人教版高中生物选修1专题3课题2月季的花药培养 （共41张PPT）

(共41张PPT)
月季的花药培养
1、被子植物定义：凡是种子有果皮包被着，胚珠有子房壁包被着的植物，就叫做被子植物
一、被子植物和裸子植物
2、裸子植物定义：凡是胚珠裸露，外面没有子房壁包被，种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物
实例：玉米、大豆、梨、杏
实例：松、杉、柏
财务工作要戒骄戒躁，扬长避短，总结经验教训，才能将工作完成的更好更出色。以下是美文网为您准备的“财务总监上半年工作总结”，供您参考，希望对您有帮助。财务总监上半年工作总结 20xx年上半年，我财务部在行领导的直接领导下，在全行员工的大力支持和配合下，同心协力，艰苦奋斗，紧紧围绕年初既定的目标，以更扎实的工作作风，严谨的工作态度，圆满的完成了行领导交办的各项任务。现将这半年的工作总结材料汇报如下：　　一、工作落实状况　　(一)组织部门员工进行定期学习，以此提高部门员工的业务技能水平和法律意识。　　每周星期一，我部门按质按量的遵照行领导的安排部署进行相关知识的学习，其中包括人事教育、安全法、会计基础知识，法律法规知识、税法知识以及思想道德素质的学习等。透过学习，使我部门员工更为深刻的认识到自己工作岗位的重要性：文件上传下达的及时性，人事教育培训的科学性、车辆资金重要空白凭证的安全性。人们常说，思想决定行动，行动决定执行力。我部门正是注重了这一点，使行之有效的执行力得到了充分发挥，从根本上转变了他们的工作态度，调动了他们的工作用心性，出色的完成了各自的工作，保证了工作质量又快
3、花的结构
花的结构：花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊
4、花的作用
被子植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分
二、被子植物花粉粒的形成
1、雄蕊的结构
雄蕊：
2、花药的结构
3、花药的发育
花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞
4、被子植物的花粉发育
②花粉粒的形成
①经历时期：
四分体时期、单核期、双核期
两个精子和一个营养核的基因型相同
③花粉粒类型
一个成熟的花粉粒即为雄配子体，有两种情况：
二核花粉粒:成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）
三核花粉粒:有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。
三、被子植物胚囊的形成
1、雌蕊的组成
柱头、花柱、子房
2、子房的结构
被子植物子房的结构
胚珠的结构
花粉管
精 子
卵细胞
极核
子房壁
珠被
珠孔
胚珠的外层是珠被，里面是胚囊。胚囊是由胚珠内的胚囊母细胞（大孢子母细胞）发育而成。胚囊母细胞经过减数分裂，产生四个细胞，称为大孢子，每个大孢子内的染色体数目都比胚囊母细胞减少一半。这4个细胞排成一行，其中靠近珠孔的3个细胞退化，最里面的发育为胚囊细胞，胚囊细胞的核连续进行三次有丝分裂，但是每次核分裂后，并不接着进行细胞质分裂，就形成了8个细胞核的胚囊。开始，这 8个细胞核分别位于胚囊的两端，每端4个，接着，每端各有1个细胞核移到胚囊的中央，这就是极核，所以再胚囊中的8个核中遗传物质是一样的。
3、卵细胞的形成
以后靠近珠孔端的3个细胞核发育成3个细胞，其中最大的一个是卵细胞，其余的是2个助细胞，另一端3个细胞核也发育成3个细胞，成为反足细胞
花粉落到雌蕊柱头上以后，在柱头上黏液的刺激下，花粉开始萌发并形成花粉管，花粉管沿着花柱向胚珠方向生长，到达胚珠后从珠孔绕过卵细胞进入胚囊，到达胚囊中卵细胞和极核之间，这时花粉管的前端破裂，两个精子释放出来，其中一个精子与两个极核结合形成受精极核，另一个精子与卵细胞结合形成受精卵，这是被子植物特有的双受精现象
4、受精过程
5、发育结果
四、产生花粉植株的两条途径
五、影响花药培养的因素
1、材料的选择
接种的花药时期
不同植物的诱导成功率很不相同，就同一种植物来说亲本的生理状况对诱导成功率也有直接影响
②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素
因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。
选材是否成功是花药培养成功的关键
①选材
一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期
选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎；
选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核期的花药。
③花药培养时期的选择
④其它时期选择的缺点
⑦花药培养时间
为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花，都不宜选作实验材料。
⑥选择完全未开放花蕾的原因
完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花药，菌少、易消毒
⑤单核期花药的挑选
一般月季的花药培养时间选在五月初到五月的中旬，即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态及生理状态会比较好，可能提高花粉的诱导成功率
月季花药培养时的花粉粒最好是（ ）
A、四分体时期 B、单核居中期
C、单核靠边期 D、二核或三核花粉粒
C
2、培养基：
花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同而有所变化小麦中为N6，马铃薯、月季中为MS，油菜中为B5培养基
3、其他因素
亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响
六、实验操作
（一）材料的选取
②某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
①最常用的方法有醋酸洋红法
1、方法
①醋酸洋红法染色机理
醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有染色体，染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色 。
将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。
②醋酸洋红的配置
2、醋酸洋红法
将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。
③染色操作
3、焙花青—铬钒法
将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比例混匀
①卡诺氏固定液的配制方法
花药应该在卡诺氏固定液中固定20min，然后取出放在载玻片上，加焙花青—铬钒溶液染色，盖上盖玻片后在显微镜下检查。
将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却至室温，过滤，加蒸馏水定容至100ml。
②焙花青—铬钒溶液的配制方法
③染色操作
（二）材料的消毒
1、酒精处理
①花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒，立即取出。
②无菌水清洗
③无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
2、消毒液处理
（三）接种和培养
① 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
② 无菌水冲洗3~5次
用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。
在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药
②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成
立即将花药接种于培养基上，通常每瓶接种花药7-10个。
1、剥取花药
①勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织
2、接种
注意：
①培养条件：温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。
3、培养
②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体
长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株
③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。
在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化（主要原因是营养核和生殖核融合造成的）
4、鉴定和筛选
5、植物组织培养技术与花药培养技术的异点：
项目 相同点 不同点
植物组织培养技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 外植体为体细胞，染色体数无需加倍。
花药培养技术 取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。