生物三轮体系实验复习：观察植物细胞的质壁分离和复原

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实验五 观察植物细胞的质壁分离和复原　　P61
一、实验原理：①细胞液浓度＞细胞外溶液浓度时，细胞吸水；细胞液浓度＜细胞外溶液浓度时，细胞失水。②细胞壁与原生质层的伸缩能力不同（细胞壁伸缩性小于原生质层的伸缩性）。
二、实验条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡。
三、实验材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。
四、实验步骤：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸引→观察（液泡由大到小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离）→盖玻片一侧滴清水， 另一侧用吸水纸吸引→观察（质壁分离复原）
五、实验结论：细胞外溶液浓度＞细胞内溶液浓度，细胞失水 质壁分离
细胞外溶液浓度＜细胞内溶液浓度，细胞吸水 质壁分离复原
六、植物细胞质壁分离和复原
1、原理：成熟（有明显液泡）的植物细胞能够与外界溶液组成一个渗透系统，通过渗透作用的方式吸水或失水。
2、方法应用：①可以用于测定细胞液的浓度 ②可以用于判断细胞的死活
3、实验步骤：
步骤 注意问题 分析
1．制作洋葱表皮的临时装片。在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平（也可挑取几条水绵放入水滴中）。盖上盖玻片。 盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片，然后轻轻放平。 防止装片产生气泡。
2．观察洋葱（或水绵）细胞可看到：液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。（或水绵细胞中有带状叶绿体，原生质层呈绿色，紧贴着细胞壁。 液泡含花青素，所以液泡呈紫色。先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。
3．观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入0.3g/mL的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。 重复几次蔗糖溶液浓度不能过高 蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小于原生质层的伸缩性，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁分离。为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。否则，细胞严重失水死亡，看不到质壁分离的复原。
4．观察细胞质壁分离的复原现象。从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由小变大，颜色由深变浅，原生质层恢复原状。 发生质壁分离的装片，不能久置，要马上滴加清水，使其复原。重复几次。 细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久，也会死亡。为了使细胞完全浸入清水中。
七、注意问题
1、选材：选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。其细胞液为紫色，在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分，观察到的质壁分离和复原效果明显。另外，取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。
2、试剂：选用0.3g/mL蔗糖溶液。浓度过高，细胞质壁分离速度虽然很快，但不久就会将细胞杀死，细胞不能进行质壁分离复原；若浓度过低，则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。另外，8% 食盐溶液、5%的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油……也可使用，但后面三者在引起质壁分离后可自动复原。
3、时间的控制：做好质壁分离的实验后，不久就要做质壁分离复原实验。避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中，细胞过度失水而导致死亡。从而观察不到质壁分离复原的现象。
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