一、选择题(13小题)
1.在破碎鸡血细胞时,要先加入20 mL的蒸馏水,其作用是
A.DNA溶解于水中
B.血细胞破裂,释放DNA
C.稀释血液,防止凝固
D.有利于搅拌
【答案】B
【解析】鸡血细胞中液体浓度高于蒸馏水,根据渗透原理,在鸡血细胞液中加入20 mL蒸馏水的作用是让鸡血细胞吸收胀破,从而释放DNA.所以B选项是正确的。
2.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验原理与方法的叙述,错误的是
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随着溶液浓度的变化而变化
B.向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水胀破,释放出其中的DNA
C.把DNA加入二苯胺溶液,在沸水浴中颜色不变,只有冷却后才能观察到蓝色
D.向滤液中加入冷却酒精的目的是除去DNA中的杂质,纯化DNA
【答案】C
3.下列反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的坐标图中正确的是
A. B.
C. D.
【答案】C
【解析】NaCl溶液浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低;NaCl溶液浓度小于0.14 mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐降低;NaCl溶液浓度大于0.14 mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐升高。所以C选项是正确的。
4.下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的是
A.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA不能去除蛋白质
B.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水胀破细胞
C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNA
D.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化
【答案】D
5.右图是利用鸡血粗提取DNA的基本操作,下表中操作目的不能实现的是
【答案】B
【解析】在DNA粗提取实验中,鸡血中加入蒸馏水的目的是使血细胞吸水胀破,A项正确;将烧杯甲中的蒸馏水加入到含DNA的浓(2 mol/L)NaCl溶液的烧杯乙中,其目的是使NaCl溶液的浓度降低至0.14 mol/L,此时DNA在NaCl溶液中的溶解度最小,从而使DNA析出,B项错误;DNA不溶于酒精溶液,细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,据此,将冷却的酒精加入到含DNA的浓NaCl溶液中,可除去溶于酒精中的杂质,C项正确;将烧杯甲中的2 mol/L的NaCl溶液加入到烧杯乙中,纱布上的黏稠物中的DNA会溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,可去除不溶于2 mol/L的NaCl溶液中的杂质,D项正确。
6.在DNA的粗提取和鉴定实验中,有两次DNA的沉淀析出,其依据的原理是
①DNA在NaCl溶液质量浓度为0.14 mol/L时溶解度最低
②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精溶液中能沉淀析出
A.两次都是①
B.两次都是②
C.第一次是①,第二次是②
D.第一次是②,第二次是①
【答案】C
【解析】第一次析出DNA利用的是原理①,因为在这种浓度的NaCl溶液中,DNA的溶解度最低,而蛋白质的溶解度增加,所以通过过滤能将DNA分离开,以除去蛋白质。第二次析出DNA利用的是原理②,即冷酒精能使DNA和蛋白质沉淀。因为这时已基本上无蛋白质。DNA的两次析出所依据的原理不同,且不能前后颠倒。C正确。
【考点定位】DNA的粗提取和鉴定
7.DNA的粗提取与鉴定实验,本实验中有以下三次过滤,分别为了获得
(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液
(2)过滤含黏稠物的0.14 mol/LNaCl溶液
(3)过滤溶解有DNA的2 mol/LNaCl溶液
A.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
B.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的滤液
C.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNA
D.含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
【答案】A
8.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是
A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料
B.DNA既溶于2 mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水
C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物
D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝
【答案】C
【解析】原则上含DNA的生物材料都行,只是DNA含量高的成功的可能性更大,所以酵母和菜花可作为提取DNA的材料,故A正确;DNA在2 mol/LNaCl溶液和蒸馏水中,溶解度较大,故B正确;向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,鸡血细胞会破裂,因DNA在蒸馏水中溶解度较大,故不会析出,C项错误;DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝,故D正确。故选C。
考点:本题考查DNA的粗提取和鉴定,对于此类试题,需要考生注意的细节较多,如实验的原理、实验选择的材料、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等,需要考生在平时的学习过程中注意积累。
9.如图为“DNA粗提取和鉴定实验的相关操作,这些操作目的正确的是
A.①是洗涤红细胞,去除血细胞表面的杂质
B.②是溶解DNA,去除不溶于酒精的杂质
C.③溶解DNA,去除不溶于2 mol/LNaCl溶液的杂质
D.④稀释NaCl溶液,去除不溶于低浓度NaCl溶液的杂质
【答案】C
考点:DNA的粗提取与鉴定实验
【名师点睛】DNA的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”
加蒸馏水2次
①加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水胀破;②加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的物质的量浓度下降到0.14 mol/L,使DNA析出
用纱布过滤3次
①过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;②滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);③过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液
用NaCl溶液4次
①加2mol/L的NaCl溶液,溶解提取的细胞核物质;②用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;③用2 mol/L的NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物;④用2 mol/L的NaCl溶液,溶解丝状物用于鉴定DNA
10.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是
A.加快溶解DNA的速度
B.加快溶解杂质的速度
C.减小DNA的溶解度,加快DNA析出
D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出
【答案】C
【解析】向溶解DNA的氯化钠溶液中加入蒸馏水会使NaCl溶液浓度降低,从而降低DNA的溶解度,使其析出速度加快,故本题正确答案为C。
11.下列材料中不能作为DNA粗提取与鉴定的材料是
猪肝、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、菜花、豌豆、菠菜、高等植物的木质部导管细胞、高等植物的韧皮部筛管细胞
A.有一项
B.有二项
C.有三项
D.有四项
【答案】C
考点:本题主要考查DNA粗提取的相关知识,意在考查考生对所学知识的理解,把握知识间的内在联系的能力。
12.在DNA的粗提取过程中,初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度及其名称分别是
①0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液
②物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液
③物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液
④体积分数为95%的酒精溶液
⑤物质的量浓度为0.015 mol/L的NaCl溶液
⑥物质的量浓度为0.04 mol/L的NaCl溶液
A.①③⑤
B.③④
C.②④
D.②③④
【答案】B
考点:本题考查DNA的粗提取过程的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
13.下列与DNA粗提取与鉴定过程有关的叙述中,正确的是
A.将猪的成熟红细胞置于清水中,红细胞涨破后将DNA释放出来
B.用2 mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后,须保留上清液
C.在提取液中加入75%的冰酒精后蛋白质会与DNA分离并析出
D.将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后溶液迅速变为蓝色
【答案】B
【解析】猪是哺乳动物,其成熟红细胞中没有细胞核和线粒体,即没有DNA,A错误;DNA在2mol/L的氯化钠溶液中溶解度最高,因此用2 mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后,须保留粘稠物保留上清液,B正确;在提取液中加入95%的冰酒精后蛋白质会与DNA分离并析出,C错误;将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后,水浴加热后溶液才会变为蓝色,D错误。
二、非选择题(3小题)
14.某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行DNA粗提取与鉴定的实验,实验主要过程如下图,回答下列问题:
(1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和____________对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是_________________。将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有DNA的滤液。
(2)步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:
①滤液中NaCl浓度在0.14 mol/L时可分离出DNA,若要再次提纯,需要将其溶解在________mol/L的NaCl溶液中;
②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是____________________;
③将得到的DNA粗提取物放在60~75 ℃水浴中保温10~15 min,蛋白质被破坏,但仍能得到纯度较高的DNA,说明了DNA ____________________。
(3)步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是____________________,依据的原理是____________________________________________________________。得到纯净的DNA后,可利用DNA与____________________在沸水浴条件下发生显色反应,来对其进行鉴定。
【答案】(1)食盐(氯化钠) 溶解DNA
(2)①2 ②分解其中的蛋白质 ③具有较高的稳定性(或耐较高温度)
(3)析出DNA DNA不溶于酒精,但酒精可以使蛋白质变性并与DNA分离 二苯胺
15.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。
DNA粗提取:
步骤一:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液(含洗涤剂和食盐),充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。
步骤二:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。
步骤三:取6支试管,分别加入等量的 (填溶液名称及浓度)溶液溶解上述絮状物。
步骤四::在上述试管中各加入4 mL 试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:
分析上述实验过程,回答下列问题:
(1)该探究性实验课题名称是 。
(2)步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是 ,食盐的作用是 。
(3)步骤二中“缓缓地”搅拌,这是为了 ,所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制 的活性,可以防止DNA降解。
(4)上述实验中步骤三、步骤四的空缺分别为 、 。
(5)实验表明, 获取的DNA量最多。
【答案】(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响
(2)溶解细胞膜 溶解DNA
(3)减少(或防止)DNA断裂 DNA水解酶(或核酸水解酶或DNA酶)
(4)2 mol/LNaCl 二苯胺
(5)保存在-20 ℃的蒜黄
【考点定位】DNA粗提取与鉴定。
16.回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。
(1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应
(2)如下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。
①正确的操作顺序是____________________________________。
②上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是__________________和________________。
③图A步骤中所用酒精必须是经过____________才能使用,该步骤的目的是________________________________________________。
(3)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加________试剂,沸水浴,如果出现________________,则该丝状物的主要成分为DNA。
【答案】(1)B
(2)①C→B→E→D→A
②加速血细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出
③充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA
(3)二苯胺 蓝色
【点睛】本题关键要结合DNA的粗提取与鉴定的实验原理进行分析。