们都是真核生物
D．乳酸菌是一种厌氧微生物，可以参与泡菜和酸奶的制作
10．
在20℃的实验条件下可顺利完成的是（　　）
A．果酒的制作
B．用二苯胺试剂鉴定DNA
C．大鼠神经细胞的培养
D．制备用于植物组织培养的固体培养基
参考答案：
1．
答案：
B
2．
答案：
A
解析：
利用酵母菌的无氧呼吸可以酿酒,一开始通入空气,酵母菌通过旺盛的有氧呼吸使出芽生殖加快产生更多酵母菌,这样在以后密闭不通气阶段才能有大量的酵母菌进行无氧呼吸产生大量酒精。制葡萄酒的时间控制在10
d～12
d左右
3．
答案：
C
解析：
醋酸是醋酸菌在有氧条件下产生的,而酒精发酵是由酵母菌在无氧条件下进行的,制葡萄酒时,发酵液中生成了葡萄醋,说明发酵装置密封不严,进入了氧气,受到了杂菌污染
4．
答案：
B
5．
答案：
(1)
提供酵母菌（酶）发酵需要的适宜温度、避免温度变化对实验结果的影响、提供发酵需要的时间　对照(2)
酵母菌增多，参与呼吸的酶数量增多，呼吸作用加快
(3)
开始时，随着发酵时间的推移，发酵产生的CO2量增加，气球体积增加；但由于葡萄糖的逐渐消耗，发酵产生的CO2减少，气体体积增大减慢，最终可能不变
(4)
温度过高，酵母菌被杀死
(5)
探究pH对酵母菌发酵的影响
解析：
本题考查酵母菌的呼吸类型，影响发酵的条件，探究pH对酵母菌发酵的影响
6．
答案：
C
解析：
酵母菌无氧呼吸产生的酒精最常用的底物是葡萄糖，玉米粉中含较多的淀粉，水解后可以为酵母菌提供葡萄糖。
7．
答案：
B
解析：
在选葡萄时应先冲洗l～2次，再去除枝梗以防葡萄破损被杂茵污染；酵母茵的繁殖力虽然很强，但仍要对所用装置进行消毒处理，因为其内含有对葡萄酒有害的微生物，影响酒的品质；酵母菌只有在20℃左右的无氧条件下才能进行酒精发酵。
8．
答案：
(1)C6H12O6
2C2H5OH＋2CO2
(2)酵母菌　野生的酵母菌
(3)18～25　酵母菌在有氧条件下大量繁殖，增加菌种数量
(4)酸性　重铬酸钾　(5)醋酸菌
解析：
本题考查果酒和果醋的制作。果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，反应式如下：C6H12O6
2C2H5OH＋2CO2。发酵需在一定的温度条件下进行。无论在有氧还是在无氧条件下，酵母菌代谢均产生CO2，因此要适时排出。
9．
答案：
B
解析：
本题考查果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作，意在考查考生的理解能力和综合运用能力。制作果酒利用的是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，在发酵初期通入无菌空气可以使酵母菌进行有氧呼吸并大量繁殖；醋酸菌是好氧微生物，在果醋发酵过程中必须持续通入无菌空气；参与腐乳发酵的青霉、毛霉、曲霉等都属于真核生物；泡菜、酸奶制作过程中使用的乳酸菌是一种厌氧细菌。
10．
答案：
A
解析：
A、酵母菌生存适宜的温度是18～25℃，所以果酒的制作在20℃的实验条件下可顺利完成，A正确；
B．用二苯胺试剂鉴定DNA需要沸水浴加热，B错误；
C．大鼠神经细胞的培养，需要保持在大鼠的正常体温37℃﹣39℃，C错误；
D．制备用于植物组织培养的固体培养基，需要加热使琼脂熔化，D错误．
故选：A．亚硝酸盐及乳酸菌发酵
1．
有关膳食中的亚硝酸盐对人体健康的影响，下列说法正确的是(　　)
A．膳食中的亚硝酸盐在人体内会随尿液全部排出
B．亚硝酸盐在人体内积累有致癌作用
C．亚硝酸盐只有在特定条件下才能转变成致癌物质
D．亚硝酸盐对人体健康不会有任何影响
2．
下列关于亚硝酸盐的叙述，错误的是(　　)
A．亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水
B．亚硝酸盐的分布广泛，其中蔬菜中亚硝酸盐的平均含量约为4
mg·kg－1
C．咸菜中的亚硝酸盐的平均含量在7
mg·kg－1以上
D．亚硝酸盐不会危害人体健康，并且还具有防腐作用，所以在食品中应多加些以延长食品的保质期
3．
以下关于传统发酵技术涉及的微生物的描述，正确的是（　　）
A．在葡萄酒的制作过程中，密封时间越长，酵母菌产生的酒精量就越多
B．果醋的生产过程中，具有协同作用的菌种是酵母菌和醋酸菌
C．毛霉属于细菌，是单细胞生物，没有由核膜包围的细胞核
D．乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下，也可以将葡萄糖分解成酒精和CO2
4．
以下关于利用生物技术加工食品时有关温度的说法错误的是（　　）
A．制作果酒时控制温度在18～25
℃
B．制作泡菜时温度控制在40～48
℃
C．制作腐乳时温度控制在15～18
℃
D．制作果醋时温度控制在30～35
℃
5．
某小组利用微生物制作酸奶(已知微生物的最适发酵温度为38
℃～44
℃)。该小组的活动记录如下：
实验目的：(略)
实验仪器：(略)
实验材料：两杯不加糖的酸奶(品牌不同，呈果冻状)、1
L牛奶
实验步骤：①消毒：将1
L牛奶放在锅内加热至82
℃接近沸腾，趁热在3个已消毒的0.5
L广口瓶中各倒入等量牛奶，标明“A”、“B”、“C”。
②加菌种：分别在A、B两个广口瓶中加入40
mL两种不同品牌的酸奶，并搅拌均匀；在C瓶中加入40
mL自来水，也混合均匀。
③发酵：将3个广口瓶的瓶口封好，放到事先已加热至38
℃～40
℃的烘箱内，保持恒温1
h。
④观察：1
h后，每隔30
min对瓶中情况观测一次，如果瓶中的牛奶已经凝固呈果冻状就可说明酸奶已做好。回答下列问题：
(1)制酸奶利用的主要微生物是________，其新陈代谢类型是________________，能否用微波炉制酸奶？______，理由是__________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)某小组同学按上述操作，一段时间后，在A、B瓶中均未品尝到两个原有品牌酸奶的味道，C瓶还有点馊味。请分析其失败的原因。
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________。
6．
制作泡菜所利用的乳酸菌最初来自于（　　）
A．人工加入到泡菜水中的　　
B．所选蔬菜自身原有的
C．腌制过程中自生的
D．水中的乳酸菌
7．
在果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作中，用到的微生物分别是（　　）
A．酵母菌、酵母菌、毛霉、乳酸菌
B．酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌
C．毛霉、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌
D．酵母菌、乳酸菌、毛霉、醋酸菌
8．
在泡菜制作过程中，10
d后坛内亚硝酸盐的含量会逐渐下降，原因是(　　)
A．坛内微生物将亚硝酸盐氧化成硝酸盐
B．坛内微生物将亚硝酸盐还原为硝酸盐
C．坛内微生物将亚硝酸盐分解成N2和NH3等物质
D．坛内微生物死亡，不会再产生亚硝酸盐
9．
在制果酒、果醋、泡菜时，发酵过程中对氧气的需求分别是（　　）。
A．无氧、有氧、无氧
B．有氧、无氧、无氧
C．无氧、有氧、有氧
D．兼氧、无氧、有氧
10．
如图是酸奶制作的简易过程，相关叙述正确的是(　　)
→→
→
A．用高压蒸汽灭菌锅对发酵瓶和鲜奶进行无菌处理
B．乳酸发酵菌种和醋酸发酵菌种都属于原核生物
C．保温发酵过程中要适时打开发酵瓶盖放出气体
D．酸奶发酵的适宜温度比果醋发酵的适宜温度要低
参考答案：
1．
答案：
C
解析：
研究表明膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，当人体摄入的亚酸盐总量达到某一定数值时才会致病。亚硝酸盐本身无致癌作用，在特定条件下转变成的亚硝胺有致癌作用。
2．
答案：
D
解析：
对蔬菜、咸菜等的亚硝酸盐含量识记错误，或者对亚硝酸盐的防腐作用过度认同，忽略了其对人体健康的危害。
3．
答案：
B
解析：
对酵母菌而言，密封时间过长，有机物耗尽，将不会再产生酒精。生产果醋时，酵母菌使糖转变成酒精，然后醋酸菌使酒精转变为醋酸，它们起协同作用。毛霉是真菌。乳酸菌的发酵产物有乳酸，不产生酒精和二氧化碳。
4．
答案：
B
解析：
20
℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是18～25
℃；制作泡菜的温度控制范围应该为毛霉生长的最适温度15～18
℃；醋酸菌生长的最适温度是在30～35
℃。
5．
答案：
(1)乳酸菌　异养厌氧型　不能　微波能破坏细胞内核酸、蛋白质等分子的结构，使乳酸菌失活
(2)在A、B瓶中均未品尝到两个原有品牌酸奶的味道，是由于在加菌种时未冷却，高温杀死了两种不同品牌酸奶中的乳酸菌，所以A、B瓶中并无乳酸菌的发酵过程，牛奶并未变成酸奶。而C瓶是因为水中其他微生物经发酵而使牛奶变馊的。
解析：
酸奶的制作是利用了乳酸菌的无氧发酵，把牛奶中的营养物质分解为乳酸。所以是异氧厌氧型代谢；牛奶在高温消毒后，要冷却后才能加入乳酸菌种，如果在高温下加入，会杀死酸奶中的乳酸菌，使得牛奶的发酵失败；自来水中有其他杂菌，加入到牛奶中，会大量滋生繁殖，使得牛奶腐败变馊。
6．
答案：
B
解析：
制作泡菜时所利用的乳酸菌最初来自于所选蔬菜自身原有的。
7．
答案：
B
8．
答案：
A
9．
答案：
A
解析：
本题考查微生物的代谢类型，制果酒、果醋、泡菜时用到的微生物分别是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。酵母菌为异养兼性厌氧型微生物，制果酒时需在无氧条件下进行；醋酸菌为异养需氧型微生物；乳酸菌为异养厌氧型微生物。
10．
答案：
B
解析：
A错误：鲜奶不能用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。C错误：乳酸菌进行无氧呼吸没有气体产生，乳酸发酵过程中无需排气。D错误：果醋发酵的适宜温度为30℃～35℃，故酸奶发酵的适宜温度比果醋发酵的适宜温度要高。
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2基础知识：DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
1．
在蛋白质和DNA的混合液中，要想得到较纯的DNA，可采用的方法有（　　）
①向混合液中加入足量的蒸馏水
②向混合液中加入DNA水解酶
③向混合液中加入冷的95%的酒精
④向混合液中加入蛋白质酶
A．①②
B．③④
C．①③
D．②④
2．
在研究DNA的样本前，采集来的血样需要用蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂处理除去蛋白质，用蛋白水解酶处理血样的目的是（　　）
A．除去血浆中的蛋白质
B．除去染色体上的蛋白质
C．除去血细胞表面的蛋白质
D．除去血细胞中所有蛋白质，使DNA释放后提纯
3．
洗涤剂对DNA没有影响，但能够溶解（　　）
A．细胞壁
B．细胞膜
C．细胞核
D．细胞质
4．
蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是（　　）
A．蒸馏水　　　　　　　
B．NaCl溶液
C．NaOH溶液
D．盐酸
5．
蛋白酶能使蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是（　　）
A．蒸馏水
B．NaCl溶液
C．NaOH溶液
D．盐酸
6．
在除去杂质时，为什么要将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温10～15
min（　　）
A．使DNA变性
B．使蛋白质变性
C．使DNA和蛋白质变性
D．分解蛋白质
7．
下列关于生物技术实践的叙述中，正确的是（　
　
）
A．
用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀
B．
参与制作果酒、果醋和腐乳的菌种中只有毛霉是真核生物
C．
海藻酸铀溶液浓度过高会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色
D．
用花菜提取DNA
时加入食盐和洗涤剂的目的分别是充分研磨和瓦解细胞膜
8．
下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是（　　
）
A．取材：鸡血细胞，原因：有细胞核，其他动物的血细胞都没有细胞核
B．粗提取：不同浓度的NaCl溶液，原因：DNA在其中的溶解度不同
C．提纯：95％的冷酒精，原因：DNA溶于酒精，蛋白质等杂质不溶于酒精
D．鉴定：二苯胺试剂，原因：DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
DNA分子在冷的酒精中可析出，据此可将DNA和蛋白质分离；而蛋白质酶则将蛋白质水解成可溶性的多肽，从而将蛋白质与DNA分离。
2．
答案：
D
解析：
蛋白酶能催化蛋白质这一类物质的水解，用蛋白酶处理血样，能去除血细胞中所有蛋白质。
3．
答案：
B
解析：
洗涤剂能够溶解细胞膜，有利于DNA的释放，但对DNA没有影响。
4．答案：
B
解析：
染色质中的主要成分是DNA和蛋白质，可以利用蛋白酶水解杂质蛋白质，从而使提取的DNA与蛋白质分开。DNA在2
mol/L
NaCl溶液中溶解度高，而蛋白质则不能溶解在2
mol/L
NaCl溶液中，通过过滤除去不能溶解的杂质蛋白质。由此可看出两种方法虽然原理不同，但目的是一样的。
5．
答案：
B
解析：
染色质中的主要成分是DNA和蛋白质，我们可以利用蛋白酶水解杂质蛋白质，从而使提取的DNA与蛋白质分开。也可以利用DNA在NaCl
溶液中的溶解度不同，DNA在2
mol/L
NaCl
溶液中溶解度高，而蛋白质不能溶解，通过过滤可除去不能溶解的杂质蛋白质，由此可看出两种方法虽然原理不同，但目的是一样的。
6．
答案：
B
解析：
大多数蛋白质不能耐受60～75℃的高温，有利于染色质(体)、蛋白质与DNA分离，这样容易获得较为纯净的DNA。
7．
答案：
A
8．
答案：
B
PAGE
1实验——测定泡菜中亚硝酸盐的含量
1．测定泡菜中亚硝酸盐的含量的操作中，用不到的试剂是（　　）
A．对氨基苯磺酸溶液
B．N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液
C．氯化镉和氯化钡溶液
D．班氏溶液
2．
在腌制泡菜时，食盐量不足时，会造成细菌大量繁殖（　　）
A．10%
B.15%
C.18%
D.20%
3．
含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是（　　）
A．抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长
B．抗生素呈碱性，会与乳酸发生中和反应
C．抗生素能够抑制酵母菌的生长
D．抗生素在酸性环境中会被分解破坏
4．
关于亚硝酸盐的叙述，正确的是（　　）
A．亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂，无限量
B．绿色食品不会含有亚硝酸盐
C．亚硝酸盐在人体胃内易变成亚硝胺
D．水煮的时间越久亚硝酸盐的含量越少
5．
泡菜制作过程中，下列对不同时期泡菜坛中乳酸菌含量的叙述，正确的是（　　）
A．制作泡菜初期并无乳酸菌的存在
B．腌制过程中乳酸菌含量会逐渐增多并达到最高峰，然后下降
C．腌制后期乳酸菌含量会急剧下降
D．腌制的全过程乳酸菌的含量不变，活性不同
6．
在制作馒头时，可采用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软，请问这两种方法中，馒头中的营养和所含有的能量情况相比较最可能的是(　　)
A．后者所含营养丰富，能量少
B．后者所含营养单一，能量少
C．前者所含营养丰富，能量少
D．两者所含营养和能量相同
7．
在果酒、果醋及泡菜制作过程中，所用原料的有机物总量及有机物种类的变化是(　　)
A．减少、增加
B．减少、减少
C．增加、增加
D．增加、减少
8．
下列关于亚硝酸盐的叙述错误的是(　　)
A．亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水
B．亚硝酸盐的分布广泛，其中蔬菜中亚硝酸盐的平均含量约为4
mg/kg
C．咸菜中亚硝酸盐的平均含量在7
mg/kg以上，所以要尽量少吃咸菜
D．亚硝酸盐不会危害人体健康，并且具有防腐作用，所以应在食品中可多加些以延长食品的保质期
9．
下列实验流程中，错误的是（　　）
A．鲜玫瑰花+清水→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→除水→玫瑰油
B．石灰水浸泡→漂洗→压榨→萃取→浓缩→过滤→胡萝卜
C．制备溶液→制备泡菜样品处理液→制备亚硝酸盐标准显色液→比色
D．挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵（果酒）→醋酸发酵（果醋）
10．
以下关于亚硝酸盐的叙述中不正确的是（　　）
A．亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水
B．亚硝酸盐的分布广泛，其中蔬菜中亚硝酸盐的平均含量约为4mg/kg
C．咸菜中亚硝酸盐的平均含量在7mg/kg以上，所以尽量少吃咸菜
D．亚硝酸盐不会危害人体健康，并且还具有防腐作用，所以在食品中应多加些以延长食品的保质期
参考答案：
1．
答案：
D
解析：
班氏溶液是用于鉴定可溶性还原糖的试剂，A、B和C项中的试剂均能用到。
2．
答案：
A
解析：
泡菜的腌制过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。
3．
答案：
A
解析：

4．
答案：
C
解析：
亚硝酸盐分布广泛，在土壤、水、鱼、谷、绿色蔬菜中都有，水煮沸越久，亚硝酸盐浓度会越大，含量不会减少。亚硝酸盐在食品生产中可作食品添加剂，但量多会使人中毒，亚硝酸盐在动物和人体胃的酸性环境中，在硫氰酸盐的催化作用下转变为亚硝胺。
5．
答案：
B
解析：
本题考查泡菜的制作原理，泡菜的制作是利用蔬菜表面的乳酸菌的代谢，将糖类转化成乳酸，因此发酵初期就有乳酸菌，由于发酵条件的变化，乳酸菌大量繁殖，达到一定量后由于酸度过大，乳酸菌数量会下降。
6．
答案：
　A
解析：
　酵母菌利用面粉中的糖进行有氧呼吸，释放出一部分能量，并且酵母菌发酵会产生氨基酸等营养物质。
7．
答案：
　A
解析：
　在果酒、果醋及泡菜制作过程中，所涉及微生物均为异养微生物，它们生长繁殖过程均需消耗有机物，在此过程中要形成很多新类型有机物。
8．
答案：
D
解析：
亚硝酸盐一般不会危害人体健康，但摄入总量达到某一数值时也会致病，故选D。
9．
答案：
C
解析：
解：A、水中蒸馏法提取玫瑰油的实验流程是：鲜玫瑰花+清水→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→除水→玫瑰油，A正确；
B．提取胡萝卜素的实验流程是：石灰水浸泡→漂洗→压榨→萃取→浓缩→过滤→胡萝卜，B正确；
C．泡菜中亚硝酸盐含量的测定的实验步骤是：配制溶液→制备标准显色液→制备泡菜样品处理液→比色，C错误；
D．果酒和果醋的制作的流程是：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵（果酒）→醋酸发酵（果醋），D正确．
故选：C．
10．
答案：
D
解析：
解：A、亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，A正确；
B．亚硝酸盐的分布广泛，其中蔬菜中亚硝酸盐的平均含量约为4mg/kg，B正确；
C．咸菜亚硝酸盐较高，平均含量在7mg/kg以上，由于亚硝酸盐有一定的毒性，因此尽量少吃咸菜，C正确；
D．亚硝酸盐有一定的毒性，当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3～0.5g时，会引起中毒，达到3g时会引起人死亡，D错误．
故选：D．
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1基础知识：PCR的反应过程
1．
在PCR反应中，只有一个DNA的片段作为模板，经过一次循环后，含引物Ⅰ的DNA单链占DNA总链数的(　　)
A．1/2
B.1/4
C.1
D.1/8
2．
多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列问题：
(1)DNA的两条链是反向平行的，通常将
的末端称为5，端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的
开始延伸DNA链。
(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到
，它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来。所用的培养基叫
。
(3)PCR的每次循环可以分为
三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循拜后，反应物中大约有
个这样的DNA片段。
(4)简述PCR技术的主要应用(要求答2项)___________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
3．
在PCR扩增循环过程中，下列说法正确的是（　　）
A．在每次循环中，变性所用的时间是一样多的
B．在每次循环中，复性所用的时间是一样多的
C．在每次循环中，延伸所用的时间是一样多的
D．以上说法都不正确
4．
PCR技术的操作步骤依次是（　　）
A．高温变性、中温延伸、低温退火
B．高温变性、低温退火、中温延伸
C．中温延伸、高温变性、低温退火
D．中温延伸、低温退火、高温变性
5．
分离血红蛋白溶液时，离心后试管的溶液分四层，血红蛋白在第(　　)层。
A．一
B．二
C．三
D．四
6．
在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是(　　)
A．防止血红蛋白被氧化
B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和
C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程
D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能
7．
在PCR的实验操作中,下列说法正确的是(　　)
①PCR所用的缓冲液和酶要在常温下储存
②离心管的盖子一定要盖严
③用手指轻弹离心管壁
④离心的目的是使反应液集中在离心管的底部
A．①②③
B.①②④
C.②③④
D.①③④
8．
PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是(　　)
①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA
②PCR过程不需要DNA聚合酶
③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的
④PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制
A．③④
B.①②
C.①③
D.②④
9．
PCR技术的操作步骤依次是（
）
A．高温变性、中温延伸、低温复性
B.
高温变性、低温复性、中温延伸
C．中温延伸、高温变性、低温复性
D.
中温延伸、低温复性、高温变性
10．
关于DNA粗提取与鉴定实验的有关说法正确的是（
）

充分溶解DNA的盐溶液是0.14mol/L的NaCl溶液

实验中提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点

对最后提取出DNA用二苯胺试剂鉴定时需用酒精灯直接加热

实验操作过程中先后两次加入蒸馏水的作用相同
参考答案：
1．
答案：
B
解析：
经过一次循环后，DNA单链共4条，含引物Ⅰ的DNA单链只有1条。
2．
答案：
⑴磷酸基团
3‘端
⑵耐高温的TaqDNA聚合酶
选择培养基
⑶变性、复性和延伸
32
⑷遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等（要求答2项）
解析：
本题考查PCR技术有关知识。DNA的两条链是反向平行的，通常将含有游离的磷酸基团的末端称为5，端，而DNA聚合酶从引物的3‘开始延伸DNA链；在体外扩增DNA时不用解旋酶而是用热变性处理的方法打开DNA双链，因此需要使用耐高温的DNA聚合酶；PCR的每次循环可以分为变性、复性和延伸三个步骤，五次循环后得到25个DNA片段。PCR技术有广泛的应用，可以用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、克隆基因等方面。
3．
答案：
D
解析：

4．
答案：
B
解析：
PCR技术的操作步骤依次是：高温变性、低温退火、中温延伸。
5．
答案：
　C
解析：
　分离血红蛋白溶液时，离心后可明显观察到试管中液体分四层，从上向下数依次为：无色透明的甲苯层，白色薄层固体(脂溶性物质的沉淀层)、红色透明液体(血红蛋白水溶液)、暗红色沉淀物(其他杂质)，故血红蛋白分布于第三层。
6．
答案：
　D
解析：
　利用磷酸缓冲液模拟细胞内pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察和研究。
7．
答案：
C
解析：
PCR所用的缓冲液和酶需装成小份,并在-20℃储存;盖严离心管口的盖子,防止实验中外源DNA污染;用手指轻轻弹击管的侧壁,使反应液混合均匀;离心的目的是使反应液集中在离心管的底部,提高反应效果。
8．
答案：
C
解析：
PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比较,主要有两点不同:(1)PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA,长度通常为20~30个核苷酸。(2)PCR过程中,DNA解旋不依赖解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的
9．
答案：
B
10．
答案：
B
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2实验——测定泡菜中亚硝酸盐的含量
1．
制作下列发酵食品时，不用香辛料（　　）
A．果酒
B.腐乳
C.泡菜
D.发酵香肠
2．
很多东北人冬季喜欢腌制酸菜，在腌制初期，将菜坛子加满水密封，其原因是(
)
A．防止水分蒸发
B．防止菜叶萎蔫
C．防止产生的乳酸挥发
D．有利于乳酸菌在无氧条件下发酵
3．
下列关于发酵产物的说法，错误的是（　　）
A．果汁发酵是否产生酒精可以用重铬酸钾来检测
B．检测醋酸产生的简单易行的方法是闻气味
C．泡菜制作产生的亚硝酸盐可以用对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺盐酸盐检测
D．检验乳酸产生的简单易行的方法是品尝
4．
为了使测定亚硝酸盐含量的准确性高，关键是（　　）
A．样品处理
B．标准显色液的制备
C．比色
D．泡菜的选择
5．
制泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化（　　）
A．先减少后增加
　　　　
B．先增加后减少
C．逐渐增加
D．逐渐减少
6．
下列是测定亚硝酸盐的试剂，其中在配制时需加入盐酸的是（　　）
①对氨基苯磺酸溶液　②N－1－萘基乙二胺盐酸盐溶液　③提取剂
A．①②③
B．①②
C．①③
D．②③
7．
有关测定亚硝酸盐含量的叙述，不正确的是（　　）
A．亚硝酸盐与对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺发生反应需在弱酸条件下
B．亚硝酸盐与显色剂反应生成紫红色物质
C．对显色反应样品进行目测，可精确算出泡菜中亚硝酸盐的含量
D．实验中需用到亚硝酸钠标准溶液
8．
分析材料回答下面的问题：
泡菜制作是以乳酸发酵为主，同时利用食盐的高渗透压作用，兼有蛋白质分解的微生物发酵过程的冷加工方法，对蔬菜的营养成分、色香味的保存十分有利。
千百年来，泡菜不但以其酸鲜纯正、脆嫩芳香、清爽可口、回味悠长的特点吸引众多食客，还因其开胃口、促消化、解荤腥、增食欲的功效为世人所乐意接受。
泡菜的制作工艺如下：选料→预处理→配制调料→泡制。
泡菜的制作看上去很简单，但要泡出色香味形俱佳、营养卫生的泡菜，应该掌握原料性质，注意选择容器、制备盐水、搭配调料、装坛等技术。如调料是泡菜风味形成的关键，泡菜坛的选择亦关乎泡菜的制作成败。
(1)从结构上分析，乳酸菌属于____________生物。
(2)用反应式表示乳酸发酵原理：
________________________________________________________________________。
(3)制作泡菜的坛子必须密封的道理是：
________________________________________________________________________。
(4)泡菜制作初期盐水表面出现白膜的原因：
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)泡菜制作过程中亚硝酸盐是怎样产生的？
________________________________________________________________________。
(6)泡菜制作后期亚硝酸盐含量下降的原因是：
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(7)除缺氧条件外，影响泡菜制作的因素是：
________________________________________________________________________。
9．
果醋制作过程中，需从充气口(　　)
A．先通入一段时间O2，以后停止通入
B．不断通入O2
C．整个过程不需通入O2
D．先密封一段时间，然后再通入O2
10．
发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，原因是
。
参考答案：
1．
答案：
A
解析：
果酒制作过程中，不用添加香辛料，腐乳、泡菜和发酵香肠时都需加入胡椒、八角、桂皮、姜等香辛料。
2．
答案：
D
解析：
酸菜的制作主要靠乳酸菌的发酵作用。在无氧条件下，乳酸菌产生乳酸，故在腌制初期，将菜坛子注满水密封，以提供一个无氧环境条件。
3．
答案：
D
解析：
发酵产物的鉴定不可以用品尝的方法，以防有毒。检验乳酸的方法是用pH试纸检测。
4．
答案：
B
解析：
亚硝酸盐含量是通过与标准显色液进行目测比较而估算出的，所以只有标准显色液制备标准才能比较出正确的结果。
5．
答案：
B
解析：
泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随腌制时间的延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，使亚硝酸盐含量逐渐下降。
6．
答案：
C
解析：
配制对氨基苯磺酸溶液须将对氨基苯磺酸溶于20%的盐酸中，提取剂需用浓盐酸调节pH至1，而N－1－萘基乙二胺盐酸盐溶液是将N－1－萘基乙二胺盐酸盐直接溶于水中制成，不需要加盐酸。
7．
答案：
C
解析：
通过比色法来测定亚硝酸盐含量，只能是大致估算出其含量，并不能精确计算出多少。
8．
答案：
(1)原核　(2)C6H12O62C3H6O3(乳酸)＋能量　(3)保证坛内乳酸菌发酵所需要的无氧条件
(4)发酵初期，盐水表面营养丰富，氧气较多，酵母菌大量繁殖形成白膜
(5)泡菜发酵初期，由于硝酸盐还原菌的活动，蔬菜中的硝酸盐被还原成亚硝酸盐
(6)乳酸菌产生大量乳酸，抑制硝酸盐还原菌的活动，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因此亚硝酸盐含量下降
(7)需要控制腌制的时间、温度和食盐的用量
9．
答案：
　B
解析：
　由于醋酸菌是需氧菌，因此在制作果醋过程中需不断通O2。
10．
答案：
发酵不同时期亚硝酸盐的含量会发生变化，及时检测是把握取食泡菜的最佳时机
解析：
本题考查了检测泡菜中亚硝酸盐含量相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系
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