生物三轮体系实验复习：观察细胞的有丝分裂

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实验九 观察细胞的有丝分裂　　P115
一、实验材料：洋葱（可用葱、蒜代替）。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。
二、实验步骤：
步骤 注意问题 分析
一、根尖的培养实验前3～4天，让洋葱放在广口瓶上，底部接触清水。根长约5cm时可用。 置于温暖处，常换水。 因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。
二、装片的制作（解离→漂洗→染色→制片）1．解离：上午10时至下午2时，剪取洋葱根尖2～3mm，立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，室温下解离3～5min。 解离时间要保证，细胞才能分散开来。解离时间也不宜过长。 目的：溶解细胞间质，使组织中的细胞相互分离开来。此时，细胞已被盐酸杀死。否则，根尖过于酥软，无法取出。
2．漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。 漂洗要充分，可换水1～2次。 目的：洗去解离液，便于染色。
3．染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5min。 染色时间不宜过长，否则显微镜下一片紫色，无法观察。 龙胆紫等为碱性染料，可使染色体着色。醋酸洋红溶液也能使染色体着色。
4．制片：用镊子将这段洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压载玻片，使细胞分散开来。 要弄碎根尖，再垂直向下均匀用力压片，不可移动盖玻片。 目的：使细胞分散，避免细胞重叠，便于观察。做得成功的装片，标本被压成云雾状。
三、观察1．低倍镜观察：把装片放在低倍镜下，慢慢移动装片，找到分生区细胞。2．高倍镜观察：移走低倍镜，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，仔细观察，找出处于细胞分裂期中期的细胞，再找出前期、后期、末期的细胞。 一定要找到分生区。在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 分生区细胞特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正处于分裂期。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。
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