2018-2019学年人教版高中生物选修三 第二章 细胞工程 单元测试
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| 名称 | 2018-2019学年人教版高中生物选修三 第二章 细胞工程 单元测试 |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 183.6KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（新课程标准） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2019-01-22 12:29:03 | ||
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文档简介
2018-2019学年人教版高中生物选修三 第二章 细胞工程 单元测试
一、单选题
1.下列有关动植物细胞工程的叙述，不正确的是(? )
A.?动物细胞融合过程中，常用的诱导因素有灭活的病毒、PEG等 B.?动物细胞培养过程中，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块 C.?植物组织培养过程中，需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁 D.?植物体细胞杂交过程中，需要用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种细胞
2.下图是两种二倍体植物细胞(甲、乙)融合并培育新植株的过程，有关分析正确的是 /
A.?过程①需要将植物组织置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中，且溶液中的渗透压应大于细胞液渗透压 B.?过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基 C.?过程②要用聚乙二醇等方法诱导原生质体融合，主要依据细胞膜具有选择透过性原理 D.?最终得到的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目的变异，不具有可育性
3.关于单克隆抗体的说法，不正确的是 ①免疫的淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合后杂交细胞产生的抗体 ②单克隆抗体制备过程中经过两次筛选 ③由于淋巴B细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞不能产生抗体，所以它们融合后产生的抗体叫单克隆抗体，不叫多克隆抗体 ④化学性质单一，特异性强，可用于防病、治病 ⑤单一的抗原进入动物体内后，从动物体内提取的抗体
A.?②⑤ B.?②④ C.?③⑤ D.?①③④
4.英国科学家米尔斯坦和柯勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，如图为其实验流程图．下列叙述不正确的是（ ） /
A.?①过程只能用灭活的病毒诱导融合 ??/B.?a是骨髓瘤细胞，②过程表示对融合细胞进行筛选 C.?③过程如在体外培养，培养基中需加入动物血清或血浆 ??/D.?选择B淋巴细胞是因为一种B淋巴细胞只产生一种特异性抗体
5.卵细胞作为生殖细胞，在生物技术中可用于（ ） ①克隆动物时细胞核的受体； ②进行体外受精，培育试管动物； ③形成受精卵，作为培育转基因动物的受体细胞； ④植物组织培养形成试管苗； ⑤动物细胞融合形成单克隆抗体； ⑥形成受精卵，利用转基因和植物组织培养，培育抗虫棉植株．
A.?①②③④ /B.?③④⑤⑥ ??/C.?①③⑤⑥ ???/D.?①②③⑥
6.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A.?用纯化的外壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B.?体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C.?将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.?利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
7.下列四个选项中，肯定没有采用植物组织培养技术的一项是（???）
A.?花药离体培养得到单倍体植株 /B.?细胞工程培育“番茄——马铃薯”杂种植株 C.?基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株 ??D.?秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株
8.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（??）
A.?与抗癌药物结合可制成生物导弹 ?/B.?体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 C.?特异性强、灵敏度高 ???D.?由浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌
9.下列关于细胞工程的叙述，错误的是( )
A.?电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.?去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.?小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.?某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同
10.某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是（???）
A.?在利用两种肝组织块制备肝细 胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理 B.?细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸 C.?甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象 D.?仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒
11.在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，最主要的原因是
A.?卵母细胞大，便于操作 ???B.?卵母细胞含有的营养物质多 C.?卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达 ?/D.?卵母细胞才具有全能性
12.研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（ ）
A.?利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 ??B.?以单克隆抗体做抗癌药物杀死癌细胞 C.?抗癌物质在单克隆细胞中大量合成 ?/D.?单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合
二、填空题
13.人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断．图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答： （1）制备单克隆抗体过程中要用到________?和________技术． （2）在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断．而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径．利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________? （3）哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为________?；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行________?以及移植后的检查等步骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行________处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生________反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能． /
14.如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题． / （1）克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是________?技术． （2）受精卵体外培养所需的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________?等物质． （3）如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用________?技术将药用蛋白基因导入________?中，在检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是________?技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定． （4）纯种荷斯坦奶牛的胚胎能在受体黄牛的子宫内存活并正常发育的生理原因是________
15.新兴生物工程能使免疫学在应用方面更上一层楼，为人类带来福音．一方面新兴生物工程可以为免疫活性物质及疫苗的制备开辟新途径，解决免疫治疗及免疫预防方面的难题；另一方面，新兴生物工程还可以为解决器官移植所面临的供体不足和免疫排斥两大难题提供可能． （1）利用________?技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径，与传统方法获取的同类产品相比，它的显著优点是________? （2）干扰素及部分疫苗都可以通过________?技术制造的工程菌来大规模生产，如国内应用较普遍的重组CHO乙肝疫苗； （3）对大面积烧伤病人，借助________?技术可获取大量自身健康皮肤用于移植． （4）通过向供体动物基因组中导入某种调节因子，以抑制________?的表达，或设法将之去除，再结合________?技术，可培育出无免疫排斥的转基因猪器官； （5）________?的分离和培养成功也为解决上述难题开辟了新途径，因其具有________?性，可在体外诱导分化产生各种人造组织器官．
三、实验探究题
16.某实验室做了下图所示的实验研究,请据图回答: /
（1）与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较________。
（2）过程②是诱导干细胞中基因________的结果。
（3）过程③需要用________进行筛选,得到的Z细胞还需进行________培养和________,经多次筛选,就可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）科学家找到一种“无限增殖调控基因”能激发细胞不断分裂,通过基因工程技术将该基因导入待定的________细胞(填细胞名称),来制备单克隆抗体,基因导入并成功表达后,该细胞将具有________的特点,在上述操作中用到了PCR扩增仪,其作用是________。
四、综合题
17.下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究．据图回答相关问题． /
（1）图中Y细胞的名称是________。
（2）①过程类似于植物组织培养技术中的________过程。②过程的实质是________。
（3）③过程中需用到的生物诱导剂是________。
（4）④处需要筛选，其目的是________。
（5）若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能检测到放射性32P的细胞器是________． 研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。
（6）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如下图所示。制备免疫小鼠所用的 H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入原核细胞表达并提纯。 /
18.以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。 /
（1）上图中过程①的完成采用的方法有:________，依据的生物学原理________。
（2）过程④要用到的酶有________，过程⑥采用的方法叫________。 上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。
分子量(kb)
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
酶M
+
+
+
酶N
+
+
酶M+酶N
+
+
+
+
+
凝胶电泳结果（1kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在）
（3）该质粒长度为________kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有________、________个。
（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是________。
答案解析部分
一、单选题
1.【答案】C
【解析】【分析】动物细胞融合过程中，常用电激、灭活的病毒、PEG等方法诱导细胞融合；动物细胞培养过程中，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块，水解组织细胞之间的糖蛋白，从而使组织细胞分散开；在植物体细胞杂交过程中，需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；植物体细胞杂交过程中，需要用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种细胞，诱导杂种细胞脱分化和再分化过程。故本题错误答案选C。 【点评】本题考查了细胞工程的相关技术，属于对识记、区分层次的考查。
2.【答案】B
【解析】【分析】过程①是去除细胞壁，要置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中，且溶液中的渗透压应等于细胞液渗透压，使细胞维持正常形态，A错误；过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基，诱导生芽、生根，?B正确；诱导原生质体融合主要依据细胞膜具有流动性的原理，C错误；最终得到的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异，由于存在同源染色体，故具有可育性，D错误。
3.【答案】C
【解析】【分析】单克隆抗体是免疫的淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合后杂交瘤细胞产生的抗体，故①正确；单克隆抗体制备过程中经过两次筛选，第一次是筛选得到杂交瘤细胞；第二次是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故②正确；因为杂交瘤细胞产生的抗体化学性质单一、特异性强，所以叫单克隆抗体，故③错；单克隆抗体可以作为诊断试剂，可以用于防病、治病和运载药物，故④正确；单一的抗原进入动物体内后，从动物体内提取的抗体不能称为单克隆抗体，故⑤错；故选C
4.【答案】A
【解析】【解答】解：A、①过程为动物细胞的融合，除了能用灭活的病毒诱导融合，还能用聚乙二醇等诱导融合，A符合题意； B、a是骨髓瘤细胞，②过程表示对融合细胞进行筛选，B不符合题意； C、③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养过程，如在体外培养，培养基中需加入动物血清或血浆，C不符合题意； D、选择B淋巴细胞是因为一种B淋巴细胞只产生一种特异性抗体，D不符合题意． 故答案为：A． 【分析】1、单克隆抗体制备流程： （1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2）得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体． 2、分析题图：a细胞是小鼠骨髓瘤细胞；b表示诱导细胞融合杂交瘤细胞；c表示筛选出的杂交瘤细胞；①过程是细胞融合，②表示在选择性培养基上进行培养，③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养．
5.【答案】D
【解析】【解答】①在细胞核移植过程中，可以将供体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，①正确； ②卵细胞在体外环境中可以与获能的精子完成受精作用，②正确； ③在基因工程中，可以将目的基因导入到受精卵中，获得转基因生物，③正确； ④通常采用花药离体培养获得单倍体植株，④错误； ⑤单克隆抗体的制备过程中，是用浆细胞与骨髓瘤细胞融合，⑤错误． ⑥卵细胞可以和精子受精形成受精卵，利用转基因和植物组织培养，培育抗虫棉植株，⑥正确． 故选：D． 【分析】细胞核移植过程中，可以将供体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中；卵细胞在体外环境中可以与获能的精子完成受精作用；在基因工程中，可以将 目的基因导入到受精卵中，获得转基因生物；通常采用花药离体培养获得单倍体植株；单克隆抗体的制备过程中，是用浆细胞与骨髓瘤细胞融合．
6.【答案】D
【解析】【分析】单克隆抗体由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，故A错；B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，故B错；将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不完全是杂交瘤细胞，也有B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，故C错；利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法（即抗体—抗原杂交技术)，可诊断出病毒感染者，故D正确。
7.【答案】D
【解析】【分析】植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性。植物组织培养是无性繁殖，可以保持生物体的优良性状。优点：繁殖速度快；“高保真”不受自然生长的限制。用花药进行离体培养，可获得单倍体植株；通过植物体细胞杂交获得“番茄——马铃薯”杂种细胞需要进行植物组织培养得到植株；通过基因工程获得的抗棉铃虫的受体细胞，需要进行植物组织培养得到棉花植株；而秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于植株的正常生长，不需要进行植物组织培养，故选D。 【点评】本题较简单，要求学生识记植物细胞工程中植物组织培养技术的相关知识，考查学生运用植物组织培养技术分析和解决实际问题的能力。
8.【答案】B
【解析】【分析】 A. 单克隆抗体 + 放射性同位素、化学药物或细胞毒素可制成生物导弹，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确；正确。? B. B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；体外培养杂交瘤细胞不可大量分泌单克隆抗体；错误。 C.特单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备；正确。 ??? D.由浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞，既能大量增殖，又能产生特异性抗体；正确 【点评】考查基本，来自课本，是基础知识考试的理想题目，学生应理解加记忆。
9.【答案】D
【解析】【解答】电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，体现细胞膜的流动性，故A正确；纤维素酶或者果胶酶去除植物细胞的细胞壁，用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理，将动物组织分散成单个细胞，故B正确；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合形成的杂交瘤细胞，即能无限繁殖，又能产生特异性抗体，故C正确；植物体细胞杂交得到的杂种植株染色体数目为二者染色体数目之和，而甲乙两品种杂交后代的染色体数目为二者的配子的染色体数目之和，故D错误。【分析】本题考查细胞工程的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
10.【答案】C
【解析】【分析】制备肝细胞悬浮液时应用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；A错误。CO2的作用是调节细胞培养液的pH值；B错误。；由于存在细胞接触抑制现象，在原代培养过程中，乙最先会出现停止增殖的现象，由于营养物质的消耗和有害代谢产物的积累，甲细胞也会出现停止增殖的现象；C正确。病毒在活细胞内才能增殖，不能用培养细胞的培养液进行培养；D错误。 【点评】本题综合性强，突出理解、分析和推理能力的培养。
11.【答案】C
【解析】【分析】选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作；卵（母）细胞细胞质多，营养丰富；卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达。其中卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达最主要。故C正确。
12.【答案】D
【解析】【解答】解：单克隆抗体主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”．生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素或化学药物或细胞毒素，这其实是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，靠药物在原位杀死癌细胞．这种治疗疗效高，副作用小，位置准确． 故选：D． 【分析】单克隆抗体的作用： ①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点． ②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”．
二、填空题
13.【答案】?动物细胞培养 ；动物细胞融合；氨基嘌呤??；能无限增殖并分泌特异性抗体；早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态；检查，培养或保存；同期发情；免疫排斥
【解析】【解答】解：（1）制备单克隆抗体的过程涉及到动物细胞融合和动物细胞培养两个过程． （2） 根据题意可知，在培养基中添加氨基嘌呤后，可以阻断DNA复制的主要途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径，因此在此培养基中选择生存下来的细胞只有融合后的杂交瘤细胞，因为只有杂交细胞才能进行辅助途径进行DNA复制并分裂增殖．杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体． （3） 哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态，没有与母体子宫建立组织上的联系，这样为胚胎的收集提供了可能．在胚胎移植技术中，收集到胚胎后要 先进行检查、培养或保存，然后再进行移植，以及移植后的检查等步骤．胚胎移植时可利用激素对受体进行同期发情处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥，为胚胎在受体内的存活提供了可能． 【分析】1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体． 2、 胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响．
14.【答案】核移植；动物血清；显微注射；受精卵；DNA分子杂交；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系
【解析】【解答】解：（1）克隆动物采用的技术主要是核移植技术，为无性生殖． （2）早期胚胎的培养过程中，培养液中需加入动物血清或血浆． （3）将目的基因导入动物细胞常用的技术是显微注射技术，受体细胞通常是受精卵，DNA分子杂交技术可用于检测目的基因是否导入． （4）纯种荷斯坦奶牛的胚胎能在受体黄牛的子宫内存活并正常发育的生理原因是：受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系 【分析】1、利用核移植技术获得的克隆动物属于无性繁殖的产物；而利用人工授精、胚胎移植获得的动物属于有性生殖． 2、动物细胞培养的培养基成分一般包括：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质． 3、胚胎移植的生理学基础： （1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境； （2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能； （3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能． （4）胚胎遗传性状不受受体任何影响．
15.【答案】?细胞融合 ??；特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）；转基因（基因工程）；动物细胞培养；抗原决定基因??；克隆；胚胎干细胞?；全能性
【解析】【解答】（1）利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径．单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）． （2）工程菌是基因工程中常用的受体细胞． （3）大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植． （4）利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体． （5）胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植． 【分析】利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径．单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）； 工程菌是基因工程中常用的受体细胞；大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植；利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器 官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体；胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植．
三、实验探究题
16.【答案】（1）高 （2）选择性表达 （3）选择性培养基；克隆化；抗体检测 （4）浆(受体)；既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体；大量获得目的基因
【解析】【解答】(1)纤维母细胞为体细胞,与之相比,诱导干细胞的全能性较高。(2)过程②是诱导干细胞的分化,实质是基因选择性表达的结果。(3)过程③需要用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞(Z细胞),得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,才能得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(4)浆细胞中导入“无限增殖调控基因”,使其既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体,可用于制备单克隆抗体。PCR扩增仪用于扩增特定DNA,可获得大量目的基因。 【分析】解答此题要理清单克隆抗体的制备过程 /
四、综合题
17.【答案】（1）抗原刺激过的B淋巴细胞(或已免疫的B淋巴细胞) （2）脱分化；基因的选择性表达 （3）灭活的病毒 （4）筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 （5）核糖体、线粒体 （6）低表达；胞外
【解析】【解答】（1）获得单抗应用抗原刺激过的B淋巴细胞(或已免疫的B淋巴细胞)与具有无限增殖能力的细胞进行融合。（2）①过程中已分化的纤维母细胞恢复分裂能力，成为干细胞，类似于植物组织培养技术中的脱分化过程。②过程中诱导干细胞分化为各种细胞，实质是基因的选择性表达。（3）③过程中诱导动物细胞融合常用的的生物诱导剂是灭活病毒。（4）④处需要从融合细胞中筛选出既能产生特异性抗体又能无限增殖的细胞。（5）含放射性32P标记的核苷酸包括核糖核苷酸和脱氧核苷酸，可参与DNA和RNA的合成，含有核酸的动物细胞的细胞器包括核糖体、线粒体。（6）H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达，在成年个体的正常组织中应是低表达。制备免疫小鼠所用的H蛋白(抗原)时，应构建胞外区基因，以便机体免疫细胞的识别。 【分析】理清单克隆抗体的制备过程 /
18.【答案】（1）用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒；细胞膜具有流动性 （2）逆转录酶、DNA聚合酶；感受态法? （3）16；3；2 （4）作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）
【解析】【解答】解：(1) 过程①是诱导动物细胞融合，采用的方法有:用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒，依据的生物学原理是细胞膜具有流动性。(2) 过程④为逆转录，要用到的酶有逆转录酶、DNA聚合酶。过程⑥为将构建的重组质粒导入大肠杆菌细胞内，最常用的转化方法是用CaCl2或Ca2+处理，增大细胞壁的通透性,使其成为感受态细胞，即采用的方法叫感受态法。(3)上图中的质粒为环状DNA。表中信息显示：单独用限制酶M切割，得到1.0、5.0和10.0 kb的3个片段，说明有3个酶M的切割点；单独用限制酶N切割，得到7.0和9.0 kb的2个片段，说明有2个酶N的切割点。综上分析，该质粒长度为1.0＋5.0＋10.0＝16.0 kb。(4) 氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）。 【分析】本题以“制备抗体的两个途径模式简图”为情境，综合考查学生对基因工程、生产单克隆抗体等相关知识的识记和理解能力。据图分析，细胞A表示效应B细胞，细胞Y表示杂交瘤细胞，结构甲表示基因表达载体，①过程表示动物细胞融合，②过程表示杂交瘤细胞的培养，③过程表示提取信使RNA，④过程表示逆转录，⑤表示基因表达载体的构建，⑥表示导入受体细胞．分析表格和审清题意是解答本题的切入点．题干中提出，mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，因此限制酶在切割时，用酶M得到3个片段，则有3个切点，用酶N得到2个片段，则有2个切点．
一、单选题
1.下列有关动植物细胞工程的叙述，不正确的是(? )
A.?动物细胞融合过程中，常用的诱导因素有灭活的病毒、PEG等 B.?动物细胞培养过程中，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块 C.?植物组织培养过程中，需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁 D.?植物体细胞杂交过程中，需要用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种细胞
2.下图是两种二倍体植物细胞(甲、乙)融合并培育新植株的过程，有关分析正确的是 /
A.?过程①需要将植物组织置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中，且溶液中的渗透压应大于细胞液渗透压 B.?过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基 C.?过程②要用聚乙二醇等方法诱导原生质体融合，主要依据细胞膜具有选择透过性原理 D.?最终得到的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目的变异，不具有可育性
3.关于单克隆抗体的说法，不正确的是 ①免疫的淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合后杂交细胞产生的抗体 ②单克隆抗体制备过程中经过两次筛选 ③由于淋巴B细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞不能产生抗体，所以它们融合后产生的抗体叫单克隆抗体，不叫多克隆抗体 ④化学性质单一，特异性强，可用于防病、治病 ⑤单一的抗原进入动物体内后，从动物体内提取的抗体
A.?②⑤ B.?②④ C.?③⑤ D.?①③④
4.英国科学家米尔斯坦和柯勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，如图为其实验流程图．下列叙述不正确的是（ ） /
A.?①过程只能用灭活的病毒诱导融合 ??/B.?a是骨髓瘤细胞，②过程表示对融合细胞进行筛选 C.?③过程如在体外培养，培养基中需加入动物血清或血浆 ??/D.?选择B淋巴细胞是因为一种B淋巴细胞只产生一种特异性抗体
5.卵细胞作为生殖细胞，在生物技术中可用于（ ） ①克隆动物时细胞核的受体； ②进行体外受精，培育试管动物； ③形成受精卵，作为培育转基因动物的受体细胞； ④植物组织培养形成试管苗； ⑤动物细胞融合形成单克隆抗体； ⑥形成受精卵，利用转基因和植物组织培养，培育抗虫棉植株．
A.?①②③④ /B.?③④⑤⑥ ??/C.?①③⑤⑥ ???/D.?①②③⑥
6.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A.?用纯化的外壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B.?体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C.?将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.?利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
7.下列四个选项中，肯定没有采用植物组织培养技术的一项是（???）
A.?花药离体培养得到单倍体植株 /B.?细胞工程培育“番茄——马铃薯”杂种植株 C.?基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株 ??D.?秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株
8.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（??）
A.?与抗癌药物结合可制成生物导弹 ?/B.?体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 C.?特异性强、灵敏度高 ???D.?由浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌
9.下列关于细胞工程的叙述，错误的是( )
A.?电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.?去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.?小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.?某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同
10.某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是（???）
A.?在利用两种肝组织块制备肝细 胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理 B.?细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸 C.?甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象 D.?仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒
11.在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，最主要的原因是
A.?卵母细胞大，便于操作 ???B.?卵母细胞含有的营养物质多 C.?卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达 ?/D.?卵母细胞才具有全能性
12.研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（ ）
A.?利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 ??B.?以单克隆抗体做抗癌药物杀死癌细胞 C.?抗癌物质在单克隆细胞中大量合成 ?/D.?单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合
二、填空题
13.人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断．图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答： （1）制备单克隆抗体过程中要用到________?和________技术． （2）在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断．而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径．利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________? （3）哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为________?；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行________?以及移植后的检查等步骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行________处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生________反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能． /
14.如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题． / （1）克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是________?技术． （2）受精卵体外培养所需的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________?等物质． （3）如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用________?技术将药用蛋白基因导入________?中，在检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是________?技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定． （4）纯种荷斯坦奶牛的胚胎能在受体黄牛的子宫内存活并正常发育的生理原因是________
15.新兴生物工程能使免疫学在应用方面更上一层楼，为人类带来福音．一方面新兴生物工程可以为免疫活性物质及疫苗的制备开辟新途径，解决免疫治疗及免疫预防方面的难题；另一方面，新兴生物工程还可以为解决器官移植所面临的供体不足和免疫排斥两大难题提供可能． （1）利用________?技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径，与传统方法获取的同类产品相比，它的显著优点是________? （2）干扰素及部分疫苗都可以通过________?技术制造的工程菌来大规模生产，如国内应用较普遍的重组CHO乙肝疫苗； （3）对大面积烧伤病人，借助________?技术可获取大量自身健康皮肤用于移植． （4）通过向供体动物基因组中导入某种调节因子，以抑制________?的表达，或设法将之去除，再结合________?技术，可培育出无免疫排斥的转基因猪器官； （5）________?的分离和培养成功也为解决上述难题开辟了新途径，因其具有________?性，可在体外诱导分化产生各种人造组织器官．
三、实验探究题
16.某实验室做了下图所示的实验研究,请据图回答: /
（1）与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较________。
（2）过程②是诱导干细胞中基因________的结果。
（3）过程③需要用________进行筛选,得到的Z细胞还需进行________培养和________,经多次筛选,就可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）科学家找到一种“无限增殖调控基因”能激发细胞不断分裂,通过基因工程技术将该基因导入待定的________细胞(填细胞名称),来制备单克隆抗体,基因导入并成功表达后,该细胞将具有________的特点,在上述操作中用到了PCR扩增仪,其作用是________。
四、综合题
17.下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究．据图回答相关问题． /
（1）图中Y细胞的名称是________。
（2）①过程类似于植物组织培养技术中的________过程。②过程的实质是________。
（3）③过程中需用到的生物诱导剂是________。
（4）④处需要筛选，其目的是________。
（5）若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能检测到放射性32P的细胞器是________． 研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。
（6）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如下图所示。制备免疫小鼠所用的 H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入原核细胞表达并提纯。 /
18.以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。 /
（1）上图中过程①的完成采用的方法有:________，依据的生物学原理________。
（2）过程④要用到的酶有________，过程⑥采用的方法叫________。 上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。
分子量(kb)
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
酶M
+
+
+
酶N
+
+
酶M+酶N
+
+
+
+
+
凝胶电泳结果（1kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在）
（3）该质粒长度为________kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有________、________个。
（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是________。
答案解析部分
一、单选题
1.【答案】C
【解析】【分析】动物细胞融合过程中，常用电激、灭活的病毒、PEG等方法诱导细胞融合；动物细胞培养过程中，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块，水解组织细胞之间的糖蛋白，从而使组织细胞分散开；在植物体细胞杂交过程中，需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；植物体细胞杂交过程中，需要用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种细胞，诱导杂种细胞脱分化和再分化过程。故本题错误答案选C。 【点评】本题考查了细胞工程的相关技术，属于对识记、区分层次的考查。
2.【答案】B
【解析】【分析】过程①是去除细胞壁，要置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中，且溶液中的渗透压应等于细胞液渗透压，使细胞维持正常形态，A错误；过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基，诱导生芽、生根，?B正确；诱导原生质体融合主要依据细胞膜具有流动性的原理，C错误；最终得到的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异，由于存在同源染色体，故具有可育性，D错误。
3.【答案】C
【解析】【分析】单克隆抗体是免疫的淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合后杂交瘤细胞产生的抗体，故①正确；单克隆抗体制备过程中经过两次筛选，第一次是筛选得到杂交瘤细胞；第二次是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故②正确；因为杂交瘤细胞产生的抗体化学性质单一、特异性强，所以叫单克隆抗体，故③错；单克隆抗体可以作为诊断试剂，可以用于防病、治病和运载药物，故④正确；单一的抗原进入动物体内后，从动物体内提取的抗体不能称为单克隆抗体，故⑤错；故选C
4.【答案】A
【解析】【解答】解：A、①过程为动物细胞的融合，除了能用灭活的病毒诱导融合，还能用聚乙二醇等诱导融合，A符合题意； B、a是骨髓瘤细胞，②过程表示对融合细胞进行筛选，B不符合题意； C、③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养过程，如在体外培养，培养基中需加入动物血清或血浆，C不符合题意； D、选择B淋巴细胞是因为一种B淋巴细胞只产生一种特异性抗体，D不符合题意． 故答案为：A． 【分析】1、单克隆抗体制备流程： （1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2）得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体． 2、分析题图：a细胞是小鼠骨髓瘤细胞；b表示诱导细胞融合杂交瘤细胞；c表示筛选出的杂交瘤细胞；①过程是细胞融合，②表示在选择性培养基上进行培养，③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养．
5.【答案】D
【解析】【解答】①在细胞核移植过程中，可以将供体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，①正确； ②卵细胞在体外环境中可以与获能的精子完成受精作用，②正确； ③在基因工程中，可以将目的基因导入到受精卵中，获得转基因生物，③正确； ④通常采用花药离体培养获得单倍体植株，④错误； ⑤单克隆抗体的制备过程中，是用浆细胞与骨髓瘤细胞融合，⑤错误． ⑥卵细胞可以和精子受精形成受精卵，利用转基因和植物组织培养，培育抗虫棉植株，⑥正确． 故选：D． 【分析】细胞核移植过程中，可以将供体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中；卵细胞在体外环境中可以与获能的精子完成受精作用；在基因工程中，可以将 目的基因导入到受精卵中，获得转基因生物；通常采用花药离体培养获得单倍体植株；单克隆抗体的制备过程中，是用浆细胞与骨髓瘤细胞融合．
6.【答案】D
【解析】【分析】单克隆抗体由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，故A错；B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，故B错；将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不完全是杂交瘤细胞，也有B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，故C错；利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法（即抗体—抗原杂交技术)，可诊断出病毒感染者，故D正确。
7.【答案】D
【解析】【分析】植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性。植物组织培养是无性繁殖，可以保持生物体的优良性状。优点：繁殖速度快；“高保真”不受自然生长的限制。用花药进行离体培养，可获得单倍体植株；通过植物体细胞杂交获得“番茄——马铃薯”杂种细胞需要进行植物组织培养得到植株；通过基因工程获得的抗棉铃虫的受体细胞，需要进行植物组织培养得到棉花植株；而秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于植株的正常生长，不需要进行植物组织培养，故选D。 【点评】本题较简单，要求学生识记植物细胞工程中植物组织培养技术的相关知识，考查学生运用植物组织培养技术分析和解决实际问题的能力。
8.【答案】B
【解析】【分析】 A. 单克隆抗体 + 放射性同位素、化学药物或细胞毒素可制成生物导弹，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确；正确。? B. B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；体外培养杂交瘤细胞不可大量分泌单克隆抗体；错误。 C.特单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备；正确。 ??? D.由浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞，既能大量增殖，又能产生特异性抗体；正确 【点评】考查基本，来自课本，是基础知识考试的理想题目，学生应理解加记忆。
9.【答案】D
【解析】【解答】电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，体现细胞膜的流动性，故A正确；纤维素酶或者果胶酶去除植物细胞的细胞壁，用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理，将动物组织分散成单个细胞，故B正确；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合形成的杂交瘤细胞，即能无限繁殖，又能产生特异性抗体，故C正确；植物体细胞杂交得到的杂种植株染色体数目为二者染色体数目之和，而甲乙两品种杂交后代的染色体数目为二者的配子的染色体数目之和，故D错误。【分析】本题考查细胞工程的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
10.【答案】C
【解析】【分析】制备肝细胞悬浮液时应用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；A错误。CO2的作用是调节细胞培养液的pH值；B错误。；由于存在细胞接触抑制现象，在原代培养过程中，乙最先会出现停止增殖的现象，由于营养物质的消耗和有害代谢产物的积累，甲细胞也会出现停止增殖的现象；C正确。病毒在活细胞内才能增殖，不能用培养细胞的培养液进行培养；D错误。 【点评】本题综合性强，突出理解、分析和推理能力的培养。
11.【答案】C
【解析】【分析】选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作；卵（母）细胞细胞质多，营养丰富；卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达。其中卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达最主要。故C正确。
12.【答案】D
【解析】【解答】解：单克隆抗体主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”．生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素或化学药物或细胞毒素，这其实是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，靠药物在原位杀死癌细胞．这种治疗疗效高，副作用小，位置准确． 故选：D． 【分析】单克隆抗体的作用： ①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点． ②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”．
二、填空题
13.【答案】?动物细胞培养 ；动物细胞融合；氨基嘌呤??；能无限增殖并分泌特异性抗体；早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态；检查，培养或保存；同期发情；免疫排斥
【解析】【解答】解：（1）制备单克隆抗体的过程涉及到动物细胞融合和动物细胞培养两个过程． （2） 根据题意可知，在培养基中添加氨基嘌呤后，可以阻断DNA复制的主要途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径，因此在此培养基中选择生存下来的细胞只有融合后的杂交瘤细胞，因为只有杂交细胞才能进行辅助途径进行DNA复制并分裂增殖．杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体． （3） 哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态，没有与母体子宫建立组织上的联系，这样为胚胎的收集提供了可能．在胚胎移植技术中，收集到胚胎后要 先进行检查、培养或保存，然后再进行移植，以及移植后的检查等步骤．胚胎移植时可利用激素对受体进行同期发情处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥，为胚胎在受体内的存活提供了可能． 【分析】1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体． 2、 胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响．
14.【答案】核移植；动物血清；显微注射；受精卵；DNA分子杂交；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系
【解析】【解答】解：（1）克隆动物采用的技术主要是核移植技术，为无性生殖． （2）早期胚胎的培养过程中，培养液中需加入动物血清或血浆． （3）将目的基因导入动物细胞常用的技术是显微注射技术，受体细胞通常是受精卵，DNA分子杂交技术可用于检测目的基因是否导入． （4）纯种荷斯坦奶牛的胚胎能在受体黄牛的子宫内存活并正常发育的生理原因是：受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系 【分析】1、利用核移植技术获得的克隆动物属于无性繁殖的产物；而利用人工授精、胚胎移植获得的动物属于有性生殖． 2、动物细胞培养的培养基成分一般包括：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质． 3、胚胎移植的生理学基础： （1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境； （2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能； （3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能． （4）胚胎遗传性状不受受体任何影响．
15.【答案】?细胞融合 ??；特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）；转基因（基因工程）；动物细胞培养；抗原决定基因??；克隆；胚胎干细胞?；全能性
【解析】【解答】（1）利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径．单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）． （2）工程菌是基因工程中常用的受体细胞． （3）大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植． （4）利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体． （5）胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植． 【分析】利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径．单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）； 工程菌是基因工程中常用的受体细胞；大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植；利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器 官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体；胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植．
三、实验探究题
16.【答案】（1）高 （2）选择性表达 （3）选择性培养基；克隆化；抗体检测 （4）浆(受体)；既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体；大量获得目的基因
【解析】【解答】(1)纤维母细胞为体细胞,与之相比,诱导干细胞的全能性较高。(2)过程②是诱导干细胞的分化,实质是基因选择性表达的结果。(3)过程③需要用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞(Z细胞),得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,才能得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(4)浆细胞中导入“无限增殖调控基因”,使其既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体,可用于制备单克隆抗体。PCR扩增仪用于扩增特定DNA,可获得大量目的基因。 【分析】解答此题要理清单克隆抗体的制备过程 /
四、综合题
17.【答案】（1）抗原刺激过的B淋巴细胞(或已免疫的B淋巴细胞) （2）脱分化；基因的选择性表达 （3）灭活的病毒 （4）筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 （5）核糖体、线粒体 （6）低表达；胞外
【解析】【解答】（1）获得单抗应用抗原刺激过的B淋巴细胞(或已免疫的B淋巴细胞)与具有无限增殖能力的细胞进行融合。（2）①过程中已分化的纤维母细胞恢复分裂能力，成为干细胞，类似于植物组织培养技术中的脱分化过程。②过程中诱导干细胞分化为各种细胞，实质是基因的选择性表达。（3）③过程中诱导动物细胞融合常用的的生物诱导剂是灭活病毒。（4）④处需要从融合细胞中筛选出既能产生特异性抗体又能无限增殖的细胞。（5）含放射性32P标记的核苷酸包括核糖核苷酸和脱氧核苷酸，可参与DNA和RNA的合成，含有核酸的动物细胞的细胞器包括核糖体、线粒体。（6）H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达，在成年个体的正常组织中应是低表达。制备免疫小鼠所用的H蛋白(抗原)时，应构建胞外区基因，以便机体免疫细胞的识别。 【分析】理清单克隆抗体的制备过程 /
18.【答案】（1）用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒；细胞膜具有流动性 （2）逆转录酶、DNA聚合酶；感受态法? （3）16；3；2 （4）作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）
【解析】【解答】解：(1) 过程①是诱导动物细胞融合，采用的方法有:用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒，依据的生物学原理是细胞膜具有流动性。(2) 过程④为逆转录，要用到的酶有逆转录酶、DNA聚合酶。过程⑥为将构建的重组质粒导入大肠杆菌细胞内，最常用的转化方法是用CaCl2或Ca2+处理，增大细胞壁的通透性,使其成为感受态细胞，即采用的方法叫感受态法。(3)上图中的质粒为环状DNA。表中信息显示：单独用限制酶M切割，得到1.0、5.0和10.0 kb的3个片段，说明有3个酶M的切割点；单独用限制酶N切割，得到7.0和9.0 kb的2个片段，说明有2个酶N的切割点。综上分析，该质粒长度为1.0＋5.0＋10.0＝16.0 kb。(4) 氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）。 【分析】本题以“制备抗体的两个途径模式简图”为情境，综合考查学生对基因工程、生产单克隆抗体等相关知识的识记和理解能力。据图分析，细胞A表示效应B细胞，细胞Y表示杂交瘤细胞，结构甲表示基因表达载体，①过程表示动物细胞融合，②过程表示杂交瘤细胞的培养，③过程表示提取信使RNA，④过程表示逆转录，⑤表示基因表达载体的构建，⑥表示导入受体细胞．分析表格和审清题意是解答本题的切入点．题干中提出，mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，因此限制酶在切割时，用酶M得到3个片段，则有3个切点，用酶N得到2个片段，则有2个切点．