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实验四 用高倍镜观察线粒体和叶绿体 P47
一、实验材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片
二、实验原理：
1、叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。
2、线粒体的辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
3、健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色，细胞质接近无色。（分子式：C30H31ClN6，分子量：511.07）
（中性红，学名“3-氨基-6甲氨基-2-甲基吩嗪盐酸盐”，分子式：C15H16N4HCl；深绿色结晶粉末。易溶于水和醇，水溶液呈红色，醇溶液为黄色其溶液。用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。中性红是一种毒性最低的活体染色剂，是液泡的专一性染色剂，只将液泡染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及细胞核不被染色，中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。在pH发生变化的条件下，中性红还具有转变颜色的特性：pH7.0～7.2 红色； pH7.2～7.6 橙色；pH7.6～8.0 黄色。pH不同表明液泡中酶原颗粒的成熟度的不同，完全成熟的酶原颗粒为乳白色，不再为中性红着色。）
4、观察叶绿体的实验中，无需对叶绿体进行染色，因为叶绿体本身是绿色的。
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三、实验步骤
步骤 操作方法 目的与作用
（1）取材 ①新鲜的藓类的叶②菠菜叶下表皮略带一些叶肉 ①藓类叶为单层细胞②下表皮容易撕取，要略带些叶肉
（2）制片 注意叶片不能太干了，保持有水的状态 以免影响细胞活性
（3）观察 叶绿体呈椭圆形，可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积（长轴）转向光源，在强光下以最小面积（短轴）转向光源。
（1）取材 漱口，口腔内侧壁上轻刮几下
（2）染色 将口腔细胞放在健那绿液滴上
（3）观察 盖上盖玻片，显微镜下观察，线粒体被染成蓝绿色
问题 1、为什么不用植物细胞来观察线粒体？【解答】植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。2、如果观察发现染色不足，如何补色？【解答】在盖玻片一侧滴加健那绿液，另一侧用吸水纸吸引。
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