生物：新课标选修1备课教案（dna的粗提取与鉴定）

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DNA的粗提取和鉴定
教学目标：
1、知识与能力目标
理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理，初步掌握DNA的粗提取和鉴定方法，理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力，通过实验使学生能够简述科学探究的基本过程。
2、情感态度与价值目标
通过探索培养科学的怀疑精神和创新精神；通过实验结果，学生树立生命物质性的观点。
教学重点：提取DNA的相关原理和步骤
教学难点：提取DNA的相关原理和步骤
教学过程：
开门见山：
讲解本实验的目的是提取DNA和DNA的鉴定，其中提取DNA是本实验的重点和难点。
提出问题：“DNA主要存在于什么结构上？”“如何提取DNA？”“选什么材料好？”
达成共识：
1、造适宜材料：选动物细胞，易打破细胞结构
2、破坏细胞膜、核膜结构，得核物质。
3、将DNA与蛋白质等物质分开，得DNA
4、去掉DNA中杂质，提纯DNA。
探究实验原理：
屏幕展示表格1
NaCl2mo1/L NaC10.14mo1/L NaC10.015mo1/L
DNA
蛋白质
表格2
DNA 蛋白质 杂质
95%酒精
不同浓度的NaC1溶液可溶解或析出DNA。95%酒精可提取DNA。
填表1：
NaCl2mo1/L NaC10.4mo1/L NaC10.015mo1/L
DNA 最大 最小 变大
蛋白质 解聚 最大 变小
填表2：
DNA 蛋白质 杂质
95%酒精 不溶 可溶 可溶
通过对实验原理的预习，表格的比较，使学生明确了各溶液的用途，保证理解实验。
请学生代表简述DNA提取实验步骤[实验设计一]
投影展示实验设计思路：
鸡血细胞液①aDNA 释放 ②bDNA与蛋白质的分离 ③cDNA析出④dDNA浓缩（提纯）
获得鸡血细胞核物质：提核物质→溶解→析出→溶解→析出
实验步骤：
( http: / / www. / Subject / shengwu.html )
引导学生讨论、回忆并回答目的①~⑨。
①防止血凝。
②加速血细胞破裂。
③溶解DNA。
④使2 mol/L的NaCl溶液稀释至0.14 mol/L，促DNA最大限度地析出。
⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上。
⑥使含DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中。
⑦除去含DNA的滤液中的杂质。
⑧提取DNA。
⑨A：出现蓝色。B：无变化
讨论与结论：
投影给出如下讨论提纲，供学生讨论。
（1）DNA粗提取过程中的关键是哪几步？
（2）提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液中的上清液？
（3）DNA的直径约为2 nm，实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个DNA分子直径的大小？
学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导，并与学生一起归纳总结。
（1）a．提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的DNA。
b．析出DNA黏稠物。加蒸馏水要慢，搅拌要轻。
c．沉淀DNA时，必须用冷酒精。
（2）提取DNA，去除杂质是关键。由于上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以要除去（含蛋白质）。
（3）实验中出现的丝状物是肉眼可以观察到的，这种丝状物的直径要比DNA分子的直径2 nm大许多倍，所以实验中出现的丝状物并不表示一个DNA分子的直径。
实验结论：细胞中有DNA，DNA遇二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。
教学目标巩固
1．实验中步骤1和步骤3都需要加入蒸馏水，两次加入的作用相同吗？为什么？
2．实验中NaCl的物质的量浓度为2 mol/L和0.14 mol/L 对DNA有何影响？
3．DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成 A．砖红色　B．橘黄色　C．紫色 D．蓝色
补充知识：
1、鉴定DNA的其他方法
用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。
1．配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭（EB）溶液。
2．将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴EB溶液染色。
3．将蜡纸放在紫外灯（260 nm）下照射（暗室中），可见橙红色的萤光（DNA的紫外吸收高峰在280 nm处）。
2、DNA粗提取与鉴定的另一种方法
1．材料用具
新鲜菜花（或蒜黄、菠菜）。
塑料烧杯，量筒，玻璃棒，尼龙纱布，陶瓷研钵，试管，试管架，试管夹，漏斗，酒精灯，石棉网，三角架，火柴，刀片，天平。
研磨液，体积分数为95%的酒精溶液，二苯胺试剂，蒸馏水。
2．方法步骤
A．DNA的粗提取
（1）准备材料：将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室，至少24小时。
（2）取材：称取30 g菜花，去梗取花，切碎。
（3）研磨：将碎菜花放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨10 min。
（4）过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液滤入烧杯中（有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心，用1000 r/min 的旋转频率，离心2~5 min；取上清液放入烧杯中）。在4℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液。
（5）加冷酒精：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的酒精溶液中，并且玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液（玻璃棒不要直插烧杯底部）。沉淀3~5 min后，可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，絮状物会缠在玻璃棒上。
B．DNA的鉴定
（1）配制二苯胺试剂：取0.1 mL B液；滴入到10 mL A液中，混匀。
（2）鉴定：取4 mL DNA提取液放入试管中，加入4 mL二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色（不变蓝）。用沸水浴（100℃）加热10 min。在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化（逐渐出现浅蓝色）。
结课：这节课咱们验证了细胞是由化合物按照一定的方式组成的这一结论。从知识结构角度来说，一要加深对生物的物质性理解；二要掌握一般的物质提取方法；三要注意不同的化学物质要用不同的原理鉴定。从实验过程角度来说，要理解各种溶液和试剂的作用和目的。
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