2018-2019学年高二下学期专题二训练卷
生 物 （一）
注意事项：
1．答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2．选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
3．非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。
一、选择题（本题包括20小题，每小题3分，共60分，每小题只有一个选项最符合题意）
1．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是（ ）
A．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解
B．等培养基冷却50℃左右时进行倒平板
C．待平板冷却凝固5～10 分钟后将平板倒过来放置
D．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
2．现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分如下表：用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，它们适于分离的是（ ）
A．甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌
B．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌
C．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌
D．甲培养基适于分离异养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌
3．从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括（ ）
A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基
B．根据微生物对特殊营养物的需求，在培养基中增减不同的特殊营养物
C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素
D．根据微生物耐热性的不同，利用高温、高压消灭不需要的杂菌
4．微生物的接种技术有很多，有关常用的两种微生物接种方法的叙述不正确的是（ ）
A．只能应用于固体培养基接种
B．都可以用于微生物的计数
C．接种培养后均可获得单菌落
D．接种用具都需进行严格灭菌
5．无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是（ ）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌
B．将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
6．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（ ）
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥ B．⑤①②③④⑥
C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
7．下列关于微生物的培养和应用的叙述正确的是（ ）
A．配制培养基时应先调PH后灭菌
B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C．培养基中加入伊红—美蓝试剂，长出的菌落为大肠杆菌菌落
D．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
8．下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A．制备①步骤使用的培养基过程是先灭菌再调pH
B．②③④步骤操作时只需要在接种前和划线结束后灼烧灭菌
C．操作③到④的过程中，接种环共灼烧处理了 5 次
D．接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息
9．下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述错误的是（ ）
A．在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH值后高压蒸汽灭菌
B．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D．步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
10．如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是（ ）
A．划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上
B．在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌
C．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的
D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数
11．下列有关微生物培养的叙述，错误的是（ ）
A．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
B．平板划线法和稀释涂布平板法都可对微生物进行计数
C．培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌
D．倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落，造成污染
12．下列检测某熟制食品中大肠杆菌是否超标的实验操作，不合理的是（ ）
A．待检测食品需要经过灭菌操作后取样检测
B．应设置未接种的培养基，作为实验的对照
C．用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数
D．接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养
13．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A．高压蒸汽灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
B．倒平板时，应将打开的皿盖放到实验操作台一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为防止污染，接种环经火焰后应趁热快速挑取菌落
D．实验室培养硝化细菌时，培养基无需加入有机碳源
14．为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是（ ）
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上
C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异
D．对于需要临时保存的菌种，可以采用－4 ℃低温保藏的方法
15．在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是（ ）
A．加入唯一氮源作为选择培养基，加入刚果红指示剂作为鉴别培养基。
B．加入唯一氮源作为鉴别培养基，加入酚红指示剂作为选择培养基。
C．加入酚红指示剂作为鉴别培养基，加入唯一氮源作为选择培养基。
D．加入刚果红指示剂作为选择培养基，加入唯一碳源作为鉴别培养基。
16．农作物秸秆等纤维质原料经加工可制成燃料乙醇，从而减少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的是（ ）
A．要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样
B．图中②过程常用的微生物B是酵母菌
C．微生物A和微生物B可利用的碳源相同
D．可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用
17．下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（ ）
A．分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同
C．测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D．接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布
18．下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是（ ）
A．先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，不需用氯化钠溶液洗去浮色
B．倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培养基
C．培养基中出现透明圈的原因是因为纤维素被分解为葡萄糖导致的
D．倒平板时就加入刚果红，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈
19．某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表，与此有关的叙述不正确的是（ ）
A．探究的问题可以是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用
B．预期结果是 1、3 组的落叶不被分解，2、4 组中的落叶被不同程度的分解
C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理
20．为了验证土壤中的微生物可以分解淀粉，取两只烧杯甲和乙，都放入等景的淀粉溶液20mL，甲中加入30mL制备好的土壤浸出液，乙中放入等量的蒸馏水，在适宜的温度下放罝7天。然后从甲中取出等量的溶液放入A1、A2试管，从乙中也取出等量的溶液放入试管B1、B2，在A1、B1中加入碘液，在A2和B2中加入斐林试剂并加热。下列对该实验结果的预测正确的是（ ）
A．A1和B1都会有蓝色出现，而且颜色深浅一致
B．A2有砖红色沉淀出现，B2无砖红色沉淀出现
C．A2和出都有砖红色沉淀出现
D．以上结果都不正确
二、非选择题（本题包括3小题，每空2分，共40分）
21．（12分）食品卫生是关系千万人健康和生命的大事，为检测某食品厂乳制品中总菌量和大肠杆菌量是否超标，常采用微生物培养的方法，请回答下列问题：
(1)应配制哪种物理性质的培养基？________，在接种之前，一般对培养基采取________方法灭菌，灭菌后才能保证培养得到的菌落全部来自待测样品。培养基中是否应该加入全部五大类营养要素？为什么？____________________________。
(2)培养基制备好以后，应该将一定量的________的稀释液接种到培养基上，并将接种好的培养基在________________等条件下培养。
(3)待培养一定时间后，对培养基中的菌落进行计数，以得出总菌量的数据，若要得到大肠杆菌量的数据，应该在配制培养基时向培养基中加入________________试剂。
22．（14分）幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素，其不良预后是胃癌。据研究发现，目前我国有超过50%人感染了Hp病菌。Hp是微需氧菌，环境氧要求5%～8%，在大气或绝对厌氧环境下均能生长，Hp的尿素酶极为丰富，尿素酶催化尿素水解形成“氨云”保护细菌在高酸环境下生存。
在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：
配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察。请回答：
⑴在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有____，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现____色环带。
⑵步骤X的操作如下图所示：
①微生物接种的方法很多，但都要注意____；上图所示方法为____。
②图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是____。
⑶在培养时，需将培养皿____并放在恒温培养箱中,否则将可能导致____。
23．（14分）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，实验流程示意图如下图所示。
请回答下列问题：
（1）步骤A是_____________，可以通过此步骤增加______________________。
（2）研究人员用_____________法筛选纤维素分解菌，这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。培养基中透明圈的大小与纤维素酶的_____________有关。
（3）在涂布平板时，取少量菌液（不超过0.1mL）滴加到培养基表面，菌液量不宜过多的原因是_______________________________________。
（4）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株甲和乙，在不同pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下表，推测菌株_____________更适合用于人工瘤胃发酵，理由是__________________________。
注：纤维素酶活性用U表示。
2018-2019学年高一下学期专题二训练卷
生 物（一）答 案
1. 【答案】D
【解析】将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，A正确；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，B正确；待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，C正确；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，D错误。
2. 【答案】B
【解析】根据所提供的甲、乙两种培养基的成分分析，甲培养基有葡萄糖、淀粉作为有机碳源，适于分离异养型微生物；乙培养基无有机碳源，适于分离自养型微生物。两者都不含氮源，说明这两种培养基都适于分离自生固氮菌。
3. 【答案】D
【解析】根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入碳源，A正确；不同的微生物需要不同的生长因子，根据需要的菌可以在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B正确；根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素，C正确；高温高压会将所有细菌（包括需要的菌类）一起杀死，D错误。
4. 【答案】B
【解析】将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；稀释涂布平板法接种可以形成单菌落，所以常用来进行微生物的计数，平板划线法常用来筛选分离微生物，B错误；两种接种方法在培养基中形成单个菌落，C正确；为防止杂菌污染，接种工具需要灭菌后使用，D正确。
5. 【答案】A
【解析】对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒和灭菌，A错误。为保证不被杂菌污染，应将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B正确。酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C正确。周围物品可能会含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，D正确。
6. 【答案】A
【解析】①实验操作者的双手用化学药剂进行消毒，用酒精擦拭双手；②接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；③培养皿能耐高温，需用干热灭菌；④空气可用紫外线消毒；⑤培养基用高压蒸汽灭菌；⑥巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒，不会破坏其营养成分；综合以上分析，正确的顺序为⑤③②①④⑥，A正确。
7. 【答案】A
【解析】配制培养基应先调pH再进行灭菌，否则会被再次污染，A正确；青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，在培养基中加入青霉素可抑制细菌而促进真菌生长，B错误；伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂，利用伊红—美蓝固体培养基可以鉴定大肠杆菌是否存在，C错误；破伤风杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，D错误。
8. 【答案】D
【解析】①步骤表示倒平板，在倒平板之前是先调pH再灭菌，A错误；②③④步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，同时在接种前和每次划线结束后都要灼烧灭菌，B错误；接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，C错误；图中操作结束后，为了防止培养皿盖上的水珠滴落到培养基造成污染，需要将培养皿倒置培养，且同时在培养基皿底标注菌种及接种日期等信息，D正确。
9. 【答案】B
【解析】在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH值后再进行髙压蒸汽灭菌，A正确；要筛选出能高效分解尿素细菌，所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨，B错误；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，形成相互对照试验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落，D正确。
10. 【答案】C
【解析】划线时皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面，A错误；在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，但培养基只是在接种前进行灭菌即可，B错误；接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落，C正确；划线时注意不要将最后一区5的划线与第一区1相连，D错误。
11. 【答案】B
【解析】微生物培养中，获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，A正确；利用稀释涂布平板法接种微生物可以形成单菌落，常用来进行微生物的计数，但利用平板划线法接种微生物不易分离出单菌落，不能对微生物进行计数，常用来筛选分离微生物，B错误；常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，C正确；倒平板后，需要将培养皿倒置，以防止培养基蒸发冷凝成的水滴入培养基而造成污染，D正确。
12. 【答案】A
【解析】待检测食品灭菌后会将大肠杆菌杀死，则不能检测大肠杆菌是否超标，A错误；应设置未接种的培养基，作为实验的对照，B正确；用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数，C正确；接种后应该将培养皿倒置，并在适宜温度下培养，D正确。
13. 【答案】D
【解析】高压灭菌加热结束，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能打开放气阀使压力表指针回到零，A错误。倒平板过程中不能将培养皿的皿盖完全打开，B错误。接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以快速挑取菌落，C错误。硝化细菌就能够制造有机物，培养基无需加入有机碳源，D正确。
14. 【答案】D
【解析】对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A、B正确；临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，C正确；对于需要临时保存的菌种，可以采用4 ℃低温保藏的方法，D错误。
15. 【答案】C
【解析】尿素分解菌能在以尿素为唯一氮源的培养基中生长，其合成的脲酶能够将尿素分解为氨使酚红指示剂呈红色，用加入酚红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌，C正确。
16. 【答案】C
【解析】根据图解可知，微生物A的碳源是纤维素，故要想获得微生物A最好选择富含纤维素的土壤采集，A正确；图中②过程表示生产乙醇的过程，常用微生物是酵母菌，B正确；微生物A所用碳源为纤维素，微生物B所用碳源为纤维素降解物，C错误；微生物A之所以能利用纤维质原料是因为其含有纤维素酶，故可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用，D正确。
17. 【答案】B
【解析】分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，其中的微生物全部死亡，不能得到尿素分解菌，A错误；土壤中各类微生物的数量不同，为了获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，可见，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围也不同，B正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用菌落计数法，一般不常用显微镜直接计数法，C错误；接种土壤微生物稀释液时，可借助平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，但并不是使微生物均匀分布，D错误。
18. 【答案】D
【解析】常用的刚果红染色法有两种：一是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，此种方法需用氯化钠溶液洗去浮色，二是在倒平板时就加入刚果红，此种方法则不需要用氯化钠溶液洗去浮色，A错误；倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入10mg/mLCR溶液，灭菌后，按照每200mL培养基加入1ml的比例加入CR溶液，B 错误；在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，C 错误；倒平板时就加入刚果红，由于有些微生物能降解色素，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解而形成透明圈，D正确。
19. 【答案】D
【解析】实验组2组合4组可以形成对照，变量是土壤的湿润程度，来研究土壤微生物对落叶的分解作用，A正确；1组和3组由于没有微生物，落叶不被分解，2组和4组由于有微生物，落叶不同程度的被分解，B正确；为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理，消除微生物的影响，C正确；该实验的变量有两个，一个是灭菌、不灭菌，一个是湿润、不湿润．自变量是灭菌、不灭菌，在湿润条件下1、2形成对照，在干燥条件下3、4形成对照，所以1、3分别是两组对照实验的对照组，D错误。
20. 【答案】B
【解析】斐林试剂是鉴定还原糖的，土壤中会含有些微生物能产生分解淀粉的淀粉酶，淀粉水解后是还原糖，所以A2会出现砖红色，其它的都没有砖红色沉淀出现，B正确。碘液是鉴定淀粉的，A1和B1都会有蓝色出现，但B1的蓝色应比较深，A错误。B2没有砖红色沉淀出现，C错误，D错误。
21. 【答案】
(1)固体 高压蒸汽灭菌 是，培养基应该能保证各种微生物都能生活，才能使实验数据准确
(2)待测样品(乳制品) 无菌、适宜的温度
(3)伊红和美蓝
【解析】 (1)微生物的培养应该用固体培养基进行培养；在接种之前，一般对固体培养基采取高压蒸汽灭菌的方法灭菌。培养基中应该加入全部五大类营养要素，即水、无机盐、碳源、氮源和生长因子。因为只有这样，才能保证各种微生物都能生活，才能使实验数据准确。(2) 培养基制备好以后，应该将一定量的乳制品的稀释液接种到培养基上，并将接种好的培养基在无菌、适宜的温度等条件下培养，使杂菌和大肠杆菌正常生活、繁殖。(3) 培养一定时间后，对培养基中的菌落进行计数，以得出总菌量的数据。而要得到大肠杆菌量的数据，应该在配制培养基时向培养基中加入伊红和美蓝试剂进行鉴定。
22. 【答案】（1）尿素酶 红
（2）①防止杂菌的污染 稀释涂布平板法 ②使微生物和无菌水混合均匀
（3）倒置 无法形成单一菌落
【解析】（1）由于尿素分解细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成氨，而氨会使培养基碱性增强，即pH升高，导致酚红指示剂变红。（2）①微生物接种的方法很多，但都要注意防止杂菌的污染；接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，图示所示为稀释涂布平板法。②图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是使微生物和无菌水混合均匀。（3）培养时需将培养皿倒置并放在恒温箱中培养，倒置培养的目的也是为了获得单一菌落。
23. 【答案】（1）选择培养 纤维素分解菌的浓度
（2）刚果红染色 量与活性
（3）培养基表面的菌液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果
（4）乙 瘤胃是酸性环境，菌株乙在酸性环境下酶的活性更高
【解析】（1）步骤A是选择培养，该步骤可增加纤维素分解菌的浓度。（2）筛选纤维素分解菌常用刚果红染色法；培养基中透明圈的大小与纤维素酶的量和活性有关。（3）在涂布平板时，菌液量不宜过多的原因是菌液过多会使培养基表面的菌液出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果 。（4）根据表中数据显示，甲菌株在pH=8时酶活性最高，乙菌株在pH=5时酶活性最高，因为瘤胃是酸性环境，因此乙菌株更适合用于人工瘤胃发酵。
2018-2019学年高二下学期专题二训练卷
生 物 （二）
注意事项：
1．答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2．选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
3．非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。
一、选择题（本题包括20小题，每小题3分，共60分，每小题只有一个选项最符合题意）
1．在纤维素分解菌分离与鉴定实验中，用到的培养基按照物理状态分类分别为（ ）
A．固体培养基、液体培养基 B．固体培养基、固体培养基
C．液体培养基、液体培养基 D．液体培养基、固体培养基
2．欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择下列固体培养基（仅列出碳氮源）中的（ ）
A．蛋白胨、柠檬酸铁铵 B．橄榄油、硫酸铵
C．乳糖、酵母膏 D．葡萄糖、蛋白胨
3．将三组生理状态相同的某植物幼根分别培养在含有相同培养液的密闭培养瓶中，一段时间后，测定根吸收某一矿质元素离子的量。培养条件及实验结果见下表：
培养瓶中气体
温度／℃
离子相对吸收量/%
空气
17
100
氮气
17
10
空气
3
28
下列分析正确的是（ ）
A．有氧条件有利于该植物幼根对该离子的吸收
B．该植物幼根对该离子的吸收与温度的变化无关
C．氮气环境中该植物幼根细胞吸收该离子不消耗ATP
D．与空气相比，氮气环境有利于该植物幼根对该离子的吸收
4．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌
A．④③② B．④②③
C．④①② D．④②①
5．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为（ ）
A．伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B．含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C．含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D．含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
6．消毒和灭菌是两个不同的概念，下列哪些事物适用于消毒处理（ ）
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②④⑤⑥⑧ D．①②③④⑦⑧
7．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是（ ）
①用左手打开皿盖
②等待平板冷却5?l0min，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④等培养基冷却至60℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖
A．②③⑤ B．②④⑤ C．①②③④ D．①②③⑤
8．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（ ）
A．①步骤使用的培养基已经灭菌
B．图中操作结束后需在培养基皿上标注菌种及接种日期等信息
C．④中只有最后一次划线的区域才可以得到所需菌落
D．①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行
9．如图是使用某接种方法在适宜的培养基上培养某种微生物的结果，相关叙述不正确的（ ）
A．该图最可能是用平板划线法进行接种
B．该接种方法适用于微生物的分离和计数
C．接种技术的核心是要防止杂菌的污染
D．可将未接种的培养基放在相同条件下培养，排除培养基是否有杂菌污染
10．用稀释涂布平板法统计细菌菌落数时，一般选择如图中哪几支试管中的稀释液来涂布平板（ ）
A．试管1、2、3
B．试管2、3、4
C．试管3、4、5
D．试管4、5、6
11．下列有关微生物培养的说法，正确的是（ ）
A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板
B．在筛选纤维素分解菌时选择培养这一步骤不可以省略
C．配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性
D．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵
12．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
13．下列有关说法，正确的是（ ）
A．对于频繁使用的菌种，可采用甘油管藏法保藏
B．甘油管藏法保存菌种时用固体体培养基
C．甘油管藏法一般保存温度为-20℃
D．甘油管藏法每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上
14．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（ ）
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
15．分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（ ）
A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层
B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌
C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源
D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
16．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述错误的是（ ）
A．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
B．菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种肉眼鉴定的依据
C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
17．原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是（ ）
A．应选择被原油污染的土壤取样
B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择性培养基
C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上
D．能形成分解圈的即为所需菌种
18．下列有关刚果红染色法的叙述，正确的是（ ）
A．刚果红可以和纤维素、淀粉等多糖形成红色复合物
B．出现透明圈的菌落一定是纤维素分解菌
C．在倒平板时加入的刚果红溶液不需要灭菌
D．在菌落形成后加入的刚果红溶液不需要灭菌
19．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是（ ）
A．经选择培养后即可将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
B．选择培养这一步可省略，但纤维素分解菌少
C．经稀释培养后，用刚果红染色
D．此实验中需设置对照组
20．抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图a），继续在同样条件下培养3天，结果如下图b。分析结果，得出的结论是（ ）
①甲菌产生了抗生素
②丙菌的生长被乙菌产生的抗生素抑制
③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制
④丁菌产生的抗生素抑制了丙菌的生长
A．①④ B．①③ C．②③ D．②④
二、非选择题（本题包括3小题，每空2分，共40分）
21．（16分）饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用?若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等?以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图?请分析作答?
（1）培养基中除了添加 以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质?
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行 ?
（3）接种以前要进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成 ?根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数?通常每种稀释液需涂布 个平板，取其平均值?若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是 ?
（4）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是 ;接种时，在第一区域划线后须将该工具 后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种。
22．（12分）幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的革兰氏阴性螺旋状杆菌，具有强的脲酶（能降解尿素）活性，其代谢类型属于异养厌氣型（氧气浓度在5%?8%左右适合，完全无氧或空气环境中无法生存)，这种细菌是慢性胃炎、甚至胃癌发生的元凶。
（1）为了对胃炎患者的胃粘膜提取物稀释样液中幽门螺杆菌进行分离，应将样品稀释液接种于以_________为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在___________条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。
（2）欲检测上述培养基中是否具有幽门螺杆菌这类细菌的存在，向培养基中添加酚红指示剂，培养基中菌落周围显示红色环带，即表明这类细菌的存在，这种检测过程的机理是_____________。
（3）采用液体培养基培养幽门螺杆歯菌，为了测定菌液中的菌体数量，一般采用_____________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计菌落的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏_____________（填“大”或“小”)，原因是_____________________________。
23．（12分）研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题。
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和____酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是_________，操作时采用的灭菌方法是_______。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成______色复合物，但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在_______时就加入刚果红。_______（第一种、第二种）方法会使菌落之间发生混杂。
2018-2019学年高二下学期专题二训练卷
生 物（二）答 案
1. 【答案】D
【解析】在纤维素分解菌分离与鉴定实验中，梯度稀释前进行选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，这一步一般选用液体培养基，筛选纤维素分解菌用了固体培养基，D正确。
2. 【答案】B
【解析】欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择以脂肪为唯一碳源的固体培养基。只有橄榄油、硫酸铵的培养基中的碳源为脂肪（橄榄油），而其它培养基中的碳源都不是脂肪。综上分析，B正确。
3. 【答案】A
【解析】表中信息显示：在相同的温度条件下，空气培养瓶中离子相对吸收量大，说明有氧条件有利于该植物幼根对该离子的吸收，A正确；同是空气培养瓶，在不同的温度条件下离子相对吸收量不同，说明温度变化会影响根对离子的吸收，B错误；在相同的温度条件下，氮气培养瓶中离子相对吸收量较空气培养瓶中离子相对吸收量小，说明幼根细胞吸收该离子消耗ATP，而且氮气环境不利于该植物幼根对该离子的吸收，C、D错误。
4. 【答案】B
【解析】在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但固氮细菌的氮源是氮气，可在该培养基上正常生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，则霉菌等真菌可正常生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌，但不影响放线菌的生长。
5. 【答案】B
【解析】伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，A错误；酵母菌对青霉素不敏感，但细菌对青霉素敏感，因此含青霉素培养基可以用于筛选酵母菌，硝化细菌能利用环境中的氨氧化释放的化学能将CO2和H2O合成为糖类等有机物，所以含氨的无机培养基可以筛选硝化细菌，B正确；酵母菌是异养生物，不能用含氨的无机培养基筛选，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能用于硝化细菌的筛选，C错误；综上分析，含青霉素培养基可以用于筛选酵母菌，伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，D错误。
6. 【答案】A
【解析】消毒是用比较温和的物理或化学方法杀死部分微生物的方法，不包括芽孢和孢子，灭菌是用强烈的物理或化学方法杀死一切微生物包括芽孢和孢子。①皮肤应进行消毒，②饮用水应进行消毒，③牛奶应进行消毒，④注射器应进行灭菌，⑤培养皿应进行灭菌，⑥接种环应进行灭菌，⑦培养基应进行灭菌，⑧果汁应进行消毒，⑨酱油应进行消毒，⑩手术刀应进行灭菌。综上所述，需要中进行消毒的是①②③⑧⑨。A正确。
7. 【答案】A
【解析】倒平板时用左手使培养皿打开稍大于锥形瓶瓶口的缝隙，①错误；等待平板冷却5?l0min，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，防止皿盖上冷凝的水珠滴落在培养基上，②正确；右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，杀灭瓶口可能存在的杂菌，③正确；培养基灭菌后，等培养基冷却至50℃左右时倒平板，④错误；右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，防止杂菌落入，⑤正确。A正确。
8. 【答案】C
【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板五个步骤。①步骤表示倒平板，在倒平板之前培养基已经灭菌，A正确；图中操作结束后需在培养基皿上标注菌种及接种日期等信息，B正确；在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，D正确。
9. 【答案】B
【解析】该图最可能是用平板划线法进行接种，A正确；平板划线法适于微生物的分离纯化，不适于计数，B错误；在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌，C正确；为了检测培养基是否有杂菌污染，可将未接种的培养基放在相同条件下培养，D正确。
10. 【答案】C
【解析】由于1、2号试管稀释倍数较小，试管中细菌数目较多，而6号试管中细菌数目较少，所以用稀释涂布平板法统计细菌菌落数时，一般选择图中试管3、4、5中的稀释液来涂布平板，C正确。
11. 【答案】D
【解析】制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前，可以通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物，但是如果样品中所要筛选的微生物数量较多，这一步可以省略，B错误；配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至能够满足该种微生物的需要，C错误；获得纯净培养物的关键是无菌操作，防止外来杂菌入侵，D正确。
12. 【答案】D
【解析】高压灭菌加热结束时，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，打开盖子，如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内液体会冲出容器，造成污染，A错误；倒平板时，培养皿盖打开一缝隙，不能放到一边，B错误；接种时，接种环经火焰灭菌冷却后挑取菌落，不能趁热挑取，以免杀死微生物，C错误；由于平板倒过来放置，则用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，D正确。
13. 【答案】C
【解析】对于频繁使用的菌种,可采用临时保存法保藏，A错误；甘油管藏法保存菌种是一种长期保存菌种的方法，需要用液体培养基保存，B错误；临时保存法的温度一般设置为4℃，甘油管藏法一般保存温度为-20℃，C正确；临时保存法需要每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上，甘油管藏法没有这样的要求，D错误。
14. 【答案】B
【解析】以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，能使酚红指示剂变红，B正确。
15. 【答案】C
【解析】制备浸出液的土壤取自土壤的表层与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，A错误；涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染，与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，B错误；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，该操作对实验影响最大，C正确；接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会造成污染，但与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，D错误。
16. 【答案】B
【解析】不同细菌在固体培养基上形成的菌落大小、颜色、隆起程度等特征不同，可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型，但不能看到细菌个体有无荚膜，A正确，B错误；纤维素可以与刚果红结合形成红色，纤维素被纤维素分解菌分解后，会在菌落周围形成无色的透明圈，所以可利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌，C正确；尿素被分解后，可产生碱性物质氨，使酚红指示剂变红，所以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可鉴定尿素分解菌，D正确。
17. 【答案】C
【解析】筛选能够利用多环芳烃为碳源的菌种，则在被原油污染的土壤中应该含有，所以配置来源于被原油污染的土壤稀释液，A正确；配置选择性培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是以原油（多环芳烃）为唯一碳源，B正确；在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养上，将土壤稀释液灭菌后会杀死原有菌种，C错误；题干有个信息“有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈”，所在选择性培养基上能形成分解圈的即为所需菌种，D正确。
18. 【答案】D
【解析】刚果红不能与淀粉形成红色复合物，A错误；有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈，出现透明圈的菌落不一定是纤维素分解菌。B错误。倒平板时加入刚果红溶液，需要经过微生物的培养过程才能检测培养基中纤维素的有无，需要灭菌，C错误；在菌落形成后加入的刚果红溶液可直接检测培养基中纤维素的有无，不需要灭菌，D正确。
19. 【答案】A
【解析】经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。
20. 【答案】B
【解析】根据图b可知，乙菌落靠近甲菌落的位置生长受到抑制，说明甲菌产生了抑制乙菌生长的抗生素，①③正确；丙菌、丁菌菌落生长正常，说明丁菌不产生抑制病菌生长的抗生素，②④错误，B正确。
21. 【答案】⑴ 植酸钙
⑵ 灭菌
⑶ 单个菌落 菌落数 3 C×106
⑷ 接种环 灼烧、冷却
【解析】（1）因为要分离产植酸酶的菌株，故培养基要添加植酸钙，还要有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质?（2）防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌。（3）接种所用的平板划线法和稀释涂布法，目的都是在培养基表面形成单个菌落。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数?通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值?将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是C×106。（4）对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是接种环。在第一区域划线后须将该工具灼烧灭菌后再划线。
22. 【答案】（1）尿素 氧气浓度在5%—8%左右
（2）脲酶将培养基中的尿素分解成氨，该物质的水溶液会使酚红指示剂呈现红色
（3）稀释涂布平板 小 有些活菌在培养过程中死亡、有些菌落是由多个活菌共同形成的
【解析】（1）根据提供信息分析，幽门螺杆菌体内含有脲酶，能够降解尿素，所以应该将幽门螺杆菌接种在以尿素为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在氧气浓度在5%—8%左右条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。（2）幽门螺杆菌体内的脲酶能够将培养基中的尿素分解成氨，该物质的水溶液会使酚红指示剂呈现红色，所以可以用添加酚红指示剂的培养基鉴定幽门螺杆菌。（3）微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用于计数。该方法一般通过统计菌落的数量代表菌体的数量；用于有些活菌在培养过程中死亡、有些菌落是由多个活菌共同形成的，所以统计的数据往往比真实值小。
23. 【答案】（1）葡萄糖苷
（2）接种环 灼烧
（3）红 倒平板 第一种
【解析】（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。（2）平板划线法接种菌种的工具是接种环；操作时采用的灭菌方法是灼烧。（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应；常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。其中第一种方法会使菌落之间发生混杂。
