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山东省济南市莱芜区金牌一对一2018-2019学年高二下学期生物选修3专题1《基因工程》期末复习题
本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分，共100分，考试时间150分钟。
第Ⅰ卷
一、单选题(共20小题，每小题3.0分,共60分)
1.下列关于限制酶和DNA连接酶的说法中，正确的是( )
A． 其化学本质都是蛋白质
B． DNA连接酶可恢复DNA分子中的氢键
C． 在基因工程中DNA聚合酶可以替代DNA连接酶
D． 限制酶切割后一定能产生黏性末端
【答案】A
【解析】限制酶和DNA连接酶的化学本质都是蛋白质。
2.下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是( )
A． 用同种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端
B． 以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C． 检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功
D． 用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接
【答案】A
【解析】一种氨基酸可对应多个密码子，以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列可能不同。只有目的基因在受体细胞中成功表达才标志着基因工程操作的成功。用含抗生素抗性基因的质粒作为载体，是因为抗性基因作为标记基因可检测载体是否导入到受体细胞中。
3.下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是( )
A． 构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶
B． 愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株
C． 卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制酶的识别位点
D． 抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传
【答案】A
【解析】构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶对质粒和目的基因切割得到相同的黏性末端，然后再拼接，通过DNA连接酶将切口处的两核苷酸通过脱水缩合形成磷酸二酯键，将其连接起来，所以A正确；愈伤组织的细胞中含有相同的遗传物质，其向不同方向的分化，是细胞中基因的选择性表达的结果，遗传物质并没有改变，所以B错误；卡那霉素抗性基因(kanr)中不能有该过程所利用的限制酶的识别位点，否则将被切开，从而其结构被破坏，则就不能检测目的基因是否导入受体细胞成功，所以C错误；抗虫棉有性生殖的过程中会发生基因重组，可能使后代的抗虫性状不能表现，所以D错误。
4.基因工程技术引起的生物变异属于( )
A． 染色体变异
B． 基因突变
C． 基因重组
D． 不可遗传的变异
【答案】C
【解析】基因工程就是把一个生物体的基因转移到另一个生物体DNA中的生物技术。基因工程技术引起的生物变异属于基因重组。
5.下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是( )
A． ③表示PCR技术，用来扩增目的基因
B． 从基因文库中要得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取
C． 若获取的目的基因相同，则图中基因组文库小于cDNA文库
D． 若基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以直接通过人工合成的方法获取
【答案】C
【解析】可以利用PCR技术，大量扩增目的基因，A项正确；可以根据目的基因的相关信息，如核苷酸序列、基因功能、基因在染色体上的位置等，从基因文库中得到所需的目的基因，B项正确；基因组文库是从DNA中获取的，而cDNA文库是利用mRNA反转录法获得的，不包含内含子，故基因组文库大于cDNA文库，C项错误；若基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以直接通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成，D项正确。
6.下列关于DNA连接酶作用的叙述中，正确的是( )
A． 将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键
B． 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键
C． 连接两条DNA链上碱基之间的氢键
D． 只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来
【答案】B
【解析】选项A是DNA聚合酶的作用。DNA连接酶能将双链DNA片段的末端连接起来，重新形成磷酸二酯键。DNA连接酶中E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端，T4DNA连接酶还可以连接平末端。
7.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是( )
A． 采用反转录的方法可得到目的基因
B． 基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C． 马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D． 用不同种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子
【答案】D
【解析】用限制酶进行切割时，必须特别注意用同一种限制酶来处理载体和目的基因，这样才会产生相同的黏性末端，进而用DNA连接酶连接起来。
8.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，正确的是( )
A． 过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B． 多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C． 过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D． 应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
【答案】B
【解析】图中①是获取目的基因的过程，获取的目的基因，可用于基因工程，但不能用于比目鱼基因组测序，故A错误；将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因不再是抗冻基因，所以得不到抗冻性增强的抗冻蛋白，故B正确；②是基因表达载体的构建过程，基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法只能将质粒导入受体细胞，不能对重组质粒进行筛选，故C错误；利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞，利用抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，故D错误。
9.下列关于基因表达载体的叙述中，不正确的是( )
A． 基因表达载体的构建是基因工程的核心
B． 其上的启动子和终止子都是有特殊结构的DNA片段
C． 一般用抗生素抗性基因作为标记基因
D． 虽然基因工程中的受体细胞有所不同，但构建的基因表达载体都是一样的
【答案】D
【解析】由于受体细胞有植物、动物、微生物之分，目的基因导入受体细胞的方法不同，所以，表达载体的构建也有所差别。
10.可用DNA探针和外源基因导入的方法进行遗传病的诊断和治疗，下列做法中不正确的是( )
①用DNA探针检测病毒性肝炎
②用DNA探针检测猫叫综合征
③用导入外源基因的方法治疗苯丙酮尿症
④用基因替换的方法治疗21三体综合征
A． ①④
B． ②④
C． ②③
D． ①③
【答案】B
【解析】肝炎病毒的遗传物质是RNA，可以用DNA探针进行检测，原理是分子杂交，①正确；猫叫综合征属于染色体结构异常，即人类的第5号染色体缺失了一部分，所以无法用DNA探针检测出来，②错误；导入外源基因的方法治疗苯丙酮尿症属于基因治疗，原理是基因工程，检测是否导入目的基因的方法是用基因探针进行DNA分子杂交，③正确；21三体综合征属于染色体数目异常，多了一条21号染色体，所以无法用基因替换的方法治疗21三体综合征，④错误。
11.下列对物质的改造不属于蛋白质工程范畴的是( )
A． 胰岛素改造
B． 抗体改造
C． 酶的改造
D． 性激素改造
【答案】D
【解析】蛋白质工程是通过改造基因来改造蛋白质或生产自然界原不存在的蛋白质，性激素不是蛋白质。
12.下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
A． 四环素抗性基因
B． 绿色荧光蛋白基因
C． 产物具有颜色反应的基因
D． 贮藏蛋白的基因
【答案】D
【解析】通常用作标记基因可以是抗性基因，也可以是有特殊颜色的基因，所以D不能作为标记基因。
13.在基因工程中，作为基因运输工具的载体，下列特征除哪项外，都是载体必须具备的条件( )
A． 能够在宿主细胞中复制，并稳定地保存
B． 具有1～多个限制酶切点
C． 必须是细菌的质粒或噬菌体
D． 具有某些标记基因
【答案】C
【解析】作为载体必须具有四个条件：①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制；②有多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个，③有一定的标记基因，便于进行筛选。④对受体细胞无害。一般来说，天然载体往往不能满足上述要求，因此需要根据不同的目的和需要，对载体进行人工改建。现今实际所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。一类是细菌细胞质的质粒另一类载体是噬菌体或某些病毒等。
14.下列关于基因工程的叙中，正确的是( )
A． 目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物
B． 限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶
C． 若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病毒侵染棉花植株
D． 载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上
【答案】A
【解析】基因工程的目的基因可以来源于动物、植物和微生物，受体细胞也可以是动物、植物和微生物，A正确；基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶和载体，其中限制酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶，B错误；若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用棉铃虫取食棉花植株，C错误；载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否导入重组细胞，但不能检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上，D错误。
15.下列关于限制酶的说法正确的是( )
A． 限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布
B． 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C． 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
D． 限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
【答案】B
【解析】限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，并不是广泛存在于各种生物中，一种限制酶能识别双链DNA的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开，DNA分子经限制酶切割形成的末端有两种形式——黏性末端和平末端。
16.α1-抗胰蛋白酶缺乏症是北美常见的一种单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶。
下列关于该过程的叙述，错误的是( )
A． 载体上绿色荧光蛋白基因(GFP基因)的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞
B． 将目的基因导入羊膀胱细胞中，将会更加容易得到α1-抗胰蛋白酶
C． 培养的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生α1-抗胰蛋白酶
D． 目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用
【答案】C
【解析】载体上绿色荧光蛋白基因作为标记基因，可用于筛选含目的基因的受体细胞；将目的基因导入羊膀胱细胞中可制得膀胱生物反应器，获取产品将不受性别和发育时期的限制；基因表达载体的构建需要限制酶和DNA连接酶的催化作用；转基因羊有性生殖产生的后代会发生性状分离，有的子代不再具有转基因生物的特性。
17.下列关于基因工程的叙述，正确的是( )
A． 获得目的基因需用限制性核酸内切酶和DNA连接酶
B． DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来
C． 可通过农杆菌转化法实现目的基因导入受体细胞
D． 载体上的标记基因有利于载体与外源基因连接以及筛选转化细胞
【答案】C
【解析】获得目的基因只需用限制性核酸内切酶，构建重组质粒需用限制性核酸内切酶和DNA连接酶；DNA连接酶的作用是将两个相同的末端通过磷酸二酯键连接起来；载体上的标记基因有利于筛选含重组DNA的细胞。
18.下列关于限制酶的叙述中，错误的是( )
A． 它能在特殊位点切割DNA分子
B． 同一种限制酶切割不同的DNA分子产生的黏性末端能够很好地进行碱基配对
C． 它能任意切割DNA分子，从而产生大量DNA片段
D． 每一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列
【答案】C
【解析】限制酶是基因工程的重要工具之一。每一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点上切割DNA分子。同一种限制酶切割不同的DNA分子，产生的黏性末端能进行互补配对。
19.基因治疗是指( )
A． 用DNA探针修复缺陷基因
B． 用DNA探针检测疾病
C． 将正常基因导入有基因缺陷的细胞中
D． 将外源基因导入受体细胞
【答案】C
【解析】基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入病人的靶细胞，以纠正基因的缺陷，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病目的的生物医学新技术。
20.运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种。这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，保护农业生态环境，根据以上信息，下列叙述正确的是( )
A． Bt基因的化学成分是蛋白质
B． Bt基因中会有菜青虫的遗传物质
C． 转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因
D． 转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物
【答案】C
【解析】转基因抗虫油菜抗虫性状的出现，是由于通过转基因技术导入的外源Bt毒蛋白基因在油菜体内表达，合成出了毒蛋白。Bt基因为双链的DNA片段，来自原核生物，其中不含有菜青虫的遗传物质。Bt基因表达产生的杀虫蛋白是高分子的有机化合物。
第Ⅱ卷
二、非选择题(共4小题，每小题10.0分,共40分)
21.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)与只使用EcoR Ⅰ相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_________________________________________________________。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。
(6)现使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，并经拼接获得的重组质粒进行再次酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1、2中标示的酶切位点及表所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，得到________种DNA片段。
②采用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，得到________种DNA片段。
【答案】(1)0、2 (2)高 (3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 (4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)DNA连接 (6)2 3
【解析】(1)该质粒为环状DNA分子，经SmaⅠ切割前，不含有游离的磷酸基团，经SmaⅠ切割后形成平末端，含有2个游离的磷酸基团。
(2)SmaⅠ识别的是CCCGGG序列，在C与G之间切割，SmaⅠ酶切位点越多，也就是C—G碱基对越多，C与G之间的氢键(3个)比A与T之间的氢键(2个)数量多，其含量越多，质粒的热稳定性越高。
(3)据图1可知，SmaⅠ切割位点在抗生素抗性基因(标记基因)中，据图2可知，SmaⅠ切割位点在目的基因中，因此使用SmaⅠ切割会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因。
(4)用同一种限制酶处理质粒和外源DNA，再用DNA连接酶连接时，住往会有三种连接形式：目的基因－质粒、目的基因－目的基因(环化)、质粒－质粒(环化)，后两种是我们不需要的，因而要进行筛选。用两种限制酶处理质粒和外源DNA，因形成的末端不同可避免上述情况的发生。
(5)连接质粒与目的基因的工具酶是DNA连接酶。
(6)分析由BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，并经拼接获得的重组质粒，这两种酶的识别序列仍然完整存在，如再用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶进行酶切时，可再度被切开，形成2种DNA片段；而EcoR Ⅰ的识别序列在原质粒中存在并没有破坏，同时切下的目的基因中还存在1个EcoR Ⅰ的识别序列，因此在重组质粒中存在2个EcoR Ⅰ的识别序列，如用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，可得到3种DNA片段。
22.科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程，据图回答下面的问题：
(1)改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于________(生物工程)的范畴。
(2)图示过程是根据预期的________，设计________，最终必须对________进行操作，此操作中改变的是________。
(3)经过改造的鼠—人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出的优点是____________________(从免疫角度考虑)。
(4)上述过程中对科学家来说难度最大的是____________________。
【答案】(1)蛋白质工程
(2)嵌合抗体功能 嵌合抗体的结构 基因 碱基对
(3)对人体的不良反应减少
(4)设计嵌合抗体的空间结构
【解析】(1)通过图示可知鼠?人嵌合抗体是通过人工设计而形成的特定功能蛋白质，其生产过程应属于蛋白质工程的范畴。(2)蛋白质工程的流程：预期蛋白质的功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→通过基因工程操作生产预期的蛋白质。(3)从免疫的角度考虑，对人体来说鼠源抗体为抗原，若利用人的抗体与之嵌合，则排斥作用会减轻，对人体的负作用会减少。(4)由于蛋白质空间结构比较复杂，不易确定，所以成为蛋白质工程中最大的障碍。
23.基因工程中，需要使用限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
(1)根据已知条件和图回答：
①上述质粒用限制酶________切割，目的基因用限制酶________切割。
②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，还要加入适量的________。
③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由是_________________________________________________________
__________________________________________。
(2)不同生物的基因可以拼接的结构基础是______________________________________________________________
______________________________________________。
(3)大肠杆菌是首先成功表达外源基因的宿主菌，但不能表达结构复杂的蛋白质，哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统虽然能表达结构复杂的哺乳类细胞蛋白，但操作复杂，表达水平低，不宜推广使用。基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞，请从细胞结构等方面分析用酵母菌作受体细胞能克服上述不足的理由是______________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________。
【答案】(1)①Ⅰ Ⅱ ②DNA连接酶 ③检测重组质粒(或目的基因)是否导入受体细胞
(2)DNA结构基本相同(其他合理答案均可)
(3)①单细胞真核生物，含有加工、修饰蛋白质的内质网和高尔基体；②繁殖速度快，能很快得到大量的目的基因；③培养成本低；④容易培养
【解析】要形成重组质粒，质粒只能出现一个切口，并且至少保留一个标记基因，因序列在GeneⅡ上，因此用限制酶Ⅰ切割，保留GeneⅠ标记基因；目的基因必须切割两次，切割后产生的黏性末端能与质粒的黏性末端互补，序列中有酶Ⅱ的切割序列，因此用酶Ⅱ，产生的末端互补。
24.请回答下列关于基因工程和蛋白质工程的问题：
(1) 获取真核细胞内目的基因的途径主要有________________________________，目的基因进入受体细胞需要__________的协助。
(2) 基因工程的核心步骤是________________，此过程用到的工具酶是____________。
(3)为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，经常采用的受体细胞是________，将目的基因导入此受体细胞常用的方法是________________。
(4) 蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对________进行改造，或制造一种________的技术。在该工程中，引起蛋白质空间结构改变的原因是组成该蛋白质肽链的________序列发生了改变。
【答案】(1)从细胞中分离和化学方法人工合成 载体
(2) 构建基因表达载体 限制酶和DNA连接酶
(3) 受精卵 显微注射技术
(4) 现有蛋白质 新蛋白质 氨基酸
【解析】(1)获取真核细胞内目的基因的途径主要有从细胞中分离和化学方法人工合成；目的基因进入受体细胞需要载体的协助。
(2)构建基因表达载体是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心步骤；此过程用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。
(3)培育转基因动物时常采用受精卵做受体细胞；常用显微注射技术将目的基因导入动物的受精卵。
(4)蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术；在蛋白质工程中，引起蛋白质空间结构改变的原因是组成该蛋白质肽链的氨基酸序列发生了改变。
绝密★启用前
山东省济南市莱芜区金牌一对一2018-2019学年高二下学期生物选修3专题1《基因工程》期末复习题
本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分，共100分，考试时间150分钟。
第Ⅰ卷
一、单选题(共20小题，每小题3.0分,共60分)
1.下列关于限制酶和DNA连接酶的说法中，正确的是( )
A． 其化学本质都是蛋白质
B． DNA连接酶可恢复DNA分子中的氢键
C． 在基因工程中DNA聚合酶可以替代DNA连接酶
D． 限制酶切割后一定能产生黏性末端
2.下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是( )
A． 用同种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端
B． 以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C． 检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功
D． 用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接
3.下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是( )
A． 构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶
B． 愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株
C． 卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制酶的识别位点
D． 抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传
4.基因工程技术引起的生物变异属于( )
A． 染色体变异
B． 基因突变
C． 基因重组
D． 不可遗传的变异
5.下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是( )
A． ③表示PCR技术，用来扩增目的基因
B． 从基因文库中要得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取
C． 若获取的目的基因相同，则图中基因组文库小于cDNA文库
D． 若基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以直接通过人工合成的方法获取
6.下列关于DNA连接酶作用的叙述中，正确的是( )
A． 将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键
B． 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键
C． 连接两条DNA链上碱基之间的氢键
D． 只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来
7.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是( )
A． 采用反转录的方法可得到目的基因
B． 基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C． 马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D． 用不同种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子
8.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，正确的是( )
A． 过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B． 多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C． 过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D． 应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
9.下列关于基因表达载体的叙述中，不正确的是( )
A． 基因表达载体的构建是基因工程的核心
B． 其上的启动子和终止子都是有特殊结构的DNA片段
C． 一般用抗生素抗性基因作为标记基因
D． 虽然基因工程中的受体细胞有所不同，但构建的基因表达载体都是一样的
10.可用DNA探针和外源基因导入的方法进行遗传病的诊断和治疗，下列做法中不正确的是( )
①用DNA探针检测病毒性肝炎
②用DNA探针检测猫叫综合征
③用导入外源基因的方法治疗苯丙酮尿症
④用基因替换的方法治疗21三体综合征
A． ①④
B． ②④
C． ②③
D． ①③
11.下列对物质的改造不属于蛋白质工程范畴的是( )
A． 胰岛素改造
B． 抗体改造
C． 酶的改造
D． 性激素改造
12.下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
A． 四环素抗性基因
B． 绿色荧光蛋白基因
C． 产物具有颜色反应的基因
D． 贮藏蛋白的基因
13.在基因工程中，作为基因运输工具的载体，下列特征除哪项外，都是载体必须具备的条件( )
A． 能够在宿主细胞中复制，并稳定地保存
B． 具有1～多个限制酶切点
C． 必须是细菌的质粒或噬菌体
D． 具有某些标记基因
14.下列关于基因工程的叙中，正确的是( )
A． 目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物
B． 限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶
C． 若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病毒侵染棉花植株
D． 载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上
15.下列关于限制酶的说法正确的是( )
A． 限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布
B． 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C． 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
D． 限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
16.α1-抗胰蛋白酶缺乏症是北美常见的一种单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶。
下列关于该过程的叙述，错误的是( )
A． 载体上绿色荧光蛋白基因(GFP基因)的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞
B． 将目的基因导入羊膀胱细胞中，将会更加容易得到α1-抗胰蛋白酶
C． 培养的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生α1-抗胰蛋白酶
D． 目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用
17.下列关于基因工程的叙述，正确的是( )
A． 获得目的基因需用限制性核酸内切酶和DNA连接酶
B． DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来
C． 可通过农杆菌转化法实现目的基因导入受体细胞
D． 载体上的标记基因有利于载体与外源基因连接以及筛选转化细胞
18.下列关于限制酶的叙述中，错误的是( )
A． 它能在特殊位点切割DNA分子
B． 同一种限制酶切割不同的DNA分子产生的黏性末端能够很好地进行碱基配对
C． 它能任意切割DNA分子，从而产生大量DNA片段
D． 每一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列
19.基因治疗是指( )
A． 用DNA探针修复缺陷基因
B． 用DNA探针检测疾病
C． 将正常基因导入有基因缺陷的细胞中
D． 将外源基因导入受体细胞
20.运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种。这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，保护农业生态环境，根据以上信息，下列叙述正确的是( )
A． Bt基因的化学成分是蛋白质
B． Bt基因中会有菜青虫的遗传物质
C． 转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因
D． 转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物
第Ⅱ卷
二、非选择题(共4小题，每小题10.0分,共40分)
21.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)与只使用EcoR Ⅰ相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_________________________________________________________。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。
(6)现使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，并经拼接获得的重组质粒进行再次酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1、2中标示的酶切位点及表所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，得到________种DNA片段。
②采用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，得到________种DNA片段。
22.科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程，据图回答下面的问题：
(1)改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于________(生物工程)的范畴。
(2)图示过程是根据预期的________，设计________，最终必须对________进行操作，此操作中改变的是________。
(3)经过改造的鼠—人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出的优点是____________________(从免疫角度考虑)。
(4)上述过程中对科学家来说难度最大的是____________________。
23.基因工程中，需要使用限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
(1)根据已知条件和图回答：
①上述质粒用限制酶________切割，目的基因用限制酶________切割。
②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，还要加入适量的________。
③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由是_________________________________________________________
__________________________________________。
(2)不同生物的基因可以拼接的结构基础是______________________________________________________________
______________________________________________。
(3)大肠杆菌是首先成功表达外源基因的宿主菌，但不能表达结构复杂的蛋白质，哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统虽然能表达结构复杂的哺乳类细胞蛋白，但操作复杂，表达水平低，不宜推广使用。基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞，请从细胞结构等方面分析用酵母菌作受体细胞能克服上述不足的理由是______________________________________________________________
______________________。
24.请回答下列关于基因工程和蛋白质工程的问题：
(1) 获取真核细胞内目的基因的途径主要有________________________________，目的基因进入受体细胞需要__________的协助。
(2) 基因工程的核心步骤是________________，此过程用到的工具酶是____________。
(3)为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，经常采用的受体细胞是________，将目的基因导入此受体细胞常用的方法是________________。
(4) 蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对________进行改造，或制造一种________的技术。在该工程中，引起蛋白质空间结构改变的原因是组成该蛋白质肽链的________序列发生了改变。
