3.1菊花的组织培养

课件11张PPT。课题1 菊花的组织培养一、课题目标：
说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。
二、课题重点和难点：
植物组织培养过程中使用的无菌技术。
三、技能目标：
本课题要知道细胞分化、细胞全能性、组织培养流程、影响组织培养的因素，记住MS培养基的营养要素及功能，尝试植物组织培养的实验操作过程。一、自学导引：阅读课本P32～P36，完成《优化设计》的自学导引。
1、基础知识 ------细胞分化：
（1）细胞分化的概念：植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。
（2）植物体的个体发育，是植物细胞不断分裂、生长和分化的结果。
（3）细胞分化是特定基因在一定的时间、空间表达的结果，也可以说，细胞分化是细胞对化学环境变化的一种反应。二、基础知识：（4）细胞分化是一个渐变过程，是一种持久的、稳定的变化。它发生在生物体的整个生命过程中，在胚胎时期达到最大限度。
（5）由于细胞分化导致组织形成和器官成熟，因此，细胞的分化是生物体发育的细胞学基础。
（6）分化的实质：是不同部位的细胞内的基因在一定因素的影响下，在特定时间和特定空间条件下选择性的表达。
（7）细胞分化后，细胞内的遗传物质并没有改变，但形成不同的RNA和蛋白质。基础知识 ------细胞全能性1、概念：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能，细胞的这种特性叫做细胞的全能性。
2、高度分化的植物细胞仍然有发育成完整植株的能力。
3、动物体细胞随着分化程度的提高，细胞的全能性逐渐受到限制，分化的潜能较窄，但其细胞核仍具有全能性。例如：克隆羊等。
4、在生物体的所有细胞中，受精卵的全能性是最高的；其次是卵细胞。
5、细胞全能性的物质基础：生物体的每一个细胞都含有本物种所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全套基因。基础知识 ------植物组织培养过程1、过程：
2、在植物体组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生分化，使一个离体细胞或组织，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化成植物体。
（1）愈伤组织的形成：大致要经历三个时期：起动期、分裂期、分化期。外植体细胞
分裂愈伤组织分化根或芽移栽植物体脱分化再分化（2）愈伤组织的形态发生方式：主要有不定芽方式和胚状体方式两种。
（3）应用：快速繁殖、培养无病毒植物、生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。
1、植物的组织培养常用的一种培养基是MS培养基。
2、植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
3、MS培养基成分：
（1）无机营养：大量元素和微量元素
（2）有机营养：维生素类；氨基酸；有机添加物；琼脂；活性炭
（3）植物生长调节物质
（4）能源和渗透压
（5）温度
（6）光照基础知识 ------影响植物组织培养的因素一、MS固体培养基的配制
1、母液的配制和保存
2、培养基配制程序
（1）配制培养液；（2）熔化琼脂；（3）调pH值；（4）培养基分装；（5）高压灭菌。
二、外植体消毒：
1、选材；2、消毒。
三、接种
1、接种室消毒；2、无菌操作的要求；
3、材料的切取和接种。实验操作四、培养：
1、愈伤组织的培养；
2、愈伤组织的继代培养；
3、试管苗的培养。
五、移栽
六、栽培
结果分析与评价1、外植体被污染的原因：
（1）材料的选取应加以选择，老的材料比幼嫩的材料带菌多，田间比温室生长的材料带菌多。
（2）消毒材料不彻底，植物组织只能进行表面灭菌，对材料内部所带的细菌、霉菌等杂菌往往难以对付，可在培养基中添加抗生素解决。
（3）人为污染，如使用未消毒工具或呼吸排出细菌；手接触材料或器皿边缘，使用过的工作器具未消毒而再继续使用，造出交叉污染；接种室空气污染等。2、（1）外植体到愈伤组织一般需要2周；
（2）愈伤组织培养成根或芽时，注意细胞分裂素和生长素的浓度比。
3、茎段上逐渐长出乳白色或黄白色的愈伤组织。