单克隆抗体

课件35张PPT。第三节 动物的克隆检测抗原用什么检测？相应的抗体 一般来说，医院如何检测人体内是否存在乙肝病毒？乙肝病毒模式图
决定抗原特异性的特定部位----如1、2
由几个氨基酸组成，
具有特定的空间结构 人们如何获得针对某种抗原的抗体?
传统的方法是什么？ 用从血清中获得的抗体进行检验时，有时会出现假阳性。 没乙肝病毒的，被误检为有乙
肝病毒。这是怎么回事？
2 用这样的抗体进行检测，特异性差。
如何解决这一问题？血清中的抗体：（单克隆抗体）单个B淋巴细胞细胞群克隆化学性质单一、
特异性强的抗体产生一个B淋巴细胞只产生一种特异性抗体在体外：方案：让B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再进行细胞培养。科勒米尔斯坦荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖
单克隆抗体的制备过程应该包含哪些细胞工程技术？动物细胞融合
动物细胞培养
三 、单克隆抗体(一）制备过程
1、如何得到B淋巴细胞？
2、如何诱导融合？


加入聚乙二醇（PEG）3、细胞两两融合后，有哪些类型？
B-B
B-瘤(杂交瘤细胞)
瘤-瘤

4、如何筛选？




（1）淋巴细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能够被氨基蝶呤阻断。但是一般不分裂增殖。
（2）骨髓瘤细胞是特殊选择的代谢缺陷型细胞，其DNA合成过程只具有D途径，能被氨基蝶呤阻断。
（3）杂交瘤细胞则既可无限增殖，又具备两条DNA合成途径。资料：5、杂交瘤细胞都能分泌所需抗体吗？如何检测？


阳性孔
7、如何得到一个细胞的克隆？
6、能保证一个孔里是一个细胞的克隆吗？


28、如何得到大量的单克隆抗体？
体内培养
体外培养单抗制备周期、步骤程序说明
（二）优点特异性强,灵敏度高1、作为体外诊断试剂（三）应用 结合同位素的单抗-----生物导弹2、运载药物 全世界正在研制的生物技术药品，25%为各类单克隆抗体，预计2010年世界单克隆抗体药物的销售额可达200亿美元。生物科技创造美好未来!说明：
一、我们教材只强调了单抗的优点，没有提到单抗的缺点；只强调了多抗的缺点，没有提到多抗的优点。
事实上，多抗与抗原的亲和力要比单抗强，毕竟它是针对多个抗原表位（抗原决定簇）的，而在乙肝表面抗原的诊断试剂盒（ ELISA法之双抗夹心法）中，是单抗和多抗联合使用的。二、本节课只从抗原决定簇这个层次和角度分析了抗血清特异性差的原因（似乎浙科版教材主要是从这个角度谈的）。其实还有用来免疫动物的抗原可能会不纯等原因。 淋巴细胞拥有一整套预先设计好的抗原受体，抗原从中选择最匹配的抗原受体。抗原与抗原受体结合后，激活带相应抗原受体的细胞大量增殖克隆。用于治疗是很受限制的。为什么？鼠的，鼠性的嵌合的 对鼠源化抗体进行改造-------蛋白质工程直接生产人源化抗体-------基因工程