课件19张PPT。专题2 细胞工程2.2.2 细胞工程技术
----制备单克隆抗体抗体:
1.能够与抗原发生______结合的__________。
2.主要分布在 。
3.能产生抗体的细胞是
___________________
4.判断:
每一个效应B细胞只分泌一种特异性抗体( )温故知新免疫球蛋白浆细胞(即效应B细胞)特异性血清√ 一、抗体的传统生产方法从血清中分离抗体该法制备抗体的缺陷:
产量 、 ,且抗
体的 。多种B淋巴细胞动物体内多种抗体抗原 反复注射单克隆抗体!低纯度低特异性差该法制备抗体的缺陷:
产量 、 ,且抗
体的 。二、单克隆抗体的制备1单克隆抗体的概念概念:用______________进行____,也就是利用_____________技术培养形成细胞群,从而产生大量的______________________的抗体,即单克隆抗体。单个B淋巴细胞克隆动物细胞培养化学性质单一,特异性强效应B细胞
(浆细胞)B淋巴细胞骨髓瘤细胞动物细胞融合动物细胞培养单克隆抗体既能产生特异性抗体,又能无限增殖杂交瘤细胞阅读课本P53-54,了解单克隆抗体的制备过程2单克隆抗体制备过程2、诱导其融合的方法有哪些?3、融合后培养液中有几种细胞?4、怎样筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞有何优点?5、为何要进行克隆化培养和专一抗体检测,多次筛选?
6、大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法有哪些?1、注射抗原的目的是什么?已经
免疫几种类型?(一选)即要
在选择性培养基上筛选出杂交瘤细胞淘汰克隆化培养
和抗体检测专一抗体
检验阳性专一抗体
检验阳性在具有筛选作用
的培养基上培养骨髓瘤细胞免疫小鼠注射特定的
抗原蛋白培养骨髓瘤细胞单克隆抗体单克隆抗体体外培养使其数量增殖:动物细胞培养体外培养小鼠腹腔内培养◆涉及技术:动物细胞培养动物细胞融合方法:用专一抗原与这些细胞产生的抗体结合注意:两种筛选的方法
和目的不同单克隆抗体的制备获得产生相应抗体的B淋巴细胞BB 、B瘤 、瘤瘤 (融合的细胞有3种)√细胞培养液小鼠腹水(二选)筛选出能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞1.将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞。( )
2.杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖,又能产生多种抗体。( )
3.在单克隆抗体制备过程中,需要进行两次筛选。第一次筛选是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞;第二次也是用选择培养基选择出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。( )
练一练× × × 4.制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植。( )
5.以绵羊红细胞刺激小鼠脾脏B淋巴细胞,再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞克隆群,由此筛选出的单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体只识别绵羊红细胞表面的特定分子,而不能识别绵羊整个红细胞。( )练一练× √ 6.科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是
( )
A.经过免疫的T淋巴细胞
B.未经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的B淋巴细胞
D.未经过免疫的B淋巴细胞
C三、单克隆抗体的应用(1)作为诊断试剂——最广泛应用单克隆抗体最主要的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。单克隆抗体的应用:准确、高效、简易、快速(如同位素标记单克隆抗体,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等)“生物导弹” =单克隆抗体+药物
(2)治疗疾病和运载药物主要用于癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞。利用抗原和抗体的特异性结合单克隆抗体导向,
药物为弹药本节小结单克隆抗体概念:单克隆抗体是由单一 细胞增殖产生的高度 的抗体。制备:应用:杂交瘤专一两次筛选作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物1右图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述,正确的是( )
A.①是从已免疫的小鼠脾
脏中获得的效应 T 淋巴细胞
B.②中使用胰蛋白酶有利于
杂交瘤细胞的形成
C.③同时具有脾脏细胞和
鼠骨髓瘤细胞的特性
D.④是经筛选培养获得的
能分泌特异性抗体的细胞群
D巩固练习2.在制备X单克隆抗体的过程中,如果用a表示骨髓瘤细胞,b表示产生X抗体的浆细胞,c为产生Y抗体的浆细胞,促进细胞两两融合后,对融合细胞进行了两次筛选,其目的分别为( )
A.从aa、bb、cc、ab、ac、bc中选出ab、bc;从ab、be中选出ab
B.从aa、bb、cc、ab、ac、bc中选出ab、bb;从ab、bb中选出bb
C.从aa、bb、cc、ab、ac、bc中选出ab、ac;从ab、ac中选出ab
D.从aa、bb、cc、ab、ac、bc中选出ab、bc;从ab、bc中选出abC巩固练习3.由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”,下列对此描述不正确的是( )
A.“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成
B.“弹头”是由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成
C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能
D.“生物导弹”是利用细胞工程制出来的C巩固练习4.(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠体内的 细胞,从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。
(2)d过程是一个___________的过程,该过程的进行常用_____________或_____________诱导。
(3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 种类型的C细胞,因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养,D细胞的名称是 ,其特点是_________________________________________。B淋巴 抗原 动物细胞融合 聚乙二醇 灭活病毒 选择性 3既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是(要求答4项)___________________________________________。
(5)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,其特点是_________________。特异性强、灵敏度高,
并可能大量制备有丝无菌、无毒的环境;充足的营养;适宜的温度和pH;适宜的气体环境