第2节 基因工程的原理和技术

课件13张PPT。限制性核酸内切酶DNA连接酶质粒——载体基因工程操作的工具第2节 基因工程的原理和技术1、筛选含有目的基因的受体细胞2、目的基因的表达步骤一 获得目的基因人工合成利用PCR技术扩增已知序列：从基因文库获得未知序列：( DNA library )聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)氢键断裂，形成单链DNA。引物与DNA模板结合，形成局部双链。 在酶的作用下，不断延伸，合成双链DNA。多次循环，获得大量双链DNA分子。PCR技术扩增鸟枪法：散弹射击法从基因文库获得人工合成法逆转录法根据已知氨基酸序列直接合成DNA步骤二 形成重组DNA分子步骤三 将重组DNA分子导入受体细胞1.基因工程中常用的受体细胞有哪些？2.导入过程如何？大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径步骤四 目的基因的检测和表达1、筛选含有目的基因的受体细胞2、目的基因的表达通过检测标记基因的有无，来判断目的基因是否导入受体细胞。目的基因导入受体细胞后，受体细胞必须表现特定的性状。练习2．有关基因工程的叙述正确的是 ( )
A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可以作为运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D1.有关基因工程的叙述中，错误的是 （ ）
A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
B、限制性核酸内切酶用于目的基因的获得
C、目的基因须由载体导入受体细胞
D、人工合成目的基因不用限制性内切酶A