人教版高中生物选修三专题二第2节 2 .2动物细胞融合与单体克隆抗体 课件共21张PPT

课件21张PPT。杂种细胞植物体细胞杂交过程1970年，科学家做了一个人-鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。A细胞B细胞人工诱导1.动物细胞融合的概念杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。
一、动物细胞融合2、动物细胞融合过程5、只考虑两两细胞融合
的话会出现几种融合类型？1、如何将动物组织分散成单个的细胞？2、动物细胞融合和植物原生质体融合的基本原理是否相同？3、动物细胞融合的具体过程是否与植物原生质体融合的过程一样？4、为什么灭活的病毒能作为诱导剂？不灭活的病毒可以作为诱导剂吗？3.动物细胞融合技术的意义和应用打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；
研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新
品种培育等的重要手段。
重要用途：制备单克隆抗体比一比
1、原理
2、融合前处理
3、使用的酶
4、诱导手段
5、结果动物细胞融合过程植物体细胞杂交过程4、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较抗原吞噬细胞
(识别和处理）T细胞(识别)B细胞
(识别)淋巴因子呈递抗原少数直接刺激增殖和分化浆细胞记忆细胞合成和 分泌抗体抗原 + 特异性免疫反应增殖和分化二次免疫体液免疫的概念图抗体的传统生产方法二、单克隆抗体
抗原 动物体内刺激浆细胞抗体抗原不纯抗体不纯特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏传统方法生产的抗体从动物的血清中分离抗体反复注射抗原存在缺陷读下面一段资料，概括出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。1.单克隆抗体的概念单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、　
　　　　　　　特异性强的抗体。2.单克隆抗体的制备一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞问题1：为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？
问题2：会有几种融合方式？
问题3：杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？
问题4：是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？
问题5：如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？第一次筛选：特定选择培养基（HAT培养基：含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶，其中氨基喋呤可阻断DNA合成的主要途径。）DNA合成氨基喋呤DNA合成阻断HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）和TK（胸苷激酶）DNA合成辅助途径骨髓瘤细胞无TK或HGPRT
B细胞有HGPRT和TK，但在体外通常培养条件下，尤其是在单个细胞环境下难于长期存活和增殖传代主要途径第二次筛选：
通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体。那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。多孔培养板专一抗体阳性检测BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）选出能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞并克隆。√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。3、单克隆抗体的应用（1）体外诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物（2）治疗疾病和运载药物主要用于癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。导向－－单克隆抗体
弹头－－药物两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一种诱导细胞融合的新方法
－－灭活病毒一种新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势本节小结重点谢谢！