生物三轮体系实验复习：检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质

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实验二 检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质　　P18
一、实验原理：
还原糖—斐林试剂—砖红色；
脂肪—苏丹Ⅲ染液—橘黄色；
脂肪—苏丹Ⅳ染液—红色；
蛋白质—双缩脲试剂—紫色
淀粉—碘液—蓝色
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二、实验过程
1、还原糖的检测
还原性糖：分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基或酮基。例如：葡萄糖、果糖、核糖、半乳糖、麦芽糖、乳糖。用斐林试剂可以检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否。
非还原性糖：分子内没有游离的半缩醛羟基。例如：脱氧核糖、蔗糖、淀粉、纤维素、糖原，多糖都是非还原性糖。
（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。
（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。
（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入新配制的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）
2、脂肪的检测
（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
（2）步骤：
①制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
②染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）
↓
③制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）
↓
④镜检鉴定（光学显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）
3、蛋白质的检测
（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）
（2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩脲试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色）
4、淀粉的检测和观察
用试管取2mL待测组织样液，向试管内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化。
注意：碘液不要滴太多，以免影响颜色观察。
【疑问】淀粉遇碘液为什么变蓝？
【解答】这主要取决于淀粉本身的结构。淀粉是白色无定形粉末，由直链淀粉（占10%～30%）和支链淀粉（占70%～90%）组成。直链淀粉能溶于热水而不呈糊状，支链淀粉不溶于水，热水与之作用则膨胀而成糊状。其中溶于水中的直链淀粉，呈弯曲形式，并借分子内氢键卷曲成螺旋状。这时加入碘液，其中碘分子便钻入螺旋当中空隙，并借助范得华力与直链淀粉联系在一起，从而形成络合物。这种络合物能比较均匀地吸收除蓝光以外的其它可见光（波长范围为400～750钠米），从而使淀粉变为深蓝色。
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