生物：3.1《菊花的组织培养》学案（新人教版选修1）第二课时（习题缺答案）

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菊花的组织培养第二课时草案
课标点击：
1．说明植物组织培养的基本原理和影响花药培养的因素。
2．说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株两种途径。
3．学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。
4．学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。
课题重点：21世纪教育网
1．植物组织培养过程中使用的无菌技术。
2．选取适宜的培养材料和培养基。
课题难点：
1．植物组织培养过程中使用的无菌技术。
2．选取适宜的培养材料和培养基。
实验操作
实验操作过程
一、制备MS固体培养基
实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备
1、配制各种母液。
配制母液时，大量元素浓缩 ，微量元素浓缩 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
2、配制培养基。
配制1LMS培养基时，先将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入蔗糖30g,去配制好的母液，依次加入，然后定容至1000mL。调节pH值，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装50或100mL
3、灭菌。高压蒸汽灭菌
二、外植体消毒
选取菊花茎段时，要取 。
无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料（外植体）的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑_______________；另一方面还要考虑植物材料的__________。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。一般情况下，细菌污染可能是由接种人员造成的，真菌污染可能是_________灭菌不当。
三、接种
接种前，用体积分数70%的酒精将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都要用火焰灼烧灭菌
四、培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间定期消毒，温度控制在18-22℃，并且每天用日光灯光照12h
五、移栽
移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日，然后用清水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中
六、栽培
每天要观察记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花
思考：
1、实验操作过程中为什么要进行一系列的消毒、灭菌，实验中是如何做到无菌操作的？
2、与微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些不同？
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