高中生物 人教版选修1第3章植物的组织培养技术3.1菊花的组织培养课件(27张）

课件27张PPT。 课题1 菊花的组织培养学习目标
熟悉植物组织培养的基本过程。
理解细胞分化、脱分化及再分化概念。
课题重点与难点
课题重点：植物组织培养的基本过程。
课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。细胞分化，脱分化，再分化。细胞分化： 个体发育中，细胞在形态、结构和
生理功能上出现稳定性差异的过程。特定时空下基因的选择性表达。形成各种组织器官。③结果：②原因：①定义：？什么是细胞分化？细胞分化的原因和结果？一、基础知识(一)植物的组织培养的基本过程2.脱分化、再分化？愈伤组织（形成的？特点？）②愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。①脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。③再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。2.植物组织培养的理论基础： 细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。
细胞全能性表达条件：2.一定的营养物质、激素和其他外界条件1.外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官二、植物组织培养的基本过程 离体器官、组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化丛芽、根 植物体 三、影响植物组织培养的因素? 不同植物的组织培养难度不同
同一种植物的不同组织培养难度不同 大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S
微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等1、外植体的选取2、培养基的配制(MS培养基)菊花组织培养应注意的问题？讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；
蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；
甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养。 3、不同植物激素浓度，使用顺序和使用量4、消毒
在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：5、pH、温度、光照
菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h活动：
用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?（提示：怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题? ）制备MS固体培养基外植体消毒 接种 培 养栽 培四、实验操作 移 栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上二、实验操作（一）制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备1、配置各种母液①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量2、配置培养基①定容② 调PH③培养基的分装 3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右② 酒精处理—无菌水冲洗
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗 ③氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液（三）接种1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭擦洗工作台并用紫外线照射20分钟4、接种注意事项①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分（四）培养无菌箱中培养，定期消毒，保持适宜的温度，光照（五）移栽（六）栽培幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培三、课题延伸1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季思 考？ 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧）
4、无菌箱中的培养；
5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析
（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再 分化
（三）是否进行了统计、对照与记录
（四）生根苗的移栽是否合格总结植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素植物细胞培养不需要光需要光基础知识（一）植物组织培养的基本过程植物的组织培养技术不同的植物组织
同一植物的不同材料
营养、环境条件
植物激素
（二）影响植物组织培养的因素1.制备MS固体培养基
1.1、配制母液
1.2、配制培养基
1.3、灭菌
2.外植体消毒
3.接种
4.培养
5.移栽
6.栽培实验操作本课题内容小结菊花组织培养基础知识实验操作植物体的组织培养影响组织培养的因素细胞分化
细胞全能性
组织培养过程营养
激素
环境条件MS固体培养基制备
外植体消毒
接种
培养
移栽
栽培思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。