课件31张PPT。动物细胞工程人教版 选修三 高二问题讨论: 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植动物细胞培养动物细胞融合生产单克隆抗体核移植动物细胞工程常用技术其它动物细胞工程的基础动物细胞培养和核移植技术韩佳琪，王馨欣，杨文琦，孟浩楠 张学博，于佳汛，田静怡，苗志豪预习反馈 学习目标1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
概念---过程---条件---应用（1）无菌、无毒（抗生素）
（2）全部的营养物质（血清）
（3）适宜的温度和PH值
（4）必要的气体条件（O2和CO2）
（1）蛋白质生物制品的生产
（2）应用于基因工程
（3）检测有毒物质，判断某种物质的毒性
（4）细胞的生理、药理、病理研究,如用于筛选抗癌药物 胰蛋白酶处理取出组织胚胎或幼龄动物器官组织剪碎单个细胞细胞悬液转入培养瓶内培养2：过程图示 动物细胞生长特性：细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，
称为细胞贴壁。
要求：
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
细胞贴壁过程动物细胞生长特性：细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，
称为细胞贴壁。
要求：
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
接触抑制人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。胰蛋白酶处理取出组织胚胎或幼龄动物器官组织剪碎单个细胞细胞悬液转入培养瓶内培养 （ 贴壁生长长成单层细胞。有接触抑制现象）。2：过程图示原代培养胰蛋白酶处理胚胎或幼龄动物器官组织细胞悬液2：过程原代培养稀释、分离胰蛋白酶处理传代培养
当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程）胰蛋白酶处理胚胎或幼龄动物器官组织细胞悬液2：过程原代培养分瓶10代细胞无限传代10-50代细胞
（部分核型改变）传代培养细胞株：一般说遗传物质未改变细胞系：遗传物质已改变所以目前使用的细胞，通常为10代以内，以保持细胞正常二倍体核型。暂时不用可低温保存（液氮）3、蛋白酶的作用是什么呢？为什么用胰蛋白酶处理而不用胃蛋白酶？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？在操作的时候要注意什么问题呢？
1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？因为其细胞生命力旺盛，分裂能力强，分化程度低。2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？存在接触抑制，且可以扩大细胞与培养液的接触面积，利与细胞吸收营养。 蛋白酶水解蛋白质。胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2-8.4，胃蛋白酶适宜PH为2.胃蛋白酶在PH为7.2-7.4的动物细胞培养中无活性。长时间处理会损伤细胞，所以要控制好时间！
思考讨论1、在动物细胞培养过程中，下列哪种现象是不可能的（ ）
A．细胞一直在细胞悬液中分裂生长
B．有少部分细胞可能在培养条件下无限地传代下去
C．有部分细胞核型会发生变化
D. 个别细胞会发生基因突变2、下列过程与细胞培养无关的是------------------（ ）
A.检测有毒物质 B.生产单克隆抗体
C.筛选抗癌药物 D.杂交育种 AD练习：一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
概念---过程---条件---应用（1）无菌、无毒（抗生素）
（2）全部的营养物质（血清）
（3）适宜的温度和PH值
（4）必要的气体条件（O2和CO2）
（1）蛋白质生物制品的生产
（2）应用于基因工程
（3）检测有毒物质，判断某种物质的毒性
（4）细胞的生理、药理、病理研究,如用于筛选抗癌药物 动物细胞培养 能否用动物细胞培养的方法使动物细胞发育成动物个体？完整动物个体全能性受限，分化潜能变弱核移植克隆动物细胞核仍具有全能性中科院神经所孙强研究员（左）和刘真博士 ◆为什么用卵母细胞？ ◆促融方法？◆激活目的？ 有人说它三个母亲过程刘真博士借助显微设备对卵母细胞进行“去核”操作 克隆动物性状与供体动物完全一样吗？它们彼此完全一样吗？不一样！因为：
一、供体动物只提供细胞核，而细胞质中的遗传物质（如线粒体DNA）来自于受体卵母细胞.
二、生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、定义： 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
3、分类： 胚胎核移植、体细胞核移植。胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易。动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难2、原理： 动物细胞核具有全能性5、体细胞核移植技术的应用前景：1.在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的 进程2.保护濒危物种3.医药卫生领域生产医用蛋白质及组织 器官的移植4.了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究 疾病的发展过程和治疗疾病体细胞核移植技术存在的问题：成功率低，许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。练习3：世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。请仔细看图后回答问题：⑴写出 ａ所指的细胞工程名称：ａ
⑵实施细胞工程ａ时，所需的受体细胞大多采用动物卵母细胞的原因是：
⑶多莉面部的毛色是 ，判断依据： 。
⑷若黑面绵羊的基因型为AA,白面绵羊的基因型为aa，则克隆羊的基因型为 。 核移植体积大，易操作。含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。白色多利全部的核基因都来自白面绵羊aa 动物细胞工程
